CN115006290A - 一种植物复方精油纳米乳及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及日用化工产品技术领域，特别是涉及一种植物复方精油纳米乳及其制备方法与应用。所述植物复方精油纳米乳包括质量份数如下的成分：表面活性剂10‑30份、助表面活性剂5‑15份、复方精油5‑15份、改性多糖0.5‑2份、水；其中，所述改性多糖为胆甾醇、琥珀酸酐与多糖反应制备；所述复方精油包括千日菊精油、雪玲云杉松针精油、柠檬草精油、酸橙叶精油和蓝桉叶精油。本发明制备的植物复方精油纳米乳分散性强、稳定性好、浓度高，显著提高了抑菌、除螨以及抑制致病酶活性等能力，具有良好的应用前景。

Description

一种植物复方精油纳米乳及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及日用化工产品技术领域，特别是涉及一种植物复方精油纳米乳及其制备方法与应用。

背景技术

皮肤是人体最表层的器官，皮肤类型基本上是天生的，而肌肤问题却是后天的，众多的皮肤问题一直给人造成巨大困扰。近年来，皮肤瘙痒、皮炎、皮疹、痤疮、头皮屑、油脂过剩等皮肤问题逐渐严重。这其中，很多病症相互影响关联，例如油脂过剩会导致螨虫寄生，螨虫会导致毛孔堵塞粗大，从而引起炎症、痤疮等一系列病变，严重影响皮肤健康。传统的抗生素药膏被用于治疗相关病症，但考虑到使用的合成抗生素的大量和毒性作用，也会影响环境和非目标生物，因此基于使用植物提取物生产的日用品的控制策略是非常有前途的替代品。

植物精油中含有多种有效成分，但植物精油的水不溶性以及高挥发性导致其应用具有局限性。精油成分在光照、空气和高温下高度不稳定，因此它们会转化成缺乏功效的降解产物。目前，通过纳米封装技术制备水性分散体是最合适的方法，特别是纳米乳液的开发。纳米乳液是均匀和各向同性的纳米分散，具有低粘度，光学透明度，热力学稳定性和具有10-200nm典型尺寸的内部(分散)相。它们通过共表面活性剂和表面活性分子的界面膜的组合而变得稳定。纳米乳是新型输送系统的绝佳候选者，具有更长的保质期，易于制备和可扩展性，并减少了外部能量输入。它们改善了水溶性差化合物的溶解，以获得更好的生物利用度，并且具有增强吸收行为的高可能性。然而，目前已有的精油纳米乳护理产品对于抑菌、除螨以及抑制致病酶活性等能力均不够理想，难以满足消费者的需求。

综上所述，亟需研发一种新型植物复方精油纳米乳，以解决现有技术中存在的问题，满足当前市场的需求。

发明内容

基于此，有必要提供一种新型植物复方精油纳米乳，以克服现有技术的不足。

本发明的一个目的在于，提供一种植物复方精油纳米乳，所述植物复方精油纳米乳包括质量份数如下的成分：

其中，

所述改性多糖为胆甾醇、琥珀酸酐与多糖反应制备；

所述复方精油包括千日菊精油、雪玲云杉松针精油、柠檬草精油、酸橙叶精油和蓝桉叶精油。

千日菊(Acmella Oleracea)又名金钮扣，为菊科金钮扣属的植物，一年生草本，在气候温暖的地区会变成多年生植物。植株小型、直立，生长快速，在秋天时开花，头花呈金黄色与红色。植物化学分析表明，千日菊提取物含有烷基酰胺、香豆素、三萜类化合物和酚类化合物，具有高效的镇静舒缓功效、减少皮肤炎症、抑制细菌、清除自由基功能。其中主要有效成分是千日菊酰胺又名金钮扣醇(spilanthol)，能抑制肌肉细胞收缩、放松面部肌肉，可以短时间内平滑皮肤，减少皱纹，与肉毒素的作用相似，另研究表明金纽扣醇具有优异的杀螨作用。

雪玲云杉(拉丁学名：P.schrenkianaFischetMey.)，被子植物门，松科，云杉属，常绿乔木，叶四棱状条形，直伸或微弯，长2-3.5厘米，宽约1.5毫米，先端锐尖，横切面菱形，四面有气孔线，上两面各有5-8条，下两面各有4-6条，是天山林海中特有的一个树种，在天山已有四千万年的生命历史，是天山上的活化石。松针精油具有优异的抗菌作用，对于阻塞的皮肤极具价值，而湿疹、干癣也可藉松针精油得到改善，还能愈合伤口，并安抚受刺激的皮肤。专利搜索发现，雪岭云杉还未用于日化用品的应用报道。

柠檬草(拉丁学名：Cymbopogon citratus(DC.)Stapf)是禾本科、香茅属的多年生密丛型具香味草本。柠檬草精油具抗菌能力，可治疗霍乱、急性胃肠炎及慢性腹泻，滋润肌肤有助于女性养颜美容之用。同时可以调节油脂分泌，有益于油性肤质和发质，可加入水中清洁皮肤，促进血液循环。

酸橙(拉丁学名：Citrus aurantium L.)是芸香科，柑橘属小乔木，枝叶密茂，刺多。叶色浓绿，质厚，翼叶倒卵形，基部狭尖。酸橙叶含芳香油量约0.2-0.5％，主要成分为芒樟醇、乙酸芳樟酯和α-松油醇，以及其他多种醇类和黄酮苷类。研究发现，酸橙叶精油具有抗氧化、抗炎以及减轻肿胀等多种生物活性。

蓝桉(拉丁学名：Eucalyptusglobulus Labill.)又名“洋草果”，是桃金娘科、桉属大乔木。桉叶油中桉叶油素含量占80-90％，同时富含单萜烯、倍半萜烯、醇、酯、醛、酮等多种天然活性成分，具有清热解毒、消炎杀菌、止痒、驱虫、抗氧化等效果。

进一步地，所述表面活性剂选自聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、吐温80和吐温20中的一种或多种。

进一步地，所述助表面活性剂选自乙醇、乙二醇、丙二醇和聚乙二醇中的一种或多种。

本发明的另一个目的在于，提供上述植物复方精油纳米乳的制备方法，包括如下步骤：

(1)制备复方精油

将植物原料粉碎后，进行微波提取，收集挥发油成分，得到所述复方精油；

(2)制备改性多糖

S1.将胆甾醇和琥珀酸酐加入无水吡啶中，反应后，加入冰盐酸，过滤、洗涤、干燥后，得到琥珀酰胆甾醇；

S2.将所述琥珀酰胆甾醇、三乙胺和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐加入二甲亚砜中，反应后得到中间产物；

S3.将多糖溶于二甲亚砜中，然后滴加所述中间产物，反应后，加入乙醇，过滤、洗涤、干燥后，得到所述改性多糖；

(3)制备植物复方精油纳米乳

L1.将表面活性剂、助表面活性剂和所述复方精油混合，得到混合油相；

L2.将所述改性多糖加入去离子水中，加热溶解后，搅拌加入到所述混合油相中，得到初乳溶液；

L3.将所述初乳溶液均质后，得到所述植物复方精油纳米乳。

进一步地，步骤(1)中，所述植物原料包括质量份数如下的成分：千日菊5-20份、雪玲云杉松针5-20、柠檬草3-10份、酸橙叶3-10份、蓝桉叶3-10份。

进一步地，步骤(1)中，所述微波提取的功率为100-200W，提取时间30-60min。

进一步地，步骤S1中，所述胆甾醇和琥珀酸酐的质量比为(4-6):4。

进一步地，步骤S1中，所述反应的时间为36-48h。

进一步地，步骤S2中，所述琥珀酰胆甾醇、三乙胺和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的质量比为1:(7-10):(15-25)。

进一步地，步骤S2中，所述反应的时间为1-3h。

进一步地，步骤S3中，所述多糖选自白及多糖、阿拉伯半乳聚糖、阿拉伯胶、半乳甘露聚糖和葡甘露聚糖中的一种或多种。

进一步地，步骤S3中，所述反应的时间为36-48h。

进一步地，步骤L2中，所述加热溶解的温度为20-50℃，搅拌速度为300-1000rpm；优选地，所述温度为30-40℃，搅拌速度为400-600rpm。

进一步地，步骤L3中，所述均质的压力为50-200MPa，均质次数为1-3次；优选地，所述均质的压力为130-160MPa，均质次数为2-3次。

本发明的另一个目的在于，提供上述植物复方精油纳米乳在个护产品中的应用，所述个护产品包括膏霜类、乳液类、油类、水类、凝胶类、手工皂类和粉类。

本发明具有以下有益效果：

1.本发明的植物复方精油纳米乳液使用安全，其原料为天然绿色植物，通过大范围原料筛选，确定了理想的原料与搭配方式，多种植物精油中的活性成分起到相互协同的作用，能够发挥更良好的抗菌、除螨、祛痘、控油、抗炎的功效。

2.本发明提供的复方精油提取方法简单便捷，极大的缩短了制备时间，节省人力以及不必要的浪费，并且适合大规模制备、重现性好。

3.本发明通过制备植物精油纳米乳，改善植物精油难溶于水以及挥发性过高的不足，通过添加大分子疏水改性多糖提高多糖亲油性，以及高压均质处理保证纳米乳尺寸恒定以及均匀分布，提高了产品的分散性和稳定性，适合用于各种个护产品商业化生产，具有良好的应用前景。

4.本发明制备的纳米乳具有更低的尺寸，其具有一定的抗菌作用，能与植物精油产生协同作用，达到更好的抗菌、除螨功效。

附图说明

图1示出了本发明测试例1中对植物复方精油纳米乳进行粒径分析的结果图。

图2示出了本发明测试例4中不同浓度下纳米乳中复方精油浓度-螨虫死亡率曲线图。

图3示出了本发明测试例5中不同浓度下纳米乳中复方精油浓度-5-α还原酶抑制活性曲线图。

具体实施方式

为了更清楚地说明本发明的技术方案，列举如下实施例。实施例中所出现的原料、反应和后处理手段，除非特别声明，均为市面上常见原料，以及本领域技术人员所熟知的技术手段。

本发明中的词语“优选的”、“优选地”、“更优选的”等是指，在某些情况下可提供某些有益效果的本发明实施方案。然而，在相同的情况下或其他情况下，其他实施方案也可能是优选的。此外，对一个或多个优选实施方案的表述并不暗示其他实施方案不可用，也并非旨在将其他实施方案排除在本发明的范围之外。

应当理解，除了在任何操作实例中，或者以其他方式指出的情况下，表示例如说明书和权利要求中使用的成分的量的所有数字应被理解为在所有情况下被术语“约”修饰。因此，除非相反指出，否则在以下说明书和所附权利要求中阐述的数值参数是根据本发明所要获得的期望性能而变化的近似值。

本发明中所述的“上、下”的含义指的是阅读者正对附图时，阅读者的上方即为上，阅读者的下方即为下，而非对本发明的装置机构的特定限定。

当部件、元件或层被称为“位于”、“结合至”、“连接至”或“联接至”另一元件或层时，其可直接位于、结合至、连接至或联接至该另一部件、元件或层，或可存在中间元件或中间层。相反，当元件被称为“直接位于”、“直接结合至”、“直接连接至”或“直接联接至”另一元件或层时，可能不存在中间元件或中间层。其他用于描述元件之间的关系的词语应当以类似的方式来进行解释(例如，“在......之间”与“直接在......之间”、“邻近”与“直接邻近”等)。本文所用术语“和/或”包括相关联的列出项中的一个或多个的任何和所有组合。

实施例1

一种植物复方精油纳米乳，所述植物复方精油纳米乳包括质量份数如下的成分：

上述植物复方精油纳米乳的制备方法包括如下步骤：

(1)制备复方精油

将15份千日菊、15份雪玲云杉松针、4份柠檬草、4份酸橙叶、4份蓝桉叶混合后，粉碎至100目，然后加入微波提取器中进行微波提取(提取功率150W，提取时间45min)，收集挥发油成分，得到所述复方精油；

(2)制备改性多糖

S1.将5g胆甾醇和4g琥珀酸酐加入50mL无水吡啶中，室温下反应48h，然后加入10％冰盐酸，过滤后用水洗涤沉淀5次，干燥后，得到琥珀酰胆甾醇；

S2.将0.3g所述琥珀酰胆甾醇、2.5g三乙胺和5.5g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐加入30mL二甲亚砜中，反应2h后得到中间产物；

S3.将100mL浓度为2％的阿拉伯半乳聚糖的二甲亚砜溶液滴入所述中间产物中，反应48h，然后加入乙醇，过滤后将沉淀用乙醇和乙醚各洗涤1次，干燥后，得到所述改性多糖；

(3)制备植物复方精油纳米乳

L1.将18g聚氧乙烯蓖麻油、9g乙二醇和10g所述复方精油混合，搅拌均匀后，得到混合油相；

L2.将0.945g所述改性多糖加入去离子水中，35℃加热溶解后，配置为浓度1.5％的溶液，600rpm磁力搅拌下将所述溶液加入到所述混合油相中，得到初乳溶液；

L3.使用高压均质仪在160MPa下将所述初乳溶液均质3次后，得到所述植物复方精油纳米乳。

实施例2

一种植物复方精油纳米乳，所述植物复方精油纳米乳包括质量份数如下的成分：

上述植物复方精油纳米乳的制备方法包括如下步骤：

(1)制备复方精油

将12份千日菊、12份雪玲云杉松针、5份柠檬草、5份酸橙叶、5份蓝桉叶混合后，粉碎至100目，然后加入微波提取器中进行微波提取(提取功率180W，提取时间50min)，收集挥发油成分，得到所述复方精油；

(2)制备改性多糖

S1.将5g胆甾醇和4g琥珀酸酐加入50mL无水吡啶中，室温下反应48h，然后加入10％冰盐酸，过滤后用水洗涤沉淀5次，干燥后，得到琥珀酰胆甾醇；

S2.将0.3g所述琥珀酰胆甾醇、2.5g三乙胺和5.5g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐加入30mL二甲亚砜中，反应2h后得到中间产物；

S3.将100mL浓度为2％的半乳甘露聚糖的二甲亚砜溶液滴入所述中间产物中，反应48h，然后加入乙醇，过滤后将沉淀用乙醇和乙醚各洗涤1次，干燥后，得到所述改性多糖；

(3)制备植物复方精油纳米乳

L1.将18g聚氧乙烯氢化蓖麻油、9g乙二醇和10g所述复方精油混合，搅拌均匀后，得到混合油相；

L2.将0.945g所述改性多糖加入去离子水中，35℃加热溶解后，配置为浓度1.5％的溶液，500rpm磁力搅拌下将所述溶液加入到所述混合油相中，得到初乳溶液；

L3.使用高压均质仪在150MPa下将所述初乳溶液均质2次后，得到所述植物复方精油纳米乳。

实施例3

一种植物复方精油纳米乳，所述植物复方精油纳米乳包括质量份数如下的成分：

上述植物复方精油纳米乳的制备方法包括如下步骤：

(1)制备复方精油

将10份千日菊、10份雪玲云杉松针、6份柠檬草、6份酸橙叶、6份蓝桉叶混合后，粉碎至100目，然后加入微波提取器中进行微波提取(提取功率130W，提取时间40min)，收集挥发油成分，得到所述复方精油；

(2)制备改性多糖

S1.将5g胆甾醇和4g琥珀酸酐加入50mL无水吡啶中，室温下反应48h，然后加入10％冰盐酸，过滤后用水洗涤沉淀5次，干燥后，得到琥珀酰胆甾醇；

S2.将0.3g所述琥珀酰胆甾醇、2.5g三乙胺和5.5g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐加入30mL二甲亚砜中，反应2h后得到中间产物；

S3.将100mL浓度为2％的阿拉伯胶的二甲亚砜溶液滴入所述中间产物中，反应48h，然后加入乙醇，过滤后将沉淀用乙醇和乙醚各洗涤1次，干燥后，得到所述改性多糖；

(3)制备植物复方精油纳米乳

L1.将18g吐温80、9g乙醇和10g所述复方精油混合，搅拌均匀后，得到混合油相；

L2.将0.945g所述改性多糖加入去离子水中，30℃加热溶解后，配置为浓度1.5％的溶液，500rpm磁力搅拌下将所述溶液加入到所述混合油相中，得到初乳溶液；

L3.使用高压均质仪在140MPa下将所述初乳溶液均质2次后，得到所述植物复方精油纳米乳。

对比例1

一种植物精油纳米乳，本对比例与实施例1的区别在于：步骤(1)中，仅使用千日菊制备精油，其他制备方法与实施例1相同。

对比例2

一种植物精油纳米乳，本对比例与实施例1的区别在于：步骤(1)中，仅使用雪玲云杉松针制备精油，其他制备方法与实施例1相同。

对比例3

一种植物精油纳米乳，本对比例与实施例1的区别在于：步骤(1)中，仅使用柠檬草制备精油，其他制备方法与实施例1相同。

对比例4

一种植物精油纳米乳，本对比例与实施例1的区别在于：步骤(1)中，仅使用酸橙叶制备精油，其他制备方法与实施例1相同。

对比例5

一种植物精油纳米乳，本对比例与实施例1的区别在于：步骤(1)中，仅使用蓝桉叶制备精油，其他制备方法与实施例1相同。

对比例6

一种植物复方精油乳液，本对比例与实施例1的区别在于：将少量DMSO加入步骤(1)制备的复方精油中，然后直接用去离子水稀释至10％浓度，得到所述植物复方精油乳液。

对比例7

一种植物精油纳米乳，本对比例与实施例1的区别在于：用大豆油代替步骤(1)制备的复方精油，其他制备方法与实施例1相同。

对比例8

一种植物复方精油纳米乳，本对比例与实施例1的区别在于：用阿拉伯半乳聚糖代替步骤(2)制备的改性多糖，其他制备方法与实施例1相同。

对比例9

一种植物复方精油纳米乳，本对比例与实施例1的区别在于：省略步骤(2)和步骤L2，步骤L3中直接对混合油相进行均质，其他制备方法与实施例1相同。

测试例1

对实施例1-3和对比例8-9制备的植物复方精油纳米乳进行粒径分析。

测试方法：

将样品在环境温度下用去离子水稀释至1％的浓度，使用Zetasizer Nano ZS90仪器(英国马尔文仪器公司)和动态光散射(DLS)评估样品的流体动力学直径，对每个样本，系统总计进行至少12次扫描。

测试结果如图1所示。

图1示出了对实施例1-3和对比例8-9制备的植物复方精油纳米乳进行粒径分析的结果图。

根据图1可以得出，实施例1、实施例2、实施例3、对比例8和对比例9的流体学直径分别为82.3nm、73.8nm、132.5nm、160.3nm和294.9nm。结果表明，本发明制备的纳米乳均一性良好，其中改性多糖的添加起到明显改善作用，比直接添加未改性多糖和不添加多糖的尺寸更小、分散性更好，同时纳米乳的尺寸还受到表面活性剂和助表面活性剂的影响。通过本发明，可以制备多尺寸的复方精油纳米乳，提高精油的利用度，用于多种个护产品。

测试例2

对实施例1-3和对比例1-9制备的植物复方精油纳米乳进行抑菌性能测试。

测试方法：

采用琼脂扩散法测定抑菌能力。具体的，取新拆封的Waltman#1滤纸，用打孔器将滤纸片打成直径为6mm的圆形状，将圆形滤纸片放在紫外超净台，紫外照射30min以灭活微生物。然后将滤纸片分别浸泡于本发明实施例1-3和对比例1-9制备的样品10min。选取大肠杆菌(ATCC 43895)、金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、白色念珠菌(ATCC 10231)、表皮葡萄球菌(ATCC 15442)、糠秕马拉色菌(ATCC 14521)和变异链球菌(ATCC 00610)为实验菌株，对各菌种活化后，稀释并均匀涂抹于琼脂培养皿平板上，然后将浸泡处理后的滤纸片贴在琼脂表面，每个样品进行三组平行实验，取平均值。同时，每个菌种使用去离子水作为空白对照。将每个培养皿分别倒置于各菌种最适温度的恒温箱中，培养24h后观察结果。使用游标卡尺测量抑菌环直径，判断各样品抑菌能力。

测试结果如表1所示。

表1抑菌性能测试结果

根据表1可以得出，实施例1-3对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、表皮葡萄球菌、糠秕马拉色菌和变异链球菌都具有良好的抑菌作用，能达到长久抑菌效果。对比例1-5与实施例1相比较，6种微生物的抗菌能力都弱于实施例1，说明多种植物精油提取物中的活性成分能够产生协同作用从而提升抑菌效果，缺少任一植物原料都不利于抑菌活性。对比例6抗菌活性略低于实施例1，表明将复方精油制备成纳米乳形式可有效提升抑菌活性，而对比例6仅为精油组成，极易挥发，且未加入改性多糖进行性能改善，因此抑菌能力不足。对比例7具有微弱的抑菌能力，表明纳米乳本身具有一定抑菌活性。对比例8抑菌能力微弱于实施例1但强于对比例9，表明多糖的添加可以提高纳米乳的抑菌活性，但将多糖进行疏水改性后，制备的纳米乳性能更加优异。

测试例3

对实施例1-3和对比例1-9制备的植物复方精油纳米乳进行除螨性能测试。

测试方法：

(1)受检者睡前彻底清洁脸部后，将长为6cm，宽为1.5cm的透明胶带贴于受检者的脸颊部位，次日揭下，用体视显微镜检测胶带上是否有螨虫；

(2)将实施例1-3和对比例1-9样品分别用去离子水稀释5倍，得到待测药液；

(3)用微量移液器吸取200μL待测药液滴加于载玻片上，用推片将药液均匀铺开，将检出蠕形螨的胶带贴于载玻片上，保证药液与虫体充分接触。然后将载玻片置于人工气候箱中(温度28℃、湿度75％)，4h后用显微镜观察蠕形螨死亡情况。同时，用等量纯净水作为空白对照组进行测试。

每组供试蠕形螨为20只，每种待测药液重复3次实验，结果取平均值。

死亡判定标准：在400倍显微镜下连续观察1min，螨体螯肢或足爪不动的初步判断为死亡，常温下30min后，再次观察足爪1min，仍然未见活动的虫体判定为死亡。

校正死亡率％＝(空白对照组存活虫数-处理组存活虫数)/空白对照组存活螨数×100％

测试结果如表2所示。

表2除螨性能测试结果

根据表2可以得出，本发明制备的复方精油纳米乳对人体蠕形螨具有显著的杀灭效果，实施例1效果明显高于对比例1-5，表明复方后的不同精油间的协同作用对除螨性能的提升显著。对比例6除螨率低于实施例1，说明制备成纳米乳形式可提高复方精油的除螨能力，同时随时间推移对比例6除螨能力减弱，这可能由于精油在长期暴露中容易挥发，这在日化用品中具有不利影响。对比例8除螨能力低于实施例1但强于对比例9，表明疏水改性多糖的添加可更好的提升除螨能力。

测试例4

不同浓度下植物复方精油纳米乳的除螨性能测试。

测试方法：

将实施例1制备的植物复方精油纳米乳用去离子水稀释为复方精油含量分别为8％、4％、2％、1％、0.5％、0.25％和0.125％的待测药液后，测试各样品除螨性能，具体测试步骤与测试例3相同，取12h为实验终点。

测试结果如表3和图2所示。

表3不同浓度下除螨性能测试结果

精油浓度/(mg/mL)	校正死亡率/％
		8％	100
4％	100
		2％	98.1
1％	80.3
		0.5％	62.6
0.25％	44.6
		0.125％	30.3

图2示出了不同浓度下纳米乳中复方精油浓度-螨虫死亡率曲线图。

根据表3和图2可以得出，实施例1制备的植物复方精油纳米乳对螨虫具有显著的杀灭效果，其杀螨效果具有浓度依赖性，在2％浓度时基本可以达到完全除螨作用。由曲线可知，复方精油浓度在1％时，螨虫致死率可以达到80％。其对螨虫的半死致死率浓度(IC₅₀值)小于0.5％。将该植物复方精油纳米乳应用于个护产品中时，建议使其最终复方精油浓度在0.25％以上。

测试例5

不同浓度下植物复方精油纳米乳对5-α还原酶抑制活性测试。

皮脂腺分泌油脂是因为雄性激素中的睾酮在5-α还原酶的作用下，被转化为二氢睾酮DHT，DHT再与皮脂腺上的雄激素受体结合后分泌油脂，降低5-α还原酶活性可以有效的控制油脂分泌。

测试方法：

取300μLpH＝7.5的Tris-HCl缓冲液，加入500μL 2g/L取自大鼠肝脏的5α-还原酶粗酶溶液，然后加入50μL 1mmol/L的睾酮溶液和50μL 1mg/mL的50％乙醇配置的不同浓度的植物复方精油纳米乳(实施例1制备)，最后加入100μL 1mmol/LNADPH，充分混匀后，将混合溶液在37℃孵育60min，然后加入1mL预冷甲醇终止反应，然后10000r/min离心5min，取上清液并用0.22μm滤膜过滤，检测睾酮剩余浓度。

抑制率％＝(1-样品管睾酮浓度的变化值/空白管睾酮浓度的变化值)×100％

测试结果如表4和图3所示。

表4不同浓度下对5-α还原酶抑制活性测试结果

图3示出了不同浓度下纳米乳中复方精油浓度-5-α还原酶抑制活性曲线图。

根据表4和图3可以得出，实施例1制备的植物复方精油纳米乳对5-α还原酶具有显著的抑制活性，其抑制效果具有浓度依赖性，在0.5％浓度时基本可以达到完全抑制作用。由曲线可知，其对5-α还原酶的半数抑制浓度(IC₅₀值)小于0.2％。该植物复方精油纳米乳应用于化妆品等日化领域时，建议使其最终复方精油浓度在0.2％以上。

测试例6

一种含植物复方精油纳米乳的除螨祛痘精华液性能测试。

一种含植物复方精油纳米乳的除螨祛痘精华液，其配方如表5所示。

表5除螨祛痘精华液配方

成分	含量/％
		植物复方精油纳米乳	10
聚乙二醇	6
		羧甲基纤维素	2
维生素B<sub>12</sub>	0.5
		透明质酸	0.2
蒸馏水	余量

制备方法：按上表含量，将聚乙二醇、羧甲基纤维素、维生素B₁₂和透明质酸加入到蒸馏水中，搅拌直至完全溶解，然后将植物复方精油纳米乳缓慢加入上述溶液中，搅拌均匀后即得除螨祛痘精华液。

测试方法：

评价对象：选择面部有痤疮、年龄为18-30岁的年轻人30例，其中男性15例，女性15例。

评价方法：采用双盲法，其中20名测试人员每天早晚于面部涂擦本测试例制备的除螨祛痘精华液5g，另10名测试人员使用常规保湿霜(将上述除螨祛痘精华液配方中的植物复方精油纳米乳替换为等量的蒸馏水，其他成分相同)为对照，测试时长为一个疗程共30天。

评价标准：①显效：痤疮消褪70％以上；②有效：痤疮消褪30％以上；③无效：痤疮消褪30％以下。

评价结果：使用常规保湿霜的10人结果均为无效。使用本测试例制备的除螨祛痘精华液的20人中，显效14例、有效4例、无效2例，总有效率达到90％，说明本除螨祛痘精华液具有良好的祛痘效果。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (10)

1.一种植物复方精油纳米乳，其特征在于，所述植物复方精油纳米乳包括质量份数如下的成分：

其中，

所述改性多糖为胆甾醇、琥珀酸酐与多糖反应制备；

所述复方精油包括千日菊精油、雪玲云杉松针精油、柠檬草精油、酸橙叶精油和蓝桉叶精油。

2.根据权利要求1所述植物复方精油纳米乳，其特征在于，所述表面活性剂选自聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、吐温80和吐温20中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述植物复方精油纳米乳，其特征在于，所述助表面活性剂选自乙醇、乙二醇、丙二醇和聚乙二醇中的一种或多种。

4.权利要求1-3任一项所述植物复方精油纳米乳的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)制备复方精油

将植物原料粉碎后，进行微波提取，收集挥发油成分，得到所述复方精油；

(2)制备改性多糖

S1.将胆甾醇和琥珀酸酐加入无水吡啶中，反应后，加入冰盐酸，过滤、洗涤、干燥后，得到琥珀酰胆甾醇；

S2.将所述琥珀酰胆甾醇、三乙胺和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐加入二甲亚砜中，反应后得到中间产物；

S3.将多糖溶于二甲亚砜中，然后滴加所述中间产物，反应后，加入乙醇，过滤、洗涤、干燥后，得到所述改性多糖；

(3)制备植物复方精油纳米乳

L1.将表面活性剂、助表面活性剂和所述复方精油混合，得到混合油相；

L2.将所述改性多糖加入去离子水中，加热溶解后，搅拌加入到所述混合油相中，得到初乳溶液；

L3.将所述初乳溶液均质后，得到所述植物复方精油纳米乳。

5.根据权利要求4所述植物复方精油纳米乳的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述植物原料包括质量份数如下的成分：千日菊5-20份、雪玲云杉松针5-20、柠檬草3-10份、酸橙叶3-10份、蓝桉叶3-10份。

6.根据权利要求4所述植物复方精油纳米乳的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述微波提取的功率为100-200W，提取时间30-60min。

7.根据权利要求4所述植物复方精油纳米乳的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述胆甾醇和琥珀酸酐的质量比为(4-6):4。

8.根据权利要求4所述植物复方精油纳米乳的制备方法，其特征在于，步骤S2中，所述琥珀酰胆甾醇、三乙胺和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的质量比为1:(7-10):(15-25)。

9.根据权利要求4所述植物复方精油纳米乳的制备方法，其特征在于，步骤S3中，所述多糖选自白及多糖、阿拉伯半乳聚糖、阿拉伯胶、半乳甘露聚糖和葡甘露聚糖中的一种或多种。

10.权利要求1-3任一项所述植物复方精油纳米乳在个护产品中的应用，其特征在于，所述个护产品包括膏霜类、乳液类、油类、水类、凝胶类、手工皂类和粉类。

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