CN115007110A - 衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱及制备方法和应用 - Google Patents
衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱及制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115007110A CN115007110A CN202210106169.XA CN202210106169A CN115007110A CN 115007110 A CN115007110 A CN 115007110A CN 202210106169 A CN202210106169 A CN 202210106169A CN 115007110 A CN115007110 A CN 115007110A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- capillary
- itaconic acid
- monolithic column
- solution
- methanol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- LVHBHZANLOWSRM-UHFFFAOYSA-N methylenebutanedioic acid Natural products OC(=O)CC(=C)C(O)=O LVHBHZANLOWSRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 49
- JAHNSTQSQJOJLO-UHFFFAOYSA-N 2-(3-fluorophenyl)-1h-imidazole Chemical compound FC1=CC=CC(C=2NC=CN=2)=C1 JAHNSTQSQJOJLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 47
- 238000002045 capillary electrochromatography Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N ammonium persulfate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- 229910001870 ammonium persulfate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 16
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 13
- 229920002565 Polyethylene Glycol 400 Polymers 0.000 claims abstract description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000013309 porous organic framework Substances 0.000 claims abstract description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 57
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 21
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 claims description 16
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 13
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 claims description 11
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 claims description 11
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 10
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 10
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 claims description 8
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 claims description 7
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 claims description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 4
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 4
- 238000007664 blowing Methods 0.000 claims description 4
- 239000010453 quartz Substances 0.000 claims description 4
- 229940126586 small molecule drug Drugs 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000010703 silicon Substances 0.000 claims description 3
- 238000006886 vinylation reaction Methods 0.000 claims description 3
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 2
- 238000002444 silanisation Methods 0.000 claims description 2
- XDLMVUHYZWKMMD-UHFFFAOYSA-N 3-trimethoxysilylpropyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CO[Si](OC)(OC)CCCOC(=O)C(C)=C XDLMVUHYZWKMMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- WORYCUOGOCBECL-UHFFFAOYSA-N methanol 3-trimethoxysilylpropyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound OC.CO[Si](OC)(OC)CCCOC(=O)C(C)=C WORYCUOGOCBECL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 abstract description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 30
- 229920000620 organic polymer Polymers 0.000 description 10
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- -1 methyl acryloyloxy propyl trimethoxysilane methanol Chemical compound 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 5
- 239000004088 foaming agent Substances 0.000 description 5
- 239000005350 fused silica glass Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 5-azacytidine Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002756 azacitidine Drugs 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000011209 electrochromatography Methods 0.000 description 2
- 238000005370 electroosmosis Methods 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 238000005220 pharmaceutical analysis Methods 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-JXOAFFINSA-N ribothymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-JXOAFFINSA-N 0.000 description 2
- MTEZSDOQASFMDI-UHFFFAOYSA-N 1-trimethoxysilylpropan-1-ol Chemical compound CCC(O)[Si](OC)(OC)OC MTEZSDOQASFMDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 1
- VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N Methyl methacrylate Chemical compound COC(=O)C(C)=C VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950000242 ancitabine Drugs 0.000 description 1
- KZOWNALBTMILAP-JBMRGDGGSA-N ancitabine hydrochloride Chemical compound Cl.N=C1C=CN2[C@@H]3O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]3OC2=N1 KZOWNALBTMILAP-JBMRGDGGSA-N 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 229940068918 polyethylene glycol 400 Drugs 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001878 scanning electron micrograph Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
- B01J20/223—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material containing metals, e.g. organo-metallic compounds, coordination complexes
- B01J20/226—Coordination polymers, e.g. metal-organic frameworks [MOF], zeolitic imidazolate frameworks [ZIF]
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36
- B01D15/3804—Affinity chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
- B01J20/282—Porous sorbents
- B01J20/285—Porous sorbents based on polymers
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
- B01J20/286—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers
- B01J20/288—Polar phases
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F220/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride ester, amide, imide or nitrile thereof
- C08F220/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms; Derivatives thereof
- C08F220/10—Esters
- C08F220/20—Esters of polyhydric alcohols or phenols, e.g. 2-hydroxyethyl (meth)acrylate or glycerol mono-(meth)acrylate
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J9/00—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof
- C08J9/28—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof by elimination of a liquid phase from a macromolecular composition or article, e.g. drying of coagulum
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/60—Construction of the column
- G01N30/6052—Construction of the column body
- G01N30/6073—Construction of the column body in open tubular form
- G01N30/6078—Capillaries
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2333/00—Characterised by the use of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical, or of salts, anhydrides, esters, amides, imides, or nitriles thereof; Derivatives of such polymers
- C08J2333/04—Characterised by the use of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical, or of salts, anhydrides, esters, amides, imides, or nitriles thereof; Derivatives of such polymers esters
- C08J2333/14—Characterised by the use of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical, or of salts, anhydrides, esters, amides, imides, or nitriles thereof; Derivatives of such polymers esters of esters containing halogen, nitrogen, sulfur, or oxygen atoms in addition to the carboxy oxygen
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Abstract
本发明提出了一种衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱及制备方法和应用，所述毛细管电色谱整体柱的固定相为：衣康酸、2‑丙烯酸‑2‑羟基‑1,3‑丙二酯、催化剂过硫酸铵在PEG 400和H2O中发生原位聚合反应，生成的多孔有机骨架整体材料。本发明提出了采用衣康酸作为功能单体通过原位聚合法制备了亲水色谱性能优异的整体柱，实现了极性核苷类药物的高效、高选择性分离分析。
Description
技术领域
本发明涉及药物分析技术领域，特别是指一种衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱及制备方法和应用。
背景技术
极性物质分析一直是分离科学领域的难点，存在反相色谱不保留或保留弱、分离度低、共流出以及正相色谱保留过强导致的不易洗脱等问题。亲水毛细管电色谱是亲水色谱和毛细管电色谱的有机结合，是实现极性物质高效、高选择性分离的一种有效途径。亲水毛细管电色谱整体柱制备方法简单，通透性好，传质速率快，分离选择性高，在极性物质分析中具有广阔的应用前景，是极性物质色谱分离研究中的重要内容。随着药物分析和生命科学的快速发展，极性物质分析需求日益增加，开发新型亲水毛细管电色谱整体柱是非常有价值的。
当前，尚且没有关于采用衣康酸作为功能单体制备亲水毛细管电色谱整体柱的研究报道。此外，现有的衣康酸键合硅胶液相色谱固定相存在制备方法复杂，成本高，分辨率低，色谱峰展宽及拖尾等问题，限制了其推广应用。开展衣康酸功能化亲水有机聚合物毛细管电色谱整体柱研究可以有效解决上述问题。
发明内容
本发明目的在于解决分离科学领域强极性物质分析面临的难题，提出了一种衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱及制备方法和应用，采用衣康酸作为功能单体通过原位聚合法制备了亲水色谱性能优异的整体柱，实现了极性核苷类药物的高效、高选择性分离分析。
本发明的技术方案是这样实现的：一种衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱，所述毛细管电色谱整体柱的固定相为：衣康酸、2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯、催化剂过硫酸铵在PEG 400和H2O中发生原位聚合反应，生成的多孔有机骨架整体材料。
进一步地，所述的固定相由以下质量百分比的组分制备：1.0％-7.0％的衣康酸，4.0％-21.0％的2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯，40.0％-53.0％的PEG 400和24.0％-42.0％的H2O，还包括催化剂过硫酸铵，过硫酸铵的用量是衣康酸和2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯总质量的1.0％-2.5％。
一种衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱的制备方法，包括以下步骤：
(1)对石英毛细管预处理，使毛细管内壁裸漏出硅羟基；
(2)对预处理后的毛细管内壁乙烯基化修饰；
(3)配置聚合物溶液，超声混合均匀且除去气泡，所述聚合物溶液包括以下质量百分比的组分：1.0％-7.0％的衣康酸，4.0％-21.0％的2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯，40.0％-53.0％的PEG 400，24.0％-42.0％的H2O，还包括催化剂过硫酸铵，过硫酸铵的用量为衣康酸和2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯总质量的1.0％-2.5％；
(4)将步骤(3)配置的均一聚合物溶液注入到步骤(2)内壁经过乙烯基化修饰的毛细管中，两端密封，55-80℃水浴反应8-20h；反应完成后，使用甲醇冲洗毛细管整体柱，除去未反应的原料，得到衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱。
进一步地，步骤(1)中，依次采用碱溶液、酸溶液依次冲洗毛细管，使毛细管内壁裸漏出硅羟基；随后用H2O、甲醇依次冲洗毛细管；最后用氮气吹干。
进一步地，所述碱溶液为NaOH溶液，酸溶液为HCl溶液。
进一步地，步骤(1)为：石英毛细管依次使用1-1.5M NaOH溶液冲洗1-2h，1-1.5MHCl溶液冲洗1-2h，超纯水冲洗1h，甲醇冲洗20min，最后用氮气吹干。
进一步地，步骤(2)中，在预处理后的毛细管中注入甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧硅烷甲醇溶液，使用Teflon两通套管连接毛细管两端成环状，放置于40-50℃水浴锅中反应10-16h；用甲醇冲洗毛细管，除去未与毛细管内壁键合的硅烷化试剂，再用氮气吹干毛细管。
进一步地，所述甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧硅烷甲醇溶液，其体积分数为40-50％。
所述的衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱在极性小分子药物分离分析中应用。
进一步地，所述的极性小分子药物为核苷类药物。
本发明的有益效果：
本发明制备了新型衣康酸功能化亲水有机聚合物毛细管电色谱整体柱，衣康酸带有丰富的羧基基团，亲水性强；羧基基团是离子化基团，解离后带负电荷，可在pH 4.5-12.0产生较强的电渗流，能够满足毛细管电色谱基于电渗流驱动流动相的要求，所制备整体柱具有优异的亲水色谱分离选择性能，实现了核苷类药物的快速高效分离分析。
本发明采用功能单体衣康酸与交联剂2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯，在二元致孔剂聚乙二醇400和超纯水中发生热引发原位聚合反应，生成多孔有机骨架整体材料。本发明的衣康酸功能化有机聚合物整体柱，制备方法简单，酸碱耐受性好，亲水色谱性能优异，重现性好；可在含有低比例有机相的流动相条件下实现极性小分子药物的快速、高效分离分析，有效降低了亲水色谱中有机相的用量，绿色经济，为极性物质分析提供了新的分析技术。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例1所制备的衣康酸功能化亲水有机聚合物毛细管电色谱整体柱的横截面扫描电镜图(A 750×；B 3000×；C 10000×)。
图2为本发明实施例1所制备亲水整体柱对极性小分子核苷类药物的电色谱分离图，图中色谱峰分别为：0.甲苯、1.碘苷、2.5-甲基尿苷、3.阿糖胞苷、4.阿扎胞苷、5.环胞苷。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
截取长35cm(内径100μm)的熔融石英毛细管，经预处理后，用注射器注入体积分数为50％(v/v)的甲基丙烯酰氧基丙基三乙氧硅烷甲醇溶液，用Teflon两通套管连接毛细管两端成环状，放置于45℃水浴锅中反应12h，对毛细管内壁进行乙烯基化修饰，然后用甲醇冲洗毛细管30min，氮气吹干待用。
将4.0％(w/w)的衣康酸，16.0％(w/w)的2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯，48.0％(w/w)的PEG 400，32.0％(w/w)的超纯水，2.0％(w/w)的衣康酸和2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯总质量的过硫酸铵，置于2mL eppendorf管中，超声15min混合均匀且除气泡，配制均一的聚合物溶液。
将上述聚合物溶液注入内壁经乙烯基化修饰的毛细管中，控制注入长度为25cm，65℃水浴反应18h。反应完成后，使用甲醇冲洗毛细管整体柱2h，除去未反应的单体、交联剂以及致孔剂、未与整体柱固定相键合的小分子聚合物等残留物，制备得到衣康酸功能化亲水有机聚合物固定相毛细管电色谱整体柱，用扫面电子显微镜观察其横截面形貌，如图1所示，整体柱固定相连续均匀，呈现出丰富的多孔结构。
将实施例1所制备的衣康酸功能化亲水有机聚合物毛细管整体柱用于电色谱分离，应用电压20kV，流动相：pH7.5 15mM NaH2PO4-Na2HPO4/乙腈(30/70，v/v)，甲苯为不保留标记物，成功实现了核苷类药物的基线分离，分离度大于1.55，色谱图如图2所示。分析物根据极性从弱到强依次被洗脱，出峰顺序依次为：甲苯﹤碘苷﹤5-甲基尿苷﹤阿糖胞苷﹤阿扎胞苷﹤环胞苷，符合亲水色谱保留机制。上述结果表明该整体柱具有良好的亲水色谱分离性能，在药物分析领域应用前景广阔。
实施例2：
截取长35cm(内径100μm)的熔融石英毛细管，经预处理后，用注射器注入体积分数为50％(v/v)的甲基丙烯酰氧基丙基三乙氧硅烷甲醇溶液，用Teflon两通套管连接毛细管两端成环状，放置于45℃水浴锅中反应12h，对毛细管内壁进行乙烯基化修饰，然后用甲醇冲洗毛细管30min，氮气吹干待用。
将6.0％(w/w)的衣康酸，14.0％(w/w)的2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯，48.0％(w/w)的PEG 400，32.0％(w/w)的超纯水，2.0％(w/w)的衣康酸和2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯总质量的过硫酸铵，置于2mL eppendorf管中，超声15min混合均匀且除气泡，配制均一的聚合物溶液。
将上述聚合物溶液注入内壁经乙烯基化修饰的毛细管中，控制注入长度为25cm，65℃水浴反应18h。反应完成后，使用甲醇冲洗毛细管整体柱2h，除去未反应的单体、交联剂以及致孔剂、未与整体柱固定相键合的小分子聚合物等残留物，制备得到衣康酸功能化亲水有机聚合物固定相毛细管电色谱整体柱。
实施例3：
截取长35cm(内径100μm)的熔融石英毛细管，经预处理后，用注射器注入体积分数为50％(v/v)的甲基丙烯酰氧基丙基三乙氧硅烷甲醇溶液，用Teflon两通套管连接毛细管两端成环状，放置于45℃水浴锅中反应12h，对毛细管内壁进行乙烯基化修饰，然后用甲醇冲洗毛细管30min，氮气吹干待用。
将5％(w/w)的衣康酸，20％(w/w)的2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯，41.3％(w/w)的PEG 400，33.7％(w/w)的超纯水，2.0％(w/w)的衣康酸和2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯总质量的过硫酸铵，置于2mL eppendorf管中，超声15min混合均匀且除气泡，配制均一的聚合物溶液。
将上述聚合物溶液注入内壁经乙烯基化修饰的毛细管中，控制注入长度为25cm，65℃水浴反应18h。反应完成后，使用甲醇冲洗毛细管整体柱2h，除去未反应的单体、交联剂以及致孔剂、未与整体柱固定相键合的小分子聚合物等残留物，制备得到衣康酸功能化亲水有机聚合物固定相毛细管电色谱整体柱。
实施例4：
截取长35cm(内径75μm)的熔融石英毛细管，经预处理后，用注射器注入体积分数为50％(v/v)的甲基丙烯酰氧基丙基三乙氧硅烷甲醇溶液，用Teflon两通套管连接毛细管两端成环状，放置于45℃水浴锅中反应12h，对毛细管内壁进行乙烯基化修饰，然后用甲醇冲洗毛细管30min，氮气吹干待用。
将4.0％(w/w)的衣康酸，16.0％(w/w)的2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯，48.0％(w/w)的PEG 400，32.0％(w/w)的超纯水，2.0％(w/w)的衣康酸和2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯总质量的过硫酸铵，置于2mL eppendorf管中，超声15min混合均匀且除气泡，配制均一的聚合物溶液。
将上述聚合物溶液注入内壁经乙烯基化修饰的毛细管中，控制注入长度为25cm，65℃水浴反应18h。反应完成后，使用甲醇冲洗毛细管整体柱2h，除去未反应的单体、交联剂以及致孔剂、未与整体柱固定相键合的小分子聚合物等残留物，制备得到衣康酸功能化亲水有机聚合物固定相毛细管电色谱整体柱。
实施例5：
截取长35cm(内径75μm)的熔融石英毛细管，经预处理后，用注射器注入体积分数为50％(v/v)的甲基丙烯酰氧基丙基三乙氧硅烷甲醇溶液，用Teflon两通套管连接毛细管两端成环状，放置于45℃水浴锅中反应12h，对毛细管内壁进行乙烯基化修饰，然后用甲醇冲洗毛细管30min，氮气吹干待用。
将7.0％(w/w)的衣康酸，21.0％(w/w)的2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯，40.0％(w/w)的PEG 400，32.0％(w/w)的超纯水，2.5％(w/w)的衣康酸和2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯总质量的过硫酸铵，置于2mL eppendorf管中，超声15min混合均匀且除气泡，配制均一的聚合物溶液。
将上述聚合物溶液注入内壁经乙烯基化修饰的毛细管中，控制注入长度为25cm，65℃水浴反应18h。反应完成后，使用甲醇冲洗毛细管整体柱2h，除去未反应的单体、交联剂以及致孔剂、未与整体柱固定相键合的小分子聚合物等残留物，制备得到衣康酸功能化亲水有机聚合物固定相毛细管电色谱整体柱。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱，其特征在于：所述毛细管电色谱整体柱的固定相为：衣康酸、2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯、催化剂过硫酸铵在PEG 400和H2O中发生原位聚合反应，生成的多孔有机骨架整体材料。
2.根据权利要求1所述的一种衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱，其特征在于：所述的固定相由以下质量百分比的组分制备：1.0％-7.0％的衣康酸，4.0％-21.0％的2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯，40.0％-53.0％的PEG 400和24.0％-42.0％的H2O，还包括催化剂过硫酸铵，过硫酸铵的用量是衣康酸和2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯总质量的1.0％-2.5％。
3.一种衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)对石英毛细管预处理，使毛细管内壁裸漏出硅羟基；
(2)对预处理后的毛细管内壁乙烯基化修饰；
(3)配置聚合物溶液，超声混合均匀且除去气泡，所述聚合物溶液包括以下质量百分比的组分：1.0％-7.0％的衣康酸，4.0％-21.0％的2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯，40.0％-53.0％的PEG 400，24.0％-42.0％的水，还包括催化剂过硫酸铵，过硫酸铵的用量为衣康酸和2-丙烯酸-2-羟基-1,3-丙二酯总质量的1.0％-2.5％；
(4)将步骤(3)配置的均一聚合物溶液注入到步骤(2)内壁经过乙烯基化修饰的毛细管中，两端密封，55-80℃水浴反应8-20h；反应完成后，使用甲醇冲洗毛细管整体柱，除去未反应的原料，得到衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，依次采用碱溶液、酸溶液依次冲洗毛细管，使毛细管内壁裸漏出硅羟基；随后用H2O、甲醇依次冲洗毛细管；最后用氮气吹干。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述碱溶液为NaOH溶液，酸溶液为HCl溶液。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)为：石英毛细管依次使用1-1.5M NaOH溶液冲洗1-2h，1-1.5M HCl溶液冲洗1-2h，超纯水冲洗1h，甲醇冲洗20min，最后用氮气吹干。
7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，在预处理后的毛细管中注入甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧硅烷甲醇溶液，使用Teflon两通套管连接毛细管两端成环状，放置于40-50℃水浴锅中反应10-16h；用甲醇冲洗毛细管，除去未与毛细管内壁键合的硅烷化试剂，再用氮气吹干毛细管。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧硅烷甲醇溶液，其体积分数为40-50％。
9.权利要求1或2所述的衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱在极性小分子药物分离分析中应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的极性小分子药物为核苷类药物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210106169.XA CN115007110B (zh) | 2022-01-28 | 2022-01-28 | 衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱及制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210106169.XA CN115007110B (zh) | 2022-01-28 | 2022-01-28 | 衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱及制备方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115007110A true CN115007110A (zh) | 2022-09-06 |
| CN115007110B CN115007110B (zh) | 2023-11-28 |
Family
ID=83066422
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210106169.XA Active CN115007110B (zh) | 2022-01-28 | 2022-01-28 | 衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱及制备方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115007110B (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107626288A (zh) * | 2017-09-29 | 2018-01-26 | 武汉大学 | 季胺碱功能化阴离子交换有机聚合物毛细管电色谱整体柱及其制备与应用 |
| CN107796887A (zh) * | 2017-09-29 | 2018-03-13 | 武汉大学 | 沸石咪唑酯骨架材料离子液体有机聚合物固定相毛细管电色谱整体柱的制备及应用 |
| CN111871394A (zh) * | 2020-07-30 | 2020-11-03 | 河南省农产品质量安全检测中心(河南省绿色食品发展中心) | 一种新型双功能基混合模式有机聚合物整体柱、其制备方法和其应用 |
-
2022
- 2022-01-28 CN CN202210106169.XA patent/CN115007110B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107626288A (zh) * | 2017-09-29 | 2018-01-26 | 武汉大学 | 季胺碱功能化阴离子交换有机聚合物毛细管电色谱整体柱及其制备与应用 |
| CN107796887A (zh) * | 2017-09-29 | 2018-03-13 | 武汉大学 | 沸石咪唑酯骨架材料离子液体有机聚合物固定相毛细管电色谱整体柱的制备及应用 |
| CN111871394A (zh) * | 2020-07-30 | 2020-11-03 | 河南省农产品质量安全检测中心(河南省绿色食品发展中心) | 一种新型双功能基混合模式有机聚合物整体柱、其制备方法和其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115007110B (zh) | 2023-11-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kanazawa et al. | Temperature-responsive chromatography using poly (N-isopropylacrylamide)-modified silica | |
| CN102617869B (zh) | 聚丙烯酸酯类及其共聚物材料亲水改性产品及其亲水改性方法 | |
| Wei et al. | Imprinted monoliths: Recent significant progress in analysis field | |
| CN102690380B (zh) | 聚丙烯酸酯类或其共聚物亲水改性的方法及其产品和用途 | |
| Huang et al. | Preparation and evaluation of molecularly imprinted polymers based on 9‐ethyladenine for the recognition of nucleotide bases in capillary electrochromatography | |
| CN106334343B (zh) | 一种琼脂糖键合硅胶杂化整体柱的制备方法及其应用 | |
| CN106693931B (zh) | 一种氨基寡糖功能化的杂化硅胶整体柱及制备方法 | |
| Zhu et al. | Recent development of monolithic materials as matrices in microcolumn separation systems | |
| JPH07507876A (ja) | キャピラリー電気泳動のための、および、一般的な表面変更のためのシロキサンジオールのコーティング | |
| CN1815224A (zh) | 一种毛细管液相色谱柱及其制备方法 | |
| CN105536293A (zh) | 一种硼酸亲和有机-硅胶杂化整体柱及其制备方法 | |
| CN107626288B (zh) | 季胺碱功能化阴离子交换有机聚合物毛细管电色谱整体柱及其制备与应用 | |
| CN115007110A (zh) | 衣康酸功能化亲水毛细管电色谱整体柱及制备方法和应用 | |
| CN109400823A (zh) | 八乙烯基-poss和二甲基丙烯酸乙二醇酯共交联的硼亲和整体柱及其制备方法 | |
| CN108187367B (zh) | 巯基衍生化l-脯氨酸型有机-无机杂化整体柱及其制备方法 | |
| CN110485165B (zh) | 具有特异性富集作用的功能化多面体低聚倍半硅氧烷改性聚合物复合涂层的制备及应用 | |
| CN1833772A (zh) | 十八烷基型整体式液相色谱微柱的制备方法 | |
| CN102059157B (zh) | 阴离子交换整体材料和以其为分离介质的常规液相色谱柱或石英毛细管柱及其制法 | |
| CN109557196A (zh) | 一种弱酸强碱型两性离子整体柱及其制备方法 | |
| CN1236308C (zh) | 辛基型微柱液相色谱整体柱的制备方法 | |
| CN103990298B (zh) | 一种外表面亲水性大孔有机-无机杂化整体柱的制备方法 | |
| CN1831526A (zh) | 一种梯度分离材料 | |
| CN103884802B (zh) | 一种失忆性贝毒分子印迹整体柱及其应用 | |
| CN102068833A (zh) | 一种多胺修饰的触须式聚合物毛细管电色谱开管柱及其制备方法 | |
| CN112934200B (zh) | 一种超分子印迹固相微萃取纤维涂层及制备方法与应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |