CN115356405A - 一种药物成分谱效关联特征解析方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物谱效关联分析技术领域，尤其涉及一种药物成分谱效关联特征解析方法。其包括以下步骤：将药物样本所含药物组分分散制备若干基础样，由基础样混合设计制备若干个试验样；对试验样进行药效试验和HPLC或/和GC分析，获得药效试验数据、HPLC或/和GC分析数据；将所得到的药效试验数据、HPLC或/和GC分析数据进行相关性分析，得到不同共有峰对药物药效的影响系数，完成药物成分谱效关联解析。本发明解析方法可以准确、高效地识别药物复杂组成中各组分对整体药效影响的差异，为阐明药物药效物质基础、中成药标准提升、中药质量控制和中药新药开发提供重要支撑。

Description

一种药物成分谱效关联特征解析方法

技术领域

本发明涉及药物谱效关联分析技术领域，尤其涉及一种药物成分谱效关联特征解析方法。

背景技术

药物成分-药效关联特征解析，是中药及其他组成复杂的天然药物在研究开发过程中都面临的一致要求。明晰复杂组成中各组分对整体药效影响的特征差异，是保障中药及其他天然药物产品安全、有效、质量可控，提高产品开发效率的关键技术问题。

作为天然药物的典型代表，中药药效物质基础解析技术体系的构建，不仅关系中药现代化发展，而且能够为天然药物更深层次研究和开发利用提供重要的技术支撑。中药药效物质基础解析强调对中医药整体观的全面认识，创新技术路径，从认识中药复杂体系成分谱效关联特征入手，实现中药成分-药效关联特征和药效物质基础解析的工作目标。

中药药效物质基础研究的目的在于：以现代分析手段(包括物理学、化学、生物学、微生物学和基因工程)和药理学为基础，从认识中药复杂体系成分谱效关联特征入手，阐明中药复杂组成中所有成分与整体药效的关联性，进而揭示中药复方配伍规律、优化处方组成、改进制剂工艺、提高中药质量标准、开发创新药物，实现中药的现代化和国际化。

中药成分谱效关联特征解析，就是要阐明中药(药材、饮片、中药配方颗粒、中药复方、中成药、有效分离部中药等)所有化学成分与中药整体药效之间的相互关系。目前在认识和技术方法层面存在重大缺陷，解析方法往往忽略了各中药组分之间的协同或拮抗等作用，以及制备工艺等多种因素对药效作用的影响，孤立的评价单一组分对整体药效的影响，从而无法从现代科学的角度，充分反映中药的药效本质，解析结论无法得到广泛认同，制约了中药的发展：

具体地，

①“药效组分”、“指标成分”的界定和认识不完整，非整体观评价组分药效，对中药微量成分及多组分共存、组分间拮抗协同作用的影响关注不够，解析结果背离中医药的特色；

②对谱效关联解析工作中试验样制备顶层设计的重要性认识不足，关联分析试验样本选择和制备方法不当，不能保证中药成分尽可能提出、中药所有成分在各试验样中都有体现、任一成分以不同分布量在各试验样中差异化合理分布的样本制备基本要求，导致试验样共有峰数量有限，严重影响谱效关联分析结果的完整性、可靠性和准确性；

③无法定量区分中药复杂组成中所有成分增强或减弱中药药效影响力的差异特征，特征评价依据不充分、不可靠、不全面、有遗漏，解析结果对阐明中药药效物质基础、中药质量评价与控制、中药新药开发等产业技术瓶颈问题的破解，应用价值不高。

在公开号为CN110187020A的专利中公开了基于治疗慢性萎缩性胃炎谱效关系的黄芪成分评价方法。其通过不同极性部位与白芍、甘草、桂枝、生姜、大枣和饴糖六味药材混合，得到七种黄芪不同极性部位配伍的黄芪建中汤，所找出的共有峰对应的大部分化学成分为白芍、甘草、桂枝、生姜、大枣和饴糖六味药材，以及少量的黄芪不同极性部位所对应的共有峰，而这些不同极性部位找出的共有峰相应的组分，不包括黄芪与白芍、甘草、桂枝、生姜、大枣等药材共煎相互作用形成的组分，导致黄芪药效成分的评价不全面，科学依据不充分。

发明内容

(一)要解决的技术问题

鉴于现有技术的上述缺点、不足，本发明提供一种药物成分谱效关联特征解析方法，其从全新的角度认识含有复杂组分的药物，组分间协同、拮抗整体形成药效的特点，于复杂共存体明晰不同组分对药物整体药效的影响。重点解决研究路径设计、试验样制备、体现药物所有成分的试验样共有峰识别、谱效关联特征分析、直观反映中药所有成分对药物药效影响能力的差异特征、由色谱峰认识中药药效物质基础的技术手段等关键技术问题。

(二)技术方案

为了达到上述目的，本发明采用的主要技术方案包括：

本发明提供一种药物成分谱效关联特征解析方法，其包括以下步骤：

S1将药物样本所含药物组分分散制备若干基础样，由基础样混合设计制备若干个试验样；

S2对试验样进行药效试验和HPLC或/和GC分析，获得药效试验数据、HPLC或/和GC分析数据；

S3将所得到的药效试验数据、HPLC或/和GC分析数据进行相关性分析，得到不同共有峰对药物药效的影响系数，完成药物成分谱效关联解析。

可选地，若干基础样的制备可根据药物样本特点及利用和关注目标组分的不同，采取差异化的提取方法的组合设计。

可选地，将药物所含药物组分以不同的分布特征分散分布于若干基础样中。

可选地，步骤S1中，以药物样本中最多种的药物组分被提取的方法制得若干基础样。

可选地，根据不同的药物特性，筛选一种或两种以上最优的提取方法的组合使所述药物样本中最多种的药物组分被提出而分散至若干基础样。

可选地，上述任一方案中所述分散制备若干基础样的方法包括药物的水煎煮、不同极性溶剂浸提、水蒸汽蒸馏、不同浓度乙醇渗漉、超临界提取、不同极性溶剂萃取、乙醇醇沉中一种或两种以上提取方法的的组合。

可选地，HPLC或/和GC分析是以全部基础样的混合制备样进行HPLC或/和GC分析色谱条件的预试验，以出峰最多、实现色谱峰分离的色谱条件，作为试验样HPLC或/和GC分析色谱条件。

可选地，上述任一方案中的HPLC或/和GC分析数据包括比对各试验样HPLC或/和GC色谱图得到的共有峰进行峰面积归一化处理，获得试验样各共有峰归一化峰面积数据。

可选地，上述任一方案中的所述药效评价数据和所述HPLC或/和GC分析数据进行相关分析，得到以药物HPLC或/和GC分析色谱峰及相应影响系数构建的谱效特征表或/和谱效关联图。

可选地，上述任一方案中的所述药物包括天然药物、加工药物，所述天然药物包括植物药、动物药、微生物制药；所述药物优选为中药。

(三)有益效果

本发明的有益效果是：

1.本发明提供的一种药物成分谱效关联特征解析方法，以独特的基础样、试验样的设计，可以从含有复杂组分的药物如天然药物，充分考虑组分间协同、拮抗整体形成药效的特点，于复杂共存体明晰不同组分对药物整体药效的影响；

其中，以独特的基础样、试验样制备方案设计理念，使药物所含有的复杂成分能够分散在基础样中；通过试验样，使基础样中的每一个成分能够以不同的变化规律分布在每个试验样中；为试验样HPLC色谱图全成分比对识别及谱效关联特征解析提供充分、必要的基础条件。通过试验样的药效分析数据和HPLC或GC分析数据就能得到不同药物组分和药物药效的影响系数，完成谱效关联解析。

2.本发明注重药物研究策略的优化和复杂系统研究方法学的变革，将成分药效关联解析工作中的化学分离与生物活性评价有效结合，通过模糊识别、逐步清晰、目标确认，以药物全成分谱效关联特征解析为突破口，全面认识组成复杂的天然药物所有成分对整体效应存在的差异化影响，解析结果能够为药物药效物质基础的全面阐释提供重要技术支撑。

3.本发明以整体观的视角认识药物所含成分于药物复杂共存体中的药效作用，关注成分间协同、拮抗作用对整体药效的影响，谱效关联特征解析方法充分体现药物的特点，为阐明药物的有效性、安全性，解决药物复杂体系研究关键科学问题，提供了一种重要的技术思路、方法和手段。

4.实现药物样本所有组分(尽可能多)谱效关联特征的模糊识别，药物谱效关联特征解析工作目标明确，重视微量成分对药物整体效应的影响，识别结果可以精准确认目标重点关注成分，并为实施目标重点关注成分的分离、纯化、鉴定，提供简便、高效的识别跟踪技术手段。

5.本发明提出的谱效关联特征表、谱效关联图，能够定量区分并直观、清晰的呈现药物复杂组成中所有成分(色谱峰)对药物药效影响力的差异特征，工作目标贴近产业需求，解析结论能够为阐明药物药效物质基础、药物质量评价、中成药标准提升、药物质量控制和药物新药开发提供重要的技术支撑。

附图说明

图1为本发明实施例2得到的(色谱峰)对橄榄晶冲剂整体药效影响系数大小顺序排列的谱效关联图。

具体实施方式

为了更好的解释本发明，以便于理解，下面结合附图，通过具体实施方式，对本发明作详细描述。

本发明实施方式其为解决药物特别是含有复杂成分甚至未知成分的天然药物比如中药，在谱效关联特征解析中无法对复杂的成分甚至未知成分进行分析；无法明晰成分间协同、拮抗作用对整体药效的影响；提出的一种药物成分谱效关联特征解析方法，其巧妙的通过含有复杂药物组分的基础样、以药物组分不同的分配比例制成不同的试验样，并通过试验样进行药物分析和HPLC或/和GC分析数据进行相关性分析，完成谱效关联特征解析。实现将所有的复杂组分进行综合评价，也避免了现有技术中将单一组分分离进行解析，导致的不全面的问题。

具体的，本发明实施方式中的药物成分谱效关联特征解析方法，其包括以下步骤：

S1将药物样本所含药物组分分散制备若干基础样，由基础样混合设计制备若干个试验样；

S2对试验样进行药效试验和HPLC或/和GC分析，获得药效试验数据、HPLC或/和GC分析数据；

S3将所得到的药效试验数据、HPLC或/和GC分析数据进行相关性分析，得到不同共有峰对药物药效的影响系数，完成药物成分谱效关联解析。

其中，药物样本根据药物不同加工、利用及生产的特点制得。应该充分考虑生产辅料对成分谱效关联特征解析的干扰，正确选择制备方法，制备满足解析要求的药物样本。药物样本可以是药物加工过程中未添加生产辅料的加工产物。

药物样本的制备方法中应该关注低极性成分和挥发性成分，防止低极性成分和挥发性成分的损耗。

{基础样和试验样}

步骤S1中的基础样和试验样是本发明实施方式关键点之一，基础样可以将药物样本中的复杂药物组分提出，基础样的设计可以根据药物的不同加工特性，从药物样本中提取制得基础样，优选为差异化提取，差异化提取可以是所采用的提取技术不同，也可以是相同的提取技术不同的参数从而得到不同的基础样。基础样设置优选为6个以上。

不同的基础样是指药物所含药物组分以不同的分布特征分散分布于若干基础样中。不同的分布特征可以是但不仅限于相同组分不同的质量浓度、不同的组分。

为了使药物样本中复杂的药物成分尽可能的均被提出并分散至基础样中，根据药物样本的特性，选择最优的提取方法或多种提取方法的组合，使药物样本中最多种的药物组分被提取至若干个基础样中。

可以是根据不同的药物特性，筛选一种或两种以上最优的提取方法的组合使所述药物样本中最多种的药物组分被提出而分散至若干基础样。提取方法的选择应同时考虑低极性分子和挥发性成分损失，以及考虑基础样中不包括药物生产过程中添加的生产辅料，提取方法可以是但不仅限于药物的水煎煮、不同极性溶剂浸提、水蒸汽蒸馏、不同浓度乙醇渗漉、超临界提取、不同极性溶剂萃取、乙醇醇沉中的一种或两种以上的组合。所采用的不同极性溶剂可以但不仅限于石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、甲醇、水。基础样制备所采用的差异化单元技术方法，还可以是但不仅限于索氏提取、超声提取、超临界提取。

若所述中药在实际使用时，是将中药原料进行煎煮得到煎煮液，则本发明实施方式中基础样可以采用上述得到的中药煎煮液。

若所述中药在实际使用时，是将中药原料进行冷水浸提得到冷水浸提液，则本发明实施方式中所采用的基础样可以为上述的冷水浸提液。

为可以更好的还原传统中药通过煎煮发生化学反应产生新的组分，以及组分之间对中药整体药效的协同作用，若某些特殊的中药原料不能通过高温煎煮，如三七粉，则应按照中药原料的特性进行冷水浸提得到的提取液作为本发明实施方式中的基础样。其它的特殊中药原料均可优选按照其药效发挥作用的实际情况进行提取。

其中，试验样是由所得到的不同的基础样通过混合配比制得，优选地，将不同的基础样经过预实验确定最佳的配比，制得不同的试验样，不同的试验样指的是试验样中所含组分的质量浓度不同。优选地，每个试验样中均包括有基础样中所出现的所有组分。

试验样设计优选为6各以上；优选地，试验样由6个以上的基础样按照不同质量配比混合得到6个以上的试验样，任一组分以不同分布量在各试验样中差异化分布，为使关联分析更完整、可靠，试验样设计为6个以上。

{HPLC或/和GC分析}

为了分析试验样中所含组分的特性，采用HPLC或/和GC分析获得试验样的HPLC或/和GC的分析色谱图。

HPLC或/和GC分析是以全部基础样的混合制备样进行HPLC或/和GC分析色谱条件的预试验，以出峰最多、实现色谱峰分离的色谱条件，作为试验样HPLC或/和GC分析色谱条件，获得相应地HPLC或/和GC分析色谱图。

对各试验样HPLC或/和GC分析色谱图进行比对分析，能够识别药物的全部组分，使谱效关联分析的结果更为全面和科学，使待评价产品的质量评价也更为科学和全面。

试验样HPLC或/和GC分析，为尽可能减少成分在紫外可见光区弱吸收以及HPLC或/和GC分析的局限，实现最大限度的全成分比对识别，辅以蒸发光散射检测器(ELSD)检测、质谱检测器检测，检视和修正HPLC或/和GC分析出现的不同现象；HPLC或/和GC分析方法不是一定的，还可以是其它任何可以分离和分析试验样中组分的方法。

为了便于后续的分析，比对各试验样HPLC或/和GC色谱图得到的共有峰进行峰面积归一化处理，获得试验样各共有峰归一化峰面积数据。

具体的，对混合设计试验样HPLC分析色谱图进行色谱峰的比对识别，确认各系列样共有峰、共有峰峰面积，并对共有峰峰面积进行归一化处理，获取不同组分(色谱峰)在试验样的相对分布量数据，包括：试验样各共有峰归一化峰面积数据。

{药效试验}

其中，所采用的药效试验可以但不仅限于动物试验，细胞试验、模式生物试验等一种或者一种以上的药效试验，以得到药效评价数据。

{相关性分析}

相关性分析可以采用采用数学分析方法和分析软件(为但不仅限于SPSS软件分析)，对混合设计的试验样药效评价数据与各试验样不同组分(色谱峰)相对分布量数据包括：试验样各共有峰归一化峰面积数据进行相关分析。

将药效评价数据和所述HPLC或/和GC分析数据进行相关分析，优选地，将试验样药效试验所得到的各试验样药效评价数据，与试验样共有峰归一化峰面积进行相关性分析，得到不同中药组分(色谱峰)对药物药效的影响系数。由峰号、出峰时间及不同中药组分(色谱峰)对药物药效的影响系数构建成分(色谱峰)—药效关联特征表；依色谱峰影响系数大小顺序构建谱效关联图。

{谱效关联表/图分析}

分析谱效关联图，定量明晰药物所有成分对整体药效影响的差异特征，确定药物药效物质基础阐明、药物质量评价、中成药二次开发、药物新药开发等工作中，需要予以关注的目标组分，并给出目标组分分离纯化过程HPLC或/和GC跟踪的方法和条件，完成药物成分谱效关联特征解析。

本发明实施方式提出的谱效关联特征表、谱效关联图能够定量区分并直观、清晰的呈现天然药物，如中药复杂组成中所有成分(色谱峰)对中药药效影响力的差异特征，工作目标贴近产业需求，解析结论能够为阐明药物特别是中药药效物质基础、药物特别是中药质量评价、中成药标准提升、药物特别是中药质量控制和药物特别是中药新药开发提供重要的技术支撑。

本发明可以根据谱效特征表，明晰在阐明中药药效物质基础、中药质量评价与控制、中药新药开发等不同研究领域应予关注的目标成分(色谱峰)、出峰时间及分布特征，为指导各重点关注目标成分的分离、纯化、制备和鉴定，提供选择适宜样本和HPLC跟踪的技术方案和条件，破解中药产业发展的瓶颈问题。

{影响系数}

本发明实施方式谱效关联表/图分析中得到的关于每个共有峰所对应组分的影响系数，一般地，影响系数为负值，说明相应组分对药物整体的药效作用为减弱作用，绝对数值越高，减弱作用越强；影响系数为正值，说明相应组分对药物整体的药效作用为增强作用，绝对数值越高，增强作用越强。

{适用范围}

本发明实施方式中的药物包括天然药物、加工药物，所述天然药物包括植物药、动物药、微生物制药；所述药物优选为中药。

中药可以是但不仅限于一种或一种以上的中药原料、原料组合物及加工产物。包括中药材、中药饮片、中药复方、中成药、中药配方颗粒、有效部位中药。

本发明实施方式的方法还特别适用于其它的天然药物，包括但不仅限于欧洲植物药、日本汉方药、韩国韩药和泰国的青草膏。

本发明实施方式所列举的初始样和基础样的制备，着眼于将药物组分、以及加工过程产生的组分等复杂组分，全部分散至初始样和基础样中，可以将药物中绝大部分的组分，包括低极性、易挥发和微量组分获取，本发明实施方式也包括以穷尽现有技术或现有技术的组合将所述药物全部的组分提出至初始样和基础样中。

为了更好的理解上述技术方案，下面将参照附图更详细地描述本发明的示例性实施例。虽然附图中显示了本发明的示例性实施例，然而应当理解，可以以各种形式实现本发明而不应被这里阐述的实施例所限制。相反，提供这些实施例是为了能够更清楚、透彻地理解本发明，并且能够将本发明的范围完整的传达给本领域的技术人员。

实施例1，中药成分谱效关联特征解析方法，具体的为：

S1基础样制备：以中药提取液作为初始样本，初始样本经多种不同极性溶剂顺序逐级萃取、沉淀，制得若干基础样；或根据研究中药样本的特点，采用水蒸气蒸馏、不同极性溶剂逐级提取的技术方法组合，制得若干基础样，最大程度的将中药样本所含应予关注的成分提出，并以不同分布特征分散分布于不同基础样中；

其中，初始样本中不包括生产辅料，初始样中应该包括低极性成分和挥发性成分；

S2试验样制备：经混配比预试验，确定适宜的基础样混合比例，将若干基础样依不同比例混合，制得8～16个试验样，任一试验样都含有所有基础样，确保中药所有成分都能够在全部试验样中得到体现，各成分在试验样中满足差异分布的要求；

S3试验样药效评价：根据中药的特点，选择动物药效模型和评价方法，对8～16个试验样进行药效试验，获取试验样药效评价数据，包括药效评分值；

S4试验样HPLC分析：对初始样本进行色谱条件试验，以出峰尽可能多、能够较好地实现色谱峰分离的色谱条件作为试验样HPLC分析色谱条件，对8～16个试验样进行HPLC分析，获取试验样HPLC分析色谱图；

S5获取不同成分在各试验样品中的相对分布量数值：对各试验样HPLC分析色谱图所有色谱峰进行比对，识别共有峰；部分不易确认归属的色谱峰，通过比对色谱峰可见-紫外吸收特征予以确认；对各共有峰分别进行峰面积归一化处理，得到中药样本所有成分(色谱峰)在各样本中的相对分布量数值。

S6成分(色谱峰)—药效相关性分析：应用数学分析方法和分析软件对试验样药效评价数据与各样本不同成分(色谱峰)相对分布量数据进行相关性分析，得到成分(色谱峰)—药效相关数据。

S7构建成分(色谱峰)—药效关联特征表：以峰号、出峰时间、成分(色谱峰)—药效相关数据，构建谱效特征表。

S8构建谱效关联图：依成分(色谱峰)对中药整体药效影响系数大小顺序排列的谱效关联图

S9谱效关联特征分析：

①定量明晰中药所有成分对整体药效影响的差异；

②确定若干对中药整体药效影响特别突出的色谱峰；

③为指导各重点关注目标成分的分离、纯化、制备和鉴定，提供HPLC跟踪的技术方案；

④以整体和突出重点的方式，阐明中药复杂组成所有成分对中药有效性、安全性的影响。

本实施例中药可以是但不仅限于一种或一种以上的中药原料、原料组合物及加工产物。包括中药材、中药饮片、中药复方、中成药、中药配方颗粒、有效部位中药。

若所述中药在实际使用时，是将中药原料进行煎煮得到煎煮液，则本实施例中所采用的中药提取液为上述得到的中药煎煮液。

若所述中药在实际使用时，是将中药原料进行冷水浸提得到冷水浸提液，则本实施例中所采用的中药提取液中药提取液为上述的冷水浸提液。

本实施例中的中药提取液提取，充分考虑中药实际使用时的中药在加工过程中产生的新组分；同时可以考虑全部组分之间发生协同或者拮抗作用对于中药药效产生的影响，得到更为准确的影响系数。

本实施例的方法可以快速高效地识别中药复杂组成中各组分对整体药效影响的差异，阐明中药药效物质基础，为中成药标准提升、中药质量控制和中药新药开发提供重要支撑。

实施例2

本实施例提供橄榄晶冲剂谱效关联特征解析方法，具体为：

S1、基础样的制备：

S11分析橄榄晶冲剂生产工艺和原料，将橄榄晶冲剂生产过程中得到的17种基础药材50％乙醇渗漉流浸膏、鲜青果水煎煮浓缩液分别以水稀释10倍，得到流浸膏液和鲜青果水煎提取液；

S12溶剂逐级萃取

石油醚作为萃取溶剂与流浸膏液按体积比为1∶1进行萃取，得到流浸膏石油醚基础样和流浸膏第一水相部；将流浸膏第一水相部继续与乙酸乙酯按体积比为1∶1萃取得到流浸膏乙酸乙酯基础样和流浸膏第二水相部，将第二水相部经加热蒸发浓缩后，加入乙醇使乙醇浓度达80％，进行醇沉处理，得到流浸膏乙醇基础样和流浸膏沉淀部，将流浸膏沉淀部经水溶解得到流浸膏水分离基础样；

相同的方法，将石油醚作为萃取溶剂与鲜青果水煎提取液按体积比为1∶1进行萃取得到鲜青果石油醚基础样和鲜青果第一水相部；将第一水相部继续与乙酸乙酯按体积比为1∶1萃取得到鲜青果乙酸乙酯基础样和第二水相部，将第二水相部经加热蒸发浓缩后，加入乙醇使乙醇浓度达80％，进行醇沉处理得到鲜青果乙醇基础样和鲜青果沉淀部，将鲜青果沉淀部经水溶解得到鲜青果水分离基础样；

综上，共得到流浸膏石油醚基础样、流浸膏乙酸乙酯基础样、流浸膏乙醇基础样、流浸膏水分离基础样、鲜青果石油醚基础样、鲜青果乙酸乙酯基础样、鲜青果乙醇基础样和鲜青果水分离基础样，共8种基础样。

S2、经过预实验确定混配方案，对8种基础样进行混合设计，配制得9个不同的试验样。

S3、对9个试验样进行醉酒小鼠酒精代谢(醉酒小鼠血液中乙醇浓度)影响的药效试验，获取试验样药效评价数据，见表1。

表1：试验样对醉酒小鼠血液中乙醇浓度的影响

及评分值

注：与模型组比较，*P<0.05，差异显著；**P<0.01，差异极显著。

S4、取少量17种药材水提液、橄榄水煎液合并制得混合样，以混合样进行色谱条件试验，以出峰尽可能多、能够较好地实现色谱峰分离的色谱条件，作为试验样1-9的HPLC分析色谱条件，对9个试验样进行HPLC分析，获取试验样HPLC分析色谱图；

S5、对各试验样HPLC分析色谱图色谱峰进行比对，识别共有峰；部分不易确认归属的色谱峰，通过比对色谱峰可见-紫外吸收特征予以确认，识别共有峰共146个；分别对各共有峰分别进行峰面积归一化处理，得到橄榄晶冲剂样本所有成分(色谱峰)在各样本中的相对分布量数值，见表2：

表2：试验样146个共有峰的出峰时间及归一化峰面积

S6采用数学分析方法和分析软件，对试验样药效评价数据与各样本不同成分(色谱峰)相对分布量数据进行相关性分析，得到成分(色谱峰)—药效相关性数据。

S7以峰号、出峰时间、影响系数，构建依影响系数由低至高顺序排列的橄榄晶冲剂谱效特征表，见表3：

表3：橄榄晶冲剂谱效特征表

S8构建依成分(色谱峰)对橄榄晶冲剂整体药效影响系数大小顺序排列的谱效关联图，如图1所示。从图1可以明晰橄榄晶冲剂中各成分对整体药效影响的差异特征、对橄榄晶冲剂整体药效影响特别突出的色谱峰及出峰时间，确定重点关注目标成分。

S9、给出橄榄晶冲剂谱效关联特征解析结论：①橄榄晶冲剂对醉酒小鼠酒精代谢(醉酒小鼠血液中乙醇浓度)影响特别显著的成分(色谱峰)为：141号(144.96min)、122号(110.05min)、140号(141.79min)和145(147.17min)、144(146.86min)、139(139.88min)6个色谱峰，为重点关注目标成分的分离纯化、化学结构鉴定，提供简便、快速的HPLC跟踪识别(出峰时间)和分离纯化技术方案；②明确须重点关注色谱峰的构成和分布特征，141号(144.96min)、122号(110.05min)、140号(141.79min)和145(147.17min)、144(146.86min)、139(139.88min)6个色谱峰，可以作为橄榄晶冲剂产品质量评价的指标成分；141号(144.96min)、122号(110.05min)、140号(141.79min)3个色谱峰，是中药新药开发应重点关注分离利用的成分；145(147.17min)色谱峰是中成药二次开发组方优化、工艺优化应重点关注分离除去的成分；③以整体和突出重点的方式，明晰橄榄晶冲剂复杂组成所有成分对中药有效性、安全性的影响；④为全面阐明橄榄晶冲剂的有效性和安全性，提升橄榄晶冲剂标准，实现橄榄晶冲剂中药创新药开发，提供重要的技术支撑。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (9)

1.一种药物成分谱效关联特征解析方法，其特征在于，其包括以下步骤：

S1将药物样本所含药物组分分散制备若干基础样，由基础样混合设计制备若干个试验样；

S2对试验样进行药效试验和HPLC或/和GC分析，获得药效试验数据、HPLC或/和GC分析数据；

S3将所得到的药效试验数据、HPLC或/和GC分析数据进行相关性分析，得到不同共有峰对药物药效的影响系数，完成药物成分谱效关联特征解析。

2.如权利要求1所述的药物成分谱效关联特征解析方法，其特征在于：将药物所含药物组分以不同的分布特征分散分布于若干基础样中。

3.如权利要求1所述的药物成分谱效关联特征解析方法，其特征在于：步骤S1中，以药物样本中最多种的药物组分被提取的方法制得若干基础样。

4.如权利要求1所述的药物成分谱效关联特征解析方法，其特征在于：根据不同的药物特性，筛选一种或两种以上最优提取方法的组合使所述药物样本中最多种的药物组分被提出而分散至若干基础样。

5.如权利要求1-4任一项所述的药物成分谱效关联特征解析方法，其特征在于：所述分散制备若干基础样的方法包括药物的水煎煮、不同极性溶剂浸提、水蒸汽蒸馏、不同浓度乙醇渗漉、超临界提取、不同极性溶剂萃取、乙醇醇沉中一种或两种以上提取方法的组合。

6.如权利要求1所述的药物成分谱效关联特征解析方法，其特征在于：HPLC或/和GC分析是以全部基础样的混合制备样进行HPLC或/和GC分析色谱条件的预试验，以出峰最多、实现色谱峰分离的色谱条件，作为试验样HPLC或/和GC分析色谱条件。

7.如权利要求1-4或6任一项所述的药物成分谱效关联特征解析方法，其特征在于：HPLC或/和GC分析数据包括比对各试验样HPLC或/和GC色谱图得到的共有峰进行峰面积归一化处理，获得试验样各共有峰归一化峰面积数据。

8.如权利要求1-4或6任一项所述的药物成分谱效关联特征解析方法，其特征在于：所述药效评价数据和所述HPLC或/和GC分析数据进行相关分析，得到以药物HPLC或/和GC分析色谱峰及相应影响系数构建的谱效特征表或/和谱效关联图。

9.如权利要求1-4或6任一项所述的药物成分谱效关联特征解析方法，其特征在于：所述药物包括天然药物及其加工产物，所述天然药物包括植物药、动物药、微生物制药；所述药物优选为中药。

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