CN115120591A - 一种peg化喜树碱长效缓释凝胶 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种PEG化喜树碱衍生物，具有如下结构：

Description

一种PEG化喜树碱长效缓释凝胶
技术领域
本发明属于医药化工领域，具体涉及一种PEG化喜树碱衍生物及其与多氨基化合物交联形成的长效缓释凝胶。
背景技术
喜树碱由1966年美国的Monroe E.Wall博士从喜树的皮中分离得到，其在抗肿瘤活性上的优异表现引起了人们的广泛关注。它可以选择性抑制拓扑异构酶Ⅰ，与TopoⅠ-DNA形成的复合物结合，稳定此复合物，从而使断裂的DNA链不能重新接合，阻止DNA复制及RNA合成，为细胞周期S期特异性药物。另外，它还能直接破坏DNA结构。实验证明，喜树碱对多种动物肿瘤有抑制作用，与常用抗肿瘤药物无交叉耐药。但是，其分子结构中喹琳环上氮的特殊碱性导致其水溶性差，不能直接用于人体的非肠道给药。同时由于喜树碱副作用大，体内半衰期短，体内残留时间长等缺点，使得其应用受到一定的限制。
与以往的常规剂型如片剂、胶囊、注射剂相比，缓释、控释制剂能够减少给药次数，改善患者的顺应性。尤其针对的是半衰期短的或者需要频繁给药的药物，可以减少服药次数，使药物浓度平稳，避免峰谷现象，有利于降低药物的毒副作用，增加药物治疗的稳定性和安全性。同时可以减少用药的总量，用较少的剂量达到更好的效果。
现有技术通过物理包埋或化学修饰方式，增强喜树碱的水溶性，延长消除时间，起到降低毒性提高药效的作用。
CN101352420B通过膜乳化法制备了装载羟基喜树碱的缓释微球，该专利制备的缓释微球能通过微导管直接在瘤体内注射方式给药，可实现靶向给药，降低枪击喜树碱的全身毒副作用，可以在体内存留30天左右。但其制备过程需要用到有机溶剂，对人体存在一定的刺激性。
CN106236699B介绍了“溶液喷涂”或“热熔挤出”工艺两种制备装载10-羟基喜树碱的体内植入物的制备方法，通过该方法制备植入剂能在体内缓慢释放HCPT，增强HCPT的药物作用，降低不良反应。同时植入剂能够直接与肿瘤接触，增加了肿瘤局部的药物浓度，降低了血中的药物浓度。但是该发明描述制备工艺复杂，且无法如微球药剂一样通过注射的方法植入体内，药物释放量较少，实际使用效果不理想。
CN101156854A通过将喜树碱及其衍生物组装在不同高分子层数的微胶囊中，以达成药物缓释的效果。该发明工艺简单，使用材料均为可降解材料，制备过程不存在化学反应，对人体影响较小。但该药剂在15小时左右就可以达到40％的药物释放率，药物释放太快，容易引起药物毒副作用。
相比于喜树碱药物，PEG化喜树碱注射液，可以显著提高药物的水溶性，实现体内较长时间的循坏。临床试验显示，PEG化喜树碱在体内的半衰期可以达到77小时左右(Rowinsky EK等人，J Clin Oncol 21:148–157)。然而临床实验中，仍然需要多次给药以维持足够的药物浓度，而且全身给药会给健康器官带来较大的全身毒性。通过物理包埋凝胶可实现局部给药，以提高药物在肿瘤局部的浓度来降低药物的全身毒性，然而对于小分子喜树碱药物来说，药物从凝胶中的释放速率较快，难以达到长期缓释的目的，例如喜树碱在琼脂凝胶的释放周期仅为两个小时左右(J.Liu et al./European Polymer Journal 42(2006))。因此，为了提高喜树碱药物的抗肿瘤能力，迫切需要一种能在肿瘤局部长期缓释药物的方法。
发明内容
本发明针对现有技术不足，提供了一种PEG化喜树碱衍生物以及该PEG化喜树碱衍生物与多氨基化合物原位交联形成的可注射性凝胶。可随着凝胶的降解实现药物缓慢释放，达到长期缓释药物的目的。
本发明具体技术方案如下：
一种PEG化喜树碱衍生物，具有如下结构：
Figure BDA0003779878530000021
其中n代表1～10的正整数，优选2～6的正整数。PEG为醛基封端的星形多臂聚乙二醇。
优选的，所述醛基封端的星形多臂聚乙二醇的臂数为2-8，单臂分子量1000-5000Da。
所述醛基选自芳香醛、烷基醛中的一种或几种，所述醛基与星形多臂聚乙二醇之间以酯键、醚键、酰胺键、氨酯键、亚胺键或脲键化学键连接，优选酰胺键或酯键连接。
本发明另一目的在于提供一种PEG化喜树碱缓释凝胶，由本发明所述的PEG化喜树碱衍生物和多氨基化合物原位交联而成。
优选的，所述多氨基化合物中氨基与PEG化喜树碱衍生物中醛基的摩尔比为0.4～4.4:1，更优选1～4:1；所述多氨基化合物为聚赖氨酸或聚赖氨酸与聚乙烯亚胺的混合物，聚赖氨酸与聚乙烯亚胺的摩尔比为2～30:3，更优选2～10:3。
本发明所述的PEG化喜树碱缓释凝胶，采用如下方法制备而成：将PEG化喜树碱衍生物溶解在pH4-6缓冲液中，配制溶液；将多氨基化合物溶解在pH4-10缓冲液中，配制多氨基化合物溶液；将两者混合得到PEG化喜树碱缓释凝胶。
所述PEG化喜树碱衍生物溶液的质量体积百分浓度为2-30％，优选，10～20％；所述多氨基化合物溶液质量体积百分浓度为0.5-20％，优选1-5％。
本发明另一目的在于提供本发明所述的PEG化喜树碱衍生物或PEG化喜树碱在制备抗癌缓释药物中的应用。
本发明优点：
本发明通过可降解连接键将喜树碱偶联在PEG上，同时通过PEG端基功能化进一步与多氨基化合物化学偶联，实现原位凝胶。本发明所述PEG化喜树碱凝胶具有长效缓释作用，显著减少药物突释，药物随降解而缓慢释放，周期长达一到三个月。
附图说明
图1为不同桥接链长的PEG化喜树碱凝胶的药物缓释曲线。
图2为不同取代率的PEG化喜树碱凝胶的药物缓释曲线。
图3为不同取代率的PEG化喜树碱凝胶的在37℃的溶胀曲线。
具体实施方式
以下通过实施例说明本发明的具体步骤，但不受实施例限制。在本发明中所使用的术语，除非另有说明，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。
下面结合具体实施例并参照数据进一步详细描述本发明。应理解，这些实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。在以下实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。
实施例1 CPT-OOC(CH2)2COOH的合成
Figure BDA0003779878530000031
称取喜树碱(CPT-OH，174mg)、丁二酸酐(150mg)于50mL茄瓶中，再加入1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU，0.23mL)，二氯甲烷(DCM)15mL，室温反应4h。加入盐酸水溶液猝灭反应，再加入大量二氯甲烷萃取，柱层析分离，得浅黄色粉末状固体114mg。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,)δ12.17(s,1H),8.69(s,1H),8.18(d,J＝8.5Hz,1H),8.13(d,J＝8.2Hz,1H),7.91–7.82(m,1H),7.72(t,J＝7.5Hz,1H),7.13(s,1H),5.48(s,2H),5.30(s,2H),2.84–2.67(m,2H),2.47(m,2H),2.15(q,J＝7.4Hz,2H),0.91(t,J＝7.4Hz,3H).HRMS(positive ESI)m/z found(calcd for C24H20N2O7+H+):449.1344(449.1343).HRMS(positive ESI)m/z found(calcd for C24H20N2O7-H+):447.1198(447.1198)。
实施例2 CPT-OOC(CH2)3COOH的合成
Figure BDA0003779878530000041
称取喜树碱(CPT-OH，174mg)、戊二酸酐(171mg)于50mL茄瓶中，再加入1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU，0.23mL)，二氯甲烷(DCM)15mL，室温反应4h。加入盐酸水溶液猝灭反应，再加入大量二氯甲烷萃取，柱层析分离，得浅黄色粉末状固体85mg。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,)δ12.00(s,1H),8.66(s,1H),8.16–8.08(m,2H),7.83(ddd,J＝8.4,6.8,1.5Hz,1H),7.68(ddd,J＝8.0,6.8,1.3Hz,1H),7.02(s,1H),5.46(s,2H),5.27(s,2H),2.54(t,J＝7.4Hz,2H),2.27(t,J＝7.4Hz,2H),2.15–2.08(m,2H),1.73(q,J＝7.4Hz,2H),0.88(t,J＝7.4Hz,3H).HRMS(positive ESI)m/z found(calcd for C25H22N2O7+H+):463.1499(463.1500)。
实施例3 CPT-OOC(CH2)4COOH的合成
Figure BDA0003779878530000042
称取喜树碱(CPT-OH，174mg)、己二酸(219mg)、4-二甲氨基吡啶(DMAP，183mg)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI，576mg)于50mL茄瓶中，再加入二氯甲烷(DCM)15mL，室温反应12h。加入盐酸水溶液猝灭反应，再加入大量二氯甲烷萃取，柱层析分离，得浅黄色粉末状固体165mg。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.97(s,1H),8.70(s,1H),8.19–8.12(m,2H),7.87(ddd,J＝8.4,6.9,1.5Hz,1H),7.72(ddd,J＝8.1,6.8,1.3Hz,1H),7.07(s,1H),5.49(s,2H),5.30(s,2H),2.54(d,J＝6.6Hz,2H),2.24(t,J＝6.7Hz,2H),2.16(m,2H),1.57(m,4H),0.92(t,J＝7.4Hz,3H).HRMS(positive ESI)m/z found(calcd forC26H24N2O7+H+):477.1656(477.1656)。
实施例4 CPT-OOC(CH2)5COOH的合成
Figure BDA0003779878530000051
称取喜树碱(CPT-OH，174mg)、庚二酸(240mg)、4-二甲氨基吡啶(DMAP，183mg)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI，576mg)于50mL茄瓶中，再加入二氯甲烷(DCM)15mL，室温反应12h。加入盐酸水溶液猝灭反应，再加入大量二氯甲烷萃取，柱层析分离，得浅黄色粉末状固体135mg。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.94(s,1H),8.70(s,1H),8.20–8.11(m,2H),7.86(ddd,J＝8.5,6.9,1.5Hz,1H),7.72(ddd,J＝8.1,6.8,1.2Hz,1H),7.05(s,1H),5.49(s,2H),5.31(s,2H),2.59–2.51(m,2H),2.16(tt,J＝8.8,5.4Hz,4H),1.61–1.49(m,4H),1.34(q,J＝7.8Hz,2H),0.92(t,J＝7.4Hz,3H).HRMS(positive ESI)m/zfound(calcd for C27H26N2O7+H+):491.1812(491.1813)。
实施例5 CPT-OOC(CH2)6COOH的合成：
Figure BDA0003779878530000052
称取喜树碱(CPT-OH，174mg)、辛二酸(261mg)、4-二甲氨基吡啶(DMAP，183mg)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI，576mg)于50mL茄瓶中，再加入二氯甲烷(DCM)15mL，室温反应12h。加入盐酸水溶液猝灭反应，再加入大量二氯甲烷萃取，柱层析分离，得浅黄色粉末状固体96mg。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.88(s,1H),8.66(s,1H),8.11(t,J＝9.1Hz,2H),7.83(t,J＝7.7Hz,1H),7.68(t,J＝7.5Hz,1H),7.01(s,1H),5.45(s,2H),5.27(s,2H),2.50(m,2H),2.11(m,4H),1.52(q,J＝7.3Hz,2H),1.41(t,J＝7.3Hz,2H),1.26(m,4H),0.88(t,J＝7.4Hz,3H).HRMS(positive ESI)m/z found(calcd for C28H28N2O7+H+):505.1969(505.1969)。
表1为实施例1-5具有不同连接键长的喜树碱衍生物的最大紫外吸收波长及吸光系数，结果表明对喜树碱的修饰未影响其它官能团结构。
表1 CPT-OOC(CH2)nCOOH的紫外吸收统计
Figure BDA0003779878530000061
实施例6 PEG-(OH)7(CPT)1的合成
称量1.00g PEG(OH)8(八臂星形聚乙二醇，单臂分子量1875Da)原料，分别将实施例1-5合成的喜树碱二酸酐衍生物，0.311g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)和0.294g 4-二甲氨基吡啶加入到30mL二氯甲烷(DCM)中，常温搅拌12h。将反应溶液稀释于250mL DCM中，用250mL氯化钠水溶液水洗三次，接着浓缩后在乙醚中沉淀。最后，将得到的固体样品真空抽干称重得到产物。
实施例7 PEG-(p-phCHO)7(OOC(CH2)2COOCPT)1的合成
将1.20g实施例6制得的PEG-(OH)7(OOC(CH2)2COOCPT)1，0.217g对甲酰基苯甲酸，0.374g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)和0.353g 4-二甲氨基吡啶加入到30mL二氯甲烷(DCM)中，常温搅拌12h。将反应溶液稀释于250mL DCM中，用250mL氯化钠水溶液水洗三次，接着浓缩后在乙醚中沉淀。最后，将得到的固体样品真空抽干称重得0.835g产物。
实施例8 PEG-(p-phCHO)7(OOC(CH2)3COOCPT)1的合成
将1.20g实施例6制得的PEG-(OH)7(OOC(CH2)3COOCPT)1，0.217g对甲酰基苯甲酸，，0.374g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)和0.353g 4-二甲氨基吡啶加入到30mL二氯甲烷(DCM)中，常温搅拌12h。将反应溶液稀释于250mL DCM中，用250mL氯化钠水溶液水洗三次，接着浓缩后在乙醚中沉淀。最后，将得到的固体样品真空抽干称重得0.735g产物。
实施例9 PEG-(p-phCHO)7(OOC(CH2)4COOCPT)1的合成
将1.653g实施例6制得的PEG-(OH)7(OOC(CH2)4COOCPT)1，0.298g对甲酰基苯甲酸，0.515g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)和0.486g 4-二甲氨基吡啶加入到30mL二氯甲烷(DCM)中，常温搅拌12h。将反应溶液稀释于250mL DCM中，用250mL氯化钠水溶液水洗三次，接着浓缩后在乙醚中沉淀。最后，将得到的固体样品真空抽干称重得1.234g产物。
实施例10 PEG-(p-phCHO)7(OOC(CH2)5COOCPT)1的合成
将1.587g实施例6制得的PEG-(OH)7(OOC(CH2)5COOCPT)1，0.287g对甲酰基苯甲酸，，0.494g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)和0.466g 4-二甲氨基吡啶加入到30mL二氯甲烷(DCM)中，常温搅拌12h。将反应溶液稀释于250mL DCM中，用250mL氯化钠水溶液水洗三次，接着浓缩后在乙醚中沉淀三次。最后，将得到的固体样品真空抽干称重得0.922g产物。
实施例11 PEG-(p-phCHO)7(OOC(CH2)6COOCPT)1的合成
将1.498g实施例6制得的PEG-(OH)7(OOC(CH2)6COOCPT)1，0.275g对甲酰基苯甲酸，0.466g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)和0.440g 4-二甲氨基吡啶加入到30mL二氯甲烷(DCM)中，常温搅拌12h。将反应溶液稀释于250mL DCM中，用250mL氯化钠水溶液水洗三次，接着浓缩后在乙醚中沉淀三次。最后，将得到的固体样品真空抽干称重得0.967g产物。
实施例12 PEG-(OH)6(OOC(CH2)3COOCPT)2的合成
反应方程式：
Figure BDA0003779878530000071
将CPT-OOC(CH2)3COOH(206.8mg)、PEG(OH)8(3.89g)、EDCI(4.887g)和DMAP(2.926g)，放入圆底烧瓶中，加入二氯甲烷溶剂30ml，反应室温搅拌过夜。然后萃取水洗3次，并在乙醚中沉淀。最终得到产物2.9g。
其中，化学位移为δ8.7,8.15,7.87,7.72,7.06为CPT芳基氢，δ5.50,5.31为CPT中亚甲基CH2的氢，δ2.15,0.92为CPT中CH2CH3的氢，δ2.60,2.40,1.79为CPT-OOC(CH2)3COO的CH2CH2CH2的氢，δ4.59为PEG羟基的峰，δ4.11为PEG中与羧基酯化生成的COOCH2的氢。
实施例13 PEG-(p-phCHO)6(OOC(CH2)3COOCPT)2的合成
将2.059g实施例12制得的喜树碱衍生物PEG-(OH)6(OOC(CH2)3COOCPT)2，0.588g对甲酰基苯甲酸(p-CBA)，1.009g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)和0.962g4-二甲氨基吡啶加入到二氯甲烷(DCM)中，搅拌12h。将反应溶液稀释于约250mL DCM中，用水洗三次，旋蒸浓缩后在乙醚中沉淀，最后，将得到的固体样品真空抽干称重得0.880g产物。
实施例14 PEG-(OH)4(OOC(CH2)3COOCPT)4的合成
反应方程式：
Figure BDA0003779878530000081
将CPT-OOC(CH2)3COOH(415.8mg,)、PEG(OH)8(3.99g,)、EDCI(7.668g,)和DMAP(5.8664g,48mmol)，放入圆底烧瓶中，加入二氯甲烷溶剂30ml，反应室温搅拌过夜。然后萃取水洗3次，并在乙醚中沉淀。最终得到产物3.6g。
其中，化学位移为δ8.7,8.15,7.87,7.72,7.06为CPT芳基氢，δ5.50,5.31为CPT中亚甲基CH2的氢，δ2.15,0.92为CPT中CH2CH3的氢，δ2.60,2.40,1.79为CPT-OOC(CH2)3COO的CH2CH2CH2的氢，δ4.59为PEG羟基的峰，δ4.11为PEG中与羧基酯化生成的COOCH2的氢。
实施例15 PEG-(p-phCHO)4(OOC(CH2)3COOCPT)4的合成
将2.035g实施例14制得的喜树碱衍生物PEG-(OH)4(OOC(CH2)3COOCPT)4、0.370g对甲酰基苯甲酸(p-CBA)，0.666g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)和0.634g4-二甲氨基吡啶加入到二氯甲烷(DCM)中，搅拌12h。将反应溶液稀释于约250mL DCM中，用水洗三次，旋蒸浓缩后在乙醚中沉淀，最后，将得到的固体样品真空抽干5h后称重得0.880g产物。
表2为实施例7～11和实施例15偶联苯醛基及喜树碱的PEG的H NMR关键化学位移，从化学位移比例关系确认了取代率，该工艺能精准的调控药物及交联官能团的比例。
表2 PEG-(p-phCHO)n(OOC(CH2)nCOOCPT)n的H NMR结果统计
Figure BDA0003779878530000091
实施例16水凝胶制备
配制方法：800mg实施例7制得的PEG-(p-phCHO)7(OOC(CH2)2COOCPT)1溶于3.2mlpH5.6磷酸二氢钠水溶液中配制凝胶试剂A，50mg聚乙烯亚胺和100mg聚赖氨酸溶于3.8mlpH9.2硼砂缓冲液中配制凝胶试剂B。
凝胶制作过程：先组装好三个方块模具，用注射器分别抽取等体积试剂A和试剂B，装上双联注射架上，迅速将溶液混合打入模具，即可得到凝胶。
实施例17水凝胶制备
配制方法：800mg实施例8制得的PEG-(p-phCHO)7(OOC(CH2)3COOCPT)1溶于3.2mlpH5.6磷酸二氢钠水溶液中配制凝胶试剂A，50mg聚乙烯亚胺和100mg聚赖氨酸溶于3.8mlpH9.2硼砂缓冲液中配制凝胶试剂B。
凝胶制作过程：先组装好三个方块模具，用注射器分别抽取等体积试剂A和试剂B，装上双联注射架上，迅速将溶液混合打入模具，即可得到凝胶。
实施例18水凝胶制备
配制方法：800mg实施例9制得的PEG-(p-phCHO)7(OOC(CH2)4COOCPT)1溶于3.2mlpH5.6磷酸二氢钠水溶液中配制凝胶试剂A，50mg聚乙烯亚胺和100mg聚赖氨酸溶于3.8mlpH9.2硼砂缓冲液中配制凝胶试剂B。
凝胶制作过程：先组装好三个方块模具，用注射器分别抽取等体积试剂A和试剂B，装上双联注射架上，迅速将溶液混合打入模具，即可得到凝胶。
实施例19水凝胶制备
配制方法：800mg实施例10制得的PEG-(p-phCHO)7(OOC(CH2)5COOCPT)1溶于3.2mlpH5.6磷酸二氢钠水溶液中配制凝胶试剂A，50mg聚乙烯亚胺和100mg聚赖氨酸溶于3.8mlpH9.2硼砂缓冲液中配制凝胶试剂B。
凝胶制作过程：先组装好三个方块模具，用注射器分别抽取等体积试剂A和试剂B，装上双联注射架上，迅速将溶液混合打入模具，即可得到凝胶。
实施例20水凝胶制备
配制方法：800mg实施例11制得的PEG-(p-phCHO)7(OOC(CH2)6COOCPT)1溶于3.2ml0.1pH5.6M磷酸二氢钠水溶液中配制凝胶试剂A，50mg聚乙烯亚胺和100mg聚赖氨酸溶于3.8ml pH9.2硼砂缓冲液中配制凝胶试剂B。
凝胶制作过程：先组装好三个方块模具，用注射器分别抽取等体积试剂A和试剂B，装上双联注射架上，迅速将溶液混合打入模具，即可得到凝胶。
实施例21水凝胶制备
配制方法：800mg实施例13制得的PEG-(p-phCHO)6(OOC(CH2)3COOCPT)2溶于3.2mlpH5.6磷酸二氢钠水溶液中配制凝胶试剂A，50mg聚乙烯亚胺和100mg聚赖氨酸溶于3.8mlpH9.2硼砂缓冲液中配制凝胶试剂B。
凝胶制作过程：先组装好三个方块模具，用注射器分别抽取等体积试剂A和试剂B，装上双联注射架上，迅速将溶液混合打入模具，即可得到凝胶。
实施例22水凝胶制备
配制方法：800mg实施例15制得的PEG-(p-phCHO)4(OOC(CH2)3COOCPT)4溶于3.2mlpH5.6磷酸二氢钠水溶液中配制凝胶试剂A，50mg聚乙烯亚胺和100mg聚赖氨酸溶于3.8mlpH9.2硼砂缓冲液中配制凝胶试剂B。
凝胶制作过程：先组装好三个方块模具，用注射器分别抽取等体积试剂A和试剂B，装上双联注射架上，迅速将溶液混合打入模具，即可得到凝胶。
实施例23水凝胶制备
配制方法：800mg PEG-(p-phCHO)8和4mgCPT溶于3.2ml pH5.6磷酸二氢钠水溶液中配制凝胶试剂A，50mg聚乙烯亚胺和100mg聚赖氨酸溶于3.8ml pH9.2硼砂缓冲液中配制凝胶试剂B。
凝胶制作过程：先组装好三个方块模具，用注射器分别抽取等体积试剂A和试剂B，装上双联注射架上，迅速将溶液混合打入模具，即可得到凝胶。
实施例24考察本发明所述PEG化喜树碱凝胶的药物缓释行为
将实施例16-22以及实施例23制得的凝胶称重，加入10倍PBS缓冲液，置于37℃水浴摇床中，定期取浸提液，紫外测试吸光度值，利用喜树碱紫外吸收标准曲线计算浸提液中喜树碱含量。
不同桥接链长的PEG化喜树碱凝胶的药物释放曲线如图1所示。结果显示仅物理包埋喜树碱的凝胶(实施例23)，在前24小时药物突释达到80％，3天就完全释放。而本发明所述不同桥接链长的PEG化喜树碱凝胶(实施例17～19)实现了长效的缓释。
不同取代率的PEG化喜树碱凝胶的药物释放曲线如图2所示。结果表明，不同取代率的PEG化喜树碱凝胶(实施例17、21、22)对缓释无直接影响，可依据临床药物用量需求，选择不同取代率的PEG化喜树碱凝胶。
实施例25考察本发明所述PEG化喜树碱凝胶的降解行为
将实施例16-23制得的凝胶称重，加入10倍PBS缓冲液，置于37℃水浴摇床中，定期取凝胶称称重，与初始重量比对，计算凝胶溶胀率。结果如图3所示。结果表明，喜树碱取代率高的凝胶降解速度较快，约为2个月，喜树碱取代率低的凝胶更为稳定，降解时间超过3个月。降解速率快慢与喜树碱取代率高低具有正相关性，可以根据临床不同肿瘤治疗周期制备不同喜树碱取代率的凝胶。
实施例26考察本发明所述PEG化喜树碱的成胶时间
将实施例16-23制得的凝胶试剂A和试剂B分别吸100微升，依次加入小瓶中，等体积混合，从试剂A、B接触开始计时，采用倒管法观察混合溶液的流动，直到不流动时及为成胶时间。
结果如表3所示。结果表明不同桥接链长不影响PEG化喜树碱凝胶的注射及成型。
表3 PEG化喜树碱凝胶成胶时间
实施例 凝胶中药物分子 成胶时间(秒)
实施例17 PEG-(p-phCHO)<sub>7</sub>(OOC(CH<sub>2</sub>)<sub>3</sub>COOCPT)<sub>1</sub> 5
实施例18 PEG-(p-phCHO)<sub>7</sub>(OOC(CH<sub>2</sub>)<sub>4</sub>COOCPT)<sub>1</sub> 6
实施例19 PEG-(p-phCHO)<sub>7</sub>(OOC(CH<sub>2</sub>)<sub>5</sub>COOCPT)<sub>1</sub> 4
实施例20 PEG-(p-phCHO)<sub>7</sub>(OOC(CH<sub>2</sub>)<sub>6</sub>COOCPT)<sub>1</sub> 6
实施例23 PEG-(p-phCHO)<sub>8</sub> 5

Claims (10)

1.一种PEG化喜树碱衍生物，其特征在于具有如下结构：
Figure FDA0003779878520000011
其中n代表1～10的正整数，PEG为醛基封端的星形多臂聚乙二醇。
2.根据权利要求1所述的PEG化喜树碱衍生物，其特征在于n代表2～6的正整数。
3.根据权利要求1所述的PEG化喜树碱衍生物，其特征在于所述醛基封端的星形多臂聚乙二醇的臂数为2-8，单臂分子量1000-5000Da。
4.根据权利要求1所述的PEG化喜树碱衍生物，其特征在于所述醛基选自芳香醛、烷基醛中的一种或几种。
5.一种PEG化喜树碱缓释凝胶，其特征在于由权利要求1-4任一项所述的PEG化喜树碱衍生物和多氨基化合物原位交联而成。
6.根据权利要求5所述的PEG化喜树碱缓释凝胶，其特征在于所述多氨基化合物中氨基与PEG化喜树碱衍生物中醛基的摩尔比为0.4～4.4:1，所述多氨基化合物为聚赖氨酸或聚赖氨酸与聚乙烯亚胺的混合物，聚赖氨酸与聚乙烯亚胺的摩尔比为2～30:3。
7.根据权利要求5所述的PEG化喜树碱缓释凝胶，其特征在于采用如下方法制备而成：将PEG化喜树碱衍生物溶解在pH4-6缓冲液中，配制溶液；将多氨基化合物溶解在pH4-10缓冲液中，配制多氨基化合物溶液；将两者混合得到PEG化喜树碱缓释凝胶。
8.根据权利要求7所述的PEG化喜树碱缓释凝胶，其特征在于所述PEG化喜树碱衍生物溶液的质量体积百分浓度为2-30％，所述多氨基化合物溶液质量体积百分浓度为0.5-20％。
9.根据权利要求8所述的PEG化喜树碱缓释凝胶，其特征在于所述PEG化喜树碱衍生物溶液的质量体积百分浓度为10～20％，所述多氨基化合物溶液的质量体积百分浓度为1-5％。
10.权利要求1-4任一项所述的PEG化喜树碱衍生物或权利要求5-9任一项所述的PEG化喜树碱缓释凝胶在制备抗癌缓释药物中的应用。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN101530619A (zh) * 2009-04-16 2009-09-16 山东大学 一种水溶性聚乙二醇化羟基喜树碱衍生物的制备方法
CN102204881A (zh) * 2011-06-08 2011-10-05 复旦大学 含喜树碱或其衍生物的凝胶缓释注射剂及其制备方法
CN109939065A (zh) * 2018-08-10 2019-06-28 上海瑞凝生物科技有限公司 医用水凝胶

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101530619A (zh) * 2009-04-16 2009-09-16 山东大学 一种水溶性聚乙二醇化羟基喜树碱衍生物的制备方法
CN102204881A (zh) * 2011-06-08 2011-10-05 复旦大学 含喜树碱或其衍生物的凝胶缓释注射剂及其制备方法
CN109939065A (zh) * 2018-08-10 2019-06-28 上海瑞凝生物科技有限公司 医用水凝胶

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