CN115089564A - 紫草素和左旋紫草素在制备抗冠状病毒药物中的应用 - Google Patents
紫草素和左旋紫草素在制备抗冠状病毒药物中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及紫草素和左旋紫草素在制备抗冠状病毒药物中的应用，首次发现紫草素和左旋紫草素是冠状病毒的广谱抑制剂，紫草素和左旋紫草素作为冠状病毒的广谱抑制剂用于治疗2019新型冠状病毒，严重急性呼吸综合症(SARS)，中东呼吸综合症(MERS)肺炎感染以及人冠状病毒OC43(HCoV‑OC43)引发的普通感冒。紫草素和左旋紫草素可以结合2019新型冠状病毒主蛋白酶(3CLpro)、木瓜蛋白酶样蛋白酶(PLpro)，3CL和PLP蛋白酶是催化RNA病毒前体蛋白裂解的关键蛋白酶，对病毒的复制有重要作用，而且高度保守，因此紫草素和左旋紫草素可以抑制2019新型冠状病毒复制。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，尤其涉及紫草素和左旋紫草素在制备抗冠状病毒药物中的应用。
背景技术
高致病性冠状病毒感染成了这十年来广受关注公共卫生问题。
紫草，中药名，紫草科植物新疆紫草Arnebia euchroma(Royle)Johnst.、紫草Lithospermum erythrorhizon Sieb.et Zucc.或内蒙紫草Arnebia guttata Bunge的干燥根。凉血，活血，解毒透疹。用于血热毒盛，斑疹紫黑，麻疹不透，疮疡，湿疹，水火烫伤。温热斑疹，湿热黄疸，紫癜，吐、衄、尿血，淋浊，热结便秘，烧伤，湿疹，丹毒，痈疡。
紫草素(Shikonin)是由紫草所提取的紫红色萘醌类天然色素，具有抗癌、抗炎、抗菌等作用。临床用于治疗急、慢性肝炎、肝硬化(腹水)。皮肝科用于治疗扁平疣、银屑病，局部应用治疗烧伤和促进伤口愈合。滴眼剂用于治疗单疱病毒性角膜炎，对上皮型树枝状和浅实质层树枝状角膜炎有一定疗效。油剂用于治疗婴儿皮炎、湿疹、阴道炎、子宫颈炎等。含有本品的牙膏可防治牙龋和牙龈炎。亦可用于药物、化妆品及食品的着色剂。
左旋紫草素(alkannin)是紫草素的左旋异构体，跟紫草素有相同的功效。
发明内容
鉴于此，本发明的目的在于提供冠状病毒有效广谱抑制剂，可以治疗冠状病毒引起的肺炎感染或普通感冒。本发明提供一种紫草的新用途，紫草中的紫草素和左旋紫草素可以结合冠状病毒主蛋白酶(3CLpro)和木瓜蛋白酶样蛋白酶(PLpro)，从而抑制病毒复制。
根据本发明紫草的新用途的一个实施方式，所述冠状病毒引起的肺炎或普通感冒可以是新型冠状病毒肺炎，严重急性呼吸综合症肺炎 (SARS)，中东呼吸综合症肺炎(MERS)以及人冠状病毒 OC43(HCoV-OC43)，NL63(HCoV-NL63)、229E(HCoV-229E)、HKU1 (HCoV-HKU1)引发的普通感冒。
购买来源，紫草素可以购买于TargetMol公司，货号(T2897)；
紫草素的结构式如下：
中文名称:紫草素
英文名称：Shikonin
别称：紫草醌,紫草宁
分子式：C16H16O5
分子量：288.30
CAS号：517-89-5
用途：紫草素是中草药紫草的主要成分。Shikonin是一种有效的 TMEM16A氯化物通道(chloride channel)抑制剂，IC50为6.5μM。Shikonin 是一种特异的丙酮酸激酶M2(PKM2)抑制剂，还可以抑制TNF-α和NF-κB 途径。Shikonin通过抑制糖酵解降低外泌体(exosome)的分泌。Shikonin 抑制AIM2炎性体活化。
购买来源，左旋紫草素可以购买于TargetMol公司，货号(T4958)；
左旋紫草素的结构式如下：
中文名称:左旋紫草素
英文名称：alkannin
别称：5,8-二羟基-2-[(1S)-1-羟基-4-甲基戊-3-烯基]萘-1,4-二酮
分子式：C16H16O5
分子量：288.30
CAS号：517-88-4
用途：在alkanna tinctoria中发现，用作食品着色剂。(-)-Alkannin具有抗癌活性，抑制细胞周期，诱导细胞凋亡。(-)-Alkannin在Rho激酶途径中改善肝脏炎症。
本发明人经过大量研究发现紫草的新用途。紫草成分紫草素和左旋紫草素可以结合冠状病毒主蛋白酶(3CLpro)以及木瓜蛋白酶样蛋白酶 (PLpro)，从而抑制病毒复制。两种参与2019-nCov蛋白酶解过程的关键蛋白酶分别为冠状病毒主蛋白酶(3CLpro)和木瓜蛋白酶样蛋白酶(PLpro)。因此，针对3CLpro和PLpro蛋白为靶点的小分子抑制剂可应用于针对新型冠状病毒的治疗。
本发明人还发现紫草素和左旋紫草素对SARS和MERS的3CL/PLP靶蛋白同样有结合，因此紫草素和左旋紫草素是冠状病毒科的广谱抑制剂。
本发明人还发现紫草素和左旋紫草素在细胞水平显著抑制冠状病毒OC43-CoV的复制，因此，紫草素和左旋紫草素是冠状病毒科的广谱抑制剂。
本发明的紫草素和左旋紫草素可以配制成各种适合的药物制剂形式，如胶囊剂、片剂、微囊片剂、注射剂、栓剂、喷雾剂或口服液等。本发明的紫草素和左旋紫草素可以单独使用，或者将其与药用辅料(例如赋形剂、稀释剂等)混合，配制成口服给药的片剂、胶囊剂、颗粒剂或糖浆剂等或注射给药的粉针剂、溶液剂。所述药物的给药方式为注射、口服、吸入式喷雾或透皮给药。
与现有技术相比，本发明的技术效果如下：
紫草素和左旋紫草素在细胞水平能够抑制冠状病毒主蛋白酶(3CLpro) 和木瓜蛋白酶样蛋白酶(PLpro)，明显的抑制OC43-CoV活病毒的复制，从而达到治疗新型冠状病毒感染及其它冠状病毒感染。紫草素和左旋紫草素作为一种中药材的成分，安全性没有问题，因此可以应用于临床。
附图说明
图1为SARS-CoV-2 3CL&shikonin传感图。
图2为SARS 3CL&shikonin传感图。
图3为MERS 3CL&shikonin传感图。
图4为SARS-CoV-2PLP&shikonin传感图。
图5为SARSPLP&shikonin传感图。
图6为MERS PLP&shikonin传感图。
图7为SARS-CoV-2 3CL&alkannin传感图。
图8为SARS 3CL&alkannin传感图。
图9为MERS 3CL&alkannin传感图。
图10为SARS-CoV-2PLP&alkannin传感图。
图11为SARSPLP&alkannin传感图。
图12为MERS PLP&alkannin传感图。
图13为紫草素抑制新型冠状病毒3CL和PLP蛋白酶的IC50。
图14为紫草素抑制MERS冠状病毒3CL和PLP蛋白酶的IC50。
图15为左旋紫草素抑制新型冠状病毒3CL和PLP蛋白酶的IC50。
图16为左旋紫草素抑制MERS冠状病毒3CL和PLP蛋白酶的IC50。
图17为紫草素抑制OC43病毒。
图18为左旋紫草素抑制OC43病毒。
图19为紫草素和左旋紫草素的半数细胞毒性CC50的测定。
具体实施方式
本发明提供紫草素和左旋紫草素在制备抗冠状病毒药物中的应用，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1：冠状病毒SPR实验
实验材料与仪器
biacore T200(GE healthcare,Uppsala,Sweden)，CM5芯片(GE healthcare,Uppsala,Sweden)，2019-CoV 3CL蛋白(近岸蛋白)，2019-CoV pL蛋白(近岸蛋白)，SARS 3CL蛋白(R&D)，MERS 3CL蛋白(genescript)，SARS Plp 蛋白(义翘神州)，MERS Plp蛋白(genescript)。
新型冠状病毒3CL蛋白SPR实验
机型为GE公司的biacore T200，将新型冠状病毒的3CL蛋白(近岸蛋白)通过氨基偶联到CM5芯片上，偶联量为10125.4RU，测量化合物和3CL蛋白在25℃下的亲和力。以30μL/分钟的流速以100uM,50uM,25uM, 12.5uM,6.25uM,3.125uM，1.5625uM,0uM的浓度注入化合物，进样时间 180s，解离时间300s。数据分析方式为稳态分析。
新型冠状病毒PLP蛋白SPR实验
机型为GE公司的biacore T200，将新型冠状病毒的PLP蛋白(近岸蛋白)通过氨基偶联到CM5芯片上，偶联量为15846.8RU，测量化合物和PLP蛋白在25℃下的亲和力。以30μL/分钟的流速以100uM,50uM,25uM, 12.5uM,6.25uM,3.125uM，1.5625uM,0uM的浓度注入化合物，进样时间 180s，解离时间300s。数据分析方式为稳态分析。
SARS病毒3CL蛋白SPR实验
机型为GE公司的biacore T200，将SARS病毒的3CL蛋白(义翘神州) 通过氨基偶联到CM5芯片上，偶联量为10452.5RU，测量化合物和SARS 病毒3CL蛋白在25℃下的亲和力。以30μL/分钟的流速以100uM，50uM, 25uM,12.5uM,6.25uM,3.125uM，1.5625uM,0.78125uM,0uM的浓度注入化合物，进样时间180s，解离时间300s。数据分析方式为稳态分析。
SARS病毒PLP蛋白SPR实验
机型为GE公司的biacore T200，将SARS病毒的PLP蛋白(义翘神州) 通过氨基偶联到CM5芯片上，偶联量为15357.7RU，测量化合物和SARS 病毒PLP蛋白在25℃下的亲和力。以30μL/分钟的流速以100uM，50uM, 25uM,12.5uM,6.25uM,3.125uM，1.5625uM,0.78125uM,0uM的浓度注入化合物，进样时间180s，解离时间300s。数据分析方式为稳态分析。
MERS病毒3CL蛋白SPR实验
机型为GE公司的biacore T200，将MERS病毒的3CL蛋白(genescript) 通过氨基偶联到CM5芯片上，偶联量为9856RU，测量化合物和MERS病毒3CL蛋白在25℃下的亲和力。以30μL/分钟的流速以100uM，50uM,25uM, 12.5uM,6.25uM,3.125uM，1.5625uM,0.78125uM,0uM的浓度注入化合物，进样时间180s，解离时间300s。数据分析方式为稳态分析。
MERS病毒PLP蛋白SPR实验
机型为GE公司的biacore T200,将MERS病毒的PLP蛋白(genescript) 通过氨基偶联到CM5芯片上，偶联量为10459.4RU，测量化合物和MERS 病毒PLP蛋白在25℃下的亲和力。以30μL/分钟的流速以100uM，50uM, 25uM,12.5uM,6.25uM,3.125uM，1.5625uM,0.78125uM,0uM的浓度注入化合物，进样时间180s，解离时间300s。数据分析方式为稳态分析。
SPR结果见下表1-2和图1-12，图1显示紫草素和SARS-CoV-23CL的亲和力，图2显示紫草素和SARS 3CL的亲和力，图3显示紫草素和MERS 3CL的亲和力，图4显示紫草素和SARS-CoV-2PLP的亲和力，图5显示紫草素和SARS PLP的亲和力，图6显示紫草素和MERS PLP的亲和力，图 7显示左旋紫草素和SARS-CoV-23CL的亲和力，图8显示左旋紫草素和 SARS 3CL的亲和力，图9显示左旋紫草素和MERS 3CL的亲和力，图10 显示左旋紫草素和SARS-CoV-2PLP的亲和力，图11显示左旋紫草素和 SARS PLP的亲和力，图12显示左旋紫草素和MERS PLP的亲和力。
表1、在25℃下紫草素结合冠状病毒3CL和PLP蛋白的亲和力
| KD(M) | Rmax(RU) | Chi<sup>2</sup>(RU<sup>2</sup>) | chi | |
| 2019CoV 3CL | 7.439*10<sup>-6</sup> | 15.77 | 1.85 | 1.36 |
| SARS 3CL | 6.732*10<sup>-6</sup> | 6.735 | 0.141 | 0.376 |
| MERS 3CL | 7.54*10<sup>-6</sup> | 4.27 | 0.0472 | 0.217 |
| 2019CoV PLP | 1.958*10<sup>-5</sup> | 13.8 | 0.0446 | 0.211 |
| SARS PLP | 2.149*10<sup>-6</sup> | 50.65 | 11.1 | 3.33 |
| MERS PLP | 4.468*10<sup>-6</sup> | 24.86 | 3.2 | 1.79 |
表2、在25℃下左旋紫草素结合冠状病毒3CL和PLP蛋白的亲和力
| KD(M) | Rmax(RU) | Chi<sup>2</sup>(RU<sup>2</sup>) | chi | |
| 2019CoV 3CL | 3.583*10<sup>-5</sup> | 15.89 | 0.64 | 0.8 |
| SARS 3CL | 5.281*10<sup>-5</sup> | 37.54 | 0.755 | 0.869 |
| MERS 3CL | 6.309*10<sup>-6</sup> | 5.766 | 0.0944 | 0.307 |
| 2019CoV PLP | 3.986*10<sup>-6</sup> | 14.95 | 0.0364 | 0.191 |
| SARS PLP | 5.242*10<sup>-6</sup> | 10.76 | 0.464 | 0.681 |
| MERS PLP | 4.75*10<sup>-5</sup> | 57.88 | 0.495 | 0.704 |
实施例2：荧光共振能量转移(FRET)法检测化合物对3CLpro细胞外蛋白酶切活性的影响
实验材料与仪器
荧光底物Dabcyl-KNSTLQSGLRKE-Edans:由南京金斯瑞生物科技有限公司合成；
荧光底物母液：用高压灭菌的缓冲液(20mM Tris-HCl,pH7.4,120mM NaCl)配制，终浓度为100uM。分装成小份，冻存于-20℃备用；
化合物母液：用100％DMSO配制，终浓度为100mM,4℃保存备用；
HBS-EP工作缓冲液(10mM Hepes,150mM NaCl,3mM EDTA和0.005％ (v/v)surfactant P20,pH7.4)；
酶标仪(MD公司)。
3CL蛋白酶FRET检测原理：
3CL蛋白酶的荧光底物根据3CL蛋白酶底物切割的特异性(核心序列为L-Q--S)设计合成。EDANS和Dabcyl为常用的荧光-淬灭分子对，最适激发波长为340nm，最适发射波长为490nM。Dabcyl对EDANS的淬灭效率大于95％，用荧光方法检测背景值很低。在未加3CL蛋白酶时，两个荧光集团之间的距离很短，约10-100A。在光激发状态下，EDANS的能力被Dabcyl淬灭，该量子现象称为共振能量转移。经过蛋白酶特异性切割后，多肽底物断裂，荧光基团和淬灭基团分离，恢复其本身的全部荧光，所以一个低荧光的多肽底物经过酶切割后成为高荧光的物质，而且荧光强度的增加与多肽水解的程度呈线性相关。底物的氨基酸序列为 KNSTLQSGLRKE，赖氨酸K修饰Dabcyl，谷氨酸E修饰EDANS，修饰后多肽分子量：1860.1。
化合物抑制冠状病毒3CL蛋白酶的IC50测定：
将化合物母液稀释，得到浓度依次为100mM、20mM、10mM、2mM、 1mM、200uM、100uM、20uM的化合物溶液，取各浓度化合物溶液1.2ul，分别与120ul的2uM 3CL蛋白酶充分混合(DMSO的终浓度为0.5％)，在 4℃孵育2小时。然后取各浓度样品100ul加到96孔板中，再分别加入100ul 20uM的荧光底物溶液开始反应，此时3CL蛋白酶的终浓度为1uM，荧光底物的终浓度为10uM，化合物的终浓度分别为500uM、100uM、50uM、 10uM、5uM、1uM、0.5uM、0.1uM。以340nm波长的光激发，检测发射波长为488nm下的荧光值变化，反应连续测定1小时，完成化合物对冠状病毒3CL蛋白酶抑制作用的测定。测定化合物IC50值时设定空白对照，即不加化合物，但加相同浓度DMSO的3CL蛋白酶样品以及单独荧光底物溶液的样品。每个样品设复孔，测定值取平均。根据不同浓度化合物存在条件下，冠状病毒3CL蛋白酶酶切荧光底物的反应速度，与未加化合物但加 0.5％DMSO的反应速度进行比较，计算得到各浓度下的抑制率(以含 0.5％DMSO条件下的酶活性为100％，抑制率＝100％-不同抑制剂浓度下的酶的相对活性X100％)。根据Logistic公式用origin软件进行非线性拟合计算化合物对3CL蛋白酶活性抑制的IC50值。公式如下：
上述公式中，A0指加0.5％DMSO时的酶活性，A(I)指不同化合物浓度下的酶活性，I指化合物的浓度，p指u因子。
测试结果见下表3和图13-图16。图13显示荧光共振能量转移(FRET) 法检测紫草素对2019CoV 3CLpro细胞外蛋白酶切活性的影响，图14显示荧光共振能量转移(FRET)法检测紫草素对MERS 3CLpro细胞外蛋白酶切活性的影响，图15显示荧光共振能量转移(FRET)法检测左旋紫草素对2019CoV 3CLpro细胞外蛋白酶切活性的影响，图16显示荧光共振能量转移(FRET)法检测左旋紫草素对MERS 3CLpro细胞外蛋白酶切活性的影响。
表3、在25℃下紫草素和左旋紫草素抑制冠状病毒3CL蛋白的IC50值
| IC<sub>50</sub> | 2019CoV 3CL | MERS 3CL |
| 紫草素 | 2.06uM | 1.6uM |
| 左旋紫草素 | 1.905uM | 0.8189uM |
实施例3：荧光共振能量转移(FRET)法检测化合物对PLP pro细胞外蛋白酶切活性的影响
实验材料与仪器
荧光底物Dabcyl-KRLKGGAPIKGE-Edans:由南京金斯瑞生物科技有限公司合成；
荧光底物母液：用高压灭菌的缓冲液(20mM Tris-HCl,pH7.4,120mM NaCl)配制，终浓度为100uM。分装成小份，冻存于-20℃备用；
化合物母液：用100％DMSO配制，终浓度为100mM,4℃保存备用；
HBS-EP工作缓冲液(10mM Hepes,150mM NaCl,3mM EDTA和0.005％ (v/v)surfactant P20,pH7.4)；
酶标仪(MD公司)。
PLP蛋白酶FRET检测原理：
PLP蛋白酶的荧光底物根据PLP蛋白酶底物切割的特异性(核心序列为RLKGGAPIKG)设计合成。EDANS和Dabcyl为常用的荧光-淬灭分子对，最适激发波长为340nm，最适发射波长为490nM。Dabcyl对EDANS 的淬灭效率大于95％，用荧光方法检测背景值很低。在未加PLP蛋白酶时，两个荧光基团之间的距离很短，约10-100A。在光激发状态下，EDANS的能力被Dabcyl淬灭，该量子现象称为共振能量转移。经过蛋白酶特异性切割后，多肽底物断裂，荧光基团和淬灭基团分离，恢复其本身的全部荧光，所以一个低荧光的多肽底物经过酶切割后成为高荧光的物质，而且荧光强度的增加与多肽水解的程度呈线性相关。底物的氨基酸序列为 KRLKGGAPIKGE，赖氨酸K修饰Dabcyl，谷氨酸E修饰EDANS，修饰后多肽分子量：1253.5。
化合物抑制冠状病毒PLP蛋白酶的IC50测定：
将化合物母液稀释，得到浓度依次为100mM、20mM、10mM、2mM、 1mM、200uM、100uM、20uM的化合物溶液，取各浓度化合物溶液1.2ul,分别与120ul的2uM PLP蛋白酶充分混合(DMSO的终浓度为0.5％)，在4℃孵育2小时。然后取各浓度样品100ul加到96孔板中，再分别加入100ul 20uM的荧光底物溶液开始反应，此时PLP蛋白酶的终浓度为1uM,荧光底物的终浓度为10uM，化合物的终浓度分别为500uM、100uM、50uM、10uM、 5uM、1uM、0.5uM、0.1uM。以340nm波长的光激发，检测发射波长为488nm 下的荧光值变化，反应连续测定1小时，完成芦丁对冠状病毒PLP蛋白酶抑制作用的测定。测定化合物IC50值时设定空白对照，即不加化合物，但加相同浓度DMSO的PLP蛋白酶样品以及单独荧光底物溶液的样品。每个样品设复孔，测定值取平均。根据不同浓度化合物存在条件下，冠状病毒 PLP蛋白酶酶切荧光底物的反应速度，与未加化合物但加0.5％DMSO的反应速度进行比较，计算得到各浓度下的抑制率(以含0.5％DMSO条件下的酶活性为100％，抑制率＝100％-不同抑制剂浓度下的酶的相对活性X100％)。根据Logistic公式用origin软件进行非线性拟合计算化合物对PLP蛋白酶活性抑制的IC50值。公式如下：
上述公式中，A0指加0.5％DMSO时的酶活性，A(I)指不同化合物浓度下的酶活性，I指化合物的浓度，p指u因子。
测试结果见下表4和图13-图16。图13显示荧光共振能量转移(FRET) 法检测紫草素对2019CoV PLpro细胞外蛋白酶切活性的影响，图14显示荧光共振能量转移(FRET)法检测紫草素对MERS PLpro细胞外蛋白酶切活性的影响，图15显示荧光共振能量转移(FRET)法检测左旋紫草素对2019 CoV PLpro细胞外蛋白酶切活性的影响，图16显示荧光共振能量转移 (FRET)法检测左旋紫草素对MERS PLpro细胞外蛋白酶切活性的影响。
表4、在25℃下紫草素和左旋紫草素抑制冠状病毒PLpro蛋白的IC50值
| IC<sub>50</sub> | 2019CoV PLP | MERS PLP |
| 紫草素 | 20.23uM | 21.97uM |
| 左旋紫草素 | 16.47uM | 3.857uM |
实施例4：核蛋白免疫荧光染色检测紫草素和左旋紫草素对冠状病毒 OC43的抑制效果
病毒的制备
HCoV-OC43(OC43)菌株购自美国典型培养物保藏中心(人类冠状病毒OC43(ATCC，VR-1558))，并通过RD细胞(ATCC，CCL-136)进行繁殖；在RD细胞培养条件是DMEM+2％FBS。感染后72小时(hpi)后，通过噬斑法测定病毒滴度(PFU/ml)。
病毒感染实验
紫草素和左旋紫草素稀释在补充有2％FBS的DMEM中，RD细胞在感染复数(MOI＝0.01)下被感染OC43。在37℃孵育48小时的过程中，化合物和病毒与细胞保持在一起。通过针对核蛋白的免疫荧光染色评估RD 细胞中OC43的感染效率。通常，RD细胞在48hpi时用100％甲醇固定，在37℃时用1％BSA/PBS封闭1h，并在1时用抗OC43 Np mAb(Sigma， MAb9012，克隆541-8F)染色：1000在37℃下孵育1小时，然后将二抗再孵育1小时。细胞核用Hoechst 33342(Thermo Scientific H1399)在1： 5000处染色15分钟。通过Mshot荧光显微照片捕获图像。
图17显示核蛋白免疫荧光染色检测紫草素对冠状病毒OC43的抑制效果，图18显示核蛋白免疫荧光染色检测左旋紫草素对冠状病毒OC43的抑制效果。结果显示：3.7uM浓度下，紫草素和左旋紫草素可以抑制90％以上的OC43-CoV病毒复制。
实施例5：化合物半数细胞毒性CC50的确证
293-ACE2细胞接种到96孔板中，次日，细胞先分别加入0.137, 0.4111.1.233,3.7,11.1,33.3和100μM的化合物。药物对293-ACE2的细胞毒性用CellTiter-Glo 2活性检测来测量。
图19显示紫草素和左旋紫草素的半数细胞毒性CC50。结果显示：紫草素和左旋紫草素的CC50分别是7.17uM和12.95uM。
应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
Claims (8)
1.紫草素和左旋紫草素中的至少一种在制备抗冠状病毒药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述冠状病毒为2019新型冠状病毒、严重急性呼吸综合症病毒或中东呼吸综合症病毒。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述冠状病毒为人冠状病毒NL63、人冠状病毒229E或人冠状病毒HKU1。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物中还包含有其它药学上可接受的成分。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述其它药学上可接受的成分含有至少一种药学上可接受的辅料。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述其它药学上可接受的成分含有与紫草素和左旋紫草素拮抗作用以外的其它药物。
7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物的制剂形式为胶囊剂、片剂、微囊片剂、注射剂、栓剂、喷雾剂或口服液。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述药物的给药方式为注射、口服、吸入式喷雾或透皮给药。
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