CN115151276A - 人抗tslp抗体的配制品及其使用方法 - Google Patents

Abstract

本文提供了包含大于约100mg/mL的抗TSLP抗体、表面活性剂、脯氨酸、和缓冲剂的组合物，这些组合物包含大于约100mg/mL的抗TSLP抗体、表面活性剂、脯氨酸、和缓冲剂。还提供了用于治疗受试者的炎性疾病的方法。

Description

人抗TSLP抗体的配制品及其使用方法

相关申请的交叉引用

本申请要求于2020年2月18日提交的美国临时专利申请号62/978,201的优先权，该临时专利申请通过引用以其全文并入。

技术领域

本发明涉及人抗TSLP单克隆抗体，包括泰派鲁单抗(tezepelumab)的高浓度水性配制品及其生物类似物(biosimilar)。

通过引用并入以电子方式提交的材料

通过引用整体并入的是与本文同时提交的计算机可读核苷酸/氨基酸序列表，其鉴定如下：名称为“55238_Seqlisting.txt”的9,856字节ASCII(文本)文件；创建于2021年2月16日。

背景技术

相关技术

在最近的2期、随机、双盲、安慰剂对照的临床试验中，将泰派鲁单抗(也称为AMG157和MED9929)以范围为70mg至280mg的剂量施用至人。与接受安慰剂的受试者相比，接受泰派鲁单抗的受试者表现出更低的临床上显著的哮喘恶化率。

药物配制品中的蛋白质浓度增加可引起稳定性问题，例如会导致形成高分子量物质(HMWS)的蛋白质聚集。在一些蛋白质配制品中，可能特别关注HMWS，尤其是保留单体对应物的大部分天然构型的那些HMWS。聚集也可能影响治疗性蛋白质的皮下生物利用度及药代动力学。

填充及精加工操作以及药物产品的施用可涉及使蛋白质溶液流过活塞泵、蠕动泵或注射针的步骤。这种过程可能赋予剪切应力及机械应力，由此可能致使蛋白质变性且造成聚集。在蛋白质溶液较浓时，此现象可能加重。

发明内容

本文提供了用于抗TSLP抗体的改善的配制品，该改善的配制品具有增加的稳定性和低粘度、同时含有高浓度的抗体。

本披露的一个方面是组合物，该组合物包含大于约100mg/mL的抗TSLP抗体、表面活性剂、脯氨酸、和缓冲剂。在示例性方面中，该抗TSLP抗体以小于约200mg/mL或小于约150mg/mL的浓度存在于该组合物中。在示例性方面中，该抗TSLP抗体以约110mg/mL至约140mg/mL的浓度存在于该组合物中。在示例性方面中，该抗TSLP抗体以约110mg/mL±10％或约140mg/mL±10％的浓度存在于该组合物中。任选地，该抗TSLP抗体以约105mg/mL至约115mg/mL的浓度存在于该组合物中。在示例性方面中，该表面活性剂是两亲性的和非离子性的。在示例性方面中，该表面活性剂是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80、或其混合物。在示例性实例中，该表面活性剂以小于或约0.015％(w/v)±0.005％(w/v)，例如约0.005％(w/v)至约0.015％(w/v)表面活性剂的浓度存在于该组合物中。在一些情况下，该表面活性剂的浓度是约0.005％(w/v)、0.010％(w/v)、或0.015％(w/v)。在示例性方面中，该组合物包含小于约3.0％(w/v)脯氨酸，例如约2.4％(w/v)至约2.8％(w/v)脯氨酸，或约2.5％(w/v)至约2.8％(w/v)脯氨酸。在示例性实例中，该脯氨酸是L-脯氨酸。在某些方面中，脯氨酸是存在于该组合物中的唯一氨基酸。在示例性方面中，该缓冲剂选自由以下组成的组：琥珀酸盐、谷氨酸盐、组氨酸、和乙酸盐。在优选的实例中，该缓冲剂是乙酸盐。在示例性方面中，该组合物包含约1mM至约50mM缓冲剂，例如约10mM至约30mM缓冲剂，任选地，约15mM至约30mM缓冲剂、约20mM至约30mM缓冲剂、或约10mM至约25mM缓冲剂。任选地，该缓冲剂包含约20mM至约2mM缓冲剂(例如，约20mM至约28mM缓冲剂、约23mM至约28mM、或约24mM至约28mM)。在示例性方面中，该组合物包含不超过0.001％(w/v)的糖或柠檬酸盐，任选地，其中该糖是二糖，例如海藻糖和蔗糖。在示例性方面中，该组合物是液体，并且任选地，pH小于约6.0，任选地，小于约5.5。在某些方面中，pH是约4.5至约5.5、或约4.8至约5.4、或约4.9、约5.2、或约5.4。在示例性方面中，该组合物的特征在于相对于不包含脯氨酸的液体组合物，粘度降低。例如，在一些情况下，该组合物的特征在于当该抗TSLP抗体的浓度小于155mg/mL时，在约20℃至约25℃下的粘度小于约24cP，任选地，当该抗TSLP抗体的浓度是约110mg/mL时，粘度是约6cP，或者当该抗TSLP抗体的浓度是约140mg/mL时，粘度是约15cP。在一些方面中，该组合物的特征在于粘度是约5cP至约20cP。在不同情况下，该组合物是等渗的或者具有处于约200mOsm/kg至约500mOsm/kg、或约225mOsm/kg至约400mOsm/kg、或约250mOsm/kg至约350mOsm/kg范围内的渗透压。在示例性实例中，该组合物适合于在25℃、30℃、或在40℃下短期储存或者在约-30℃或约2℃至约8℃下长期储存。例如，如通过尺寸排阻色谱法(SEC)确定的，在2℃至8℃下储存6个月后，小于0.5％的治疗性蛋白质被降解，任选地，其中该治疗性蛋白质包含在玻璃小瓶或注射器中。还例如，如通过尺寸排阻色谱法(SEC)确定的，在2℃至8℃下储存约24个月至约36个月后，小于5％的抗体被降解，任选地，其中在2℃至8℃下储存24个月或36个月后，小于2％的抗体被降解。在多个方面中，如通过SEC确定的，在约25℃下储存至少2周后(任选地，至少1个月后、至少2个月后、至少3个月后、至少4个月后、至少5个月后或至少6个月后)，小于5％的抗体被降解。在不同情况下，如通过SEC确定的，在2℃至8℃下储存约24个月至约36个月后，随后在约25℃下储存至少2周或至少1个月或至少2个月后，小于5％的抗体被降解。在示例性实例中，该抗TSLP抗体是IgG2抗体。在一些方面中，该抗TSLP抗体与SEQ ID NO:2的氨基酸29-159中所示的TSLP多肽特异性结合。任选地，该抗体的两个结合位点具有与TSLP的相同的结合。在示例性实例中，该抗TSLP抗体包含(A)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列的轻链CDR1序列；(ii)含有SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列的轻链CDR2序列；和(iii)含有SEQID NO:5中所示的氨基酸序列的轻链CDR3序列；和(B)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:6中所示的氨基酸序列的重链CDR1序列；(ii)含有SEQ ID NO:7中所示的氨基酸序列的重链CDR2序列，和(iii)含有SEQ ID NO:8中所示的氨基酸序列的重链CDR3序列。在示例性方面中，该抗TSLP抗体包含：(A)轻链可变结构域，该轻链可变结构域选自由以下组成的组：(i)与SEQ ID NO:12具有至少80％同一性的氨基酸序列；(ii)由与SEQID NO:11具有至少80％同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；(iii)由在中等严格条件下与由SEQ ID NO:11组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；和(B)重链可变结构域，该重链可变结构域选自由以下组成的组：(i)与SEQ ID NO:10具有至少80％同一性的氨基酸序列；(ii)由与SEQ ID NO:9具有至少80％同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；(iii)由在中等严格条件下与由SEQ ID NO:9组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；或者(C)(A)的轻链可变结构域和(B)的重链可变结构域。

本披露的另一个方面是组合物，该组合物包含约110mg/mL至约140mg/mL泰派鲁单抗、约0.01％(w/v)±0.005％(w/v)聚山梨醇酯80、约2.4％(w/v)至约2.8％(w/v)L-脯氨酸、以及约20mM至约28mM乙酸盐，其中该组合物的粘度小于约20cP，并且pH小于约5.5。任选地，该pH是5.2，任选地，其中在约20℃至约25℃下的粘度是约15cP。

本披露的另一个方面是组合物，该组合物包含约110mg/mL的抗TSLP抗体、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80、约2.4％(w/v)至约2.8％(w/v)L-脯氨酸、以及约20mM至约28mM乙酸盐，其中该组合物的pH是约5.2。任选地，该组合物包含约22mM至约26mM乙酸盐，或约24mM至约26mM。

本披露的另一个方面是组合物，该组合物包含约140mg/mL的抗TSLP抗体、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80、约2.5％(w/v)至约2.8％(w/v)L-脯氨酸、以及约20mM至约28mM乙酸盐，其中该组合物的pH是约5.2。任选地，该组合物包含约25mM至约26mM乙酸盐。

在多个实施例中，该组合物包含110mg/mL抗TSLP抗体、24mM乙酸盐、2.5％(w/v)L-脯氨酸、和0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，pH为5.2。在多个实施例中，该组合物包含110mg/mL抗TSLP抗体、10mM乙酸盐、3.0％(w/v)L-脯氨酸、和0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，pH为5.2。

本披露的另一个方面是制品，该制品包含当前披露的任一种组合物，任选地，包含约0.5mL至约5mL(例如，约0.5mL至约3mL)的组合物。

本披露的另一个方面是预填充注射器，该预填充注射器包含当前披露的任一种组合物，任选地，包含约0.5mL至约5mL(例如，约0.5mL至约3mL)的组合物。

本披露的另一个方面是小瓶，该小瓶包含当前披露的任一种组合物，任选地，包含约0.5mL至约5mL(例如，约0.5mL至约3mL)的组合物。

还提供一种自动注射器，该自动注射器含有本文所述的组合物，任选地，包含约0.5mL至约5mL(例如，约0.5mL至约3mL)的组合物。在多种实施例中，该自动注射器是Ypsomed

在多种实施例中，该自动注射器披露于WO2018/226565、WO 2019/094138、WO 2019/178151、WO 20120/072577、WO2020/081479、WO 2020/081480、PCT/US 20/70590、PCT/US 20/70591、PCT/US20/53180、PCT/US 20/53179、PCT/US 20/53178、或PCT/US20/53176。

本披露的另一个方面是用于治疗受试者的炎性疾病的方法，该方法包括向该受试者施用治疗有效量的如前述权利要求中任一项所述的组合物。在示例性实例中，该炎性疾病选自由以下组成的组：哮喘、特应性皮炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、嗜酸细胞性食管炎(EoE)、鼻息肉、慢性自发性荨麻疹、Ig驱动的疾病(例如IgA肾病&狼疮性肾炎)、嗜酸细胞性胃炎、无鼻息肉的慢性鼻窦炎和特发性肺纤维化(IPF)。在示例性方面中，该方法包括以每2周或每4周的间隔施用该组合物。任选地，将该组合物施用至少4个月、6个月、9个月、1年或更长时间的时期。在多个实施例中，该炎性疾病是哮喘。在一些方面中，该哮喘是重度哮喘、嗜酸细胞性哮喘或非嗜酸细胞性哮喘、或低嗜酸细胞哮喘。在示例性实例中，该受试者是成年人。在可替代的方面中，该受试者是儿童或青少年。在示例性实例中，该施用减少该受试者的血液、痰液、支气管肺泡液或肺中的嗜酸细胞。在一些方面中，该施用将该受试者中的细胞计数自Th2高群体变成Th2低群体。在某些方面中，该施用改善受试者中选自由以下组成的组的一个或多个哮喘量度：用力呼气量(FEV)、FEV1可逆性、用力肺活量(FCV)、FeNO、哮喘控制问卷-6评分和AQLQ(S)+12评分。在示例性方面中，如通过哮喘症状日志测量的，该施用改善哮喘的一种或多种症状。在多个实施例中，该施用为皮下或静脉内。在多个实施例中，该施用为皮下。

本披露的另一个方面是供储存或使用的组合物的呈现形式，例如，于单次使用小瓶，单次使用注射器，或者玻璃、玻璃内衬或玻璃涂覆主容器中。

本披露的另一个方面提供泰派鲁单抗或另一个人抗TSLP单克隆抗体或其抗原结合部分用于制造如本文所述的用以治疗需要抗TSLP单克隆抗体的受试者的药物的用途。

本披露的另一个方面是试剂盒，该试剂盒包括本文所述的组合物或制品，以及包装插页、包装标签、说明书或者指导或披露本文中所披露的任何方法或实施例的其他标记。

本披露的另一个方面是制备稳定的液体抗体组合物的方法，该稳定的液体抗体组合物具有小于约24cP的粘度并且包含小于约200mg/mL的抗TSLP抗体、表面活性剂和缓冲剂，所述方法包括(i)将包含以第一浓度的抗体、乙酸盐和脯氨酸的第一溶液与包含乙酸盐和脯氨酸的缓冲剂组合，以获得包含约110mg/mL至约140mg/mL泰派鲁单抗、脯氨酸和乙酸盐的溶液以及(ii)向该溶液中添加表面活性剂以达到约0.01％(w/v)±0.005％(w/v)表面活性剂的最终浓度。在一些方面中，添加脯氨酸后，该稳定的液体组合物的粘度小于约20cP。在示例性方面中，将包含约200mM至约300mM脯氨酸的溶液与第一溶液组合。在示例性方面中，该脯氨酸是L-脯氨酸。在某些实例中，该表面活性剂是聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。在示例性方面中，该缓冲剂由冰乙酸制成。在多个方面中，该缓冲剂包含约1mM至约30mM乙酸盐，任选地，约5mM至约15mM乙酸盐。在一些情况下，该稳定的液体抗体组合物的pH是约5.2。

在另外的方面，提供了制备稳定的液体抗体组合物的方法，该组合物具有小于约24cP的粘度并包含小于约200mg/mL的抗TSLP抗体、表面活性剂和缓冲剂，所述方法包括用包含约10mM至约20mM乙酸盐和约2.7％(w/v)至约3.3％(w/v)，pH约4.9至约5.5的缓冲剂配制抗TSLP抗体，以及(ii)添加表面活性剂以达到约0.005％(w/v)±0.015％(w/v)表面活性剂的最终浓度。在多个实施例中，该缓冲剂使用冰乙酸制成。在多个实施例中，将缓冲剂使用氢氧化钠滴定至pH 5.2。

还提供用于注射的溶液，该溶液(i)包含约110mg/mL至约115mg/mL泰派鲁单抗、约24mM至约26mM使用冰乙酸制成的乙酸盐、约2.4％至约2.6％(w/v)L-脯氨酸、约0.01％聚山梨醇酯80、氢氧化钠、和注射用水，(ii)具有约5.2的pH和约3年的保质期。在多个实施例中，提供了预填充注射器，该预填充注射器包含约1.91mL的稳定的液体抗体组合物。

根据以下详细描述的综述，结合附图，其他方面及优势对本领域普通技术人员将显而易见。尽管这些组合物、制品及方法易于应用于各种形式的实施例，但在理解本披露为说明性的而非意欲本发明受限于本文所述的特定实施例的情况下，以下描述包括特定实施例。关于本文所述的组合物、制品及方法，预期任选的特征，包括但不限于组分、其组成范围、取代基、条件及步骤，选自本文提供的各个方面、实施例及实例。

附图说明

图1A是粘度(cP)随配制品中蛋白质(泰派鲁单抗)浓度(mg/mL)而变化的图，该配制品包含蔗糖(圆圈)或脯氨酸(正方形)。配制品以实验室规模制备并在粘度测量过程中不包含表面活性剂。测定温度：20℃。

图1B是在40℃、30℃、或2℃-8℃下储存的一系列配制品的尺寸排阻色谱法(SEC)主峰％随时间(月)而变化的图，该配制品包含约130mg/mL泰派鲁单抗和脯氨酸或山梨糖醇。配制品以实验室规模制备并包含表面活性剂。

图2是在40℃下储存的配制品SEC主峰％随时间(月)而变化的图，该配制品包含泰派鲁单抗(约130mg/mL)和脯氨酸(圆圈)、脯氨酸和乙酸钙(正方形)、或脯氨酸和乙酸镁(三角形)。配制品以实验室规模制备并包含表面活性剂。

图3是在2℃至8℃下储存的一系列配制品SEC主峰％随时间(月)而变化的图，该配制品包含约110mg/mL泰派鲁单抗。使用了两种不同批次的抗体(批次A和批次B)。配制品以实验室规模制备并包含表面活性剂。

图4是在-30℃下储存的三个批次泰派鲁单抗(约140mg/mL)SEC主峰％随时间(月)而变化的图，使用储存在单次使用的系统袋中。原料药的批次以大规模制备并包含表面活性剂。

图5A是在40℃下储存的四个批次泰派鲁单抗(约110mg/mL)SEC主峰％随时间(月)而变化的图。将批次1的一个样品装入预填充注射器(PFS)中，然后储存。将批次1-4的样品装入小瓶中，然后储存。药物产品的批次以大规模制备并包含表面活性剂。

图5B是在30℃下储存的四个批次泰派鲁单抗(约110mg/mL)SEC主峰％随时间(月)而变化的图。将批次1-3的每一批的样品装入预填充注射器(PFS)中，然后储存。将批次5的样品装入小瓶中，然后储存。药物产品的批次以大规模制备并包含表面活性剂。

图6A是在25℃下储存的五个批次泰派鲁单抗(约110mg/mL)SEC主峰％随时间(月)而变化的图。将批次1-3的每一批的样品装入预填充注射器(PFS)中，然后储存。将批次1-5的样品装入小瓶中，然后储存。药物产品的批次以大规模制备并包含表面活性剂。

图6B是在2℃-8℃下储存的五个批次泰派鲁单抗(约110mg/mL)SEC主峰％随时间(月)而变化的图。将批次1-2的每一批的样品装入预填充注射器(PFS)，然后储存。将批次1-5的每一批的样品装入小瓶中，然后储存。药物产品的批次以大规模制备并包含表面活性剂。

图7A-7B显示了表6中的脯氨酸配制品在预填充注射器(图7A)中或在玻璃小瓶(图7B)中在2℃-8℃或25℃下储存长达6个月，或在40℃下储存1个月的SEC主峰％。配制品以实验室规模制备。

图8A-8B显示了表6中的脯氨酸配制品在预填充注射器(图8A)中或在玻璃小瓶(图8B)中在2℃-8℃或25℃下储存长达6个月，或在40℃下储存1个月的SEC％HWM物质。配制品以实验室规模制备。

图9A-9B显示了表6中的脯氨酸配制品在预填充注射器(图9A)中或在玻璃小瓶(图9B)中在2℃-8℃或25℃下储存长达6个月，或在40℃下储存1个月的CEX主峰％。配制品以实验室规模制备。

图10A-10B显示了表6中的脯氨酸配制品在预填充注射器(图10A)中或在玻璃小瓶(图10B)中在2℃-8℃或25℃下储存长达6个月，或在40℃下储存1个月的rCE-SDS重链(HC)和轻链(LC)峰％。配制品以实验室规模制备。

具体实施方式

定义

提供以上描述仅为了清楚理解，而不应理解为无必要的限制，因为本发明范畴内的修改方案对本领域普通技术人员是显而易见的。

贯穿本说明书及以下权利要求书，除非上下文另有要求，否则单词“包含(comprise)”及变化形式如“包含(comprises和comprising)”应理解为隐含包括所陈述的整数或步骤或者整数或步骤的组，而不是排除任何其他整数或步骤或者整数或步骤的组。

贯穿本说明书，在组合物描述为包括组分或材料时，除非另外描述，否则预期这些组合物也可基本上由或由所叙述的组分或材料的任何组合组成。同样，在方法描述为包括特定步骤时，除非另外描述，否则预期这些方法也可基本上由或由所叙述的步骤的任何组合组成。本文中说明性地披露的本发明可在不存在本文中未明确披露的任何要素或步骤的情况下适当地实践。

本文中所披露的方法及其单个步骤的实践可人工和/或在电子设备辅助或由其提供的自动化下进行。虽然已参考特定实施例描述了诸多方法，但本领域普通技术人员应容易了解到，可使用执行与这些方法相关的动作的其他方式。例如，除非另外描述，否则可在不背离该方法的范畴或精神的情况下改变各步骤的顺序。另外，一些单个步骤可组合、省略或进一步再分成其他步骤。

除非另有说明，否则预期这些组合物和方法包括含有以下进一步描述的其他任选的要素、特征及步骤(包括附图中所示的那些)中的一或多种的任何组合的实施例。

在禁止对人体实施的方法赋予专利的管辖权方面，向人受试者“施用”组合物的含义应局限于规定人受试者将通过任何技术(例如经口、吸入、局部给予、注射、插入等)自我施用的受控物质。意欲最广泛的合理解释，其与限定可获得专利的主题的法律或法规一致。在不禁止对人体实施的方法赋予专利的管辖权方面，“施用”组合物包括对人体实施的方法和上述活动二者。

应理解，贯穿本说明书提供的每个最大数值限制包括与每个对应较低数值限制形成的范围作为替代方面，如同明确书写这种范围。贯穿本说明书提供的每个最小数值限制将包括与每个较高数值限制形成的范围作为替代方面，如同明确书写这种范围。贯穿本说明书提供的每个数值范围将包括属于这种较宽数值范围内的每个较窄数值范围，如同本文中明确书写所有这种较窄数值范围。本文中所披露的尺寸和值应理解为包括披露所叙述的值以及对应准确数值，例如，描述为“约10mM”的值应理解为包括“10mM”作为替代披露内容。

本文中所引用的所有专利、出版物及参考文献均通过引用以其全文并入本文中。在本披露与所并入之专利、出版物及参考文献出现矛盾的情况下，应以本披露为主。

除非另有说明，否则用于本申请(包括说明书和权利要求书)中的以下术语具有以下给出的定义。

除非上下文另外清楚规定，否则如说明书及所附权利要求书中所用，不定冠词“一个/种(a/an)”及定冠词“该(the)”包括复数以及单数指示物。

除非另外定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语均具有与本披露所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同的含义。以下参考文献为技术人员提供关于本披露中使用的许多术语的通用定义，包括但不限于：Singleton等人,DICTIONARY OFMICROBIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY[微生物学与分子生物学词典](第2版1994)；THECAMBRIDGE DICTIONARY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY[剑桥科技词典](Walker编辑,1988)；THE GLOSSARY OF GENETICS[遗传学术语表],第5版,R.Rieger等人(编辑),Springer Verlag[施普林格出版公司](1991)；以及Hale和Marham,THE HARPER COLLINSDICTIONARY OF BIOLOGY[哈珀·柯林斯生物学词典](1991)。

术语“约”或“大约”意指如由本领域普通技术人员所确定的具体值的可接受误差，其部分地取决于如何测量或确定该值。在某些实施例中，术语“约”或“大约”意指1个、2个、3个或4个标准偏差内。在某些实施例中，术语“约”或“大约”意指给定值或范围的30％、25％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.05％内。每当术语“约”或“大约”在一系列两个或更多个数值中的第一数值前面时，应了解术语“约”或“大约”适用于该系列中的每个数值。

如本文所用的术语“哮喘”是指过敏性哮喘、非过敏性哮喘、嗜酸细胞性哮喘和非嗜酸细胞性哮喘。

如本文所用的术语“过敏性哮喘”是指由一种或多种吸入性过敏原引发的哮喘。此类患者对引发哮喘反应的一种或多种过敏原具有阳性的IgE荧光酶免疫测定(FEIA)水平。

通常，大部分过敏性哮喘与Th2型炎症有关。

术语“非过敏性哮喘”是指在诊断时具有低嗜酸细胞、低Th2或低IgE的患者。通常，在IgE荧光酶免疫测定(FEIA)中，患有“非过敏性哮喘”的患者对包括地区特异性过敏原的一组过敏原的反应呈阴性。除低IgE的外，那些患者经常在诊断时具有低嗜酸细胞计数或无嗜酸细胞计数和低Th2计数。

如本文所用的术语“重度哮喘”是指需要高强度治疗(例如GINA步骤4和步骤5)来维持良好控制或尽管进行高强度治疗但仍未实现良好控制的哮喘(GINA,Global Strategyfor Asthma Management and Prevention[全球哮喘管理和预防战略].GlobalInitiative for Asthma[全球哮喘防治创议](GINA)2012年12月)。

如本文所用的术语“嗜酸细胞性哮喘”是指具有≥300个细胞/μL或≥250个细胞/μL的筛选血液嗜酸细胞计数的哮喘患者。在多个实施例中，血液嗜酸细胞计数≥300个细胞/μL、≥250个细胞/μL、≥200个细胞/μL或≥150个细胞/μL。“低嗜酸细胞性”哮喘是指具有小于250个细胞/uL血液或血清的哮喘患者。

如本文所用的术语“Th2型炎症”是指具有≥140个细胞/μL的筛选血液嗜酸细胞计数和>100IU/mL的筛选总血清IgE水平的受试者(Corren等人,N Engl J Med.[新英格兰医学杂志]22；365(12):1088-98,2011)。“Th2高”哮喘群体或概况是指IgE>100IU/mL且血液嗜酸细胞计数≥140个细胞/μL的受试者。“Th2低”哮喘群体是指IgE<100IU/mL且血液嗜酸细胞计数≤140个细胞/μL的受试者

如本文所用的“高FeNO”(呼出气一氧化氮分数)是指基线FeNO测量值大于或等于来自研究中的所有随机化受试者的中位数。高FeNO是指24或更高的FeNO水平。

如本文所用的术语“高血清骨膜蛋白水平”是指患者的基线血清骨膜蛋白水平大于或等于来自研究中的所有随机化受试者的中位数。已显示骨膜蛋白与过敏性炎症的某些方面相关，包括嗜酸细胞募集、气道重塑和显现Th2表型(Li等人,Respir Res.[呼吸研究]16(1):57,2015)。

如本文所用的术语“当前支气管扩张剂(BD)后1秒用力呼气量(FEV₁)可逆性”是指FEV₁的BD后变化≥12％和≥200mL

如本文所用的术语“哮喘恶化”是指引起以下任一者的哮喘恶化：使用全身性皮质类固醇至少3天；单一可储存注射剂量的皮质类固醇被视为等于3天过程的全身性皮质类固醇；对于接受维持OCS的受试者，维持剂量临时加倍持续至少3天方为合格；由需要全身性皮质类固醇(根据上述)的哮喘引起的急诊(ED visit)；由哮喘引起的住院治疗。还研究与哮喘恶化有关的其他量度以确定作用。这些量度包括与哮喘恶化(即重度哮喘恶化)相关的住院治疗、首次哮喘恶化的时间和具有一或多次哮喘恶化/重度哮喘恶化的受试者的比例。

术语“哮喘恶化”是指经由ePRO装置，可与受试者相关(受试者驱动)或者与哮喘每日日志警报相关(日志驱动)的新的或增加的症状和/或征象(检查或肺功能)。哮喘恶化阈值包括：与基线相比(导入期最后7天)，连续3天中至少2天早高峰流速下降≥30％；和/或与前一周的平均使用相比，连续3天中至少2天拯救药物治疗增加≥50％(最少增加2次或更多次吹吸，或一种新的或另外的雾化β2激动剂)；和/或连续3晚中至少2晚，由哮喘引起夜醒，需要使用拯救药物治疗；和/或总哮喘症状评分(白天[晚间评估]和夜间[早晨评估]的和)增加超过筛选/导入期平均值(筛选/导入期最后10天)至少2个单位，或连续3天中至少2天最高可能评分(每日评分为6)。

如本文所用的术语“细胞因子”是指由细胞释放的一种或多种小(5-20kD)蛋白质，其对细胞之间的相互作用和通信或对诸如免疫细胞增殖和分化的细胞行为具有特定作用。免疫系统中细胞因子的功能包括促进循环的白细胞和淋巴细胞流入免疫碰撞位点；刺激B细胞、T细胞、外周血单核细胞(PBMC)以及其他免疫细胞的发育和增殖；以及提供抗微生物活性。示例性免疫细胞因子包括但不限于IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13、IL-15、IL17A、IL-17F、IL-18、IL-21、IL-22、干扰素(包括IFNα、β和γ)、肿瘤坏死因子(包括TNFα、β)、转化生长因子(包括TGFα、β)、粒细胞集落刺激因子(GCSF)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)和胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)。

“辅助性T细胞(Th)1细胞因子”或“Th1特异性细胞因子”是指由Th1 T细胞表达(细胞内和/或分泌)的细胞因子，并且包括IFN-g、TNF-a、IL-12。“Th2细胞因子”或“Th2特异性细胞因子”是指由Th2 T细胞表达(细胞内和/或分泌)的细胞因子，包括IL-4、IL-5、IL-13和IL-10。“Th17细胞因子”或“Th17特异性细胞因子”是指由Th17 T细胞表达(细胞内和/或分泌)的细胞因子，包括IL-17A、IL-17F、IL-22和IL-21。除本文中所列出的Th17细胞因子的外，Th17细胞的某些群体还表达IFN-g和/或IL-2。多功能CTL细胞因子包括IFN-g、TNF-a、IL-2和IL-17。

术语“特异性地结合”为“抗原特异性的”、“对抗原具有特异性”、“选择性结合剂”、“特异性结合剂”、“抗原靶标”或与抗原“免疫反应”是指抗体或多肽以比相关蛋白的其他抗原更大的亲和力结合靶标抗原。本文预期该药剂特异性地结合可用于鉴别免疫细胞类型的靶标蛋白，例如表面抗原(例如T细胞受体、CD3)、细胞因子(例如TSLP、IL-4、IL-5、IL-13、IL-17、IFN-g、TNF-a)及其类似物。

术语“抗体”或“免疫球蛋白”是指由各自由包含可变区和基本上全长恒定区的两条基本上全长的重链和两条基本上全长的轻链组成的规范四聚体糖蛋白。抗原结合部分可通过重组DNA技术或通过完整抗体的酶促或化学裂解产生。术语“抗体”包括单克隆抗体、多克隆抗体、嵌合抗体、人抗体和人源化抗体。“抗体”或“免疫球蛋白”也可以指嵌合或CDR移植的抗体。

抗体变体包括抗体片段和变为标准四聚体抗体的结构的类抗体蛋白。通常抗体变体包括变为恒定区的V区，或可替代地，任选地以非标准方式添加V区至恒定区。实例包括多特异性抗体(例如具有额外V区的双特异性抗体)、可结合抗原的抗体片段(例如Fab'、F’(ab)2、Fv、单链抗体、双抗体)、双互补位肽(biparatopic)、单链抗体(scFv)、单链抗体片段、双抗体、三抗体、四抗体、微型抗体、线性抗体；螯合重组抗体、三抗体或双抗体、胞内抗体、纳米抗体、小模块免疫药物(SMIP)、抗原结合域免疫球蛋白融合蛋白、单域抗体(包括骆驼化抗体)、含VHH抗体或其变体或衍生物、以及含有足够赋予对多肽的抗原特异性结合的免疫球蛋白的至少一部分(诸如一个、两个、三个、四个、五个或六个CDR序列)的多肽(只要抗体保留所需生物活性即可)、以及包含前述各项的重组肽(只要其展现所需生物活性即可)。

抗体片段包括抗体的抗原结合部分，尤其包括Fab、Fab'、F(ab')2、Fv、域抗体(dAb)、互补决定区(CDR)片段、单链抗体(scFv)、单链抗体片段、双抗体、三抗体、四抗体、微型抗体、线性抗体；螯合重组抗体、三抗体或双抗体、胞内抗体、纳米抗体、小模块免疫药物(SMIP)、抗原结合域免疫球蛋白融合蛋白、单域抗体(包括骆驼化抗体)、含VHH抗体或其变体或衍生物，以及含有足够赋予对多肽的抗原特异性结合的免疫球蛋白的至少一部分(诸如一个、两个、三个、四个、五个或六个CDR序列)的多肽，只要抗体保留所需生物活性即可。

“价数(valency)”是指靶向表位的各抗体或抗体片段上的抗原结合位点的数目。典型全长IgG分子或F(ab)₂是“二价”的，因为其具有两个相同的靶标结合位点。“单价”抗体片段，诸如F(ab)’或scFc，具有单个抗原结合位点。三价或四价抗原结合蛋白还可工程改造成多价。

术语“单克隆抗体”是指自基本上均质的抗体群体(即构成该群体的个体抗体除可少量存在的天然存在的可能突变外均一致)获得的抗体。

术语“抑制TSLP活性”包括抑制以下任一者或多者：-

-TSLP结合其受体；

-在TSLP存在下表达TSLPR的细胞的增殖、活化或分化；

-在极化测定中在TSLP存在下Th2细胞因子产生的抑制；

-在TSLP存在下树突状细胞活化或成熟；

-在TSLP存在下肥大细胞细胞因子释放。

参见，例如美国专利7982016B2的第6栏和实例8，以及US 2012/0020988 A1的实例7-10。

术语“样品”或“生物样品”是指自受试者获得以用于本发明的方法中的样品，并且包括尿、全血、血浆、血清、唾液、痰液、组织切片、脑脊髓液、有活体外刺激的外周血单核细胞、无活体外刺激的外周血单核细胞、有活体外刺激的肠淋巴组织、无活体外刺激的肠淋巴组织、肠灌洗液、支气管肺泡灌洗液、鼻灌洗液和诱导的痰液。

术语“治疗(treat、treating和treatment)”是指与本文所述的炎性病症有关的事件、疾病或病症的临床症状、表现或进展暂时或永久、部分或完全地消除、减少、压制或改善。如相关领域中所认识到，用作治疗剂的药物可降低既定疾病状态的严重度，但不必消除疾病的每种表现才被认为是有用治疗剂。类似地，预防性施用的治疗不必完全有效地预防病症发作才可成为可行的预防剂。仅仅降低疾病的影响(例如通过减少其症状的次数或降低其症状的严重度，或通过增加另一治疗的有效性，或通过产生另一有益作用)或降低疾病在受试者中发生或恶化的可能性即为足够。本披露的一个实施例涉及用于确定治疗功效的方法，该方法包括向患者施用治疗剂，该治疗剂施用的量和时间足以引起持续好转，超越反映特定病症的严重度的指示剂的基线。

术语“治疗有效量”是指治疗剂有效改善或减轻与疾病或病症有关的症状或征象的量。

低粘度抗TSLP抗体组合物

泰派鲁单抗在70mg至280mg的强度范围内已显示出效力，并且在一些情况下，该抗TSLP抗体将以110mg/mL或140mg/mL的剂量配制。具有高蛋白质浓度的配制品可表现出增加的粘度，以至于可能会对用于向患者施用抗体的装置的功能造成负面影响。类似地，医疗保健提供者手动将药物注入患者的能力可能会受到影响。另外，高粘度在制造过程中可能会被禁止。从蛋白质稳定性的角度来看，具有高蛋白质浓度的配制品也具有挑战性。例如，导致形成高分子量物质(HMWS)的聚集可发生在包含高蛋白质浓度的配制品中。因此，需要提供抗TSLP抗体(诸如泰派鲁单抗)的低粘度、等渗、液体配制品，该抗体适合于肠胃外施用且可以在低温下(例如，2℃-8℃和-30℃)长期储存，或在室温下(例如，20℃-25℃，为了患者方便)短期储存。

本文提供了适合于肠胃外施用且可以长期或短期储存的液体配制品(即液体组合物)，这些液体配制品包含高浓度的抗TSLP抗体(例如，大于约100mg/mL)、表面活性剂、脯氨酸、和缓冲剂。在示例性实施例中，该抗TSLP抗体以大于约100mg/mL且，任选地，小于约200mg/mL或小于约150mg/mL的浓度存在于该组合物中。在一些方面中，该抗TSLP抗体以约105mg/mL、约110mg/mL、约120mg/mL、约130mg/mL、约140mg/mL、约150mg/mL、约160mg/mL、约170mg/mL、约180mg/mL、约190mg/mL、约195mg/mL、约196mg/mL、约197mg/mL、约198mg/mL、约199mg/mL的浓度存在于该组合物中。在多个方面中，该抗TSLP抗体以约105mg/mL至约190mg/mL、约105mg/mL至约180mg/mL、约105mg/mL至约170mg/mL、约105mg/mL至约160mg/mL、约105mg/mL至约150mg/mL、约105mg/mL至约140mg/mL、约105mg/mL至约130mg/mL、约105mg/mL至约120mg/mL、约110mg/mL至约190mg/mL、约120mg/mL至约190mg/mL、约130mg/mL至约190mg/mL、约140mg/mL至约190mg/mL、约150mg/mL至约190mg/mL、约160mg/mL至约190mg/mL、约170mg/mL至约190mg/mL、或约180mg/mL至约190mg/mL的浓度存在于该组合物中。在多个方面中，该抗TSLP抗体以约105mg/mL至约115mg/mL或约108mg/mL至约112mg/mL、或约130mg/mL至约150mg/mL或约135mg/mL至约145mg/mL的浓度存在于该组合物中。在示例性方面中，该抗TSLP抗体以约110mg/mL至约140mg/mL，例如，约110mg/mL±10％、约140mg/mL±10％的浓度存在于该组合物中。

本披露的组合物包含表面活性剂。表面活性剂是两亲性的(具有极性头部和疏水性尾部)表面活性剂。表面活性剂优先积聚在界面处，从而减小界面张力。使用表面活性剂也可有助于缓解大蛋白质颗粒的形成。在一些方面中，存在于本披露的组合物中的表面活性剂是两亲性表面活性剂和/或非离子性表面活性剂。示例性表面活性剂包括聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯(例如聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80)，烷基芳基聚醚，例如氧乙基化烷基酚(例如Triton^TM X-100)，和泊洛沙姆(例如

例如

F68)，以及属于一个表面活性剂类别或属于多个表面活性剂类别的上述中的任一者的组合。尤其预期聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80(及其任选的混合物)。在示例性实例中，该表面活性剂以小于或约0.015％(w/v)±0.005％(w/v)的浓度存在于该组合物中。例如，该配制品可包含约0.005％(w/v)至约0.015％(w/v)表面活性剂，例如约0.005％(w/v)、约0.006％(w/v)、约0.007％(w/v)、约0.008％(w/v)、约0.009％(w/v)、约0.010％(w/v)、约0.011％(w/v)、约0.012％(w/v)、约0.013％(w/v)、约0.014％(w/v)、约0.015％(w/v)。在示例性方面中，该配制品包含约0.005％(w/v)、0.010％(w/v)、或0.015％(w/v)表面活性剂。

本披露的组合物包含脯氨酸，例如L-脯氨酸、D-脯氨酸。在一些方面中，该组合物包含小于约3.0％(w/v)脯氨酸。例如，在示例性方面中，该组合物包含约2.0％(w/v)、约2.1％(w/v)、约2.2％(w/v)、约2.3％(w/v)、约2.4％(w/v)、约2.5％(w/v)、约2.6％(w/v)、约2.7％(w/v)、约2.8％(w/v)、约2.9％(w/v)、或约3.0％(w/v)脯氨酸，例如L-脯氨酸。例如，在示例性方面中，该组合物包含约2.0％(w/v)至约2.1％(w/v)、约2.0％(w/v)至约2.2％(w/v)、约2.0％(w/v)至约2.3％(w/v)、约2.0％(w/v)至约2.4％(w/v)、约2.0％(w/v)至约2.5％(w/v)、约2.0％(w/v)至约2.6％(w/v)、约2.0％(w/v)至约2.7％(w/v)、约2.0％(w/v)至约2.8％(w/v)、或约2.0％(w/v)至约2.9％(w/v)脯氨酸，例如L-脯氨酸。在不同情况下，该组合物包含约2.4％(w/v)至约2.8％(w/v)或约2.5％(w/v)至约2.8％(w/v)或约2.6％(w/v)至约2.8％(w/v)或约2.7％(w/v)至约2.8％(w/v)。在一些方面中，脯氨酸是存在于该组合物中的唯一氨基酸。在多个实施例中，该组合物包含约140mM至约280mM脯氨酸、约150mM至约250mM脯氨酸、约160mM至约240mM脯氨酸、约170mM至约230mM脯氨酸、或约180至约220mM脯氨酸。在多个实施例中，该组合物包含约140mM脯氨酸、约150mM脯氨酸、约160mM脯氨酸、约170mM脯氨酸、约180mM脯氨酸、约190mM脯氨酸、约200mM脯氨酸、约210mM脯氨酸、约220mM脯氨酸、约230mM脯氨酸、约240mM脯氨酸、约250mM脯氨酸、约260mM脯氨酸、约270mM脯氨酸、或约280mM脯氨酸。在示例性实例中，脯氨酸是存在于该组合物中的降低该组合物粘度的唯一氨基酸。

本披露的组合物包含缓冲剂。该缓冲剂可以是，例如有机缓冲剂。在一些方面中，该缓冲剂在25℃下可例如以约pH 4至5.5、或4.5至5.5、或4.5至5为中心。在多个实施例中，该缓冲剂在25℃下可具有处于pH 5.0-5.2的一个pH单位内的pKa。一种这种缓冲剂是在25℃下具有约4.75的pKa的乙酸/乙酸盐。另一这种缓冲剂是在25℃下具有约4.27的pKa的谷氨酸/谷氨酸盐。预期的其他可替代的缓冲剂包括基于离子，包括琥珀酸盐(在25℃下pKa4.21)、丙酸盐(在25℃下pKa 4.87)、苹果酸盐(在25℃下pKa 5.13)、吡啶(在25℃下pKa5.23)、以及哌嗪(在25℃下pKa 5.33)的缓冲剂。预期该缓冲剂可提供为钠盐(或二钠盐，视情况而定)或在可替代方案中作为钾、镁或铵盐。尤其预期基于乙酸盐、谷氨酸盐以及琥珀酸盐，例如乙酸盐或谷氨酸盐的缓冲剂。在一些方面中，该缓冲剂由冰乙酸或谷氨酸制成。任选地，添加氢氧化钠直至达到目标pH。

在示例性方面中，该缓冲剂选自由以下组成的组：谷氨酸盐、组氨酸、和乙酸盐。在一些方面中，该缓冲剂是乙酸盐，并且任选地，该缓冲剂由冰乙酸制成。在示例性实例中，该组合物包含约1mM至约50mM缓冲剂，例如约1mM至约40mM缓冲剂、或约1mM至约30mM。在多个方面中，该组合物包含约5mM至约40mM，例如约10mM至约30mM缓冲剂，任选地，约15mM至约30mM缓冲剂、约20mM至约30mM缓冲剂、或约10mM至约25mM缓冲剂。在示例性方面中，该缓冲剂以约10mM、约11mM、约12mM、约13mM、约14mM、约15mM、约16mM、约17mM、约18mM、约19mM、约20mM、约21mM、约22mM、约23mM、约24mM、约25mM、约26mM、约27mM、约28mM、约29mM或约30mM缓冲剂的浓度存在于该组合物中。在某些实施例中，该缓冲剂是任选地由冰乙酸制成的乙酸盐缓冲剂，其中添加氢氧化钠直至达到目标pH。在不同情况下，该组合物包含约20mM至约28mM缓冲剂，任选地，约23mM至约28mM或约24mM至约28mM缓冲剂(例如，乙酸盐)。在多个方面中，该组合物包含约22mM至约26mM缓冲剂(例如，乙酸盐)。在多个方面中，该组合物包含约24mM至约26mM缓冲剂(例如，乙酸盐)。如本文所述，在多个方面中，缓冲剂的浓度取决于抗TSLP抗体的浓度。在多个方面中，当抗体的浓度为约110mg/mL至约140mg/mL时，缓冲剂(例如，乙酸盐)的浓度为约20mM至约28mM。任选地，当抗体的浓度为约110mg/mL时，组合物包含约22mM至约26mM或约24mM至约26mM缓冲剂(例如，乙酸盐)。任选地，当抗体的浓度为约140mg/mL时，组合物包含约24mM至约26mM或约25mM至约26mM缓冲剂(例如，乙酸盐)。

在多个实施例中，该组合物包含110mg/mL抗TSLP抗体、与10mM乙酸盐、3.0％(w/v)L-脯氨酸、和0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，最终pH为5.2。在多个实施例中，该组合物包含110mg/mL抗TSLP抗体，配制在24mM乙酸盐、2.5％(w/v)L-脯氨酸、和0.01％(w/v)聚山梨醇酯80中，pH为5.2。在多个实施例中，该组合物包含110mg/mL泰派鲁单抗，配制在24mM乙酸盐、2.5％(w/v)L-脯氨酸、和0.01％(w/v)聚山梨醇酯80中，pH为5.2。

在示例性方面中，本披露的组合物可以包含另外的组分。在多个方面，该组合物包含任何药学上可接受的成分，包括例如酸化剂、添加剂、吸附剂、气溶胶推进剂、空气置换剂、碱化剂、抗结块剂、抗凝血剂、抗微生物防腐剂、抗氧化剂、抗菌剂、碱、粘合剂、缓冲剂、螯合剂、包衣剂、着色剂、干燥剂、洗涤剂、稀释剂、消毒剂、崩解剂、分散剂、溶解增强剂、染料、润肤剂、乳化剂、乳化稳定剂、填充剂、成膜剂、增味剂、调味剂、流动增强剂、胶凝剂、造粒剂、保湿剂、润滑剂、粘膜粘合剂、软膏基质、软膏、油质运载体、有机碱、锭剂基质、色素、增塑剂、抛光剂、防腐剂、多价螯合剂、皮肤渗透剂、增溶剂、溶剂、稳定剂、栓剂基质、表面活性剂(surface active agent)、表面活性剂(surfactant)、悬浮剂、甜味剂、治疗剂、增稠剂、张力剂、毒性剂、粘度增加剂、吸水剂、水混溶性助溶剂、水软化剂或润湿剂。参见例如Handbook of Pharmaceutical Excipients[药物赋形剂手册],第三版,A.H.Kibbe(Pharmaceutical Press[医药出版社],London,UK[英国伦敦],2000)，将其通过引用以其全文并入。Remington’s Pharmaceutical Sciences[雷明顿药物科学],第十六版,E.W.Martin(Mack Publishing Co.[麦克出版公司],Easton,Pa.[宾夕法尼亚州伊斯顿],1980)，将其通过引用以其全文并入。

在可替代的方面中，该组合物基本上由抗TSLP抗体、表面活性剂、脯氨酸、和缓冲剂组成或由其组成。在示例性实例中，本披露的组合物不包含超过0.001％(w/v)的糖或柠檬酸盐，任选地，其中该糖是二糖，例如海藻糖和蔗糖。

在可替代的方面中，本披露的组合物是液体。在某些方面中，该液体具有小于约6.0，任选地，小于约5.5的pH。在一些方面中，该pH是约4.5至约5.5或约4.8至约5.4，例如约4.8、约4.9、约5.0、约5.1、约5.2、约5.3、约5.4。在一些方面中，该pH是约4.9、5.2、或5.4。在一些方面中，该组合物的特征在于相对于不包含脯氨酸的液体组合物，粘度降低。在示例性实例中，该组合物的特征在于当抗TSLP抗体的浓度小于155mg/mL时，在20℃下的粘度小于约24厘泊(cP)，任选地，当抗TSLP抗体的浓度是约110mg/mL时，粘度是约6cP，或者当抗TSLP抗体的浓度是约140mg/mL时，粘度是约15cP。在某些方面中，该组合物的特征在于当该抗TSLP抗体的浓度小于155mg/mL(例如约110mg/mL、约140mg/mL)时，粘度是约5cP至约20cP，例如约5cP至约15cP、约5cP至约10cP、约10cP至约20cP、约15cP至约20cP、或约5cP、约6cP、约7cP、约8cP、约9cP、约10cP、约11cP、约12cP、约13cP、约14cP、约15cP、约16cP、约17cP、约18cP、约19cP、约20cP。在示例性方面中，当该抗体的浓度是约100mg/mL至约180mg/mL时，该组合物具有约15cP±5cP的粘度。除非另有说明，否则本文披露的所有粘度是指使用旋转粘度计在20℃和约1000l/s的剪切速率下测量的粘度。

在示例性方面中，该组合物意欲用于皮下施用至受试者，因此该组合物与预期的施用部位是等渗的。例如，在一些方面中，该组合物的渗透压处于约270至约350mOsm/kg、或约285至约345mOsm/kg、或约300至约315mOsm/kg的范围内。例如，若该溶液呈意欲用于经肠胃外施用的形式，则可使其与血液等渗(约300mOsm/kg渗透压)。在示例性方面中，该水性药物配制品具有处于约200mOsm/kg至约500mOsm/kg、或约225mOsm/kg至约400mOsm/kg、或约250mOsm/kg至约350mOsm/kg的范围内的渗透压。

本披露的组合物有利地适合于长期和短期储存。在示例性方面中，该组合物适合于在冷冻或冷藏温度或更高温度下长期或短期储存。因此，本披露的组合物可以在低于0℃的温度下(例如约-80℃至约-10℃、约-60℃至约-20℃、或约-30℃)或在约1℃至约10℃的温度下(例如约2℃至约8℃)储存。任选地，在这些温度(低于10℃)下的储存可以是长期储存，例如，至少6个月、至少12个月、至少18个月、至少24个月、至少30个月、至少36个月。本披露的组合物可以在室温(例如约20℃至约30℃、约23℃至约27℃、约25℃、或约30℃)下储存。在多个方面中，本披露的组合物可以在高于室温的温度(例如大于30℃(例如约35℃至约45℃、约40℃))下储存。

在多个方面中，本披露的组合物是高度稳定的并且可以在冷冻或冷藏温度下忍受长期储存。本披露的组合物作为液体或固体是高度稳定的。任选地，在约-40℃至约-20℃(例如，约-35℃、约-30℃、约-25℃、约-20℃)下储存约1个月至约3个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的治疗性蛋白质被降解。在一些方面中，如通过SEC确定的，在约-40℃至约-20℃下储存6个月或12个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的治疗性蛋白质被降解，并且任选地，该治疗性蛋白质包含在玻璃小瓶或注射器中。在一些方面中，如通过SEC确定的，在约-40℃至约-20℃下储存24个月或36个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的治疗性蛋白质被降解，并且任选地，该治疗性蛋白质包含在玻璃小瓶或注射器中。在多个实施例中，如通过SEC确定的，在玻璃小瓶或注射器中于约-40℃至约-20℃下储存24个月后，超过95％的治疗性蛋白质是完整的。在一些方面中，如通过SEC确定的，在约-40℃至约-20℃下储存24个月后，本披露的组合物中小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的抗体被降解，任选地，其中在约-40℃至约-20℃下储存36个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的抗体被降解。任选地，在约2℃至约8℃(例如，约2℃、约3℃、约4℃、约5℃、约6℃、约7℃、约8℃)下储存约1个月至约3个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的治疗性蛋白质被降解。在一些方面中，如通过SEC确定的，在约2℃至约8℃下储存6个月或12个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的治疗性蛋白质被降解，并且任选地，该治疗性蛋白质包含在玻璃小瓶或注射器中。在一些方面中，如通过SEC确定的，在约2℃至约8℃下储存24个月或36个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的治疗性蛋白质被降解，并且任选地，该治疗性蛋白质包含在玻璃小瓶或注射器中。在多个实施例中，如通过SEC确定的，在玻璃小瓶或注射器中于约2℃至约8℃下储存24个月后，超过95％的治疗性蛋白质是完整的。在一些方面中，如通过SEC确定的，在约2℃至约8℃下储存24个月后，本披露的组合物中小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的抗体被降解，任选地，其中在约2℃至约8℃下储存36个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的抗体被降解。

在多个方面中，本披露的组合物是高度稳定的并且可以在室温下忍受长期储存。任选地，在约23℃至约27℃(例如，约23℃、约24℃、约25℃、约26℃、约27℃)下储存约1个月至约3个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的治疗性蛋白质被降解。在多个方面中，如通过SEC确定的，在约室温(例如25℃)下储存至少2周之后(任选地，至少1个月后、至少2个月后、至少3个月后、至少4个月后、至少5个月后或至少6个月后)，小于5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的抗体被降解。在一些方面中，如通过SEC确定的，在约23℃至约27℃下储存6个月至12个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的治疗性蛋白质被降解，并且任选地，该治疗性蛋白质包含在玻璃小瓶或注射器中。在多个实施例中，如通过SEC确定的，在玻璃小瓶或注射器中于23℃至约27℃下储存24个月后，超过95％的治疗性蛋白质是完整的。在一些方面中，如通过SEC确定的，在约23℃至约27℃下储存24个月后，本披露的组合物中小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的抗体被降解，任选地，其中在约23℃至约27℃下储存36个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的抗体被降解。

在多个方面中，本披露的组合物是高度稳定的并且可以在更高温度，例如大于室温的温度下忍受短期储存。任选地，在约28℃至约32℃(例如，约28℃、约29℃、约30℃、约31℃、约32℃)下储存1个月至约3个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的治疗性蛋白质被降解。在一些方面中，如通过SEC确定的，在约28℃至约32℃下储存6个月或12个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的治疗性蛋白质被降解，并且任选地，该治疗性蛋白质包含在玻璃小瓶或注射器中。在多个实施例中，如通过SEC确定的，在玻璃小瓶或注射器中于约28℃至约32℃下储存24个月后，超过95％的治疗性蛋白质是完整的。在一些方面中，如通过SEC确定的，在约28℃至约32℃下储存24个月后，本披露的组合物中小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的抗体被降解，任选地，其中在约28℃至约32℃下储存36个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的抗体被降解。在示例性方面中，如通过SEC确定的，在约30℃下储存6个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的治疗性蛋白质被降解。

在多个方面中，本披露的组合物是高度稳定的并且可以在压力储存条件下忍受短期储存。任选地，在约38℃至约42℃(例如，约38℃、约39℃、约40℃、约41℃、约42℃)下储存约1周后或约2周后或约1个月至约3个月后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的治疗性蛋白质被降解。

在多个方面中，本披露的组合物是高度稳定的，并且可以忍受混合或组合储存条件。任选地，如通过SEC确定的，在约2℃至约8℃下储存24个月，随后在约25℃下储存2周或更久后，小于约5％(例如，小于约4％、小于约3％、小于约2％、小于约1％)的抗体被降解。在多个方面中，如通过SEC确定的，在约25℃下储存2周后，小于5％的抗体被降解。任选地，如通过SEC确定的，在约2℃至约8℃下储存24个月至约36个月，随后在约25℃下储存约4周至8周后，小于5％的抗体被降解。在不同情况下，如通过SEC确定的，在2℃至8℃下储存约24个月至约36个月，随后在约室温(例如25℃)下储存至少2周或至少约1个月或至少约2个月之后，小于5％的抗体被降解。

在本披露的示例性方面中，该组合物以供储存或使用的形式提供，例如，于单次使用小瓶，单次使用注射器，或者玻璃、玻璃内衬或玻璃涂覆主容器中。在示例性方面中，该组合物被提供在单次使用的系统袋或聚碳酸酯大玻璃瓶中，用于冷冻储存。在可替代的方面中，该组合物包含在玻璃小瓶或注射器中，用于例如在约2℃至约8℃下的长期储存或在更高温度(例如约25℃、约30℃、约40℃)下的储存。

在示例性实例中，该组合物被提供用于现成的和/或设计成用于自我施用的递送系统中。在示例性方面中，该组合物被提供在预填充式注射器、或自动注射器、笔型注射器、双室笔及其类似物中。这样的产品是本领域已知的并且可商购的。参见，例如Shire,Steven,Monoclonal Antibodies:Meeting the Challenges in Manufacturing,Formulation,Delivery and Stability of Final Drug Product[单克隆抗体：应对最终药物产品的制造、配制、递送和稳定性的挑战],Chapter 8:Development of deliverydevice technology to deal with the challenges of highly viscous mAbformulations at high concentration[第8章：递送装置技术的发展，以应对在高浓度下高粘度mAb配制品的挑战],Woodhead Publishing[伍德海德出版社],英国剑桥,第153-162页(2015)。在示例性方面中，该组合物被提供用于YpsoMate^TM自动注射、YpsoMate^TM 2.25自动注射器、或VarioJect^TM(瑞士布格多夫YpsoMed公司)。其他自动注射器包括例如SelfDose^TM患者控制的注射器、BD Physioject^TM一次性自动注射器、

II注射器(英国牛津郡欧曼福德公司(Owen Mumford))。在多个实施例中，该自动注射器是Ypsomed

自动注射器。本方法中预期的另外的自动注射器披露于国际专利公开WO2018/226565、WO 2019/094138、WO 2019/178151、WO 20120/072577、WO 2020/081479、WO2020/081480，和国际专利申请号PCT/US 20/70590、PCT/US20/70591、PCT/US 20/53180、PCT/US 20/53179、PCT/US 20/53178、和PCT/US20/53176，这些文献通过引用并入本文。

本披露的组合物可适合于通过任何可接受的途径，包括肠胃外，并且特别地皮下施用。例如，皮下施用可施用至上臂、大腿或腹部。其他途径包括例如静脉内、皮内、肌肉内、腹膜内、结节内及脾内。皮下途径是优选的。

若该组合物呈意欲施用至受试者的形式，则可使其与预期的施用部位等渗。例如，若该溶液呈意欲用于经肠胃外施用的形式，则可使其与血液等渗。该组合物通常是无菌的。在某些实施例中，此可通过无菌过滤膜进行过滤来实现。在某些实施例中，一般将肠胃外组合物置于具有无菌接取口的容器，例如静脉内溶液袋，或具有可通过皮下注射针刺穿的塞子的小瓶，或预填充注射器中。在某些实施例中，该组合物能以即用形式储存。

本披露的组合物包含抗TSLP抗体。在示例性实施例中，该抗TSLP抗体与SEQ IDNO:2的氨基酸29-159中所示的TSLP多肽特异性结合。胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)是上皮细胞衍生的细胞因子，其是对促炎性刺激起反应而产生，且主要经由其在树突状细胞(Gilliet,J Exp Med.[实验医学杂志]197:1059-1067,2003；Soumelis,Nat Immunol.[自然免疫学]3:673-680,2002；Reche,J Immunol.[免疫学杂志]167:336-343,2001)、肥大细胞(Allakhverdi,J Exp Med.[实验医学杂志]204:253-258,2007)、和CD34+祖细胞上的活性而驱动过敏性炎性反应。Swedin等人,Pharmacol Ther[药理学与治疗学]169:13-34(2017)。TSLP通过由白细胞介素(IL)-7受体α(IL-7Rα)链和常见γ链样受体(TSLPR)组成的异二聚体受体发信号(Pandey,Nat Immunol.[自然免疫学]1:59-64,2000；Park,J ExpMed.[实验医学杂志]192:659-669,2000)。

与对照相比，哮喘个体气道中人TSLP mRNA(Brightling等人,J Allergy ClinImmunol[过敏与临床免疫杂志]121:5-10quiz 1-2(2008)；Ortega等人,NEJM[新英格兰医学杂志]371:1198-1207(2014))和蛋白质水平(Ortega等人,(2014),同上)有所增加，并且此表达程度与疾病严重度相关。Brightling等人,(2008),同上。最近的研究已证明，人TSLP基因座中的单核苷酸多态性与预防哮喘、特应性哮喘、和气道过度反应有关，这表明TSLP基因表达的差别调节可影响疾病易感性。(To等人,BMC Public Health[BMC公共健康]12:204(2012)；

(奥马珠单抗(omalizumab))：Highlights of PrescribingInformation[处方信息要点]2016。(在https://www.gene.com/download/pdf/xolair_prescribing.pdf.)；Bleecker等人,The Lancet[柳叶刀]388:2115-2127(2016)。这些数据表明靶向TSLP可抑制与哮喘有关的多个生物途径。

TSLP的早期非临床研究表明在自气道上皮细胞或基质细胞释放TSLP之后，其活化肥大细胞、树突状细胞及T细胞，从而释放Th2细胞因子(例如IL-4/13/5)。最近公开的人类资料证明在重度哮喘中在组织TSLP基因与蛋白质表达、Th2基因特征评分和组织嗜酸细胞之间存在良好相关性。因此，抗TSLP靶标疗法可在具有Th2型炎症的哮喘患者中为有效的(Shikotra等人,J Allergy Clin Immunol.[过敏与临床免疫杂志]129(1):104-11,2012)。

来自其他研究的数据表明TSLP可经由与Th2无关的途径，诸如气道平滑肌与肥大细胞之间的串扰，引起气道炎症(Allakhverdi等人,J Allergy Clin Immunol.[过敏与临床免疫杂志]123(4):958-60,2009；Shikotra等人,同上)。TSLP还可促进诱导T细胞分化成产生Th-17-细胞因子的细胞，从而在更重度哮喘中常见到嗜中性细胞炎症增加(Tanaka等人,Clin Exp Allergy.[临床和实验过敏]39(1):89-100,2009)。这些数据和其他出现的证据表明阻断TSLP可用于压制多个生物途径，包括但不限于涉及Th2细胞因子(IL-4/13/5)的途径。

预期对TSLP具有特异性的抗体可用于治疗哮喘，包括重度哮喘、嗜酸细胞性哮喘、非嗜酸细胞性/低嗜酸细胞性哮喘和本文所述的其他形式哮喘。

诸如结合靶标抗原(例如TSLP)的特异性结合剂(诸如抗体和抗体变体或片段)可用于本发明的方法中。在一个实施例中，该特异性结合剂是抗体。这些抗体可以是单克隆的(MAb)；重组的；嵌合的；人源化的，诸如互补决定区(CDR)移植的；人的；抗体变体，包括单链；和/或双特异性的；以及其片段；变体；或衍生物。抗体片段包括抗体的结合目的多肽上的表位的那些部分。此类片段的实例包括由全长抗体的酶促裂解产生的Fab和F(ab')片段。其他结合片段包括由重组DNA技术产生的片段，这些技术诸如表达含有编码抗体可变区的核酸序列的重组质粒。

单克隆抗体可经修饰用作治疗剂或诊断剂。一个实施例为“嵌合”抗体，其中一部分重链(H)和/或轻链(L)与来源于特定物种或属于特定抗体类别或子类的抗体中的对应序列相同或同源，而链的剩余部分与来源于另一物种或属于另一抗体类别或子类的抗体中的对应序列相同或同源。还包括此类抗体的片段，只要其展现所需生物活性即可。参见美国专利号4,816,567；Morrison等人,1985,Proc.Natl.Acad.Sci.[美国国家科学院院刊]81:6851-55。

在另一个实施例中，单克隆抗体是“人源化”抗体。用于将非人抗体人源化的方法为本领域中所熟知。参见美国专利号5,585,089和5,693,762。通常，人源化抗体具有一个或多个自非人类来源引入其中的氨基酸残基。可例如使用本领域中所述的方法(Jones等人,1986,Nature[自然]321:522-25；Riechmann等人,1998,Nature[自然]332:323-27；Verhoeyen等人,1988,Science[科学]239:1534-36)，通过用啮齿类动物互补决定区的至少一部分代替人抗体的对应区域来进行人源化。

本披露还涵盖结合TSLP的人抗体和抗体变体(包括抗体片段)。使用在缺少内源性免疫球蛋白产生时能够产生人抗体谱的转基因动物(例如小鼠)，通过用多肽抗原(即具有至少6个相邻氨基酸)进行免疫接种，任选地结合载体，来产生此类抗体。参见，例如Jakobovits等人,1993,Proc.Natl.Acad.Sci.[美国国家科学院院刊]90:2551-55；Jakobovits等人,1993,Nature[自然]362:255-58；Bruggermann等人,1993,Year inImmuno.[年度免疫学]7:33。还参见PCT申请号PCT/US 96/05928和PCT/US93/06926。其他方法描述于美国专利号5,545,807、PCT申请号PCT/US 91/245和PCT/GB 89/01207、以及欧洲专利号546073B1和546073A1中。人抗体还可通过在宿主细胞中表达重组DNA或通过在如本文所述的杂交瘤细胞中表达来产生。

嵌合的、CDR移植的以及人源化抗体和/或抗体变体通常通过重组方法产生。将编码抗体的核酸引入宿主细胞中并且使用本文所述的材料和程序表达。在优选的实施例中，在诸如CHO细胞的哺乳动物宿主细胞中产生抗体。单克隆(例如人)抗体可通过在宿主细胞中表达重组DNA或通过在如本文所述的杂交瘤细胞中表达来产生。

可用于本发明的方法中的抗体和抗体变体(包括抗体片段)包含含有以下的抗TSLP抗体：(A)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列的轻链CDR1序列；(ii)含有SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列的轻链CDR2序列；和(iii)含有SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列的轻链CDR3序列；和(B)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:6中所示的氨基酸序列的重链CDR1序列；(ii)含有SEQ ID NO:7中所示的氨基酸序列的重链CDR2序列，和(iii)含有SEQ ID NO:8中所示的氨基酸序列的重链CDR3序列。

还预期包含以下的抗体或抗体变体：(A)轻链可变结构域，该轻链可变结构域选自由以下组成的组：(i)与SEQ ID NO:12具有至少80％(例如，约85％、约90％、约95％、大于95％)同一性的氨基酸序列；(ii)由与SEQ ID NO:11具有至少80％(例如，约85％、约90％、约95％、大于95％)同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；(iii)由在中等严格条件下与由SEQ ID NO:11组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；和(B)重链可变结构域，该重链可变结构域选自由以下组成的组：(i)与SEQ ID NO:10具有至少80％(例如，约85％、约90％、约95％、大于95％)同一性的氨基酸序列；(ii)由与SEQ ID NO:9具有至少80％(例如，约85％、约90％、约95％、大于95％)同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；(iii)由在中等严格条件下与由SEQ ID NO:9组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；或者(C)(A)的轻链可变结构域和(A)的重链可变结构域，其中该抗体或抗体变体与SEQ ID NO:2的氨基酸29-159中所示的TSLP多肽特异性结合。

在示例性实例中，该抗TSLP抗体包含含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的重链、含有SEQ ID NO:14的氨基酸序列的轻链、或者含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的重链、和含有SEQ ID NO:14的氨基酸序列的轻链。

泰派鲁单抗是具有以下的示例性抗TSLP抗体：(A)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列的轻链CDR1序列；(ii)含有SEQ IDNO:4中所示的氨基酸序列的轻链CDR2序列；和(iii)含有SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列的轻链CDR3序列；和(B)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:6中所示的氨基酸序列的重链CDR1序列；(ii)含有SEQ ID NO:7中所示的氨基酸序列的重链CDR2序列，和(iii)含有SEQ ID NO:8中所示的氨基酸序列的重链CDR3序列。

泰派鲁单抗还包含：

(A)轻链可变结构域，该轻链可变结构域选自由以下组成的组：

(i)与SEQ ID NO:12具有至少80％同一性的氨基酸序列；

(ii)由与SEQ ID NO:11具有至少80％同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；

(iii)由在中等严格条件下与由SEQ ID NO:11组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；以及

(B)重链可变结构域，该重链可变结构域选自由以下组成的组：

(i)与SEQ ID NO:10具有至少80％同一性的氨基酸序列；

(ii)由与SEQ ID NO:9具有至少80％同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；

(iii)由在中等严格条件下与由SEQ ID NO:9组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；或者

(C)(A)的轻链可变结构域和(B)的重链可变结构域。

其他示例性抗TSLP抗体是本领域已知的。参见，例如国际专利申请公开号WO2017/042701、WO 2016/142426、WO 2010/017468，美国专利申请公开号US2012/0020988，以及美国专利号8,637,019。在示例性方面中，该抗TSLP抗体是在这些出版物之一中披露的抗体。

在多个实施例中，该抗TSLP抗体或其抗体变体是二价的并且选自由以下组成的组：人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、单克隆抗体、重组抗体、抗原结合抗体片段、单链抗体、单体抗体、双抗体、三抗体、四抗体、Fab片段、IgG1抗体、IgG2抗体、IgG3抗体和IgG4抗体。在示例性方面中，该抗TSLP抗体是IgG2抗体。

在多个实施例中，该抗TSLP抗体变体选自由以下组成的组：双抗体、三抗体、四抗体、Fab片段、单域抗体、scFv，其中该剂量经调整，使得这些结合位点相对于给予二价抗体的结合位点是等摩尔的。在示例性方面中，该抗体的两个结合位点具有与TSLP的相同的结合。

预期该抗体或抗体变体是IgG2抗体。人IgG2恒定区的示例性序列能以Uniprot编号P01859自Uniprot数据库获得，该Uniprot数据库通过引用并入本文。包括关于其他抗体重链及轻链恒定区的序列信息的信息还可经由Uniprot数据库以及在抗体工程改造及产生领域熟知的其他数据库公开获得。

在某些实施例中，抗体衍生物包括四聚体糖基化抗体，其中与亲本多肽的氨基酸序列相比，糖基化位点的数目和/或类型改变。在某些实施例中，变体包含比天然蛋白质更多或更少数目的N连接的糖基化位点。可替代地，消除此序列的取代将移除已存在的N连接的碳水化合物链。还提供N连接的碳水化合物链的重排，其中消除一个或多个N连接的糖基化位点(通常天然存在的N连接的糖基化位点)且创造一个或多个新的N连接的位点。另外的优选的抗体变体包括半胱氨酸变体，其中与亲本氨基酸序列相比，一个或多个半胱氨酸残基缺失或取代另一个氨基酸(例如丝氨酸)。当抗体必须重新折叠成生物学上活性构象时，诸如在分离不溶性包涵体之后，半胱氨酸变体可为有用的。半胱氨酸变体一般具有比天然蛋白质少的半胱氨酸残基，且通常具有偶数个，以使由未配对的半胱氨酸引起的相互作用最小。

所需氨基酸取代(无论保守或非保守)可由本领域技术人员在需要此类取代时来确定。在某些实施例中，氨基酸取代可用于鉴别人TSLP的抗体的重要残基，或增加或减少抗体对本文所述的人TSLP的亲和力。

根据某些实施例，优选的氨基酸取代为以下那些：(1)降低对蛋白质水解的敏感性；(2)降低对氧化的敏感性；(3)改变用于形成蛋白质复合物的结合亲和力；(4)改变结合亲和力和/或(4)赋予或改变此类多肽上的其他生理化学特性或功能特性。根据某些实施例，可在天然存在的序列中(在某些实施例中，在形成分子间接触的结构域外的多肽部分中)进行单个或多个氨基酸取代(在某些实施例中为保守氨基酸取代)。在某些实施例中，保守氨基酸取代通常基本上不能改变亲本序列的结构特性(例如替换氨基酸不应倾向于使亲本序列中存在的螺旋断裂，或破坏亲本序列特征性的其他类型二级结构)。技术公认的多肽二级和三级结构的实例描述于Proteins,Structures and Molecular Principles[蛋白质/结构和分子原理](Creighton编辑,W.H.Freeman and Company[W.H.弗里曼公司],纽约(1984))；Introduction to Protein Structure[蛋白质结构简介](C.Branden和J.Tooze编辑,Garland Publishing[加兰出版社],纽约,纽约州(1991))；以及Thornton等人Nature[自然]354:105(1991)，将这些文献各自通过引用并入本文。

与前述一致，在一些方面中，本披露的组合物包含约110mg/mL至约140mg/mL抗TSLP抗体(例如泰派鲁单抗)、约0.01％(w/v)±0.005％(w/v)聚山梨醇酯80、约2.4％(w/v)至约2.8％(w/v)L-脯氨酸、以及约20mM至约28mM乙酸盐，其中该组合物的粘度小于约20cP(例如15cP)，并且pH小于约5.5，任选地，约5.2。任选地，该抗TSLP抗体包含(A)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列的轻链CDR1序列；(ii)含有SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列的轻链CDR2序列；和(iii)含有SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列的轻链CDR3序列；和(B)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:6中所示的氨基酸序列的重链CDR1序列；(ii)含有SEQ ID NO:7中所示的氨基酸序列的重链CDR2序列，和(iii)含有SEQ ID NO:8中所示的氨基酸序列的重链CDR3序列。在示例性实例中，该组合物包含约110mg/mL的抗TSLP抗体，例如泰派鲁单抗，0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，约2.4％(w/v)至约2.8％(w/v)L-脯氨酸，以及约20mM至约28mM乙酸盐(例如，约22mM至约26mM、约24mM至约26mM)，其中该组合物的pH是约5.2，其中该抗TSLP抗体任选地包含：(A)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列的轻链CDR1序列；(ii)含有SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列的轻链CDR2序列；和(iii)含有SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列的轻链CDR3序列；和(B)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:6中所示的氨基酸序列的重链CDR1序列；(ii)含有SEQ ID NO:7中所示的氨基酸序列的重链CDR2序列，和(iii)含有SEQ ID NO:8中所示的氨基酸序列的重链CDR3序列。在可替代的实例中，该组合物包含约140mg/mL的抗TSLP抗体，例如泰派鲁单抗，0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，约2.5％(w/v)至约2.8％(w/v)L-脯氨酸，以及约20mM至约28mM乙酸盐(例如，约24mM至约26mM、约25mM至约26mM)，其中该组合物的pH是约5.2，其中该抗TSLP抗体任选地包含：(A)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列的轻链CDR1序列；(ii)含有SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列的轻链CDR2序列；和(iii)含有SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列的轻链CDR3序列；和(B)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:6中所示的氨基酸序列的重链CDR1序列；(ii)含有SEQ ID NO:7中所示的氨基酸序列的重链CDR2序列，和(iii)含有SEQ ID NO:8中所示的氨基酸序列的重链CDR3序列。在多个实施例中，该组合物包含110mg/mL抗TSLP抗体、24mM乙酸盐、2.5％(w/v)L-脯氨酸、和0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，pH为5.2。在多个实施例中，该组合物包含110mg/mL抗TSLP抗体、10mM乙酸盐、3.0％(w/v)L-脯氨酸、和0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，pH为5.2。

制备方法

本文进一步提供了制备本披露的组合物的方法。因此，进一步提供了制备稳定的液体组合物的方法，该稳定的液体组合物具有小于约24cP的粘度并且包含小于约200mg/mL(约100mg/mL至约180mg/mL)的抗TSLP抗体、表面活性剂和缓冲剂。在示例性实施例中，该方法包括：(i)将包含以第一浓度的抗体、乙酸盐和脯氨酸的第一溶液与包含乙酸盐和脯氨酸的缓冲剂组合，以获得包含约110mg/mL至约140mg/mL的泰派鲁单抗、脯氨酸和乙酸盐的溶液，以及(ii)向该溶液中添加表面活性剂以达到约0.01％(w/v)±0.005％(w/v)表面活性剂的最终浓度。在示例性方面中，该稳定的液体组合物包含约110mg/mL或约140mg/mL的抗TSLP抗体。在一些方面中，相对于不含脯氨酸的液体组合物，该含脯氨酸的稳定的液体组合物的粘度减少。例如，在一些情况下，该稳定的液体配制品的粘度小于约20cP。在示例性方面中，将包含约200mM至约300mM脯氨酸(例如约220mM至约280mM、约245mM至约275mM、约255mM至约265mM、或约260mM)的溶液与第一溶液组合。任选地，该脯氨酸是L-脯氨酸。在一些方面中，该表面活性剂是聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。在示例性实例中，该表面活性剂是聚山梨醇酯80，并且PS80的最终浓度是约0.01％(w/v)。在示例性方面中，该缓冲剂由冰乙酸制成，并且任选地，添加氢氧化钠后达到目标pH。在不同情况下，该缓冲剂包含约1mM至约30mM乙酸盐，任选地，约5mM至约15mM乙酸盐。在多个方面中，该缓冲剂的pH与稳定的液体组合物的pH相同。在示例性实例中，该稳定的液体组合物的pH是约5.2。在示例性实施例中，该抗TSLP抗体是泰派鲁单抗。

制品、注射器、和小瓶

本披露提供了一种制品，该制品包含当前披露的任一种组合物，任选地，包含约0.5mL至约5mL(例如，约0.5mL至约4.5mL、约0.5mL至约4mL、约0.5mL至约3.5mL、约0.5mL至约3mL、约0.5mL至约2.5mL、约0.5mL至约2mL、约0.5mL至约1.5mL、约0.5mL至约1mL、约1mL至约5mL、约1.5mL至约5mL、约2mL至约5mL、约2.5mL至约5mL、约3mL至约5mL、约3.5mL至约5mL、约4mL至约5mL、约4.5mL至约5mL)的组合物。在多个方面中，该制品包含约0.64mL至2.09mL的当前披露的任一种组合物。任选地，该制品包含约1.91mL的当前披露的任一种组合物。任选地，该组合物包含约100mg/mL至约280mg/mL抗TSLP抗体(例如泰派鲁单抗)。在多个方面中，该组合物包含约110mg/mL至约140mg/mL抗TSLP抗体(例如泰派鲁单抗)、约0.01％(w/v)±0.005％(w/v)聚山梨醇酯80、约2.4％(w/v)至约2.8％(w/v)L-脯氨酸、以及约20mM至约28mM乙酸盐，其中该组合物的粘度小于约20cP(例如15cP)，并且pH小于约5.5，任选地，约5.2。

本披露还提供了一种预填充注射器(PFS)，该预填充注射器包含当前披露的任一种组合物，任选地，包含约0.5mL至约5mL(例如，约0.5mL至约4.5mL、约0.5mL至约4mL、约0.5mL至约3.5mL、约0.5mL至约3mL、约0.5mL至约2.5mL、约0.5mL至约2mL、约0.5mL至约1.5mL、约0.5mL至约1mL、约1mL至约5mL、约1.5mL至约5mL、约2mL至约5mL、约2.5mL至约5mL、约3mL至约5mL、约3.5mL至约5mL、约4mL至约5mL、约4.5mL至约5mL)的组合物。在多个方面中，该PFS包含约0.64mL至2.09mL的当前披露的任一种组合物。任选地，该PFS包含约1.91mL的当前披露的任一种组合物。任选地，该组合物包含约100mg/mL至约280mg/mL抗TSLP抗体(例如泰派鲁单抗)。在多个方面中，该组合物包含约110mg/mL至约140mg/mL抗TSLP抗体(例如泰派鲁单抗)、约0.01％(w/v)±0.005％(w/v)聚山梨醇酯80、约2.4％(w/v)至约2.8％(w/v)L-脯氨酸、以及约20mM至约28mM乙酸盐，其中该组合物的粘度小于约20cP(例如15cP)，并且pH小于约5.5，任选地，约5.2。

还提供了一种小瓶，该小瓶包含当前披露的任一种组合物，任选地，包含约0.5mL至约5mL(例如，约0.5mL至约4.5mL、约0.5mL至约4mL、约0.5mL至约3.5mL、约0.5mL至约3mL、约0.5mL至约2.5mL、约0.5mL至约2mL、约0.5mL至约1.5mL、约0.5mL至约1mL、约1mL至约5mL、约1.5mL至约5mL、约2mL至约5mL、约2.5mL至约5mL、约3mL至约5mL、约3.5mL至约5mL、约4mL至约5mL、约4.5mL至约5mL)的组合物。在多个方面中，该小瓶包含约0.64mL至2.09mL的当前披露的任一种组合物。任选地，该小瓶包含约1.91mL的当前披露的任一种组合物。任选地，该组合物包含约100mg/mL至约280mg/mL抗TSLP抗体(例如泰派鲁单抗)。在多个方面中，该组合物包含约110mg/mL至约140mg/mL抗TSLP抗体(例如泰派鲁单抗)、约0.01％(w/v)±0.005％(w/v)聚山梨醇酯80、约2.4％(w/v)至约2.8％(w/v)L-脯氨酸、以及约20mM至约28mM乙酸盐，其中该组合物的粘度小于约20cP(例如15cP)，并且pH小于约5.5，任选地，约5.2。

试剂盒

本披露还提供了试剂盒，该试剂盒包括本文所述的组合物以及包装插页、包装标签、说明书或者指导或披露本文中所披露的任何方法或实施例的其他标记。在某些实施例中，本披露提供了用于产生单次剂量施用单位的试剂盒。在本披露的某些实施例中，包括含有单腔室和多腔室预填充式注射器(例如液体注射器)的试剂盒。

使用方法

本披露还提供了泰派鲁单抗或另一个人抗TSLP单克隆抗体或其抗原结合部分用于制造如本文所述的用以治疗需要抗TSLP单克隆抗体的受试者的药物的用途。

本文预期用于治疗受试者的炎性疾病的方法。在示例性实施例中，这些方法包括向该受试者施用治疗有效量的组合物，该组合物包含大于约100mg/mL的抗TSLP抗体、表面活性剂、脯氨酸、和缓冲剂。在某些实施例中，该组合物是无菌药物组合物。

如本文所用的，“炎性疾病”是指涉及由免疫系统攻击人体自身的细胞或组织引起的异常炎症的医学病症，这可能导致慢性疼痛、发红、肿胀、僵硬、以及对正常组织的损害。炎性疾病包括例如哮喘、慢性消化性溃疡、结核病、牙周炎、窦炎、活动性肝炎、强直性脊柱炎、类风湿性关节炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、克罗恩病、溃疡性结肠炎、骨关节炎、动脉粥样硬化、全身性红斑狼疮、特应性皮炎、嗜酸细胞性食管炎(EoE)、鼻息肉、慢性自发性荨麻疹、Ig驱动的疾病(例如IgA肾病和狼疮性肾炎)、嗜酸细胞性胃炎、无鼻息肉的慢性鼻窦炎、特发性肺纤维化(IPF)等。在示例性方面中，该炎性疾病是哮喘、特应性皮炎、或COPD。在示例性方面中，该炎性疾病是哮喘，并且在一些情况下，该哮喘是重度哮喘、嗜酸细胞性哮喘、非嗜酸细胞性哮喘、或低嗜酸细胞哮喘。令人惊讶地，本文中发现用抗TSLP抗体治疗有效地减少非嗜酸细胞/低嗜酸细胞群体中的哮喘症状，如同其在高嗜酸细胞群体中一般。在一些方面中，该方法降低受试者的哮喘恶化频率。

本文还预期治疗具有Th2高哮喘概况或Th2低哮喘概况的受试者的哮喘的方法。预期抑制TSLP蛋白质与其受体复合物结合的TSLP拮抗剂将与本文所述的抗体一样有效地治疗低嗜酸细胞哮喘群体。类似地，预期抑制TSLP与其受体复合物结合的TSLP拮抗剂将有效地治疗Th2低哮喘群体。

本文提供了治疗患有低嗜酸细胞哮喘的患者的方法，该方法包括施用本披露的组合物。还预期治疗患有特征为低Th2概况的哮喘的受试者的方法，该方法包括施用包含抗TSLP抗体的本披露的组合物。在多个实施例中，该抗体是泰派鲁单抗或本领域中描述的另一个抗TSLP抗体。示例性抗TSLP抗体包括WO 2017/042701、WO2016/142426、WO 2010/017468、US 20170066823、US 20120020988和US 8637019(将这些文献通过引用并入本文)中所述的抗体。还预期用于治疗受试者的慢性阻塞性肺病(COPD)的方法，该方法包括施用抗TSLP抗体或抗体变体。

预期该受试者是人。该受试者可以是成人、青少年或儿童。

治疗抗体(或抗体变体)组合物可在多个部位递送至患者。多次施用可同时进行或可在一段时间内施用。在某些情况下，提供治疗组合物的连续流动为有益的。可周期性施用其他疗法，例如每小时、每日、每周、每2周、每3周、每月或以更长时间间隔。

在多个实施例中，既定剂量的治疗剂(诸如具有两个TSLP结合位点的二价抗体)的量可根据疗法施用的个体的体型以及所治疗的病症的特征而变化。

在示例性治疗中，该组合物提供的抗TSLP抗体或抗体变体的剂量是在每日剂量约70mg至约280mg的范围内。例如，该剂量能以约70mg、210mg、或280mg提供。在多个实施例中，该包含抗TSLP抗体或抗体变体的组合物能以每日剂量70mg、80mg、90mg、100mg、110mg、120mg、130mg、140mg、150mg、160mg、10mg、180mg、190mg、200mg、210mg、220mg、230mg、240mg、250mg、260mg、270mg、或280mg的剂量施用。这些浓度能以单个剂型或多个剂量施用。以上剂量每两周或每四周给予。在多个实施例中，该抗TSLP抗体或抗体变体以70mg每两周或每四周的单次剂量施用。在多个实施例中，该抗TSLP抗体或抗体变体以210mg每两周或每四周的单次剂量施用。在多个实施例中，该包含大于约100mg/mL抗TSLP抗体的组合物以每两周或每四周的间隔向该受试者施用。

对于抗体变体，抗体变体的量应使剂量中的TSLP结合位点的数目与上述标准二价抗体的TSLP结合位点数目是等摩尔的。

预期该包含抗TSLP抗体或抗体变体的本披露的组合物以每2周或每4周施用于少4个月、6个月、9个月、1年或更长时间的时期。在多个实施例中，该施用为皮下或静脉内。在多个实施例中，该施用为皮下。

预期用该抗TSLP抗体或抗体变体治疗会减少受试者的血液、痰液、支气管肺泡液或肺中的嗜酸细胞。还预期该施用将该受试者中的细胞计数自Th2高群体变成Th2低群体。进一步预期施用该抗TSLP抗体会改善受试者中选自由以下组成的组的一个或多个哮喘量度：用力呼气量(FEV)、FEV1可逆性、用力肺活量(FCV)、FeNO、哮喘控制问卷-6评分和AQLQ(S)+12评分。

诊断和评估哮喘的量度包括以下：

使用标准化单次呼吸的呼出气一氧化氮分数(FeNO)(美国胸科学会(AmericanThoracic Society)；ATS,Am J Respir Crit Care Med.[美国呼吸与危重症医学杂志]171(8):912-30,2005)测试而评估的气道炎症。例如，受试者经由NIOX

气道炎症监测器吸入至肺总量，接着以50mL/sec呼出10秒(通过视觉和听觉提示辅助)。

根据ATS/欧洲呼吸协会(European Respiratory Society，ERS)指南进行肺活量测定法(Miller等人,Eur Respir J.[欧洲呼吸杂志]26(1):153-61,2005)。例如，在各肺活量测定期进行多次用力呼气尝试(至少3次，但至多8次)，并且记录满足ATS/ERS可接受性和可重现性标准的2次最佳尝试。最佳尝试将基于最高FEV1。2次最佳尝试的最大FEV1将用于分析。将使用适当参考值记录绝对测量值(FEV1和FVC)与预测标准值百分比。不管进行最高FVC的尝试如何(即使该尝试未产生最高FEV1)，也报告最高FVC。

在受试者进行BD前肺活量测定法之后评估支气管扩张剂后(BD后)肺活量测试。使用SABA，诸如舒喘宁(albuterol)(90μg计量的剂量)或沙丁胺醇(salbutamol)(100μg计量的剂量)或等同物，利用隔离装置，诱发最大支气管扩张，最多进行总共8次吹吸(Sorkness等人,J Appl Physiol.[应用生理学杂志]104(2):394-403,2008)。将在4次、6次或8次吹吸之后获得的最高BD前和BD后FEV1用于测定可逆性及进行分析。可逆性算法如下：

可逆性％＝(BD后FEV1-BD前FEV1)×100/BD前FEV1

自第2次就诊的早晨(第-4周)至第64周，使用峰流速仪，在早晨醒来时和晚上就寝前，每日进行呼吸峰流速(PEFR)的家庭峰流速测试两次。可能时，在最后一次给予SABA拯救药物治疗之后至少6小时，应进行步行肺功能测量。

哮喘每日日志包括以下每日评估：哮喘症状；拯救药物治疗的吸入；夜间由于哮喘而醒来，需要使用拯救药物治疗；哮喘相关的活动限制、哮喘相关的应力和背景药物治疗顺应性。每天早上和晚上完成哮喘每日日志。ePRO装置中存在触发器，用于警告受试者哮喘恶化的征象。

哮喘控制问卷(ACQ)6为评估哮喘症状(即夜间醒来、醒来症状、活动限制、呼吸浅短、喘息)和每日使用拯救支气管扩张剂和FEV1的由患者报告的问卷(Juniper等人,1999年10月)。ACQ-6为ACQ的缩短版本，其自初始ACQ评分省略FEV1测量。问题同等地进行加权处理且评分为0(完全控制)至6(严重不受控制)。平均ACQ评分为反应平均值。平均评分≤0.75指示哮喘控制良好，评分在0.75与≤1.5之间指示哮喘得到部分控制，且评分>1.5指示哮喘不受控制(Juniper等人,Respir Med.[呼吸道医学]100(4):616-21,2006)。认为至少0.5的个体变化为临床上有意义的(Juniper等人,Respir Med.[呼吸道医学]99(5):553-8,2005)。

标准化哮喘生活质量问卷(AQLQ[S])+12(AQLQ(S)+12)为测量哮喘患者所经历的HRQoL的32项问卷(Juniper等人,Chest.[胸]115(5):1265-70,1999年5月)。该问卷包含4个独立领域(症状、活动限制、情绪功能和环境刺激)。要求受试者回忆其在前2周期间的经历且基于在7(无损害)至1(重度损害)范围内的7点量表，对32个问题中的每个问题评分。总评分计为对所有问题的平均反应。4个单独的领域评分(症状、活动限制、情绪功能和环境刺激)为对各领域中问题的反应的平均值。总评分与单独领域评分的0.5的个体改善已被鉴别为最小重要变化，其中评分变化≥1.5鉴别为大的有意义的变化(Juniper等人,J ClinEpidemiol.[临床流行病学杂志]47(1):81-7,1994)。

哮喘改善可被测量为以下中的一个或多个：AER(年恶化率)降低；哮喘的住院治疗/重度恶化减少；首次哮喘恶化(在开始用抗TSLP抗体治疗后)的时间自基线的变化(增加)；在治疗过程、例如52周中具有一或多次哮喘恶化或重度恶化的受试者的比例相对于安慰剂减少；FEV1和FVC(支气管扩张剂前和支气管扩张剂后)自基线的变化(增加)；血液或痰液的嗜酸细胞(或若获得切片或BAL流体，则为肺嗜酸细胞)自基线的变化(减少)；FeNO自基线的变化(减少)；IgE自基线的变化(减少)；如通过包括ACQ和变体、AQLQ和变体、SGRQ和哮喘症状日志的PRO所测量，哮喘症状和控制有所改善；拯救药物治疗的使用变化(减少)；全身性皮质类固醇的使用减少；血液中Th2/Th1细胞比率下降。大部分/所有这些量度应在总群体和亚群中，包括高和低嗜酸细胞(大于或等于250为高；小于250为低)、过敏性和非过敏性、Th2高和低、骨膜蛋白高和低(与中位数值相比)和FeNO高和低(大于或等于24或小于24)。

如通过哮喘症状日志所测量，治疗还改善哮喘的一种或多种症状。症状包括但不限于白天及夜间症状频率及严重度、活动避免及限制、哮喘相关的应力和疲劳以及拯救哮喘药物治疗的使用)、以及如通过省略FEV₁的哮喘控制问卷(ACQ-6)所测量的哮喘控制的其他量度。

在多个实施例中，与未接受抗TSLP抗体的受试者相比，用该包含抗TSLP抗体的本披露的组合物治疗延迟达到哮喘恶化的时间。

本披露中还预期施用多种药剂，诸如抗体组合物结合如本文所述的第二药剂，包括但不限于消炎剂或哮喘疗法。

但是，预期在多个实施例中，该施用降低受试者中共同施用的疗法的频率或水平。示例性共同施用的疗法包括但不限于吸入型皮质类固醇(ICS)、长效β2激动剂(LABA)、白三烯受体拮抗剂[LTRA]、长效抗毒蕈碱药[LAMA]、色甘酸钠、短效β2激动剂(SABA)、以及茶碱或口服皮质类固醇。在多个实施例中，该施用消除对皮质类固醇疗法的需要。

提供以下实例用于说明而不意欲限制本发明的范围。

实例

贯穿本文中所提供的实例，使用以下缩写：DF，渗滤；PS80，聚山梨醇酯80；PS20，聚山梨醇酯20；SEC，尺寸排阻色谱，CEX，阳离子交换色谱，rCE，降低的毛细管电泳，F#，配制品编号。另外，贯穿这些实例，提供了用于制造包含泰派鲁单抗的最终配制品的DF缓冲剂的组成以及最终配制品的组分的估计浓度。所分析的(例如，任选地在储存后，针对稳定性、粘度)最终配制品的某些组分的最终浓度与DF或透析缓冲剂的浓度不同，视存在或不存在反离子而定。不存在反离子时，配制品具有低离子强度。在这种情况下，乙酸盐与泰派鲁单抗共浓缩，使得最终配制品包含相对于DF或透析缓冲剂的浓度而言更高的乙酸盐浓度。例如，当DF缓冲剂或最终配制品都不包含低离子(例如HCl)且因而具有低离子强度时，使用包含10mM乙酸盐的DF缓冲剂导致包含110mg/mL泰派鲁单抗的配制品(pH 5.2)中存在约20mM至约28mM(例如，约25mM)乙酸盐。类似地，不存在低离子时(例如HCl)，包含10mM乙酸盐的DF缓冲剂导致包含140mg/mL泰派鲁单抗的配制品(pH 5.2)中存在约20mM至约28mM(例如，约25mM)乙酸盐。当存在低离子(例如HCl)时，乙酸盐不与泰派鲁单抗共浓缩，并且因此DF缓冲剂的乙酸盐浓度和最终组合物的乙酸盐浓度一般相等。另外，赋形剂可受到体积排阻，或可受到非特异性相互作用影响。例如，在110mg/mL泰派鲁单抗配制品中，脯氨酸浓度可比DF缓冲剂中指示的浓度低多达约16.67％，并且在140mg/mL泰派鲁单抗配制品中，脯氨酸浓度可比DF缓冲剂中指示的浓度低多达约10％至约13.3％。根据上文，贯穿以下实例，在考虑以上所描述的赋形剂排阻和乙酸盐共浓缩效应的情况下，提供了最终配制品的组分的浓度。

实例1

该实例描述了产生高浓度泰派鲁单抗配制品的示例性方法。

使用包括实验室规模的切向流过滤(TFF)系统的方法制备了泰派鲁单抗的高浓度配制品。在该方法中，使用渗滤缓冲剂经由渗滤(DF)对含有70mg/mL泰派鲁单抗的初始低浓度溶液进行完全缓冲剂交换。除非在以下实例中另有说明，否则渗滤缓冲剂包含约10mM乙酸盐和约3％(w/v)L-脯氨酸。渗滤缓冲剂使用冰乙酸制备，使用氢氧化钠滴定至DF缓冲剂pH。渗滤缓冲剂的pH变化取决于配制品的目标pH。在缓冲剂交换步骤后，将泰派鲁单抗溶液浓缩至等于或高于目标泰派鲁单抗浓度的泰派鲁单抗浓度。如果需要，然后可使用稀释缓冲剂将浓缩的泰派鲁单抗溶液稀释至目标泰派鲁单抗浓度。除非在以下实例中另外指出，否则稀释缓冲剂包含与渗滤缓冲剂相同的组成，并且包含约10mM乙酸盐和约3％(w/v)L-脯氨酸，其中除非另有说明，否则目标pH为5.2。稀释步骤后，添加表面活性剂。在一些情况下，该表面活性剂是聚山梨醇酯80(PS80)并在一些情况下，将PS80以0.01％(w/v)的最终PS80的浓度添加到每种配制品中。在其他情况下，该表面活性剂是聚山梨醇酯20(PS20)，并将PS20以0.004％(w/v)至0.015％(w/v)的最终浓度添加到每种配制品中。

通过用于评估产品质量的一系列测定法或其组合测试了高浓度配制品的粘度、储存时的稳定性。使用旋转粘度计在约20℃至约25℃的温度下测量粘度，并且所报告的粘度值是在约900l/s至约1000l/s的剪切速率。除非另有说明，否则粘度是在没有表面活性剂的情况下测量的。出于稳定性，将各配制品的样品填充至容器并在-30℃至约40℃的温度下储存长达36个月(例如，在约-30℃下储存36个月，在2℃至约8℃下储存24个月，在约25℃下储存6个月，在约30℃下储存2个月，在40℃下储存1-3个月)。经由尺寸排阻色谱法(SEC)测试样品，以确定配制品在多个储存时间点的稳定性。报告了配制品的主峰百分比并反映了在指定的储存时间后剩余的泰派鲁单抗(单体形式)的量。

实例2

该实例描述了不同赋形剂对配制品粘度的影响的最初评估。

为了评估蔗糖和L-脯氨酸对配制品粘度的影响，作为蛋白质(泰派鲁单抗)浓度的函数，用不同浓度的泰派鲁单抗制备了包含这些赋形剂之一的两系列泰派鲁单抗配制品。每个系列的泰派鲁单抗浓度范围从约50mg/mL至>200mg/mL。基本上如实例1所述制备含脯氨酸的配制品，其中DF缓冲剂包含约10mM乙酸盐和3％(w/v)L-脯氨酸，并且pH为4.5(用NaOH滴定)。没有将表面活性剂添加到含脯氨酸的配制品中。因为含有70mg/mL泰派鲁单抗的初始低浓度溶液包含蔗糖，所以不需要经由渗滤进行缓冲剂交换步骤来制备含蔗糖的配制品。通过将初始低浓度溶液浓缩至较高浓度，然后用包含约10mM乙酸盐，约9.0％(w/v)蔗糖，pH 5.2的稀释缓冲剂稀释，来制备含蔗糖的配制品。稀释缓冲剂使用冰乙酸制成，使用氢氧化钠滴定至pH5.2。没有将表面活性剂添加到含蔗糖的配制品中。

基本上如实例1中所述测试每个系列的每种配制品的样品的粘度，并且结果在下表1中提供。

表1

结果也以图形方式表示在图1A中。该图提供了绘制含有脯氨酸的配制品的粘度随蛋白质(泰派鲁单抗)浓度而变化的图。出于比较目的，将每种含有蔗糖的配制品的粘度绘制在图上。如图1A所示，当泰派鲁单抗浓度超过100mg/mL时，蔗糖配制品的粘度急剧增加，而当将泰派鲁单抗与L-脯氨酸一起配制时，粘度曲线发生偏移。包含脯氨酸和浓度在约110mg/mL至约180mg/mL范围内的泰派鲁单抗的配制品展示出的粘度约为包含类似泰派鲁单抗浓度的蔗糖配制品的粘度的一半。

该实例证明，相对于含蔗糖的配制品，含脯氨酸的配制品表现出明显更低的粘度。

实例3

该实例描述了不同赋形剂对高浓度泰派鲁单抗配制品的粘度和稳定性的影响。

脯氨酸对泰派鲁单抗的高浓度配制品具有显著的降粘作用。但是，其对蛋白质稳定性的影响尚不十分清楚。由于难以制备材料而无法在高浓度稳定性研究中将蔗糖配制品用作对照，因此将脯氨酸配制品的稳定性与包含山梨糖醇的配制品(另一种常用的赋形剂)的稳定性进行了比较。

基本上如实例1中所述制备约130mg/mL的泰派鲁单抗的高浓度配制品。对于含山梨糖醇的配制品，DF缓冲剂包含约5％(w/v)山梨糖醇和约10mM乙酸盐。对于含脯氨酸的配制品，DF缓冲剂包含约3％(w/v)L-脯氨酸和约10mM乙酸盐。将每种DF缓冲剂用氢氧化钠滴定至pH 4.6。除pH外，稀释缓冲剂与DF缓冲剂相同。向各配制品中添加PS20，最终浓度为0.01％(w/v)。

基本上如实例1所述测试各配制品的样品的粘度。观察到，与包含山梨糖醇的配制品相比，含有脯氨酸的配制品展示出更低的溶液粘度。在25℃下，与山梨糖醇配制品相比，含脯氨酸的配制品的粘度为10.2cP，而在相同条件下，山梨糖醇配制品的粘度为15.3cP。

基本上如实例1所述测试各配制品的样品在三种储存条件之一下的稳定性：(A)在40℃下在玻璃注射器中储存长达3个月，(B)在2℃-8℃下在玻璃注射器中储存约24个月，或(C)在30℃下在玻璃注射器中储存长达24个月。进行尺寸排阻色谱法(SEC)，以监测泰派鲁单抗的物理稳定性(即聚集)。与山梨糖醇对照相比，含脯氨酸的配制品在整个储存温度范围内均表现出可接受的稳定性。将结果显示于图1B中。如图1B所示，含脯氨酸的泰派鲁单抗配制品的物理稳定性与含山梨糖醇的配制品一样好。在冷冻或冷藏温度下储存24个月后，存在超过98％的主峰。

实例4

该实例描述了赋形剂盐在含有脯氨酸的泰派鲁单抗配制品中的作用。

其他人已经显示出盐赋予高浓度抗体配制品的优点。已经假设该盐充当屏蔽物，以中断导致聚集的蛋白质-蛋白质(抗体-抗体)相互作用。盐也被认为降低了粘度。为了研究盐的添加是否改善了L-脯氨酸的降粘作用，制备了含或不含赋形剂盐的三种配制品，该配制品包含2％至3％的L-脯氨酸和130mg/mL泰派鲁单抗。在这项研究中测试的盐包括乙酸钙(25mM)和乙酸镁(25mM)。基本上如实例1所述制备各配制品，且用于制备各配制品的DF缓冲剂示于表2中。向各配制品中添加PS20至最终浓度为0.01％(w/v)。

表2

将DF缓冲剂用NaOH滴定至注明的pH。

每种配制品的样品在玻璃注射器中在40℃下储存长达3个月。在储存0、0.5、1、2和3个月时进行尺寸排阻色谱法(SEC)，以监测泰派鲁单抗的物理稳定性(即聚集)。将结果显示于图2中。如图2所示，相对于不含盐的配制品，在乙酸钙或乙酸镁的存在下，含有脯氨酸的泰派鲁单抗配制品的物理稳定性(即聚集)降低。储存3个月后，既不包含乙酸钙也不包含乙酸镁的配制品展示出超过95％的主峰，而包含这些盐中的一种的配制品展示出小于94％的主峰，这指示超过5％的抗体已经去稳定或被降解。

还目测检查各配制品。与包含不含任何盐的脯氨酸的配制品相比，包含乙酸钙和乙酸镁的每种配制品更浑浊(turbid或cloudy)。

基本上如实例1所述测量各配制品的样品的粘度，并证明添加盐(乙酸钙和乙酸镁)降低了粘度。

尽管添加盐降低了泰派鲁单抗高浓度配制品的粘度，但是添加盐降低了泰派鲁单抗配制品的稳定性。鉴于已知向高浓度抗体配制品中添加盐可减少蛋白质聚集，因此该研究的结果令人惊讶且出乎意料。

实例5

该实例证明了表面活性剂和pH对不同的泰派鲁单抗配制品的稳定性的影响。

基本上如实例1所述制备包含110mg/mL泰派鲁单抗的第一系列高浓度泰派鲁单抗配制品。表3描述了用于制备每种配制品的DF缓冲剂。如所指示，该泰派鲁单抗来源于两个批次(批次A或批次B)中的一个。如实例1所述将表面活性剂、聚山梨酸酯20(PS20)或聚山梨酸酯80(PS80)以从约0.005％(w/v)至约0.015％(w/v)的浓度范围添加到该配制品中。该配制品的pH在4.9至5.4之间变化。

表3

将PS20或PS80添加至注明的最终浓度。除非标有*，否则储存在玻璃注射器中。将缓冲剂用NaOH滴定至最终pH。

将各配制品的样品填充至容器(玻璃注射器或小瓶)中，并在2℃-8℃下储存长达24个月。进行SEC以确定各配制品在2℃-8℃下储存0、3、6、12和24个月时的稳定性。图3显示了所指示的配制品中泰派鲁单抗的主峰％。如图3所示，包含PS20或PS80的各配制品(跨pH范围)在储存24个月后均表现出蛋白质稳定性。配制品之间主峰％起始水平的差异可能是由于所使用的泰派鲁单抗的批次变化造成的。

实例6

该实例证明了在冷冻温度下储存的泰派鲁单抗配制品的稳定性。

大规模制备三批泰派鲁单抗，每批包含约140mg/mL泰派鲁单抗。简而言之，在细胞培养和纯化之后，通过超滤/渗滤(UF/DF)将材料渗滤到最终配制品中。渗滤过程中使用的缓冲剂是10mM乙酸盐(来自乙酸)、260mM L-脯氨酸，用氢氧化钠滴定至pH 4.5。交换缓冲剂后，将材料过度浓缩至180mg/mL，并使用10mM乙酸酯(来自乙酸)、260mM L-脯氨酸稀释至140mg/mL泰派鲁单抗，用氢氧化钠滴定至pH 4.5。通过添加聚山梨醇酯80以达到0.01％(w/v)的最终浓度来制备最终材料。最后，将材料过滤并在-30℃下长期储存。

每一批的说明描述于表4中。

表4

将PS80添加至注明的最终浓度。将DF缓冲剂用NaOH滴定至目标pH。

将各样品填充至容器(单次使用的系统(SUS)袋)中，并在-30℃下储存长达36个月。进行SEC以确定各配制品在储存0、3、6、9、12、18、24、30和36个月后的稳定性。图4显示了各批的中泰派鲁单抗的主峰％。如图4所示，每个批次在-30℃下储存36个月后，存在超过99％的主峰。泰派鲁单抗批次在-30℃下储存后表现出出色的稳定性。这些结果令人惊讶且出乎意料，因为脯氨酸不被称为冷冻保护剂。还令人惊讶的是，不需要其他赋形剂(例如蔗糖、山梨醇)即可达到在-30℃下所需的稳定性。

实例7

该实例证明了在不同时间和温度下储存后不同批次的泰派鲁单抗配制品的稳定性。

大规模制备了几批泰派鲁单抗，每批包含约110mg/mL泰派鲁单抗。简而言之，将在-30℃下储存的包含140mg/mL泰派鲁单抗的主体泰派鲁单抗解冻并使用10mM乙酸盐(来自乙酸)、3％(w/v)L-脯氨酸、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80稀释至110mg/mL泰派鲁单抗，使用氢氧化钠滴定至5.2。稀释后，将材料过滤并填充到玻璃小瓶或注射器中。

使用10mM乙酸盐和3.0％(w/v)脯氨酸将包含140mg/mL泰派鲁单抗的浓缩的泰派鲁单抗溶液稀释至110mg/mL泰派鲁单抗，添加PS80使最终浓度为0.01％(w/v)。各配制品的最终pH为5.2。

在第一个系列研究中，将一批的大量的(1.91mL)泰派鲁单抗配制品放入体积容量为2.25mL的玻璃预填充注射器(PFS)中，并在不同条件(如表5中所示)下水平放置。

在另一系列研究中，将一批的大量的(0.64mL至2.09mL，例如1.91mL)泰派鲁单抗配制品放入具有13mm密封件和13mm塞子的5cc玻璃小瓶中。将装满的小瓶在不同的条件(如表6中所示)下储存。

总体而言，在不同的储存时间和温度下储存了几批次泰派鲁单抗配制品，这些条件总结在表7中。

表5

研究#	最长储存时间(月)	储存温度(℃)	图
				1	1	40	5A
2	2	30	5B
				3	6	25	6A
4	36	2-8C	6B
				5	36	-30	4

经由尺寸排阻色谱法(SEC)测试储存材料的样品，以确定配制品在多个储存时间点和在多种储存温度下的稳定性。所示的泰派鲁单抗主峰的百分比示于指示的图中。总体而言，图4、5A、5B、6A和6B证明在各种条件下储存后，泰派鲁单抗保持物理稳定。综合起来，证明了泰派鲁单抗配制品在-30℃至40℃的温度范围下长达36个月的稳定性。即使在压力储存条件下，储存1个月后大于或等于主峰的94％仍存在(图5A)。

实例8

该实例证明了储存条件对包含乙酸盐、脯氨酸和PS80的泰派鲁单抗配制品的影响。

为了研究在不同温度和不同时间下泰派鲁单抗配制品对稳定性的影响，以及评估该配制品的稳健性，制备了15种包含乙酸盐、脯氨酸、聚山梨醇酯80和约110mg/ml泰派鲁单抗的配制品，然后进行了模拟运输测试。

对于每种配制品，将包含140mg/mL泰派鲁单抗的初始溶液在独特的渗滤(DF)缓冲剂中透析，以实现完全的缓冲剂交换。更换缓冲剂后，将溶液浓缩至目标泰派鲁单抗浓度，并在必要时使用稀释缓冲剂进行稀释。除非另有说明，否则稀释缓冲剂与DF缓冲剂相同。浓缩(或浓缩和稀释)后，添加表面活性剂。

表6和表7中分别显示了研究中使用的每种配制品(或缓冲剂，如果注明)的目标和最终(测定)组成。

表6

目标pH和赋形剂浓度以进行稳健性研究

^a表中列出的赋形剂水平表示渗滤稀释缓冲剂中的赋形剂浓度。

^b非运输中心点配制品样品

表7

测量的pH和赋形剂浓度以进行稳健性研究

^a以％w/v和mM计的L-脯氨酸浓度是等效的。

^b非运输中心点配制品样品

通过用于评估产品质量的一系列测定法或其组合测试了配制品的储存时的稳定性。在预填充注射器(PFS)和小瓶上均进行了分析。比较配制品1至15，以分析蛋白质浓度、pH、乙酸盐、L-脯氨酸和PS80浓度对蛋白质的组合影响随时间的变化。进行统计分析以评估产品质量指标：SE UHPLC(HMW和主峰)、CEX-UHPLC(酸性峰、主峰和碱性峰)和rCE SDS(HC+LC)。经由尺寸排阻色谱法(SEC)和CEX测试样品，以确定配制品在多个储存时间点的稳定性。报告了每种配制品的高分子量(HMW)物质的百分比和主峰的百分比。主峰百分比反映了在指定的储存时间后剩余的泰派鲁单抗(单体形式)的量。毛细管电泳-十二烷基硫酸钠(CE-SDS)用于在非还原(nrCE-SDS)或还原条件(rCE-SDS)下分离变性的蛋白质大小变体。在rCE-SDS下，测量了％重链和％轻链的总和。

基于从零开始的每个时间点的峰值百分比变化进行分析。出于稳定性，将各配制品的样品填充至容器并在约2℃-8℃至约25℃的温度下储存长达6个月(例如，1周、2周、4周、3个月、6个月)，或在40℃的温度下储存1个月。

SEC和CEX结果如图7至9所示。SEC结果报告为主峰(单体)的百分比(％)(图7A、图7B)和高分子量(HMW)物质(图8A、图8B)。CEX结果报告为主峰的百分比(％)(图9A、图9B)。rCE-SDS结果报告为重链+轻链(HC+LC)的百分比(图10A、图10B)。在2℃至8℃下储存6个月的样品仅显示微小变化。

还通过HIAC(高精度液体颗粒计数)和微流成像(MFI)测量了颗粒形成。在2℃到8℃的温度下未观察到亚可见的颗粒趋势，并且确定大多数颗粒与用于储存材料的主要容器有关。在任何配制品中均未观察到可见的蛋白质颗粒。

虽然研究表明在25℃下储存6个月的样品的降解对pH和乙酸盐浓度存在统计学上的显著的依赖性，但与时间导致的降解速率相比，观察到的总体变化较小。当pH、蛋白质浓度、聚山梨醇酯80的量、乙酸盐和脯氨酸各自在中心点附近变化时，药物产品配制品对配制品组成的微小变化具有稳健性。如预期的那样，当在2℃-8℃的建议储存温度下储存6个月时，这15种配制品在物理和化学上都稳定。蛋白质浓度、乙酸盐和脯氨酸浓度、pH值和聚山梨醇酯80浓度以及储存容器等参数的变化均未显示显著影响。

预计本领域技术人员能够想到如以上说明性实例中所阐述的本发明的许多修改和变化。因此，仅将权利要求书中出现的此类限制施加于本发明上。

序列表

<110> 安进公司

<120> 人抗TSLP抗体的配制品及其使用方法

<130> 32053/55238

<150> US 62/978,201

<151> 2020-02-18

<160> 14

<170> PatentIn 3.5版

<210> 1

<211> 743

<212> DNA

<213> 智人

<220>

<221> 尚未归类的特征

<223> TSLP

<220>

<221> CDS

<222> (200)..(676)

<400> 1

gcagccagaa agctctggag catcagggag actccaactt aaggcaacag catgggtgaa 60

taagggcttc ctgtggactg gcaatgagag gcaaaacctg gtgcttgagc actggcccct 120

aaggcaggcc ttacagatct cttacactcg tggtgggaag agtttagtgt gaaactgggg 180

tggaattggg tgtccacgt atg ttc cct ttt gcc tta cta tat gtt ctg tca 232

Met Phe Pro Phe Ala Leu Leu Tyr Val Leu Ser

1 5 10

gtt tct ttc agg aaa atc ttc atc tta caa ctt gta ggg ctg gtg tta 280

Val Ser Phe Arg Lys Ile Phe Ile Leu Gln Leu Val Gly Leu Val Leu

15 20 25

act tac gac ttc act aac tgt gac ttt gag aag att aaa gca gcc tat 328

Thr Tyr Asp Phe Thr Asn Cys Asp Phe Glu Lys Ile Lys Ala Ala Tyr

30 35 40

ctc agt act att tct aaa gac ctg att aca tat atg agt ggg acc aaa 376

Leu Ser Thr Ile Ser Lys Asp Leu Ile Thr Tyr Met Ser Gly Thr Lys

45 50 55

agt acc gag ttc aac aac acc gtc tct tgt agc aat cgg cca cat tgc 424

Ser Thr Glu Phe Asn Asn Thr Val Ser Cys Ser Asn Arg Pro His Cys

60 65 70 75

ctt act gaa atc cag agc cta acc ttc aat ccc acc gcc ggc tgc gcg 472

Leu Thr Glu Ile Gln Ser Leu Thr Phe Asn Pro Thr Ala Gly Cys Ala

80 85 90

tcg ctc gcc aaa gaa atg ttc gcc atg aaa act aag gct gcc tta gct 520

Ser Leu Ala Lys Glu Met Phe Ala Met Lys Thr Lys Ala Ala Leu Ala

95 100 105

atc tgg tgc cca ggc tat tcg gaa act cag ata aat gct act cag gca 568

Ile Trp Cys Pro Gly Tyr Ser Glu Thr Gln Ile Asn Ala Thr Gln Ala

110 115 120

atg aag aag agg aga aaa agg aaa gtc aca acc aat aaa tgt ctg gaa 616

Met Lys Lys Arg Arg Lys Arg Lys Val Thr Thr Asn Lys Cys Leu Glu

125 130 135

caa gtg tca caa tta caa gga ttg tgg cgt cgc ttc aat cga cct tta 664

Gln Val Ser Gln Leu Gln Gly Leu Trp Arg Arg Phe Asn Arg Pro Leu

140 145 150 155

ctg aaa caa cag taaaccatct ttattatggt catatttcac agcccaaaat 716

Leu Lys Gln Gln

aaatcatctt tattaagtaa aaaaaaa 743

<210> 2

<211> 159

<212> PRT

<213> 智人

<400> 2

Met Phe Pro Phe Ala Leu Leu Tyr Val Leu Ser Val Ser Phe Arg Lys

1 5 10 15

Ile Phe Ile Leu Gln Leu Val Gly Leu Val Leu Thr Tyr Asp Phe Thr

20 25 30

Asn Cys Asp Phe Glu Lys Ile Lys Ala Ala Tyr Leu Ser Thr Ile Ser

35 40 45

Lys Asp Leu Ile Thr Tyr Met Ser Gly Thr Lys Ser Thr Glu Phe Asn

50 55 60

Asn Thr Val Ser Cys Ser Asn Arg Pro His Cys Leu Thr Glu Ile Gln

65 70 75 80

Ser Leu Thr Phe Asn Pro Thr Ala Gly Cys Ala Ser Leu Ala Lys Glu

85 90 95

Met Phe Ala Met Lys Thr Lys Ala Ala Leu Ala Ile Trp Cys Pro Gly

100 105 110

Tyr Ser Glu Thr Gln Ile Asn Ala Thr Gln Ala Met Lys Lys Arg Arg

115 120 125

Lys Arg Lys Val Thr Thr Asn Lys Cys Leu Glu Gln Val Ser Gln Leu

130 135 140

Gln Gly Leu Trp Arg Arg Phe Asn Arg Pro Leu Leu Lys Gln Gln

145 150 155

<210> 3

<211> 11

<212> PRT

<213> 智人

<220>

<221> 尚未归类的特征

<223> LCDR1

<400> 3

Gly Gly Asn Asn Leu Gly Ser Lys Ser Val His

1 5 10

<210> 4

<211> 7

<212> PRT

<213> 智人

<220>

<221> 尚未归类的特征

<223> LCDR2

<400> 4

Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser

1 5

<210> 5

<211> 11

<212> PRT

<213> 智人

<220>

<221> 尚未归类的特征

<223> LCDR3

<400> 5

Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp His Val Val

1 5 10

<210> 6

<211> 5

<212> PRT

<213> 智人

<220>

<221> 尚未归类的特征

<223> HCDR1

<400> 6

Thr Tyr Gly Met His

1 5

<210> 7

<211> 17

<212> PRT

<213> 智人

<220>

<221> 尚未归类的特征

<223> HCDR2

<400> 7

Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys His Tyr Ala Asp Ser Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 8

<211> 13

<212> PRT

<213> 智人

<220>

<221> 尚未归类的特征

<223> HCDR3

<400> 8

Ala Pro Gln Trp Glu Leu Val His Glu Ala Phe Asp Ile

1 5 10

<210> 9

<211> 366

<212> DNA

<213> 智人

<220>

<221> 尚未归类的特征

<223> 重链VH

<400> 9

cagatgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60

tcctgtgcag cgtctggatt caccttcaga acctatggca tgcactgggt ccgccaggct 120

ccaggcaagg gactggagtg ggtggcagtt atatggtatg atggaagtaa taaacactat 180

gcagactccg tgaagggccg attcaccatc accagagaca attccaagaa cactctgaat 240

ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgtgt attactgtgc gagagcccct 300

cagtgggagc tagttcatga agcttttgat atctggggcc aagggacaat ggtcaccgtc 360

tcttca 366

<210> 10

<211> 122

<212> PRT

<213> 智人

<220>

<221> 尚未归类的特征

<223> 重链VH

<400> 10

Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Thr Tyr

20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys His Tyr Ala Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Asn

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Pro Gln Trp Glu Leu Val His Glu Ala Phe Asp Ile Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 11

<211> 325

<212> DNA

<213> 智人

<220>

<221> 尚未归类的特征

<223> 轻链VL

<400> 11

tcctatgtgc tgactcagcc accctcggtg tcagtggccc caggacagac ggccaggatt 60

acctgtgggg gaaacaacct tggaagtaaa agtgtgcact ggtaccagca gaagccaggc 120

caggcccctg tgctggtcgt ctatgatgat agcgaccggc cctcatggat ccctgagcga 180

ttctctggct ccaactctgg gaacacggcc accctgacca tcagcagggg cgaagccggg 240

gatgaggccg actattactg tcaggtgtgg gatagtagta gtgatcatgt ggtatttcgg 300

cggagggacc aagctgaccg tccta 325

<210> 12

<211> 108

<212> PRT

<213> 智人

<220>

<221> 尚未归类的特征

<223> 轻链VL

<400> 12

Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Gln

1 5 10 15

Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Leu Gly Ser Lys Ser Val

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr

35 40 45

Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser Trp Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Gly Glu Ala Gly

65 70 75 80

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp His

85 90 95

Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105

<210> 13

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成肽

<400> 13

Asp Tyr Trp Met His

1 5

<210> 14

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成肽

<400> 14

His Ile Lys Ser Lys Thr Asp Ala Gly Thr Thr Asp Tyr Ala Ala Pro

1 5 10 15

Val Lys Gly

Claims (93)

1.一种组合物，该组合物包含大于约100mg/mL的抗TSLP抗体、表面活性剂、脯氨酸、和缓冲剂，

其中该抗TSLP抗体包含

(A)轻链可变结构域，该轻链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列的轻链CDR1序列；(ii)含有SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列的轻链CDR2序列；和(iii)含有SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列的轻链CDR3序列；以及

(B)重链可变结构域，该重链可变结构域包含：(i)含有SEQ ID NO:6中所示的氨基酸序列的重链CDR1序列；(ii)含有SEQ ID NO:7中所示的氨基酸序列的重链CDR2序列，和(iii)含有SEQ ID NO:8中所示的氨基酸序列的重链CDR3序列。

2.如权利要求1所述的组合物，其中该抗TSLP抗体包含：

(A)轻链可变结构域，该轻链可变结构域选自由以下组成的组：

i.与SEQ ID NO:12具有至少80％同一性的氨基酸序列；

ii.由与SEQ ID NO:11具有至少80％同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；或

iii.由在中等严格条件下与由SEQ ID NO:11组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；或者

(B)重链可变结构域，该重链可变结构域选自由以下组成的组：

i.与SEQ ID NO:10具有至少80％同一性的氨基酸序列；

ii.由与SEQ ID NO:9具有至少80％同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；或

iii.由在中等严格条件下与由SEQ ID NO:9组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；或者

(C)(A)的轻链可变结构域和(B)的重链可变结构域。

3.如权利要求1或2所述的组合物，其中该抗TSLP抗体是IgG2抗体。

4.如权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中该抗TSLP抗体包含含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的重链、含有SEQ ID NO:14的氨基酸序列的轻链、或者含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的重链、和含有SEQ ID NO:14的氨基酸序列的轻链。

5.如权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中该抗TSLP抗体与SEQ ID NO:2的氨基酸29-159中所示的TSLP多肽特异性结合。

6.如权利要求1至5中任一项所述的组合物，其中该抗TSLP抗体的两个结合位点具有与TSLP的相同的结合。

7.如权利要求1至6中任一项所述的组合物，其中该抗TSLP抗体以小于约200mg/mL的浓度存在于该组合物中。

8.如权利要求7所述的组合物，其中该抗TSLP抗体以小于约150mg/mL的浓度存在于该组合物中。

9.如权利要求8所述的组合物，其中该抗TSLP抗体以约110mg/mL至约140mg/mL的浓度存在于该组合物中。

10.如权利要求9所述的组合物，其中该抗TSLP抗体以约110mg/mL±10％的浓度存在于该组合物中。

11.如权利要求9所述的组合物，其中该抗TSLP抗体以约140mg/mL±10％的浓度存在于该组合物中。

12.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该表面活性剂是两亲性的和非离子性的。

13.如权利要求12所述的组合物，其中该表面活性剂是聚山梨醇酯。

14.如权利要求13所述的组合物，其中该表面活性剂是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80、或其混合物。

15.如权利要求12至14中任一项所述的组合物，该组合物包含浓度小于或约0.005％(w/v)至约0.015％(w/v)的表面活性剂。

16.如权利要求15所述的组合物，该组合物包含约0.010％(w/v)±0.0025％(w/v)表面活性剂。

17.如权利要求15所述的组合物，该组合物包含约0.005％(w/v)、0.010％(w/v)、或0.015％(w/v)表面活性剂。

18.如前述权利要求中任一项所述的组合物，该组合物包含小于约3.0％(w/v)脯氨酸。

19.如前述权利要求中任一项所述的组合物，该组合物包含约2.4％(w/v)至约2.8％(w/v)脯氨酸或约2.5％(w/v)至约2.8％(w/v)脯氨酸。

20.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该脯氨酸是L-脯氨酸。

21.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中脯氨酸是存在于该组合物中的唯一氨基酸。

22.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该缓冲剂选自由以下组成的组：琥珀酸盐、谷氨酸盐、组氨酸、和乙酸盐。

23.如权利要求22所述的组合物，其中该缓冲剂是乙酸盐。

24.如前述权利要求中任一项所述的组合物，该组合物包含约10mM至约30mM缓冲剂。

25.如权利要求24所述的组合物，该组合物包含约20mM至约28mM缓冲剂，任选地，约23mM至约28mM或约24mM至约28mM。

26.如权利要求25所述的组合物，该组合物包含约24mM至约26mM缓冲剂。

27.如前述权利要求中任一项所述的组合物，该组合物包含不超过0.001％(w/v)的糖或柠檬酸盐，任选地，其中该糖是二糖，例如海藻糖和蔗糖。

28.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该组合物是液体。

29.如权利要求28所述的组合物，其中pH小于约6.0，任选地，小于约5.5。

30.如权利要求29所述的组合物，其中该pH是约4.5至约5.5。

31.如权利要求30所述的组合物，其中该pH是约4.8至约5.4。

32.如权利要求31所述的组合物，其中该pH是约4.9、5.2、或5.4。

33.如权利要求28至32中任一项所述的组合物，该组合物的特征在于相对于不包含脯氨酸的液体组合物，粘度降低。

34.如权利要求28至33中任一项所述的组合物，该组合物的特征在于当该抗TSLP抗体的浓度小于155mg/mL时，在约20℃至约25℃下的粘度小于约24cP，任选地，当该抗TSLP抗体的浓度是约110mg/mL时，粘度是约6cP，或者当该抗TSLP抗体的浓度是约140mg/mL时，粘度是约15cP。

35.如权利要求29所述的组合物，该组合物的特征在于粘度是约5cP至约20cP，任选地约15cP。

36.如权利要求28至35中任一项所述的组合物，其中该组合物是等渗的或者具有处于约200mOsm/kg至约500mOsm/kg、或约225mOsm/kg至约400mOsm/kg、或约250mOsm/kg至约350mOsm/kg范围内的渗透压。

37.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中如通过尺寸排阻色谱法(SEC)确定的，在2℃至8℃下储存约24个月至约36个月后，小于5％的该抗体被降解，任选地，其中在2℃至8℃下储存24个月或36个月后，小于2％的该抗体被降解。

38.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中如通过SEC确定的，在约25℃下储存至少2周之后(任选地，至少1个月之后、至少2个月之后、至少3个月之后、至少4个月之后、至少5个月之后或至少6个月之后)，小于5％的该抗体被降解。

39.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中如通过SEC确定的，在2℃至8℃下储存约24个月至约36个月后，随后在约25℃下储存至少2周或至少1个月或至少2个月后，小于5％的该抗体被降解。

40.一种组合物，该组合物包含约110mg/mL至约140mg/mL泰派鲁单抗、约0.01％(w/v)±0.005％(w/v)聚山梨醇酯80、约2.4％(w/v)至约2.8％(w/v)L-脯氨酸、以及约20mM至约28mM乙酸盐，其中该组合物的粘度小于约20cP，并且pH小于约5.5。

41.如权利要求40所述的组合物，其中该pH是5.2，任选地，其中在约20℃至约25℃下的粘度是约15cP。

42.一种组合物，该组合物包含约110mg/mL的抗TSLP抗体、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80、约2.4％(w/v)至约2.8％(w/v)L-脯氨酸、以及约20mM至约28mM乙酸盐，其中该组合物的pH是约5.2。

43.如权利要求42所述的组合物，该组合物包含约22mM至约26mM。

44.如权利要求43所述的组合物，该组合物包含约24mM至约26mM乙酸盐。

45.如权利要求42至44中任一项所述的组合物，该组合物包含110mg/mL抗TSLP抗体、24mM乙酸盐、2.5％(w/v)L-脯氨酸、和0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，pH为5.2。

46.如权利要求1所述的组合物，该组合物包含110mg/mL抗TSLP抗体、10mM乙酸盐、3.0％(w/v)L-脯氨酸、和0.01％(w/v)聚山梨醇酯80，pH为5.2。

47.一种组合物，该组合物包含约140mg/mL的抗TSLP抗体、0.01％(w/v)聚山梨醇酯80、约2.5％(w/v)至约2.8％(w/v)L-脯氨酸、以及约20mM至约28mM乙酸盐，其中该组合物的pH是约5.2。

48.如权利要求47所述的组合物，该组合物包含约25mM至约26mM乙酸盐。

49.一种制品，该制品包含如前述权利要求中任一项所述的组合物，该制品任选地包含约0.5mL至约5mL的组合物。

50.如权利要求49所述的制品，该制品包含约1mL至约3mL的组合物。

51.一种预填充注射器，该预填充注射器包含如前述权利要求中任一项所述的组合物，该预填充注射器包含约0.5mL至约5mL的组合物。

52.如权利要求51所述的预填充注射器，该预填充注射器包含约1mL至约3mL的组合物。

53.一种小瓶，该小瓶包含如前述权利要求中任一项所述的组合物，该小瓶任选地包含约0.5mL至约5mL的组合物。

54.如权利要求53所述的小瓶，该小瓶包含约1mL至约3mL的组合物。

55.一种自动注射器，该自动注射器包含如前述权利要求中任一项所述的组合物，该自动注射器包含约0.5mL至约5mL。

56.如权利要求55所述的自动注射器，该自动注射器包含约1mL至约3mL的组合物。

57.如权利要求55或56所述的自动注射器，其中该自动注射器是Ypsomed

58.如权利要求55至57中任一项所述的自动注射器，其中该自动注射器披露于WO2018/226565、WO 2019/094138、WO 2019/178151、WO 20120/072577、WO 2020/081479、WO2020/081480、PCT/US 20/70590、PCT/US 20/70591、PCT/US 20/53180、PCT/US 20/53179、PCT/US 20/53178、或PCT/US 20/53176。

59.一种用于治疗受试者的炎性疾病的方法，该方法包括向该受试者施用治疗有效量的如前述权利要求中任一项所述的组合物。

60.如权利要求59所述的方法，其中该炎性疾病选自由以下组成的组：哮喘、特应性皮炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、嗜酸细胞性食管炎(EoE)、鼻息肉、慢性自发性荨麻疹、Ig驱动的疾病、IgA肾病、狼疮性肾炎、嗜酸细胞性胃炎、无鼻息肉的慢性鼻窦炎和特发性肺纤维化(IPF)。

61.如权利要求60所述的方法，其中该炎性疾病是哮喘。

62.如权利要求59或60所述的方法，该方法包括以每2周的间隔施用该组合物。

63.如权利要求59或60所述的方法，该方法包括每4周施用该组合物。

64.如权利要求59至63中任一项所述的方法，其中将该组合物施用至少4个月、6个月、9个月、1年或更长时间的时期。

65.如权利要求59至64中任一项所述的方法，其中皮下施用该组合物。

66.如权利要求61至65中任一项所述的方法，其中该哮喘是重度哮喘。

67.如权利要求61至66中任一项所述的方法，其中该哮喘是嗜酸细胞性哮喘或非嗜酸细胞性哮喘。

68.如权利要求61至67中任一项所述的方法，其中该哮喘是低嗜酸细胞哮喘。

69.如权利要求59至68中任一项所述的方法，其中该受试者是成年人。

70.如权利要求59至68中任一项所述的方法，其中该受试者是儿童或青少年。

71.如权利要求59至70中任一项所述的方法，其中该施用减少该受试者的血液、痰液、支气管肺泡液或肺中的嗜酸细胞。

72.如权利要求59至71中任一项所述的方法，其中该施用将该受试者中的细胞计数自Th2高群体变成Th2低群体。

73.如权利要求59至72中任一项所述的方法，其中该施用改善受试者中选自由以下组成的组的一个或多个哮喘量度：用力呼气量(FEV)、FEV1可逆性、用力肺活量(FCV)、FeNO、哮喘控制问卷-6评分和AQLQ(S)+12评分。

74.如权利要求59至73中任一项所述的方法，其中如通过哮喘症状日志测量的，该施用改善哮喘的一种或多种症状。

75.一种制备稳定的液体抗体组合物的方法，该稳定的液体抗体组合物具有小于约24cP的粘度并且包含小于约200mg/mL的抗TSLP抗体、表面活性剂和缓冲剂，所述方法包括：(i)将包含以第一浓度的抗体、乙酸盐和脯氨酸的第一溶液与包含乙酸盐和脯氨酸的缓冲剂组合，以获得包含约110mg/mL至约140mg/mL泰派鲁单抗、脯氨酸和乙酸盐的溶液，以及(ii)添加表面活性剂以达到约0.01％(w/v)±0.005％(w/v)表面活性剂的最终浓度。

76.如权利要求75所述的方法，其中该稳定的液体抗体组合物包含约140mg/mL的抗TSLP抗体。

77.如权利要求75或76所述的方法，其中相对于不含脯氨酸的稳定的液体组合物，该含脯氨酸的稳定的液体组合物的粘度减少。

78.如权利要求75至77中任一项所述的方法，其中该稳定的液体组合物的粘度小于约20cP。

79.如权利要求75至78中任一项所述的方法，其中将包含约200mM至约300mM脯氨酸的溶液与第一溶液组合。

80.如权利要求75至79中任一项所述的方法，其中该脯氨酸是L-脯氨酸。

81.如权利要求75至80中任一项所述的方法，其中该表面活性剂是聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。

82.如权利要求81所述的方法，其中该表面活性剂是聚山梨醇酯80。

83.如权利要求75至82中任一项所述的方法，其中该缓冲剂由冰乙酸制成。

84.如权利要求75至83中任一项所述的方法，其中该缓冲剂组合物包含约1mM至约30mM乙酸盐，任选地，约5mM至约15mM乙酸盐。

85.如权利要求75至84中任一项所述的方法，其中该稳定的液体抗体组合物的pH是约5.2。

86.如权利要求75至85中任一项所述的方法，其中该抗TSLP抗体包含：

(A)轻链可变结构域，该轻链可变结构域选自由以下组成的组：

iv.与SEQ ID NO:12具有至少80％同一性的氨基酸序列；

v.由与SEQ ID NO:11具有至少80％同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；或

vi.由在中等严格条件下与由SEQ ID NO:11组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；或者

(B)重链可变结构域，该重链可变结构域选自由以下组成的组：

iv.与SEQ ID NO:10具有至少80％同一性的氨基酸序列；

v.由与SEQ ID NO:9具有至少80％同一性的多核苷酸序列编码的氨基酸序列；或者

vi.由在中等严格条件下与由SEQ ID NO:9组成的多核苷酸互补序列杂交的多核苷酸编码的氨基酸序列；或者

(C)(A)的轻链可变结构域和(B)的重链可变结构域。

87.如权利要求86所述的方法，其中该抗TSLP抗体是IgG2抗体。

88.如权利要求86或87所述的方法，其中该抗TSLP抗体包含含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的重链、含有SEQ ID NO:14的氨基酸序列的轻链、或者含有SEQ ID NO:13的氨基酸序列的重链、和含有SEQ ID NO:14的氨基酸序列的轻链。

89.一种制备稳定的液体抗体组合物的方法，该稳定的液体抗体组合物具有小于约24cP的粘度并且包含小于约200mg/mL的抗TSLP抗体、表面活性剂和缓冲剂，所述方法包括用包含约10mM至约20mM乙酸盐和约2.7％(w/v)至约3.3％(w/v)，pH约4.9至约5.5的缓冲剂配制抗TSLP抗体，以及(ii)添加表面活性剂以达到约0.005％(w/v)±0.015％(w/v)表面活性剂的最终浓度。

90.如权利要求89所述的方法，其中该缓冲剂使用冰乙酸制成。

91.如权利要求89或90所述的方法，其中将缓冲剂使用氢氧化钠滴定至pH 5.2。

92.一种用于注射的溶液，该溶液(i)包含约110mg/mL至约115mg/mL泰派鲁单抗、约24mM至约26mM使用冰乙酸制成的乙酸盐、约2.4％至约2.6％(w/v)L-脯氨酸、约0.01％聚山梨醇酯80、氢氧化钠、和注射用水，(ii)具有约5.2的pH和约3年的保质期。

93.一种预填充注射器，该预填充注射器包含约1.91mL的如权利要求92所述的稳定的液体抗体组合物。

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