CN115236230B - 一种毛发中野生乌羽玉致幻成分麦司卡林的检测方法 - Google Patents
一种毛发中野生乌羽玉致幻成分麦司卡林的检测方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种毛发中野生乌羽玉致幻成分麦司卡林的检测方法，步骤包括：S1、配制体积浓度为0.1％的甲酸乙腈溶液以及质量浓度为0.4ng/mL的内标甲醇溶液；S2、精密称取预处理后的待测毛发样品，并加入步骤S1所制得的内标甲醇溶液，后处理后即得待测样品溶液；S3、将步骤S2所制得的待测样品溶液注入液相色谱串联质谱系统中进行检测；S4、根据标准工作曲线，计算待测毛发样品中麦司卡林的质量浓度；本发明采用冷冻研磨技术作为后处理方法使得毛发样品中的麦司卡林得以释放，相较于其他碱水解、超声等方法，操作更简单，耗时更短；本发明的检测方法简单，灵敏度高，选择性好且分析时间短，仅需5分钟，适合应用于日常案件处理。
Description
技术领域
本发明涉及麦司卡林检测领域，尤其涉及一种毛发中野生乌羽玉致幻成分麦司卡林的检测方法。
背景技术
麦司卡林(Mescaline)别名为三甲氧苯乙胺，是苯乙胺的衍生物，分子式为C11H17NO3；麦司卡林是传统致幻剂(Hallucinogens)的一种，存在于墨西哥北部与美国西南部的野生的乌羽玉属植物当中，早在史前时代，居住在墨西哥的印第安人就食用含有麦司卡林的乌羽玉属植物作为宗教仪式的辅助物，从而进入精神恍惚状态；麦司卡林服用后使人产生幻觉，导致自我歪曲和思维分裂，更有甚者可发展为迁延性精神病，还会出现自杀、自残及攻击性等行为，给滥用者本身及社会公共安全带来极大的危害。目前，麦司卡林已被纳入我国一类精神药品与麻醉药品管理目录，但其在生物基质中的分析检测相关报道还比较少，因此开展麦司卡林在生物基质中的分析检测方法研究对相关案件的评判至关重要；
已报道的研究中有许多分析方法可以用来检测定量麦司卡林；例如在peyote仙人掌基质中检测分析麦司卡林含量的方法有：液相色谱光电二极管阵列检测法(LC-PAD)、实时高分辨质谱直接分析法(DART-HRMS)、以及毛细管电泳-电喷雾-质谱(CE-ESI-MS)；毛发是一种极具优势的生物检材，由于在毛发中麦司卡林的浓度很低，以往方法的定量限(LOQ)可能不足以检测出真实案例中的低浓度麦司卡林，且分析时间较长。
因此，亟需一种具有较高灵敏度，分析时间较短的毛发中野生乌羽玉致幻成分麦司卡林的检测方法。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种毛发中野生乌羽玉致幻成分麦司卡林的检测方法。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：
提供一种毛发中野生乌羽玉致幻成分麦司卡林的检测方法，步骤包括：
S1、配制体积浓度为0.1％的甲酸乙腈溶液以及质量浓度为0.4ng/mL的内标甲醇溶液；
S2、精密称取预处理后的待测毛发样品，并加入步骤S1所制得的所述内标甲醇溶液，后处理后即得待测样品溶液；
S3、将步骤S2所制得的所述待测样品溶液注入液相色谱串联质谱系统中进行检测；
液相色谱的条件包括：色谱柱为C18色谱柱，100mm×2.1mm，1.7μm；流动相A为步骤S1所制得的所述甲酸乙腈溶液，流动相B为乙腈；流速为0.25mL/min；柱温为常温；进样量为5μL；所述液相色谱的洗脱方式为梯度洗脱，所述梯度洗脱的程序包括：
0min时，流动相A为95％，流动相B为5％；
0.5min时，流动相A为95％，流动相B为5％；
1.0min时，流动相A为85％，流动相B为15％；
2.0min时，流动相A为85％，流动相B为15％；
2.5min时，流动相A为50％，流动相B为50％；
4.0min时，流动相A为50％，流动相B为50％；
5.0min时，流动相A为95％，流动相B为5％；
质谱的条件包括：采用电喷雾离子器质谱的正离子模式检测，选择离子监测模式，采用Analyst software 1.5多工作站进行数据收集和分析，多离子模式监测；质谱仪离子源温度为500℃，直接进样后进行母离子和子离子，以及去簇电压和碰撞能的筛选以得到最大的离子强度，保持碰撞解离能量稳定；
S4、根据标准工作曲线，计算所述待测毛发样品中麦司卡林的质量浓度。
优选地，所述内标甲醇溶液中溶质为25B-NBOMe-D3。
优选地，步骤S2中，所述预处理包括：将待测毛发样品采用丙酮清洗3次，并收集最后一次的丙酮清洗液，吹干后采用甲醇复溶，于室温下干燥，并剪成1mm-2mm段，即可。
优选地，步骤S2中，所述后处理包括：研磨处理、超声处理、离心处理以及过滤处理；其中，
所述研磨处理的温度为4℃以下，速度为6m/s，时间为20s，停留时间为40s，循环次数为10次；
所述超声处理的时间为10min；
所述离心处理的时间为5min；
所述过滤处理的滤膜为0.22μm的微孔滤膜。
优选地，步骤S3中，质谱的条件包括：气帘气为30psi的氮气，电喷雾电压为5500V，碰撞室出口电压为13V，入口电压为10V，辅助气1为35psi，辅助气2为40psi，源温度为500℃。
优选地，步骤S3中，质谱的参数包括：
优选地，步骤S4中，所述标准工作曲线的绘制方法包括：在20mg的空白毛发中分别添加2μL、6μL、20μL、100μL、160μL以及200μL的标准中间液，采用所述检测方法进行检测，以定量离子峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标，绘制所述标准工作曲线，并得到标准工作曲线回归方程。
更优选地，配制所述标准中间液包括：精密移取适量麦司卡林，加入甲醇配制质量浓度为100ng/mL的所述标准中间液。
更优选地，所述标准工作曲线回归方程为y＝0.01015x+0.00348，线性范围为10pg/mg-1000pg/mg，相关系数为0.998，检测限为3pg/mg，定量限为10pg/mg。
本发明采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：
本发明采用冷冻研磨技术作为后处理方法使得毛发样品中的麦司卡林得以释放，相较于其他碱水解、超声等方法，操作更简单，耗时更短；本发明的检测方法简单，灵敏度高，选择性好且分析时间短，仅需5分钟，适合应用于日常案件处理。
附图说明
图1为空白毛发及麦司卡林在毛发中浓度为LOQ时的色谱图；其中，图1A为空白毛发的色谱图，图1B为麦司卡林定量离子对(212.0/180.0)的色谱图，图1C为麦司卡林定性离子对(212.0/165.0)的色谱图；
图2为标准工作曲线(10pg/mg-1000pg/mg)；
图3为标准质量浓度(0.1ng/mL)下麦司卡林和内标的色谱图；
图4为应用实施例中，阳性毛发样本中的麦司卡林色谱图；其中，图4A为阳性毛发中麦司卡林定量离子对(212.0/180.0)的色谱图，图4B为阳性毛发中麦司卡林定性离子对(212.0/165.0)的色谱图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，但不作为本发明的限定。
实施例
标准品、试剂以及样品：
麦司卡林(Mescaline)标准品和氘代内标(Internal standard，IS)25B-NBOMe-D3均购自美国Cerilliant试剂公司；
甲醇和乙腈(UPLC)购自Sigma-Aldrich公司(St.Louis，MO，USA)；甲酸铵(UPLC)购自Fluka(Buchs，Switzerland)公司；甲酸(4.014784.0250，AR)购自CNW(UK)；去离子水由Milli-Q(Millipore，MA，USA)净水系统制备；空白毛发由实验室志愿者获得。
仪器条件：
XW-80A涡旋混合器(上海医科大学仪器厂)，MinnSpin高速离心机(德国Eppendorf公司)，AFS-10超纯水制备系统(德国Merck公司)；
SCIEX ExionLCTM液相色谱仪(美国SCIEX公司)串联QTRAP 6500三重四级杆线性离子阱复合质谱仪(美国SCIEX公司)；色谱柱：Waters Acquity UPLC BEH C18(100mm×2.1mm，1.7μm)，预柱：Waters Acquity UPLC BEH C18(100mm×2.1mm，1.7μm)，使用MultiQuant 3.0.2工作站进行数据分析；
本实施例提供一种毛发中野生乌羽玉致幻成分麦司卡林的检测方法，步骤包括：
S1、将1000μL甲酸与1000mL乙腈混合，即得体积浓度为0.1％的甲酸乙腈溶液；
精密移取适量内标25B-NBOMe-D3溶液，加甲醇溶液，配制为质量浓度为0.4ng/mL的内标甲醇溶液；
S2、精密称取预处理的待测毛发样品20mg置于2mL研磨管中，并加入步骤S1所制得的所述内标甲醇溶液0.7mL，于冷冻研磨仪中研磨后，依次进行超声处理10min以及离心处理5min后，取上清液200μL，用0.22μm的微孔滤膜过滤处理后，即得待测样品溶液；所述预处理包括将毛发样本用丙酮清洗3次，并收集最后一次的丙酮清洗液，吹干后采用甲醇复溶以排除外部污染因素，毛发清洗后于室温下干燥，并剪成1mm-2mm段，即可；所述研磨的温度为4℃以下，速度为6m/s，时间为20s，停留时间为40s，循环次数为10次；
S3、将步骤S2所制得的所述待测样品溶液注入液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)系统中进行检测；
液相色谱的条件包括：色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18(100mm×2.1mm，1.7μm)；流动相A为步骤S1所制得的所述甲酸乙腈溶液，流动相B为乙腈；流速为0.25mL/min；柱温为常温；进样量为5μL；所述液相色谱的洗脱方式为梯度洗脱，所述梯度洗脱的程序如表1所示：
表1
质谱的条件包括：采用电喷雾离子器质谱(Applied Biosystems/MDS SCIEX，Toronto，Canada)的正离子模式检测，选择离子监测模式，采用Analyst software 1.5(Waters)多工作站进行数据收集和分析，多离子模式监测；质谱仪离子源温度为500℃，直接进样后进行母离子和子离子，以及去簇电压(Declustering Potential，DP)和碰撞能(Collision energy，CE)的筛选以得到最大的离子强度，保持碰撞解离能量稳定；通过将各目标分析物分别直接质谱进样，依次确立了麦司卡林和内标物的碎片离子、去簇电压、碰撞能和保留时间如表2所示，使得碎片离子有最大响应值，每个化合物通过两个碎片离子进行计算；
质谱的条件为：气帘气为30psi的氮气；电喷雾电压为5500V；碰撞室出口电压(CXP)为13V；入口电压(EP)为10V；辅助气1(GS1)为35psi；辅助气2(GS2)为40psi；源温度(TEM)为500℃，其它质谱参数与表2一致；
表2
S4、在20mg空白毛发中添加2μL、6μL、20μL、100μL、160μL和200μL的标准中间液，按照步骤S2中样品前处理方法处理后，过0.22μm滤膜，注入液相色谱串联质谱系统中进行检测，以定量离子峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标，绘制标准工作曲线(如图2所示)，得到标准工作曲线回归方程为y＝0.01015x+0.00348，线性范围为10pg/mg-1000pg/mg，相关系数为0.998，检测限为3pg/mg，定量限为10pg/mg；计算所述待测毛发样品中麦司卡林的质量浓度(pg/mg)；配制所述标准中间液包括：精密移取适量麦司卡林，加入甲醇配制为质量浓度为100ng/mL的所述标准中间液。
验证实施例(方法学验证)
1、选择性：将来自10位志愿者的不含目标物的空白毛发进行分析，确保在目标组分的出峰时间内没有其他物质的干扰；通过比较空白毛发样品中各化合物的色谱图，确认内源性物质及可能的同服药物对目标物及内标无干扰；各化合物出峰时间分布在2.77min-3.94min；各目标物在基质中浓度为LOQ时的色谱图如图1所示；
2、检测限(LOD)和定量限(LOQ)：取空白毛发加入标准中间液配置成不同浓度的含全部目标物的毛发样品；以信噪比S/N≥3时的质量浓度为检测限，S/N≥10时的质量浓度为定量限，并将定量限作为线性范围的最小浓度，对6份平行毛发样品进行精密度和准确度实验考察；分别考察质量浓度为10pg/mg、20pg/mg、100pg/mg、800pg/mg的毛发样品，以信噪比S/N≥3时的质量浓度为LOD，S/N≥10时的质量浓度为LOQ；6份LOQ质控毛发样品精密度(relative standard deviation，RSD)小于20％，且准确度在80％-120％之间；实验结果如表3所示，麦司卡林在毛发中的LOD为3pg/mg，LOQ为10pg/mg，足以满足日常检案需要。
3、精密度和准确度：对LOQ、低、中、高四个浓度的毛发样品进行精密度和准确度的考察，取空白毛发加入标准中间液适量得到浓度为10pg/mg、20pg/mg、100pg/mg、800pg/mg的毛发样品，每个浓度点6份平行样品，按步骤S2中的方法进行预处理，按步骤S3中的检测方法进行检测，计算日内精密度和准确度；连续测定4天，计算日间精密度和准确度；精密度用相对标准偏差(relative standard deviation，RSD)表示，将毛发样品与标准曲线同时测定，以当日的标准曲线计算毛发样品平行样的浓度之间的接近程度，精密度考察了在同日和不同日重复实验后的变化，准确度用偏倚表示，通过线性计算浓度，比较线性计算所得值与真实值之间的百分比；结果显示，麦司卡林在毛发中的日内精密度为4.0％-8.8％，日间精密度为1.6％-8.8％，日内准确度为88.8％-106.8％，日间准确度为91.1％-103.5％，表明本发明的方法精密度和准确度良好。
4、线性范围：取空白毛发加入标准中间液和内标甲醇溶液适量，得到质量浓度为10pg/mg、20pg/mg、100pg/mg、800pg/mg的毛发样品；按步骤S2中的方法进行预处理，按步骤S3中的检测方法进行检测，以每个分析物在生物基质中的浓度为横坐标，以分析物的定量离子的峰面积比值为纵坐标，采用加权最小二乘法进行回归运算，求得线性方程，并计算相关系数(R2)；每个化合物的线性方程由5-8个点计算得到，最低浓度为LOQ(S/N≥10)，并确保实际样品的浓度落在线性范围内；结果如表3所示，麦司卡林在相应的浓度在线性范围内线性关系良好，相关系数(R2)＞0.995。
5、提取回收率和基质效应：将样品分为三组计算提取回收率和基质效应；Ⅰ组：不同来源的毛发按步骤S2中的预处理方法处理前添加一定浓度标准中间液；Ⅱ组：不同来源的毛发按步骤S2中的预处理方法处理后添加相应浓度的标准中间液；Ⅲ组：配制相应浓度的标准中间液；取不同来源的空白毛发加入标准中间液适量得到质量浓度为10pg/mg、20pg/mg、100pg/mg、800pg/mg的毛发样品，每个浓度每组各6份样品，按步骤S3中的检测方法进行检测，记录峰面积(A)；提取回收率＝AⅠ/AⅡ，基质效应＝AⅡ/AⅢ；毛发中麦司卡林的提取回收率范围为85.0％-101.0％，基质效应范围为84％-105％，表明麦司卡林在毛发中的回收率良好，基质效应小。
6、稳定性：取不同来源的空白毛发加入标准中间液适量得到质量浓度为10pg/mg、20pg/mg、100pg/mg、800pg/mg的质控样品，每个浓度6份样品，按步骤S2中的方法进行预处理后，4℃自动进样杆下放置24h后考察样品稳定性；结果表明，毛发质控样品在稳定性的准确度为88.7％-110.0％。
表3
应用实施例
采用实施例中的方法对一例阳性样本进行检测，经测定，麦司卡林在毛发中的浓度为242.4pg/mg，色谱图如图4所示。
综上所述，本发明采用冷冻研磨技术作为后处理方法使得毛发样品中的麦司卡林得以释放，相较于其他碱水解、超声等方法，操作更简单，耗时更短；本发明的检测方法简单，灵敏度高，选择性好且分析时间短，仅需5分钟，适合应用于日常案件处理。
以上所述仅为本发明较佳的实施例，并非因此限制本发明的实施方式及保护范围，对于本领域技术人员而言，应当能够意识到凡运用本发明说明书及图示内容所作出的等同替换和显而易见的变化所得到的方案，均应当包含在本发明的保护范围内。
Claims (7)
1.一种毛发中野生乌羽玉致幻成分麦司卡林的检测方法，其特征在于，步骤包括：
S1、配制体积浓度为0.1％的甲酸乙腈溶液以及质量浓度为0.4ng/mL的内标甲醇溶液；
所述内标甲醇溶液中溶质为25B-NBOMe-D3；
S2、精密称取预处理后的待测毛发样品，并加入步骤S1所制得的所述内标甲醇溶液，后处理后即得待测样品溶液；
S3、将步骤S2所制得的所述待测样品溶液注入液相色谱串联质谱系统中进行检测；
液相色谱的条件包括：色谱柱为C18色谱柱，100mm×2.1mm，1.7μm；流动相A为步骤S1所制得的所述甲酸乙腈溶液，流动相B为乙腈；流速为0.25mL/min；柱温为常温；进样量为5μL；所述液相色谱的洗脱方式为梯度洗脱，所述梯度洗脱的程序包括：
0min时，流动相A为95％，流动相B为5％；
0.5min时，流动相A为95％，流动相B为5％；
1.0min时，流动相A为85％，流动相B为15％；
2.0min时，流动相A为85％，流动相B为15％；
2.5min时，流动相A为50％，流动相B为50％；
4.0min时，流动相A为50％，流动相B为50％；
5.0min时，流动相A为95％，流动相B为5％；
质谱的条件包括：采用电喷雾离子器质谱的正离子模式检测，选择离子监测模式，采用Analyst software 1.5多工作站进行数据收集和分析，多离子模式监测；质谱仪离子源温度为500℃，直接进样后进行母离子和子离子，以及去簇电压和碰撞能的筛选以得到最大的离子强度，保持碰撞解离能量稳定；
S4、根据标准工作曲线，计算所述待测毛发样品中麦司卡林的质量浓度；
所述标准工作曲线回归方程为y＝0.01015x+0.00348，线性范围为10pg/mg-1000pg/mg，相关系数为0.998，检测限为3pg/mg，定量限为10pg/mg。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤S2中，所述预处理包括：将待测毛发样品采用丙酮清洗3次，并收集最后一次的丙酮清洗液，吹干后采用甲醇复溶，于室温下干燥，并剪成1mm-2mm，即可。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤S2中，所述后处理包括：研磨处理、超声处理、离心处理以及过滤处理；其中，
所述研磨处理的温度为4℃以下，速度为6m/s，时间为20s，停留时间为40s，循环次数为10次；
所述超声处理的时间为10min；
所述离心处理的时间为5min；
所述过滤处理的滤膜为0.22μm的微孔滤膜。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤S3中，质谱的条件包括：气帘气为30psi的氮气，电喷雾电压为5500V，碰撞室出口电压为13V，入口电压为10V，辅助气1为35psi，辅助气2为40psi，源温度为500℃。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤S3中，质谱的参数包括：
6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤S4中，所述标准工作曲线的绘制方法包括：在20mg的空白毛发中分别添加2μL、6μL、20μL、100μL、160μL以及200μL的标准中间液，采用所述检测方法进行检测，以定量离子峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标，绘制所述标准工作曲线，并得到标准工作曲线回归方程。
7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，配制所述标准中间液包括：
精密移取适量麦司卡林，加入甲醇配制质量浓度为100ng/mL的所述标准中间液。
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Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101398414A (zh) * | 2008-10-15 | 2009-04-01 | 上海市公安局刑事侦查总队 | 液相色谱-质谱同时对242种化合物的定性筛查方法 |
| KR101004749B1 (ko) * | 2010-05-27 | 2011-01-07 | 대한민국 | 기체크로마토그래피를 이용한 소변 중 60종 이상 마약성분의 다성분 동시분석법 |
| CN102077093A (zh) * | 2008-04-29 | 2011-05-25 | 赛凯米迪克斯股份有限公司 | 用于测定角化结构中分析物的非蛋白水解方法 |
| WO2015066459A1 (en) * | 2013-10-31 | 2015-05-07 | Medtech Bioscience, Llc | Analyte detection device and methods of using same |
| CN111487336A (zh) * | 2020-04-13 | 2020-08-04 | 司法鉴定科学研究院 | 一种头发中37种芬太尼类新精神活性物质的分析方法 |
| CN112326819A (zh) * | 2020-10-20 | 2021-02-05 | 司法鉴定科学研究院 | 一种同时测定毛发中依替唑仑、氟硝西泮以及7氨基氟硝西泮的分析方法 |
| CN113267589A (zh) * | 2021-03-18 | 2021-08-17 | 司法鉴定科学研究院 | 一种头发中16种合成大麻素类物质及其代谢物的分析方法 |
| CN113325103A (zh) * | 2021-05-28 | 2021-08-31 | 司法鉴定科学研究院 | 一种同时测定毛发中钩吻素子、钩吻素甲和钩吻素己的分析方法 |
| CN113418994A (zh) * | 2021-04-28 | 2021-09-21 | 浙江工业大学 | 闪蒸-气相色谱/质谱法结合微反应装置测定人体毛发中冰毒和摇头丸含量的方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3149469B1 (en) * | 2014-05-29 | 2020-04-22 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Rare molecule detection |
| WO2020156849A1 (en) * | 2019-01-28 | 2020-08-06 | Redhotdiagnostics Ab | A method for measuring a concentration of a biomarker/analyte in blood from mammals. |
| BR112022020732A2 (pt) * | 2020-04-13 | 2022-12-20 | Univ Basel | Método de dosagem e tratamento de pacientes com um psicodélico, método para determinar uma dose de um psicodélico para um indivíduo, método para definir doses terapêuticas de um psicodélico em ensaios clínicos, método para tratar afecções psiquiátricas em um indivíduo, métodos de terapia, e método para monitorar indivíduos para depressão após tratamento com lsd |
-
2022
- 2022-07-21 CN CN202210860403.8A patent/CN115236230B/zh active Active
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102077093A (zh) * | 2008-04-29 | 2011-05-25 | 赛凯米迪克斯股份有限公司 | 用于测定角化结构中分析物的非蛋白水解方法 |
| CN101398414A (zh) * | 2008-10-15 | 2009-04-01 | 上海市公安局刑事侦查总队 | 液相色谱-质谱同时对242种化合物的定性筛查方法 |
| KR101004749B1 (ko) * | 2010-05-27 | 2011-01-07 | 대한민국 | 기체크로마토그래피를 이용한 소변 중 60종 이상 마약성분의 다성분 동시분석법 |
| WO2015066459A1 (en) * | 2013-10-31 | 2015-05-07 | Medtech Bioscience, Llc | Analyte detection device and methods of using same |
| CN111487336A (zh) * | 2020-04-13 | 2020-08-04 | 司法鉴定科学研究院 | 一种头发中37种芬太尼类新精神活性物质的分析方法 |
| CN112326819A (zh) * | 2020-10-20 | 2021-02-05 | 司法鉴定科学研究院 | 一种同时测定毛发中依替唑仑、氟硝西泮以及7氨基氟硝西泮的分析方法 |
| CN113267589A (zh) * | 2021-03-18 | 2021-08-17 | 司法鉴定科学研究院 | 一种头发中16种合成大麻素类物质及其代谢物的分析方法 |
| CN113418994A (zh) * | 2021-04-28 | 2021-09-21 | 浙江工业大学 | 闪蒸-气相色谱/质谱法结合微反应装置测定人体毛发中冰毒和摇头丸含量的方法 |
| CN113325103A (zh) * | 2021-05-28 | 2021-08-31 | 司法鉴定科学研究院 | 一种同时测定毛发中钩吻素子、钩吻素甲和钩吻素己的分析方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| "The analysis of 132 novel psychoactive substances in human hair using a single step extraction by tandem LC/MS";Vassiliki A. Boumba et al;《FORENSIC SCIENCE INTERNATIONAL》;第第279卷卷;第193-201页 * |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
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