CN115290581A - 抗Xa测定试剂盒(发色底物法) - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物技术领域,尤其涉及抗Xa测定试剂盒(发色底物法)。本发明试剂盒采用特定的稳定剂体系搭配试剂盒中其他组分,使得所述试剂盒在保证检测结果准确可靠的情况下,37℃热稳定性明显优于现有试剂盒,可常温储存,储存期更长。本发明提供的检测方法操作过程简便,仅需要建立一条校准曲线即可测试不同种类的肝素,包括普通肝素和低分子量肝素,两者建立的校准曲线是重合的。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,尤其涉及抗Xa测定试剂盒(发色底物法)。
背景技术
Xa(活化凝血因子X)是体内参与凝血过程的重要因子,是一种胰蛋白酶 样丝氨酸蛋白酶,同时作用于内源和外源两条凝血途径。Xa参与凝血的原理 是其与Va(活化凝血因子V)和磷脂表面的钙离子结合后,催化凝血酶原转化 成凝血酶,凝血酶进一步激活血小板,同时将纤维蛋白原转化成纤维蛋白, 最终导致凝血。具有抗Xa活性的主要有肝素(普通未分级肝素UFH和低分子 量肝素LMWH)、磺达肝素及Xa的直接抑制剂(利伐沙班、阿哌沙班和依度 沙班等)。目前临床上抗凝治疗使用的抗凝药物多以肝素类抗凝剂为主。肝 素是一种由葡萄糖胺,L-艾杜糖醛苷,N-乙酰葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸交替 组成的黏多糖硫酸脂,是应用最广泛的抗凝剂之一。肝素在凝血系统中的主 要作用就是增强抗凝血酶III(AT-III)的生物活性,同时抑制Xa,发挥抗凝作 用。普通未分级肝素,平均分子量在15000Da,可从猪和牛的肺组织中提取得 到,其在治疗过程中,会引起两种已知的副作用(骨质疏松症及肝素诱导的 血小板减少症),故需对其进行监测;低分子量肝素LMWH,是由普通未分 级肝素经过各种解聚方法得到,平均分子量在4000~6000Da,其抑制Xa的有效剂量明显低于UFH,同时具有生物利用度高,抗血栓作用强及对凝血系统影 响小,副作用少等特点,但由于低分子量肝素的清除主要在肾脏,因此对于 孕妇、肥胖者、儿童、老人和患有肾脏疾病或肾功能障碍的肝素治疗患者也 需进行监测。故研究准确检测肝素含量的方法具有很高的临床应用价值。
目前,检测肝素抗Xa活性的主要方法有凝固法和发色底物法,应用最广 泛的是发色底物法,近年来也更倾向于发色底物法。发色底物法测定肝素抗 Xa活性的原理是,肝素与血浆中的抗凝血酶III(AT-III)结合形成复合物,抑 制Xa活性,Xa与其特异性底物反应,释放出染料,该染料在405nm处有最大 吸收峰,可通过吸光值进而计算肝素抗Xa活性。发色底物法又细分两种,一 种是两步法,另一种是一步法。两步法原理是肝素与AT-III结合与Xa反应,然 后Xa再与其特异性底物反应,中国专利CN103063592A、CN103323416A、CN105203479A及CN107091814A是采用这种原理;一步法是肝素与AT-III结合 后,先加底物,再加Xa,底物与肝素-AT-III复合物不反应,待加入Xa后,肝 素-AT-III复合物抑制Xa及Xa与特异性底物结合这两个反应同时发生,中国专 利CN104062243A和CN108195783A是采用这种原理。
Xa因子在液体状态下不稳定,大多数采用冻干技术,由于冻干工艺较为 复杂,容易造成批间差大,使不同批次试剂的检测结果差异大。中国专利 CN107091814A公布了一种液体即用型血液肝素浓度的试剂,其为液体试剂, 开瓶即用,无需复溶,使用方便,但稳定时间仍不够长,37℃下仅可稳定21 天,并且测试过程较为繁琐,测试不同种类的肝素均需要建立相应的标准曲 线。中国专利CN108195783A公布了一种肝素活性测定试剂盒,虽然具有热稳 定性,但是热稳定时间较短,仅有14天。故,目前的技术中仍然存在测试繁 琐,热稳定性低的问题。
发明内容
针对上述问题,本发明目的在于提供一种热稳定性好、检测结果准确可 靠的抗Xa测定试剂盒及检测方法。
为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
抗Xa测定试剂盒,由R1试剂和R2试剂组成;
所述R1试剂由发色底物、缓冲剂、稳定剂和防腐剂组成,其中,所述稳 定剂选自棉子糖、牛血清白蛋白、壬基酚聚氧乙烯醚、聚乙烯吡咯烷酮及十 二烷基二甲基氧化胺中的一种或几种;
所述R2试剂由Xa因子、缓冲剂、抗凝剂、无机盐、稳定剂、防腐剂组 成;其中,所述稳定剂为羟乙基淀粉、羧甲基纤维素钠、牛血清白蛋白、曲 拉通X-100、抑肽酶、十四烷基三甲基溴化铵、聚山梨酯、聚乙烯醇、正缬氨 酸、甜菜碱中的一种或几种。
一些实施方案中,所述R1试剂中,稳定剂由棉子糖、壬基酚聚氧乙烯醚 和聚乙烯吡咯烷酮组成。具体地,在所述的R1试剂中稳定剂中各组分的浓度 优选为:1~5%(w/v)的棉子糖、0.01~2%(w/v)的壬基酚聚氧乙烯醚和 0.1~2%(w/v)的聚乙烯吡咯烷酮,进一步优选为2%(w/v)棉子糖,0.1%(w/v)壬 基酚聚氧乙烯醚和1%(w/v)聚乙烯吡咯烷酮。
本发明中,所述R1试剂组成为:
1~5mM发色底物、20~100mM缓冲剂、1~5%的棉子糖、0.01~2%的壬基 酚聚氧乙烯醚和0.1~2%(w/v)的聚乙烯吡咯烷酮和0.015~1.05%(w/v)防腐剂。
其中,发色底物为Suc-Ile-Glu-(γ-Piperidyl)-Gly-Arg-pNA·HCl(S-2732) 或Z-D-Arg-Gly-Arg-pNA·HCl(S-2765),优选浓度为1~5mMS-2732,更优 选为1.5mMS-2732;
缓冲剂选自咪唑、Tris-HCl、磷酸盐、HEPES中的一种或几种,pH为5~7, 优选pH5~7的20~100mM的咪唑,更优选为pH为6的50mM的咪唑;
防腐剂选自叠氮钠、ProClin300、环丙沙星、青霉素、生物防腐剂Krovin300 中的一种或几种,优选0.01~1%(w/v)叠氮钠和0.005~0.05%(w/v)环丙沙星的组 合,更优选为0.05%(w/v)叠氮钠和0.01%(w/v)环丙沙星的组合。
一些实施方案中,所述R2试剂中,稳定剂由羟乙基淀粉、牛血清白蛋白、 聚乙烯醇和正缬氨酸组成。在所述的R2试剂中稳定剂中各组分的浓度优选为: 0.01%~1%(w/v)羟乙基淀粉、1~5%(w/v)牛血清白蛋白、1~5%(w/v)聚乙烯醇和 1~5%(w/v)正缬氨酸,进一步优选为0.5%(w/v)羟乙基淀粉、3%(w/v)牛血清白 蛋白、2%(w/v)聚乙烯醇和3%(w/v)正缬氨酸。
本发明中所述R2试剂中,各组分浓度如下:
0.3~1.2IU/mLXa因子、50~200mM缓冲剂、10~50mM抗凝剂、 0.5~1.5%(w/v)无机盐、0.01%~1%(w/v)羟乙基淀粉、1~5%(w/v)牛血清白蛋白、 1~5%(w/v)聚乙烯醇、1~5%(w/v)正缬氨酸和0.01~1%(w/v)防腐剂。
其中,所述R2试剂中:
Xa因子为牛Xa因子、猪Xa因子或人Xa因子,猪Xa因子的浓度优选 0.3~1.2IU/mL,具体可为0.3、0.6或1.2IU/mL;
缓冲剂选自咪唑、Tris-HCl、磷酸盐、HEPES中的一种或几种,优选为 pH6~9的50~200mM的HEPES,具体可为pH8.5的100mMHEPES、pH8.5的 50mMHEPES或pH8.5的200mMHEPES;
抗凝剂为柠檬酸钠和EDTA·2Na中的一种或两者的混合物,优选为 10~50mMEDTA·2Na,具体浓度可为10mM、20mM或50mM;
所述无机盐为NaCl、KCl、CaCl2、MgCl2中的一种或几种,KCl的质量 百分比浓度优选为0.5~1.5%(w/v)的KCl,具体可为0.5%(w/v)、0.8%(w/v)或 1.5%(w/v);
所述防腐剂为叠氮钠、ProClin300、环丙沙星、硫酸庆大霉素、生物防腐 剂Krovin300等中的一种或几种,优选为0.01~1%(w/v)叠氮钠,具体可为 0.01%(w/v)叠氮钠、1%(w/v)叠氮钠或0.1%(w/v)叠氮钠。
本发明还提供一种检测抗Xa活性的方法,利用本发明所述的抗Xa测定 试剂盒检测待测样本的抗Xa活性,包括:
将待测样本与所述R1试剂孵育,然后加入所述R2试剂孵育,在405nm 波长处测定吸光值,根据将吸光值代入标准曲线中,获得待测样本的抗Xa活 性。
本发明提供的检测抗Xa活性的方法中,待测样本为普通肝素的样本或低 分子量肝素的样本。
所述标准曲线根据梯度浓度的肝素标准品溶液的吸光值和抗Xa活性建 立,见图1。其中,肝素标准品溶液的浓度为0.01IU/mL~2.10IU/mL,具体为 肝素标准品1:0.01IU/mL;肝素标准品2:0.76IU/mL;肝素标准品3:2.10IU/mL。
本发明试剂盒采用特定的稳定剂体系搭配试剂盒中其他组分,使得所述 试剂盒在保证检测结果准确可靠的情况下,37℃热稳定性明显优于现有试剂 盒,可常温储存,储存期更长。本发明提供的检测方法操作过程简便,仅需 要建立一条校准曲线即可测试不同种类的肝素,包括普通肝素和低分子量肝 素,两者建立的校准曲线是重合的。
附图说明
图1示本发明试剂盒检测普通肝素和低分子肝素的标准曲线图。
具体实施方式
本发明提供了一种操作简便,性能优良,热稳定性好的抗Xa测定试剂盒。 本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出 的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都 被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述, 相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进 行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
本发明采用的试材皆为普通市售品,皆可于市场购得。
下面结合实施例,进一步阐述本发明:
实施例1本发明试剂盒及稳定性测试
表1.现有试剂盒配方(对照组)
表2.本发明试剂盒配方(实验组①)
上述配方的试剂盒配制完成后,进行分装,放置于37℃电热恒温水槽中, 每隔一段时间进行取样在UP3000全自动凝血分析仪上测试2个质控品(1个 普通肝素质控品和1个低分子量肝素质控品),结果见下表所示(测试结果 的单位均为IU/mL),与0天的偏差在10%以下视为稳定,下述实验组②~实 验组⑧也这样操作及判断。
表3.对照组及实验组测试结果对比
由上表结果可知,对照组在0~7天是稳定的,与0天的相对偏差在10% 以下;与对照组相比,实验组的结果比较乐观,37℃下50天仍很稳定,保持 偏差在6%以下,远远优于对照组。
实施例2:
对照组试剂盒配方同表1,实验组②~⑦的试剂盒中,R1配方同表2,R2配 方见下表:
表4.实验组②~实验组⑦中R2配方
其中,实验组②~实验组⑦试剂盒的检测结果见下表5~表6。
表5.实验组②和实验组③的结果
表6.实验组④和实验组⑤的结果
表7.实验组⑥和实验组⑦的结果
由表5~表7的结果可知,稳定性效果由小到大的顺序为实验组②、实验 组③<实验组④、实验组⑤<实验组⑥、实验组⑦。
实施例3本发明试剂盒的相关性能检测实验
(1)准确性检测实验
检测方法:用可溯源至参考物质/有证参考物质(CRM)的高、中、低三 个浓度的企业参考品,对实验组①的试剂盒进行测试,重复检测3次,分别 计算相对偏差。如果3次结果的相对偏差在±15%范围内,即判为合格。
表8.准确度测试结果
(2)重复性检测实验
检测方法:用实验组①的试剂盒分别测试普通肝素质控品(低值、高值) 和低分子量肝素质控品(低值、高值),重复测定10次,计算CV%,CV% ≤10%即为合格。
表9.重复性测试结果
(3)线性检测实验
测试方法:将接近线性范围上限的高浓度样本(H)和接近线性范围下限 的低浓度样本(L)混合,至少制备5个不同稀释浓度的样本(xi),每个浓 度使用实验组①的试剂盒重复测定3次,分别求出检测结果的均值(yi)。以 稀释浓度(xi)为自变量,以检测结果均值(yi)为因变量求出线性回归方程, 应符合以下要求:
①普通肝素(UFH)线性至少涵盖0.1IU/ml—1.2IU/ml。在线性区间内, 线性回归方程的斜率在1±0.05范围内,相关系数(r)≥0.980;
②低分子肝素(LMWH)线性至少涵盖0.1IU/ml—2.0IU/ml。在线性区 间内,线性回归方程的斜率在1±0.05范围内,相关系数(r)≥0.980。
表10.普通肝素线性测试结果
表11.低分子量肝素线性测试结果
(4)检出限(灵敏度)检测实验
测试方法:使用2个批号的实验组①的试剂盒,对5份浓度近似检出限 (LOD)(检出限为0.1IU/mL,空白限为0.05IU/mL)的低值样本进行检测, 每份样本进行4次重复检测,连续检测3天,每个试剂批号需要总共至少60 个低水平样本结果,低于空白限数值的检测结果的数量应≤3个即为合格。
表12.普通肝素检出限测试结果
表13.低分子量肝素检出限测试结果
以上仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技 术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰, 这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.抗Xa测定试剂盒,其特征在于,由R1试剂和R2试剂组成;
所述R1试剂由发色底物、缓冲剂、稳定剂和防腐剂组成,其中,所述稳定剂选自棉子糖、牛血清白蛋白、壬基酚聚氧乙烯醚、聚乙烯吡咯烷酮及十二烷基二甲基氧化胺中的一种或几种;
所述R2试剂由Xa因子、缓冲剂、抗凝剂、无机盐、稳定剂、防腐剂组成;其中,所述稳定剂为羟乙基淀粉、羧甲基纤维素钠、牛血清白蛋白、曲拉通X-100、抑肽酶、十四烷基三甲基溴化铵、聚山梨酯、聚乙烯醇、正缬氨酸、甜菜碱中的一种或几种。
2.根据权利要求1所述的抗Xa测定试剂盒,其特征在于,所述R1试剂中,稳定剂由棉子糖、壬基酚聚氧乙烯醚和聚乙烯吡咯烷酮组成。
3.根据权利要求1所述的抗Xa测定试剂盒,其特征在于,所述R2试剂中,稳定剂由羟乙基淀粉、牛血清白蛋白、聚乙烯醇和正缬氨酸组成。
4.根据权利要求1~3任一项所述的试剂盒,其特征在于,
所述R1试剂组成为:
1~5mM发色底物、20~100mM缓冲剂、1~5%(w/v)的棉子糖、0.01~2%(w/v)的壬基酚聚氧乙烯醚和0.1~2%(w/v)的聚乙烯吡咯烷酮和0.015~1.05%(w/v)防腐剂。
5.根据权利要求1~4任一项所述的抗Xa测定试剂盒,其特征在于,所述R1试剂中:
发色底物为Suc-Ile-Glu-(γ-Piperidyl)-Gly-Arg-pNA·HCl或Z-D-Arg-Gly-Arg-pNA·HCl;
缓冲剂选自咪唑、Tris-HCl、磷酸盐、HEPES中的一种或几种,pH为5~7;
防腐剂选自叠氮钠、ProClin300、环丙沙星、青霉素、生物防腐剂Krovin300中的一种或几种。
6.根据权利要求1~5任一项所述的抗Xa测定试剂盒,其特征在于,所述R2试剂中各组分浓度如下:
0.3~1.2IU/mLXa因子、50~200mM缓冲剂、10~50mM抗凝剂、0.5~1.5%(w/v)无机盐、0.01%~1%(w/v)羟乙基淀粉、1~5%(w/v)牛血清白蛋白、1~5%(w/v)聚乙烯醇、1~5%(w/v)正缬氨酸和0.01~1%(w/v)防腐剂。
7.根据权利要求1~6任一项所述的抗Xa测定试剂盒,其特征在于,所述R2试剂中:
Xa因子为牛Xa因子、猪Xa因子或人Xa因子;
缓冲剂选自咪唑、Tris-HCl、磷酸盐、HEPES中的一种或几种;
抗凝剂为柠檬酸钠和EDTA·2Na中的一种或两者的混合物。
8.一种检测抗Xa活性的方法,其特征在于,利用权利要求1~7任一项所述的抗Xa测定试剂盒检测待测样本的抗Xa活性,包括:
将待测样本与所述R1试剂孵育,然后加入所述R2试剂孵育,在405nm波长处测定吸光值,根据将吸光值代入标准曲线中,获得待测样本的抗Xa活性。
9.根据权利要求8所述的检测方法,其特征在于,所述标准曲线根据梯度浓度的低分子量肝素标准品溶液的吸光值和抗Xa活性建立。
10.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述低分子量肝素标准品溶液的浓度为0.01IU/mL~2.10IU/mL。
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Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070037236A1 (en) * | 2005-08-12 | 2007-02-15 | Dade Behring Marburg Gmbh | Factor Xa-based heparin assay using a heparin-modifying component |
US20120202232A1 (en) * | 2011-02-07 | 2012-08-09 | Siemens Healthcare Diagnostics Products Gmbh | Heparin-insensitive Method for Determining Direct Coagulation Factor Inhibitors |
CN107091814A (zh) * | 2017-06-23 | 2017-08-25 | 宁波艾科生物科技有限公司 | 一种液体即用型血液肝素浓度的检测试剂 |
CN107153043A (zh) * | 2017-06-23 | 2017-09-12 | 宁波艾科生物科技有限公司 | 一种液体即用型抗凝血酶ⅲ活性测定试剂 |
CN108195783A (zh) * | 2018-01-30 | 2018-06-22 | 迈克生物股份有限公司 | 肝素活性测定试剂盒 |
CN108982865A (zh) * | 2018-08-16 | 2018-12-11 | 上海原科实业发展有限公司 | 一种血栓弹力图法肝素定量检测试剂盒及其制备方法 |
-
2021
- 2021-10-11 CN CN202111180757.XA patent/CN115290581B/zh active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070037236A1 (en) * | 2005-08-12 | 2007-02-15 | Dade Behring Marburg Gmbh | Factor Xa-based heparin assay using a heparin-modifying component |
US20120202232A1 (en) * | 2011-02-07 | 2012-08-09 | Siemens Healthcare Diagnostics Products Gmbh | Heparin-insensitive Method for Determining Direct Coagulation Factor Inhibitors |
CN107091814A (zh) * | 2017-06-23 | 2017-08-25 | 宁波艾科生物科技有限公司 | 一种液体即用型血液肝素浓度的检测试剂 |
CN107153043A (zh) * | 2017-06-23 | 2017-09-12 | 宁波艾科生物科技有限公司 | 一种液体即用型抗凝血酶ⅲ活性测定试剂 |
CN108195783A (zh) * | 2018-01-30 | 2018-06-22 | 迈克生物股份有限公司 | 肝素活性测定试剂盒 |
CN108982865A (zh) * | 2018-08-16 | 2018-12-11 | 上海原科实业发展有限公司 | 一种血栓弹力图法肝素定量检测试剂盒及其制备方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN115290581B (zh) | 2023-10-13 |
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GR01 | Patent grant | ||
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