CN115124416A - 从文冠果中提取神经酸的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及神经酸制备领域，提出了从文冠果中提取神经酸的方法，包括以下步骤：S1、从文冠果种仁中，得到文冠果油；S2、将文冠果油与异丙醇、三乙胺混合搅拌，室温静置，水洗至澄清，调节pH至3～5，得到混合液；S3、向所述混合液中加入萃取剂进行萃取，水洗至中性，蒸馏，得到脂肪酸混合液，干燥得到神经酸粗品；S4、将神经酸粗品用石油醚和氯仿溶解后，加入0.1～0.5wt％活性炭搅拌，加热回流，过滤并浓缩，得到浓缩液；S5、将所述浓缩液调节pH至4～5，结晶纯化，过滤，干燥得到神经酸。通过上述技术方案，解决了现有技术中神经酸的生产成本高、操作复杂和提取纯度低的问题。
Description
技术领域
本发明涉及神经酸制备领域，具体的，涉及从文冠果中提取神经酸的方法。
背景技术
神经酸又叫顺-15-二十四碳烯酸，属于一种单不饱和脂肪酸，首先被发现于哺乳动物神经组织中，在神经递质与受体结合过程中发挥积极作用，使大脑信息及时传递，预防大脑老化和老年痴呆，同时可以改善大脑的功能，增强记忆力。缺乏神经酸将会引起脑萎缩、神经衰弱和记忆力减退等疾病。因此，神经酸的提取与应用具有十分重要的意义与价值。
目前商品化的神经酸大多从深海鲨鱼油中提取，由于其生产成本高，来源较少，导致价格昂贵。化学合成神经酸路线及工艺复杂、得率低、无法实现工业化。对此，各国科学家展开了广泛的研究，发现在一些植物中也存在神经酸，而植物来源更广泛，提取成本低。由于文冠果具有适应性强，耐干旱、贫瘠，根系发达，萌蘖力强，生长快、结实早、产量高、寿命长等优点，因此具有很大的开发价值。
发明内容
本发明提出从文冠果中提取神经酸的方法，解决了相关技术中神经酸的生产成本高、操作复杂和提取纯度低的问题。
本发明的技术方案如下：
从文冠果中提取神经酸的方法，包括以下步骤：
S1、从文冠果种仁中，得到文冠果油；
S2、将文冠果油与异丙醇、三乙胺混合搅拌，室温静置，水洗至澄清，调节pH至3～5，得到混合液；
S3、向所述混合液中加入萃取剂进行萃取，水洗至中性，蒸馏，得到脂肪酸混合液，干燥得到神经酸粗品；
S4、将神经酸粗品用石油醚和氯仿溶解后，加入0.1～0.5wt％活性炭搅拌，加热回流，过滤并浓缩，得到浓缩液；
S5、将所述浓缩液调节pH至4～5，结晶纯化，过滤，干燥得到神经酸。
作为进一步的技术方案，所述步骤S2中文冠果油与异丙醇、三乙胺的质量比为100:40～60:0.5～1.5。
作为进一步的技术方案，所述步骤S3中，混合液与萃取剂的体积比为1:3～5。
作为进一步的技术方案，所述步骤S3中，萃取剂是由无水乙醇与石油醚以体积比为1:10～30混合而成。
作为进一步的技术方案，所述步骤S4中神经酸粗品、石油醚与氯仿的质量比为1:1:2。
作为进一步的技术方案，所述步骤S4中加热回流温度为70～90℃，回流时间2～3h。
作为进一步的技术方案，所述步骤S4中浓缩至神经酸粗品质量的1.5倍。
作为进一步的技术方案，所述步骤S3、步骤S5中均采用醋酸、盐酸、硫酸或磷酸中的一种调节pH。
作为进一步的技术方案，所述步骤S5中结晶时间为2～3h，结晶温度为0～5℃，结晶3～5次。
作为进一步的技术方案，所述的文冠果油，由以下方法制得：
S1、将文冠果种仁干燥后，粉碎，得到文冠果粉末；
S2、将所述文冠果粉末中加入乙酸乙酯，调节pH至10-12进行提取，得到提取液；
S3、进行抽滤、减压浓缩，并去除乙酸乙酯，得到文冠果油。
本发明的工作原理及有益效果为：
1、本发明通过文冠果油与异丙醇、三乙胺混合搅拌，来提高所提取的神经酸纯度，同时控制文冠果油与异丙醇、三乙胺的质量比为100:40～60:0.5～1.5，当文冠果油与异丙醇、三乙胺的质量比超出本发明限定的范围，提取的神经酸纯度均降低。
2、本发明通过用无水乙醇与石油醚混合后，作为萃取剂，提高了从文冠果油中提取的神经酸的纯度，并且无水乙醇与石油醚的体积比要控制在1:10～30之内，当增加石油醚的比例或者增大无水乙醇的比例时，都会在一定程度上降低神经酸的纯度。
3、本发明一方面通过将神经酸粗品用石油醚和氯仿溶解后，并且控制神经酸粗品、石油醚与氯仿的质量比为1:1:2，另一方面通过控制活性炭的添加量和加热回流温度及回流时间，使提取的神经酸纯度达到了98％以上。
4、本发明通过控制冷冻结晶的结晶时间为2～3h、结晶温度为0～5℃，结晶3～5次，避免其它不饱和脂肪酸的析出，提高神经酸的纯度，当结晶条件超出本发明限定的结晶范围内，提取的神经酸纯度均降低。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都涉及本发明保护的范围。
将文冠果种仁干燥后，粉碎，得到文冠果粉末；将所述文冠果粉末中加入乙酸乙酯，调节pH至10～12进行提取，得到提取液；进行抽滤、减压浓缩，并去除乙酸乙酯，得到文冠果油。
以下全部实施例及对比例均是采用所述的文冠果油，
以下全部实施例及对比例均是通过GC-MS分析，鉴定出神经酸的纯度。
实施例1
S1、将100份文冠果油与40份异丙醇、0.5份三乙胺混合搅拌，室温静置60min，水洗至澄清，用醋酸调节pH至3，得到混合液；
S2、向所述混合液中加入萃取剂进行萃取，水洗至中性，蒸馏，得到脂肪酸混合液，干燥得到神经酸粗品，所述混合液与萃取剂的体积比为1:3，萃取剂中无水乙醇与石油醚的体积比为1:10；
S3、将10份神经酸粗品用10份石油醚和20份氯仿溶解后，加入0.1wt％活性炭搅拌，在70℃下加热回流2h，过滤并浓缩至神经酸粗品质量的1.5倍，得到浓缩液；
S4、将所述浓缩液用醋酸调节pH至4，在0℃下结晶2h，反复结晶3次后，过滤，干燥得到神经酸。
本实施例中，提取的神经酸纯度为98.75％。
实施例2
S1、将100份文冠果油与45份异丙醇、0.5份三乙胺混合搅拌，室温静置45min，水洗至澄清，用醋酸调节pH至4，得到混合液；
S2、向所述混合液中加入萃取剂进行萃取，水洗至中性，蒸馏，得到脂肪酸混合液，干燥得到神经酸粗品，所述混合液与萃取剂的体积比为1:4，萃取剂中无水乙醇与石油醚的体积比为1:15；
S3、将10份神经酸粗品用10份石油醚和20份氯仿溶解后，加入0.2wt％活性炭搅拌，在75℃下加热回流2h，过滤并浓缩至神经酸粗品质量的1.5倍，得到浓缩液；
S4、将所述浓缩液用盐酸调节pH至4，在2℃下结晶2.5h，反复结晶4次后，过滤，干燥得到神经酸。
本实施例中，提取的神经酸纯度为98.13％。
实施例3
S1、将100份文冠果油与50份异丙醇、1份三乙胺混合搅拌，室温静置50min，水洗至澄清，用硫酸调节pH至5，得到混合液；
S2、向所述混合液中加入萃取剂进行萃取，水洗至中性，蒸馏，得到脂肪酸混合液，干燥得到神经酸粗品，所述混合液与萃取剂的体积比为1:4，萃取剂中无水乙醇与石油醚的体积比为1:20；
S3、将10份神经酸粗品用10份石油醚和20份氯仿溶解后，加入0.3wt％活性炭搅拌，在80℃下加热回流2h，过滤并浓缩至神经酸粗品质量的1.5倍，得到浓缩液；
S4、将所述浓缩液用磷酸调节pH至5，在5℃下结晶3h，反复结晶5次后，过滤，干燥得到神经酸。
本实施例中，提取的神经酸纯度为98.38％。
实施例4
S1、将100份文冠果油与60份异丙醇、1.5份三乙胺混合搅拌，室温静置55min，水洗至澄清，用盐酸调节pH至4，得到混合液；
S2、向所述混合液中加入萃取剂进行萃取，水洗至中性，蒸馏，得到脂肪酸混合液，干燥得到神经酸粗品，所述混合液与萃取剂的体积比为1:5，萃取剂中无水乙醇与石油醚的体积比为1:30；
S3、将10份神经酸粗品用10份石油醚和20份氯仿溶解后，加入0.4wt％活性炭搅拌，在85℃下加热回流2.5h，过滤并浓缩至神经酸粗品质量的1.5倍，得到浓缩液；
S4、将所述浓缩液用醋酸调节pH至5，在5℃下结晶2.5h，反复结晶4次后，过滤，干燥得到神经酸。
本实施例中，提取的神经酸纯度为98.52％。
实施例5
S1、将100份文冠果油与60份异丙醇、1.5份三乙胺混合搅拌，室温静置60min，水洗至澄清，用硫酸调节pH至4，得到混合液；
S2、向所述混合液中加入萃取剂进行萃取，水洗至中性，蒸馏，得到脂肪酸混合液，干燥得到神经酸粗品，所述混合液与萃取剂的体积比为1:5，萃取剂中无水乙醇与石油醚的体积比为1:30；
S3、将10份神经酸粗品用10份石油醚和20份氯仿溶解后，加入0.5wt％活性炭搅拌，在90℃下加热回流3h，过滤并浓缩至神经酸粗品质量的1.5倍，得到浓缩液；
S4、将所述浓缩液用磷酸调节pH至5，在5℃下结晶3h，反复结晶5次后，过滤，干燥得到神经酸。
本实施例中，提取的神经酸纯度为98.42％。
对比例1
与实施例1的区别仅在于，将实施例1中的三乙胺替换为等量的氢氧化钠，提取的神经酸纯度为96.12％。
对比例2
与实施例1的区别仅在于，将实施例1中的异丙醇替换为等量的乙醇，提取的神经酸纯度为96.65％。
对比例3
与实施例1的区别仅在于，步骤S2中萃取剂是无水乙醇，提取的神经酸纯度为95.19％。
对比例4
与实施例1的区别仅在于，步骤S2中萃取剂是石油醚，提取的神经酸纯度为95.88％。
对比例5
与实施例1的区别仅在于，步骤S3中的石油醚替换为等量乙醇、氯仿替换为等量的乙酸乙酯，提取的神经酸纯度为97.18％。
对比例6
与实施例1的区别仅在于，步骤S3中的石油醚和氯仿替换为等量的乙醇，提取的神经酸纯度为96.95％。
对比例7
与实施例1的区别仅在于，活性炭的加入量为0.6wt％，提取的神经酸纯度为97.05％。
本发明的实施例1是上述实施例中得到神经酸纯度最佳的实施例，对比例为发明人在实验探索过程中的一些较差案例的列举。其中对比例1采用氢氧化钠替代三乙胺，造成神经酸纯度降低，提取的神经酸纯度仅为96.12％，对比例2采用乙醇替代异丙醇，提取的神经酸纯度为96.65％，对比例3和对比例4分别将步骤S2中萃取剂替换为无水乙醇和石油醚，提取的神经酸品质较差，对比例5将石油醚和氯仿，替换为乙醇和乙酸乙酯，对比例6将石油醚和氯仿替换为乙醇，提取的神经酸纯度降低，对比例6没有控制好活性炭的添加量，导致所提取的神经酸纯度为97.05％。
以上仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.从文冠果中提取神经酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、从文冠果种仁中，得到文冠果油；
S2、将文冠果油与异丙醇、三乙胺混合搅拌，室温静置，水洗至澄清，调节pH至3～5，得到混合液；
S3、向所述混合液中加入萃取剂进行萃取，水洗至中性，蒸馏，得到脂肪酸混合液，干燥得到神经酸粗品；
S4、将神经酸粗品用石油醚和氯仿溶解后，加入0.1～0.5wt％活性炭搅拌，加热回流，过滤并浓缩，得到浓缩液；
S5、将所述浓缩液调节pH至4～5，结晶纯化，过滤，干燥得到神经酸。
2.根据权利要求1所述的从文冠果中提取神经酸的方法，其特征在于，所述步骤S2中文冠果油与异丙醇、三乙胺的质量比为100:40～60:0.5～1.5。
3.根据权利要求1所述的从文冠果中提取神经酸的方法，其特征在于，所述步骤S3中，混合液与萃取剂的体积比为1:3～5。
4.根据权利要求1所述的从文冠果中提取神经酸的方法，其特征在于，所述步骤S3中，萃取剂是由无水乙醇与石油醚以体积比为1:10～30混合而成。
5.根据权利要求1所述的从文冠果中提取神经酸的方法，其特征在于，所述步骤S4中神经酸粗品、石油醚与氯仿的质量比为1:1:2。
6.根据权利要求1所述的从文冠果中提取神经酸的方法，其特征在于，所述步骤S4中加热回流温度为70～90℃，回流时间2～3h。
7.根据权利要求1所述的从文冠果中提取神经酸的方法，其特征在于，所述步骤S4中浓缩至神经酸粗品质量的1.5倍。
8.根据权利要求1所述的从文冠果中提取神经酸的方法，其特征在于，所述步骤S3、步骤S5中均采用醋酸、盐酸、硫酸或磷酸中的一种调节pH。
9.根据权利要求1所述的从文冠果中提取神经酸的方法，其特征在于，所述步骤S5中结晶时间为2～3h，结晶温度为0～5℃，结晶3～5次。
10.根据权利要求1所述的从文冠果中提取神经酸的方法，其特征在于，所述的文冠果油，由以下方法制得：
S1、将文冠果种仁干燥后，粉碎，得到文冠果粉末；
S2、将所述文冠果粉末中加入乙酸乙酯，调节pH至10～12进行提取，得到提取液；
S3、进行抽滤、减压浓缩，并去除乙酸乙酯，得到文冠果油。
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