CN115236320A - 一种划膜缓冲液及其制备方法和免疫层析试剂片 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种划膜缓冲液及其制备方法和免疫层析试剂片，涉及免疫层析检测技术领域，本发明通过在划膜缓冲液中添加离液盐，包括作用浓度为0.1％～2％的叠氮钠和/或0.01％～2％硫氰酸钾等来提高免疫层析试剂片检测的信号强度，达到提升检测灵敏度的目的，此外，该方法的操作简单，成本可控，始于推广。

Description

一种划膜缓冲液及其制备方法和免疫层析试剂片
技术领域
本发明涉及免疫层析检测技术领域，具体而言，涉及一种划膜缓冲液及其制备方法和免疫层析试剂片。
背景技术
荧光免疫层析具有成本低、操作简单、快捷以及方便携带等优点，是体外诊断领域重要的一部分。荧光免疫层析技术是基于抗原抗体特异性免疫反应的新型膜检测技术。该技术以固定有检测线(包被抗体或包被抗原)和质控线(抗抗体)的条状纤维层析材料为固定相，测试液为流动相，荧光微球标记抗体或抗原固定于连接垫，通过毛细管作用使待分析物在层析条上移动。主要用于传染病、微生物、妊娠、排卵、心肌梗死、毒品、药物等多种蛋白、抗体、小分子化合物的特异性定性、定量检测。
对于荧光层析低值检测而言，由于本身待测物较少，捕获物与待测物的不充分结合导致低含量的待测物无法被检测区分开。现有技术中，提高免疫层析试剂片检测灵敏度的方法主要包括以下几类：(1)通过优化免疫层析试剂片读取仪信号采集、信号增强、以及数据处理等方面来提高其检测灵敏度，如专利CN103018439A；(2)通过引入级联放大体系如生物素-链霉亲和素系统或者多酶级联放大系统，来提高检测灵敏度，如专利CN110596404A；(3)通过对膜的修饰使得抗原抗体的结合机率增加，对于提高低值区的检测灵敏度和信号的强度，如专利CN108535472A。
虽然这些方法在一定程度上提高了免疫层析试剂片的检测灵敏度，但其提高检测灵敏度的能力是有限的，同时这些方法需要引入新的体系或者升级信号读取仪器及信号处理软件，操作上相对繁琐，成本相对较高。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供一种划膜缓冲液及其制备方法和免疫层析试剂片。
本发明是这样实现的：
第一方面，本发明实施例提供了一种划膜缓冲液，其包括第一离液盐和第二离液盐中的至少一种，以及划膜缓冲液基质，所述第一离液盐为NaN3，所述第二离液盐的阳离子为SCN-；在所述划膜缓冲液中，第一离液盐的质量分数为0.1％～2％，第二离液盐的质量分数为0.01％～2％。
第二方面，本发明实施例提供了如前述实施例所述的划膜缓冲液的制备方法，其包括把所述划膜缓冲液的组分混合。
第三方面，本发明实施例提供了NaN3在制备用于免疫层析检测的划膜缓冲液中的应用。
第四方面，本发明实施例提供了NaN3和/或如前述实施例所述的划膜缓冲液在制备用于提高免疫层析检测灵敏度的试剂盒中的应用。
第五方面，本发明实施例提供了一种免疫层析试剂片的制备方法，其包括采用如前述实施例所述的划膜缓冲液进行检测线抗体的划膜，得到包被好检测线的层析膜。
第六方面，本发明实施例提供了一种免疫层析试剂片，其由前述实施例所述的免疫层析试剂片的制备方法制备获得。
本发明具有以下有益效果：
本发明通过在划膜缓冲液中添加离液盐来提高免疫层析试剂片检测的信号强度，离液盐具体包括叠氮钠(NaN3)和/或硫氰酸钾(KSCN)，达到了有效提升检测免疫层析试剂的检测灵敏度的目的，该方法的操作简单，成本可控，始于推广。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本发明实施例提供了一种划膜缓冲液，其包括第一离液盐和第二离液盐中的至少一种，以及划膜缓冲液基质，所述第一离液盐为NaN3，所述第二离液盐的阳离子为SCN-；在所述划膜缓冲液中，第一离液盐的质量分数为0.1％～2％，第二离液盐的质量分数为0.01％～2％。
离液盐是一种可以扰乱水分子间的氢键、增加其混乱度的盐，比如在离子对色谱中常见的高氯酸盐、异硫氰酸盐等就属于离液盐。合适的离液盐的加入可以增强离子型分析物的疏水性，提高其在疏水表面的附着。本发明通过在划膜缓冲液中添加NaN3和/或SCN-，使得采用该划膜液进行层析膜检测线和质控线制备的免疫检测试剂片检测的信号强度，能够显著提高检测的灵敏度。
在一些实施例中，所述划膜缓冲液包括第一离液盐时，所述划膜缓冲液中，第一离液盐(NaN3)的作用浓度为0.2％～1％，具体可以为0.2％、0.25％、0.3％、0.35％、0.4％、0.45％、0.5％、0.55％、0.6％、0.65％、0.7％、0.75％、0.8％、0.85％、0.9％、0.95％和1％中的任意一种或任意两种之间的范围，更优选为0.5％～1％，更优选为0.5％～1％。在优选范围的限定下，能够进一步提高检测灵敏度。
在一些实施例中，所述划膜缓冲液包括第二离液盐时，划膜缓冲液中第二离液盐的质量分数为0.01％～1％，具体可以为0.01％、0.05％、0.1％、0.15％、0.2％、0.25％、0.3％、0.35％、0.4％、0.45％、0.5％、0.55％、0.6％、0.65％、0.7％、0.75％、0.8％、0.85％、0.9％、0.95％和1％中的任意一种或任意两种之间的范围，更优选为0.5％～1％，优选为0.5％～1％。在优选范围的限定下，能够进一步提高检测灵敏度。
在没有限定的情况下，第二离液盐中的阳离子为金属离子，具体可以包括Na、K、Fe和NH4中的至少一种，优选为NA、K中的至少一种，即第二离液盐为KSCN和NaSCN中的至少一种。
在一些实施例中，当所述划膜缓冲液包括第一离液盐和第二离液盐时，第一离液盐和第二离液盐的混合质量比为(1～3)：(1～3)，具体可以为1：1、1：2、1：3、2：1和3：1中的任意一种或任意两种之间的范围，优选的是2：1。优选方案具有更好的技术效果。
在没有限定的情况下，划膜液缓冲液基质可以选自现有常规采用的划膜缓冲液(没有添加NaN3和KSCN的划膜液)。
优选地，所述划膜缓冲液基质包括缓冲溶液和添加剂，所述添加剂选自蔗糖和EDTA中的至少一种。
优选地，在所述划膜缓冲液中，蔗糖的质量分数为0.5％～5％，具体可以为0.5％、1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％中的任意一种或任意两种之间的范围。EDTA的作用浓度为0.1～5mM，具体可以为0.1mM、1mM、2mM、3mM、4mM、5mM中的任意一种或任意两种之间的范围。
优选地，所述缓冲溶液选自PBS、PB、CB、CBS、MES和HEPES中的任意一种。
优选地，所述缓冲溶液的pH为6.5～7.5，具体可以为6.5、6.7、6.9、7.1、7.3、7.5中的任意一种或任意两种之间的范围，更优选为7.3。
本发明实施例还提供了如前述任意实施例所述的划膜缓冲液的制备方法，其包括把所述划膜缓冲液的组分混合，具体为在划膜缓冲液基质中添加离液盐，使得离液盐满足上述限定的质量分数(作用浓度)。
本发明实施例还提供了NaN3在制备用于免疫层析检测的划膜缓冲液中的应用。
优选地，NaN3在所述划膜缓冲液中的质量分数为0.1％～2％；可以理解的是，NaN3对应前述任意实施例所述的第一离液盐，其在所述划膜缓冲液中的质量分数可以同前述任意实施例所述，划膜缓冲液的具体制备过程也同前述任意实施例所述，不再赘述。
本发明实施例提供了NaN3和/或如前述任意实施例所述的划膜缓冲液在制备用于提高免疫层析检测灵敏度的试剂盒中的应用。
NaN3制备的划膜缓冲液，能够应用于层析膜的检测线包被，制备获得的产品具有检测灵敏度的有效提高，因此，NaN3和/或前述任意实施例所述的划膜缓冲液能够作为提高免疫层析检测灵敏度的试剂盒的组分。
在一些实施例中，所述试剂盒还可以包括其它用于提高检测灵敏度的试剂。
本发明实施例提供了一种免疫层析试剂片的制备方法，其包括采用如前述任意实施例所述的划膜缓冲液进行检测线抗体的划膜，得到包被好检测线的层析膜。
在一些实施例中，所述制备方法还包括采用如前述任意实施例所述的划膜缓冲液进行质控线抗体的划膜，得到包被好质控线和检测线的层析膜。划膜时，将检测线抗体和/或质控线抗体与划膜缓冲液混合，基于划膜仪进行划膜即可。只要检测线采用本申请提供的划膜缓冲液即可达到显著提高检测灵敏度的效果。
在一些实施例中，所述制备方法还包括：在底板上依次搭接样品垫、结合垫、所述层析膜以及吸水垫。除划膜液的组分外，免疫层析试剂片的其他制备过程可以参照现有的步骤进行实施，在其他过程相同的情况下，采用本发明实施例提供的划膜缓冲液相对于现有划膜缓冲液，具有更好的检测灵敏度。
此外，本发明实施例还提供了一种免疫层析试剂片，其由前述任意实施例所述的免疫层析试剂片的制备方法制备获得。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
提供了一种免疫层析试剂片，其制备方法包括以下步骤。
(1)划膜缓冲液的制备
划膜缓冲液划膜缓冲液基质以及离液盐(NaN3)，膜缓冲液基质包括蔗糖、EDTA以及缓冲液，所述划膜缓冲液由以下方法制成：用纯水配制缓冲液作为基础液；称取配方量的蔗糖、乙二酸四乙胺二钠(EDTA)、不同浓度离液盐，溶于配方量的基础液中，混匀，调整pH为7.3；采用孔径为0.22μm的滤膜过滤除菌获得划膜缓冲液。
具体可参照表1。
表1划膜缓冲液配方
成分 含量
蔗糖 2.5％(质量分数)
EDTA 1mM
NaN<sub>3</sub> 0.5％
KSCN 0％
缓冲液 0.01M PBS
pH 7.3
(2)层析膜的制备
使用上述划膜缓冲液对GE家的硝酸纤维素膜的抗体划膜，在其他实施例中，硝酸纤维素膜可以选用包括Merck、Pall和Sartorius等厂家的；包被完后通过37℃烘箱干燥后，得到包被好检测线和质控线的层析膜；
(3)结合垫的制备
用化学交联等方式把标记抗体偶联到荧光微球上，得到标记抗体修饰的荧光颗粒，再把标记抗体修饰的荧光颗粒平铺在玻璃纤维上，得到荧光颗粒结合垫；
(4)免疫层析试剂片的制备
把制备获得的层析膜、荧光颗粒结合垫、样品垫、吸收垫按照一定的顺序贴合在聚氯乙烯的底板上，通过裁切成试剂条，与相应的塑料件组装成为完整的试剂片，得到免疫层析检测试剂片。
实施例2
提供了一种免疫层析试剂片，大致与实施例1相同，区别在于离液盐不同，离液盐为KSCN，在划膜缓冲液中的作用浓度为0.1％。
实施例3
提供了一种免疫层析试剂片，大致与实施例1相同，区别在于离液盐不同，离液盐为NaN3和KSCN组合且质量比为2：1，在划膜缓冲液中的作用浓度为0.04％和0.02％。
实施例4
提供了一种免疫层析试剂片，大致与实施例1相同，区别在于离液盐不同，离液盐为NH4SCN，在划膜缓冲液中的作用浓度为0.1％。
试验例1
不同NaN3浓度对CK-MB项目的影响。
(1)划膜缓冲液的制备
基于实施例1提供的划膜缓冲液的制备，按照不同浓度的NaN3以及不同的缓冲液，设置多组对照组，其中PBS划膜缓冲液中NaN3浓度分别为0％、0.02％、0.05％、0.1％、0.5％、1％，其中PB划膜缓冲液中NaN3浓度分别为0％、0.02％、0.1％。
(2)层析膜的制备
使用上述9种划膜缓冲液进行Pall厂家硝酸纤维素膜的划膜，划膜完后通过37℃烘箱干燥后，得到包被好CK-MB抗体(检测线)和质控线的层析膜；
(3)结合垫的制备
使用化学交联等方式把CK-MB的标记抗体偶联到荧光微球上，得到CK-MB标记抗体修饰的荧光颗粒，再把CK-MB标记抗体修饰的荧光颗粒平铺在玻璃纤维上，得到荧光颗粒结合垫；
(4)免疫层析试剂片的制备
把层析膜、荧光颗粒结合垫、样品垫、吸收垫按照一定的顺序贴合在聚氯乙烯的底板上，通过裁切成试剂条，与相应的塑料件组装成为完整的试剂片，得到免疫层析检测试剂片，对其信号进行测试，测试结果如下表2所示。
表2划膜缓冲液中不同NaN3浓度对CK-MB项目的影响
Figure BDA0003730158070000081
从表2数据看出，在PBS以及PB两种划膜缓冲液体系中，提高划膜缓冲液中NaN3的浓度使得CK-MB试剂片的信号有了显著的提高，使得区分度增加，提升了测量灵敏度的效果。
试验例2
划膜缓冲液中不同的NaN3浓度对cTnI项目的影响。
(1)划膜缓冲液的制备
基于实施例1提供的划膜缓冲液的制备，基于不同浓度的NaN3以及不同的缓冲液，设置多组对照组，其中PBS划膜缓冲液的NaN3浓度分别为0％、0.02％、0.05％、0.07％、0.1％，其中PB划膜缓冲液的NaN3浓度分别为0％、0.02％。
(2)层析膜的制备
使用上述7种划膜缓冲液进行Merck厂家硝酸纤维素膜的划膜，划膜完后通过37℃烘箱干燥后，得到包被好cTnI抗体和质控线的层析膜；
(3)结合垫的制备
使用化学交联等方式把cTnI标记抗体偶联到荧光微球上，得到cTnI标记抗体修饰的荧光颗粒，再把cTnI标记抗体修饰的荧光颗粒平铺在玻璃纤维上，得到荧光颗粒结合垫；
(4)免疫层析试剂片的制备
把层析膜、荧光颗粒结合垫、样品垫和吸收垫按照一定的顺序贴合在聚氯乙烯的底板上，通过裁切成试剂条，与相应的塑料件组装成为完整的试剂片，得到免疫层析检测试剂片，对其信号进行测试，测试结果如下表3所示。
表3划膜缓冲液中不同NaN3浓度对cTnI项目的影响
Figure BDA0003730158070000091
从表3数据看出，在PBS以及PB两种划膜缓冲液体系中，提高划膜缓冲液中NaN3的浓度使得cTnI试剂片的信号有了显著的提高，低值部分也有了明显的区分，提升了测量灵敏度的效果。
试验例3
不同KSCN浓度对CK-MB项目的影响。
(1)划膜缓冲液的制备
基于实施例2提供的划膜缓冲液的制备，基于不同浓度的KSCN以及不同的缓冲液，设置多组对照组，其中PBS划膜缓冲液中KSCN浓度分别为0％、0.05％、0.1％、0.5％，其中PB划膜缓冲液中KSCN浓度分别为0％、0.05％、0.1％、0.5％；
(2)层析膜的制备
使用上述8种划膜缓冲液进行Pall厂家硝酸纤维素膜的划膜，划膜完后通过37℃烘箱干燥后，得到包被好CK-MB抗体(检测线)和质控线的层析膜；
(3)结合垫的制备
使用化学交联等方式把CK-MB的标记抗体偶联到荧光微球上，得到CK-MB标记抗体修饰的荧光颗粒，再把CK-MB标记抗体修饰的荧光颗粒平铺在玻璃纤维上，得到荧光颗粒结合垫；
(4)免疫层析试剂片的制备
把层析膜、荧光颗粒结合垫、样品垫、吸收垫按照一定的顺序贴合在聚氯乙烯的底板上，通过裁切成试剂条，与相应的塑料件组装成为完整的试剂片，得到免疫层析检测试剂片，对其信号进行测试，测试结果如下表4所示。
表4划膜缓冲液中不同KSCN浓度对CK-MB项目的影响
Figure BDA0003730158070000101
从表4数据看出，与添加NaN3类似，在PBS、PB两种划膜缓冲液体系中，提高划膜缓冲液中KSCN的浓度都使得CK-MB试剂片的信号有了显著的提高，使得区分度增加，提升了测量灵敏度的效果。
试验例4
不同KSCN浓度对cTnI项目的影响。
(1)划膜缓冲液的制备
基于实施例2提供的划膜缓冲液的制备，基于不同浓度的KSCN以及不同的缓冲液，设置多组对照组，其中PBS划膜缓冲液中KSCN浓度分别为0％、0.05％、0.1％，其中PB划膜缓冲液中KSCN浓度分别为0％、0.05％、0.1％；
(2)层析膜的制备
使用上述6种划膜缓冲液进行Merck厂家硝酸纤维素膜的划膜，划膜完后通过37℃烘箱干燥后，得到包被好cTnI抗体(检测线)和质控线的层析膜；
(3)结合垫的制备
使用化学交联等方式把cTnI标记抗体偶联到荧光微球上，得到cTnI标记抗体修饰的荧光颗粒，再把cTnI标记抗体修饰的荧光颗粒平铺在玻璃纤维上，得到荧光颗粒结合垫；
(4)免疫层析试剂片的制备
把层析膜、荧光颗粒结合垫、样品垫、吸收垫按照一定的顺序贴合在聚氯乙烯的底板上，通过裁切成试剂条，与相应的塑料件组装成为完整的试剂片，得到免疫层析检测试剂片，对其信号进行测试，测试结果如下表5所示。
表5划膜缓冲液中不同KSCN浓度对cTnI项目的影响
Figure BDA0003730158070000111
从表5数据看出，在PBS以及PB两种划膜缓冲液体系中，提高划膜缓冲液中KSCN的浓度使得cTnI试剂片的信号有了显著的提高，低值部分也有了明显的区分，提升了测量灵敏度的效果。
试验例5
不同NaN3和KSCN组合浓度对CK-MB项目的影响。
(1)划膜缓冲液的制备
基于实施例3提供的划膜缓冲液的制备，按照不同浓度的NaN3和KSCN的缓冲液，设置多组对照组，其中PBS划膜缓冲液中NaN3和KSCN浓度分别为0％/0％、0.02％/0％、0％/0.02％、0.02％/0.01％、0.02％/0.02％、0.04％/0.02％、0.06％/0.02％。
(2)层析膜的制备
使用上述7种划膜缓冲液进行Pall厂家硝酸纤维素膜的划膜，划膜完后通过37℃烘箱干燥后，得到包被好CK-MB抗体(检测线)和质控线的层析膜；
(3)结合垫的制备
使用化学交联等方式把CK-MB的标记抗体偶联到荧光微球上，得到CK-MB标记抗体修饰的荧光颗粒，再把CK-MB标记抗体修饰的荧光颗粒平铺在玻璃纤维上，得到荧光颗粒结合垫；
(4)免疫层析试剂片的制备
把层析膜、荧光颗粒结合垫、样品垫、吸收垫按照一定的顺序贴合在聚氯乙烯的底板上，通过裁切成试剂条，与相应的塑料件组装成为完整的试剂片，得到免疫层析检测试剂片，对其信号进行测试，测试结果如下表6所示。
表6划膜缓冲液中不同NaN3和KSCN浓度对CK-MB项目的影响
Figure BDA0003730158070000121
从表6数据看出，在PBS划膜缓冲液体系中，在划膜缓冲液中使用NaN3和KSCN组合的方式可以在更低的浓度使得CK-MB试剂片的信号有显著的提高，增加区分度，使得测量灵敏度提升。
试验例6
不同NaN3和KSCN组合浓度对cTnI项目的影响。
(1)划膜缓冲液的制备
基于实施例3提供的划膜缓冲液的制备，按照不同浓度的NaN3和KSCN的缓冲液，设置多组对照组，其中PBS划膜缓冲液中NaN3和KSCN浓度分别为0％/0％、0.02％/0％、0％/0.02％、0.02％/0.01％、0.02％/0.02％、0.04％/0.02％、0.06％/0.02％。
(2)层析膜的制备
使用上述7种划膜缓冲液进行Merck厂家硝酸纤维素膜的划膜，划膜完后通过37℃烘箱干燥后，得到包被好cTnI抗体(检测线)和质控线的层析膜；
(3)结合垫的制备
使用化学交联等方式把cTnI的标记抗体偶联到荧光微球上，得到cTnI标记抗体修饰的荧光颗粒，再把cTnI标记抗体修饰的荧光颗粒平铺在玻璃纤维上，得到荧光颗粒结合垫；
(4)免疫层析试剂片的制备
把层析膜、荧光颗粒结合垫、样品垫、吸收垫按照一定的顺序贴合在聚氯乙烯的底板上，通过裁切成试剂条，与相应的塑料件组装成为完整的试剂片，得到免疫层析检测试剂片，对其信号进行测试，测试结果如下表7所示。
表7划膜缓冲液中不同NaN3和KSCN浓度对cTnI项目的影响
Figure BDA0003730158070000131
Figure BDA0003730158070000141
从表7数据看出，在PBS划膜缓冲液体系中，在划膜缓冲液中使用NaN3和KSCN组合的方式可以在更低的浓度使得cTnI试剂片的信号有显著的提高，增加区分度，使得测量灵敏度提升。
试验例7
不同NH4SCN浓度对CK-MB项目的影响。
(1)划膜缓冲液的制备
基于实施例4提供的划膜缓冲液的制备，基于不同浓度的NH4SCN的缓冲液，设置多组对照组，其中PBS划膜缓冲液中NH4SCN浓度分别为0％、0.02％、0.05％、0.1％、0.2％、0.5％、1％。
(2)层析膜的制备
使用上述7种划膜缓冲液进行Pall厂家硝酸纤维素膜的划膜，划膜完后通过37℃烘箱干燥后，得到包被好CK-MB抗体(检测线)和质控线的层析膜；
(3)结合垫的制备
使用化学交联等方式把CK-MB的标记抗体偶联到荧光微球上，得到CK-MB标记抗体修饰的荧光颗粒，再把CK-MB标记抗体修饰的荧光颗粒平铺在玻璃纤维上，得到荧光颗粒结合垫；
(4)免疫层析试剂片的制备
把层析膜、荧光颗粒结合垫、样品垫、吸收垫按照一定的顺序贴合在聚氯乙烯的底板上，通过裁切成试剂条，与相应的塑料件组装成为完整的试剂片，得到免疫层析检测试剂片，对其信号进行测试，测试结果如下表8所示。
表8划膜缓冲液中不同NH4SCN浓度对CK-MB项目的影响
Figure BDA0003730158070000151
从表8数据看出，与添加NaN3类似，在PBS划膜缓冲液体系中，在0.5％浓度以内提高划膜缓冲液中NH4SCN的浓度都使得CK-MB试剂片的信号有了显著的提高，使得区分度增加，提升了测量灵敏度的效果。
试验例8
不同NH4SCN浓度对cTnI项目的影响。
(1)划膜缓冲液的制备
基于实施例4提供的划膜缓冲液的制备，基于不同浓度的NH4SCN的缓冲液，设置多组对照组，其中PBS划膜缓冲液中NH4SCN浓度分别为0％、0.02％、0.05％、0.1％、0.2％。
(2)层析膜的制备
使用上述5种划膜缓冲液进行Merck厂家硝酸纤维素膜的划膜，划膜完后通过37℃烘箱干燥后，得到包被好cTnI抗体(检测线)和质控线的层析膜；
(3)结合垫的制备
使用化学交联等方式把cTnI标记抗体偶联到荧光微球上，得到cTnI标记抗体修饰的荧光颗粒，再把cTnI标记抗体修饰的荧光颗粒平铺在玻璃纤维上，得到荧光颗粒结合垫；
(4)免疫层析试剂片的制备
把层析膜、荧光颗粒结合垫、样品垫、吸收垫按照一定的顺序贴合在聚氯乙烯的底板上，通过裁切成试剂条，与相应的塑料件组装成为完整的试剂片，得到免疫层析检测试剂片，对其信号进行测试，测试结果如下表9所示。
表9划膜缓冲液中不同NH4SCN浓度对cTnI项目的影响
Figure BDA0003730158070000161
从表9数据看出，在PBS划膜缓冲液体系中，在0.1％浓度以内提高划膜缓冲液中NH4SCN的浓度使得cTnI试剂片的信号有了显著的提高，低值部分也有了明显的区分，提升了测量灵敏度的效果。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种划膜缓冲液，其特征在于，其包括：第一离液盐和第二离液盐中的至少一种，以及划膜缓冲液基质，所述第一离液盐为NaN3，所述第二离液盐的阳离子为SCN-；在所述划膜缓冲液中，第一离液盐的质量分数为0.1％～2％，第二离液盐的质量分数为0.01％～2％。
2.根据权利要求1所述的划膜缓冲液，其特征在于，所述划膜缓冲液包括第二离液盐时，第二离液盐的质量分数为0.01％～1％，优选为0.5％～1％；
优选地，所述第二离液盐包括KSCN和NaSCN中的至少一种；
优选地，所述第二离液盐为KSCN；
优选地，所述划膜缓冲液包括第一离液盐时，第一离液盐的质量分数为0.2％～1％，优选为0.5％～1％。
3.根据权利要求1所述的划膜缓冲液，其特征在于，所述划膜缓冲液包括第一离液盐和第二离液盐时，所述第一离液盐和所述第二离液盐的混合质量比为(1～3)：(1～3)；
优选地，所述第一离液盐和所述第二离液盐的混合质量比为2：1。
4.根据权利要求1～3任一项所述的划膜缓冲液，其特征在于，所述划膜缓冲液基质包括缓冲溶液和添加剂，所述添加剂选自蔗糖和EDTA中的至少一种；
优选地，在所述划膜缓冲液中，蔗糖的质量分数为0.5％～5％，EDTA的作用浓度为0.1～5mM；
优选地，所述缓冲溶液选自PBS、PB、CB、CBS、MES和HEPES中的任意一种；
优选地，所述缓冲溶液的pH为6.5～7.5。
5.如权利要求1～4任一项所述的划膜缓冲液的制备方法，其特征在于，其包括把所述划膜缓冲液的组分混合。
6.NaN3在制备用于免疫层析检测的划膜缓冲液中的应用；
优选地，NaN3在所述划膜缓冲液中的质量分数为0.1％～2％；
优选地，NaN3在所述划膜缓冲液中的质量分数为0.2％～1％。
7.NaN3和/或如权利要求1～4任一项所述的划膜缓冲液在制备用于提高免疫层析检测灵敏度的试剂盒中的应用。
8.一种免疫层析试剂片的制备方法，其特征在于，其包括采用如权利要求1～4任一项所述的划膜缓冲液进行检测线抗体的划膜，得到包被好检测线的层析膜；
优选地，所述方法还包括采用如权利要求1～4任一项所述的划膜缓冲液进行质控线抗体的划膜，得到包被好质控线和所述检测线的层析膜。
9.根据权利要求8所述的免疫层析试剂片的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：在底板上依次搭接样品垫、结合垫、所述层析膜以及吸水垫。
10.一种免疫层析试剂片，其特征在于，其由权利要求8或9所述的免疫层析试剂片的制备方法制备获得。
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