CN115039766B - 一种常温猪精液稀释剂 - Google Patents

一种常温猪精液稀释剂 Download PDF

Info

Publication number
CN115039766B
CN115039766B CN202210970561.9A CN202210970561A CN115039766B CN 115039766 B CN115039766 B CN 115039766B CN 202210970561 A CN202210970561 A CN 202210970561A CN 115039766 B CN115039766 B CN 115039766B
Authority
CN
China
Prior art keywords
temperature
sperm
diluent
normal
boar
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202210970561.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN115039766A (zh
Inventor
赵勇
周业勋
张鹏飞
张宏福
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Animal Science of CAAS
Original Assignee
Institute of Animal Science of CAAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Animal Science of CAAS filed Critical Institute of Animal Science of CAAS
Priority to CN202210970561.9A priority Critical patent/CN115039766B/zh
Publication of CN115039766A publication Critical patent/CN115039766A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN115039766B publication Critical patent/CN115039766B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
    • A01N1/0226—Physiologically active agents, i.e. substances affecting physiological processes of cells and tissue to be preserved, e.g. anti-oxidants or nutrients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
    • A01N1/0215—Disinfecting agents, e.g. antimicrobials for preserving living parts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/02—Preservation of living parts
    • A01N1/0205—Chemical aspects
    • A01N1/021—Preservation or perfusion media, liquids, solids or gases used in the preservation of cells, tissue, organs or bodily fluids
    • A01N1/0221—Freeze-process protecting agents, i.e. substances protecting cells from effects of the physical process, e.g. cryoprotectants, osmolarity regulators like oncotic agents

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

本发明涉及人工授精领域，具体涉及一种常温猪精液稀释剂。根据本发明的常温猪精液稀释剂，活性组分包括DSO、DSFO和MP，能够保护猪精子膜完整性，维持猪精子活力、顶体功能，最终提高猪精子的受精能力。利用本发明的常温猪精液稀释剂，猪精液常温保存时间10天以上，精子活力80%以上，畸形率低于10%，精子顶体完整性高于85.8%。此猪精液稀释保存剂在低温保藏中效果更佳。同时，该稀释剂使用方便，适于广泛推广，对促进生猪产业健康持续发展具有重要意义。

Description

一种常温猪精液稀释剂
技术领域
本发明涉及人工授精领域，具体涉及一种常温猪精液稀释剂。
背景技术
随着人工授精技术的广泛应用，对种公猪精液品质的要求也越来越高，那么对猪精保存的技要求也越来越高，猪精液保存的效果好坏一直是限制优秀种公猪发挥优势的重要因素。
目前稀释剂价格较贵，增加了养殖成本，如何改善精液稀释剂的配方，从而让猪精液品质在常温状态下保存时间更久，并且降低人工授精的成本，是当今养猪事业发展待攻克的难题。现有的常用的猪精液稀释液基础配方主要成分包括葡萄糖、柠檬酸钠、氯化钾、EDTA-2Na、三羟甲基甲烷、柠檬酸、碳酸氢钠、青霉素、链霉素等。
海藻寡糖（DSO）有多种生物学功能，降低血糖、血脂，调整肠道健康，解毒抗凝血、抗炎、免疫调节等作用，已经在医药、食品添加剂、饲料添加剂等领域得到广泛应用。深海鱼油（DSFO）含有丰富的EPA（二十碳五烯酸）、DHA（二十二碳六烯酸），可以调节血脂，清理血栓，防止血液凝固，营养大脑、改善记忆，改善视力维护视网膜等功能，已经在婴儿奶粉、医药等领域得到广泛应用。牛奶多肽（MP）具有高生理活性，可有效美白肌肤，令肌肤紧致嫩滑，同时富含L色氨酸、安神助眠的功效，已经在美容、改善睡眠领域得到了应用。
现有技术并未报道海藻寡糖（DSO）、深海鱼油（DSFO）和牛奶多肽（MP）可以应用于到猪精液稀释液，提高猪精保存的保存质量。
发明内容
本发明的目的是提供一种常温猪精液稀释剂。
根据本发明的常温猪精液稀释剂包括基础成分以及活性成分，其中，所述活性成分包括海藻寡糖、深海鱼油和牛奶多肽。
根据本发明的常温猪精液稀释剂，包括基础成分以及活性成分，其中，所述基础成分包括葡萄糖、柠檬酸钠、氯化钾、EDTA-2Na、三羟甲基甲烷、柠檬酸、碳酸氢钠、青霉素和链霉素。
根据本发明的常温猪精液稀释剂，其中，基于1L所述常温猪精液稀释剂，所述基础成分包括葡萄糖27.5g、柠檬酸钠6.9g、 EDTA-2Na 2.35g、碳酸氢钠1.0g、氯化钾0.75g、 柠檬酸2.9g、tris5.65g、青霉素0.6g、链霉素1.0g。
根据本发明的常温猪精液稀释剂，其中，基于1L所述常温猪精液稀释剂，所述海藻寡糖的浓度为0.01~10克/升，所述深海鱼油的浓度为 0.001~1毫克/升，所述牛奶多肽的浓度为 0.1~5克/升。
根据本发明的常温猪精液稀释剂，其中，基于1L所述常温猪精液稀释剂，海藻寡糖的浓度为0.1g/L，所述深海鱼油的浓度为0.01mg/L，所述牛奶多肽的浓度为0.05g/L。
根据本申请的技术方案，首次将海藻寡糖（DSO）、深海鱼油（DSFO）和牛奶多肽（MP）应用于到猪精液稀释液，现有技术并未报道相关应用。
根据本发明的常温猪精液稀释剂，活性组分包括DSO、DSFO和MP，能够保护猪精子膜完整性，维持猪精子活力、顶体功能，最终提高猪精子的受精能力。利用本发明的常温猪精液稀释剂，猪精液常温（17-20°C）保存时间10天以上，精子活力80%以上，畸形率低于10%，精子顶体完整性高于85.8%。此猪精液稀释保存剂在低温保藏（4-8°C）中效果更佳。同时，该稀释剂使用方便，适于广泛推广，对促进生猪产业健康持续发展具有重要意义。
附图说明
图1显示常温下DSO和DSFO对保存过程中猪精子活力的影响；
图2显示常温下DSO和DSFO对保存过程中猪精子畸形率的影响；
图3显示常温下DSO和DSFO对保存过程中猪精子顶体完整性的影响；
图4显示常温下DSO、DSFO、MP对保存过程中猪精子活力的影响；
图5显示常温下DSO、DSFO、MP对保存过程中猪精子畸形率的影响；
图6常温下DSO、DSFO、MP对保存过程中猪精子畸形率的影响。
具体实施方式
本发明的常温猪精液稀释剂包括基础成分以及活性成分，其中，所述活性成分包括海藻寡糖（DSO，Deep sea seaweed oligosaccharides）、深海鱼油（DSFO，Deep sea fishoil）和牛奶多肽（MP，Milk peptides）；所述基础成分包括葡萄糖、柠檬酸钠、氯化钾、EDTA-2Na、三羟甲基甲烷、柠檬酸、碳酸氢钠、青霉素和链霉素。
根据猪精液稀释保存液的配方，基础成分在1升（1L）稀释保存液里的含量：葡萄糖27.5g，柠檬酸钠6.9g， EDTA-2Na 2.35g，碳酸氢钠1.0g，氯化钾0.75g， 柠檬酸2.9g，tris5.65g， 青霉素0.6g，链霉素1.0g。在基础成分的基础上添加了活性成分海藻寡糖（DSO，Deep seaweed oligosaccharides）、深海鱼油（DSFO，Deep sea fish oil）和牛奶多肽（MP，Milk peptides）。海藻寡糖（DSO）浓度为0.01~10克/升（g/L），深海鱼油（DSFO）0.001~1毫克/升（mg/L），牛奶多肽（MP） 0.1~5克/升（g/L）。其中DSO浓度0.1g/L最优，DSFO浓度0.01mg/L最优，MP浓度0.05g/L最优。
实施例1
基础成分在1升（1L）稀释保存液里的含量：葡萄糖27.5g，柠檬酸钠6.9g， EDTA-2Na 2.35g，碳酸氢钠1.0g，氯化钾0.75g， 柠檬酸2.9g，tris5.65g， 青霉素0.6g，链霉素1.0g。
在保持常用猪精液稀释保存剂中基础成分固定不变的条件下，优化DSO、DSFO和MP：
1、优化海藻寡糖（DSO）和深海鱼油（DSFO）的含量对精子性状的影响
优化
海藻寡糖（DSO）和深海鱼油（DSFO）的含量（1L稀释保存液）。在基础成分的基础上添加了DSO和DSFO，DSO设置4个剂量：0.01、 0.1、 1、10克/升（g/L）；DSFO设置4个剂量：0.001、 0.01、 0.1、1毫克/升（mg/L）。同时用市场上常用的猪精液稀释剂作为对照。
1.1猪精子活力
如图1所示，常温（17-20°C）保存1天（第1天），在基础成分添加了DSO和DSFO（试验组）的猪精液稀释液和对照稀释液保存猪精子活力上没有明显差异，猪精子活力都可以达到90%以上；保存第5天，对照稀释液的保存猪精子活力的能力下降显著至83.5%，而试验组猪精液稀释液保存的猪精子活力大于86.2% ；保存到第10天，对照组猪精液稀释液精子活力为77.7%，而试验组猪精液稀释液的精子活力仍保存在81.8%以上。其中，DSO浓度0.1g/L最优，DSFO浓度0.01mg/L最优，而且DSO（0.1g/L）+ DSFO（0.01mg/L）在它们的组合中最优。重复上述试验5次，图中结果显示是5次平均值±标准误。DSO和 DSFO一起添加[DSO（0.1g/L）+ DSFO（0.01mg/L）]可以更好的保存猪精子活力，具有协同增效的作用。
1.2精子畸形率
如图2所示，常温（17-20°C）保存1天（第1天），基础成分添加了DSO和DSFO的猪精液稀释液（试验组）和对照稀释液保存猪精子畸形率上没有明显差异，猪精子畸形率小于等于8.2%；保存到第10天，对照组猪精液稀释液中精子畸形率为12.4%，而试验组猪精液稀释液中精子畸形率小于9.8%。重复上述试验5次，图中结果显示是5次平均值±标准误。DSO和DSFO一起添加[DSO（0.1g/L）+ DSFO（0.01mg/L）]可以更好的保存猪精子，降低猪精子畸形率，具有协同增效的作用。
1.3顶体完整性
如图3所示，常温（17-20°C）保存1天（第1天），基础成分添加了DSO和DSFO的猪精液稀释液（试验组）和对照稀释液保存猪精子顶体完整性上没有明显差异，猪精子顶体完整性都大于90.2%；保存到第10天，对照组猪精液稀释液中精子顶体完整性为81.8%，而试验组猪精液稀释液中顶体完整性大于86.7%。重复上述试验5次，图中结果显示是5次平均值±标准误。DSO和 DSFO一起添加[DSO（0.1g/L）+ DSFO（0.01mg/L）]可以更好的保存猪精子，提高猪精子顶体完整性，具有协同增效的作用。
2、第二步在第一步的基础上，优化了牛奶多肽的含量（1L稀释保存液）。
第一步研究发现了DSO最优浓度是0.1g/L，DSFO的最优浓度是0.01mg/L。在基础成分+DSO（0.1g/L）+ DSFO（0.01mg/L）的基础上添加牛奶多肽（MP），MP设置4个剂量：0.01、0.05、 0.1、1克/升（g/L）。同时用市场上常用的猪精液稀释剂作为对照。
2.1精子活力
如图4所示，常温（17-20°C）保存1天（第1天），基础成分+DSO（0.1g/L）+ DSFO（0.01mg/L）+MP的猪精液稀释液（试验组）和对照稀释液保存猪精子活力上没有明显差异，猪精子活力都可以达到89.8%以上；保存第5天，对照稀释液的保存猪精子活力的能力显著下降至82.9%，而试验组的猪精液稀释液保存的猪精子活力>88.3% ；保存到第10天，对照组猪精液稀释液中精子活力为77.5%，而试验组猪精液稀释液中精子活力仍保存在82.4%以上。其中MP浓度0.05g/L最优，而且DSO（0.1g/L）+ DSFO（0.01mg/L）+ MP（0.05g/L）在它们的组合中最优。重复上述试验5次，图中结果显示是5次平均值±标准误。MP、DSO和 DSFO一起添加[DSO（0.1g/L）+ DSFO（0.01mg/L）+ MP（0.05g/L）]可以更好的保存猪精子活力，三者具有协同增效的作用。
2.2精子畸形率
如图5所示，常温（17-20°C）保存1天（第1天），基础成分+DSO（0.1g/L）+ DSFO（0.01mg/L）+MP的猪精液稀释液（试验组）和对照稀释液保存猪精子畸形率没有明显差异，猪精子畸形率大约8%；保存到第10天，对照组猪精液稀释液中精子畸形率为12.3%，而试验组猪精液稀释液中精子畸形率低于9.0%。重复上述试验5次，图中结果显示是5次平均值±标准误。MP、DSO和 DSFO一起添加[DSO（0.1g/L）+ DSFO（0.01mg/L）+ MP（0.05g/L）]可以更好的保存猪精子，降低猪精子畸形率，三者具有协同增效的作用。
2.3猪精顶体完整性
如图6所示，常温（17-20°C）保存1天（第1天），基础成分+DSO（0.1g/L）+ DSFO（0.01mg/L）+MP的猪精液稀释液（试验组）和对照稀释液保存猪精顶体完整性没有明显差异，猪精子顶体完整性大于89.8%；保存到第10天，对照组猪精液稀释液中精子顶体完整性为82.1%，而试验组中精子顶体完整性大于87.5%。重复上述试验5次，图中结果显示是5次平均值±标准误。MP、DSO和 DSFO一起添加[DSO（0.1g/L）+ DSFO（0.01mg/L）+ MP（0.05g/L）]可以更好的保存猪精子，提高猪精子顶体完整性，三者具有协同增效的作用。
以上实施例仅用于解释本申请的技术方案，不限定本申请的保护范围。

Claims (4)

1.一种常温猪精液稀释剂，包括基础成分以及活性成分，其特征在于，所述活性成分包括海藻寡糖、深海鱼油和牛奶多肽，基于1L所述常温猪精液稀释剂，所述海藻寡糖的浓度为0.01~10克/升，所述深海鱼油的浓度为 0.001~1毫克/升，所述牛奶多肽的浓度为 0.1~5克/升。
2.根据权利要求1所述的常温猪精液稀释剂，其特征在于，所述基础成分包括葡萄糖、柠檬酸钠、氯化钾、EDTA-2Na、三羟甲基甲烷、柠檬酸、碳酸氢钠、青霉素和链霉素。
3.根据权利要求2所述的常温猪精液稀释剂，其特征在于，基于1L所述常温猪精液稀释剂，所述基础成分包括葡萄糖27.5g、柠檬酸钠6.9g、 EDTA-2Na 2.35g、碳酸氢钠1.0g、氯化钾0.75g、 柠檬酸2.9g、tris5.65g、青霉素0.6g、链霉素1.0g。
4.根据权利要求1所述的常温猪精液稀释剂，其特征在于，基于1L所述常温猪精液稀释剂，海藻寡糖的浓度为0.1g/L，所述深海鱼油的浓度为0.01mg/L，所述牛奶多肽的浓度为0.05g/L。
CN202210970561.9A 2022-08-13 2022-08-13 一种常温猪精液稀释剂 Active CN115039766B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210970561.9A CN115039766B (zh) 2022-08-13 2022-08-13 一种常温猪精液稀释剂

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210970561.9A CN115039766B (zh) 2022-08-13 2022-08-13 一种常温猪精液稀释剂

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN115039766A CN115039766A (zh) 2022-09-13
CN115039766B true CN115039766B (zh) 2022-11-18

Family

ID=83167262

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210970561.9A Active CN115039766B (zh) 2022-08-13 2022-08-13 一种常温猪精液稀释剂

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN115039766B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101856016A (zh) * 2010-06-19 2010-10-13 张尤嘉 猪精液常温保存稀释液
CN110326612A (zh) * 2019-08-21 2019-10-15 西北农林科技大学 一种猪精液常温保存抗氧化稀释液及其制备方法

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2012203918A1 (en) * 2006-06-12 2012-07-26 The Jackson Laboratory Sperm cryoprotective media
CN101595866B (zh) * 2008-06-06 2013-05-08 上海市农业科学院 一种猪精液冻存液及猪精液处理方法
KR101799983B1 (ko) * 2009-05-26 2017-12-20 어드밴스드 바이오뉴트리션 코프. 생물학적 활성 미생물 및/또는 생활성 물질을 포함하는 안정한 건식분말 조성물 및 제조 방법
CN105211052B (zh) * 2015-10-29 2017-11-07 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 一种培养后的nkt细胞的冻存液及其制备方法
CN110742058B (zh) * 2016-06-29 2022-02-01 许红喜 一种冷冻保存动物精子的方法
CN107372460A (zh) * 2017-07-13 2017-11-24 漳州傲农现代农业开发有限公司 一种抗氧化应激的猪精液常温保存稀释剂、保存液及应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101856016A (zh) * 2010-06-19 2010-10-13 张尤嘉 猪精液常温保存稀释液
CN110326612A (zh) * 2019-08-21 2019-10-15 西北农林科技大学 一种猪精液常温保存抗氧化稀释液及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN115039766A (zh) 2022-09-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107156108A (zh) 一种外周血干细胞保存液及制备方法
CN102132819A (zh) 一种含有低聚糖的泡腾片
Habeeb et al. Negative effects of heat stress on physiological and immunity responses of farm animals
CN115039766B (zh) 一种常温猪精液稀释剂
Singh et al. Augmentation of milk production by supplementing bypass fat in dairy animals
Dahl Physiology of lactation in dairy cattle—challenges to sustainable production
RU2624868C2 (ru) Способ приготовления комплексного гелеобразного препарата для лечения и профилактики мастита у коров и комплексный гелеобразный препарат на его основе
CN103238754B (zh) 一种用于母猪快速分娩及产后康复的复合预混料及其制备工艺
Tufani et al. Rumen acidosis in small ruminants and its therapeutic management
CN110973120A (zh) 番鸭精液常温保存稀释液的配制方法
CN103651333B (zh) 一种马属动物冷冻精液稀释液及其配制方法
Bernstein et al. Replanting the severed auricle: an update
CN105311054A (zh) 一种用于水产养殖的抗应激组合物
Mahan et al. Vitamin E and selenium in swine nutrition
CN106912548A (zh) 一种对虾保鲜剂
CN111134234A (zh) 防治草鱼烂鳃病的饲料添加剂
Suzuki Electron microscopic study on myocardial lesions in thiamine-deficient rats
Patel Prevention and control of mastitis in bovines by feed supplements
Al-Kaky et al. Hematological and Hormonal Effects of Spirulina Platensis Algae Powder and Zinc Sulfate on Iraqi Local Goats During Late Pregnancy
Desroches et al. The effect of blueberry extracts and quercetin on capacitation status of stored boar sperm
CN109393391A (zh) 一种蜜炼柠檬罐头及其制作方法
Arif et al. Influence of honey on sperm traits in KUB rooster concerning cold storage
Haenlein NUTRITIONAL CAUSES OF REPRODUCTIVE PROBLEMS IN GOATS
Khalifa et al. Preservation of ram semen extender with non-traditional ingredients in liquid and frozen state
CN107307193A (zh) 一种茶多酚奶牛饲料

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant