CN115253144A - 针对戊二醛类消毒剂的中和剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提出了针对戊二醛类消毒剂的中和剂及其制备方法,该中和剂包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为0.5~3%,聚山梨酯‑80为1~3%,亚硫酸氢钠为0.1~2%,硫代硫酸钠为0.5~3%、组氨酸为0.5~3%;余量为纯化水。该中和剂同时适用于单方和复方的戊二醛类消毒剂,对单方或复方的戊二醛类消毒剂均能起到完全、高效的中和作用,可有效避免消毒剂残留对杀菌效果验证试验准确性的影响。
Description
技术领域
本发明属于消毒剂用中和剂技术领域,尤其涉及针对用于微生物实验的戊二醛类消毒剂的中和剂及其制备方法。
背景技术
化学消毒剂杀菌效果验证试验中,残留消毒剂的去除是试验成功的决定性因素之一,因为消毒体系中残留的消毒剂,可能对微生物的生长繁殖具有一定抑制作用,从而可导致对杀菌灭毒效果偏高的错误判断,甚至产生假阴性结果。目前对残余消毒剂的去除最常用的是化学中和法,即在化学消毒评价试验中,达到规定消毒时间终点时,取样加于适宜种类和浓度的中和剂中,立即终止残留消毒剂的继续作用,以便准确检测出消毒体系中残留存活的微生物及其数量。但是,常用的消毒剂大多成分复杂且所含的抑菌成分作用较强,很难筛选出合适的中和剂,而选用合适的中和剂对于化学消毒剂杀菌效果评价试验结果至关重要。
以戊二醛类消毒剂为例,其为微生物实验中常用的消毒剂,目前虽有针对某种特定组分的戊二醛类消毒剂的中和剂产品,但在实际应用中,因较难确定戊二醛类消毒剂是单方还是复方的,而现有的中和剂无法同时适用于单方和复方的戊二醛类消毒剂,因此不能有效、完全、彻底的中和消毒剂。
发明内容
本发明针对上述技术问题,提出针对戊二醛类消毒剂的中和剂及其制备方法,该中和剂同时适用于单方和复方的戊二醛类消毒剂,对单方或复方的戊二醛类消毒剂均能起到完全、高效的中和作用,可有效避免消毒剂残留对杀菌效果验证试验准确性的影响。
为了达到上述目的,本发明采用的技术方案为:
本发明一方面公开了一种针对戊二醛类消毒剂的中和剂,包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为0.5~3%,聚山梨酯-80为1~3%,亚硫酸氢钠为0.1~2%,硫代硫酸钠为0.5~3%、组氨酸为0.5~3%;余量为纯化水。
在其中一些实施例中,该中和剂包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为0.5%,聚山梨酯-80为1%,亚硫酸氢钠为0.1%,硫代硫酸钠为0.5%、组氨酸为0.5%,纯化水为97.4%。
在其中一些实施例中,该中和剂,包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为3%,聚山梨酯-80为3%,亚硫酸氢钠为2%,硫代硫酸钠为3%、组氨酸为3%,纯化水为86%。
在其中一些实施例中,该中和剂,包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为1%,聚山梨酯-80为1.5%,亚硫酸氢钠为2%,硫代硫酸钠为2%、组氨酸为0.5%,纯化水为93%。
本发明另一方面公开了上述的针对戊二醛类消毒剂的中和剂的制备方法,包括以下步骤:
1)按配比称取聚山梨酯-80,将其溶解于纯化水中得溶液A;
2)按配比称取甘氨酸、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、组氨酸,上述原料溶解于纯化水中得溶液B;
3)将溶液A和溶液B混合并搅拌均匀,经冷却定容后进行分装;
4)对步骤3)分装的溶液进行灭菌处理,即得中和剂。
在其中一些实施例中,该制备方法的步骤1)中,聚山梨酯-80加入纯化水中加温至60℃搅拌使其充分溶解。
在其中一些实施例中,该制备方法的步骤2)中,原料加入纯化水中室温(21~25℃)搅拌充分溶解。
在其中一些实施例中,该制备方法的步骤4)采用高温高压灭菌,在120~121℃下0.2MPa高压灭菌15~20min。
与现有技术相比,本发明的优点和积极效果在于:提出了针对戊二醛类消毒剂的中和剂及其制备方法,该中和剂能完全、高效的中和单方或复方的戊二醛类消毒剂,从而有效避免消毒剂残留对杀菌效果验证试验准确性的影响,同时,该中和剂自身成分,及其与戊二醛类消毒剂反应的产物均对实验微生物无杀灭或抑制生长的作用,对培养基成分也无破坏作用,亦不会影响生物性状,能够很好的适用于细菌和病毒不同的评价过程,使用效果好,可有效避免消毒剂和中和剂的使用对实验结果产生影响。此外,该中和剂的组分简单且易购,可降低中和剂的生产成本。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
一种针对戊二醛类消毒剂的中和剂,用于微生物效果验证包括细菌定量杀灭试验和病毒定量灭活试验的消毒剂中和。该中和剂包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为0.5~3%,聚山梨酯-80为1~3%,亚硫酸氢钠为0.1~2%,硫代硫酸钠为0.5~3%、组氨酸为0.5~3%;余量为纯化水。
上述中和剂的制备方法包括以下步骤:
1)按配比称取聚山梨酯-80,将其溶解于纯化水中得溶液A;
2)按配比称取甘氨酸、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、组氨酸,上述原料溶解于纯化水中得溶液B;
3)将溶液A和溶液B混合并搅拌均匀,经冷却定容后进行分装;
4)对步骤3)分装的溶液进行灭菌处理,即得中和剂。
具体的,该制备方法的步骤1)中,聚山梨酯-80加入纯化水中加温至60℃搅拌使其充分溶解。
具体的,该制备方法的步骤2)中,原料加入纯化水中室温(21~25℃)下搅拌充分溶解。
具体的,该制备方法的步骤4)采用高温高压灭菌,在120~121℃下0.2MPa高压灭菌15~20min。优选的,灭菌温度为121℃,灭菌时间为15min。
为了更清楚详细地介绍本发明实施例所提供的针对戊二醛类消毒剂的中和剂及其制备方法,下面将结合具体实施例进行描述。
实施例1
本实施例提供了一种针对戊二醛类消毒剂的中和剂,包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为0.5%,聚山梨酯-80为1%,亚硫酸氢钠为0.1%,硫代硫酸钠为0.5%、组氨酸为0.5%,纯化水为97.4%。
上述中和剂的制备方法包括以下步骤:
1)按配比称取聚山梨酯-80,将其加入纯化水中,加温至60℃,并搅拌使其充分溶解,得溶液A;
2)按配比称取甘氨酸、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、组氨酸,上述原料加入纯化水中,室温(21-25℃)搅拌至充分溶解,得溶液B;
3)将溶液A和溶液B混合并搅拌均匀,经冷却至室温,定容后分装;
4)步骤3)分装的溶液在121℃下0.2MPa高压灭菌15min,即得中和剂,所得产品检验合格后入库保存。
实施例2
本实施例提供了一种针对戊二醛类消毒剂的中和剂,包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为3%,聚山梨酯-80为3%,亚硫酸氢钠为2%,硫代硫酸钠为3%、组氨酸为3%,纯化水为86%。
上述中和剂的制备方法包括以下步骤:
1)按配比称取聚山梨酯-80,将其加入纯化水中,加温至60℃,并搅拌使其充分溶解,得溶液A;
2)按配比称取甘氨酸、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、组氨酸,上述原料加入纯化水中,室温(21-25℃)搅拌至充分溶解,得溶液B;
3)将溶液A和溶液B混合并搅拌均匀,经冷却至室温,定容后分装;
4)步骤3)分装的溶液在121℃下0.2MPa高压灭菌15min,即得中和剂,所得产品检验合格后入库保存。
实施例3
本实施例提供了一种针对戊二醛类消毒剂的中和剂,包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为1%,聚山梨酯-80为1.5%,亚硫酸氢钠为2%,硫代硫酸钠为2%、组氨酸为0.5%,纯化为93%。
上述中和剂的制备方法包括以下步骤:
1)按配比称取聚山梨酯-80,将其加入纯化水中,加温至60℃,并搅拌使其充分溶解,得溶液A;
2)按配比称取甘氨酸、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、组氨酸,上述原料加入纯化水中,室温(21-25℃)搅拌至充分溶解,得溶液B;
3)将溶液A和溶液B混合并搅拌均匀,经冷却至室温,定容后分装;
4)步骤3)分装的溶液在121℃下0.2MPa高压灭菌15min,即得中和剂,所得产品检验合格后入库保存。
实施例4
本实施例提供了一种针对戊二醛类消毒剂的中和剂,包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为1.75%,聚山梨酯-80为2%,亚硫酸氢钠为1.05%,硫代硫酸钠为1.75%、组氨酸为1.75%,纯化水为91.7%。
上述中和剂的制备方法包括以下步骤:
1)按配比称取聚山梨酯-80,将其加入纯化水中,加温至60℃,并搅拌使其充分溶解,得溶液A;
2)按配比称取甘氨酸、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、组氨酸,上述原料加入纯化水中,室温(21-25℃)搅拌至充分溶解,得溶液B;
3)将溶液A和溶液B混合并搅拌均匀,经冷却至室温,定容后分装;
4)步骤3)分装的溶液在121℃下0.2MPa高压灭菌15min,即得中和剂,所得产品检验合格后入库保存。
实施例5中和效果测试实验
按2002年版《消毒技术规范》规定,作中和鉴定试验,确定所选中和剂是否适合于拟进行的细菌杀灭和病毒灭活试验,并进行不同中和剂的横向作用效果比较,确定所选中和剂的选择优势。中和剂选择合格的判定依据为:第1组无试验菌,或仅有极少数试验菌菌落生长;第2组有较第1组为多,但较第3、4、5(组)为少的试验菌菌落生长;第3、4、5(组)有相似量试验菌生长,且其组间菌落误差率<15%,连续3次试验取得合格评价。
选择三个不同厂家的戊二醛类消毒剂产品,分别为:
消毒剂1:有效成分为戊二醛+癸甲溴铵,舒清(戊二醛癸甲溴铵溶液),齐鲁动物保健品有限公司,产品批号:1911002;
消毒剂2:有效成分为戊二醛,醛灭净(浓戊二醛溶液),山东菏泽三仪生物工程有限公司,产品批号:20030201;
消毒剂3:有效成分为戊二醛+苯扎氯铵+乙二醛+甲醛,世德来有限公司生产,产品批号:1026499;
采用上述三种消毒剂进行中和鉴定试验,每个消毒剂试验至少重复1次,以实施例1至4的中和剂作试验组中和剂,设置两种中和剂作为对比例进行测试实验。其中,两个对比例的中和剂分别为:
对比例1的中和剂包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为1%,聚山梨酯-80为1%,余量为纯化水;
对比例2的中和剂为D/E中和肉汤,青岛高科技工业园海博生物技术有限公司,HB4209。
各中和剂对3种消毒剂的细菌中和鉴定试验结果统计如表1所示:
表1戊二醛消毒剂的细菌中和鉴定试验结果统计
表1的实验结果表明,实验组和对比例的中和剂对三种消毒剂样品的菌落误差率均不超过15%,其对三种戊二醛类消毒剂的中和效果反映:本发明的中和剂优于对比例的两种中和剂,即本发明的中和剂对单方和复方的戊二醛类消毒剂均能起到完全、高效的中和作用,可有效避免消毒剂残留对杀菌效果验证试验准确性的影响,本发明的中和剂为戊二醛类消毒剂细菌杀灭评价试验的适合中和剂。
选择消毒剂1样品进行病毒中和鉴定试验。
病毒悬液制备:(1)液氮中取出冻存的试验VERO细胞,在37℃温水中融化,用细胞维持液洗涤后,转种于完全培养基培养瓶中,于37℃CO2培养箱中培养至单层铺满瓶内;(2)取出实验室低温冻存的猪伪狂犬病毒株,37℃水浴融化,用细胞维持液作10倍稀释,然后接种于含已经长满单层VERO细胞的细胞瓶内,置37℃CO2培养箱中,使与细胞吸附、生长。逐日观察病变,待3/4细胞出现病变时,收获病毒,测定效价为107.1TCID50/0.1ml。对其病毒液收获并稀释为100TCID50分装于无菌离心管(1.5ml)中,备用。
中和试验重复3次,以实施例3的中和剂作为试验中和剂,测定不同试验组的病毒滴度,并计算其灭活率,中和剂对戊二醛类消毒剂的病毒中和鉴定试验结果统计如表2所示:
表2戊二醛消毒剂的病毒中和鉴定试验结果统计
表2的实验结果表明,本发明的中和剂可有效去除戊二醛消毒剂对试验病毒的残留作用,且对病毒本身和细胞生长无不良影响。选择本发明的中和剂作为戊二醛类消毒剂病毒灭活评价试验的中和剂可避免对培养基和细胞的毒性作用,保证实验结果的可靠性。
虽然本发明已以较佳的实施例公开如上,但其并非用以限定本发明,任何熟悉此技术的人,在不脱离本发明的精神和范围内,都可以做各种改动和修饰,因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
Claims (7)
1.一种针对戊二醛类消毒剂的中和剂,其特征在于,包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为0.5~3%,聚山梨酯-80为1~3%,亚硫酸氢钠为0.1~2%,硫代硫酸钠为0.5~3%、组氨酸为0.5~3%;余量为纯化水。
2.根据权利要求1所述的针对戊二醛类消毒剂的中和剂,其特征在于,包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为0.5%,聚山梨酯-80为1%,亚硫酸氢钠为0.1%,硫代硫酸钠为0.5%、组氨酸为0.5%,纯化水为97.4%。
3.根据权利要求1所述的针对戊二醛类消毒剂的中和剂,其特征在于,包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为3%,聚山梨酯-80为3%,亚硫酸氢钠为2%,硫代硫酸钠为3%、组氨酸为3%,纯化水为86%。
4.根据权利要求1所述的针对戊二醛类消毒剂的中和剂,其特征在于,包含以下质量百分比的原料组分:甘氨酸为1%,聚山梨酯-80为1.5%,亚硫酸氢钠为2%,硫代硫酸钠为2%、组氨酸为0.5%,纯化水为93%。
5.权利要求1至4中任一项所述的针对戊二醛类消毒剂的中和剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤,因分步溶解原料,各原料组分作用比较明显,效果不易丢失,进行溶液A、B配制:
1)按配比称取聚山梨酯-80,将其加于纯化水中得溶液A;
2)按配比称取甘氨酸、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、组氨酸,上述原料溶解于纯化水中得溶液B;
3)将溶液A和溶液B混合并搅拌均匀,经冷却定容后进行分装;
4)对步骤3)分装的溶液进行灭菌15min处理,即得中和剂。
6.根据权利要求5所述的针对戊二醛类消毒剂的中和剂的制备方法,其特征在于,所述步骤1)中,聚山梨酯-80加入纯化水中加温至60℃搅拌使其充分溶解;所述步骤2)中,原料加入纯化水中在21~25℃搅拌充分溶解。
7.根据权利要求5所述的针对戊二醛类消毒剂的中和剂的制备方法,其特征在于,所述步骤4)采用高温高压灭菌,在120~121℃下高压灭菌15~2min。
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