CN115281090B - 一种水紫树的组培快繁的方法 - Google Patents

一种水紫树的组培快繁的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种水紫树的组培快繁的方法，可有效获得水紫树的无菌系瓶苗，外植体接种污染率在15％以下，增殖培养基配方的特点是能有效激活侧芽、腋芽的活性，通过60至90天的培养，可获得3.5以上的增殖效率。继代培养可提升增殖芽的健壮程度，使茎秆变壮，节间明显，叶片厚实。然后，将高度在2至3cm的无菌苗接种在生根培养基上进行生根培养，生根周期为45天，生根率为80.5％，平均根数为3.2，平均根长为2.5cm，经过练苗程序即可供应优质水紫树种苗。

Description

一种水紫树的组培快繁的方法
技术领域
本发明涉及植物种植技术领域，具体涉及一种水紫树的组培快繁的方法。
背景技术
水紫树(Nyssa aquatica)为耐水湿生境的高大落叶乔木树种，是紫树科蓝果树属植物，树高30米；树叶卵形，长10～15厘米，下表面被毛；叶柄长、多毛，叶正面亮绿，反面灰白。秋季红紫色或黄色。3、4月开淡绿色小花，雌花有长梗，较出叶早或同时。果实紫红色，椭圆型核果(果实)长1-4厘米，果核尖棱。水紫树原生于在美国南方海岸平原沼泽、河滩地。因此根周期性地浸在水中。其生长较快，树冠较窄。单叶互生，叶长10～18厘米，秋季叶色金黄。喜光，适应性强，极耐水湿，能长期在水涝条件下生存和生长适宜在低洼地、水边、田边种植，是低湿地片林和水网平原农田防护林的理想树种。
水紫树的价值：水紫树具有生长快，树冠窄、适应性强，耐水湿等特点。在绿化工程中适用于低洼地、水边、田边种植，是低湿地片林和水网平原农田防护林的理想树种，在绿化中具有重要作用和价值。其优点为树体挺拔，材质好，出材量大，基部有明显膨大特征，秋叶金黄色，且叶形美观。它由幼苗逐渐变为细长的树干和圆鼓的树根。一棵成熟紫树可作为生产家具和条板箱的商业木材。水紫树的圆鼓的树根是木雕刻师偏爱的木头来源。
植物组织培养技术又称离体培养，是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官、组织或细胞以及原生质体，在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株，是一种被广泛应用的植物繁殖技术手段，尤其是针对一些母本材料较少或自然收获的种子出苗率极低，采用扦插等手段很难获得再生植株但又极具市场前景的园林材料，通过植物组织培养技术可以在短时间内获得批量优质种苗，同时又能保留母本材料树体挺拔，秋叶金黄的优秀园林特性，最大限度降低其繁殖的成本，获得相应的经济和社会效益。
相比于采用播种育苗技术而言，组培更能在相对较短的时间内获得数量大且整齐度高，园艺观赏品质更加稳定的优质种苗。扦插成活率极低，无法满足生产中批量种苗的需要。相对扦插繁殖技术而言，组培方式受到母本材料的限制更少一些，可以在有限的母株材料下批量化生产优良单株苗。
发明内容
本发明旨在提供了一种水紫树的组培快繁的方法，该方法可有效获得水紫树的无菌系瓶苗，外植体接种污染率在15％以下。增殖培养基配方的特点是能有效激活侧芽、腋芽的活性，通过60至90天的培养，可获得3.5以上的增殖效率。继代培养可提升增殖芽的健壮程度，使茎秆变壮，节间明显，叶片厚实。然后，将高度在2至3cm的无菌苗接种在生根培养基上进行生根培养，生根周期为45天，生根率为80.5％，平均根数为3.2，平均根长为2.5cm。
本发明的技术方案如下：
一种水紫树的组培快繁的方法，包括以下步骤：
将消毒后的水紫树顶芽的外植体在无菌条件下接种于启动培养基上，进行启动培养，选择生长势强的健壮无菌芽接种到增殖培养基上进行增殖培养，选择伸长生长的无菌芽接种在继代培养基上进行继代培养，得到水紫树无菌系种苗；将高度在2-3cm的水紫树无菌系种苗接种在生根培养基上进行生根培养。
所述消毒，包括以下步骤：
清理枝条表面的杂物和污染源，用流水和肥皂水分别浸泡，冲洗干净后，在超净工作台上先用酒精消毒，再用升汞消毒，无菌水冲洗后，吸干水分；
优选的，所述流水冲洗至少30min；
所述肥皂水冲洗30-60min；
所述酒精的体积百分比浓度为75％，所述酒精消毒的时间为1-2min；
所述升汞的体积百分比浓度为0.1％，所述升汞消毒的时间为20-30min；
所述无菌水冲洗的次数为3-5次。
优选的，从健壮的水紫树母本植株上采集顶芽饱满的枝条作为组织培养的所述外植体。
优选的，当春季时，使用的所述启动培养基包括：
WPM+6-BA 0.5-1.5mg/L+KT 0.5-1.5mg/L+IBA 0.5-1.0mg/L+2，4-D 0.01-0.05mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖20-30g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L。
当夏季或秋季时，使用的所述启动培养基包括：
WPM+GA3 0.2-0.5mg/L+6-BA 0.5-1.5mg/L+KT 0.5-1.5mg/L+IBA 0.5-1.5mg/L+2，4-D 0.01-0.05mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖20-30g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L。
优选的，所述启动培养在昼夜交替的培养环境中进行；
所述启动培养的环境温度为24-26℃；
所述启动培养的光照强度为5000-9000lx，每天所述光照时间为10-14h；
所述启动培养的时间为60-90天。
优选的，所述增殖培养基包括：WPM+6-BA 0.5-1.5mg/L+KT 0.5-1.5mg/L+IBA0.5-1.5mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖20-30g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L；
所述增殖培养的时间为60-90天。
优选的，所述继代培养基包括：WPM+6-BA 0.5-1.5mg/L+NAA 0.5-1.5mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖20-30g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L；
所述继代培养的时间为50-70天。
优选的，所述生根培养基包括：1/2NH4NO3浓度减半处理的WPM+NAA 0.5-1.5mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖15-20g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L；
所述生根培养的时间为30-45天。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)本发明所所提供的水紫树的组培快繁的方法，可有效获得水紫树的无菌系瓶苗，外植体接种污染率在13％以下，启动周期为60天，可根据瓶苗内芽的长度分批次转接到增殖配方下进行增殖培养，增殖培养的周期是60至90天，增殖系数在3.5左右。
(2)本发明所所提供的水紫树的组培快繁的方法，根据生产需要进行继续扩增或开展继代生长培养，增殖周期为60至90天，继代周期为50-70天。
(3)本发明所所提供的水紫树的组培快繁的方法，将高度在2至3cm的无菌苗接种在生根培养基上进行生根培养，生根周期为45天，生根率为80.5％，平均根数为3.2，平均根长为2.5cm。
(4)本发明所所提供的水紫树的组培快繁的方法，对各培养基的成分进行调整，均是最为合适的培养基配方，搭配使用能达到预期的组培扩繁效果。
具体实施方式
本发明所提供的一种水紫树的组培快繁的方法，包括以下步骤：
将消毒后的水紫树的外植体在无菌条件下接种于启动培养基上，进行启动培养，选择生长势强的健壮无菌芽接种到增殖培养基上进行增殖培养，选择伸长生长的无菌芽接种在继代培养基上进行继代培养，得到水紫树无菌系种苗；将高度在2-3cm的水紫树无菌系种苗接种在生根培养基上进行生根培养。
水紫树作为江南地区邻水景观树种的母本植株材料较少，本发明通过植物组培的方式已经建立了水紫树的无菌系，筛选出了增殖系数较高的增殖配方和生根配方，掌握了水紫树组培苗练苗技术要点，对水紫树的产业化发展提供技术支持。
在本发明一些优选的实施例中，从健壮的水紫树母本植株上采集顶芽饱满的枝条作为组织培养的所述外植体，保证培养的成活率和质量。
在本发明一些优选的实施例中，消毒具体包括：
清理枝条表面的杂物和污染源，用流水和肥皂水分别浸泡，冲洗干净后，在超净工作台上先用酒精消毒，再用升汞消毒，无菌水冲洗后，吸干水分，保证培养过程冲植株不被感染。
进一步地，所述流水冲洗30-60min，清除外植体表面的灰尘等杂质。
进一步地，所述肥皂水浸泡30-60min。
进一步地，所述酒精的浓度为75％，更进一步优选的，所述酒精消毒的时间为1-2min。
进一步地，所述升汞的浓度为0.1％，更进一步优选的，所述升汞消毒的时间为20-30min。
进一步地，所述无菌水冲洗的次数为3次以上，最佳为5次。
对消毒过程进行限定，保证消毒的可靠性。
在本发明一些优选的实施例中，当春季时，使用的所述启动培养基包括：WPM+6-BA(6-苄基嘌呤)0.5-1.5mg/L+KT(激动素)0.5-1.5mg/L+IBA(吲哚丁酸)0.5-1.5mg/L+2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸)0.01-0.05mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖20-30g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L。如表1所示。
表1春季启动培养基的具体组成
试剂名称 标准化剂量(mg/L)
<![CDATA[NH<sub>4</sub>NO<sub>3</sub>]]> 400
<![CDATA[K<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>]]> 990
<![CDATA[KH<sub>2</sub>PO<sub>4</sub>]]> 170
<![CDATA[Ca(NO<sub>3</sub>)<sub>2</sub>·4H<sub>2</sub>O]]> 556
<![CDATA[MgSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O]]> 370
<![CDATA[FeSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O]]> 27.8
Na2-EDTA 37.3
<![CDATA[MnSO<sub>4</sub>·4H<sub>2</sub>O]]> 22.5
<![CDATA[ZnSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O]]> 8.6
<![CDATA[CuSO<sub>4</sub>·5H<sub>2</sub>O]]> 0.25
<![CDATA[H<sub>3</sub>BO<sub>3</sub>]]> 6.2
<![CDATA[Na<sub>2</sub>MoO<sub>4</sub>·2H<sub>2</sub>O]]> 0.25
肌醇 100
VB5 0.5
VB1 1.0
VB6 0.5
甘氨酸 2
6-BA 0.5-1.5
IBA 0.1-1.0
KT 0.5-1.5
2，4-D 0.01-0.05
琼脂粉 6.5g/L
蔗糖 20-30g/L
活性炭 0.3-0.8g/L
pH 5.5-5.8
在本发明一些优选的实施例中，当夏秋季时，使用的所述启动培养基包括：
WPM+GA3(赤霉酸)0.2-0.5mg/L+6-BA 0.5-1.5mg/L+KT 0.5-1.5mg/L+IBA 0.5-1.5mg/L+2，4-D 0.01-0.05mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖20-30g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L。如表2所示。
表2夏秋季启动培养基的具体组成
试剂名称 标准化剂量(mg/L)
<![CDATA[NH<sub>4</sub>NO<sub>3</sub>]]> 400
<![CDATA[K<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>]]> 990
<![CDATA[KH<sub>2</sub>PO<sub>4</sub>]]> 170
<![CDATA[Ca(NO<sub>3</sub>)<sub>2</sub>·4H<sub>2</sub>O]]> 556
<![CDATA[MgSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O]]> 370
<![CDATA[FeSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O]]> 27.8
Na2-EDTA 37.3
<![CDATA[MnSO<sub>4</sub>·4H<sub>2</sub>O]]> 22.5
<![CDATA[ZnSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O]]> 8.6
<![CDATA[CuSO<sub>4</sub>·5H<sub>2</sub>O]]> 0.25
<![CDATA[H<sub>3</sub>BO<sub>3</sub>]]> 6.2
<![CDATA[Na<sub>2</sub>MoO<sub>4</sub>·2H<sub>2</sub>O]]> 0.25
肌醇 100
VB5 0.5
VB1 1.0
VB6 0.5
甘氨酸 2
6-BA 0.5-1.5
KT 0.5-1.5
IBA 0.1-1.0
GA3 0.1-0.5
2，4-D 0.01-0.05
琼脂粉 6.5g/L
蔗糖 20-30g/L
活性炭 0.3-0.8g/L
pH 5.5-5.8
在本发明一些优选的实施例中，模拟正常的生长环境，采用光照与黑暗交替的环境下进行培养，启动培养在昼夜交替的培养环境中进行。
进一步地，所述启动培养的环境温度为24-26℃。
进一步地，选择适合植物生长所需要的光照强度为5000-9000lx，和光照时间为10-14h以及启动培养的总时长为60-90天。
在本发明一些优选的实施例中，所述增殖培养基包括：WPM+6-BA 0.5-1.5mg/L+KT0.5-1.5mg/L+IBA 0.5-1.0mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖20-30g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L，如表3所示；所述增殖培养的时间为60-90天。
表3水紫树增殖培养基的具体组成
试剂名称 标准化剂量(mg/L)
<![CDATA[NH<sub>4</sub>NO<sub>3</sub>]]> 400
<![CDATA[K<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>]]> 990
<![CDATA[KH<sub>2</sub>PO<sub>4</sub>]]> 170
<![CDATA[Ca(NO<sub>3</sub>)<sub>2</sub>·4H<sub>2</sub>O]]> 556
<![CDATA[MgSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O]]> 370
<![CDATA[FeSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O]]> 27.8
Na2-EDTA 37.3
<![CDATA[MnSO<sub>4</sub>·4H<sub>2</sub>O]]> 22.5
<![CDATA[ZnSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O]]> 8.6
<![CDATA[CuSO<sub>4</sub>·5H<sub>2</sub>O]]> 0.25
<![CDATA[H<sub>3</sub>BO<sub>3</sub>]]> 6.2
<![CDATA[Na<sub>2</sub>MoO<sub>4</sub>·2H<sub>2</sub>O]]> 0.25
肌醇 100
VB5 0.5
VB1 1.0
VB6 0.5
甘氨酸 2
6-BA 0.5-1.5
IBA 0.5-1.0
KT 0.5-1.5
琼脂粉 6.5g/L
蔗糖 20-30g/L
活性炭 0.3-0.8g/L
pH 5.5-5.8
在本发明一些优选的实施例中，所述继代培养基包括：WPM+6-BA0.5-1.5mg/L+NAA0.5-1.5mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖20-30g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L，活性炭的作用主要是起到吸附外植体所产生的酚类褐化物的作用，提高外源激素的吸收率。如表4所示；所述继代培养的时间为50-70天。
表4水紫树继代培养基的具体组成
Figure BDA0003788500700000071
Figure BDA0003788500700000081
在本发明一些优选的实施例中，所述生根培养基包括：1/2NH4NO3浓度减半处理的WPM+IBA 0.5-1.0mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖15-20g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L，如表5所示。所述生根培养的时间为30-45天。
表5水紫树生根培养基的具体组成
Figure BDA0003788500700000082
Figure BDA0003788500700000091
在本发明中，采用植物激素梯度化设置，对于启动培养基的激素的设定，在本发明外的其他激素水平下，也有少量无菌芽产生，但只有在上述启动培养基上芽的萌发较快，生长表现也较为健康。对于增殖培养基，在本发明外的其他激素水平下，水紫树也能增殖，但增殖系数变低，增殖芽的质量下降，主要表现为芽小，节间变短等，导致有效芽数不够，增殖效果不理想。同理，本发明所提供的继代生长培养基和生根培养基的设置，也是最为适合的培养基配方，能达到预期的组培扩繁效果。
在本发明一些优选的实施例中，所述生根培养的时间为30-45天。
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1：
2020年3月10日从浙江省海宁市图书馆采集到水紫树枝条，开展其组培快繁试验，其步骤为：
a、从健壮的水紫树母本植株上采集顶芽饱满的枝条或者侧芽作为组织培养外植体；最好选择晴朗5天后的晴朗早晨取外植体。
b、将外植体带回实验室，流水清理枝条表面的杂物和污染源，可利用流水冲洗1h，再在肥皂水中浸泡30min后，冲洗干净。
c、浸泡入75％的酒精(v/v)中带回超净工作台上准备消毒处理，酒精浸泡1min，取出再将其没入0.1％的升汞(v/v)中进行表面消毒，消毒时间为20min。
d、无菌水冲洗5次，用灭好菌的滤纸吸干表面的水分，在灭好菌的培养皿中切断后，待接种到启动培养基上。
其中，启动培养基配方是：WPM+6-BA 0.5mg/L+KT 0.5mg/L+IBA 0.5mg/L+2，4-D0.01mg/L+琼脂粉6.5g/L+蔗糖30g/L+活性炭粉0.4g/L。
在室温设置在25℃，光照强度设置在6000lx，光照时长12h，昼夜交替的培养环境中进行培养，当培养60d至90d后，根据各外植体的生长程度分批转接在增殖培养基上，选择伸长生长的健壮无菌芽接种在继代培养基上进行继代培养，得到水紫树无菌系种苗；将高度在2至3cm的水紫树无菌系种苗接种在生根培养基上进行生根培养。
其中，增殖培养配方是：WPM+6-BA 0.8mg/L+KT 0.8mg/L+IBA 0.5mg/L+琼脂6.5g/L+蔗糖30g/L+活性炭粉0.3g/L。
继代配方是：WPM+6-BA(1.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)+活性炭粉0.4g/L+琼脂6.5g/L+蔗糖25g/L。
生根培养基配方是：1/2NH4NO3浓度减半处理的WPM+IBA 0.8mg/L+活性炭粉0.6g/L+琼脂6.5g/L+蔗糖20g/L。
结果表明，本发明所提供的水紫树的组培快繁的方法，可有效获得水紫树的无菌系瓶苗，外植体接种污染率在18％，将高度在2.5至3cm的无菌苗接种在生根培养基上进行生根培养，平均生根周期为45天，平均生根率为80.6％，平均根数在3.6，平均根长为2.2cm。
实施例2
2020年7月18日，从浙江省海宁市森城实业有限公司采集到水紫树枝条，再次开展其组培快繁试验，其步骤为：
a、从健壮的水紫树母本植株上采集顶芽饱满的枝条或者侧芽作为组织培养外植体；注意要求在晴朗天气3天以上的晴朗的早晨取外植体。
b、将外植体带回实验室，刷毛清理枝条表面的杂物和污染源，可利用流水冲洗30min以上，再在肥皂水中浸泡30min后，冲洗干净。
c、带回超净工作台上先用75％的酒精浸泡1min，在将其没入0.1％的升汞中进行表面消毒，消毒时间为25min。
d、无菌水冲洗4次以上，用灭好菌的滤纸吸干表面的水分，在灭好菌的培养皿中切断后，待接种到启动培养基上。
其中，启动培养基配方是：WPM+GA30.4mg/L+6-BA 0.8mg/L+KT 0.8mg/L+IBA0.8mg/L+2，4-D 0.03mg/L+琼脂粉6.5g/L+蔗糖20g/L+活性炭粉0.4g/L。
在室温设置在25℃，光照强度设置在6000lx，光照时长12h，昼夜交替的培养环境中进行培养，当培养60d至90d后，根据各外植体的生长程度分批转接在增殖培养基上，选择伸长生长的健壮无菌芽接种在继代培养基上进行继代培养，得到水紫树无菌系种苗；将高度在2至3cm的水紫树无菌系种苗接种在生根培养基上进行生根培养。
其中，增殖培养配方是：WPM+6-BA 1.0mg/L+KT 1.0mg/L+IBA 0.8mg/L+琼脂6.5g/L+蔗糖30g/L+活性炭粉0.5g/L。
继代配方是：WPM+6-BA 1.2mg/L+NAA 1.2mg/L+活性炭粉0.4g/L+琼脂6.5g/L+蔗糖25g/L。
生根培养基配方是：1/2NH4NO3浓度减半处理的WPM+IBA 1.1mg/L+活性炭粉0.6g+琼脂6.5g/L+蔗糖20g/L。
结果表明，本发明所提供的水紫树的组培快繁的方法，可有效获得水紫树的无菌系瓶苗，外植体接种污染率在12％，将高度在2.5至3cm的无菌苗接种在生根培养基上进行生根培养，平均生根周期为45天，平均生根率为85.3％，平均根数在3.5，平均根长为2.4cm。
实施例3
2022年3月1日，从浙江省嘉兴市王江泾镇嘉兴市农业科学研究院实生优选水紫树母株上剪取的枝条开展组培快繁试验，其步骤为：
a、从健壮的水紫树母本植株上采集顶芽饱满的枝条或者侧芽作为组织培养外植体；最好选择的晴朗早晨取外植体。
b、将外植体带回实验室，流水清理枝条表面的杂物和污染源，可利用流水冲洗30min以上，再在肥皂水中浸泡30min后，冲洗干净。
c、浸泡入75％的酒精中带回超净工作台上准备消毒处理，酒精浸泡1到2min，取出再将其没入0.1％的升汞中进行表面消毒，消毒时间为28min。
d、无菌水冲洗4次以上，用灭好菌的滤纸吸干表面的水分，在灭好菌的培养皿中切断后，待接种到启动培养基上。
其中，启动培养基配方是：WPM+6-BA 1.0mg/L+KT 1.0mg/L+IBA 1.0mg/L+2，4-D0.04mg/L+琼脂粉6.5g/L+蔗糖25g/L+活性炭粉0.5g/L。
在室温设置在25℃，光照强度设置在6000lx，光照时长12h，昼夜交替的培养环境中进行培养，当培养60d至90d后，根据各外植体的生长程度分批转接在增殖培养基上，选择伸长生长的健壮无菌芽接种在继代培养基上进行继代培养，得到水紫树无菌系种苗；将高度在2至3cm的水紫树无菌系种苗接种在生根培养基上进行生根培养。
其中，增殖培养配方是：WPM+6-BA 1.2mg/L+KT 1.2mg/L+IBA 1.0mg/L+琼脂6.5g/L+蔗糖30g/L+活性炭粉0.8g/L。
继代配方是：WPM+6-BA 1.4mg/L+NAA 1.4mg/L+活性炭粉0.4g/L+琼脂6.5g/L+蔗糖20g/L。
生根培养基配方是：1/2NH4NO3浓度减半处理的WPM+IBA 1.5mg/L+活性炭粉0.6g+琼脂6.5g/L+蔗糖20g/L。
结果表明，本发明所提供的水紫树的组培快繁的方法，可有效获得水紫树的无菌系瓶苗，外植体接种污染率在11％，将高度在2至3cm的无菌苗接种在生根培养基上进行生根培养，平均生根周期为45天，平均生根率为86.2％，平均根数在3.1，平均根长为2.6cm。
本技术相对扦插、压条等无性繁殖技术而言，具有受优良母株数量限制少的优点；相对播种育苗繁殖技术而言，所生产的种苗整齐度好，后代工程苗的变异率低的特点，对苗木生产企业而言，是较为快捷的种苗获得途径。

Claims (3)

1.一种水紫树的组培快繁的方法，其特征在于，包括以下步骤：
从健壮的水紫树母本植株上采集顶芽饱满的枝条或者侧芽作为组织培养的外植体，消毒后在无菌条件下接种于启动培养基上，进行启动培养，选择生长势强的健壮无菌芽接种到增殖培养基上进行增殖培养，选择伸长生长的无菌芽接种在继代培养基上进行继代培养，得到水紫树无菌系种苗；将高度在2-3cm的水紫树无菌系种苗接种在生根培养基上进行生根培养；
当春季时，使用的所述启动培养基为：
WPM+6-BA 0.5-1.5mg/L+KT 0.5-1.5mg/L+IBA 0.5-1.0mg/L+2,4-D 0.01-0.05mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖20-30g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L；
当夏季或秋季时，使用的所述启动培养基为：
WPM+GA3 0.2-0.5mg/L+6-BA 0.5-1.5mg/L+KT 0.5-1.5mg/L+IBA 0.5-1.5mg/L+2,4-D0.01-0.05mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖20-30g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L；
所述增殖培养基为：WPM+6-BA 0.5-1.5mg/L+KT 0.5-1.5mg/L+IBA 0.5-1.5mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖20-30g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L；
所述增殖培养的时间为60-90天；
所述继代培养基为：WPM+6-BA 0.5-1.5mg/L+NAA 0.5-1.5mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖20-30g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L；
所述继代培养的时间为50-70天；
所述生根培养基为：1/2NH4NO3浓度减半处理的WPM+IBA 0.5-1.5mg/L+琼脂粉5.5-6.5g/L+蔗糖15-20g/L+活性炭粉0.3-0.8g/L；
所述生根培养的时间为30-45天。
2.如权利要求1所述的水紫树的组培快繁的方法，其特征在于，所述消毒，包括以下步骤：
清理枝条表面的杂物和污染源，用流水和肥皂水分别浸泡，冲洗干净后，在超净工作台上先用酒精消毒，再用升汞消毒，无菌水冲洗后，吸干水分；
所述流水冲洗至少30min；
所述肥皂水冲洗30-60min；
所述酒精的体积百分比浓度为75%，所述酒精消毒的时间为1-2min；
所述升汞的体积百分比浓度为0.1%，所述升汞消毒的时间为20-30min；
所述无菌水冲洗的次数为3-5次。
3.如权利要求1所述的水紫树的组培快繁的方法，其特征在于，所述启动培养在昼夜交替的培养环境中进行；
所述启动培养的环境温度为24-26℃；
所述启动培养的光照强度为5000-9000lx，每天光照时间为10-14h；
所述启动培养的时间为60-90天。
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