CN115337218A - 一种口腔护理组合物、其应用以及含有其的牙膏、漱口水、口腔凝胶 - Google Patents
一种口腔护理组合物、其应用以及含有其的牙膏、漱口水、口腔凝胶 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了口腔护理组合物、其应用以及含有其的牙膏、漱口水、口腔凝胶等口腔护理产品，所述组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇。本发明的口腔护理组合物中包含羟丙基四氢吡喃三醇，该羟丙基四氢吡喃三醇的结构可以选自羟丙基四氢吡喃三醇的S构型、R构型，或S构型与R构型复合物中的任意一组。本发明的有益效果是：具有显著促进牙龈细胞生长、上调牙龈成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的合成，下调基质金属蛋白酶(MMP‑1)合成及促进糖胺聚糖的合成作用，能有效改善牙龈及牙周组织健康、固齿以及缓解牙龈炎症。
Description
技术领域
本发明涉及口腔护理品技术领域，具体涉及口腔护理组合物、其应用以及含有其的牙膏、漱口水、口腔凝胶。
背景技术
口腔健康是人体健康及心里健康的重要组成部分，也是反映生命健康质量的一面镜子，日益受到人们的关注。世界卫生组织、联合国牙科联盟(FDⅠ)也已根据1979年世界卫生大会通过“2000年人人享有卫生保健”的目标，制定了具体的口腔健康目标：即要使人人享有完整的口腔健康状态，使牙齿、颌骨及相关结构处于最佳的功能状态。
然而，越来越多的口腔问题被报道出来，诸如牙龈出血、牙龈炎、口腔溃疡、口腔异味、龋齿、牙菌斑等。而且牙病已成为危害人数最多的疾病之一，以龋齿为例，龋齿已被列为世界上第三种最主要的疾病，仅次于冠心病和癌症，其患病率高达37.3％，仅我国就存在超过11亿颗该补的牙齿。当然，随着口腔健康知识的普及、口腔卫生习惯的养成和公民素质的提升，口腔护理越来越引起重视。人们已经养成了坚持每天刷牙、饭后漱口的口腔清洁习惯，但相较于发达国家定期去医院或诊所做牙齿检查、定期做专业清洁的情况，我国整体的口腔护理情况仍有差距。
为了增强我国公民的口腔健康，越来越多的口腔护理产品被开发出来，例如抗菌牙膏、牙龈护理牙膏、漱口水、牙齿清洁剂等。但创新性的口腔护理原料，特别是具有保护牙龈、缓解牙周炎症的有效原料少之又少，且针对特殊人群，尤其是牙龈炎、牙龈萎缩、重症糖尿病引起的牙周炎的有效原料更是凤毛麟角。
其中，专利号为202011610810.0的已公开专利申请一种含透明质酸的口腔用品及其制备方法中，公开了一种含透明质酸的口腔用品及其制备方法，其中一种含透明质酸的组合物，包括透明质酸组合物和氟化物，旨在通过透明质酸薄膜将氟化物缓释到牙齿表面中，并发挥其防龋和再矿化作用，但对于其他针对牙龈萎缩、牙周炎等亚健康口腔问题的改善，并未提出有效建议。
发明内容
针对现有技术中的不足，本发明提供一种口腔护理组合物、其应用以及含有其的牙膏、漱口水、口腔凝胶，本发明提供口腔护理组合物能够促进牙龈细胞生长、上调牙龈成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的合成，下调基质金属蛋白酶(MMP-1)合成及促进糖胺聚糖的合成作用，显著改善牙龈及牙周组织健康、固齿以及缓解牙龈炎症。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
根据本发明的一个方面，提供了一种口腔护理组合物，所述组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇。
进一步的，所述羟丙基四氢吡喃三醇的结构可以选自羟丙基四氢吡喃三醇的S构型、R构型，或S构型与R构型复合物中的任意一组。
进一步的，所述组合物还包括绣球菌多糖。
进一步的，所述绣球菌多糖为深海绣球菌菌种经发酵培养所获取的孢外多糖提取物。
进一步的，所述孢外多糖提取物中为一种包含三螺旋结构的β-葡聚糖。
进一步的，所述羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为0.1％-20％，所述绣球菌多糖的分子量40万-120万，所述绣球菌多糖的使用量为0.01％-1.0％。
进一步的，所述羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为0.5％-5％。所述绣球菌多糖为60-80万，所述绣球菌多糖使用量为0.01％-0.2％。
进一步的，所述组合物还包括选自溶菌酶、抗菌肽、蜂胶提取物和/或透明质酸锌的组合物中的任一种或几种。
进一步的，所述溶菌酶的使用量为0.05％-5％，优选为0.5％-2％。
进一步的，所述抗菌肽的使用量为0.5％-4％，优选为0.8％-2％。
进一步的，所述蜂胶提取物的使用量0.2％-20％，优选为0.5％-5％。
进一步的，所述透明质酸锌包括低分子透明质酸锌和高分子透明质酸锌，其中，所述低分子透明质酸锌分子量5000-50万道尔顿，所述高分子透明质酸锌分子量50万-150万道尔顿，所述透明质酸锌使用量为0.05％-2％，优选0.1％-1％。
进一步的，所述组合物还包括选自绿茶提取物、氨甲环酸、蒲地蓝提取物、甘草酸二钾、雪莲提取物或四氢甲基嘧啶羧酸的组合物中的任一种或几种。
进一步的，所述绿茶提取物的使用量为0.01％-2％，优选为0.05％-0.5％。
进一步的，所述蒲地蓝提取物的使用量0.05-5％，优选0.1-2％，所述甘草酸二钾的使用量为0.05％-2％，优选为0.1％-0.5％。
进一步的，所述四氢甲基嘧啶羧酸使用量为0.05％-5％，优选0.1％-2％。
进一步的，所述雪莲提取物使用量为0.01-5％，优选为0.1％-2％。
进一步的，所述氨甲环酸使用量为0.01-1％，优选为0.02-0.1％。
进一步的，所述组合物还包括稳定剂、润湿剂、保湿剂、表面活性剂、抗氧化剂、摩擦剂、氟化物、抗超敏剂、着色剂和防腐剂、香精中的任意一种或多种。
进一步的，所述保湿剂为透明质酸钠、低分子透明质酸钠、聚谷氨酸钠、甘油、山梨醇、戊二醇中的任意一种或多种；
优选的，所述低分子透明质酸钠的分子量800道尔顿-40万道尔顿。
进一步的，所述抗氧化剂为维生素C及其衍生物、维生素E、β-葫芦卜素、虾青素中的任意一种或多种；
优选的，所述抗氧化剂为维生素C及其衍生物。
进一步的，所述稳定剂为乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸二钠。
进一步的，所述防腐剂为聚赖氨酸、山梨酸钾、1,2-戊二醇、酒精、氯己定和双胍杀菌剂中的任意一种或多种；
优选的，所述防腐剂为山梨酸钾。
根据本发明的另一个方面，提供上述的口腔护理组合物在制作口腔清洁用品及口腔消炎用品中的应用。
进一步的，上述口腔清洁用品包括牙膏、漱口水、口腔喷雾剂、口腔用凝胶、洁牙剂、口腔膜贴及调理剂。
根据本发明的又一个方面，提供一种漱口水，包含上述的口腔护理组合物和水；
优选的，所述水在漱口水中的质量含量为60％-90％，所述口腔护理组合物的质量含量为10％-40％。
根据本发明的又一个方面，提供一种牙膏，包含权利要求书上述的口腔护理组合物。
根据本发明的又一个方面，提供一种口腔凝胶，包含上述的口腔护理组合物。
通过上述技术方案，本发明口腔护理组合物中包含羟丙基四氢吡喃三醇，该羟丙基四氢吡喃三醇的结构可以选自羟丙基四氢吡喃三醇的S构型、R构型，或S构型与R构型复合物中的任意一组。本发明提供的口腔护理组合物具有显著地促进牙龈成纤维细胞合成Ⅰ型胶原蛋白、调节基质金属蛋白酶(MMP-1)合成及促进糖胺聚糖的合成作用，维持牙周组织健康、缓解牙龈衰老，改善牙龈及牙周组织健康、固齿，以及缓解牙龈炎症。
具体实施方式
羟丙基四氢吡喃三醇是一种具有抗衰老活性物的木糖衍生物，广泛应用于皮肤护理产品中，可以促进糖胺聚糖、胶原蛋白和弹性蛋白的合成，使肌肤更具弹性，从而改善细纹，预防肌肤衰老。申请人经过多次反复试验和研究，发现将羟丙基四氢吡喃三醇应用到口腔护理品领域，羟丙基四氢吡喃三醇具有显著地促进牙龈成纤维细胞合成Ⅰ型胶原蛋白、抑制基质金属蛋白酶MMP-1合成、维持牙周组织健康、缓解牙龈衰老的显著功能。同时发现，羟丙基四氢吡喃三醇和绣球菌多糖的协同作用，以及羟丙基四氢吡喃三醇和绣球菌多糖组合与溶菌酶、抗菌肽、蜂胶提取物和/或透明质酸锌中的一种或几种组合搭配的协同作用，或上述组合与绿茶提取物、氨甲环酸、蒲地蓝提取物、甘草酸二钾或四氢甲基嘧啶羧酸中的任一种或几种组合搭配的协同作用，以上各成分的协同既能舒缓、修复受损的牙周组织，抗牙菌斑、改善牙龈炎、保持口腔清洁，从效果上更能显著强化牙龈组织。上述成分的应用或协同应用，可用于制备牙膏、漱口水、口腔调理剂、凝胶、洁牙剂或口腔喷雾等口腔护理产品，以帮助消费者缓解牙周组织早衰所导致的牙龈萎缩及牙龈敏感；也可用来修复受损口腔黏膜及舒缓牙周组织炎症、抑菌、保持清新的口气等问题。
根据本发明的一典型实施例，提供一种口腔护理组合物，包含羟丙基四氢吡喃三醇。
优选的，羟丙基四氢吡喃三醇的结构可以选自羟丙基四氢吡喃三醇的S构型、R构型，或S构型与R构型复合物中的任意一组。
上述典型实施例中，应用于口腔护理领域羟丙基四氢吡喃三醇的结构式如I式所示。该羟丙基四氢吡喃三醇的结构因羟丙基上-OH的构象差异区分为S构型和R构型，其应用组合的组成可为S与R构型的任意比例复合物。
发明人经实验发现羟丙基四氢吡喃三醇具有显著促进牙龈成纤维细胞合成Ⅰ型胶原蛋白，下调基质金属蛋白酶(MMP-1)表达量，从而说明羟丙基四氢吡喃三醇具有延缓牙龈衰老、维持牙龈及牙周组织健康，缓解牙龈萎缩和牙龈炎的功效，所以羟丙基四氢吡喃三醇可用于口腔护理、口腔清洁、口腔消炎产品中以满足上述功能。
优选的，组合物还包括绣球菌多糖。
发明人又经实验研究发现羟丙基四氢吡喃三醇和绣球菌多糖在促进牙龈成纤维细胞合成Ⅰ型胶原蛋白，下调金属基质蛋白酶(MMP-1)的合成中具有显著的协同功效，且羟丙基四氢吡喃三醇和绣球菌多糖作为组合物可显著起到抗牙龈衰老、改善牙龈萎缩、维持牙龈健康、护理口腔粘膜、固齿等功效。该组合物可应用于口腔护理、口腔清洁、口腔消炎产品，尤其是口腔抗衰老产品中。
优选的，绣球菌多糖为深海绣球菌菌种经发酵培养所获取的孢外多糖提取物。
优选的，孢外多糖提取物中为一种包含三螺旋结构的β-葡聚糖。绣球菌多糖的主要及关键成分为含有一种具有独特三螺旋结构的β-葡聚糖，具有显著促进皮肤、口腔粘膜的愈合及抗炎、舒缓、抗衰老等生理活性。
优选的，羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为0.1％-20％，绣球菌多糖的分子量40万-120万，绣球菌多糖的使用量为0.01％-1.0％。
优选的，羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为0.5％-5％。绣球菌多糖为60-80万，绣球菌多糖使用量为0.01％-0.2％。
优选的，组合物还包括选自溶菌酶、抗菌肽、蜂胶提取物和/或透明质酸锌的组合物中的任一种或几种。
其中，溶菌酶属于微生物发酵来源，具有相对广谱的抑菌能力。抗菌肽为微生物发酵获取，具有抑菌、舒缓和抑制牙菌斑的效果。蜂胶提取物中含有黄酮类物质和矿质元素，具有抗氧化、抑菌，防蛀牙、防龋齿和牙周病，有助于口腔卫生。本实施例中各成分协同作用，具有调节口腔微生物平衡，抑制有害菌群，达到预防蛀牙、防龋齿、预防牙周病和减少防腐剂使用量的作用。
优选的，溶菌酶的使用量为0.05％-5％，优选为0.5％-2％。
优选的，抗菌肽的使用量为0.5％-4％，优选为0.8％-2％。
优选的，蜂胶提取物的使用量0.2％-20％，优选为0.5％-5％。
优选的，透明质酸锌包括低分子透明质酸锌和高分子透明质酸锌，其中，低分子透明质酸锌分子量5000-50万道尔顿，高分子透明质酸锌分子量50万-150万道尔顿，透明质酸锌使用量为0.05％-2％，优选0.1％-1％。
优选的，组合物还包括选自绿茶提取物、氨甲环酸、蒲地蓝提取物和/或甘草酸二钾、雪莲提取物或四氢甲基嘧啶羧酸的组合物中的任一种或几种。
其中，绿茶提取物中含有茶多酚等活性成分，具有抗炎、抑菌、抗氧化的作用，所以绿茶提取物对缓解口腔炎症、促进伤口修复、抵抗牙龈衰老能提供更好的协同性，同时能清新口气。甘草酸二钾为甘草提取物或其衍生物，蒲地蓝提取物和甘草酸二钾具有舒缓、抗炎症的功效，能有效舒缓、对抗牙齿敏感。四氢甲基嘧啶羧酸具有抗衰老、保护牙龈、舒缓的功效，能有效改善牙齿敏感、牙龈早衰。雪莲提取物为天山雪莲植物细胞经培养后所提取获
优选的，绿茶提取物的使用量为0.01％-2％，优选为0.05％-0.5％。
优选的，蒲地蓝提取物的使用量0.05-5％，优选0.1-2％，所述甘草酸二钾的使用量为0.05％-2％，优选为0.1％-0.5％。
优选的，四氢甲基嘧啶羧酸使用量为0.05％-5％，优选0.1％-12％。
优选的，雪莲提取物使用量为0.01-5％，优选为0.1％-2％。
优选的，氨甲环酸使用量为0.01-1％，优选为0.02-0.1％。
优选的，一种口腔护理组合物，含羟丙基四氢吡喃三醇，还含有氨甲环酸又名凝血酸、传明酸，常用于止血，具有抗纤维蛋白溶解的作用，在口腔护理产品中可起到改善牙龈出血、舒缓等作用。
优选的，组合物还包括稳定剂、润湿剂、保湿剂、表面活性剂、抗氧化剂、摩擦剂、氟化物、抗超敏剂、着色剂和防腐剂、香精中的任意一种或多种。
优选的，保湿剂为透明质酸钠、低分子透明质酸钠、聚谷氨酸钠、甘油、山梨醇、戊二醇中的任意一种或多种；
优选的，低分子透明质酸钠的分子量800道尔顿-40万道尔顿。
优选的，抗氧化剂为维生素C及其衍生物、维生素E、β-葫芦卜素、虾青素中的任意一种或多种；
优选的，抗氧化剂为维生素C及其衍生物。
优选的，稳定剂为乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸二钠。
优选的，防腐剂为聚赖氨酸、山梨酸钾、1,2-戊二醇、酒精、氯己定和双胍杀菌剂中的任意一种或多种；
优选的，所述防腐剂为山梨酸钾。
根据本发明的另一典型实施例，提供上述的口腔护理组合物在制作口腔清洁用品、口腔护理用品及口腔消炎用品中的应用。优选的，上述的口腔护理组合物可应用于牙膏、漱口水、口腔喷雾剂、口腔用凝胶、洁牙剂、口腔膜贴及相关调理剂等口腔护理用品、口腔清洁用品及口腔消炎用品。
根据本发明的另一典型实施例，提供一种漱口水，包含上述的口腔护理组合物和水；
优选的，水在漱口水中的质量含量为60％-90％，所述口腔护理组合物的质量含量为10％-40％。
根据本发明的另一典型实施例，提供一种牙膏，包含上述实施例中的口腔护理组合物。
根据本发明的另一典型实施例，提供一种口腔凝胶，包含上述实施例中的口腔护理组合物。
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
具体实施例
实施例
表1为实施例中的组分质量百分组成：
表1
验证试验
实施例1至实施例3为研究羟丙基四氢吡喃三醇在口腔护理中的功效，实施例4至实施例7中在羟丙基四氢吡喃三醇加入绣球菌多糖，研究羟丙基四氢吡喃三醇与绣球菌多糖的协同作用，上述各实施例均以生理盐水为溶剂，根据各验证试验要求配置母液或根据表1中配置不同浓度的羟丙基四氢吡喃三醇溶液。
一、实施例对人牙龈成纤维细胞(HGFs)Ⅰ型胶原蛋白合成的影响，使用实施例1-7
1.用含血清培养基(DMEM)常规培养人牙龈成纤维细胞，至第四代时将生长良好的细胞接种至6孔培养板，37℃、5％CO2细胞培养箱中继续培养，待细胞铺板至>70％时。每组设置3个重复。
2.更换无血清培养液，继续培养12小时。
3.加入实施例样品或对照例样品至所需浓度，培养15分钟，更换无血清培养基，继续培养4小时。
4.为模拟漱口或刷牙条件，重复试验3给药处理二次，更换无血清培养基后继续培养12小时。
5.收集细胞，进行细胞破碎，采用人Ⅰ型前胶原氨基端肽Elisa试剂盒进行测试。
6.实施例1作为阳性对照(200μmol/L维生素C)，实施例2作为空白对照组(生理盐水)，各组均采用与实施例相同的处理方式。
7.按照下面公式计算各组中胶原蛋白的相对量。
Ⅰ型胶原蛋白相对量％＝(实验组胶原蛋白含量-空白对照组胶原蛋白含量)/空白对照组胶原蛋白含量×100％
表2为Ⅰ型胶原蛋白相对表达量：
表2
与对比例2相比，显著性分析：*p＜0.05表示显著，**p＜0.01表示极显著
8.结果分析：
在人牙龈成纤维细胞模型下，相较于对比例2(空白对照组)而言，对比例1(200μmol/L维生素C)中Ⅰ型胶原蛋白的表达量显著上升，证明该实验模型建模成功。而实施例1中Ⅰ型胶原蛋白的表达量显著上调，实施例2和实施例3组Ⅰ型胶原蛋白的表达量均极显著上调，且实施例2中Ⅰ型胶原蛋白的表达量对比例1高25.55％，实施例3中Ⅰ型胶原蛋白的表达量比对比例2高了9.71％。说明羟丙基四氢吡喃三醇在浓度0.5％-5％均能显著提高Ⅰ型胶原蛋白的表达量，且在0.5％-5％浓度范围内，Ⅰ型胶原蛋白的表达量具有浓度依赖性，浓度越高上调Ⅰ型胶原蛋白效果越显著。
与空白对照相比，实施例4和实施例5中绣球菌多糖将胶原蛋白的合成提高5.32％和8.42％，但无显著差异；而实施例6是在实施例1基础上加入了0.2％绣球菌多糖，发现实施例6中Ⅰ型胶原的合成量显著高于实施例1，说明加入0.2％绣球菌多糖与0.5％羟丙基四氢吡喃三醇的组合物与相同浓度的羟丙基四氢吡喃三醇相比Ⅰ型胶原的合成量上调了23.52％，表明绣球菌多糖与羟丙基四氢吡喃三醇具有协同效果；同样，实施例7在实施例2(2.5％羟丙基四氢吡喃三醇)的基础上加入了0.2％绣球菌多糖，其Ⅰ型胶原蛋白的合成量显著高于实施例2，且实施例7(0.2％绣球菌多糖与2.5％羟丙基四氢吡喃三醇的组合物)对Ⅰ型胶原蛋白的合成量比实施例2高16.54％，更比实施例3(5％浓度的羟丙基四氢吡喃三醇)高6.83％。通过以上分析可知，羟丙基四氢吡喃三醇与绣球菌多糖对Ⅰ型胶原蛋白的合成具有协同上调的作用。
人牙龈成纤维细胞主要功能之一是合成胶原蛋白和纤维粘连蛋白，胶原蛋白和纤维粘连蛋白是维持牙周组织健康的重要保障，而实施例中的有效成分羟丙基四氢吡喃三醇确实可以上调Ⅰ型胶原蛋白的表达量。牙周组织中Ⅰ型胶原蛋白含量提高，会进一步维持牙周健康，预防牙周炎和牙龈萎缩等病症，即证明羟丙基四氢吡喃三醇对牙龈及牙周组织健康有显著的改善效果。同样分析可得绣球菌多糖与羟丙基四氢吡喃三醇对Ⅰ型胶原蛋白有显著的协同作用。所以羟丙基四氢吡喃三醇和/或绣球菌多糖均能缓解牙龈衰老。
二、实施例对人牙龈成纤维细胞(HGFs)基质金属蛋白酶(MMP-1)合成的影响，使用实施例1-7。
1.取第四代生长良好的人牙龈成纤维细胞，转接至96孔培养板，在37℃、5％CO2细胞培养箱中继续培养至细胞铺板>70％以上。每组设置3个重复。
2.更换无血清培养液，继续培养12小时。
3.给药处理：加入实施例样品母液或对照例样品母液至所需浓度，培养15分钟，更换无血清培养基，继续培养4小时。
4.为模拟漱口或刷牙条件，重复试验3给药处理二次，更换无血清培养基后继续培养12小时。
5.收集细胞上清液：收集各组细胞培养上清液，然后3000r/min、4℃离心20min，以除掉细胞残渣，置于-20℃冰箱保存备用。
6.按照pro-MMP-1 Elisa试剂盒的步骤来检测各组细胞上清液中MMP-1蛋白的表达水平。
7.按照下面公式计算各组中MMP-1的相对量。
MMP-1蛋白相对量％＝(实验组MMP-1蛋白含量-空白对照组MMP-1蛋白含量)/空白对照组MMP-1蛋白含量×100％
表3，MMP-1蛋白相对表达量
| 组别 | MMP-1相对合成量 |
| 对比例2(生理盐水) | 100±0.89％ |
| 对比例1(200μmol/L维生素C) | 89.25±4.39％<sup>*</sup> |
| 实验例1 | 96.02±2.27％ |
| 实验例2 | 90.32±2.19％<sup>*</sup> |
| 实验例3 | 85.73±3.16％<sup>**</sup> |
| 实验例4 | 95.32±1.20％<sup>*</sup> |
| 实验例5 | 96.21±0.98％ |
| 实施例6 | 90.62±1.38％<sup>*</sup> |
| 实施例7 | 83.31±3.11％<sup>**</sup> |
表3
与对比例2相比，显著性分析：*p＜0.05表示显著，**p＜0.01表示极显著
8.实验结果及分析
基质金属蛋白酶(MMPs)是一组锌离子(Zn2+)依赖型的蛋白水解酶的总称，MMPs几乎能降解细胞外基质(ECM)中的各种蛋白成分，被认为是该过程中主要的蛋白水解酶。MMPs中最具代表性的是胶原酶(MMP-1和MMP-8)，它可以分解Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原纤维的三股螺旋结构，使胶原蛋白失活，所以细胞外基质(包括胶原Ⅰ、Ⅲ)更新的快慢取决于这些酶类的活性。而对于口腔健康，MMPs对牙周炎发展过程中，牙周韧带、压槽骨和牙龈中胶原的破坏起着关键作用。
故本实验以典型性的基质金属蛋白酶Ⅰ(MMP-1)作为研究对象，利用人牙龈成纤维细胞模型研究实施例对MMP-1合成的影响。与对比例2相比，比例1(维生素C组)显著性的下调了MMP-1的表达，说明建模成功。与对比例2相比，实验例1、实验例2和实验例3均能抑制MMP-1的合成，抑制率分别是3.98％，9.68％*和14.27％*；且实验例2和实验例3对MMP-1合成具有显著性抑制作用。试想MMP-1受到抑制，则Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原蛋白可在牙龈等口腔组织保留更长时间，从而保护了牙龈、牙周韧带、压槽骨，进而对牙周疾病(诸如牙周炎、牙龈萎缩)具有改善效果。此实验证实羟丙基四氢吡喃三醇具有潜在的改善牙周疾病或亚健康状态的效果。
同理实施例4表明，0.2％绣球菌多糖单独给药也能抑制MMP-1的合成，从而发挥绣球菌多糖抗牙龈衰老的功效。实施例6在实施例1(0.5％羟丙基四氢吡喃三醇)基础上同时添加0.2％绣球菌多糖，发现实施例6比实施例1抑制MMP-1合成效果更明显，抑制率提高了5.40％，同样实施例7在实施例2(2.5％羟丙基四氢吡喃三醇)的基础上添加0.2％绣球菌多糖，实施例7比实施例2对MMP-1的抑制效果更显著，抑制率提高了7.01％，且比实施例3(5％羟丙基四氢吡喃三醇)对MMP-1的抑制率高2.42％，说明羟丙基四氢吡喃三醇与绣球菌多糖对MMP-1的抑制具有显著的协同效果。所以羟丙基四氢吡喃三醇和/或绣球菌多糖单独应用或复配使用均能抑制MMP-1的合成，从而缓解牙龈衰老。
三、含实施例1-19及对比例1-2所述组成成分的漱口水对口腔状态影响(牙菌斑、感官评价)
1.志愿者招募
遵循《赫尔辛基和东京宣言》关于人类指南第652/2016号，招募121名志愿者，并与志愿者签订知情同意书。志愿者选择标准：口腔无明显病症，不吸烟、24颗及以上天然牙齿，无牙龈结石，无正畸质量，不在妊娠期及哺乳期，对漱口水无过敏现象；性别要求男女各60名，18-45周岁，每个实施例或对比例11名志愿者，以便每一组可获得10名志愿者的有效数据。
2.漱口水制备：
表4，漱口水组分表
| 原料名称 | 组分占比 |
| 实施例或对比例 | 如表1 |
| 甘油 | 1％ |
| PEG-40氢化蓖麻油 | 0.6％ |
| 泊洛沙姆 | 0.5％ |
| 瓜尔胶 | 0.4％ |
| 山梨酸钾 | 0.2％ |
| 去离子水 | 余量 |
表4
配置方法：
根据上表组分及比例，将各组分分别加入一定量的去离子水中，搅拌混合均匀，加入余量水至100％，继续搅拌混合均匀即得漱口水。下文以加入特定浓度的实施例1-19漱口水，标注为应用例1-19，对比例1-2,标注为应用例20-21。其中应用例1-13和应用例20-21用于牙菌斑的测定。
3.漱口水使用：
每天刷牙后30min使用含实施例1-19或对照例1-2组成成分(见表1)的漱口水，含漱1min，每次间隔12小时，每天漱口两次。
4.菌斑检查:
分别在第0天，14天和28天测量菌斑指数PLI。具体操作为，采用一次性平面口径，并在手电筒辅助照射下进行检查。先将RED-COTER菌斑显示液按一定比例配置成漱口水，受试者将其在口腔中含漱30秒。然后根据Quigley-Hein菌斑指数记录法对各组菌斑进行评价计分，计算每一个受试者的菌斑均值。菌斑评价标准如下表(表5)。
表5，菌斑评价标准
表5
5.实验结果及分析：
结果如表6，应用例1-7和应用例19-20中不含任何抑菌或杀菌成分，牙菌斑的数量(均在1.8以上)均与使用漱口水前(均在1.8以上)相似，说明应用例1-7和应用例20-21对牙菌斑的数量无显著变化，但长期坚持定时漱口会对牙菌斑的形成有一定改善的趋势。应用例8-13中分别加入抑菌或杀菌成分，如透明质酸锌、溶菌酶、抗菌肽、蜂胶提取物和山梨酸钾，坚持使用应用例8-13的漱口水28天后，菌斑指数均在0.5以下，说明其对牙菌斑的形成有明显的抑制效果。应用例1-7均含有羟丙基吡喃三醇和/或绣球菌多糖，但不含抑菌或杀菌成分，同时，应用例14-19也没有抑菌剂或防腐剂，也无显著抑制口腔牙菌斑的效果(结果未列出)，而应用例8-13均有显著的抗牙菌斑效果，说明抗牙菌斑效果主要是由透明质酸锌、溶菌酶、抗菌肽、蜂胶提取物和山梨酸钾带来的。故透明质酸锌、溶菌酶、抗菌肽、蜂胶提取物和山梨酸钾等具有抑菌活性的成分与“羟丙基四氢吡喃三醇和绣球菌多糖组合物”复配，能赋予该组合物抑菌、清新口气、抑制牙菌斑形成的作用和功效。
表6为实施例1-19及对比例1、2对牙菌斑评价结果(其中实施例1-19对应应用例1-18，对比例1、2对应应用例20、21
| 组别 | 第0天 | 第14天 | 第28天 |
| 应用例1 | 2.0 | 2.1 | 2.0 |
| 应用例2 | 2.2 | 2.1 | 2.1 |
| 应用例3 | 1.8 | 2.0 | 1.9 |
| 应用例4 | 1.9 | 1.8 | 1.8 |
| 应用例5 | 2.1 | 2.0 | 2.1 |
| 应用例6 | 2.0 | 2.0 | 1.9 |
| 应用例7 | 2.1 | 2.1 | 2.3 |
| 应用例8 | 2.1 | 1.0 | 0.3 |
| 应用例9 | 2.0 | 1.1 | 0.3 |
| 应用例10 | 1.9 | 1.0 | 0.2 |
| 应用例11 | 2.3 | 1.1 | 0.4 |
| 应用例12 | 1.8 | 1.3 | 0.5 |
| 应用例19 | 1.9 | 1.4 | 0.5 |
| 应用例20 | 2.2 | 2.2 | 2.1 |
| 应用例21 | 2.0 | 2.0 | 1.9 |
表6
6.应用例感官评价调查
自行设计调查问卷，以问卷形式来评判各应用例漱口水的使用感。从刺激性、改善口干、口腔异味、牙龈敏感四个方面评价应用例的使用效果，在随访第28天时，由志愿者填写问卷。各方面评价方法及打分规则见表7，并计算每位受试者打分的均值：
表7，感官评价指标及评价方法
| 评价项目 | 分值 | 评价标准 |
| 刺激性 | 0-5 | 无刺激性得0分，刺激性无法接受得5分 |
| 改善口干 | 0-5 | 改善效果明显得5分，无改善效果得0分 |
| 口腔异味 | 0-5 | 易产生口腔异味得0分，无口腔异味得5分 |
| 牙龈敏感 | 0-5 | 对牙龈敏感有明显改善效果得5分，无效果得0分 |
表7
7.感官评价结果及分析：
表8，感官评价得分
表8
由表8可知，除应用例9和应用例11刺激性评分小于0.2(＜0.5认为无刺激)，应用例1-21中其他应用例的刺激性评分中得分均为0，说明应用例1-21各漱口水对志愿者口腔均无刺激性。
由表8可知，应用例1-21的改善口干项目评分中，应用例20和应用例21评分分别为2.3和2.0，对口干无明显改善效果。应用例1-19中，得分均在3.0分以上均能有效改善口干的情况，推测羟丙基四氢吡喃三醇、绣球菌多糖发挥了基础的保湿、滋润口腔的作用。其次透明质酸锌(4.5分)、蜂胶提取物(4.8分)、透明质酸钠(4.6分)、绿茶提取物(4.2分)和四氢甲基嘧啶羧酸(4.3分)评分均在4.2分以上，说明其促进了“羟丙基四氢吡喃三醇、绣球菌多糖组合物”滋润口腔的作用，推测以上成分也具有潜在滋润口腔、改善口干的效果。
由表8可知，应用例1-21中口腔异味评分均在2.0以上，说明应用例1-21对改善口腔异味均是有效果的，其中透明质酸锌(4.0分)、溶菌酶(3.9分)、抗菌肽(4.2分)、蜂胶提取物(4.3分)和山梨酸钾(4.2分)的得分均在3.9分以上，具有显著的改善口腔异味的效果，推测是其抑菌效果发挥了一定作用，另外绿茶提取物(4.7分)对清新口气有显著的作用，此外经常漱口对清新口气也有助益(如应用例20(2.0分)和应用例21(2.5分))。
由表8可知，相较于应用例20-21，应用例1-19评分均在3.5分以上，说明应用例1-19对牙龈敏感有较明显的改善，同样验证了羟丙基四氢吡喃三醇和/或绣球菌多糖对口腔敏感有改善效果，说明羟丙基四氢吡喃三醇和/或绣球菌多糖及其组合物对改善口腔健康有所帮助，可应用于口腔护理品中。此外透明质酸锌(4.2分)、高浓度维生素C(4.3分)、氨甲环酸(4.6分)、甘草酸二钾(4.5分)和四氢甲基嘧啶羧酸(4.4分)的评分均在4.2分以上，其对牙龈敏感有较为显著效果。故透明质酸锌、高浓度维生素C、氨甲环酸、甘草酸二钾和四氢甲基嘧啶羧酸中任一种或几种对“羟丙基四氢吡喃三醇和/或绣球菌多糖及其组合物”的改善牙龈效果有显著的协同及促进作用。
综合以上实验，含羟丙基四氢吡喃三醇和/或绣球菌多糖的实施例1-7可显著促进Ⅰ型胶原蛋白的合成，显著抑制基质金属蛋白酶MMP-1的合成，从而对牙周疾病(诸如牙周炎、牙龈萎缩)具有改善效果。且羟丙基四氢吡喃三醇与绣球菌多糖具有协同功效，能协同缓解牙龈衰老，预防牙龈炎症和牙龈萎缩。含羟丙基四氢吡喃三醇、绣球菌多糖和具有抑菌、杀菌成分协同(如应用例8-13)具有显著的抗牙菌斑的效果；含羟丙基四氢吡喃三醇、绣球菌多糖组合物(应用例8-19)能改善口干、减弱口腔异味、改善口腔敏感症状的发生，验证了羟丙基四氢吡喃三醇和绣球菌多糖等的组合物能维持口腔健康，可广泛应用于各种口腔护理产品中。本发明提供的口腔护理组合物，为口腔护理产品的创新提供了原料及创新思路。
实施例22
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇，使用量为0.1％。
实施例23
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇，使用量为20％。
实施例24
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇，使用量为10％。
实施例25
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇，使用量为15％。
实施例26
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇，羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为0.3％，绣球菌多糖的分子量120万，绣球菌多糖的使用量为1.0％。
实施例27
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇，羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为5％，绣球菌多糖的分子量40万，绣球菌多糖的使用量为0.01％。
实施例28
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇，羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为8％，绣球菌多糖的分子量100万，绣球菌多糖的使用量为0.1％。
实施例29
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇，所述羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为12％。所述绣球菌多糖分子量为80万，绣球菌多糖使用量为0.2％。
实施例30
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇，羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为18％。绣球菌多糖分子量为60万，绣球菌多糖使用量为0.8％。
实施例31
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为19％，绣球菌多糖为60万，绣球菌多糖使用量为0.9％，溶菌酶的使用量为0.05％。
实施例32
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为19％，绣球菌多糖为50万，绣球菌多糖使用量为0.7％，溶菌酶的使用量为5％，抗菌肽的使用量为0.5％。
实施例33
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为14％，绣球菌多糖为70万，绣球菌多糖使用量为0.6％，溶菌酶的使用量为0.5％，抗菌肽的使用量为4％。
实施例34
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为13％，绣球菌多糖为75万，绣球菌多糖使用量为0.4％，溶菌酶的使用量为2％，抗菌肽的使用量为0.8％，蜂胶提取物的使用量20％。
实施例35
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为11％，绣球菌多糖为110万，绣球菌多糖使用量为0.3％，溶菌酶的使用量为4％，抗菌肽的使用量为0.75％，蜂胶提取物的使用量0.2％。
实施例36
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为11％，绣球菌多糖为110万，绣球菌多糖使用量为0.3％，溶菌酶的使用量为4％，抗菌肽的使用量为0.75％，蜂胶提取物的使用量0.2％，低分子透明质酸钠分子量5000道尔顿，高分子透明质酸钠分子量50万道尔顿，透明质酸钠使用量为0.05％，绿茶提取物的使用量为2％，蒲地蓝提取物的使用量0.05，甘草酸二钾的使用量为0.05％，四氢甲基嘧啶羧酸使用量为0.05％，雪莲提取物使用量为0.01％，氨甲环酸使用量为0.01％。
实施例37
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为9％，绣球菌多糖为150万，绣球菌多糖使用量为0.3％，溶菌酶的使用量为4％，抗菌肽的使用量为0.6％，蜂胶提取物的使用量0.2％，低分子透明质酸锌分子量50万道尔顿，所述高分子透明质酸锌分子量150万道尔顿，所述透明质酸锌使用量为2％，绿茶提取物的使用量为0.01％，蒲地蓝提取物的使用量5％，甘草酸二钾的使用量为2％，四氢甲基嘧啶羧酸使用量为5％，雪莲提取物使用量为5％，氨甲环酸使用量为1％。
实施例38
一种口腔护理组合物，组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为11％，绣球菌多糖为110万，绣球菌多糖使用量为0.3％，溶菌酶的使用量为4％，抗菌肽的使用量为0.75％，蜂胶提取物的使用量5％，低分子透明质酸钠分子量30万道尔顿，所述透明质酸锌分子量150万道尔顿，所述透明质酸锌使用量为0.05％，绿茶提取物的使用量为0.05％，蒲地蓝提取物的使用量2％，甘草酸二钾的使用量为0.5％，四氢甲基嘧啶羧酸使用量为0.1％，雪莲提取物使用量为0.1％，氨甲环酸使用量为0.02％。
实施例39
一种漱口水，包含上述实施例1-19，22-38中的口腔护理组合物和水；其中，水在漱口水中的质量含量为60％，口腔护理组合物的质量含量为40％。
实施例40
一种漱口水，包含上述实施例1-19，22-38中的口腔护理组合物和水；其中，水在漱口水中的质量含量为90％，口腔护理组合物的质量含量为10％。
实施例41
一种漱口水，包含上述实施例1-19，22-38中的口腔护理组合物和水；其中，水在漱口水中的质量含量为80％，口腔护理组合物的质量含量为20％。
实施例42
一种漱口水，包含上述实施例1-19，22-38中的口腔护理组合物和水；其中，水在漱口水中的质量含量为70％，口腔护理组合物的质量含量为30％。
实施例43
一种漱口水，包含上述实施例1-19，22-38中的口腔护理组合物和水；其中，水在漱口水中的质量含量为75％，口腔护理组合物的质量含量为25％。
实施例44
一种牙膏，包含上述实施例1-19，22-38中的口腔护理组合物。
实施例45
一种口腔凝胶，包含上述实施例1-19，22-38中的口腔护理组合物。
实施例46
一种洁牙剂，包含上述实施例1-19，22-38中的口腔护理组合物。
以上实施例和应用例，方案中公布的具有技术方案和/或特征性等常识未做过多的描述，在此应当指出，对本技术领域专业人员来说，在不脱离本发明技术方案的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的适用性。本申请要求的保护范围应该以其权利要求书内容为准，说明书中具体实施例和应用例方式等记载可用于解释权利要求书的内容。
Claims (28)
1.一种口腔护理组合物，其特征在于，所述组合物包含羟丙基四氢吡喃三醇。
2.根据权利要求1所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述羟丙基四氢吡喃三醇的结构可以选自羟丙基四氢吡喃三醇的S构型、R构型，或S构型与R构型复合物中的任意一组。
3.根据权利要求1所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述组合物还包括绣球菌多糖。
4.根据权利要求3所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述绣球菌多糖为深海绣球菌菌种经发酵培养所获取的孢外多糖提取物。
5.根据权利要求4所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述孢外多糖提取物为一种包含三螺旋结构的β-葡聚糖。
6.根据权利要求3-5任一项所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为0.1％-20％，所述绣球菌多糖的分子量40万-120万，所述绣球菌多糖的使用量为0.01％-1.0％。
7.根据权利要求6所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述羟丙基四氢吡喃三醇的使用量为0.5％-5％。所述绣球菌多糖为60-80万，所述绣球菌多糖使用量为0.01％-0.2％。
8.根据权利要求1-5任一项所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述组合物还包括选自溶菌酶、抗菌肽、蜂胶提取物和/或透明质酸锌的组合物中的任一种或几种。
9.根据权利要求8所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述溶菌酶的使用量为0.05％-5％，优选为0.5％-2％。
10.根据权利要求8所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述抗菌肽的使用量为0.5％-4％，优选为0.8％-2％。
11.根据权利要求8所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述蜂胶提取物的使用量0.2％-20％，优选为0.5％-5％。
12.根据权利要求8所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述透明质酸锌包括低分子透明质酸锌和高分子透明质酸锌，其中，所述低分子透明质酸锌分子量5000-50万道尔顿，所述高分子透明质酸锌分子量50万-150万道尔顿，所述透明质酸锌使用量为0.05％-2％，优选0.1％-1％。
13.根据权利要求1-5任一项所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述组合物还包括选自绿茶提取物、氨甲环酸、蒲地蓝提取物、甘草酸二钾、雪莲提取物或四氢甲基嘧啶羧酸的组合物中的任一种或几种。
14.根据权利要求13所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述绿茶提取物的使用量为0.01％-2％，优选为0.05％-0.5％。
15.根据权利要求13所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述蒲地蓝提取物的使用量0.05-5％，优选0.1-2％，所述甘草酸二钾的使用量为0.05％-2％，优选为0.1％-0.5％。
16.根据权利要求13所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述四氢甲基嘧啶羧酸使用量为0.05％-5％，优选0.1％-2％。
17.根据权利要求13所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述雪莲提取物使用量为0.01-5％，优选为0.1％-2％。
18.根据权利要求13所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述氨甲环酸使用量为0.01-1％，优选为0.02-0.1％。
19.根据权利要求1-18任一项所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述组合物还包括稳定剂、润湿剂、保湿剂、表面活性剂、抗氧化剂、摩擦剂、氟化物、抗超敏剂、着色剂和防腐剂、香精中的任意一种或多种。
20.根据权利要求书19所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述保湿剂为透明质酸钠、低分子透明质酸钠、聚谷氨酸钠、甘油、山梨醇、戊二醇中的任意一种或多种；
优选的，所述低分子透明质酸钠的分子量800道尔顿-40万道尔顿。
21.根据权利要求书19所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述抗氧化剂为维生素C及其衍生物、维生素E、β-葫芦卜素、虾青素中的任意一种或多种；
优选的，所述抗氧化剂为维生素C及其衍生物。
22.根据权利要求书19所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述稳定剂为乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸二钠。
23.根据权利要求书19所述的口腔护理组合物，其特征在于，所述防腐剂为聚赖氨酸、山梨酸钾、1,2-戊二醇、酒精、氯己定和双胍杀菌剂中的任意一种或多种；
优选的，所述防腐剂为山梨酸钾。
24.根据权利要求1-23中任一项所述的口腔护理组合物在制作口腔清洁用品、口腔护理用品及口腔消炎用品中的应用。
25.根据权利要求24所述的应用，其特征在于，所述口腔清洁用品包括牙膏、漱口水、口腔喷雾剂、口腔用凝胶、洁牙剂、口腔膜贴及调理剂。
26.一种漱口水，其特征在于，包含权利要求1-23中任一项所述的口腔护理组合物和水；
优选的，所述水在漱口水中的质量含量为60％-90％，所述口腔护理组合物的质量含量为10％-40％。
27.一种牙膏，其特征在于，包含权利要求书1-23中任一项所述的口腔护理组合物。
28.一种口腔凝胶，其特征在于，包含权利要求书1-23中任一项所述的口腔护理组合物。
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