CN115068427B - 缓释7天及缓释14天的青蒿素b微球及其制备方法 - Google Patents
缓释7天及缓释14天的青蒿素b微球及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115068427B CN115068427B CN202110263343.7A CN202110263343A CN115068427B CN 115068427 B CN115068427 B CN 115068427B CN 202110263343 A CN202110263343 A CN 202110263343A CN 115068427 B CN115068427 B CN 115068427B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- artemisinin
- release
- microsphere
- microspheres
- aqueous solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 title claims abstract description 111
- PVBSTLWHHZPUSK-JDRMZHCHSA-N 2-[(1s,4r,4as,8r,8ar)-8,8a-dihydroxy-4,7-dimethyl-2,3,4,4a,5,8-hexahydro-1h-naphthalen-1-yl]prop-2-enoic acid Chemical compound O[C@@H]1C(C)=CC[C@H]2[C@H](C)CC[C@@H](C(=C)C(O)=O)[C@]21O PVBSTLWHHZPUSK-JDRMZHCHSA-N 0.000 title claims abstract description 82
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 35
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 62
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 24
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims abstract description 10
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 29
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 21
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 claims description 16
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 claims description 14
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 claims description 14
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 12
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 11
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 11
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 11
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 10
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 claims description 9
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 8
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 7
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 7
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 6
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 5
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 claims description 4
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 3
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 claims description 3
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 claims description 3
- 230000000379 polymerizing effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 19
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 18
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- BLUAFEHZUWYNDE-NNWCWBAJSA-N artemisinin Chemical class C([C@](OO1)(C)O2)C[C@H]3[C@H](C)CC[C@@H]4[C@@]31[C@@H]2OC(=O)[C@@H]4C BLUAFEHZUWYNDE-NNWCWBAJSA-N 0.000 description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 11
- 229960004191 artemisinin Drugs 0.000 description 10
- 229930101531 artemisinin Natural products 0.000 description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 9
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 8
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- -1 sesquiterpene lactone compound Chemical class 0.000 description 4
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 4
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 2
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 238000011028 process validation Methods 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 2
- WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N (S)-chloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(N[C@@H](C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- 235000001405 Artemisia annua Nutrition 0.000 description 1
- 240000000011 Artemisia annua Species 0.000 description 1
- 241000208838 Asteraceae Species 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- HATRDXDCPOXQJX-UHFFFAOYSA-N Thapsigargin Natural products CCCCCCCC(=O)OC1C(OC(O)C(=C/C)C)C(=C2C3OC(=O)C(C)(O)C3(O)C(CC(C)(OC(=O)C)C12)OC(=O)CCC)C HATRDXDCPOXQJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000078 anti-malarial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000004900 autophagic degradation Effects 0.000 description 1
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 229960003677 chloroquine Drugs 0.000 description 1
- WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N chloroquine Natural products ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000013265 extended release Methods 0.000 description 1
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 1
- 238000010579 first pass effect Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000010224 hepatic metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930009674 sesquiterpene lactone Natural products 0.000 description 1
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000007962 solid dispersion Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
- A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/365—Lactones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
- A61K36/282—Artemisia, e.g. wormwood or sagebrush
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
为了解决青蒿素B因水溶性低、生物利用度低及半衰期短等问题无法成药的问题，本发明主要提供了两种注射用青蒿素B微球及其制备方法。具体地，本发明提供了一种14天缓释青蒿素B微球及一种7天缓释青蒿素B微球。体外释放研究表明，所制备的缓释微球，其释放过程大致符合零级释放动力学方程，并且没有明显突释现象。而且，本制剂所用的辅料为生物可降解材料，安全性高。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体涉及两种青蒿素B微球及其制备方法。
背景技术
青蒿素B是从菊科植物黄花蒿中提取分离得到的一种倍半萜内酯类化合物(见图1)，属于青蒿素类化合物。近年来，越来越多研究表明青蒿素类药物除抗疟作用外，在抗炎、抗菌、抗病毒和抗肿瘤等方面也具有潜在的药理活性(Ganguli A,Choudhury D,Datta S,et al. Inhibition of autophagy by chloroquine potentiates synergisticallyanti-cancer property of artemisinin by promoting ROS dependent apoptosis[J].Biochimie,2014,107(Pt B):338-349)。前期本实验室研究发现青蒿素B在体外对多种肿瘤细胞株具有很强的抗肿瘤活性，能够抑制肿瘤的增殖和转移。但青蒿素类化合物成药性却存在诸多难点，研究和开发维持有效血药浓度的青蒿素类成分的长效注射剂成为人们探究的方向之一。
目前市场上销售的青蒿素类化合物的制剂产品普遍存在着制剂技术水平低，服用剂量较大，服药间隔时间短等的突出问题。绝大多数青蒿素类化合物在水中的溶解度都较差，造成药物的普通口服制剂在生物体内的溶出速率很低，影响药物的吸收，导致药物不能吸收完全。药物口服肝脏代谢首过效应是造成生物利用度低的另一个重要原因，青蒿素类化合物在动物体内的生物利用度为19％-35％，绝大多数的青蒿素类药物进入生物体后在1-2h内血中药物浓度达到最大，而且药物的消除半衰期都很短。
为了解决青蒿素类化合物存在的以上问题，主要围绕着以下两个方面进行了青蒿素类化合物新剂型的研究：其一在于提高青蒿素类化合物的溶解能力，加快药物在生物体内的释放速度，主要制剂包括环糊精包合物、固体分散体、微乳、微粉、聚合物胶束溶液等，增大其溶解度，提高溶出速率；另一方面延长青蒿素类药物在生物体内的停留时间，制备其缓控释制剂，如脂质体、透皮给药制剂等，提高了该类药物的体内停留时间，改善生物利用度。
长效缓控释微球多采用可生物降解的聚合物作为骨架材料，包裹药物形成供注射途径给药的微球制剂。该制剂可在几周或几个月时间内以一定速率释放药物以维持有效血药浓度，从而可减少给药次数，且降低血药浓度的波动，以达到长效和缓释的目的。注射用微球的平均粒径一般为20-40μm，大约为头发直径的一半左右。注射用长效缓控释微球具有以下优点：使用方便，大幅减少患者给药次数，尤其适用于癌症和慢性病患者；可以提高精神病人给药的顺应性；提高药效、降低毒副作用；还有就是降低医护费用，缓解医疗资源短缺问题。当然，注射用长效缓控释微球在开发和应用的过程中也会存在一些困难：比如微球制剂一般会有的突释问题，如何优化生产工艺降低微球的突释率，确保该突释不会产生明显的毒副作用。因此，如何研发出突释低，而且释放稳定的微球产品成为微球研发的一大难点。许多因素影响微球产品的研发，导致微球的研发困难重重，自1986年首个微球产品上市以来，目前为止全球的微球产品不超过15个。青蒿素B的半衰期比其它青蒿素及其衍生物的半衰期更短，因此其成药性更为困难，导致目前国内外均未发现青蒿素B的相关制剂研究报道，亦无与其相关的药代动力学、药效学等研究报道。
发明内容
本发明主要提供了两种注射用青蒿素B微球及其制备方法。具体地，本发明提供了一种14天缓释青蒿素B，该缓释微球在缓释过程，其释放过程大致符合零级释放动力学方程，并且没有明显突释现象。
本发明公开了14天青蒿素B微球的制备步骤，具体如下：
①溶解：取一定量的青蒿素B与辅料的固体粉末一起混合均匀后加入一定量的有机溶剂充分振荡使其完全溶解；
②乳化：将步骤①所述混合溶液用乳化器在一定转速下乳化；
③固化：往步骤②所述混合溶液中加入一定量的表面活化剂水溶液，在常温、常压下，磁力搅拌器搅拌一段时间；
④冻干：将步骤③搅拌所得溶液经滤膜过滤后，加入一定量冻干保护剂水溶液，放入冻干机中冻干一定时间后出箱，过筛网得青蒿素B微球冻干粉针剂。
具体地，步骤①中所述辅料为由不同比例的羟基乙酸和聚乳酸聚合而成的共聚物(PLGA),辅料型号为75 25 5A。
具体地，步骤①中所述的原辅料的比为1:1-1:1.6，优选地，步骤①中所述的原辅料的比为1:1.3。
具体地，步骤①中所述有机溶剂为二氯甲烷。
具体地，步骤①中所述的辅料浓度(g/mL)为13.10-26.84％。优选地，步骤①中所述的辅料浓度(g/mL)为19.10％。
步骤②中所述的乳化过程中转速为1500rpm-2200rpm，优选地，步骤②中所述的乳化过程中转速为1700rpm。
步骤③中所述的表面活化剂水溶液是聚乙烯醇(PVA)水溶液，其浓度(g/mL)为0.5％， PVA用量与原料用量的质量比为50:13-450:13。
步骤③中所述的固化过程中搅拌时间为1-4h。
步骤④中所述的冻干保护剂是甘露醇水溶液，甘露醇的加入量为微球固含量的5-20％，优选地，甘露醇的加入量为微球固含量的10％。
本发明公开了7天青蒿素B微球的制备步骤，具体如下：
(1)溶解：取一定量的青蒿素B与辅料的固体粉末一起混合均匀后加入一定量的有机溶剂充分振荡使其完全溶解；
(2)乳化：将步骤(1)所述混合溶液用乳化器在一定转速下乳化；
(3)固化：往步骤(2)所述混合溶液中加入一定量的表面活化剂水溶液，在常温、常压下，磁力搅拌器搅拌一段时间；
(4)冻干：将步骤(3)搅拌所得溶液经滤膜过滤后，加入一定量冻干保护剂水溶液，放入冻干机中冻干一定时间后出箱，过筛网得青蒿素B微球冻干粉针剂。
具体地，步骤(1)中所述辅料为由不同比例的羟基乙酸和聚乳酸聚合而成的共聚物 (PLGA),辅料型号为50 50 2.5A。
具体地，步骤(1)中所述的原辅料的比为1:1.3-1:0.7，优选地，步骤(1)中所述的原辅料的比为1:1.3。
具体地，步骤(1)中所述有机溶剂为二氯甲烷。
具体地，步骤(1)中所述的辅料浓度(g/mL)为19.10％。
步骤(2)中所述的乳化过程中转速为范围1700-2000rpm优选地，步骤(2)中所述的乳化过程中转速为1800rpm。
步骤(3)中所述的表面活化剂水溶液是聚乙烯醇(PVA)水溶液，其浓度(g/mL)为0.5％，PVA用量与原料用量的质量比为50:13至450：13。
步骤(3)中所述的固化过程中搅拌时间为1-4h。
步骤(4)中所述的冻干保护剂是甘露醇水溶液，甘露醇的加入量为微球固含量的5％-20％，优选地，甘露醇的加入量为微球固含量的10％。
本发明的技术优势在于：可以获得突释小，而且释放恒定的青蒿素B微球。
附图说明
图1青蒿素B的化学结构式
图2QHSBW-190611批14天青蒿素B微球体外释放曲线图
图3QHSBW-190611批14天青蒿素B微球外部电镜图
图4QHSBW-190611批14天青蒿素B微球内部电镜图
图5处方工艺验证批14天青蒿素B微球体外释放曲线图
图6处方工艺验证批14天青蒿素B微球电镜图
图7QHSBW-191127批7天青蒿素B微球体外释放曲线图
具体实施方式
下面通过具体例子对本发明做进一步说明，但需要指出的是，以下实施例不对本发明形成任何限制。
实施例1制备缓释14天的青蒿素B
1.青蒿素B微球的制备
(1)0.5％PVA水溶液的制备。将聚乙烯醇置于洁净的5L的玻璃烧杯内，加入目标体积一半量的注射用水，搅拌使其充分溶胀后缓慢升温至70～80℃，使之完全溶解。补加注射用水定容至目标体积，配成5％(W/V)聚乙烯醇溶液，备用。临用前，用注射用水稀释至0.5％。
(2)10％甘露醇溶液的制备。称取甘露醇，加注射用水使其溶解，搅拌5分钟，配成10％(W/W)浓度。
(3)青蒿素B微球的制备。采用乳化溶剂挥发法制备青蒿素B载药微球，实验方法步骤如下：称取650mg的青蒿素B和845mg PLGA(75,25,5A)于容器内，往容器内加3.6g 的二氯甲烷充分振荡使其完全溶解，然后用高剪切混合乳化器在1700rpm转数下进行乳化，乳化在1.5L的0.5％PVA水溶液中进行，室温条件下将乳化液用磁力搅拌器进行搅拌4h使微球完全固化，再将固化液用微孔滤膜过滤后得微球湿品，最后加入1.5mL的甘露醇水溶液使微球分散均匀，经冷冻干燥得微球成品。
(4)微球冻干曲线如下表所示：
表1微球冻干曲线
2.青蒿素B体外释放方法的研究
(1)释放介质的配制。分别称取一定量的磷酸二氢钾，氢氧化钠，吐温80，加超纯水定容至一定体积，使KH2PO4和NaOH摩尔浓度为0.05mol/L，吐温80质量浓度为0.5％，然后用pH计测定并调节其pH值至7.40左右。
(2)体外释放的检测。精密称取本品约40mg，置250ml的具塞试管中，加释放介质220ml，平行制备两份，放入37℃±1℃恒温箱中静置，然后分别于放样后0h，1h，4h，8h，24h，4d， 7d，14d从试管中取溶液1ml，同时补充相同温度的释放介质1ml。将取出的溶液经0.22um微孔滤膜(水系膜)过滤，得供试品溶液，然后用HPLC测定峰面积，外标法计算其含量，并按下式计算其体外累计释放度。
其中：Ci：供试品在取样点的浓度(mg/mL) V：释放液的体积(mL)
Σmi-1：取出的样品总量(按YA-2原料量计)
A样：供试品峰面积 A对：对照品峰面积
W样：称样量(mg) D：稀释倍数
3.青蒿素B微球的电镜观察
取少量冻干后的微球粉末，将其平铺在粘有导电胶的载样台上，再用压缩空气吹去多余的粉末。然后，用离子测射仪对其进行喷金使其导电后将其放置到扫描电镜下观察其微观形态。
4.青蒿素B微球的粒径及粒径分布检测
精密称取青蒿素B微球制剂约40mg，加5mL超纯水，超声5min，转速2200rpm，然后用激光粒度仪测定其粒径及其分布情况。
5.青蒿素B微球的载药量检测
精密称取青蒿素B微球制剂约10mg，加入一定量的乙腈和甲醇(1:1)的混合液，充分振荡使其完全溶解后用0.22μm微孔滤膜(有机膜)滤过，得供试品溶液，然后用HPLC 测定峰面积，按下式计算其载药量。
其中：A样：供试品峰面积 A对：对照品峰面积
C对：对照品浓度(mg/mL) W样：称样量(mg)D：稀释倍数
6.结果
经步骤④得到的QHSBW-190611批14天青蒿素B微球体外释放结果如表2，体外释放曲线图见图2，该批次14天青蒿素B微球电镜图见图3和图4。以上数据可以看出该批次微球形态良好，体外释放结果表明，该制剂存在缓释过程，其释放过程大致符合零级释放动力学方程，并且没有明显突释现象。
表2 QHSBW-190611批14天青蒿素B微球体外释放结果
实施例2缓释14天的青蒿素B微球辅料种类筛选
考察了四种型号的PLGA，其余按照实施例1的青蒿素B微球的制备方法制备各种微球，通过电镜观察及体外释放情况选择合适的PLGA型号，结果如下。
(1)5050MN2300辅料的考察：通过对该辅料不同原辅料比例的考察(见表3)，发现无论何种比例下，该辅料制备成的固化液在经过滤膜过滤后，获得的微球的量极少，无法在实际中应用，而且将获得的其少数微球在电镜下观察其形态，发现该微球黏在一起。因此判定该辅料不适合青蒿素B微球的制备。
表3 5050MN2300辅料处方筛选表
(2)辅料5050 1A，502H的考察：
表4 5050 1A，502H辅料处方筛选察表
选用5050 1A，502H型号的PLGA进行进一步的辅料种类的探索研究(见表4)，原辅料的比例都按照1:2的进行对比研究，通过电镜观察其外观形态，结果发现用50 50 1A的PLGA制备成的青蒿素B微球成球形很差，无法得到成球规则的微球，而且微球黏在一起，因此该辅料也无法制备青蒿素B微球。而用502H制备成的青蒿素B微球成球较好，而且微球较为分散，因此对该微球进行体外释放实验，结果见表5。由结果可见，该辅料制备成的青蒿素B微球24h的释放太大，达到了38.98％，可能会对后期的药效及安全性研究带来困扰，因此需要进一步探索其它种类的辅料。
表5处方5的微球体外释放结果
(3)辅料7525 5A的考察：采用的辅料型号75 25 5A进行青蒿素B微球的制备，同时原辅料比例为1:1.3，结果发现该辅料制备的青蒿素B微球成球较好，而且分散性也较好。对其体外释放进行了进一步研究，结果见下表6所示。体外释放结果发现，该辅料制备的青蒿素B微球24h的释放较低，约15％左右，而且在24h后，其释放基本呈零级释放，基本符合设计要求。
表6 QHSBW-190514批青蒿素B微球体外释放结果
实施例3缓释14天的青蒿素B微球原辅料比例的考察
具体制备方法同实施例1，在保持辅料7525 5A浓度不变的情况下(19.10％)，通过考察不同原辅料比例对青蒿素B微球体外释放的影响以确定原辅料比例，考察的原辅料比例分别为1:1；1:1.3及1:2，考察结果如表7所示。
表7不同原辅料比例制备的微球体外释放
从实验结果可见，当原辅料比例为1:1时，其前24h的释放较快，而后13天的释放较慢，而且24h的释放无法呈线性关系；当原辅料比例为1:2时，其前24h的释放较慢，但是24h后的释放也很慢，24-96h的释放也明显高于96-336h的释放，也无法呈线性关系；而当原辅料比例为1:1-1:1.6时，其前24h的释放适中，而且其24h-336h的释放基本上呈线性关系，因此确定原辅料的比例为1:1-1:1.6，优选为1:1.3。
实施例4缓释14天的青蒿素B微球辅料浓度的考察
具体制备方法同实施例1，选用7525 5A的辅料，保持原辅料的比例1:1.3相同，分别考察辅料浓度分别为7.01％，19.10％，26.84％时制备成青蒿素B微球后对其体外释放的影响，结果见表8。
表8不同批次辅料浓度制备的微球体外释放
结果显示，当辅料浓度为7.01％和33.30％时，青蒿素B微球24h前释放均较快，而24h释放较慢，况且当辅料浓度为33.30％时，其24h后的释放不呈零级释放；而当辅料浓度为13.10％-26.84％时，整体释放较为平稳，而且基本呈零级释放，因此选定该浓度，优选为19.10％。
实施例5缓释14天的青蒿素B微球乳化转速的考察
按具体制备方法同实施例1，采用不同的乳化转数进行青蒿素B微球的制备，通过对其体外释放和粒径考察，确定合适的乳化转数，结果见表9及表10。
表9 QHSW-190514等批次微球体外释放结果
表10 QHSW-190514等批次粒径及其分布结果
由以上数据可见，乳化的转速越快，微球的粒径越小，释放越快。1300rpm时，释放较慢；当转数为3000rpm，24h的释放太快了，因此仅有当转数为1500rpm-2200rpm时，其释放较为符合要求，优选为乳化转数为1700rpm。
实施例6缓释14天的青蒿素B微球处方工艺验证
按照实施例1的处方工艺(实施例1是最优工艺)，进行了三批青蒿素B微球的制备，对其体外释放和粒径进行了检测，结果见表11，图5及图6。
表11处方工艺验证3批青蒿素B微球的体外释放结果
由体外释放和电镜图可见，按照以上确定的处方工艺制备的青蒿素B微球符合预期14 天缓释的要求，该处方工艺可行。
实施例7缓释7天青蒿素B微球的制备
(1)探索缓释7天青蒿素B微球的制备：将关键辅料PLGA的型号由75 25 5A改为 5050 2.5A，其它条件如实施例1，探索制备成青蒿素B 7天缓释微球的可能性，详见表12。由表数据可见，50 50 2.5A辅料可以基本满足青蒿素B微球7天缓释的要求。
表12 PLGA5050 2.5A制备青蒿素B微球的体外释放结果
(2)缓释7天青蒿素B微球处方工艺的优化：在以上考察结果的基础上，考虑到其释放偏低，故考察乳化转数对释放的影响，以期适当提高释放量，结果见表13。
表13 QHSW-191127批次微球的处方工艺信息及体外释放结果
由以上数据可见，乳化的转速越快，释放越快。1700rpm时，释放较慢，但最后的释放也在85％以上；当转数为2100rpm，24h的释放超过来了25％，因此当转数为1700rpm-2000rpm时，其释放较为符合要求，优选为乳化转数为1800rpm。
在固定的转数和辅料浓度的基础上，考察不同原辅料比例对微球体外释放的影响，结果见表14和图7。
表14不同原辅料比例的微球体外释放结果
由以上结果可见，当原辅料比例为1:1.6时，24h的释放大于25％，而当原辅料比例为 1:0.5时，整体释放偏慢，因此选择原辅料的比例为1:1.3-1:0.7，优选为1:1.3。
Claims (6)
1.一种14天青蒿素B微球制剂的制备方法，其制备过程主要包括以下步骤：
①溶解：取一定量的青蒿素B原料与辅料的固体粉末一起混合均匀后加入一定量的有机溶剂充分振荡使其完全溶解；
②乳化：将步骤①所述混合溶液用乳化器在一定转速下乳化；
③固化：往步骤②所述混合溶液中加入一定量的表面活化剂水溶液，在常温、常压下，磁力搅拌器搅拌一段时间；
④冻干：将步骤③搅拌所得溶液经滤膜过滤后，加入一定量冻干保护剂水溶液，放入冻干机中冻干一定时间后出箱，过筛网得青蒿素B微球冻干粉针剂；
其中，步骤①中所述辅料为羟基乙酸和聚乳酸聚合而成的共聚物(PLGA),辅料型号为75 25 5A；原辅料的比为1:1-1:1.6；辅料浓度(g/mL)为13.10-26.84；步骤②中所述的乳化过程中转速为1500rpm-2200rpm；步骤③中所述的表面活化剂水溶液是聚乙烯醇(PVA)水溶液，其浓度(g/mL)为0.5％，PVA用量与原料用量的质量比为50:13-450:13。
2.根据权利要求1所述青蒿素B微球的制备方法，其特征在于，步骤①中所述的原辅料的比为1:1.3。
3.根据权利要求2所述青蒿素B微球的制备方法，其特征在于，步骤①中所述的辅料浓度(g/mL)为19.10％。
4.根据权利要求3所述青蒿素B微球的制备方法，其特征在于，步骤②中所述的乳化过程中转速为1700rpm。
5.根据权利要求4所述的青蒿素B微球的制备方法，其特征在于，步骤①中所述有机溶剂为甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、二氯甲烷、三氯甲烷，DMSO、DMF中的一种或多种。
6.根据权利要求5所述的青蒿素B微球的制备方法，其特征在于，步骤④中所述的冻干保护剂是甘露醇水溶液，甘露醇的加入量为微球固含量的5％–20％。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110263343.7A CN115068427B (zh) | 2021-03-11 | 2021-03-11 | 缓释7天及缓释14天的青蒿素b微球及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110263343.7A CN115068427B (zh) | 2021-03-11 | 2021-03-11 | 缓释7天及缓释14天的青蒿素b微球及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115068427A CN115068427A (zh) | 2022-09-20 |
| CN115068427B true CN115068427B (zh) | 2024-01-30 |
Family
ID=83241012
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110263343.7A Active CN115068427B (zh) | 2021-03-11 | 2021-03-11 | 缓释7天及缓释14天的青蒿素b微球及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115068427B (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106265632A (zh) * | 2015-05-25 | 2017-01-04 | 于荣敏 | 青蒿素b抑制a549细胞迁移侵袭的作用 |
| CN110302171A (zh) * | 2019-07-12 | 2019-10-08 | 山东大学 | 一种瘤内注射用sn-38-plga缓释微球及其制备方法和应用 |
| CN110917176A (zh) * | 2018-08-31 | 2020-03-27 | 中科微针（北京）科技有限公司 | 一种可植入型缓释微针贴片及其制备方法 |
| CN111346055A (zh) * | 2020-03-10 | 2020-06-30 | 于荣敏 | 一种青蒿素b聚合物胶束制剂及其制备与表征方法 |
-
2021
- 2021-03-11 CN CN202110263343.7A patent/CN115068427B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106265632A (zh) * | 2015-05-25 | 2017-01-04 | 于荣敏 | 青蒿素b抑制a549细胞迁移侵袭的作用 |
| CN110917176A (zh) * | 2018-08-31 | 2020-03-27 | 中科微针（北京）科技有限公司 | 一种可植入型缓释微针贴片及其制备方法 |
| CN110302171A (zh) * | 2019-07-12 | 2019-10-08 | 山东大学 | 一种瘤内注射用sn-38-plga缓释微球及其制备方法和应用 |
| CN111346055A (zh) * | 2020-03-10 | 2020-06-30 | 于荣敏 | 一种青蒿素b聚合物胶束制剂及其制备与表征方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| WANG Yanqing ET AL..Development of Arteannuin B Sustained-Release Microspheres for Anti-Tumor Therapy by Integrated Experimental and Molecular Modeling Approaches.2021,第13卷(第8期),1236:e1-21. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115068427A (zh) | 2022-09-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20100291200A1 (en) | Formulations for poorly soluble drugs | |
| CN102670518B (zh) | 一种难溶性药物球形颗粒的制备方法 | |
| CN101327182B (zh) | 一种水难溶性药物的纳米晶体纤维毡的制备 | |
| US9283190B2 (en) | Highly efficient and long-acting slow-release formulation of poorly soluble drugs and preparation method thereof | |
| Shadambikar et al. | Formulation development of itraconazole PEGylated nano-lipid carriers for pulmonary aspergillosis using hot-melt extrusion technology | |
| CN104163915A (zh) | 胆固醇-泊洛沙姆-胆固醇三嵌段共聚物及其制备方法和应用 | |
| CN111346060A (zh) | 一种释药速度可控的乙基纤维素掩味微球及其制备 | |
| CN106727336A (zh) | 冬凌草甲素立方液晶纳米粒及其制备方法 | |
| US8962017B2 (en) | Formulation of silymarin with high efficacy and prolonged action and the preparation method thereof | |
| CN103751787A (zh) | 维生素e tpgs在制备多孔药物载体微粒中的用途 | |
| CN101984958B (zh) | 纳米级阿苯达唑微粉及其制备方法 | |
| CN102357075A (zh) | 一种多西他赛纳米制剂及其制备方法 | |
| US9023388B2 (en) | Formulation of silibinin with high efficacy and prolonged action and the preparation method thereof | |
| CN103585113B (zh) | 一种芹菜素聚乳酸缓释微球及其制备方法 | |
| CN113413372A (zh) | 一种基于阿立哌唑微晶凝聚体的长效可注射微球及其制备方法 | |
| CN106389336B (zh) | 液晶纳米粒前体微粒、自组装液晶纳米粒及其制备方法 | |
| CN115068427B (zh) | 缓释7天及缓释14天的青蒿素b微球及其制备方法 | |
| CN102028655B (zh) | 扎那米韦固体脂质纳米粒的口服制剂及其制备方法 | |
| CN101810586B (zh) | 左旋多巴甲酯缓释微球组合物及其制备方法 | |
| CN101040847B (zh) | 一种采用氢化蓖麻油生产的纳米药物制剂及其制备工艺 | |
| Soujanya et al. | A Review on Novel Vesicular Drug Delivery System: Proniosomes. | |
| CN105412022A (zh) | 一种银杏内酯b速释微丸及其制备方法 | |
| CN100375635C (zh) | 一种水溶性抗癌药物缓释纤维制剂及其制备方法 | |
| CN105693544B (zh) | 用于抗肿瘤药物递送的小分子材料及制备方法和应用 | |
| Saini et al. | Formulation and in-vitro evaluation of Glipizide (Anti diabetic drug) Liposphere |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |