CN115040579B - 一种烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及中药制药技术领域的二次发酵中止核心技术。该烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂的制备方法包括：S1备料：按照中药君臣佐使方剂处方，君药：大黄、苦参、黄柏、紫草；臣药：三七、龙胆草、马齿苋；佐使药：蜂胶和辅料。S2分别煎煮：获得提取液；S3一次发酵：按照君药和臣药提取液混合后接种灵芝菌种，进行一次发酵；S4二次发酵：对一次发酵液灭菌后接种灵芝菌进行二次发酵，发酵中止调控技术获得中间代谢产物；S5喷雾剂制备：加入佐使药及抛射剂制备成喷雾剂；S6凝胶剂制备。本发明为运用中医药理论、中医药典籍、民族药经验瑰宝与高科技生物二次发酵中止调控技术相结合，制备出安全、可靠的烧烫伤抗菌喷雾剂及凝胶剂。

Description

一种烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂的制备方法

技术领域

本发明涉及中药制药技术领域，具体涉及一种烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂的制备方法。

背景技术

烧烫伤是生活中常见的意外伤害，是指由于热能(包括火焰、蒸汽、热水或热固体)、电能、化学物质、放射线等作用于人体，而导致的皮肤损伤，为一种常见病。其临床表现根据受伤程度和面积大小而有所不同，轻者以红、肿、热、痛或皮肤起水泡为主要临床表现；重者可深入肌肉、骨骼，并造成休克、感染等全身变化，严重者可导致死亡。

目前，针对烧烫伤，市场常见治疗药物仍以含“抗生素”、“磺胺类”类的西药为主，上述药物均具有程度不等的不良反应或副作用。而治疗烧烫伤的中药配方虽然在我国民间较为广泛应用，但其药材组与配方比例也各不相同，治疗效果参差不齐，特别是中医药在抗菌功能方面的缺陷，导致制法先进、质量可控、疗效可靠的中药烧烫伤治疗药物屈指可数。

因此，临床上治疗烧烫伤还缺乏疗效比较理想的药物。所以我公司研发出的烧烫伤护理抗菌凝胶剂、烧烫伤护理抗菌喷雾剂用以解决上述问题。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂的制备方法，应用生物二次发酵技术、休克调控技术与中医药理论结合，制备出一种质量可控，疗效可靠，使用方便，无不良反应或副作用的临床治疗烧烫伤药物。

本发明的技术方案是这样实现的：一种烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂的制备方法，其特征在于：一种烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂的发酵工艺方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1)、备料：准备以下质量克数的各组分：

君药:大黄10～20g、苦参5～12g、黄柏6～15g、紫草10～20g；

臣药：三七1～3g、龙胆草2～5g、马齿苋1～2g；

佐使药：蜂胶1～2g；

辅料：卡波姆0.5～1g、琼脂1～2g、乙醇溶液20～40g、纯化水适量；

S2)、提取：将君药和臣药分别按量投入各自的提取容器中，各加入4～8 倍纯化水没过药材，浸润12～24小时后，煮沸，保持沸腾20分钟，并经100 目过滤得提取液，按比例混合提取液，得到合并提取液，混匀、待用；

S3)、一次发酵：将合并提取液接种菌种(灵芝菌Ganoderma Lucidum(Leyss.exFr.)Karst)进行一次发酵，发酵时间18～24小时，发酵温度26～ 32℃，发酵完成，高温灭菌后静置12小时，获得一次发酵液；

S4)、二次发酵：将得到的一次发酵液继续接种菌种(灵芝菌Ganoderma Lucidum(Leyss.exFr.)Karst)进行二次发酵，发酵温度26～32℃，获得高活性抗生剂中间代谢发酵液；

S5)、分散助溶：将步骤S4得到的中间代谢发酵液采用分散助溶处理，使呈混悬液状的微溶性高活性抗菌聚集物分散溶解，得到澄清发酵原液；

S6)、抗菌喷雾剂制备：将步骤S5得到的澄清发酵原液经静置、过滤后加入抛射剂调节喷雾剂的总量，最后经检验，灌装至喷雾瓶中，得到所述的烧烫伤护理抗菌喷雾剂成品；

S7)、抗菌凝胶剂制备：按量称取卡波姆，在快速搅拌中缓慢匀速加入10～ 20倍量的纯化水，使其充分溶胀，静置12～24小时待用，得到凝胶剂；按量取佐使药和制得的凝胶剂，加入至步骤S5得到的澄清发酵原液中搅拌均匀，定容制得1000ml抗菌凝胶剂待包装品；最后经检验,将待包品灌装至复合软管中，得到所述的烧烫伤护理抗菌凝胶剂成品。

所述步骤S3中，在100～120℃温度下，灭菌时间3～5分钟。

所述步骤S4中，根据发酵液的性状改变、pH值改变为指示节点，以休克调控中止技术停止发酵，获得高活性抗生剂中间代谢发酵液。

所述步骤S7中，加入澄清发酵原液中搅拌30分钟，所述复合软管规格为 30g/支或60g/支。

还包括S8包装步骤，所述包装包括将单位制剂产品贴标、装盒、装箱、获得成品，入库抽检。

本发明解决了背景技术中存在的缺陷,具有以下有益效果：

本发明提供一种烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂的制备方法，应用生物二次发酵技术、休克调控技术与中医药理论结合，制备出一种质量可控，疗效可靠，使用方便，无不良反应或副作用的临床治疗烧烫伤药物。具体有以下优点：

1、突破了传统中医药在抗菌领域弱的缺陷和空白。

通过生物二次发酵调控技术与中医药理论结合，制备出的《烧烫伤护理抗菌凝胶剂》、《烧烫伤护理抗菌喷雾剂》，具有能抑制杀灭烧烫伤引起创口感染的多种致病微生物，包括金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、弗氏枸橼酸杆菌、白色念珠菌、病毒、衣原体、支原体以及厌氧菌、耐药菌等。而且能用于清理创口创面，止痛、消炎、化瘀、生肌，促进愈合。这两大作用，大大提高了该两类药物的治疗功效和应用范围。突破了传统中医药在抗菌领域弱的缺陷和空白。

2、具有无毒副作用、无刺激性、无过敏反应的中医药优良属性和特点。

3、杀菌机理的突破与创新：经过对其杀菌机理和作用深入系统的研究，它的杀菌机理和作用原理独特，具有高效抑制杀灭其它病毒、衣原体、支原体、细菌、真菌等感染呼吸系统的致病微生物的作用；其杀菌机理和作用为直接迅速渗透到菌体内部，使菌体全面被破坏，菌体凝聚成团絮状，迅速融蚀彻底死亡，且不可能再产生变异菌株、超级细菌和耐药菌。

4、抛射剂。ICU重症室的应用。烧烫伤护理抗菌喷雾剂还可制备成抛射剂用于火灾等突发事件人员抢救，对抢救出的伤员进行第一时间的创面消，还可用于ICU重症室的杀菌消毒。

附图说明

图1为本发明烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂制备方法的工艺流程图；

图2为本发明受试细菌电子显微镜放大对照图。

具体实施方式

实施例1

一种烧烫伤护理抗菌喷雾剂的制备方法，如附图1工艺路线图及工艺技术参数所示，其特征在于，包括以下步骤：

S1)、备料：准备以下质量克数的各组分：

君药:大黄15g、苦参8g、黄柏10g、紫草12g；

臣药：三七2g、龙胆草3g、马齿苋1.5g；

佐使药：蜂胶1.5g；

辅料：纯化水500～1000ml、卡波姆0.8g、琼脂1.5g，乙醇溶液25g；

S2)、提取：将君药和臣药分别按量投入各自的提取容器中，各加入6.5倍纯化水没过药材，浸润12～24小时后，煮沸，保持沸腾20分钟，并经100 目过滤得提取液，按比例混合提取液，得到合并提取液，混匀，待用；

S3)、一次发酵：将合并提取液接种1号菌种(灵芝菌Ganoderma Lucidum(Leyss.exFr.)Karst)进行一次发酵，发酵时间18～24小时，发酵温度26～ 32℃，发酵完成，高温灭菌后静置12小时，获得一次发酵液；灭菌在100～120℃温度下，灭菌时间3～5分钟。

生产用菌种为灵芝菌Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr)

性状:通常所称的灵芝指灵芝的子实体，在本发明中主要使用灵芝的菌丝体作为发酵用菌种。菌丝体培养特征及镜检:菌种接种于马铃薯培养基斜面，温度为 24-26C,培养时间120小时生长出无色或近白色絮状菌丝体，或做平板单菌落培养，菌落呈不规则无色或近白色絮状菌丝体，边缘呈辐射状。将上述菌种接种在马铃薯培养液中，在24～35℃温度下，摇床培养180～220次分钟，PH值自然，培养5～7天，制成菌悬液，作为第一次和第二次发酵用菌种(菌悬液)。

S4)、二次发酵：将得到的一次发酵液继续接种2号菌种(灵芝菌GanodermaLucidum(Leyss.exFr.)Karst)进行二次发酵，发酵温度26～32℃，获得高活性杀灭细菌、真菌、衣原体、支原体、病毒等致病微生物的中间代谢产物；根据发酵液的性状改变、pH值改变为指示节点，以休克调控中止技术停止发酵，获得高活性抗生剂中间代谢发酵液。

S5)、分散助溶：将步骤S4得到的中间代谢发酵液采用分散助溶处理，使使呈混悬液状的微溶性高活性抗菌聚集物分散溶解，得到澄清发酵原液；

S6)、抗菌喷雾剂制备：将步骤S5得到的澄清发酵原液经静置、过滤后加入抛射剂调节喷雾剂的总量，最后经检验，灌装至喷雾瓶中，得到所述的烧烫伤护理抗菌喷雾剂成品。

S7)、包装：包装包括将单位制剂产品贴标、装盒、装箱、获得成品，入库抽检，得到烧烫伤护理抗菌喷雾剂。

本发明的实施过程是：本发明将二次发酵中止技术、休克调控技术相结合，研发出具有抑制杀灭感染烧烫伤的致病微生物(细菌、病毒、霉菌、衣原体及支原体)功效的原创性现代中药抗生剂。本发明制备的烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂杀菌机理独特，能直接迅速地渗透到菌体内部，使菌体全面被破坏，菌体凝聚成团絮状，被迅速融蚀，彻底死亡，且不可能再产生变异菌株、超级细菌和耐药菌。其杀菌范围包括细菌、霉菌、衣原体、支原体、病毒等感染致病微生物。成果大大超过了抗菌素只能抑制杀灭细菌的作用和范围。如附图2所示的受试细菌电子显微镜放大对照图，其左图为未经处理过的对照受试菌体的电子显微镜图片，受试菌体细胞完整,细胞壁光滑、细胞质和核物质清晰。右图为经本发明烧烫伤护理抗菌凝胶剂处理的对照受试菌体，可见受试菌体被全面破坏,凝聚成团絮状融蚀死亡,菌体根本不可能逆转再修复成超级细菌或耐药菌。

此外，本发明通过分散助溶技术，将发酵液中的微溶性高活性抗菌成分聚集物扩散溶解，均匀分散于抗菌凝胶剂中，提升了药物功效。本发明具有安全、高效、快速、同时杀灭6大类致病微生物的功效，杀菌范围大大超过抗菌素只能抑制杀灭细菌的作用。产品还应用了中药处方君臣佐使药物，有助于干燥创面、生肌结痂、止痛消炎。

实施例2

一种烧烫伤护理抗菌凝胶剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1)、备料：准备以下质量克数的各组分：

君药:大黄20g、苦参12g、黄柏15g、紫草20g；

臣药：三七3g、龙胆草5g、马齿苋2g；

佐使药：蜂胶2g；

辅料：纯化水500～1000ml、卡波姆1g、琼脂2g；

S2)、提取：将君药和臣药分别按量投入各自的提取容器中，各加入4～8 倍纯化水没过药材，浸润12～24小时后，煮沸，保持沸腾20分钟，并经100 目过滤得提取液，按比例混合提取液，得到合并提取液，混匀，待用。

S3)、一次发酵：将合并提取液接种1号菌种(灵芝菌Ganoderma Lucidum(Leyss.exFr.)Karst)进行一次发酵，发酵时间18～24小时，发酵温度26～ 32℃，发酵完成，高温灭菌后静置12小时，获得一次发酵液；灭菌在100～120℃温度下，灭菌时间3～5分钟。

S4)、二次发酵：将得到的一次发酵液继续接种2号菌种(灵芝菌GanodermaLucidum(Leyss.exFr.)Karst)进行二次发酵，发酵温度26～32℃，获得高活性杀灭细菌、真菌、衣原体、支原体、病毒等致病微生物的中间代谢产物；根据发酵液的性状改变、pH值改变为指示节点，以休克调控中止技术停止发酵，获得高活性抗生剂中间代谢发酵液。

S5)、分散助溶：将步骤S4得到的中间代谢发酵液采用分散助溶处理，使使呈混悬液状的微溶性高活性抗菌聚集物分散溶解，得到澄清发酵原液；

S6)、抗菌凝胶剂制备：按量称取卡波姆，在快速搅拌中缓慢匀速加入10～ 20倍量的纯化水，使其充分溶胀，静置12～24小时待用，得到凝胶剂；

按量取佐使药和制得的凝胶剂，加入至步骤S5得到的澄清发酵原液中搅拌均匀，加水定容制得1000ml抗菌凝胶剂待包装品；最后经检验,将待包品灌装至复合软管中，得到所述的烧烫伤护理抗菌凝胶剂成品。复合软管规格为30g/ 支或60g/支。

S7)、包装：包装包括将单位制剂产品贴标、装盒、装箱、获得成品，入库抽检，得到烧烫伤护理抗菌凝胶剂成品。

试验测试：

2019年6月～2020年6月，将30例年龄相仿的Ⅱ度烫伤的男性患者随机平均分成A、B、C三组。三组无显著性差异，具有可比性。A组患者施用实施例1中的烧烫伤护理抗菌喷雾剂，B组患者施用实施例2中的烧烫伤护理抗菌凝胶剂，C组患者施用现有药店里购买的普通烧烫伤药膏。药物喷涂或涂抹于伤口处，每组患者均一日施药三次，且用量相当，观察各项指标，记录各组患者的康复时间，具体观察指标如下：

1、对皮肤感染创面进行仔细观察，记录创面颜色变化，有无脓性分泌物渗出，是否出现溃疡、流血、结痂等现象。

2、用0.1cm×0.1cm标准透明计算方格纸覆盖于伤口上，进行创面愈合百分率的测定。

愈合率＝[(An-1-An)/An-1]×100％

式中An-1＝烫伤后第n-1天创面面积，An＝用药后第n天创面面积(开放创面)。计算结果见表1：

表1

处理	1～5天愈合率	16～20天愈合率	22～26天愈合率	总愈合时间
					实施例1	14.88％	76.5％	89.5％	32.2天
实施例2	15.1％	78.5％	90.3％	31.5天
					实施例3	4.65％	56.3％	75.8％	42.3天

由表1可见，A、B组患者的平均康复时间短于C组患者的平均康复时间，因此，实施例1及实施例2中所制备的烧烫伤护理抗菌喷雾剂和凝胶剂的治疗效果要优于现有的烧烫伤药膏。

毒性试验：

为开展本发明产品的安全性研究，已委托权威实验室进行动物模型的皮肤急性毒性、刺激、过敏反应试验、眼刺激试验、长期毒性试验。

结论表明：

(1)本品对家兔未产生经皮急性毒性作用，对家兔皮肤无刺激性作用，对豚鼠皮肤无致敏性作用。对家兔长期大剂量经皮给药后，局部皮肤无刺激作用，未引起中毒反应；血液学及血清生化指标未见异常。对新西兰大白兔无急性眼刺激作用。

(2)本品对家兔皮肤给药长期毒性试验病理组织学切片观察，结果证实对肺、脑、心、肝、肾、胃、肠、脾、皮肤、甲状腺、肾上腺、睾丸、卵巢、骨髓等组织加大使用4倍于常规剂量后，均无毒性反应。

表明该药的安全性大，属于无毒级别。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1)、备料：准备以下质量克数的各组分：

君药:大黄10～20g、苦参5～12g、黄柏6～15g、紫草10～20g；

臣药：三七1～3g、龙胆草2～5g、马齿苋1～2g；

佐使药：蜂胶1～2g；

辅料：卡波姆0.5～1g、琼脂1～2g、乙醇溶液20～40g、纯化水适量；

S2)、提取：将君药和臣药分别按量投入各自的提取容器中，各加入4～8倍纯化水没过药材，浸润12～24小时后，煮沸，保持沸腾20分钟，并经100目过滤得提取液，按比例混合提取液，得到合并提取液，混匀、待用；

S3)、一次发酵：将合并提取液接种菌种灵芝菌Ganoderma Lucidum(Leyss.exFr.)Karst进行一次发酵，发酵时间18～24小时，发酵温度26～32℃，发酵完成，100～120℃高温灭菌后静置12小时，获得一次发酵液；

S4)、二次发酵：将得到的一次发酵液继续接种菌种灵芝菌Ganoderma Lucidum(Leyss.exFr.)Karst进行二次发酵，发酵温度26～32℃，获得高活性抗生剂中间代谢发酵液；

S5)、分散助溶：将步骤S4得到的中间代谢发酵液采用分散助溶处理，使呈混悬液状的微溶性高活性抗菌聚集物分散溶解，得到澄清发酵原液；

S6)、抗菌喷雾剂制备：将步骤S5得到的澄清发酵原液经静置、过滤后加入抛射剂调节喷雾剂的总量，最后经检验，灌装至喷雾瓶中，得到所述的烧烫伤护理抗菌喷雾剂成品；

S7)、抗菌凝胶剂制备：按量称取卡波姆，在快速搅拌中缓慢匀速加入10～20倍量的纯化水，使其充分溶胀，静置12～24小时待用，得到凝胶剂；按量取佐使药和制得的凝胶剂，加入至步骤S5得到的澄清发酵原液中搅拌均匀，定容制得1000ml抗菌凝胶剂待包装品；最后经检验,将待包品灌装至复合软管中，得到所述的烧烫伤护理抗菌凝胶剂成品。

2.根据权利要求1所述的烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂的制备方法，其特征在于：所述步骤S3中，灭菌时间3～5分钟。

3.根据权利要求1所述的烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂的制备方法，其特征在于：所述步骤S4中，根据发酵液的性状改变、pH值改变为指示节点，以休克调控中止技术停止发酵，获得高活性抗生剂中间代谢发酵液。

4.根据权利要求1所述的烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂的制备方法，其特征在于：所述步骤S7中，加入澄清发酵原液中搅拌30分钟，所述复合软管规格为30g/支或60g/支。

5.根据权利要求1所述的烧烫伤护理抗菌凝胶剂、喷雾剂的制备方法，其特征在于：还包括S8包装步骤，所述包装包括将单位制剂产品贴标、装盒、装箱、获得成品，入库抽检。