CN115404268A - 一种sry基因检测探针和试剂盒 - Google Patents
一种sry基因检测探针和试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115404268A CN115404268A CN202211241390.2A CN202211241390A CN115404268A CN 115404268 A CN115404268 A CN 115404268A CN 202211241390 A CN202211241390 A CN 202211241390A CN 115404268 A CN115404268 A CN 115404268A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- sry
- probe
- gene
- detection
- crrna
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Abstract
本发明提供一种SRY基因检测试剂盒,属于基因检测技术领域,所述SRY基因检测试剂盒包括:转录系统,等温扩增系统,用于检测SRY基因的CRISPR‑Cas13系统,以及可视化系统。其中用于检测SRY基因的CRISPR‑Cas13系统,包括:Cas13a核酸酶、转录后的crRNA、可视化显色报告分子;上述crRNA针对SRY基因,Cas13a核酸酶通过在crRNA识别靶基因后,激活酶活性,并对可视化显色报告分子进行切割,释放检测信号。本发明试剂盒能够对SRY基因检测,采用恒温扩增的方式并结合横向流动试纸条,不需要复杂的温控,具有操作简单,灵敏度高,特异性强,检测速度快的优势,可用于不同环境的快速检测。
Description
技术领域
本发明涉及分子生物基因检测技术领域,具体涉及一种用于SRY基因检测的探针、CRISPR-Cas13系统和相关的试剂盒。
背景技术
SRY基因(sex-determining region of Y-chromosome,全称:Y染色体性别决定区)是哺乳动物的雄性性别决定基因。自发现后,对SRY基因的研究迅速发展开来。在基础医学、畜牧业和产前诊断等方面都有着广泛的应用。
像目前孕妇产检除了常规的医院检查,产前诊断主要的还有唐氏筛查、羊水穿刺和无创产检基因检测等。唐氏筛查准确率比较低,只有70%。羊水穿刺核酸检测是行业金标准,准确率高达100%,但容易造成孕妇流产,穿刺过程也会给孕妇很大的心理负担。因此,准确率高达99.9%、仅仅从手臂上抽取孕妇不到10毫升外周血的无创产前基因检测(NIPT)成为了广受孕妇家庭欢迎的基因遗传病筛查手段。而SRY基因检测,可以辅助选择产前诊断的最佳时间。且随着技术的进步和数据的扩大,可以搭建正常母体胎儿游离DNA的浓度平台,这将对某些病理妊娠、性连锁遗传病的早期诊断提供帮助。
目前市面上针对SRY基因的检测手段,主要有PCR加电泳凝胶的检测模式、QPCR荧光定量检测模式和基因测序等。这些检测手段需要依赖较多的仪器,且耗时相对较长。
本发明运用等温扩增和Cas13系统检测,减少了对大型仪器的依赖,检测时长稳定且相对较短,成本相对较低。能够做到快速、便携、准确的检测。作为辅助检测手段,有很大的应用空间。且本发明体系完善后,针对其他靶基因设计制备引物和编码DNA探针,也可完成其他靶基因的检测。
发明内容
本发明能够辅助产前诊断,其检测流程简单方便,成本较低。同时本发明检测灵敏度高,检测的特异性好。
本发明提供一种用于检测SRY基因的crRNA探针,所述crRNA探针包括:SRY probeF1和SRY probe R1,其中,SRY probe F1在5’端带有T7启动子序列,
所述SRY probe R1与SRY probe F1互补;
T7启动子序列为:GAAATTAATACGACTCACTATAGGG;
SRY probe F1的碱基序列为:
GAAATTAATACGACTCACTATAGGGGATTTAGACTACCCCAAAAACGAAGGGGACTAAAACGCAAAACATGGTAATTCAGTAACGTTGA;
SRY probe R1的碱基序列为:
TCAACGTTACTGAATTACCATGTTTTGCGTTTTGATCCCCTTCGTTTTTGGGGTAGTCTAAATCCCCTATAGTGAGTCGTATTAATTTC。
其中,所述SRY probe F1的靶基因为SRY基因。
SRY基因的碱基序列为:
TGGCGATTAAGTCAAATTCGCATTTTTCAGGACAGCAGTAGAGCAGTCAGGGAGGCAGATCAGCAGGGCAAGTAGTCAACGTTACTGAATTACCATGTTTTGCTTGAGAATGAATACATTGTCAGGGTACTAGG。
其中,所述crRNA探针的编码DNA序列包括:用于Cas13a核酸酶识别的核酸序列,以及与靶基因互补的核酸序列。
用于Cas13a核酸酶识别的核酸序列为:
GATTTAGACTACCCCAAAAACGAAGGGGACTAAAAC;
与靶基因互补的核酸序列为:
GCAAAACATGGTAATTCAGTAACGTTGA。
基于上述探针,本发明还提供一种用于检测SRY基因的CRISPR-Cas13系统,包括:Cas13a核酸酶、crRNA探针和可视化显色报告分子;所述crRNA用于识别SRY基因,Cas13a核酸酶在crRNA识别靶基因后,激活酶活性,并对可视化显色报告分子进行切割,释放检测信号。
其中,所述CRISPR-Cas13系统还包括:检测缓冲液;检测缓冲液包括:Tris。
其中,所述报告分子为非特异性报告分子,其序列为/56-FAM/mArArUrGrGrCmAmArArUrGrGrCmA/3Bio/,其中5’端用FAM标记,3’端用生物素标记。
同时,本发明提供一种SRY基因检测试剂盒,包括:转录系统,等温扩增系统,用于检测SRY基因的CRISPR-Cas13系统,以及可视化系统;
其中,所述转录系统包括T7 ReactionBuffer、T7 Polymerase Mix、SRYprobe探针对和无核酸酶水;
所述用于检测SRY基因的CRISPR-Cas13系统包括:Cas13a核酸酶、crRNA探针和可视化显色报告分子;
所述等温扩增系统包括:针对SRY基因的引物对,包括SRY-F1和SRY-R1;
SRY-F1的碱基序列为:
GAAATTAATACGACTCACTATAGGGTGGCGATTAAGTCAAATTCGCATTTTTCAG;
SRY-R1的碱基序列为:
CCTAGTACCCTGACAATGTATTCATTCTCA;
所述可视化系统包括:横向流动试纸条和检测层析液。
所述横向流动试纸条前端包被有带FAM抗体的彩色微球,检测线上包被有生物素抗体,质控线上包被有羊抗鼠抗体。
优选地,等温扩增系统还包括:RPA重组酶、反应缓冲液V、醋酸镁溶液、无核酸酶水。
优选地,RPA重组酶包括:T4噬菌体重组酶UvsX、辅助因子UvsY、DNA聚合酶、单链DNA结合蛋白和dNTPs。
优选地,反应缓冲液V包括:40mM Tris(pH=7.9)、64mM醋酸钾、8mM乙酸镁、0.8mMDTT、2.4mMATP、16mM磷酸肌酸、80ng/μL肌酸激酶和质量浓度为5%的聚乙二醇。
优选地,醋酸镁溶液摩尔浓度为250mM。
上述试剂盒的使用方法,包括如下步骤:先将编码DNA探针转录成crRNA,检测后备用;再将样品DNA通过等温扩增系统进行扩增;随后经用于检测SRY基因的CRISPR-Cas13系统对SRY基因特异性识别;最后通过可视化系统观察检测信号以判断待检样品是否含有SRY基因。
横向流动试纸条前端包被有带FAM抗体的彩色微球,其彩色微球采用(羧基)偶联抗体两步法工艺,经过微球的稀释、活化、去除残留EDC、偶联抗体、封闭、去除未结合抗体等步骤制成。质控线(C线)在后端,其上包被有羊抗鼠抗体;检测线(T线)位于控制线前,其上包被有生物素抗体。完整的非特异性报告分子在和彩色微球上的FAM抗体结合后,会被检测线上的生物素抗体捕获显色,而多余的彩色微球上的FAM抗体会与羊抗鼠抗体结合而被保留在控制线上显色;而经过Cas13a水解的非特异性报告分子,其一端的生物素与检测线上的生物素抗体结合,但不显色。另一端的FAM会和彩色微球上的FAM抗体结合,不会被检测线上的生物素抗体限制,而是和控制线上的羊抗鼠抗体结合显色。
有益效果
本发明的优势在于:对SRY基因靶分子进行等温扩增,实现低拷贝分子的富集,从而大大提高检测下限,使低拷贝的分子被检出,最低限可达200个拷贝,提高扩增效率使检出率到达更高的要求,满足低拷贝模板的检出率。而且由于检测体系利用基因编辑探针特异性,因此检测有很高的特异性。
本发明能够对SRY基因检测,采用恒温扩增的方式并结合横向流动试纸条,不需要复杂的温控,具有操作简单,灵敏度高,特异性强,检测速度快等诸多技术优势。该试剂盒可用于实验室、临床、现场即时等多种环境中进行快速检测,并且可以以此为基础衍生出对其他病原体或者非病原体DNA和RNA的检测方法。
附图说明
图1为本发明的检测原理图。
图2为靶向检测的试纸条结果图。
图3为特异性测试的试纸条结果图。
具体实施方式
下面,通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
实施例1
1.1引物及探针设计
针对SRY基因进行引物设计。设计完成进行DNA序列合成,具体如下:
(1)SRY基因的引物对
设计编码DNA探针,crRNA探针的编码DNA序列具体如下:
1.2探针制备
将编码DNA探针转录成向导RNA探针(crRNA):一对编码DNA探针各取5μL混匀,95℃退火5min。后取退火的DNA探针加入转录反应体系中,混匀;将反应管置于37℃反应16h。反应结束后,用磁珠纯化或柱纯化反应产物,得到crRNA。检测后分装备用。
转录反应体系为:
试剂 | 用量 |
T7 Reaction Buffer | 10μL |
T7 Polymerase Mix | 2μL |
SRY probe探针对 | 5μL |
无核酸酶水 | 3μL |
1.3等温扩增
取5μL待检测样品和无核酸酶水分别加入等温扩增反应体系中,混匀;将反应板置于39℃反应15min,反应结束后,得到待检测样品的等温扩增反应产物。
试剂 | 用量 |
缓冲液V和RPA重组酶冻干粉 | 25μL |
引物对(SRY-F1和SRY-R1) | 2μL |
醋酸镁 | 2.5μL |
无核酸酶水 | 15.5μL |
模板 | 5μL |
1.4靶向检测
取1μL等温扩增产物进行检测,其中,所述检测反应体系如下:
非特异性报告分子如下:
名称 | 序列(5'to3') |
非特异性报告分子 | /56-FAM/mArArUrGrGrCmAmArArUrGrGrCmA/3Bio/ |
反应结束后,向产物添加20μL试纸条检测层析液,混匀离心后将横向流动试纸条的载样区插入检测液中,2-5min后根据检测线条带的明亮度差异,可以通过肉眼直接观察并进行判读。
1.5灵敏度测试
将制备好的模板溶解后测定其浓度,通过浓缩或稀释成不同浓度。
测试:参与等温扩增的模板浓度(copies/mL)如下表:
取5μL不同浓度模板参与等温扩增,后取1μL等温扩增产物进行靶向检测,经试纸条检测结果如图2。结果表明当模板浓度高于200copies/mL时,应用本发明,可以有效的检出。
1.6特异性测试
随机选取了七位志愿者采集样本参与特异性测试,并加上了一个空白对照(不加入样本,用检测缓冲液代替)。由不参与实验的人员进行编号记录留存。样本以盲样的形式进入实验室进行检测,留存的记录见下表所示。
盲样序号 | A | B | C | D | E | F | G |
性别 | 女 | 男 | 男 | 女 | 女 | 女 | 男 |
试纸条结果如图3,。结果表明SRY基因可以被检测到,且无交叉反应。证实了本发明检测具有较高的特异性。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种用于检测SRY基因的crRNA探针,其特征在于,所述crRNA探针包括:SRY probeF1和SRY probe R1,其中,SRY probe F1在5’端带有T7启动子序列,
所述SRY probe R1与SRY probe F1互补;
T7启动子序列为:GAAATTAATACGACTCACTATAGGG
SRY probe F1的碱基序列为:
GAAATTAATACGACTCACTATAGGGGATTTAGACTACCCCAAAAACGAAGGGGACTAAAACGCAAAACATGGTAATTCAGTAACGTTGA;
SRY probe R1的碱基序列为:
TCAACGTTACTGAATTACCATGTTTTGCGTTTTGATCCCCTTCGTTTTTGGGGTAGTCTAAATCCCCTATAGTGAGTCGTATTAATTTC。
2.根据权利要求1所述的用于检测SRY基因的crRNA探针,其特征在于,所述SRY probeF1的靶基因为SRY基因。
SRY基因的碱基序列为:
TGGCGATTAAGTCAAATTCGCATTTTTCAGGACAGCAGTAGAGCAGTCAGGGAGGCAGATCAGCAGGGCAAGTAGTCAACGTTACTGAATTACCATGTTTTGCTTGAGAATGAATACATTGTCAGGGTACTAGG。
3.根据权利要求1所述的用于检测SRY基因的crRNA探针,其特征在于,所述crRNA探针的编码DNA序列包括:用于Cas13a核酸酶识别的核酸序列,以及与靶基因互补的核酸序列。
用于Cas13a核酸酶识别的核酸序列为:
GATTTAGACTACCCCAAAAACGAAGGGGACTAAAAC;
与靶基因互补的核酸序列为:
GCAAAACATGGTAATTCAGTAACGTTGA。
4.一种用于检测SRY基因的CRISPR-Cas13系统,其特征在于,包括:Cas13a核酸酶、crRNA探针和可视化显色报告分子;所述crRNA用于识别SRY基因,Cas13a核酸酶在crRNA识别靶基因后,激活酶活性,并对可视化显色报告分子进行切割,释放检测信号。
5.根据权利要求4所述用于检测SRY基因的CRISPR-Cas13系统,其特征在于,所述CRISPR-Cas13系统还包括:检测缓冲液;检测缓冲液包括:Tris。
6.根据权利要求4所述用于检测SRY基因的CRISPR-Cas13系统,其特征在于,所述报告分子为非特异性报告分子,其序列为/56-FAM/mArArUrGrGrCmAmArArUrGrGrCmA/3Bio/,其中5’端用FAM标记,3’端用生物素标记。
7.一种SRY基因检测试剂盒,其特征在于,包括:转录系统,等温扩增系统,用于检测SRY基因的CRISPR-Cas13系统,以及可视化系统;
其中,所述转录系统包括T7 ReactionBuffer、T7 Polymerase Mix、SRY probe探针对和无核酸酶水;
所述用于检测SRY基因的CRISPR-Cas13系统包括:Cas13a核酸酶、crRNA探针和可视化显色报告分子;
所述等温扩增系统包括:针对SRY基因的引物对,包括SRY-F1和SRY-R1;
SRY-F1的碱基序列为:
GAAATTAATACGACTCACTATAGGGTGGCGATTAAGTCAAATTCGCATTTTTCAG;
SRY-R1的碱基序列为:
CCTAGTACCCTGACAATGTATTCATTCTCA;
所述可视化系统包括:横向流动试纸条和检测层析液。
8.根据权利要求7所述的SRY基因检测试剂盒,其特征在于,所述横向流动试纸条前端包被有带FAM抗体的彩色微球,检测线上包被有生物素抗体,质控线上包被有羊抗鼠抗体。
9.根据权利要求7所述的SRY基因检测试剂盒,其特征在于,所述T7 Polymerase Mix包括:T7 DNA聚合酶、所述T7 ReactionBuffer包括:rNTPs。
10.根据权利要求7所述的SRY基因检测试剂盒,其特征在于,所述等温扩增系统还包括:RPA重组酶、反应缓冲液V、醋酸镁溶液、无核酸酶水;
其中,所述RPA重组酶包括:T4噬菌体重组酶UvsX、辅助因子UvsY、DNA聚合酶、单链DNA结合蛋白和dNTPs。
所述反应缓冲液V包括:pH=7.9的Tris、醋酸钾、乙酸镁、DTT、ATP、磷酸肌酸、肌酸激酶和质量浓度为5%的聚乙二醇。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202211241390.2A CN115404268B (zh) | 2022-10-11 | 2022-10-11 | 一种sry基因检测探针和试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202211241390.2A CN115404268B (zh) | 2022-10-11 | 2022-10-11 | 一种sry基因检测探针和试剂盒 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN115404268A true CN115404268A (zh) | 2022-11-29 |
CN115404268B CN115404268B (zh) | 2023-04-07 |
Family
ID=84167280
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202211241390.2A Active CN115404268B (zh) | 2022-10-11 | 2022-10-11 | 一种sry基因检测探针和试剂盒 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN115404268B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115851912A (zh) * | 2022-11-30 | 2023-03-28 | 湖南家辉生物技术有限公司 | 一种与性反转相关的致病基因、引物对及其应用和鉴定基因型的方法 |
Citations (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108893529A (zh) * | 2018-06-25 | 2018-11-27 | 武汉博杰生物医学科技有限公司 | 一种基于CRISPR技术特异性检测人KRAS基因2号及3号外显子突变的crRNA |
CN110551800A (zh) * | 2018-06-03 | 2019-12-10 | 上海吐露港生物科技有限公司 | 一种耐高温Cas蛋白的用途及靶标核酸分子的检测方法和试剂盒 |
CN111560482A (zh) * | 2020-06-11 | 2020-08-21 | 亚能生物技术(深圳)有限公司 | 基于CRISPR/Cas和核酸试纸的检测方法和人乳头瘤病毒检测试剂盒 |
CN112301101A (zh) * | 2019-07-24 | 2021-02-02 | 上海吐露港生物科技有限公司 | Crispr多靶标检测方法及其试剂盒 |
CN113462796A (zh) * | 2021-06-15 | 2021-10-01 | 浙江大学 | 核酸等温扩增和CRISPR/Cas13a联合检测微生物的方法和应用 |
CN113462795A (zh) * | 2021-05-31 | 2021-10-01 | 浙江大学 | 一种用于快速检测单核细胞增生李斯特菌的联合检测方法及其系统和应用 |
CN113549618A (zh) * | 2021-06-28 | 2021-10-26 | 中国人民解放军疾病预防控制中心 | 基于RAA扩增和CRISPR-Cas13a系统的SARS-CoV-2核酸检测方法 |
CN113584134A (zh) * | 2021-09-06 | 2021-11-02 | 山东启邦汇康生物技术有限公司 | 一种基于CRISPR-Cas9的等温核酸检测系统及其方法和应用 |
CN113621737A (zh) * | 2021-09-06 | 2021-11-09 | 辽宁佰昊生物科技有限公司 | 一种流感病毒检测试剂盒及其应用 |
US20220135958A1 (en) * | 2020-11-03 | 2022-05-05 | Caspr Biotech Corporation | Class 2 crispr-cas rna-guided endonucleases |
-
2022
- 2022-10-11 CN CN202211241390.2A patent/CN115404268B/zh active Active
Patent Citations (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110551800A (zh) * | 2018-06-03 | 2019-12-10 | 上海吐露港生物科技有限公司 | 一种耐高温Cas蛋白的用途及靶标核酸分子的检测方法和试剂盒 |
CN108893529A (zh) * | 2018-06-25 | 2018-11-27 | 武汉博杰生物医学科技有限公司 | 一种基于CRISPR技术特异性检测人KRAS基因2号及3号外显子突变的crRNA |
CN112301101A (zh) * | 2019-07-24 | 2021-02-02 | 上海吐露港生物科技有限公司 | Crispr多靶标检测方法及其试剂盒 |
CN114174535A (zh) * | 2019-07-24 | 2022-03-11 | 上海吐露港生物科技有限公司 | Crispr多靶标检测方法及其试剂盒 |
CN111560482A (zh) * | 2020-06-11 | 2020-08-21 | 亚能生物技术(深圳)有限公司 | 基于CRISPR/Cas和核酸试纸的检测方法和人乳头瘤病毒检测试剂盒 |
US20220135958A1 (en) * | 2020-11-03 | 2022-05-05 | Caspr Biotech Corporation | Class 2 crispr-cas rna-guided endonucleases |
CN113462795A (zh) * | 2021-05-31 | 2021-10-01 | 浙江大学 | 一种用于快速检测单核细胞增生李斯特菌的联合检测方法及其系统和应用 |
CN113462796A (zh) * | 2021-06-15 | 2021-10-01 | 浙江大学 | 核酸等温扩增和CRISPR/Cas13a联合检测微生物的方法和应用 |
CN113549618A (zh) * | 2021-06-28 | 2021-10-26 | 中国人民解放军疾病预防控制中心 | 基于RAA扩增和CRISPR-Cas13a系统的SARS-CoV-2核酸检测方法 |
CN113584134A (zh) * | 2021-09-06 | 2021-11-02 | 山东启邦汇康生物技术有限公司 | 一种基于CRISPR-Cas9的等温核酸检测系统及其方法和应用 |
CN113621737A (zh) * | 2021-09-06 | 2021-11-09 | 辽宁佰昊生物科技有限公司 | 一种流感病毒检测试剂盒及其应用 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
DAGANG TAO ET AL.: "A Simple, Affordable, and Rapid Visual CRISPR‑Based Field Test for Sex Determination of Earlier Porcine Embryos and Pork Products" * |
JINBO WU ET AL.: "Fast detection of genetic information by an optimized PCR in an interchangeable chip" * |
MOHAMMAD AMIN ALMASI ET AL.: "Loop Mediated Isothermal Amplification (LAMP) for Embryo Sex Determination in Pregnant Women at Eight Weeks of Pregnancy" * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115851912A (zh) * | 2022-11-30 | 2023-03-28 | 湖南家辉生物技术有限公司 | 一种与性反转相关的致病基因、引物对及其应用和鉴定基因型的方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN115404268B (zh) | 2023-04-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN111778357B (zh) | 基于CRISPR/Cas12a的呼吸道合胞病毒核酸快速检测试剂盒及其检测方法 | |
CN110878343B (zh) | 一种用于遗传性耳聋致病基因SLC26A4突变快速检测的Cpf1试剂盒及其检测方法 | |
WO2022033334A1 (zh) | 一种新型冠状病毒(SARS-CoV-2)快速检测试剂盒及其方法 | |
CN108220479B (zh) | 能检测多种猪猝死症病原的多重连接探针扩增鉴别试剂盒 | |
US20230002821A1 (en) | High-throughput detection method for rare mutation of gene | |
WO2017219512A1 (zh) | 一种游离dna文库构建方法及试剂盒 | |
WO2021128659A1 (zh) | 特异性引物探针组合及其适于血液直接扩增结合荧光pcr法检测叶酸代谢能力基因的应用 | |
CN115404268B (zh) | 一种sry基因检测探针和试剂盒 | |
CN110804669A (zh) | 用于肺炎支原体的crispr检测引物组及其用途 | |
CN116064754A (zh) | 减少交叉污染的扩增子测序文库的构建方法 | |
US20230193369A1 (en) | Composition, reaction liquid and method for improving qpcr test performance, and use thereof | |
CN106801099A (zh) | 一种检测mthfr基因突变的核酸组合及其应用和试剂盒 | |
CN110468189B (zh) | 基于单样本二代测序检测样本体细胞变异的方法及装置 | |
CN113684317B (zh) | 一种基于CRISPR-Cas12b对乙肝病毒B型和C型的超灵敏快速检测及鉴别系统 | |
CN107164508A (zh) | 用于检测肝癌的基因标志物及其用途 | |
Salvi et al. | Urinary cell-free DNA: potential and applications | |
JP3169027U (ja) | 遺伝子集団検知構造 | |
CN110904234A (zh) | 基于ddPCR及EGFR热点突变检测人循环肿瘤细胞的引物组、探针组、试剂盒及用途 | |
CN111500768B (zh) | 鉴定新型冠状病毒的引物探针及在双重数字pcr的用途 | |
EP3412769B1 (en) | Method for separating target cell from blood sample and use thereof | |
WO2021194145A1 (ko) | 알지네이트-폴리도파민-실리카 복합체를 포함하는 세포 유리(cell free) dna 추출용 조성물 | |
Weymaere et al. | Enrichment of circulating trophoblasts from maternal blood using filtration-based Metacell® technology | |
CN110616261A (zh) | 一种用于检测egfr基因t790m突变的试剂盒及检测方法 | |
CN113061653A (zh) | 用于产前无创检测21三体综合征的pcr扩增组合物及检测试剂盒 | |
US20080293585A1 (en) | 5'/3' Ratioing Procedure for Detection of Gene Rearrangements |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |