CN115353544A - 一种鸡冠花籽中蛋白质的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种鸡冠花籽中蛋白质的提取方法,其包括:鸡冠花籽清洗干燥后粉碎备用。鸡冠花籽粉末用石油醚(60‑90)脱脂后干燥。在45~50℃水浴条件下将脱脂后的鸡冠花籽原料与水混合,加入纤维素酶水溶液和果胶酶水溶液,酶解4—5h。离心过滤取固,水洗固体3次。将上述固体和水混合,用稀盐酸调PH至3—4,水解2—3h后离心过滤取固,水洗固体至水洗液中性。固体干燥,得到鸡冠花籽蛋白质产品。本发明依次采用脱脂,酶解,酸水解对鸡冠花籽进行处理,制备出一种较高含量的鸡冠花籽蛋白质。
Description
技术领域
本发明属于蛋白质提取技术领域,涉及一种鸡冠花籽中蛋白质的提取方法。
背景技术
鸡冠花,又名青箱子,百日红,为苋科青葙属一年生草本植物。鸡冠花籽即为鸡冠花的种子。鸡冠花籽作为一种常见中药供药用,具有清热明目,止血,凉血,止泻等功效。又因其富含蛋白质,鸡冠花籽又常作为饲料使用,增加饲料中蛋白质含量。鸡冠花籽是一种优质植物蛋白,在饲料加工及食品工业中具有广阔应用前景。
发明内容
(一)解决的技术问题
本发明提供一种鸡冠花籽中蛋白质的提取方法。操作简便,安全可靠,能较好的得到含量较高的鸡冠花籽蛋白质。
(二)技术方案
为实现以上目的,本发明通过以下技术方案予以实现:一种鸡冠花籽中蛋白质的提取方法,具体包括以下步骤:
S1.将鸡冠花籽清水清洗干净去除杂质,然后通过自然晾干的方式进行干燥,将干燥后的鸡冠花籽粉碎成鸡冠花籽粉末,然后鸡冠花籽粉末通过60目筛网后备用;
S2.粉碎后的鸡冠花籽粉末和石油醚按照固液比(m/v)=1:1.5的比例混合并形成混合液体一,将混合液体一在50—55℃下脱脂3次形成固体,再将所得固体在鼓风烘箱中干燥,得到中间体A;
S3.将S2步骤所得中间体A和水按照固液比(m/v)=1:3的比例混合得到混合液体二,混合液体二进行水浴,在45—50℃环境下搅拌,并加入纤维素酶水溶液和果胶酶水溶液进行酶解,酶解4—5h得到混合液体三,将混合液体三离心过滤取固,得到中间体B,中间体B加入适量清水搅拌洗涤并离心过滤的水洗处理,将中间体B水洗处理3次;
S4.将S3步骤所得中间体B和水按照固液比(m/v)=1:3的比例混合得到混合液体四,混合液体四进行水浴,在45—50℃环境搅拌下,用稀盐酸调节PH到3—4,水解2—3h后离心过滤取固得到中间体C,中间体C加入适量清水中搅拌洗涤并离心过滤取固,重复水洗操作至水洗液PH为中性,然后将中间体C在65℃烘箱干燥,得到蛋白质产品。
优选的,所述石油醚脱脂使用的石油醚为沸程60-90,固液比为m/v=1:1.5,50—55℃下脱脂3次。
优选的,所述鸡冠花籽和纤维素酶及果胶酶的添加量比例为鸡冠花籽:纤维素酶(果胶酶)=150g:0.1g。
优选的,所述S4步骤中所用稀盐酸浓度为3.5%,用稀盐酸调节PH到3—4,水解2—3h。
优选的,所述S3和S4步骤中离心条件为5000r/min,时间20min。
(三)有益效果
本发明的目的在于提供一种鸡冠花籽中蛋白质的提取方法,具备以下有益效果:
一方面可以扩大鸡冠花籽的应用范围,提高其的综合经济价值;另一方面,也为食品加工行业及饲料加工行业提供一种优质蛋白质来源。同时该方法中的酶制剂品种易得,使用成本低,并且酶解和酸水解过程具有高效性和可重复性,无论是实验室小试制备还是工厂大规模生产,都有着成本上的优势。
具体实施方式
下面,结合实施例对本发明的技术方案进行说明,但是,本发明并不限于下述的实施例。
实施例1
本实施例为PH=3.0酸水解的鸡冠花籽中蛋白质提取实施例。
将鸡冠花籽清水清洗干净去除杂质,然后通过自然晾干的方式进行干燥,将干燥后的鸡冠花籽粉碎成鸡冠花籽粉末,然后鸡冠花籽粉末通过60目筛网后备用。称取鸡冠花籽粉末200g,加入石油醚(沸程60-90)300ml,加热至50—55℃,搅拌脱脂3次,过滤取固,干燥得中间体A。
称取该中间体A粉末150g,加入水450ml,搅拌混合均匀。进行水浴,在45—50℃环境下搅拌,加入1.0%(m/v)的纤维素酶水溶液10ml和1.0%(m/v)果胶酶水溶液10ml,保温搅拌酶解5h,离心过滤得到中间体B,中间体B加入适量清水搅拌洗涤,加入适量清水搅拌洗涤并离心过滤的水洗处理,将中间体水洗处理3次;所得中间体B加入到450ml水中,搅拌混合均匀。进行水浴,在45—50℃环境搅拌下,用3.5%(m/m)的稀盐酸调节PH到3.0,保温搅拌水解3h后离心过滤取固得到中间体C,中间体C加入适量清水中搅拌洗涤,离心过滤取固,重复水洗操作,至水洗液PH为中性,所得固体在65℃鼓风烘箱中干燥,即得蛋白质产品。
实施例2
本实施例为PH=4.0酸水解的鸡冠花籽中蛋白质提取实施例。
将鸡冠花籽清水清洗干净去除杂质,然后通过自然晾干的方式进行干燥,将干燥后的鸡冠花籽粉碎成鸡冠花籽粉末,然后鸡冠花籽粉末通过60目筛网后备用。称取鸡冠花籽粉末200g,加入石油醚(沸程60-90)300ml,加热至50—55℃,搅拌脱脂3次,过滤取固,干燥得中间体A。
称取该中间体A粉末150g,加入水450ml,搅拌混合均匀。进行水浴,在45—50℃环境下搅拌,加入1.0%(m/v)的纤维素酶水溶液10ml和1.0%(m/v)果胶酶水溶液10ml,保温搅拌酶解5h,离心过滤得到中间体B,中间体B加入适量清水搅拌洗涤,加入适量清水搅拌洗涤并离心过滤的水洗处理,将中间体水洗处理3次;所得中间体B加入到450ml水中,搅拌混合均匀。进行水浴,在45—50℃环境搅拌下,用3.5%(m/m)的稀盐酸调节PH到4.0,保温搅拌水解3h后离心过滤取固得到中间体C,中间体C加入适量清水中搅拌洗涤,离心过滤取固,重复水洗操作,至水洗液PH为中性,所得固体在65℃鼓风烘箱中干燥,即得蛋白质产品。
对比实施例1
本实施例为不经过脱脂处理的鸡冠花籽蛋白质提取对比实施例。
将鸡冠花籽水洗晾干后粉碎,过60目筛网备用。称取该粉末150g,加入水450ml,搅拌混合均匀。水浴45—50℃并搅拌下,加入1.0%(m/v)的纤维素酶水溶液10ml和1.0%(m/v)果胶酶水溶液10ml,保温搅拌酶解5h,离心过滤取固。固体加入适量清水搅拌洗涤,离心过滤,取固。继续重复水洗固体2次;所得固体加入到450ml水中,搅拌混合均匀。水浴45—50℃并搅拌下,用3.5%(m/m)的稀盐酸调节PH到3.5,保温搅拌水解3h后离心过滤取固,固体加入适量清水中搅拌洗涤,离心过滤取固,重复水洗操作,至水洗液PH为中性,所得固体在65℃鼓风烘箱中干燥,即得蛋白质产品。
对比实施例2
本实施例为不经过纤维素酶处理的鸡冠花籽蛋白质提取对比实施例。
将鸡冠花籽水洗晾干后粉碎,过60目筛网备用。称取鸡冠花籽粉末200g,加入石油醚(60-90)300ml,加热至50—55℃,搅拌脱脂3次,过滤取固,干燥得中间体A。
称取该中间体A粉末150g,加入水450ml,搅拌混合均匀。水浴45—50℃并搅拌下,加入1.0%(m/v)果胶酶水溶液10ml,保温搅拌酶解5h,离心过滤取固。固体加入适量清水搅拌洗涤,离心过滤,取固。继续重复水洗固体2次;所得固体加入到450ml水中,搅拌混合均匀。水浴45—50℃并搅拌下,用3.5%(m/m)的稀盐酸调节PH到3.5,保温搅拌水解3h后离心过滤取固,固体加入适量清水中搅拌洗涤,离心过滤取固,重复水洗操作,至水洗液PH为中性,所得固体在65℃鼓风烘箱中干燥,即得蛋白质产品。
对比实施例3
本实施例为不经过果胶酶处理的鸡冠花籽中蛋白质提取对比实施例。
将鸡冠花籽水洗晾干后粉碎,过60目筛网备用。称取鸡冠花籽粉末200g,加入石油醚(60-90)300ml,加热至50—55℃,搅拌脱脂3次,过滤取固,干燥得中间体A。
称取该中间体A粉末150g,加入水450ml,搅拌混合均匀。水浴45—50℃并搅拌下,加入1.0%(m/v)的纤维素酶水溶液10ml,保温搅拌酶解5h,离心过滤取固。固体加入适量清水搅拌洗涤,离心过滤,取固。继续重复水洗固体2次;所得固体加入到450ml水中,搅拌混合均匀。水浴45—50℃并搅拌下,用3.5%(m/m)的稀盐酸调节PH到3.5,保温搅拌水解3h后离心过滤取固,固体加入适量清水中搅拌洗涤,离心过滤取固,重复水洗操作,至水洗液PH为中性,所得固体在65℃鼓风烘箱中干燥,即得蛋白质产品。
对比实施例4
本实施例为不经过酸水解处理的鸡冠花籽中蛋白质提取对比实施例。
将鸡冠花籽水洗晾干后粉碎,过60目筛网备用。称取鸡冠花籽粉末200g,加入石油醚(60-90)300ml,加热至50—55℃,搅拌脱脂3次,过滤取固,干燥得中间体A。
称取该中间体A粉末150g,加入水450ml,搅拌混合均匀。水浴45—50℃并搅拌下,加入1.0%(m/v)的纤维素酶水溶液10ml和1.0%(m/v)果胶酶水溶液10ml,保温搅拌酶解5h,离心过滤取固。固体加入适量清水搅拌洗涤,离心过滤,取固。继续重复水洗固体2次,所得固体在65℃鼓风烘箱中干燥,即得蛋白质产品。
选择凯氏定氮法精确测定鸡冠花籽原材料以及实施例1~2与对比例1~4的鸡冠花籽蛋白质含量。具体如表1所示。
表1鸡冠花籽蛋白质的提取率和蛋白质含量
以鸡冠花籽原料的蛋白质含量为基础,对比各个实施例的蛋白质含量提高的倍数数据。具体如表2所示。
表2各个实施例蛋白质含量与原料对比
如表1所示,本发明提供的一种鸡冠花籽中蛋白质的提取方法,所得到的鸡冠花籽蛋白质含量最高能达到16.32%,为鸡冠花籽原料的2.06倍。实施例1~2与对比实施例1~4相比较,其所得到的鸡冠花籽蛋白质含量为最高的15.85%和16.32%,使用该方法得到的鸡冠花籽蛋白质,为鸡冠花籽的综合利用,创造良好前景,为鸡冠花籽经济价值的提高,提供了机会和方法。
如上所述,即可较好地实现本发明,上述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述,并非对本发明的范围进行限定,在不脱离本发明设计精神的前提下,本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种改变和改进,均应落入本发明确定的保护范围内。
Claims (5)
1.一种鸡冠花籽中蛋白质的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.将鸡冠花籽清水清洗干净去除杂质,然后通过自然晾干的方式进行干燥,将干燥后的鸡冠花籽粉碎成鸡冠花籽粉末,然后鸡冠花籽粉末通过60目筛网后备用;
S2.粉碎后的鸡冠花籽粉末和石油醚按照固液比(m/v)=1:1.5的比例混合并形成混合液体一,将混合液体一在50—55℃下脱脂3次形成固体,再将所得固体在鼓风烘箱中干燥,得到中间体A;
S3.将S2步骤所得中间体A和水按照固液比(m/v)=1:3的比例混合得到混合液体二,混合液体二进行水浴,在45—50℃环境下搅拌,并加入纤维素酶水溶液和果胶酶水溶液进行酶解,酶解4—5h得到混合液体三,将混合液体三离心过滤取固,得到中间体B,中间体B加入适量清水搅拌洗涤并离心过滤的水洗处理,将中间体B水洗处理3次;
S4.将S3步骤所得中间体B和水按照固液比(m/v)=1:3的比例混合得到混合液体四,混合液体四进行水浴,在45—50℃环境搅拌下,用稀盐酸调节PH到3—4,水解2—3h后离心过滤取固得到中间体C,中间体C加入适量清水中搅拌洗涤并离心过滤取固,重复水洗操作至水洗液PH为中性,然后将中间体C在65℃烘箱干燥,得到蛋白质产品。
2.根据权利要求1所述的一种鸡冠花籽中蛋白质的提取方法,其特征在于,所述石油醚为沸程60-90。
3.根据权利要求1所述的一种鸡冠花籽中蛋白质的提取方法,其特征在于,所述鸡冠花籽和纤维素酶及果胶酶的添加量比例为鸡冠花籽:纤维素酶及果胶酶=150g:0.1g。
4.根据权利要求1所述的一种鸡冠花籽中蛋白质的提取方法,其特征在于,包括:S4步骤中所用稀盐酸浓度为3.5%。
5.根据权利要求1所述的一种鸡冠花籽中蛋白质的提取方法,其特征在于,所述S3和S4步骤中离心条件为5000r/min,时间20min。
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