CN115286673B - 来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物及提取方法与应用 - Google Patents
来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物及提取方法与应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115286673B CN115286673B CN202210767123.2A CN202210767123A CN115286673B CN 115286673 B CN115286673 B CN 115286673B CN 202210767123 A CN202210767123 A CN 202210767123A CN 115286673 B CN115286673 B CN 115286673B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- acid
- drug
- compound
- pharmaceutically acceptable
- acceptable salt
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 22
- -1 sesquiterpene compound Chemical class 0.000 claims abstract description 19
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 18
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- 229930004725 sesquiterpene Natural products 0.000 claims abstract description 5
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims description 18
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims description 17
- 241000607272 Vibrio parahaemolyticus Species 0.000 claims description 15
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 14
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 claims description 14
- 241000293755 Carteriospongia foliascens Species 0.000 claims description 12
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 claims description 12
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 claims description 12
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 claims description 11
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 claims description 11
- 241000607265 Vibrio vulnificus Species 0.000 claims description 11
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 claims description 11
- 229940032049 enterococcus faecalis Drugs 0.000 claims description 11
- 241000243142 Porifera Species 0.000 claims description 10
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 10
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229940124350 antibacterial drug Drugs 0.000 claims description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 6
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 6
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 5
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 claims description 5
- 238000003817 vacuum liquid chromatography Methods 0.000 claims description 5
- 241000502280 Clitocybe Species 0.000 claims description 4
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 claims description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 4
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 3
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 3
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims description 3
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 claims description 2
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 claims description 2
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N diphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(O)=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 2
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 claims description 2
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 claims description 2
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 claims description 2
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 claims description 2
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 abstract description 12
- 229930002368 sesterterpene Natural products 0.000 abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 6
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 6
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 6
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- GVFFAMRIFGYUEO-NWZCTALXSA-N 4,4,8,17,17a-pentamethyl-17a-homoandrostane Chemical compound C1CCC(C)(C)C2CC[C@@]3(C)C4CCC(C)C(C)[C@@]4(C)CCC3[C@]21C GVFFAMRIFGYUEO-NWZCTALXSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000098177 Phyllospongia lamellosa Species 0.000 description 3
- 238000002114 high-resolution electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 229930014547 scalarane Natural products 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 150000002611 lead compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229930014652 scalarane sesterterpene Natural products 0.000 description 2
- 150000002653 sesterterpene derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 1
- 241000243143 Demospongiae Species 0.000 description 1
- 241000264871 Dictyoceratida Species 0.000 description 1
- 241000024458 Paractenopsyllus madagascarensis Species 0.000 description 1
- 241000498044 Phyllospongia Species 0.000 description 1
- 241000264873 Spongiidae Species 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 238000011482 antibacterial activity assay Methods 0.000 description 1
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 238000002815 broth microdilution Methods 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical class 0.000 description 1
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 description 1
- 150000001783 ceramides Chemical class 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- USIUVYZYUHIAEV-UHFFFAOYSA-N diphenyl ether Chemical class C=1C=CC=CC=1OC1=CC=CC=C1 USIUVYZYUHIAEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000001968 scalaranes Chemical class 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000012306 spectroscopic technique Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N vitamin D2 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J3/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, substituted in position 17 beta by one carbon atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J3/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, substituted in position 17 beta by one carbon atom
- C07J3/005—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, substituted in position 17 beta by one carbon atom the carbon atom being part of a carboxylic function
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物或其药用盐，结构选自以下结构的一种：
Description
技术领域
本发明属于海洋生物医药技术领域，具体涉及一种从杯叶海绵Phyllospongiafoliascens中经提取、分离纯化得到的降二倍半萜类化合物及提取方法与应用。
背景技术
海洋高压、高盐、缺少光照等生存环境，导致海绵等海洋底栖生物在进化的过程中形成了独特的化学防御能力，从而产生许多结构新颖、活性显著的次级代谢产物，这些代谢产物是创新药物的重要来源和新的突破口，一直是天然药物学家的研究对象。药源材料杯叶海绵Phyllospongia foliascens属寻常海绵纲(Demospongiae)，网角海绵目(Dictyoceratida)，角骨海绵科(Spongiidae)海绵，产自西沙群岛附近海域。Phyllospongia属海绵的化学成分研究多集中在P.foliascens、P.dendyi、P.lamellosa、P.papyracea和P.madagascarensis等种，富含萜类成分。目前，文献报道该种属的化学成分主要是变型碳架的scalarane型二倍半萜类、二苯基醚类、甾体、甘油糖脂和神经酰胺类等。其中的scalarane型二倍半萜化合物显示有抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗炎等多种生物活性。从该种属中分离得到的scalarane型二倍半萜化合物12α-acetoxy-13β,18β-cyclobutan-20,24-dimethyl-24-oxoscalar-16-en-25β-ol对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis有非常良好的抗菌活性，MIC值分别为1.8μg/mL和1.7μg/mL(参见文献：Hassan M,Rateb M E,Hetta M,et al.Scalarane sesterterpenes fromthe Egyptian Red Sea sponge Phyllospongia lamellosa.Tetrahedron,2015,71(4):577-583.)。
目前，文献报道的scalarane型二倍半萜类化合物都是6/6/6/6环骈合的母核结构，未见报道从该属海绵中分离得到具有抗肿瘤活性的罕见6/6/6/5环骈合scalarane型降二倍半萜类化合物，抗菌活性也未见文献报道
发明内容
本发明的第一目的是提供一种来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物。
本发明的第二目的是提供一种所述来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物的提取方法。
本发明的第三目的是提供一种所述来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物在制备抗菌药物中的应用。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
本发明的第一方面提供了一种来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物或其药用盐，结构选自以下结构的一种：
所述来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物是从杯叶海绵Phyllospongiafoliascens中经提取、分离纯化得到。
所述药用盐选自有机酸盐、无机酸盐。
所述无机酸选自盐酸、硫酸、磷酸、二磷酸、氢溴酸、硝酸。
所述有机酸选自乙酸、马来酸、富马酸、酒石酸、琥珀酸、乳酸、对甲苯磺酸、水杨酸、草酸。
本发明的第二方面，提供了一种所述来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物的提取方法，包括以下步骤：
第一步，制备总提物：
将干燥的杯叶海绵Phyllospongia foliascens粉碎后，用体积比为1:1的二氯甲烷:甲醇混合溶剂超声提取，杯叶海绵Phyllospongia foliascens与混合溶剂的质量体积比为1:(1.5～3)，每次至少1小时，共2～5次，合并提取液，减压浓缩得到总提物；
第二步，分离纯化：
①将第一步获得的总提物经减压液相柱色谱VLC，以石油醚:乙酸乙酯＝100:1，50:1，25:1，10:1，5:1，3:1，1:1为溶剂进行梯度洗脱，根据TLC薄层层析显色合并相似流分，得到11个组分Fr.A–K；
②对组分Fr.F进行正相硅胶柱色谱，石油醚:乙酸乙酯＝1:0，20:1，15:1，10:1，5:1为溶剂进行梯度洗脱，根据TLC薄层层析显色合并相似流分，得到6个组分Fr.F1–F6；
③对组分Fr.F5组经反相高效液相，条件为98％甲醇/水，水中含有0.1％甲酸，流速2mL/min，检测波长为236nm，得到化合物1(保留时间为25.0分钟)和化合物2(保留时间为27.8分钟)。
本发明的第三方面，提供了一种所述来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物或其药用盐在制备抗菌药物中的应用。
所述抗菌药物选自抗创伤弧菌(Vibrio vulnificus)药物、抗副溶血弧菌(VibrioParahemolyticus)药物、抗大肠杆菌(Escherichia coli)药物、抗金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)药物、抗粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)药物、抗枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)药物、抗绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)药物。
体外抗菌实验结果显示，本发明的化合物对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)、副溶血弧菌(Vibrio Parahemolyticus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)的生长都具有强烈的抑制活性，其抑菌活性MIC值大小与阳性对照药氯霉素相当。
本发明的化合物1和化合物2的抑菌活性和抗菌谱优于文献报道(Tetrahedron,2015,71:577-583.)的同类scalarane型化合物phyllospongin C的抑制活性；本发明化合物1和2对副溶血弧菌(Vibrio Parahemolyticus)的生长都具有强烈的抑制活性，其抗菌活性MIC值分别为4μg/mL和2μg/mL，远优于化合物phyllospongin C的抗菌活性(均>20μg/mL)。
由于采用上述技术方案，本发明具有以下优点和有益效果：
本发明的来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物为研究和开发新的抗菌药物提供了新的先导化合物，为开发利用我国海洋药用资源提供了科学依据。
本发明的来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物经体外活性试验证明，对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)、副溶血弧菌(VibrioParahemolyticus)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)等多种细菌具有显著的抗菌活性，本发明的化合物1对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)抑制的MIC值为2μg/mL，效果与阳性对照药氯霉素(MIC值为2μg/mL)相当，本发明的化合物2对副溶血弧菌(Vibrio Parahemolyticus)、大肠杆菌(Escherichia coli)和枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)抑制的MIC值分别为2μg/mL、2μg/mL和2μg/mL，效果与阳性对照药氯霉素(MIC值为2μg/mL)相当；另外特别值得一提的是，本发明的化合物2对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)抑制的MIC值为2μg/mL，效果明显优于阳性对照药氯霉素(MIC值为4μg/mL)，部分结果优于文献报道的相似结构PhyllosponginA(对Bacillus subtilis的MIC值为10.3μg/mL，参见文献：Hassan M,Rateb M E,Hetta M,et al.Scalaranesesterterpenes from the Egyptian Red Sea sponge Phyllospongialamellosa.Tetrahedron,2015,71(4):577-583.)。因此，可以将它们用于抗菌药物的开发。
具体实施方式
为了更清楚地说明本发明，下面结合优选实施例对本发明做进一步的说明。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。
本发明所用的杯叶海绵Phyllospongia foliascens于2019年12月采自西沙群岛附近海域，由上海交通大学医学院仁济医院林厚文教授鉴定，样本保存在海军军医大学特色医学中心海洋生物医药与极地医学研究室，样品编号为XS-2019.12。文献(Zhang Hong-Jun，Yi Yang-Hua，Yang Fan，Chen Wan-Sheng，Lin Hou-Wen.Sesterterpenes and a newsterol from the marine sponge Phyllospongia foliascens.Molecules,2010,15(2):834-841.)记载公开了杯叶海绵Phyllospongia foliascens。
实施例1
本发明化合物的制备
第一步，制备总提物：
将600.0g干燥的杯叶海绵Phyllospongia foliascens粉碎后，用1000mL二氯甲烷:甲醇(1:1)混合溶剂超声提取，每次1小时，共3次，合并提取液，减压浓缩得到29.7g总提物。
第二步，分离纯化：
①将总提物经减压液相柱色谱(VLC)，以石油醚:乙酸乙酯＝100:1，50:1，25:1，10:1，5:1，3:1，1:1为溶剂进行梯度洗脱，根据TLC薄层层析显色合并相似流分，得到11个组分Fr.A–K；
②对组分Fr.F进行正相硅胶柱色谱，石油醚:乙酸乙酯＝1:0，20:1，15:1，10:1，5:1为溶剂进行梯度洗脱，根据TLC薄层层析显色合并相似流分，得到6个组分Fr.F1–F6；
③对组分Fr.F5组经反相高效液相，条件为98％甲醇/水(0.1％甲酸)，流速2mL/min，检测波长为236nm，即得化合物1(保留时间为25.0分钟)和化合物2(保留时间为27.8分钟)。
化合物1和化合物2的结构如下所示：
第三步，结构鉴定
化合物1和化合物2经UV、IR、HRESIMS、NMR等多种现代光谱技术，确定了化学结构。
化合物1：无色油状；UV(MeOH)λmax 224(3.50)；IR(KBr)vmax 2954,2926,28682851,1712,1687,1611,1566,1460,1437,1413,1377,1327,1268,1246,1175,1104,1080,1032,1012,978,945cm–1；HRESIMS m/z[M+Na]+467.3491(Calcd.C29H46O3Na)；1H和3C NMR核磁共振谱数据见表1所示。
化合物2：无色油状；UV(MeOH)λmax 224(3.43)；IR(KBr)vmax 2956,2924,2868,28511712,1611,1566,1460,1413,1327,1268,1175,1104,1032,1012,978,777cm–1；HRESIMS m/z[M+Na]+495.3442(Calcd.C30H48O4Na)；1H和3C NMR核磁共振谱数据见表1所示。
表1化合物1和化合物2的核磁共振谱数据
a Measured at 500MHz for 1HNMR and 125MHz for 13C NMR in CDCl3；
b Measured at 500MHz for 1H NMR and 125MHz for 13C NMR in MeOD-d4.
实施例2
本发明化合物的体外抗菌活性实验：
实验方法：改良肉汤稀释法(Waitz JA.Methods for DilutionAntimicrobialSusceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically；Approved Standard—Eighth Edition.Clinical&Laboratory Standards Institute，2002.)
分别取50μL待测指示菌株大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)接入营养肉汤培养基进行活化，创伤弧菌(Vibrio vulnificus)、副溶血弧菌(Vibrio Parahemolyticus)接入脑心浸液肉汤进行活化，37℃，180r/min摇床培养10h进行活化，测定OD值范围为0.6-0.8方可后续使用。将上述活化的菌液用灭菌的营养肉汤按1:1000稀释后备用。将样品和阳性对照氯霉素分别用DMSO溶解成1mg/mL，之后用营养肉汤稀释成浓度为128μg/mL。取灭菌的96孔板，第一孔直接加200μL的样品原液，其余每孔加入营养肉汤100μL，从第一孔中吸出100μL加入第二孔，混匀再吸取100μL至第3孔，如此连续倍半稀释至第8孔，并从第9孔中吸取100μL弃去，第9孔为空白对照，随后将96孔板放于37℃培养箱中培养16h，以恰好能够完全抑制小孔内细菌生长的药物浓度为最小抑菌浓度(MIC)，每组重复三次，结果如表2所示。
表2：化合物抗指示菌最小抑菌浓度(MIC，μg/mL)
实验结果：表2结果显示，本发明的化合物1和化合物2对创伤弧菌(Vibriovulnificus)、副溶血弧菌(Vibrio Parahemolyticus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)都具有很好的抑制活性，对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑制活性与阳性对照氯霉素相当，表明化合物具有抗菌活性，因此本发明的化合物1和化合物2可以作为抗菌药物的先导化合物。
以上所述仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专利的技术人员在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述提示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明方案的范围内。
Claims (6)
1.一种来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物或其药用盐，其特征在于，结构选自以下结构的一种：
2.根据权利要求1所述的来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物或其药用盐，其特征在于，所述来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物是从杯叶海绵Phyllospongiafoliascens中经提取、分离纯化得到。
3.根据权利要求1所述的来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物或其药用盐，其特征在于，所述药用盐选自有机酸盐、无机酸盐。
4.根据权利要求3所述的来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物或其药用盐，其特征在于，所述无机酸选自盐酸、硫酸、磷酸、二磷酸、氢溴酸、硝酸；
所述有机酸选自乙酸、马来酸、富马酸、酒石酸、琥珀酸、乳酸、对甲苯磺酸、水杨酸、草酸。
5.一种权利要求1至4任一项所述的来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
第一步，制备总提物：
将干燥的杯叶海绵Phyllospongiafoliascens粉碎后，用体积比为1:1的二氯甲烷:甲醇混合溶剂超声提取，杯叶海绵Phyllospongiafoliascens与混合溶剂的质量体积比为1:(1.5～3)，每次至少1小时，共2～5次，合并提取液，减压浓缩得到总提物；
第二步，分离纯化：
①将第一步获得的总提物经减压液相柱色谱VLC，以石油醚:乙酸乙酯＝100:1，50:1，25:1，10:1，5:1，3:1，1:1为溶剂进行梯度洗脱，根据TLC薄层层析显色合并相似流分，得到11个组分Fr.A–K；
②对组分Fr.F进行正相硅胶柱色谱，石油醚:乙酸乙酯＝1:0，20:1，15:1，10:1，5:1为溶剂进行梯度洗脱，根据TLC薄层层析显色合并相似流分，得到6个组分Fr.F1–F6；
③对组分Fr.F5组经反相高效液相，条件为98％甲醇/水，水中含有0.1％甲酸，流速2mL/min，检测波长为236nm，得到化合物1和化合物2。
6.一种权利要求1至4任一项所述的来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物或其药用盐在制备抗菌药物中的应用，其特征在于，所述抗菌药物选自抗创伤弧菌药物、抗副溶血弧菌药物、抗大肠杆菌药物、抗金黄色葡萄球菌药物、抗粪肠球菌药物、抗枯草芽孢杆菌药物、抗绿脓杆菌药物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210767123.2A CN115286673B (zh) | 2022-07-01 | 2022-07-01 | 来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物及提取方法与应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210767123.2A CN115286673B (zh) | 2022-07-01 | 2022-07-01 | 来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物及提取方法与应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115286673A CN115286673A (zh) | 2022-11-04 |
| CN115286673B true CN115286673B (zh) | 2024-05-03 |
Family
ID=83823038
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210767123.2A Active CN115286673B (zh) | 2022-07-01 | 2022-07-01 | 来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物及提取方法与应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115286673B (zh) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102659912A (zh) * | 2012-03-27 | 2012-09-12 | 中国科学院烟台海岸带研究所 | 一种多氧二倍半萜类化合物及其制备和应用 |
-
2022
- 2022-07-01 CN CN202210767123.2A patent/CN115286673B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102659912A (zh) * | 2012-03-27 | 2012-09-12 | 中国科学院烟台海岸带研究所 | 一种多氧二倍半萜类化合物及其制备和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115286673A (zh) | 2022-11-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108299462B (zh) | 混源萜化合物及其分离方法和应用 | |
| CN113831245B (zh) | 大苞荆芥提取物中的二萜及其制备方法和应用 | |
| Yan et al. | Bioactive terpenoids from Santalum album derived endophytic fungus Fusarium sp. YD-2 | |
| CN113861008A (zh) | 大苞松香二萜及其制备方法和作为制备预防或/和治疗炎症的抗炎、抗菌药物中的应用 | |
| CN114044734B (zh) | 松香烷二萜及其制备方法和应用 | |
| CN107674891B (zh) | 一种从球毛壳菌中提取嗜氮酮类化合物的方法 | |
| CN115286673B (zh) | 来源于杯叶海绵的降二倍半萜类化合物及提取方法与应用 | |
| CN117603221A (zh) | 一种小分子化合物或其药学上可接受的盐、其用途及提取方法 | |
| CN110407792B (zh) | 源于草酸青霉的黑麦酮酸类化合物Secalonic acid J及制备方法 | |
| CN115536645B (zh) | 化合物Phomolide B及其制备方法和在抗菌药物中的应用 | |
| CN113861126B (zh) | 高度氧化二萜及其制备方法和作为制备预防或/和治疗炎症的抗炎、抗菌药物中的应用 | |
| CN113943211B (zh) | 维吾尔药材中二萜及其制备方法和作为制备预防或/和治疗炎症的抗炎、抗菌药物中的应用 | |
| CN110330544A (zh) | 一种4,4,1-双环甾类化合物及其制备方法和用途 | |
| CN114957285A (zh) | 一种稠合醚环单萜吲哚生物碱类化合物、制备方法和应用 | |
| CN109232384B (zh) | 马兜铃内酰胺类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN115304658B (zh) | 一种Scalarane降二倍半萜类化合物及其提取方法与应用 | |
| CN110407797B (zh) | 源于草酸青霉的黑麦酮酸类化合物Secalonic acid K及制备方法 | |
| CN113004237A (zh) | 一种螺环化合物及其制备方法和应用 | |
| CN113480557B (zh) | 聚酮类化合物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN106397459B (zh) | 硫代二酮哌嗪类化合物及其应用 | |
| CN114835725B (zh) | 一种降二萜类化合物及其制备方法和用途 | |
| CN115181083B (zh) | 化合物Cyophiobiolins A-B制备方法及其在制备抗炎药物中的应用 | |
| CN115583953B (zh) | 喹唑啉酮生物碱类化合物及其制备方法与应用 | |
| CN109652468B (zh) | 一种抗肿瘤化合物的制备方法及其应用 | |
| CN109575040B (zh) | 一种具有抗菌活性的化合物及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |