CN114984131B - 一种用于退行性骨病的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

一种用于退行性骨病的中药组合物及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN114984131B
CN114984131B CN202210929940.3A CN202210929940A CN114984131B CN 114984131 B CN114984131 B CN 114984131B CN 202210929940 A CN202210929940 A CN 202210929940A CN 114984131 B CN114984131 B CN 114984131B
Authority
CN
China
Prior art keywords
parts
chinese
traditional chinese
chinese medicine
angelica
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202210929940.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114984131A (zh
Inventor
朱继忠
高永堂
毕明艳
廖晓燕
柳春日
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jilin Ruilong Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
Jilin Ruilong Pharmaceutical Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jilin Ruilong Pharmaceutical Co ltd filed Critical Jilin Ruilong Pharmaceutical Co ltd
Priority to CN202210929940.3A priority Critical patent/CN114984131B/zh
Publication of CN114984131A publication Critical patent/CN114984131A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114984131B publication Critical patent/CN114984131B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/56—Materials from animals other than mammals
    • A61K35/58—Reptiles
    • A61K35/586—Turtles; Tortoises, e.g. terrapins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/192—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having aromatic groups, e.g. sulindac, 2-aryl-propionic acids, ethacrynic acid 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A61K31/343—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide condensed with a carbocyclic ring, e.g. coumaran, bufuralol, befunolol, clobenfurol, amiodarone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/351—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom not condensed with another ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
    • A61K36/232—Angelica
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
    • A61K36/233—Bupleurum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/40—Cornaceae (Dogwood family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/481—Astragalus (milkvetch)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/487—Psoralea
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/52—Juglandaceae (Walnut family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/894—Dioscoreaceae (Yam family)
    • A61K36/8945—Dioscorea, e.g. yam, Chinese yam or water yam
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation or decoction

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明提供了一种用于退行性骨病的中药组合物及其制备方法，涉及中药提取物技术领域。本发明在实施过程中以桃叶珊瑚苷、丹酚酸B、阿魏酸、羟基红花黄色素A和苍术酮为药物原料与龟甲、补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪混合，通过控制其含量以及组分之间的配比，明显提高了药物组合物的相互作用，有助于退行性骨病的治疗；在实施过程中本发明采用龟甲全药材入药，不仅有利于退行性骨病的治疗，还可以提高药物的稳定性，提高药物的保存时限。

Description

一种用于退行性骨病的中药组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及中药提取物技术领域，具体涉及一种用于退行性骨病的中药组合物及其制备方法。
背景技术
骨病一般包括：风湿性关节炎、类风湿性关节炎、退行性关节炎、强直性脊柱炎、颈椎病、肩周炎、骨质增生、股骨头坏死、产后风等。退行性关节炎又称肥大性关节炎，是指一些老年人常常会有腰痛、腿痛、关节痛。由于它多见于老年人，因而也称作老年性关节炎。老年性退化，是引起退行性关节炎的主要原因。中老年后，一切组织器官都会发生退行性变化；骨和关节组织也不例外，易发生退行性变化，尤其好发于承重的关节和多活动的关节。过度的负重或过度的使用某些关节，可促进退行性变化的发生。此外，如关节内骨折、糖尿病、长期不恰当地使用肾上腺皮质激素等因素，均可促进退行性变化的形成和加速已存在的退行性变化的发展。
目前针对退行性骨病的治疗一般通过外科手术，将坏死、病变的人体自身骨组织切除、清除取出，在原处安装一个人工造的骨头部件。以解决患者在一定时间内获得行动自由。但手术风险大，费用相当高，因此越来越多的人开始尝试使用中药疗法治疗和预防退行性骨病，目前也有很多关于治疗和预防退行性骨病的现有技术公开，如中国专利申请201710259184.7中公开了一种治疗骨病的药物，由如下原料配制制成：穿破石、姜黄、牡蛎、血竭、苏木、当归、补骨脂、五加皮、走马风、甘草。该发明是治疗骨病、风湿的药物，以纯中药配制而成，配方科学合理，配置简单，无毒副作用，疗效短，见效快，对于腰间盘突出、骨质增生、腰椎管狭窄、退行性病变、骨关节炎、滑膜积液、四肢麻木、腿肚子抽筋、肌肉拉伤、骨折等病有良好的治疗效果，治愈率达95%左右。
再如中国专利申请200910093274.9中公开了一种治疗退行性骨病的药物，主要是由下述重量配比的原料制成的药剂：复合骨胶原20-60，氨基葡萄糖20-60，阿法骨化醇0.05-1.0，大豆异黄酮3-30，维生素C钙3-30，蔗糖10-60，糊精1-20、立崩1-20、硬脂酸镁0.5-10、二氧化硅5-50。其制备方法为：步骤A：清洗，选健康动物软骨作为原料，除去附着的表面杂质；步骤B：加入碱性水溶液水解，促进动物软骨的溶解，改变其分子结构；步骤C：冷却加酸中和；步骤D：过滤，除去皮质、骨粒及其它杂质；步骤 E：浓缩，蒸发水分，减少体积，易于沉淀收集，减少成份丢失；步骤F：酒精沉淀，将稀膏状物料内的有用物质沉淀析出；步骤G：脱水，向收集的沉淀物反复加入95度(以酒精比重计测)酒精，将物料内的水分渗出达到脱水的目的；步骤H：烘干并密封包装。
但是现有的中药组合物普遍存在药物有效成分溶出度低，生物利用度差，治疗效果不佳的问题，因此需要开发一种药物有效成分含量高，稳定性好，治疗效果优的中药组合物，能够更好的用于治疗退行性骨病。
发明内容
基于现有技术中存在的不足，本发明旨在提供一种药物有效成分含量高，稳定性好，治疗效果优的中药组合物，该中药提取物组合物能够更好的治疗退行性骨病。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种用于退行性骨病的中药组合物，包括以下组分：龟甲、补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁、黄芪、桃叶珊瑚苷、丹酚酸B、阿魏酸、羟基红花黄色素A和苍术酮。
优选地，所述的中药组合物，按重量份数计包括以下组分：龟甲2-5份、补骨脂20-50份、山茱萸20-50份、柴胡25-60份、当归25-60份、山药25-50份、核桃仁20-45份、黄芪20-55份、桃叶珊瑚苷0.1-0.3份、丹酚酸B 0.2-0.6份、阿魏酸0.02-0.06份、羟基红花黄色素A0.1-0.25份和苍术酮0.2-0.6份。
优选地，所述的中药组合物，按重量份数计包括以下组分：龟甲3-4份、补骨脂30-40份、山茱萸30-40份、柴胡30-50份、当归40-50份、山药30-40份、核桃仁30-40份、黄芪35-45份、桃叶珊瑚苷0.15-0.25份、丹酚酸B 0.3-0.5份、阿魏酸0.03-0.04份、羟基红花黄色素A 0.2-0.25份和苍术酮0.3-0.5份。
在一些优选实施方案中，所述的柴胡与当归的质量比为0.5-2:1；优选为1:1。
在另一些优选实施方案中，所述的桃叶珊瑚苷、羟基红花黄色素A和苍术酮的质量比为1:0.5-1.25:1.5；优选为1:1.2:1.5。
本申请还提供了上述中药组合物的制备方法，包括以下步骤：
（1）将补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪清洗干净，晾干、粉碎后加水煎煮，过滤，将提取液浓缩、干燥后得提取物，备用；
（2）将龟甲清洗干净后晾干，然后将龟甲研磨成粉，备用；
（3）步骤1制备的提取物，步骤（2）中的龟甲粉与桃叶珊瑚苷、丹酚酸B、阿魏酸、羟基红花黄色素A和苍术酮混合，即得。
步骤（1）中所述的加水煎煮分两次进行，第一次煎煮加水量与补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的配比为6-8:1，时间为1-3小时，第二次煎煮加水量为补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的配比为2-4:1，时间为0.5-1.5小时；所述的加水煎煮之前先将补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪加水浸泡10-24小时。
作为一个优选地实施方案，步骤（1）在加水煎煮之前先将补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪加水浸泡10-24小时，加水没过药材即可。
作为一个优选地实施方案，所述的中药组合物，按重量份数计包括以下组分：龟甲4份、补骨脂35份、山茱萸35份、柴胡40份、当归40份、山药35份、核桃仁40份、黄芪35份、桃叶珊瑚苷0.2份、丹酚酸B 0.5份、阿魏酸0.03份、羟基红花黄色素A 0.24份和苍术酮0.3份。
所述的中药组合物的制备方法，包括以下步骤：
（1）将补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪清洗干净，晾干、粉碎后加水浸泡10-24小时，然后煎煮两次，第一次煎煮加水量与补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的6-8倍，时间为1-3小时，过滤后得药渣和滤液，滤液保留备用，药渣进行第二次煎煮，加水量为补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的4-6倍，时间为0.5-1.5小时，过滤，弃去药渣，保留滤液，合并两次滤液浓缩，干燥，得提取物，备用；
（2）将龟甲清洗干净后晾干，然后将龟甲研磨成粉，粒径为100-200目，备用；
（3）步骤1制备的提取物，步骤（2）中的龟甲粉与桃叶珊瑚苷、丹酚酸B、阿魏酸、羟基红花黄色素A和苍术酮混合，即得。
本发明的另一目的是提供上述中药组合物的应用，所述应用为在制备治疗退行性骨病药物中的应用。
本发明的再一个目的是提供一种包含上述中药组合物的制剂，所述的制剂包括口服液、糖浆剂、胶囊、粉剂、颗粒剂和片剂中的任一种。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
（1）本发明采用药物有效成分直接制备成药物组合物，药物生物利用度高，治疗效果好；
（2）本发明通过控制药物有效成分的具体种类，并控制其含量，明显提高了药物组合物的相互作用，有助于退行性骨病的治疗；另外，本发明综合采用多种药物有效成分，包括桃桃叶珊瑚苷、丹酚酸B、阿魏酸、羟基红花黄色素A和苍术酮，通过各组分的相互作用达到了便于吸收，有效治疗退行性骨病的效果；
（3）本发明所述的药物配方中没有加入任何药物辅助成分，在实施过程中本发明采用龟甲全药材入药，一方面龟甲中含有胶原蛋白和多种氨基酸和无机元素有利于退行性骨病的治疗，另一方面本申请采实施过程中发现合理控制药物的粒径可以提高药物的稳定性，提高药物的保存时限；
（4）本发明公开的药物组合物采用药物有效成分直接制备得到，制备方法简单，药物有效利用率高，稳定性好。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行说明，以使本发明技术方案更易于理解、掌握，但本发明并不局限于此。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
本发明实施例和对比例中所述的组分如下：桃叶珊瑚苷（CAS:479-98-1）、丹酚酸B（CAS:115939-25-8）、阿魏酸（CAS：1135-24-6）、羟基红花黄色素A（CAS: 78281-02-4）、苍术酮（CAS:6989-21-5）购于市售产品，纯度均≥98％；以上组分，不同厂家的产品对效果不具有显著性影响。
实施例1一种用于退行性骨病的中药组合物
按重量份数计包括以下组分：龟甲4份、补骨脂35份、山茱萸35份、柴胡40份、当归40份、山药35份、核桃仁40份、黄芪35份、桃叶珊瑚苷0.2份、丹酚酸B 0.5份、阿魏酸0.03份、羟基红花黄色素A 0.24份和苍术酮0.3份。
制备方法，包括以下步骤：
（1）将补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪清洗干净，晾干、粉碎后加水煎泡20小时，然后加水煎煮两次，第一次煎煮加水量与补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的6倍，时间为3小时，过滤后得药渣和滤液，滤液保留备用，药渣进行第二次煎煮，加水量为补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的4倍，时间为0.5小时，过滤，弃去药渣，保留滤液，合并两次滤液浓缩，干燥，得提取物，备用；
（2）将龟甲清洗干净后晾干，然后将龟甲研磨成粉，粒径为100目，备用；
（3）步骤1制备的提取物，步骤（2）中的龟甲粉与桃叶珊瑚苷、丹酚酸B、阿魏酸、羟基红花黄色素A和苍术酮混合，即得。
实施例2一种用于退行性骨病的中药组合物
按重量份数计包括以下组分：龟甲2份、补骨脂20份、山茱萸20份、柴胡25份、当归25份、山药25份、核桃仁20份、黄芪20份、桃叶珊瑚苷0.1份、丹酚酸B 0.2份、阿魏酸0.02份、羟基红花黄色素A 0.1份和苍术酮0.2份。
制备方法，包括以下步骤：
（1）将补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪清洗干净，晾干、粉碎后加水煎泡10小时，然后加水煎煮两次，第一次煎煮加水量与补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的6倍，时间为1小时，过滤后得药渣和滤液，滤液保留备用，药渣进行第二次煎煮，加水量为补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的6倍，时间为1.5小时，过滤，弃去药渣，保留滤液，合并两次滤液浓缩，干燥，得提取物，备用；
（2）将龟甲清洗干净后晾干，然后将龟甲研磨成粉，粒径为200目，备用；
（3）步骤1制备的提取物，步骤（2）中的龟甲粉与桃叶珊瑚苷、丹酚酸B、阿魏酸、羟基红花黄色素A和苍术酮混合，即得。
实施例3一种用于退行性骨病的中药组合物
按重量份数计包括以下组分：龟甲5份、补骨脂50份、山茱萸50份、柴胡60份、当归60份、山药50份、核桃仁45份、黄芪55份、桃叶珊瑚苷0.3份、丹酚酸B 0.6份、阿魏酸0.06份、羟基红花黄色素A 0.25份和苍术酮0.6份；
制备方法，包括以下步骤：
（1）将补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪清洗干净，晾干、粉碎后加水煎泡15小时，然后加水煎煮两次，第一次煎煮加水量与补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的8倍，时间为1小时，过滤后得药渣和滤液，滤液保留备用，药渣进行第二次煎煮，加水量为补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的4倍，时间为1.5小时，过滤，弃去药渣，保留滤液，合并两次滤液浓缩，干燥，得提取物，备用；
（2）将龟甲清洗干净后晾干，然后将龟甲研磨成粉，粒径为150目，备用；
（3）步骤1制备的提取物，步骤（2）中的龟甲粉与桃叶珊瑚苷、丹酚酸B、阿魏酸、羟基红花黄色素A和苍术酮混合，即得。
实施例4一种用于退行性骨病的中药组合物
按重量份数计包括以下组分：龟甲4份、补骨脂40份、山茱萸30份、柴胡50份、当归40份、山药40份、核桃仁40份、黄芪35份、桃叶珊瑚苷0.25份、丹酚酸B 0.3份、阿魏酸0.04份、羟基红花黄色素A 0.25份和苍术酮0.5份；
制备方法，包括以下步骤：
（1）将补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪清洗干净，晾干、粉碎后加水煎泡20小时，然后加水煎煮两次，第一次煎煮加水量与补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的6倍，时间为3小时，过滤后得药渣和滤液，滤液保留备用，药渣进行第二次煎煮，加水量为补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的6倍，时间为0.5小时，过滤，弃去药渣，保留滤液，合并两次滤液浓缩，干燥，得提取物，备用；
（2）将龟甲清洗干净后晾干，然后将龟甲研磨成粉，粒径为100目，备用；
（3）步骤1制备的提取物，步骤（2）中的龟甲粉与桃叶珊瑚苷、丹酚酸B、阿魏酸、羟基红花黄色素A和苍术酮混合，即得。
对比例1
与实施例1的区别在于：改变柴胡与当归的质量比为4:1（柴胡与当归的总含量与实施例1相同），其他组分含量和操作与实施例1相同。
对比例2
与实施例1的区别在于：改变桃叶珊瑚苷、羟基红花黄色素A和苍术酮的质量比为1:1.5:1（桃叶珊瑚苷、羟基红花黄色素A和苍术酮的总含量与实施例1相同），其他组分含量和操作与实施例1相同。
对比例3
与实施例1的区别在于：制备方法不同，即：
（1）将补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁、黄芪和龟甲清洗干净，晾干、粉碎后加水煎泡20小时，然后加水煎煮两次，第一次煎煮加水量与补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁、黄芪和龟甲总质量的6倍，时间为3小时，过滤后得药渣和滤液，滤液保留备用，药渣进行第二次煎煮，加水量为补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁、黄芪和龟甲总质量的4倍，时间为0.5小时，过滤，弃去药渣，保留滤液，合并两次滤液浓缩，干燥，得提取物，备用；
（2）步骤1制备的提取物与桃叶珊瑚苷、丹酚酸B、阿魏酸、羟基红花黄色素A和苍术酮混合，即得。
效果实验：
1、引湿性研究
将实施例1-4及对比例1-3的中药组合物加入淀粉等辅料，按组合物：辅料=1:1的比例，制成粉剂，取能通过80目筛的药粉置于45℃烘箱中烘6h，确保它们含水量接近。
将底部盛有过饱和氯化钠溶液的干燥器在25℃放置48h，使其内部相对湿度恒定在75.28％。在已干燥至恒重的称量瓶底部放入厚约2mm按以上要求的细粉，精密称重后置于上述干燥器中(称量瓶盖打开)，于1，2，3，6，9，12，24，36h，精确称量瓶与样品的质量，计算吸湿率，具体见下表1。
表1各组样品吸湿率（单位：%）
1h 2h 3h 6h 9h 12h 24h 36h
实施例1 1 1.7 2.8 5.3 8.5 12 15 17
实施例2 1 1.6 2.9 5.5 9 12.2 15.4 17.1
实施例3 1.2 1.8 2.8 5.4 8.6 12.1 15.2 17.5
实施例4 1.1 1.7 3.0 5.6 8.9 12.7 15.5 17.4
对比例1 1.2 1.9 3.2 5.9 9.2 13.2 15.7 17.8
对比例2 1.3 2.2 3.3 5.8 9.4 13.0 16.0 17.6
对比例3 2.1 3.6 5.0 7.5 11.9 15.2 17.5 19.9
根据上表1的数据可以看出，将本申请实施例1-4和对比例1-3制备的药物组合物余等量的辅料混合，置于相同的环境中，本申请实施例1-4制备的药物组合物的吸湿率明显低于对比例，尤其是对比例3，即采用龟甲全药材入药，通过合理控制药物的粒径可以降低药物的吸湿性，提高稳定性，延长药物的保存时限。
2、动物实验
将实施例1-4及对比例1-3的中药组合物加赋形剂硬脂酸镁，制成粉剂，命名为龟芪壮骨颗粒，粉剂中含赋形剂1.9g生药/g粉剂。临用时将粉剂以等量蒸馏水分散开，用时摇匀，4℃保存。评价实施例1-4及对比例1-3的中药组合物对退行性骨病的治疗活性。
剂量选择：按照龟芪壮骨颗粒有效成分计，高剂量0.8 g/kg、中剂量0.4 g/kg、低剂量0.2 g/kg；试验过程中，实施例1按照高、中、低剂量组给药，实施例2-4及对比例1-3均按低剂量(0.2 g/kg)给药。
1. 实验动物：
3月龄SPF级SD大鼠，雄性，180-220g，130只。
2. 造模
3.1 实验材料和仪器：
名称 厂家
木瓜蛋白酶 上海阿拉丁生化科技股份有限公司
水合氯醛 定州百克赛斯生物科技有限公司
半胱氨酸 上海阿拉丁生化科技股份有限公司
0.9%生理盐水 上海阿拉丁生化科技股份有限公司
注射器（1ml、5ml、10ml等规格）若干 -
消毒物品（酒精、碘伏、纱布）若干 -
电子天平 华志电子科技有限公司
3.2 实验方法：
随机取出12只作为正常组，对其余118只SD大鼠采用木瓜蛋白酶注射造模法进行造模。
(1) 麻醉
提前称取大鼠的重量并记录下来，依照3ml/kg的量计算每只大鼠所需的水合氯醛的量，按照所计算的量抽取相应的10%水合氯醛备用。用提前准备好的酒精棉球对腹股沟的位置进行消毒，以与皮肤15°夹角的角度快速进针，推注水合氯醛。大鼠大约会在15-30分钟左右进入麻醉状态，表现为双目微闭、活动减少，待用镊子夹其皮肤与踝关节后无反应即麻醉成功，可以进行下一步操作。
(2) 木瓜蛋白酶注射
注射前先配置0.2ml的2%木瓜蛋白酶合0.03mol/L半胱氨酸混合液待用。放于冰箱4℃冷藏室储存，于实验前取出，静置30min后对大鼠进行膝关节注射。
首先将双侧膝关节剪毛并用酒精棉球消毒，屈伸膝关节找到髌韧带，将其外侧的凹陷处作为注射进针点，左手托住膝关节并使其稍微弯曲，充分暴露进针点，右手持抽取好木瓜蛋白酶合半胱氨酸混合液的注射器刺入皮肤，向膝关节腔后内上方向继续刺入。进入关节腔后缓慢推注木瓜蛋白酶和半胱氨酸混合液，然后快速将注射器退出，用干棉球扪住进针点勿使混合液流出，并轻轻屈伸膝关节使混合液充满关节腔。以上步骤在造模第1、4、7天各操作一次，4到6周为造模完成的时间节点。
(3) 分组
造模完成后随机抽取造模组5只、正常组1只大鼠并处死，检测并评估造模成功后，再次将造成的退行性膝关节炎（简称KOA）模型大鼠随机分成11组，分别设置为高剂量组、中剂量组、低剂量组、模型组、阳性对照组（盐酸氨基葡萄糖），每组10只。按预先设计好的实验方法进行药物干预，连续给药4周。按照药物剂量换算公式A（体表面积m2）=K（系数）*W（体重）2/3*10-4计算出各组实验动物所需给药量。
3. 大鼠KOA模型鉴定
大鼠自由活动1周后观察大鼠造模后的步态、膝关节局部外观及肿胀程度，并参照关节炎指数(arthritis index,AI)评分判断膝关节炎模型是否建立成功，造模后评分为3分及以上的大鼠视为造模成功。
关节炎指数(arthritis index,AI)评分标准
步态正常及关节肿胀 0分
步态正常伴关节轻微肿胀 1分
步态轻微改变并出现中度红肿 2分
出现跛行并有重度红肿 3分
无法活动并有严重的红肿 4分
4. 关节软骨组织肉眼观察和病理学观察
4.1 实验材料和仪器：
名称 厂家
苏木素 上海阿拉丁生化科技股份有限公司
伊红 上海阿拉丁生化科技股份有限公司
10%甲醛溶液 上海阿拉丁生化科技股份有限公司
脱钙液 北京酷来搏科技有限公司
梯度酒精 上海阿拉丁生化科技股份有限公司
福尔马林 麦克林试剂公司
生理盐水 上海阿拉丁生化科技股份有限公司
恒温水浴锅 上海博讯实业有限公司
石蜡切片机 德国Leica生物
组织包埋机 德国Leica生物
光学显微镜 日本Olympus
4.2 实验方法：
(1)测量大鼠膝关节周径，测量时将大鼠右膝关节保持伸膝位，取股骨与胫骨的交界处的膝关节最大周径,剃除测量位置周边的鼠毛,标记测量范围，保证每次测量都是同样位置，用细线环绕一周标记细线长度，于刻度尺上确定长度（单位：cm）。分别测量造模前、造模后及药物干预14天、28天后的膝关节周径。
(2)实验大鼠经处死后，切开模型侧（右后）膝关节腔，3名人员遵循双盲原则根据软骨的外观情况进行评分，参考相关文献标准；
肉眼观察关节软骨评分参考表
外观关节软骨面平整、光滑 0分
外观关节软骨面颜色暗淡，表面不平，有小的凹陷存在 1分
外观关节软骨面表面糜烂形成，中等量的软骨缺损 2分
外观关节软骨表面大的溃烂形成，大量的软骨缺损 3分
外观关节软骨大面积剥脱形成并暴露软骨下骨质 4分
(3)将用精细的组织刀片取下的软骨组织固定在10％的福尔马林溶液中，常温放置48小时后，大量流水冲洗，然后用浸泡在脱钙液中脱钙，每两天换脱钙液一次，当用针头探刺软骨组织硬度较小，类似软组织后，表明脱钙过程完成。修剪软骨周围附着的多余的软组织，再次大量生理盐水冲洗，用常规梯度的乙醇溶液进行脱水后，浸蜡，石蜡包埋机包埋，进行组织切片（厚度定为4μm），然后进行辅片，苏木精染色，流水冲洗，继续脱一次水，用伊红染色，最后用100％的乙醇脱水，即可封片，切片制作完成。
(4)在光镜下观察软骨切片并评分，具体的评分标准注意参照软骨细胞、软骨结构、有无血管增生、潮线完整性等的变化综合评定。具体见Mankins评分标准。
Mankins评分标准
分类项目 评分 分类项目 评分
结构 - 番红O固绿染色 -
正常 0分 正常 0分
表面不规则 1分 轻度减弱 1分
表面不规则及血管翳 2分 中度减弱 2分
裂隙深达软骨移行层 3分 严重减弱 3分
裂隙深达软骨放射层 4分 未显色 4分
裂隙深达软骨钙化层 5分 结构完全破坏 6分
软骨细胞 - 潮线 -
正常 0分 完整 0分
弥漫性细胞数量增多 1分 有血管穿越 1分
增生性细胞簇 2分 细胞数量减少 3分
5. 数据的统计分析方法
数据统计采用SPSS21.0统计学软件进行分析，定量数据采用均数±标准差，样本间采用t检验，组间差异使用单因素方差分析，以P＜0.05表示差异有统计学意义。
6、检测结果
具体检测结果见下表2。
表2
剂量 肉眼观察关节软骨评分 Mankins评分
正常组 - 0.340±0.165 0.960±0.299
模型组 - 3.790±0.664<sup>##</sup> 13.690±1.946<sup>##</sup>
阳性对照 0.15 g/kg 1.951±0.247<sup>**</sup> 9.040±1.275<sup>**</sup>
实施例1 0.20 g/kg 2.970±0.585<sup>*●</sup> 11.280±1.235<sup>*●</sup>
实施例1 0.40 g/kg 1.660±0.354<sup>**◊○○</sup> 8.000±0.907<sup>**◊○○</sup>
实施例1 0.80 g/kg 1.483±0.230<sup>**◊○○</sup> 7.060±0.737<sup>**◊○○</sup>
实施例2 0.20 g/kg 3.190±0.522<sup>*●</sup> 11.650±1.149<sup>*●</sup>
实施例3 0.20 g/kg 2.990±0.592<sup>*●</sup> 11.370±1.669<sup>*●</sup>
实施例4 0.20 g/kg 3.027±0.601<sup>*●</sup> 11.879±1.802<sup>*●</sup>
对比例1 0.20 g/kg 3.720±0.503 13.360±2.002
对比例2 0.20 g/kg 3.760±0.455 13.010±1.320
对比例3 0.20 g/kg 3.630±0.371 12.900±1.483
注：##与正常组比较：P＜0.01；
*与模型组比较：P＜0.05；**与模型组比较：P＜0.01；
◊与阳性对照组比较：P＜0.05；
○○与对比例1、2、3比较：P＜0.01；
●与对比例1、2、3比较：P＜0.05。
由上表1可知，本发明中的组合物能够有效降低肉眼观察关节软骨和Mankins评分的数值，说明本申请制备组合物能有效地治疗退行性骨病，尤其是实施例1制备的药物组合物在高剂量0.8mg/kg、中剂量0.4mg/kg条件下相对于模型组，对比例1-3均具有显著性差异（P＜0.01），相对于阳性对照组有差异（P＜0.05）；实施例1-4制备的药物组合物在低剂量0.2mg/kg条件下相对于模型组、对比例1-3有差异（P＜0.05）；其中，组分之间的配比会对组合物的药效造成影响，改变组分之间的配比不在本申请保护范围内，得到的组合物的疗效明显减弱；在此化合物中，组分间存在一定的相互作用影响，只有在一定比例范围内才能具有较高的效果，改变比例不在本申请范围内会在一定程度上影响药物组合物的治疗效果。
最后应当说明的是，以上内容仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，本领域的普通技术人员对本发明的技术方案进行的简单修改或者等同替换，均不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (9)

1.一种用于退行性骨病的中药组合物，其特征在于：按重量份数计由以下组分制成：龟甲2-5份、补骨脂20-50份、山茱萸20-50份、柴胡25-60份、当归25-60份、山药25-50份、核桃仁20-45份、黄芪20-55份、桃叶珊瑚苷0.1-0.3份、丹酚酸B 0.2-0.6份、阿魏酸0.02-0.06份、羟基红花黄色素A 0.1-0.25份和苍术酮0.2-0.6份；
所述的柴胡与当归的质量比为0.5-2:1；
所述的桃叶珊瑚苷、羟基红花黄色素A和苍术酮的质量比为1:0.5-1.25:1.5。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于：按重量份数计由以下组分制成：龟甲3-4份、补骨脂30-40份、山茱萸30-40份、柴胡30-50份、当归40-50份、山药30-40份、核桃仁30-40份、黄芪35-45份、桃叶珊瑚苷0.15-0.25份、丹酚酸B 0.3-0.5份、阿魏酸0.03-0.04份、羟基红花黄色素A 0.2-0.25份和苍术酮0.3-0.5份。
3.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于：所述的柴胡与当归的质量比为1:1。
4.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于：所述的桃叶珊瑚苷、羟基红花黄色素A和苍术酮的质量比1:1.2:1.5。
5.根据权利要求2所述的中药组合物，其特征在于：按重量份数计由以下组分制成：龟甲4份、补骨脂35份、山茱萸35份、柴胡40份、当归40份、山药35份、核桃仁40份、黄芪35份、桃叶珊瑚苷0.2份、丹酚酸B 0.5份、阿魏酸0.03份、羟基红花黄色素A 0.24份和苍术酮0.3份。
6.根据权利要求1-5任一项所述的中药组合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）将补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪清洗干净，晾干、粉碎后加水煎煮，过滤，将提取液浓缩、干燥后得提取物，备用；
（2）将龟甲清洗干净后晾干，然后将龟甲研磨成粉，备用；
（3）步骤1制备的提取物，步骤（2）中的龟甲粉与桃叶珊瑚苷、丹酚酸B、阿魏酸、羟基红花黄色素A和苍术酮混合，即得。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：步骤（1）中所述的加水煎煮分两次进行，第一次煎煮加水量与补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的配比为6-8:1，时间为1-3小时，第二次煎煮加水量为补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪总质量的配比为4-6:1，时间为0.5-1.5小时；所述的加水煎煮之前先将补骨脂、山茱萸、柴胡、当归、山药、核桃仁和黄芪加水浸泡10-24小时。
8.根据权利要求1-5任一项所述的中药组合物在制备治疗退行性骨病药物中的应用。
9.一种中药制剂，其特征在于：包含权利要求1-5任一项所述的中药组合物，所述的制剂为口服液、糖浆剂、胶囊、粉剂、颗粒剂和片剂中的任一种。
CN202210929940.3A 2022-08-04 2022-08-04 一种用于退行性骨病的中药组合物及其制备方法 Active CN114984131B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210929940.3A CN114984131B (zh) 2022-08-04 2022-08-04 一种用于退行性骨病的中药组合物及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210929940.3A CN114984131B (zh) 2022-08-04 2022-08-04 一种用于退行性骨病的中药组合物及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114984131A CN114984131A (zh) 2022-09-02
CN114984131B true CN114984131B (zh) 2022-10-11

Family

ID=83023041

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210929940.3A Active CN114984131B (zh) 2022-08-04 2022-08-04 一种用于退行性骨病的中药组合物及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114984131B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116159098B (zh) * 2023-04-24 2023-06-27 吉林华康食元生物科技有限公司 一种防治退行性骨关节炎病变的组合物

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1593484A (zh) * 2004-06-23 2005-03-16 敦化市瑞隆药业有限责任公司 龟芪壮骨颗粒
CN103340341A (zh) * 2013-07-03 2013-10-09 山西大学 一种具有壮骨作用的功能性食品及其制备方法
CN105213705A (zh) * 2014-06-30 2016-01-06 蒋晓红 一种用于治疗骨质疏松的龟鹿坚骨汤
CN114053354A (zh) * 2021-12-21 2022-02-18 湖南省健缘医疗科技有限公司 益肾壮骨的中药组合物及其制备方法和应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1593484A (zh) * 2004-06-23 2005-03-16 敦化市瑞隆药业有限责任公司 龟芪壮骨颗粒
CN103340341A (zh) * 2013-07-03 2013-10-09 山西大学 一种具有壮骨作用的功能性食品及其制备方法
CN105213705A (zh) * 2014-06-30 2016-01-06 蒋晓红 一种用于治疗骨质疏松的龟鹿坚骨汤
CN114053354A (zh) * 2021-12-21 2022-02-18 湖南省健缘医疗科技有限公司 益肾壮骨的中药组合物及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN114984131A (zh) 2022-09-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104306959A (zh) 一种治疗骨质疏松的药物组合物及其制备方法
JP2016540833A (ja) 広金銭草総フラボノイドカプセル剤およびその製造方法、並びにその応用
CN114984131B (zh) 一种用于退行性骨病的中药组合物及其制备方法
KR20020068126A (ko) 외상 치료 활성을 갖는 생약 추출 엑기스 및 이를함유하는 약제학적 조성물 또는 건강식품
CN106822377B (zh) 一种复方骨炎巴布贴及其制备方法
CN111184792B (zh) 一种治疗膝骨关节炎的中药组合物
CN101156849B (zh) 一种促牙周再生的苯妥英钠缓释凝胶及其制备方法与应用
CN100556426C (zh) 治疗骨科疾病的抗骨增生制剂及其制法和检测方法
CN101648015A (zh) 一种治疗青光眼的中药组合物及其用途
CN117545497A (zh) 用于治疗骨和关节疾病的源自药材的药物组合物及用于制备其的方法
CN107812039A (zh) 一种具有补肾健骨功能的牛大力中药组合物及其制备方法
CN106860656A (zh) 一种治疗骨质疏松症的中药组合物及其制备方法和应用
CN100375616C (zh) 一种以战骨为原料的健骨滴丸及其制备方法
CN104721366B (zh) 一种中药组合物及其应用
CN101884756B (zh) 祛风除湿、活络止痛的药物组合物及制法、制剂与用途
CN109125631A (zh) 具有肝肾调节功能的中药组合物及其制备方法
CN116159098B (zh) 一种防治退行性骨关节炎病变的组合物
CN115120629B (zh) 腹脐草在制备预防/治疗骨关节病药物方面的用途及其中药组合物、中药制剂及制备方法
CN115192654B (zh) 一种归芪活血制剂的医药新用途
CN115487236B (zh) 荆防制剂在制备防治糖尿病足药物中的用途
CN112755137B (zh) 一种治疗轻中度膝骨关节炎的中药组合物及其应用
CN1205989C (zh) 用于治疗股骨头缺血性坏死的药物组合物及其制备方法
CN108310206B (zh) 一种用于预防或治疗骨质疏松症的中药组合物及其制备方法和应用
CN112933156A (zh) 一种益肾健腰丸的制备方法
CN105079240B (zh) 一种治疗骨质增生的药物组合物

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant