CN115177609A - 绿原酸在制备缓解鸡免疫应激产品中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及家禽养殖技术领域，尤其是涉及一种绿原酸在制备缓解鸡免疫应激产品中的应用。本发明不仅提供绿原酸能够显著提高鸡的抗应激能力的技术方案，同时实现了在日粮中不同水平添加下的精准调控。在集约化养殖日益盛行的大背景下，本发明能够提高养殖成功率、避免了因使用化学药物而造成的药物残留，且饲喂方法简单，具有良好的市场前景。

Description

绿原酸在制备缓解鸡免疫应激产品中的应用
技术领域
本发明涉及家禽养殖技术领域，尤其是涉及一种绿原酸在制备缓解鸡免疫应激产品中的应用。
背景技术
肉鸡的机体发育是非常复杂的代谢过程，其生产性能受到遗传因素和环境因素的共同作用。近年来，随着畜禽养殖业的迅速发展，集约化、规模化养殖方法被广泛使用，然而，集约化的饲养方式容易导致肉鸡生长发育状况不佳，生产性能和抗应激能力的下降。
在过去生产实践中，养殖企业常用氯丙嗪等化学药物添加至饲料中，来防治应激反应对畜禽的影响。但由于其残留时间长，副作用明显，国家已禁止在饲料中添加。因此，研究开发出能有效增强肉鸡抗应激反应，稳定和安全的饲料级抗生素的替代品，是当前养鸡生产迫切需要解决的重要问题。
中草药因其天然，无残留等特点引起了人们的广泛关注。绿原酸(CGA) 是植物经光合作用合成的一种苯丙素类似物，是杜仲、金银花等中药材的主要活性成分。但是目前CGA在畜禽上的研究较少，且以成分复杂，物质基础不明确的植物提取物形式应用，导致绿原酸对家禽的作用机制仍不清楚。
有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的之一在于提供绿原酸在缓解鸡免疫应激中的应用。
本发明的目的之二在于提供绿原酸在制备缓解鸡免疫应激产品中的应用。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
绿原酸在缓解鸡免疫应激中的应用。
绿原酸在制备缓解鸡免疫应激产品中的应用。
进一步地，免疫应激为LPS注射造成的免疫应激。
进一步地，绿原酸的功能包括促进鸡采食量、促进鸡增重、降低料重比、促进鸡肠道发育、减低鸡血清中皮质酮水平、降低鸡血清中肿瘤坏死因子水平和改善鸡免疫器官发育中的至少一种。
进一步地，所述肠道包括十二指肠、空肠和回肠。
进一步地，免疫器官包括法氏囊、脾脏和胸腺。
进一步地，所述鸡为肉鸡。
进一步地，所述产品为鸡饲料。
进一步地，绿原酸作为添加剂添加到鸡饲料中。
进一步地，绿原酸占鸡饲料的质量百分比为0.05％-0.15％。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
发明人通过LPS持续不断的多次注射，应激肉鸡生产性能展示出持续的抑制状态。在日粮中添加不同浓度的绿原酸可以有效缓解应激肉鸡生产性能的抑制、提高应激肉鸡采食量和体增重。此外，绿原酸改善了应激组肉鸡的肠道和免疫器官的发育，并显著下调了由LPS诱导的应激肉鸡血清中皮质酮(CORT)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达，实现了对炎症反应的抑制。在集约化养殖日益盛行的大背景下，本发明能够提高养殖成功率、避免了因使用化学药物而造成的药物残留，且饲喂方法简单，具有良好的市场前景。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明通过肉鸡腹腔连续注射相同剂量的LPS(0.5mg/kg)构建免疫应激模型，并检测肉鸡血清中皮质酮的表达，判断应激模型是否建立成功，同时通过饲喂添加不同比例的绿原酸(HPLC98％)日粮评估LPS诱导的免疫应激导致的肉鸡生产性能的下降的现象是否受到绿原酸的调控，从而筛选出能够缓解肉鸡免疫应激的最佳适用浓度，探索出绿原酸在应激肉鸡生长中的分子机制。
本发明中绿原酸是杜仲提取物，HPLC≥98％，避免了植物提取物其他成分的干扰。
料肉比(FCR)是指饲养的畜禽增重一公斤所消耗的饲料量，它是评价饲料报酬的一个重要指标，也是编制生产计划和财务计划的重要依据。料肉比高说明用的饲料多，但增长的肉少；反之，料肉比低说明用的饲料少，但增长的肉多。料肉比＝消耗饲料总量(kg)/增重总量(kg)。
下面通过实施例对本发明作进一步说明。如无特别说明，实施例中的材料为根据现有方法制备而得，或直接从市场上购得。
实施例
(1)实验设计及分组：
选取420只1日龄AA雄性肉鸡，随机分为5个处理：对照组、应激组(LPS为0.5mg/kg)、绿原酸添加组(0.05％CGA+0.5mg/kg LPS组、0.1％ CGA+0.5mg/kg LPS组、0.15％CGA+0.5mg/kg LPS组、)，对照组和应激组饲喂普通日粮，绿原酸添加组饲喂添加不同比例的绿原酸日粮，每个处理6 个重复，每个重复14只鸡。绿原酸添加组肉鸡从1日龄开始饲喂添加绿原酸的肉鸡饲粮。基础饲粮参考肉鸡饲养标准配比，其组成及营养水平见表 1。
表1基础日粮组成成分及营养水平
Figure BDA0003686130940000041
1)微量元素预混料为每千克配合饲料提供：铜8mg(CuSO4·5H2O)；铁80mg(FeSO4)；锰100 mg(MnSO4·H2O)；硒0.15mg(Na2SeO3)；碘0.35mg(KI)。
2)维生素预混料为每千克配合饲料提供：VA 9500IU，VD3 62.5ug，VE 30IU，VK32.65mg， VB1 2mg，VB6 6mg，VB12 0.025mg，生物素0.0325mg，叶酸1.25mg，泛酸12mg，烟酸50mg。
从肉鸡14日龄开始，不同处理组每天接受一次注射，如表2所示，连续注射9天。在每天注射后24h，从每一笼中挑选一只鸡进行断头采血，取免疫器官、肠道等。在首次注射后2h，4h相同处理。
表2各处理组注射情况
处理组 腹腔注射
saline saline
LPS LPS(0.5mg/kg)
0.05％CGA+LPS LPS(0.5mg/kg)
0.1％CGA+LPS LPS(0.5mg/kg)
0.15％CGA+LPS LPS(0.5mg/kg)
(2)测定肉鸡生产性能
肉仔鸡空腹8h后，以重复为单位称重，记录14、15、17、19、21 日龄的体重，并计算14-15、15-17、17-19、19-21日龄的平均日采食量、平均日增重和料重比。
绿原酸对应激肉鸡不同生长阶段生产性能的影响统计结果如表3所示。从表中结果可以看出，在每天一次腹腔注射相同剂量的LPS的情况下，LPS 对于肉鸡生产性能的抑制贯穿至整个注射周期，与应激组相比，日粮中添加不同比例的绿原酸缓解了实验全期(14d-21d)应激肉鸡的平均日增重的抑制，且0.05％及0.1％绿原酸显著提高了实验全期(14d-21d)应激肉鸡的平均日采食量；0.05％、0.1％及0.15％绿原酸缓解了14-15d、15-17d及17-19d 应激肉鸡采食量的抑制，0.05％及0.1％绿原酸缓解了19-21d应激肉鸡采食量的抑制，且0.05％及0.1％绿原酸在15-17d及17-19d时达到显著水平。同时，0.1％及0.15％绿原酸显著提高了14-15d应激肉鸡的体增重，0.05％绿原酸缓解了17-19d应激肉鸡体增重的抑制，但0.05％绿原酸添加组与应激组相比差异不显著；绿原酸对料肉比的影响主要发生在14-15d，在此生长阶段，应激组肉鸡料肉比显著升高，日粮中添加不同浓度的绿原酸可显著降低应激肉鸡的料肉比。
表3 CGA对应激肉鸡不同生长阶段生产性能的影响
Figure BDA0003686130940000061
注：同一行数据不同上标字母表示差异显著(P＜0.05)
(3)测定免疫器官和肠道指数
摘取肉鸡胸腺、脾脏、法氏囊，分别进行称重，计算免疫器官指数。摘取肉鸡十二指肠、空肠、回肠，测量长度。
绿原酸对应激肉鸡十二指肠长度的影响统计结果如表4所示；绿原酸对应激肉鸡空肠长度的影响统计结果如表5所示；绿原酸对应激肉鸡回肠长度的影响统计结果如表6所示。从表中可以看出，与对照组相比，17d应激组肉鸡的空肠长度显著减少，日粮中添加0.05％、0.1％和0.15％比例的绿原酸可显著增加17d应激肉鸡空肠长度；绿原酸对应激肉鸡回肠长度的影响主要发生在23d，与对照组相比，23d应激组肉鸡的回肠长度显著减少，日粮中添加0.05％、0.1％和0.15％的绿原酸可有效缓解应激肉鸡回肠长度增长的抑制。
表4 CGA对应激肉鸡十二指肠长度的影响
(cm)
日龄(d) 对照组 应激组 0.05％CGA组 0.1％CGA组 0.15％CGA组
15 19.53±2.265 19.60±1.972 20.50±2.429 20.60±1.193 21.60±1.296
17 18.42±2.200 19.83±1.722 18.83±1.835 19.17±1.329 19.60±1.497
19 19.33±1.366 18.40±1.020 18.67±1.033 19.83±1.472 18.33±1.506
21 21.25±0.987<sup>a</sup> 19.80±1.33<sup>ab</sup> 20.33±1.211<sup>ab</sup> 21.00±1.550a 19.40±1.020<sup>b</sup>
23 21.83±1.237 21.60±4.869 23.92±2.800 24.23±3.859 25.50±2.589
注：同一行数据不同上标字母表示差异显著(P＜0.05)
表5 CGA对应激肉鸡空肠长度的影响
(cm)
日龄(d) 对照组 应激组 0.05％CGA组 0.1％CGA组 0.15％CGA组
15 45.23±3.676 42.40±3.727 43.40±4.800 45.95±5.846 46.02±4.578
17 44.70±1.327<sup>c</sup> 42.30±0.400<sup>d</sup> 45.67±4.008<sup>bc</sup> 48.08±3.29<sup>ab</sup> 50.58±2.538<sup>a</sup>
19 56.83±1.941 53.80±5.418 52.67±2.658 53.00±3.578 52.00±4.775
21 51.00±2.828<sup>a</sup> 50.00±3.286<sup>a</sup> 45.90±2.538<sup>b</sup> 51.25±2.752<sup>a</sup> 48.17±4.535<sup>ab</sup>
23 42.90±3.200 41.25±3.657 39.17±3.545 40.25±1.405 41.92±2.691
注：同一行数据不同上标字母表示差异显著(P＜0.05)
表6 CGA对应激肉鸡回肠长度的影响
(cm)
Figure BDA0003686130940000071
Figure BDA0003686130940000081
注：同一行数据不同上标字母表示差异显著(P＜0.05)
绿原酸对应激肉鸡脾脏指数的影响统计结果如表7所示；绿原酸对应激肉鸡法氏囊指数的影响统计结果如表8所示；绿原酸对应激肉鸡胸腺指数的影响统计结果如表9所示。从表中可以看出，在攻毒前中期，LPS使应激肉鸡胸腺指数(17d)和法氏囊指数(19d)显著减小，在日粮中添加不同水平的绿原酸可升高胸腺指数，且0.05％及0.15％绿原酸添加组达到显著水平，0.05％及0.1％绿原酸对19d应激肉鸡法氏囊指数有升高作用，但差异并不显著；在攻毒后期(21d、23d)，LPS使应激组脾脏指数显著升高，在日粮中添加0.05％及0.1％的绿原酸可降低应激组肉鸡脾脏指数，但差异并不显著。
表7 CGA对应激肉鸡脾脏指数的影响
(g/kg)
日龄(d) 对照组 应激组 0.05％CGA组 0.1％CGA组 0.15％CGA组
15 0.91±0.360 0.88±0.220 1.10±0.211 1.02±0.349 1.16±0.341
17 0.87±0.266 1.08±0.216 0.96±0.261 0.88±0.176 0.95±0.098
19 0.97±0.136 1.06±0.149 1.17±0.394 1.24±0.392 1.12±0.328
21 0.90±0.159<sup>b</sup> 1.51±0.545<sup>a</sup> 1.31±0.278<sup>ab</sup> 1.19±0.213<sup>ab</sup> 1.50±0.391<sup>a</sup>
23 0.87±0.136<sup>b</sup> 1.17±0.202<sup>a</sup> 1.45±0.270<sup>a</sup> 1.26±0.399<sup>a</sup> 1.35±0.193<sup>a</sup>
注：同一行数据不同上标字母表示差异显著(P＜0.05)
表8 CGA对应激肉鸡法氏囊指数的影响
(g/kg)
日龄(d) 对照组 应激组 0.05％CGA组 0.1％CGA组 0.15％CGA组
15 2.32±0.478 2.17±0.279 2.07±0.585 1.88±0.444 1.86±0.357
17 2.17±0.618<sup>ab</sup> 1.87±0.450<sup>b</sup> 2.10±0.493<sup>ab</sup> 2.65±0.573<sup>a</sup> 1.95±0.408<sup>b</sup>
19 2.61±0.621<sup>a</sup> 1.93±0.232<sup>b</sup> 2.19±0.482<sup>ab</sup> 2.34±0.535<sup>ab</sup> 1.96±0.356<sup>b</sup>
21 2.09±0.521<sup>ab</sup> 1.73±0.990<sup>b</sup> 1.80±0.670<sup>b</sup> 1.84±0.500<sup>b</sup> 2.82±0.693<sup>a</sup>
23 2.2±0.476 1.70±0.741 1.90±0.709 2.12±0.184 2.31±0.945
注：同一行数据不同上标字母表示差异显著(P＜0.05)
表9 CGA对应激肉鸡胸腺指数的影响
(g/kg)
Figure BDA0003686130940000091
注：同一行数据不同上标字母表示差异显著(P＜0.05)
(4)血清因子检测
采用酶联免疫法(ELISA)依次测定血清样品中的CORT、TNF-α、IL-1 β浓度。
绿原酸对应激肉鸡血清皮质酮的影响统计结果如表10所示。从表中可以看出，与对照组相比，应激肉鸡血清中皮质酮(17d)显著升高，日粮中添加不同浓度绿原酸可显著降低血清中皮质酮的表达。
表10 CGA对应激肉鸡血清皮质酮的影响
(ng/mL)
Figure BDA0003686130940000092
注：同一行数据不同上标字母表示差异显著(P＜0.05)
绿原酸对应激肉鸡血清肿瘤坏死因子的影响统计结果如表11所示；绿原酸对应激肉鸡血清白介素1β的影响统计结果如表12所示。从表中可以看出，与对照组相比，应激肉鸡血清中肿瘤坏死因子(15d)显著升高，日粮中添加0.1％的绿原酸可显著降低肿瘤坏死因子的表达，说明本发明中绿原酸对于肉鸡的抗应激能力和免疫功能的增强有促进作用。
表11 CGA对应激肉鸡血清肿瘤坏死因子的影响
(ng/L)
Figure BDA0003686130940000101
注：同一行数据不同上标字母表示差异显著(P＜0.05)
表12 CGA对应激肉鸡血清白细胞介素1β的影响
(ng/L)
日龄(d) 对照组 应激组 0.05％CGA组 0.1％CGA组 0.15％CGA组
14d(2h) 183.47±29.738<sup>ab</sup> 77.04±23.80<sup>b</sup> 285.91±215.281<sup>a</sup> 170.78±42.126<sup>ab</sup> 127.66±36.018<sup>ab</sup>
14d(4h) 147.47±57.973<sup>a</sup> 140.41±42.7<sup>a</sup> 46.84±15.777<sup>b</sup> 45.87±25.008<sup>b</sup> 67.62±15.284<sup>b</sup>
15 64.23±15.956<sup>c</sup> 73.98±14.7<sup>bc</sup> 107.55±22.014<sup>ab</sup> 120.11±26.270<sup>a</sup> 89.27±34.133<sup>abc</sup>
17 67.99±15.138 69.46±24.55 66.78±11.213 58.92±15.214 84.18±24.422
19 106.62±18.055 105.80±41.7 124.94±92.654 68.47±10.391 103.53±69.483
21 275.59±190.85<sup>ab</sup> 156.39±77.7<sup>b</sup> 428.83±57.846<sup>a</sup> 168.69±75.747<sup>b</sup> 115.42±53.322<sup>b</sup>
23 115.12±26.069<sup>b</sup> 151.4±41.6<sup>ab</sup> 102.76±54.205<sup>b</sup> 140.39±44.755<sup>ab</sup> 227.97±105.298<sup>a</sup>
注：同一行数据不同上标字母表示差异显著(P＜0.05)
结论：
本发明将绿原酸应用在肉鸡免疫应激实验中，实验结果显示在日粮中添加0.05％～0.15％比例的绿原酸可以增强肉鸡的抗应激能力，改善肉鸡的生长状况，从而提高了肉鸡的生产性能。其中绿原酸在实验前期(15d)以0.1％和0.15％的添加水平效果较好，在实验中后期(17、19d、21d、23d) 以0.05％和0.1％的添加水平效果较好。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.绿原酸在缓解鸡免疫应激中的应用。
2.绿原酸在制备缓解鸡免疫应激产品中的应用。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，免疫应激为LPS注射造成的免疫应激。
4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，绿原酸的功能包括促进鸡采食量、促进鸡增重、降低料重比、促进鸡肠道发育、减低鸡血清中皮质酮水平、降低鸡血清中肿瘤坏死因子水平和改善鸡免疫器官发育的至少一种。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述肠道包括十二指肠、空肠和回肠。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，免疫器官包括法氏囊、脾脏和胸腺。
7.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述鸡为肉鸡。
8.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品为鸡饲料。
9.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，绿原酸作为添加剂添加到鸡饲料中。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，绿原酸占鸡饲料的质量百分比为0.05％-0.15％。
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CN1899279A (zh) * 2005-07-22 2007-01-24 四川九章生物化工科技发展有限公司 绿原酸在制备具有保护肝脏功效药物的用途
CN104586828A (zh) * 2015-02-13 2015-05-06 四川九章生物科技有限公司 绿原酸在制备治疗绒毛膜癌的药物中的用途
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