CN115399106B - 一种评价长绒棉耐Na2CO3性的方法 - Google Patents

一种评价长绒棉耐Na2CO3性的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN115399106B
CN115399106B CN202110589687.7A CN202110589687A CN115399106B CN 115399106 B CN115399106 B CN 115399106B CN 202110589687 A CN202110589687 A CN 202110589687A CN 115399106 B CN115399106 B CN 115399106B
Authority
CN
China
Prior art keywords
long
staple cotton
resistance
germination rate
stress
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202110589687.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN115399106A (zh
Inventor
叶武威
芮存
高文伟
范亚朋
张悦新
戴茂华
王琴琴
韩明格
陆许可
陈修贵
王德龙
王帅
郭丽雪
王俊娟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Cotton Research of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Original Assignee
Institute of Cotton Research of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Cotton Research of Chinese Academy of Agricultural Sciences filed Critical Institute of Cotton Research of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Priority to CN202110589687.7A priority Critical patent/CN115399106B/zh
Publication of CN115399106A publication Critical patent/CN115399106A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN115399106B publication Critical patent/CN115399106B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01CPLANTING; SOWING; FERTILISING
    • A01C1/00Apparatus, or methods of use thereof, for testing or treating seed, roots, or the like, prior to sowing or planting
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01CPLANTING; SOWING; FERTILISING
    • A01C1/00Apparatus, or methods of use thereof, for testing or treating seed, roots, or the like, prior to sowing or planting
    • A01C1/02Germinating apparatus; Determining germination capacity of seeds or the like
    • A01C1/025Testing seeds for determining their viability or germination capacity

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)

Abstract

本发明公开了一种评价待测长绒棉耐Na2CO3性的方法,包括如下步骤:(1)取脱绒的吉扎67种子或待测长绒棉种子,消毒,之后催芽,得到露白种子;(2)对所述露白种子进行Na2CO3胁迫处理和水处理,得到Na2CO3胁迫萌发率;(3)获得待测长绒棉的相对萌发率,根据待测长绒棉的相对萌发率判断耐Na2CO3级别。本发明采用胁迫萌发法对长绒棉种质进行耐Na2CO3性鉴定,鉴定周期为3天,周期短,并且不受外界气候条件限制,不需花费大量费用。该方法为筛选耐Na2CO3性长绒棉材料提供依据,而且为进一步研究耐Na2CO3性长绒棉种质材料提供便捷基础。本发明具有重要的应用价值。

Description

一种评价长绒棉耐Na2CO3性的方法
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种评价长绒棉耐Na2CO3性的方法。
背景技术
长绒棉又称海岛棉(Gossypium barbadense),不仅是一种重要的遗传材料,而且是盐碱地先锋作物,长绒棉以其耐盐碱性及优良的纤维品质著称。有关长绒棉的研究主要集中于盐胁迫,针对耐盐作用机制也取得了一定的进展。长绒棉耐碱性研究鲜有报道。
我国长绒棉种质资源丰富,有近1000份种质资源,为长绒棉耐盐性鉴定、筛选和培育提供了丰富的材料。
盐碱土是盐土碱土和各种盐化碱化土壤的总称,我国盐渍化土壤面积约为3.69×107hm2,占现有耕地的25%,主要分布于土壤蒸发量大、降水量稀少的干旱半干旱地区和滨海地区(孙璐[J].中国农业科学,2012,45(16):3265-3272.)。研究表明,当土壤的易溶盐含量超过0.3%时,就会造成土壤盐碱化,盐土以中性盐(如NaCl、Na2SO4)为主,碱土以碱性盐(如Na2CO3、NaHCO3)为主。土壤盐碱化一直是影响植物生长发育,严重限制农业生产的重要因素。由于各种因素综合作用,土壤退化及土壤盐渍化面积逐渐增大。因此,建立一种方便快速、适合大规模棉花材料耐Na2CO3鉴定的方法至关重要。
发明内容
本发明的目的是快速鉴定待测长绒棉耐Na2CO3性。
本发明首先保护一种评价待测长绒棉耐Na2CO3性的方法,可包括下述步骤:
(1)取脱绒的吉扎67种子,消毒,之后催芽,得到露白的吉扎67种子;
(2)对所述露白的吉扎67种子进行Na2CO3胁迫处理和水处理,得到吉扎67的Na2CO3胁迫萌发率;
(3)取脱绒的待测长绒棉种子,消毒,之后催芽,得到露白的待测长绒棉种子;
(4)对所述露白的待测长绒棉种子进行Na2CO3胁迫处理和水处理,得到待测长绒棉的Na2CO3胁迫萌发率;
(5)获得待测长绒棉的相对萌发率,并进行如下判断:如果相对萌发率为90.00%以上,待测长绒棉的耐Na2CO3性为高抗;如果相对萌发率为75.00%以上且小于89.99%,待测长绒棉的耐Na2CO3性为抗;如果相对萌发率为50.00%以上且小于74.99%,待测长绒棉的耐Na2CO3性为耐;如果相对萌发率小于50.00%,待测长绒棉的耐Na2CO3性为不耐;
相对萌发率=待测长绒棉的Na2CO3胁迫萌发率/吉扎67的Na2CO3胁迫萌发率×50%;
Na2CO3胁迫萌发率=Na2CO3胁迫处理萌发率/水处理萌发率×100%。
所述步骤(1)或步骤(3)中,脱绒可采用浓硫酸进行。
所述步骤(1)或步骤(3)中,消毒的方法可为先用乙醇水溶液浸泡、无菌水清洗,之后用双氧水浸泡、无菌水清洗。
所述步骤(1)或步骤(3)中,消毒的方法可为先用75%乙醇水溶液浸泡20-40s(如20-30s、30-40s、20s、30s或40s)、无菌水清洗,之后用30%双氧水浸泡4-5h(如4h、5h)、无菌水清洗。
所述步骤(1)或步骤(3)中,催芽的方法可为26-30℃(如26-28℃、28-30℃、26℃、28℃或30℃)暗培养10h以上(如10h或12h)。
所述步骤(2)或步骤(4)中,进行Na2CO3胁迫处理可为120-130mM(如120-125mM、125-130mM、120mM、125mM或130mM)Na2CO3处理2-4d(2-3d、3-4d、2d、3d或4d)。
上述任一所述的方法中,所述待测长绒棉可为吐75-193、65-3049-6、8704依、吐75-37、NMGB-11、NMGB-15、巴-5507、巴州-3244、吐77-55、吉扎31、洛赛雅(长)、吐75-238、墨-1413、抗77-65、新海5号、新海4号、海92-1、巴州-3761、73-14、海92-2、吉扎45、洛赛雅(0)、埃及棉9363、吉扎1号、比马1、8813依、新海2号、苏K202、吐79-713、巴66-284、新海29、新海35、65-3080-2、5904依、巴238、NMGB-3、5172弗、E24-3389、NMGB-7、吉扎47、NMGB-12、吐75-6、阿102、跃零1号、埃及棉424、巴州-3021、新海31、新海14、新海30、Pimas-3、DJ-07-136、巴-329、吐77-104、NMGB-2、塔海-901、NMGB-9、NMGB-14、新海21、海92-3、密努非、吉扎57、新海33、丰产2号、吉2、新海26、新海36、V9-2、新海27、海岛棉3、巴3119或MOC-1号。
上述任一所述方法在筛选长绒棉种质中的应用也属于本发明的保护范围。
上述应用中,所述长绒棉种质可为抗Na2CO3的长绒棉种质、高抗Na2CO3的长绒棉种质、不耐Na2CO3的长绒棉种质或耐Na2CO3的长绒棉种质。
上述任一所述方法在评价长绒棉种质耐Na2CO3性中的应用也属于本发明的保护范围。
上述任一所述耐Na2CO3性具体可为抗Na2CO3、高抗Na2CO3、不耐Na2CO3和耐Na2CO3
本发明采用胁迫萌发法对长绒棉种质进行耐Na2CO3性鉴定,鉴定周期为3天,周期短,并且不受外界气候条件限制,不需花费大量费用,建立了一种较为经济的、方便快速的长绒棉耐Na2CO3性鉴定方法。该方法为筛选耐Na2CO3性长绒棉材料提供依据,而且为进一步研究耐Na2CO3性长绒棉种质材料提供便捷基础。本发明具有重要的应用价值。
附图说明
图1为不同浓度Na2CO3处理对棉花种子萌发的影响。其中,a-g分别为无菌水、含25mMNa2CO3的无菌水溶液、含50mM Na2CO3的无菌水溶液、含75mM Na2CO3的无菌水溶液、含100mM Na2CO3的无菌水溶液、含125mM Na2CO3的无菌水溶液、含150mMNa2CO3的无菌水溶液对长绒棉种子萌发的影响,A—D依次为海92-2、新海2号、埃及棉424和NMGB-7。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述,给出的实施例仅为了阐明本发明,而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南,并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法,按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
本发明中所涉及的所有种质均来自于中国农业科学院棉花研究所,公众可从国家棉花种质资源中期库(中国农业科学院棉花研究所)获得。
实施例1、评价长绒棉种质材料的耐Na2CO3性的方法
一、长绒棉种子预处理
1、将长绒棉(海92-2、新海2号、埃及棉424或NMGB-7)种子用浓硫酸进行脱绒处理,之后清水冲洗干净,晾干。
2、挑选饱和、成熟度一致的长绒棉种子,先用75%(v/v)乙醇水溶液充分浸泡30s,无菌水清洗4-5次;之后用30%双氧水浸泡4-5h,无菌水清洗4-5次,得到无菌长绒棉种子。
3、将无菌长绒棉种子置于人工培养箱,28℃暗培养12h(目的为催芽),得到“露白”的长绒棉种子。
二、Na2CO3胁迫条件筛选
1、竖直双层滤纸法培养种子
将无菌滤纸平铺在无菌塑料盘子上,用待测溶液(无菌水、含25mM Na2CO3的无菌水溶液、含50mM Na2CO3的无菌水溶液、含75mM Na2CO3的无菌水溶液、含100mM Na2CO3的无菌水溶液、含125mM Na2CO3的无菌水溶液或含150mM Na2CO3的无菌水溶液)浸湿滤纸,将10粒大小一致的、“露白”的长绒棉种子生长点向同一个方向摆放在滤纸上,纵向间隔5cm,沿种子位置横向卷起滤纸,将种子卷在滤纸中间,并继续沿着种子位置横向卷起滤纸,使滤纸形成直筒状。保持根尖向下,将直筒状滤纸竖直放在烧杯中,烧杯底部加入适量待测溶液,保持滤纸始终湿润。
2、完成步骤1后,将所述烧杯放入人工培养箱,28℃、黑暗培养3d,观察种子萌发情况。
实验重复三次,观察结果。其中一次实验结果见图1。
结果表明,用含125mM Na2CO3的无菌水溶液处理3d时长绒棉种子萌发明显受到抑制,萌发率显著下降,萌发胚根受害严重。因此,选择含125mM Na2CO3的无菌水溶液处理3d作为Na2CO3胁迫处理条件,调查萌发率作为筛选的指标。
三、评价72份长绒棉种质材料的耐Na2CO3
共涵盖72份长绒棉种质材料,具体名称见表1。
表1
1、长绒棉种子预处理
每份长绒棉种质材料进行如下实验:将步骤一中的长绒棉替换为长绒棉种质材料,其它步骤均不变,得到“露白”的长绒棉种子。
2、Na2CO3胁迫
每份长绒棉种质材料进行如下实验:
A、实验组
(1)将无菌滤纸平铺在无菌塑料盘子上,用含125mM Na2CO3的无菌水溶液浸湿滤纸,将10粒大小一致的、“露白”的长绒棉种子生长点向同一个方向摆放在滤纸上,纵向间隔5cm,沿种子位置横向卷起滤纸,将种子卷在滤纸中间,并继续沿着种子位置横向卷起滤纸,使滤纸形成直筒状。保持根尖向下,将直筒状滤纸竖直放在烧杯中,烧杯底部加入适量含125mM Na2CO3的无菌水溶液,保持滤纸始终湿润。
(2)完成步骤(1)后,将所述烧杯放入人工培养箱,28℃、黑暗培养3d,统计种子萌发率。
B、对照组
将A中的含125mM Na2CO3的无菌水溶液替换为无菌水,其它步骤均不变,作为对照。
实验重复三次。统计结果见表2。
表2
3、对步骤2的数据进行方差分析。
分析结果见表3。结果表明,区组间差异不显著,说明三个区组间重复性较好;处理间差异极显著,说明Na2CO3胁迫处理对种子萌发率存在显著的抑制作用;品种×处理间互作存在极显著差异性,说明不同品种间在耐Na2CO3性上存在差异。
表3
4、根据步骤2的数据计算平均值,得到每个长绒棉种质材料的Na2CO3胁迫萌发率(Na2CO3胁迫萌发率=实验组萌发率/对照组萌发率×100%),从高到低排序。
结果见表4。
表4
5、鉴定结果评价
(1)根据步骤4的结果,将72份长绒棉种质材料中耐Na2CO3性最强的吉扎67作为耐Na2CO3性鉴定的对照材料,计算各个长绒棉种质材料的相对萌发率(相对萌发率=长绒棉种质材料的Na2CO3胁迫萌发率/对照材料的Na2CO3胁迫萌发率×50%)。
(2)根据相对萌发率划分耐Na2CO3级别,,具体标准如下:如果相对萌发率为90.00%以上,耐Na2CO3级别为高抗;如果相对萌发率为75.00%以上且小于89.99%,耐Na2CO3级别为抗;如果相对萌发率为50.00%以上且小于74.99%,耐Na2CO3级别为耐;如果相对萌发率小于50.00%,耐Na2CO3级别为不耐。
72份长绒棉种质材料耐Na2CO3级别的结果见表5。
表5
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说,在不脱离本发明的宗旨和范围,以及无需进行不必要的实验情况下,可在等同参数、浓度和条件下,在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例,应该理解为,可以对本发明作进一步的改进。总之,按本发明的原理,本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进,包括脱离了本申请中已公开范围,而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围,可以进行一些基本特征的应用。

Claims (7)

1.一种评价待测长绒棉耐Na2CO3性的方法,包括下述步骤:
(1)取脱绒的吉扎67种子,消毒,之后催芽,得到露白的吉扎67种子;
(2)对所述露白的吉扎67种子进行Na2CO3胁迫处理和水处理,得到吉扎67的Na2CO3胁迫萌发率;
(3)取脱绒的待测长绒棉种子,消毒,之后催芽,得到露白的待测长绒棉种子;
(4)对所述露白的待测长绒棉种子进行Na2CO3胁迫处理和水处理,得到待测长绒棉的Na2CO3胁迫萌发率;
(5)获得待测长绒棉的相对萌发率,并进行如下判断:如果相对萌发率为90.00%以上,待测长绒棉的耐Na2CO3性为高抗;如果相对萌发率为75.00%以上且小于89.99%,待测长绒棉的耐Na2CO3性为抗;如果相对萌发率为50.00%以上且小于74.99%,待测长绒棉的耐Na2CO3性为耐;如果相对萌发率小于50.00%,待测长绒棉的耐Na2CO3性为不耐;
相对萌发率=待测长绒棉的Na2CO3胁迫萌发率/吉扎67的Na2CO3胁迫萌发率×50%;
Na2CO3胁迫萌发率=Na2CO3胁迫处理萌发率/水处理萌发率×100%;
所述步骤(2)或步骤(4)中,进行Na2CO3胁迫处理为125mMNa2CO3处理3d。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤(1)或步骤(3)中,脱绒采用浓硫酸进行。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤(1)或步骤(3)中,消毒的方法为先用乙醇水溶液浸泡、无菌水清洗,之后用双氧水浸泡、无菌水清洗。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤(1)或步骤(3)中,消毒的方法为先用75%乙醇水溶液浸泡20-40s、无菌水清洗,之后用30%双氧水浸泡4-5h、无菌水清洗。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述步骤(1)或步骤(3)中,催芽的方法为26-30℃暗培养10h以上。
6.权利要求1至5任一所述方法在筛选长绒棉种质中的应用;
所述长绒棉种质为抗Na2CO3的长绒棉种质、高抗Na2CO3的长绒棉种质、不耐Na2CO3的长绒棉种质或耐Na2CO3的长绒棉种质。
7.权利要求1至5任一所述方法在评价长绒棉种质耐Na2CO3性中的应用。
CN202110589687.7A 2021-05-28 2021-05-28 一种评价长绒棉耐Na2CO3性的方法 Active CN115399106B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110589687.7A CN115399106B (zh) 2021-05-28 2021-05-28 一种评价长绒棉耐Na2CO3性的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110589687.7A CN115399106B (zh) 2021-05-28 2021-05-28 一种评价长绒棉耐Na2CO3性的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN115399106A CN115399106A (zh) 2022-11-29
CN115399106B true CN115399106B (zh) 2023-08-11

Family

ID=84155577

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110589687.7A Active CN115399106B (zh) 2021-05-28 2021-05-28 一种评价长绒棉耐Na2CO3性的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN115399106B (zh)

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2181240C1 (ru) * 2001-01-25 2002-04-20 Пензенская государственная сельскохозяйственная академия Способ оценки солеустойчивости растений
JP2009055832A (ja) * 2007-08-31 2009-03-19 Kao Corp 植物ストレス耐性付与方法
CN107409534A (zh) * 2017-09-08 2017-12-01 中国农业科学院棉花研究所 一种棉花耐碱性的鉴定方法
CN107607700A (zh) * 2017-09-08 2018-01-19 中国农业科学院棉花研究所 一种棉花耐镉性的鉴定方法
CN110226382A (zh) * 2019-05-20 2019-09-13 湖北省农业科学院经济作物研究所 自然海水胁迫棉花种子萌发期耐盐鉴定方法
CN111855920A (zh) * 2020-08-05 2020-10-30 中国农业科学院棉花研究所 一种鉴定棉花受碱胁迫程度的方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2181240C1 (ru) * 2001-01-25 2002-04-20 Пензенская государственная сельскохозяйственная академия Способ оценки солеустойчивости растений
JP2009055832A (ja) * 2007-08-31 2009-03-19 Kao Corp 植物ストレス耐性付与方法
CN107409534A (zh) * 2017-09-08 2017-12-01 中国农业科学院棉花研究所 一种棉花耐碱性的鉴定方法
CN107607700A (zh) * 2017-09-08 2018-01-19 中国农业科学院棉花研究所 一种棉花耐镉性的鉴定方法
CN110226382A (zh) * 2019-05-20 2019-09-13 湖北省农业科学院经济作物研究所 自然海水胁迫棉花种子萌发期耐盐鉴定方法
CN111855920A (zh) * 2020-08-05 2020-10-30 中国农业科学院棉花研究所 一种鉴定棉花受碱胁迫程度的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
不同盐碱胁迫对棉花种子萌发的影响;李双男等;《种子》;第37卷(第1期);第38-45页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN115399106A (zh) 2022-11-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103503737B (zh) 一种梨树腐烂病抗性鉴定的方法
CN103340150B (zh) 一种甲基磺酸乙酯诱变处理麻疯树种子的方法
CN103053411A (zh) 一种筛选耐旱性转基因玉米的方法
Wang et al. Effects of biodegradable films on melon quality and substrate environment in solar greenhouse
CN111793567B (zh) 胶膜菌科真菌及其促进白旗兜兰种子萌发形成幼苗的应用
CN106035059A (zh) 一种人工合成抗根肿病甘蓝型油菜新材料的方法
CN102517376A (zh) 一种桑树抗青枯病能力鉴定方法
CN109463221B (zh) 筛选耐旱甘蓝型油菜品种的方法
CN107409534B (zh) 一种棉花耐碱性的鉴定方法
CN103782908A (zh) 一种籼粳杂交水稻花药培养方法
CN115399106B (zh) 一种评价长绒棉耐Na2CO3性的方法
CN107607700B (zh) 一种棉花耐镉性的鉴定方法
CN1413448A (zh) 一种抗碱性水稻育种材料的快速筛选方法
CN102876584A (zh) 炭角菌菌株及其用途
CN101864377B (zh) 防治梨枯梢病害的生防菌株sm16
CN104429933B (zh) 一种筛选高抗盐碱半野生棉材料的方法
CN103098700A (zh) 棉花胞质雄性不育系选育方法
CN1223261C (zh) 魔芋试管芋快速繁殖方法
CN102715009B (zh) 高浓度co2条件下的黄连木扦插繁殖方法
CN103931432A (zh) 一种茄子黄萎病的接种方法
CN113061639A (zh) 一种马铃薯黄萎病病原菌致病性测定方法
CN114292769A (zh) 耐盐碱番茄叶内生菌、发酵液、制备方法及应用
YU et al. Analysis of salinity-tolerance and screening evaluation indicators to salinity-tolerance in Medicago sativa seedlings
CN106105727B (zh) 半野生棉萌发期钠盐抗性的鉴定方法
CN112021178A (zh) 一种利用多壁碳纳米管促进桫椤孢子萌发的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant