CN115400038A - 美白用组合物的用途以及利用其的皮肤美白方法 - Google Patents
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Abstract
Description
技术领域
本发明涉及美白用组合物的用途以及利用其的皮肤美白方法。
背景技术
皮肤在人类的生存中起到必要的多种功能。用于维持人体内部的稳态以对应环境变化的屏障功能、用于感知外部变化的感官功能、体温调节功能等属于最具代表性的皮肤功能。所述多种皮肤功能中,尤其皮肤的屏障功能主要是通过位于皮肤的最外层的角质层来体现。有报告指出,角质层不仅单纯起到屏障功能,而且也影响着内部中存在的细胞层,即表皮层或者真皮层的功能以及作用、结构等,因此其重要性在持续增加。所述角质层由坏死的角质细胞和细胞间脂质构成,作为从外部刺激中保护皮肤,阻止水分从内部蒸发的皮肤保护膜,负责核心功能。另外,角质层的角质形成细胞通过分化以及角质化过程,形成皮肤屏障。
引起人的皮肤老化的因素有多样,尤其因紫外线导致皮肤皱纹的生成、弹力下降、色素沉着以及皮肤屏障的受损,由此出现皮肤水分量的减少。因紫外线导致的皮肤受损而皮肤表面的水分量减少时,皮肤表面角质层丧失柔性的同时,皮肤变干燥,其最终导致皮肤无法顺利完成作为屏障的功能。因此,为了强化皮肤屏障,维持皮肤保湿力是极其重要的。
与表皮中存在的水平衡(water homeostasis)有关的孔(pores)有两种,它们就是水通道蛋白(Aquaporins,AQP)和紧密连接(Tight Junction,TJ)。另外,周知丝聚蛋白(filagrin)作为负责皮肤保湿的天然保湿因子(NMF)的前蛋白,丝聚蛋白生产促进功能在保湿作用中,起到重要的作用(J.Invest.Dermatol.54,24-31,1970)。
一方面,有很多报告中指出,多种炎症性皮肤炎是基于IgE(免疫球蛋白E)相关免疫机制发生,在该情况下,由T细胞异常的迟发性免疫反应进行参与。尤其是,在发生特应性皮炎的部位,巨噬细胞、Th淋巴细胞、肥大细胞等免疫相关细胞的浸润增加很多。对于特应性皮炎的皮肤,当为特应性皮炎患者时,血液中IgE的浓度高,其是因为Th2细胞的数量增加,该细胞分泌的IL-4、13等Th2细胞因子刺激B淋巴细胞,由此促进IgE分泌。尤其是,初期特应性皮炎时,IL-4、IL-13作用较大(Donald Y.M.Leung et al.,J Clin Invest.2004,113,651-657)。
所述特应性皮炎之类的炎症在治疗以及预防中,至关重要的是使炎症消退因子主动进行参与。所述炎症消退因子作为主动参与到炎症的消退步骤(inflammationresolution)的因子,在炎症反应后期从组织内免疫细胞(中性粒细胞(neutrophil)、巨噬细胞(macrophage))中自然生成以及分泌。所述炎症消退因子具有脂质、蛋白质、气体分子等多种形态,其中,尤其是最近活跃进行着对炎症消退脂质因子(specialized pro-resolving lipid mediator,SPMs)的研究。所述炎症消退脂质因子是作为ω-3多不饱和脂肪酸(omega-3polyunsaturated fatty acid;PUFA)的二十碳五烯酸(eicosapentaenoicacid;EPA)或者二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid;DHA)在细胞内进行代谢,由此生成的代谢物(metabolite)。目前为止虽然有多个报告指出基于所述炎症消退脂质因子的炎症反应的缓和,然而尚未有报告指出所述炎症消退脂质因子对黑色素生成细胞(melanocyte)的黑色素生成的影响以及用于强化皮肤美白功效的用途。为此,本发明人在开发对人体安全的天然皮肤美白剂的过程中,确认到所述炎症消退脂质因子不仅在没有色素沉着因子的环境下具有皮肤美白功效,而且抑制由色素沉着因子导致的色素沉着现象,进一步地,阻碍痤疮诱导菌(Cutibacterium acnes(痤疮丙酸杆菌),C.acnes)诱导的黑色素的生成,从而具有美白功效,由此完成了本发明。
一方面,作为与本发明相关的现有技术文献,具有韩国公开专利第10-2020-0042285号等。
发明内容
技术问题
一实现例想要提供一种能够改善皮肤色素沉着过度现象的化妆料组合物的用途。
其他一实现例想要提供一种个体的皮肤美白方法,其包括向个体给药所述化妆料组合物的步骤。
技术方案
根据一实现例,提供一种用于制备美白用组合物的化合物的用途,所述化合物包括由以下化学式A表示的结构单位,并包括一个以上的羟基以及一个以上的羧基。
【化学式A】
作为所述有效成分含有的化合物可以包括由以下化学式1表示的化合物。
【化学式1】
在所述化学式1中,R1至R3各自独立为氢原子、羟基或者羧基,且所述R1至R3中的至少一个为羟基,所述R1至R3中的至少一个为羧基。
可以是,所述R1以及R2各自独立为羟基,所述R3为羧基。
由所述化学式1表示化合物可以相对于所述组合物总量,含有0.001nM至1μM的浓度。
由所述化学式1表示化合物可以相对于所述组合物总量,含有0.01nM至100nM的浓度。
作为所述有效成分含有的化合物可以包括由以下化学式2表示的化合物。
作为所述有效成分含有的化合物可以包括由以下化学式3表示的化合物。
【化学式2】
【化学式3】
在所述化学式2中,R1至R3各自独立为氢原子、羟基或者羧基,且所述R1至R3中的至少一个为羟基,所述R1至R3中的至少一个为羧基,
在所述化学式3中,R3以及R4各自独立为羟基或者羧基,且所述R3以及R4中的至少一个为羟基,所述R3以及R4中的至少一个为羧基。
所述美白用组合物可以为化妆料组合物。
根据其他一实现例,提供一种个体的皮肤美白方法,所述方法包括向个体给药化妆料组合物的步骤,所述化妆料组合物作为有效成分含有化合物,所述化合物包括由所述化学式A表示的结构单元,并包括一个以上的羟基以及一个以上的羧基。
根据又一其他实现例,提供一种为了制备美白用组合物而包括一个以上的羟基以及一个以上的羧基的同时,由所述化学式A表示的化合物的用途。
根据又一其他实现例,提供一种方法,其通过向皮肤涂敷有效量的组合物,从而美白皮肤,所述组合物包括由所述化学式A表示的化合物(包括一个以上的羟基以及一个以上的羧基)。
对于包括一个以上的羟基以及一个以上的羧基的同时,由所述化学式A表示的化合物以及浓度可以如前述,对于所述组合物可以包括由所述化学式1至化学式3表示的化合物也可以如前述。
发明效果
根据一实现例的组合物,不仅阻碍痤疮诱导菌(C.acnes)引起的黑色素生成细胞(melanocyte)内黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase(酪氨酸酶))的蛋白质表达的增加,而且与痤疮诱导菌无关而在引起皮肤色素沉着的情况下,也阻碍黑色素生成细胞(melanocyte)内黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase(酪氨酸酶))的蛋白质表达的增加,从而可以向涂敷所述组合物的皮肤赋予优秀的美白效果。即,确认到根据一实现例的组合物不仅在没有色素沉着因子的环境下具有皮肤美白功效,而且抑制色素沉着因子引起的色素沉着现象,进一步地,阻碍痤疮诱导菌(C.acnes)诱导的黑色素的生成,从而可以向涂敷所述组合物的皮肤赋予优秀的美白效果。
附图说明
图1至图3是各自独立示出根据一实现例的组合物在人类正常黑色素生成细胞(melanocyte)中阻碍黑色素生成酶(TRP2、tyrosinase)的蛋白质表达的增加的照片以及图表;
图4至图6是各自独立示出根据一实现例的组合物阻碍不是由痤疮诱导菌(C.acnes)而是由色素沉着因子(α-MSH)引起的黑色素生成酶(TRP2、tyrosinase)的蛋白质表达的增加的照片以及图表;
图7至图9是各自独立示出根据一实现例的组合物阻碍不是由痤疮诱导菌(C.acnes)而是由色素沉着因子(IBMX)引起的黑色素生成酶(TRP2、tyrosinase)的蛋白质表达的增加的照片以及图表;
图10是示出痤疮诱导菌(C.acnes)增加黑色素生成酶(TRP1、TRP2)的蛋白质表达的照片;
图11以及图12是各自独立示出根据一实现例的组合物阻碍由痤疮诱导菌(C.acnes)引起的黑色素生成酶(TRP1、TRP2)的蛋白质表达的增加的照片以及图表。
具体实施方式
以下,详细说明本发明的实现例以供本发明所属技术领域中具有通常知识的人能够容易实施。然而,本发明可以由各种不同的形态实现,不限于在此说明的实现例。
在本说明书中,皮肤美白功能的改善是指,使位于皮肤外层的角质层的颜色变亮变白。作为皮肤的第一个防御膜的角质层能够因外部环境而容易受损伤。为了向该皮肤赋予美白能力,通常是可以通过涂抹皮肤外用剂的处方来暂时解决问题,然而难以解决根本上的问题,进一步地,皮肤外用剂大部分不是用来解决问题,而是仅具有单纯遮住皮肤内黑印程度的效果,因此目前为止不能仅通过单纯涂抹皮肤外用剂的处方,就能根本上改善皮肤的色素沉着问题。为此,本发明人确认到构成根据一实现例的组合物的、由特定化学式表示的化合物能够解决如上所述根本上的问题,从而根本上改善皮肤美白功效,由此完成了本发明。
更加具体为,根据一实现例的组合物针对参与到黑色素合成的黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase(酪氨酸酶))的表达,可以通过调节信号传导,期待皮肤美白效果。
针对此,曾公布了当c-AMP的细胞内浓度增加时,增加黑色素的生成,当细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase;ERK)传导通路被激活时,减少黑色素的生成的事实。然而,作为激活所述细胞外信号调节激酶传导通路的方法,公知有刺激使细胞外信号调节激酶磷酸化的信号传导通路的方法,而且当抑制作为使细胞外信号调节激酶脱磷酸化的酶的蛋白质磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)时,激活细胞外信号调节激酶,因此最终期待通过小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia-associatedtranscription factor;MIITF)的分解得到皮肤美白效果,然而最近未公开抑制所述蛋白质磷酸酶2A的有效方法。
针对此,本发明人确认到向黑色素细胞处理作为有效成分含有特定化合物的组合物(更加具体为,作为有效成分以特定浓度范围含有所述特定化合物的组合物)时,具有阻碍黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase)的合成的效果,由此完成了本发明。
一方面,如前述方法,直接抑制黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase)的物质需要使用高浓度,因此不仅能够显示皮肤刺激等的副作用,而且曲酸(kojic acid)因其能够引起皮肤癌的可能性,处于禁止使用的状态。然而,根据一实现例的组合物由于不是直接抑制黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase)的物质,因此不刺激皮肤而几乎没有副作用的同时,通过抑制黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase)的生成,可以显示非常强的美白效果。
在本说明书中,当提及到层、膜、区域、板等部分位于其他部分“之上”时,其不仅包括“直接”位于其他部分“之上”的情况,还包括在其中间存在又一其他部分的情况。与此相反地,当提及到某一部分“直接”位于其他部分“之上”时,是指在中间不存在其他部分。
在本说明书中,没有另外有定义时,“组合”是指混合或者共聚合。另外,“共聚合”是指嵌段共聚合乃至无规共聚合,“共聚物”是指嵌段共聚物乃至无规共聚物。
以下,说明根据一实现例的皮肤美白用组合物。
根据一实现例的皮肤美白用组合物,作为有效成分含有化合物,所述化合物包括由以下化学式A表示的结构单位,并包括一个以上的羟基以及一个以上的羧基的化合物。
【化学式A】
例如,作为所述有效成分含有的化合物可以包括由以下化学式1表示的化合物。
【化学式1】
在所述化学式1中,
R1至R3各自独立为氢原子、羟基或者羧基,且所述R1至R3中的至少一个为羟基,所述R1至R3中的至少一个为羧基。
例如,可以是,在所述化学式1中,R1以及R2各自独立为羟基,R3为羧基。
由所述化学式1表示的化合物作为炎症消退脂质因子(specialized pro-resolving lipid mediator,SPMs)之一,不仅阻碍痤疮诱导菌(C.acnes)在黑色素生成细胞(melanocyte)内增加黑色素生成酶(TRP1、TRP2)的蛋白质表达,而且在由除所述痤疮诱导菌之外的皮肤色素沉着因子(α-MSH,IBMX等)引起的色素沉着的皮肤中,也阻碍黑色素生成酶(TRP2、tyrosinase)的蛋白质表达的增加,从而可以向皮肤赋予优秀的美白效果。
皮肤的色素沉积过度可以是因皮肤炎症反应之后的体内激素异常、遗传性疾病以及紫外线照射等各种原因引起的,作为主要原因,可以举出黑色素合成异常以及分布异常等。
黑色素的主要功能是去除氧自由基,从而保护皮肤免受因氧自由基导致的受损。因此,黑色素多表示为了保护皮肤免受物理、化学毒性物质的影响而具有有效的应对体系。如上所述的黑色素的生成是酪氨酸(Tyrosine)在黑色素细胞中通过黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase)而转换为多巴醌(Dapaquinone)之后,通过酶的作用以及自发性的氧化反应来完成的。
目前为止公知的抑制黑色素生成的方法大致为如下。
首先,是阻隔紫外线,从而去除黑色素生成的主要原因的方法。该方法可以通过使化妆料组合物含有光散射剂或者光阻隔剂,从而期待优秀效果。
接着,可以通过阻碍黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase)的活性中所需的核心碳水化合物,例如氨基葡萄糖(Glucosamine)的合成,从而抑制黑色素的生成。
另外,可以阻碍作为曲酸(Kojic acid)或者熊果素参与到黑色素的生成的酶的黑色素生成酶(TRP1)的功能。
进一步地,也可以利用如对苯二酚(hydroquinone),对生成黑色素的黑色素细胞具有特异毒性的物质,阻碍黑色素细胞的分裂。
除此之外,还介绍过还原生成的黑色素进行脱色的方法。
目前,为了发现美白组合物而进行的大部分的研究是集中研究直接抑制参与到黑色素合成中的黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase)的物质。然而,除了直接抑制黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase)之外,还曾提出过可以通过调节参与到黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase)的表达的信号传导(signal transduction),期待美白效果的技术(Briganti S,Camera E,Picardo M.Pigment Cell Res,2003,16(2):101-10)。
另外,周知黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase)在受到外部刺激或者激素等的影响时,通过作为转录因子的MITF(小眼畸形相关转录因子;microphthalmia-associatedtranscription factor)的调节来产生(DS Kim,ES Whang,JE Lee,SY Kim,SB Kwon,andKC Park.J Cell Sci.2003;116:1699-706),然而还未曾介绍过通过抑制所述MITF的表达,减少黑色素的生成的方法。
根据一实现例的组合物通过抑制所述黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase)的生成来减少黑色素的生成,具体为,在黑色素生成细胞(melanocyte)中阻碍因痤疮诱导菌(C.acnes)等而增加的黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase)的蛋白质表达的效果卓越,因此,当使用在因痤疮诱导菌(C.acnes)或者其他皮肤色素沉着诱导因子而诱导色素沉着过度的皮肤上时,皮肤美白效果非常显著。例如,当向痤疮周围的皮肤涂敷根据一实现例的组合物时,可以期待非常优秀的皮肤美白效果。
一实现例提供一种作为有效成分含有由所述化学式1表示的化合物的皮肤美白用组合物,可以以药学上有效的量单独含有由所述化学式1表示的化合物或者包括一个以上的药学上可接受的载体、赋形剂或者稀释剂。
在所述组合物内,由所述化学式1表示化合物可以相对于组合物总量,含有0.001nM至1μM的浓度,例如,0.01nM至100nM的浓度,例如1nM至100nM的浓度。例如,在所述组合物内,由所述化学式1表示化合物可以相对于组合物总量,含有0.001nM以上、0.01nM以上、0.1nM以上、1nM以上的浓度,可以含有1μM以下、100nM以下的浓度。当以不足0.001nM的浓度使用由所述化学式1表示的化合物时,抑制痤疮诱导菌(C.acnes)或者皮肤色素沉着诱导因子在黑色素生成细胞(melanocyte)中增加黑色素生成酶(TRP1、TRP2、tyrosinase)的蛋白质表达的现象的程度微弱,因此不能具有皮肤美白功能改善效果。另外,当以超过1μM的浓度使用由所述化学式1表示的化合物时,显示细胞毒性而有可能危害人体,因此不优选,当以超过100nM的浓度使用时,虽然细胞毒性的危害相对低,然而与以1nM至100nM的浓度含有由所述化学式1表示的化合物的情况相比,在皮肤美白效果上可能没有大的差异,反而是不必要地含有过量的由所述化学式1表示的化合物,从而可能限制组合物内其他功能性成分的作用等,因此可以不优选。
例如,所述美白用组合物可以作为有效成分含有由以下化学式2表示的化合物。
【化学式2】
在所述化学式2中,
R1至R3各自独立为氢原子、羟基或者羧基,且所述R1至R3中的至少一个为羟基,所述R1至R3中的至少一个为羧基。
例如,所述化学式2可以由以下化学式2-1表示,但是不一定限定于此。
【化学式2-1】
例如,所述美白用组合物可以包括由以下化学式3表示的化合物。
【化学式3】
在所述化学式3中,R3以及R4各自独立为羟基或者羧基,且所述R3以及R4中的至少一个为羟基,所述R3以及R4中的至少一个为羧基。
例如,所述化学式3可以由以下化学式3-1表示,但是不一定限定于此。
【化学式3-1】
以上“药学上有效的量”是指向动物或者人给药所述生理活性成分而显示所目的的生理学或者药力学活性上充分的量。然而,所述药学上有效的量可以根据症状的程度、患者的年龄、体重、健康状态、性别、给药途径以及治疗时间等而适当变化。
另外,以上“药学上可接受”是指生理学上允许且向人类给药时,一般不引起胃肠障碍、晕眩感之类的过敏反应或者与其类似的反应。作为所述载体、赋形剂以及稀释剂的示例,可以举出乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藓醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯胶、海藻酸、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、甲基羟苯酸酯、丙基羟苯酸酯、滑石、硬脂酸镁以及矿物油。另外,还可以含有填充剂、抗凝剂、润滑剂、润湿剂、香料、乳化剂以及防腐剂等。
例如,所述组合物可以为化妆料组合物。
在本说明书中,“化妆料”可以是指,不仅具有美容功能,还可以具有除美容功能之外进一步具有医学功能的所有物质。
所述化妆料组合物的剂型不受特别限制,根据目的可以适当选择。
例如,所述化妆料组合物可以剂型化为溶液、悬浮液、乳浊液、糊剂、凝胶、霜、乳液、粉、皂剂、含表面活性剂的清洁剂、油、粉状粉底、乳状粉底、蜡状粉底以及喷雾等,但不限于此。更加详细地,可以剂型化为清洗剂、营养液(tonic)、头发定型剂、营养化妆水、精华液、精华乳、焗油剂、润发乳、洗发水、乳液、养发剂或者染发剂等的化妆料组合物;水包油(O/W)型、油包水(W/O)型等的基础化妆料。例如,所述组合物可以具有选自由润肤乳、润肤液、收敛剂、乳液、牛奶乳液、保湿乳液、滋养乳液、按摩霜、营养霜、保湿霜、护手霜、软膏、粉底、精华、滋养精华、面膜、皂剂、洁面泡沫、洁面乳、洁面霜、身体乳、沐浴乳、乳液、软膏、凝胶、霜、贴片以及喷雾剂而成的组中的一种剂型。另外,所述组合物在各个剂型中,除了所述必要成分之外,其他成分可根据其他外用剂的种类或者使用目的等,本领域技术人员容易适当选择并进行调配。例如,还可以包含紫外线阻隔剂、护发调理剂、香料等。
所述化妆料组合物可以含有化妆品学上可接受的介质或者基质。其作为适合局部使用的所有剂型,可以提供为例如溶液、凝胶、固体或者糊状无水生成物、在水相分散油相得到的乳剂、悬浮液、微乳剂、微胶囊、微颗粒球或者离子型(脂质体)以及/或者非离子型的囊素分散剂形态,或者霜、化妆水、乳液、粉、软膏、喷雾或者遮瑕棒形态。所述组合物可以按照本领域中的常规方法制备。
当本发明的剂型为溶液或者乳浊液时,作为载体成分,使用溶剂、增溶剂或者破乳剂,例如,有水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇油、甘油脂肪酯、聚乙二醇或者山梨糖醇的脂肪酸脂。
当本发明的剂型为悬浮液时,作为载体成分,可以使用诸如水、乙醇或者丙二醇的液态稀释剂;诸如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇酯以及聚氧乙烯山梨糖醇酐酯的悬浮剂;微晶纤维素;偏氢氧化铝;膨润土、琼脂或者黄蓍胶等。
当本发明的剂型为糊剂、霜剂或者凝胶剂时,作为载体成分,可以使用动物性油、植物性油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、氧化硅、滑石或者氧化锌等。
当本发明的剂型为粉剂或者喷雾剂时,作为载体成分,可以使用乳糖、滑石、氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉剂,尤其为喷雾剂时,还可以含有诸如氯氟烃、丙烷/丁烷或二甲醚的推进剂。
在本发明的一实施形态中,所述化妆料组合物还可以含有增粘剂。本发明的化妆料组合物中包含的增粘剂可以使用甲基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基羟基鸟嘌呤、羟甲基纤维素、羟基乙纤维素、羧乙烯聚合物、聚季铵盐、鲸蜡硬脂醇、硬脂酸、卡拉胶等,可以优选使用羧甲基纤维素、羧乙烯聚合物、聚季铵盐中的一种以上,可以最优选为羧乙烯聚合物。
在本发明的一实施形态中,所述化妆料组合物根据需要,可以适当含有各种基质和添加剂,这些成分的种类和量可由发明人容易选定。可以根据需要含有可接受的添加剂,例如,还可以含有本领域常规的防腐剂、色素、添加剂等的成分。
作为防腐剂,具体可以为苯氧乙醇(Phenoxyethanol)或者1,2-己二醇(1,2-Hexanediol)等,香料可以为人工香料等。
此外,在本发明的一实施形态中,化妆料组合物可以含有水溶性维生素、油溶性维生素、高分子肽、高分子多醣、神经鞘脂类以及海藻汁而成的组中的组合物。作为除此之外可以添加的调配成分,可以举出油脂成分、保湿剂、润滑剂(emollients)、表面活性剂、有机和无机颜料、有机粉体、紫外线吸收剂、防腐剂、杀菌剂、抗氧化剂、植物提取物、pH调节剂、乙醇、色素、香料、血液循环促进剂、凉感剂、止汗剂、净化水等。
另外,除此之外可添加的调配成分不限于此,所述任意成分也可以在不破坏本发明的目的以及效果的范围内进行调配。
进一步地,根据一实现例的化妆料组合物,如上所述,不仅可以作为药学组合物使用,还可以作为保健食品使用。例如,可以容易作为食品的主原料、副原料、食品添加剂、功能性食品或者饮料使用。
所述“食品”是指含有一种或者其以上的营养素的天然物质或者加工品,优选为,是指经过某种程度的加工工序,成为可以直接食用的状态,作为通常的含义,是指包含食品、食品添加剂、功能性食品以及饮料全部。
作为可以添加所述食品用组合物的食品,例如具有各种食品类、饮料、口香糖、茶、维生素复合物、功能性食品。进一步地,包括特殊营养食品(例如,配方奶粉、婴、幼儿食品等)、肉制品、鱼肉制品、豆腐类、凉粉类、面类(例如,拉面类、面条类等)、面包类、健康辅助食品、调味食品(例如,酱油、大酱、辣椒酱、混合酱等)、酱汁类、饼干类(例如,快餐类)、糖果类、巧克力类、口香糖类、雪糕类、乳制品(例如,发酵乳、奶酪等)、其他加工食品、辣白菜、腌制食品(各种泡菜类、酱菜类)、饮料(例如,水果饮料、蔬菜饮料、豆乳类、发酵饮料类等)、天然调味料(例如,拉面调料包等),但不限于此。所述食品、饮料或者食品添加剂可以通过常规的制备方法制备。
另外,所述“功能性食品”或者“保健食品”是指在食品利用物理学、生物化学、生物工学上的方法等赋予附加价值以使该食品的功能在特定目的中起作用、表现的食品群,或者设计为使食品组分所具有的与调节生物防御节律、防止疾病和疾病恢复等有关的体内调节功能对生物充分进行表达,并进行加工的食品,具体可以为保健食品。所述功能性食品可以包括食品学上可接受的食品辅助添加剂,可以进一步包括功能性食品的制备中通常使用的合适的载体、赋形剂以及稀释剂。
所述保健食品的种类不限于此,可以为粉末、颗粒、片剂、胶囊或者饮料形态。
其他一实现例提供一种个体的皮肤美白方法,其包括向个体给药所述组合物的步骤。对于所述组合物,如上所述。
所述给药可以按照本领域中常规的方法给药。所述给药可以通过例如静脉内、肌肉内、口服、经皮(transdermal)、粘膜、鼻内(intranasal)、气管内(intratracheal)或者皮下给药之类的途径,通过任意手段直接向个体给药。所述给药可以是全身或者局部给药。所述给药可以是向存在皮肤老化的部位局部给药。所述给药可以是例如通过涂敷给药。所述涂敷是指通过合适的方法,向个体的皮肤接触所述组合物的所有方法,由此可以使所述组合物吸收至皮肤内部。
所述个体可以为哺乳动物,例如人、牛、马、猪、狗、羊、山羊或者猫。所述个体可以为需要改善、延迟或者抑制皮肤色素沉着过度的个体。所述个体可以为需要抑制细胞凋亡、抑制黑色素生成酶(Tyrosinase)的蛋白质表达或者增加抗氧化活性的个体。
所述给药可以是向每个个体每日给药根据一实现例的组合物0.01mg至10000mg、0.1mg至1000mg,例如0.1mg至500mg、0.1mg至100mg、0.1mg至50mg、0.1mg至25mg、1mg至1,000mg、1mg至500mg、1mg至100mg、1mg至50mg、1mg至25mg、5mg至1,000mg、5mg至500mg、5mg至100mg、5mg至50mg、5mg至25mg、10mg至1,000mg、10mg至500mg、10mg至100mg、10mg至50mg或者10mg至25mg。或者,所述给药可以是将根据一实现例的组合物以0.01至25μM、0.05至5μM、0.075至3.75μM、0.1至2.5μM、0.15至2μM、0.25至1.5μM、0.4至1.25μM、0.5至1.2μM或者0.75至1.15μM的浓度(使用浓度;working concentration)作用的给药。
针对本发明的优点、特征以及达成其的方法,参考详细后述的实施例会变明确。以下,通过实施例详细说明本申请的发明。然而,所述实施例是用于具体说明本发明,本发明的范围不受所述实施例的限定。
(实施例)
试验例1:在人类正常黑色素生成细胞中阻碍黑色素生成酶(酪氨酸酶,TRP2)的蛋
白质表达的增加的确认
在6-孔板(well plate)铺上人类正常黑色素生成细胞(melanocyte),次日换成没有PMA(丙二醇甲醚醋酸酯)的黑色素生成细胞培养基。此时,处理各自(以组合物总量为基准)以0nM、0.001nM、0.01nM、0.1nM、1nM、10nM以及100nM含有由以下化学式1-1表示的化合物(开曼化学公司;Cayman chemical)的组合物。培养4日之后,在各个孔(well)利用裂解液(lysis buffer)裂解细胞之后,分离蛋白质。在经分离的蛋白质中,在作为黑色素生成酶的酪氨酸酶(tyrosinase)、TRP2(酪氨酸酶相关蛋白2;tyrosinase related protein 2)活用特异抗体,测定相对的蛋白质表达量。作为对照组,确认GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)的表达量,在图1至图3中示出该结果。
【化学式1-1】
由图1至图3可以确认到,当含有由所述化学式1-1表示的化合物时,与痤疮诱导菌(C.acnes)无关而在人类正常黑色素生成细胞中有效阻碍黑色素生成酶(酪氨酸酶、TRP2)的蛋白质表达的增加。尤其是,可以确认到,以与由所述化学式1-1表示的化合物浓度依赖性方式,有效阻碍酪氨酸酶的蛋白质表达的增加。
试验例2:阻碍由色素沉着诱导剂(Pigmentation inducer)(α-MSH)引起的黑色素
生成酶(酪氨酸酶、TRP2)的蛋白质表达的增加的确认
在6-孔板(well plate)铺上人类正常黑色素生成细胞(melanocyte),次日换成没有PMA的黑色素生成细胞培养基。此时,与500nM的色素沉着诱导剂(Pigmentationinducer)(α-MSH)一起,处理各自(以组合物总量为基准)以0nM、0.001nM、0.01nM、0.1nM、1nM、10nM以及100nM含有由以下化学式1-1表示的化合物(开曼化学公司;Caymanchemical)的组合物。培养4日之后,在各个孔(well)利用裂解液(lysis buffer)裂解细胞之后,分离蛋白质。在经分离的蛋白质中,在作为黑色素生成酶的酪氨酸酶(tyrosinase)、TRP2(酪氨酸酶相关蛋白2;tyrosinase related protein 2)活用特异抗体,测定相对的蛋白质表达量。作为对照组,确认GAPDH的表达量,在图4至图6中示出该结果。
【化学式1-1】
由图4至图6可以确认到,当含有由所述化学式1-1表示的化合物时,有效阻碍由色素沉着诱导剂(Pigmentation inducer)(α-MSH)引起的黑色素生成酶(酪氨酸酶、TRP2)的蛋白质表达的增加。
试验例3:阻碍由色素沉着诱导剂(Pigmentation inducer)(IBMX)引起的黑色素
生成酶(酪氨酸酶、TRP2)的蛋白质表达的增加的确认
在6-孔板(well plate)铺上人类正常黑色素生成细胞(melanocyte),次日换成没有PMA的黑色素生成细胞培养基。此时,与100μM的色素沉着诱导剂(Pigmentationinducer)(IBMX)一起,处理各自(以组合物总量为基准)以0nM、0.001nM、0.01nM、0.1nM、1nM、10nM以及100nM含有由以下化学式1-1表示的化合物(开曼化学公司;Caymanchemical)的组合物。培养4日之后,在各个孔(well)利用裂解液(lysis buffer)裂解细胞之后,分离蛋白质。在经分离的蛋白质中,在作为黑色素生成酶的酪氨酸酶(tyrosinase)、TRP2(酪氨酸酶相关蛋白2;tyrosinase related protein2)活用特异抗体,测定相对的蛋白质表达量。作为对照组,确认GAPDH的表达量,在图7至图9中示出该结果。
【化学式1-1】
由图7至图9可以确认到,当含有由所述化学式1-1表示的化合物时,有效阻碍由色素沉着诱导剂(Pigmentation inducer)(IBMX)引起的黑色素生成酶(酪氨酸酶、TRP2)的蛋白质表达的增加。
试验例4:痤疮诱导菌(C.acnes)是否增加黑色素生成酶(TRP1、TRP2)的蛋白质表
达的确认
在BHI培养基接种痤疮丙酸杆菌(Cutibacterium acnes)(C.acnes,ATCC 6919)之后,在37℃的厌氧状态下,培养72至96小时,回收培养液。将回收的培养液进行离心分离(在4℃、5000xg下10分钟),沉淀细菌。将沉淀的细菌利用磷酸盐缓冲生理盐水(phosphate-buffered saline;PBS)清洗两次之后,制成C.acnes活菌储备溶液(stock)以使最终浓度为1010CFU/ml,并在-80℃下进行冷冻保存。在6-孔板(well plate)铺上人类正常黑色素生成细胞(melanocyte),次日换成没有PMA的黑色素生成细胞培养基。此时,处理104、105、106、107CFU/ml的C.acnes活菌。培养2日之后,在各个孔(well)利用裂解液(lysis buffer)裂解细胞之后,分离蛋白质。在经分离的蛋白质中,在作为黑色素生成酶的TRP1(酪氨酸酶相关蛋白1;tyrosinase related protein 1)、TRP2(酪氨酸酶相关蛋白2;tyrosinase relatedprotein 2)活用特异抗体,测定相对的蛋白质表达量。作为对照组,确认GAPDH的表达量,在图10中示出该结果。
由图10可以确认到,痤疮诱导菌(C.acnes)在黑色素生成细胞(melanocyte)中增加黑色素生成酶(TRP1、TRP2)的蛋白质表达。
试验例5:阻碍由痤疮诱导菌(C.acnes)引起的黑色素生成酶(TRP1、TRP2)的蛋白
质表达的增加的确认
在6-孔板(well plate)铺上人类正常黑色素生成细胞(melanocyte),次日换成没有PMA的黑色素生成细胞培养基。此时,与107CFU/ml的C.acnes活菌一起,处理各自(以组合物总量为基准)以1nM、10nM以及100nM含有由以下化学式1-1表示的化合物(开曼化学公司;Cayman chemical)的组合物。培养2日之后,在各个孔(well)利用裂解液(lysis buffer)裂解细胞之后,分离蛋白质。在经分离的蛋白质中,在作为黑色素生成酶的TRP1(酪氨酸酶相关蛋白1;tyrosinase related protein 1)、TRP2(酪氨酸酶相关蛋白2;tyrosinaserelated protein 2)活用特异抗体,测定相对的蛋白质表达量。作为对照组,确认GAPDH的表达量,在图11以及图12中示出该结果。
【化学式1-1】
由图11以及图12可以确认到,当以1nM至100nM的浓度范围含有由所述化学式1-1表示的化合物时,有效阻碍由痤疮诱导菌(C.acnes)引起的黑色素生成酶(TRP1、TRP2)的蛋白质表达的增加。
以上详细说明了本发明的优选实施例,然而本发明的权利范围不限于此,利用权利要求书中所定义的本发明的基本概念的本领域技术人员的各种变形以及改良形态也属于本发明的权利范围。
Claims (15)
3.根据权利要求2所述的用途,其中:
所述R1以及R2各自独立为羟基;
所述R3为羧基。
4.根据权利要求2所述的用途,其中:
由所述化学式1表示的化合物相对于所述组合物总量,含有0.001nM至1μM的浓度。
5.根据权利要求4所述的用途,其中:
由所述化学式1表示的化合物相对于所述组合物总量,含有0.01nM至100nM的浓度。
8.根据权利要求1所述的用途,其中:
所述美白用组合物为化妆料组合物。
11.根据权利要求10所述的个体的皮肤美白方法,其中:
所述R1以及R2各自独立为羟基;
所述R3为羧基。
12.根据权利要求10所述的个体的皮肤美白方法,其中:
由所述化学式1表示的化合物相对于所述组合物总量,含有0.001nM至1μM的浓度。
13.根据权利要求12所述的个体的皮肤美白方法,其中:
由所述化学式1表示的化合物相对于所述组合物总量,含有0.01nM至100nM的浓度。
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