CN105079240B - 一种治疗骨质增生的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种治疗骨质增生的药物组合物，其原料药包括如下重量配比的药味：防风4～60份，五灵脂2～45份，当归3～36份，赤芍4～60份，独活2～60份，防己3～50份，桑寄生3～50份，熟地黄5～60份，川芎3～48份，制草乌2～30份，牛膝3～60份，元胡2～45份，红花2～40份，威灵仙4～50份，桂枝5～60份，制川乌2～30份。本发明各药物配伍精当，相辅相成，能够有效用于对腰椎、膝关节、颈椎等各个部分的骨质增生疾病的治疗，且安全无毒，为临床用药提供了新的选择。

Description

一种治疗骨质增生的药物组合物

技术领域

本发明涉及一种治疗骨质增生的药物组合物。

背景技术

骨质增生症简称骨质增生，是中老年人发病率较高的疾病之一，也是骨科最常见的疾病之一，是中老年人随着年龄的增长所发生的骨关节的退行性改变，50岁以上的老年人骨质增生发生率为98％。研究资料表明，一般人从20岁开始，就有退行性变化，40岁时，几乎90％的人负重关节都有或多或少的增生性改变，但绝大部分很轻，不致影响身体健康。随着年龄的增长，骨质增生的发病率越高，多发在中老年人身上。随着现代社会生活方式的改变及生活节奏的加快，低头工作、长时间坐办公室的人群不断增多，空调、冰箱、汽车的广泛使用，使人们遭受风寒湿邪侵袭的机会增加，造成颈椎、腰椎等骨质增生类疾病的患病率不断上升，发病年龄不断提前。同时，由于人体组织的退行性改变常常是持久、顽固、难以终止或逆转的，使得该病的发病、进展、复发等各项指标居高不降，成为医学界公认的一大难题。

现代医学对骨质增生症的治疗仍局限于以手术治疗为主，由于手术费用高，疗效又难以保证，加之患者多年老、体弱、多病，增加了手术的危险性，一般人多不愿接受或难以接受，而以激素、消炎止痛为主的西药保守治疗也只能缓解一时的疼痛，停药即发，令患者非常头痛。

骨质增生的发病率不断提高，发病年龄不断提前，西医中的西药和手术在治疗骨质增生方面存在不可突破的瓶颈，中医药已成为目前临床上治疗骨质增生的唯一值得信赖的治疗手段，祖国传统医药独辟蹊径治疗骨质增生症，疗效确切。

发明内容

本发明的目的在于提供一种治疗骨质增生的药物组合物。

本发明提供了一种治疗骨质增生的药物组合物，其原料药包括如下重量配比的药味：

防风4～60份，五灵脂2～45份，当归3～36份，赤芍4～60份，独活2～60份，防己3～50份，桑寄生3～50份，熟地黄5～60份，川芎3～48份，制草乌2～30份，牛膝3～60份，元胡2～45份，红花2～40份，威灵仙4～50份，桂枝5～60份，制川乌2～30份。

进一步地，其原料药包括如下重量配比的药味：

防风15份，五灵脂10份，当归12份，赤芍20份，独活15份，防己10份，桑寄生15份，熟地黄20份，川芎12份，制草乌15份，牛膝15份，元胡15份，红花10份，威灵仙15份，桂枝10份，制川乌15份。

进一步地，它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂：

防风4～60份，五灵脂2～45份，当归3～36份，赤芍4～60份，独活2～60份，防己3～50份，桑寄生3～50份，熟地黄5～60份，川芎3～48份，制草乌2～30份，牛膝3～60份，元胡2～45份，红花2～40份，威灵仙4～50份，桂枝5～60份，制川乌2～30份。

优选地，它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂：

防风15份，五灵脂10份，当归12份，赤芍20份，独活15份，防己10份，桑寄生15份，熟地黄20份，川芎12份，制草乌15份，牛膝15份，元胡15份，红花10份，威灵仙15份，桂枝10份，制川乌15份。

其中，它是由所述原料药的药粉、或原料药的水或/和乙醇提取物为活性成分，加上药学上常用的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。

水提物或以药粉入药，均是中药传统使用方式，水提后，由于水的溶解范围广，能够将大部分有效成分溶出，使药物更容易被人体吸收，起效更快，例如汤剂等给药形式；以原粉入药，药粉的表面积较大，也有利于药材中有效成分在体内的吸收，但药材未经提取，有效成分仍需在体内溶出再吸收，其起效相对水提物较慢，但也同时削弱了药材中有害成分对人体造成的毒副反应，适合于长期服用，如将原粉制备成丸剂等给药形式。目前在制药过程中，乙醇作为溶剂对药物进行提取，也是最为常见的提取方式之一，乙醇为半极性溶剂，溶解性能界于极性与非极性溶剂之间，可以溶解水溶性的某些成分，也能溶解非极性溶剂溶解的一些成分，通常用乙醇提取代替水煎，从而避免大量无效成分的溶出，提高有效成分的浓度和提取效率，不过乙醇的价格较水贵，在现代制药工业大生产中，为了节省生产成本，通常还是以水煎为主。在本发明已知组合物水提物具有生理活性的情况下，为了适应各种生产和使用时的需求，可以任选水提、原粉、醇提或它们的组合方式来制备具体的制剂。

本发明所述药学上可接受的辅料包括但不仅限于填充剂(稀释剂)、润滑剂(助流剂或抗粘着剂)、分散剂、湿润剂、粘合剂、调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、崩解剂等。粘合剂包含糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄芪胶、纤维素及其衍生物(如微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素或羟丙甲基纤维素等)、明胶浆、糖浆、淀粉浆或聚乙烯吡咯烷酮等；填充剂包含乳糖、糖粉、糊精、淀粉及其衍生物、纤维素及其衍生物、无机钙盐(如硫酸钙、磷酸钙、磷酸氢钙、沉降碳酸钙等)、山梨醇或甘氨酸等；润滑剂包含微粉硅胶、硬脂酸镁、滑石粉、氢氧化铝、硼酸、氢化植物油、聚乙二醇等；崩解剂包含淀粉及其衍生物(如羧甲基淀粉钠、淀粉乙醇酸钠、预胶化淀粉、改良淀粉、羟丙基淀粉、玉米淀粉等)、聚乙烯吡咯烷酮或微晶纤维素等；湿润剂包含十二烷基硫酸钠、水或醇等；抗氧剂包含亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、二丁基苯酸等；抑菌剂包含0.5％苯酚、0.3％甲酚、0.5％三氯叔丁醇等；调节剂包含盐酸、枸橼酸、氢氧化钾(钠)、枸橼酸钠及缓冲剂(包括磷酸二氧钠和磷酸氢二钠)等；乳化剂包含聚山梨酯-80、没酸山梨坦、普流罗尼克F-68，卵磷酯、豆磷脂等；增溶剂包含吐温-80、胆汁、甘油等。

所述药学上可接受的辅助性成分，它具有一定生理活性，但该成分的加入不会改变上述药物组合物在疾病治疗过程中的主导地位，而仅仅发挥辅助功效，这些辅助功效仅仅是对该成分已知活性的利用，是医药领域惯用的辅助治疗方式。若将上述辅助性成分与本发明药物组合物配合使用，仍然应属于本发明保护的范围。

进一步地，所述制剂为经胃肠道吸收制剂。例如，所述制剂为丸剂、片剂、散剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液。

例如，所述颗粒剂，包括药物浸膏粉、填充剂、粘合剂和润湿剂，其中，填充剂:浸膏粉＝20％～210％w/w、粘合剂:浸膏粉＝1％～12％w/w、润湿剂:浸膏粉＝40％～120％w/w；

所述药物浸膏粉是如下重量配比的原料药的水提物干燥粉末：

防风4～60份，五灵脂2～45份，当归3～36份，赤芍4～60份，独活2～60份，防己3～50份，桑寄生3～50份，熟地黄5～60份，川芎3～48份，制草乌2～30份，牛膝3～60份，元胡2～45份，红花2～40份，威灵仙4～50份，桂枝5～60份，制川乌2～30份。

进一步地，所述药物浸膏粉是如下重量配比的原料药的水提物干燥粉末：

防风15份，五灵脂10份，当归12份，赤芍20份，独活15份，防己10份，桑寄生15份，熟地黄20份，川芎12份，制草乌15份，牛膝15份，元胡15份，红花10份，威灵仙15份，桂枝10份，制川乌15份。

其中，所述水提物干燥粉末是原料药的水煎液干燥粉末。

进一步地，所述药物浸膏粉的制备方法如下：按配比称取原料药，加药材总质量6～20倍量水，加水煎煮1～4次，每次1～3小时，过滤，收集滤液，减压浓缩，所得浸膏液低温真空干燥，粉碎，即得。

进一步地，所述填充剂包括淀粉、乳糖、甘露醇、微晶纤维素中的一种或两种以上的组合；粘合剂包括聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羧甲纤维素钠(CMC-Na)中的一种或两种以上的组合；润湿剂包括蒸馏水、乙醇或含水乙醇。

本发明还提供了上述药物组合物的制备方法，它包括如下操作步骤：

(1)按配比称取原料药；

(2)取原料药，加水提取，合并水提液，加上药学上常用的辅料或辅助性成分制备成制剂。

所述加水提取，包括水煎、温浸、超声、常压或减压提取等各种提取方式，只要是以水为溶剂，辅以常规检测手段，均可达到相同或相似的提取效果。

本发明还提供了上述药物组合物在制备抗炎、镇痛或治疗骨质增生的药物中的用途。

进一步地，所述药物是治疗颈椎骨质增生、腰椎骨质增生、含椎间盘突出或膝关节骨质增生的药物。

进一步地，所述药物是降低基质金属蛋白酶1(MMP-1)、聚蛋白多糖酶-4(ADAMTS-4)活性或/和提高基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)活性的药物。

方中用独活、桑寄生祛风除湿，养血和营，活络通痹为主药；牛膝、熟地黄补益肝肾，强壮筋骨为辅药；川芎、当归、赤芍补血活血；佐以独活、防己以搜风治风痹，川乌、草乌、红花、五灵脂、元胡、桂枝祛寒止痛，使以威灵仙、防风祛周身风寒湿邪。各药合用，为标本兼顾，扶正祛邪之剂。

本发明各药物配伍精当，相辅相成，能够有效用于对腰椎、膝关节、颈椎等各个部分的骨质增生疾病的治疗，且安全无毒，为临床用药提供了新的选择。

附图说明

图1各实验组家兔膝关节软骨增生评分

图2各实验组小鼠扭体次数

图3各实验组小鼠扭痛阈值

图4各实验组家兔膝关节软骨增生评分

图5各实验组家兔膝关节软骨MMP-1阳性细胞率

图6各实验组家兔膝关节软骨TIMP-1阳性细胞率

图7各实验组家兔膝关节软骨ADAMTS-4阳性细胞率

图8各实验组小鼠扭体次数

图9各实验组小鼠扭痛阈值

具体实施方式

实施例1本发明药物组合物的制备

处方：

原料：防风15g，五灵脂10g，当归12g，赤芍20g，独活15g，防己10g，桑寄生15g，熟地黄20g，川芎12g，制草乌15g，牛膝15g，元胡15g，红花10g，威灵仙15g，桂枝10g，制川乌15g

辅料：微晶纤维素100g淀粉150g羧甲基纤维素钠50g

制备方法：取处方量药材，加入适量水浸泡30min后，加热提取数次，过滤，合并提取液，减压浓缩至适当密度；加入辅料混匀，60℃温度干燥后过80目筛，混合均匀，加95％乙醇制软材，16目网制粒；60℃温度干燥后整粒，然后加入硬脂酸镁50g，混匀，压成1000片，包衣即得。

实施例2本发明药物组合物的制备

处方：

原料：防风15g，五灵脂10g，当归12g，赤芍20g，独活15g，防己10g，桑寄生15g，熟地黄20g，川芎12g，制草乌15g，牛膝15g，元胡15g，红花10g，威灵仙15g，桂枝10g，制川乌15g

辅料：乳糖180g 淀粉175g 甜菊素50g

制备方法：取处方量药材，加入适量水浸泡30min后，加热提取数次，过滤，合并提取液，减压浓缩至适当密度；加入辅料混匀，60℃温度干燥后过80目筛，混合均匀，加95％乙醇制软材，16目网制粒，60℃温度干燥后整粒，装袋密封，共制成1000袋。

实施例3本发明药物组合物的制备

处方：

原料：防风15g，五灵脂10g，当归12g，赤芍20g，独活15g，防己10g，桑寄生15g，熟地黄20g，川芎12g，制草乌15g，牛膝15g，元胡15g，红花10g，威灵仙15g，桂枝10g，制川乌15g

辅料：蔗糖120g 水果香精 100g

制备方法：取处方量药材，加入适量水浸泡30min后，加热提取数次，过滤，合并提取液，减压浓缩至适当密度，放冷后加入高浓度乙醇，静置过夜，滤过，减压回收至无醇味，调PH至5.2～6.5，加入辅料混匀后，加水至10000ml，静置，滤过，灭菌后灌装，共制成1000瓶。

实施例4本发明药物组合物的制备方法

处方：

防风60g，五灵脂45g，当归36g，赤芍60g，独活60g，防己50g，桑寄生50g，熟地黄60g，川芎48g，制草乌30g，牛膝60g，元胡45，红花40，威灵仙50g，桂枝60g，制川乌30g。

制备方法：按处方比例称取药材，加适量水煎煮2～3次，每次1～2小时，过滤，收集滤液，即得汤剂。

实施例5本发明药物组合物的制备方法

处方：

防风30g，五灵脂20g，当归30g，赤芍40g，独活30g，防己20g，桑寄生30g，熟地黄20g，川芎32g，制草乌25g，牛膝35g，元胡35g，红花30g，威灵仙30g，桂枝50g，制川乌25g。

制备方法：按处方比例称取药材，加85～95％乙醇超声提取2次，收集醇提液；药渣加水煎煮2次，收集水煎液，醇提液回收乙醇后，与水煎液合并，浓缩，加入适量辅料制备丸剂。

实施例6本发明药物组合物的制备方法

处方：

防风15g，五灵脂10g，当归12g，赤芍20g，独活15g，防己10g，桑寄生15g，熟地黄20g，川芎12g，制草乌15g，牛膝15g，元胡15g，红花10g，威灵仙15g，桂枝10g，制川乌15g。

制备方法：

按处方比例称取药材，加适量水煎煮2～3次，每次2～3小时，过滤，收集滤液，浓缩，喷雾干燥，加入适量辅料制粒，即得颗粒剂。

实施例7本发明药物组合物的制备方法

处方：

防风8g，五灵脂5g，当归6g，赤芍10g，独活8g，防己5g，桑寄生8g，熟地黄10g，川芎4g，制草乌8g，牛膝8g，元胡8g，红花5g，威灵仙8g，桂枝5g，制川乌4g。

制备方法：按处方比例称取药材，加60～65％乙醇回流提取3次，收集醇提液，回收乙醇后，浓缩，加入适量辅料制粒，压片，即得片剂。

实施例8本发明药物组合物的制备方法

处方：

防风4g，五灵脂2g，当归3g，赤芍4g，独活2g，防己3g，桑寄生3g，熟地黄5g，川芎3g，制草乌2g，牛膝3g，元胡2g，红花2g，威灵仙4g，桂枝5g，制川乌2g。

制备方法：按处方比例称取药材，加适量水煎煮2～3次，每次1～2小时，过滤，收集滤液，即得汤剂。

以下通过具体试验例来说明本发明的有益效果。

试验例1本发明药物组合物活性研究

1.材料与方法

1.1药物及其处方组成

防风，五灵脂，当归，赤芍，独活，防己，桑寄生，熟地黄，川芎，制草乌，牛膝，元胡，红花，威灵仙，桂枝，制川乌。

1.2药物制备方法

(1)剂量①组：按以下处方比例称取各味药材，防风60份，五灵脂45份，当归36份，赤芍60份，独活60份，防己50份，桑寄生50份，熟地黄60份，川芎48份，制草乌30份，牛膝60份，元胡45，红花40，威灵仙50份，桂枝60份，制川乌30份。

(2)剂量②组：防风30份，五灵脂20份，当归30份，赤芍40份，独活30份，防己20份，桑寄生30份，熟地黄20份，川芎32份，制草乌25份，牛膝35份，元胡35份，红花30份，威灵仙30份，桂枝50份，制川乌25份。

(3)剂量③组：防风15份，五灵脂10份，当归12份，赤芍20份，独活15份，防己10份，桑寄生15份，熟地黄20份，川芎12份，制草乌15份，牛膝15份，元胡15份，红花10份，威灵仙15份，桂枝10份，制川乌15份。

(4)剂量④组：防风8份，五灵脂5份，当归6份，赤芍10份，独活8份，防己5份，桑寄生8份，熟地黄10份，川芎4份，制草乌8份，牛膝8份，元胡8份，红花5份，威灵仙8份，桂枝5份，制川乌4份。

(5)剂量⑤组：防风4份，五灵脂2份，当归3份，赤芍4份，独活2份，防己3份，桑寄生3份，熟地黄5份，川芎3份，制草乌2份，牛膝3份，元胡2份，红花2份，威灵仙4份，桂枝5份，制川乌2份。

分别按剂量组处方比例称取药材，加适量水煎煮1～3小时，过滤，收集滤液，减压浓缩至适当体积备用。

1.3实验动物

(1)家兔：体重2.0～2.7kg，雄性。

(2)KM小鼠，体重18.5～22.5g。

1.4实验仪器、试剂

(1)酶标仪、电子天平等

(2)青霉素、链霉素、生理盐水、消毒酒精等。

1.5阳性药

(1)抗骨增生片；(2)吗啡

2.药效研究

2.1药物非临床试验

【对家兔实验性膝关节增生治疗作用】

取家兔40只，以戊巴比妥钠30mg/kg耳缘静脉注射麻醉，固定于手术台上，选左膝在无菌条件下施行手术，于股骨上段绑扎止血带，切除内侧半月板并切断内侧副韧带后，逐层缝合切口，放松止血带。手术结束后，家兔分笼饲养，并连续3天肌注青霉素钠40万U/只，防止伤口感染。同时将已造模的家兔按体重随机分为7组，每组8只，分别作为：模型组、阳性组、药物剂量①～⑤组。另取8只作为假手术组(只做假手术创伤)。药物各剂量组按27.44g处方生药/kg剂量灌胃给药，阳性组按0.50g/kg剂量腹腔注射给予吗啡生理盐水溶液，正常组和模型组灌胃给予纯净水，给药体积均为250ml/kg，连续2周。

检测指标：于末次给药后2h，处死动物，立即解剖膝关节，置10％甲醛溶液中固定、石腊包埋、切片、HE染色，光镜下观察软骨改变情况。将软骨增生程度按表1评分标准进行打分，评价损伤程度。

表1软骨增生成都评价标准

【对醋酸致小鼠扭体反应治疗作用】

取昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机等分为5组，每组10只，分别作为：按体重随机分为7组，每组10只，分别作为：对照组、阳性组、药物剂量①～⑤组。药物各剂量组分别按101.92g处方生药/kg灌胃给药，阳性组按2.5mg/kg剂量腹腔注射给予吗啡生理盐水溶液，对照组灌胃给予纯净水，体积均为20ml/kg，每日一次，连续7d。于末次给药后1h，每只小鼠腹腔注射0.6％冰醋酸0.1ml/10g，记录注射后5～15min内出现的扭体反应次数。

【对小鼠热刺激所致疼痛治疗作用】

选取昆明种雌性小鼠(痛阈值<5s或>30s者或易跳跃者剔除)70只，随机等分为7组，剂量及时间、体积同上。于末次给药后2测定各实验组小鼠痛阈值，以动物投入热板至出现舔后足的时间为该鼠的痛阈值，超过60s的以60s计。

实验结果

【对家兔实验性膝关节增生治疗作用】

由图1可知，与假手术组比较，模型组家兔膝关节软骨骨质增生分数极显著增大(P<0.05)；与模型组比较，药物各剂量组家兔膝关节软骨增生分数有显著减小(P<0.05)，其中剂量③组有极显著减小(P<0.01)；与阳性组比较，剂量②、④组家兔膝关节软骨增生分数有显著减小(P<0.05)，剂量③组有极显著减小(P<0.01)。结果表明，药物对家兔骨质增生具有良好的抑制作用，其中剂量③组有最佳治疗效果。

【对醋酸致小鼠扭体反应治疗作用】

由图2可知，与对照组比较，药物各剂量组小鼠扭体次数均有显著减少(P<0.05)，其中剂量③组有极显著减小(P<0.01)；与阳性组比较，剂量③组有显著减少(P<0.05)。结果表明，药物对醋酸致小鼠扭体反应具有良好的对抗作用。

【对小鼠热刺激所致疼痛治疗作用】

由图3可知，与对照组比较，药物各剂量组小鼠痛阈值均有显著增大(P<0.05)，其中剂量③～⑤组有极显著增大(P<0.01)。结果表明，药物可显著提高小鼠痛阈值。

【非临床实验结论】

本发明药物组合物具有良好的抗骨质增生和镇痛作用。

2.2药物临床试验

2.2.1临床试验一般资料

选自2012年3月～2014年3月在本发明药物试用医院进行治疗的628例骨质增患者生。其中颈椎骨质增生223例，腰椎骨质增生(含椎间盘突出)197例，膝关节骨质增生162例，其他类骨质增生46例，其中男性患者276人，女性患者352人。年龄在35～65岁之间，平均年龄为41岁。

2.2.2治疗方法

试验药物：防风15g，五灵脂10g，当归12g，赤芍20g，独活15g，防己10g，桑寄生15g，熟地黄20g，川芎12g，制草乌15g，牛膝15g，元胡15g，红花10g，威灵仙15g，桂枝10g，制川乌15g。

将这628例患者随机分为4组，每组157例。第一组为本发明组合物高剂量组；第二组为本发明组合物中剂量组；第三组为本发明组合物低剂量组；第四组为西药组。中药煎煮及服药方法，按处方量药材加适量水煎煮1.5小时后于饭前半小时服用，按此方法煎煮和服用，一日三次，每副药连续服用2天，连续2周。西药治疗组的157例患者采用口服布洛芬30mg/次，3次/d；服用维生素B625mg/次，3次/d。临床治疗为2周。分析4组患者的治疗后的临床疗效。

2.2.3疗效评定标准

依照我国中医病证诊断疗效标准关于腰椎骨质增生的疗效标准。治愈：疼痛消失，关节活动正常。显效：疼痛有所减轻，关节活动基本正常。有效：疼痛略微有所减轻，关节活动稍有好转。无效疼痛无变化，关节功能无改变。

2.2.4治疗结果

结果见下表2：

表2各实验组治疗效果比较

结果显示，本发明复方对各种类型的骨质增生具有良好的治疗作用，总有效率为100％，且在所有患者治疗期间，未发现明显不良反应，表明本发明药物安全有效。

【临床实验结论】

本发明药物对临床常见骨质增生，如颈椎骨质增生、腰椎骨质增生(含椎间盘突出)、膝关节骨质增生等具有良好的治疗作用，且安全无毒副作用。

试验例2本发明颗粒剂的活性研究

1.材料与方法

1.1药物及其处方组成

防风4～60g，五灵脂2～45g，当归3～36g，赤芍4～60g，独活2～60g，防己3～50g，桑寄生3～50g，熟地黄5～60g，川芎3～48g，制草乌2～30g，牛膝3～60g，元胡2～45g，红花2～40g，威灵仙4～50g，桂枝5～60g，制川乌2～30g。

1.2颗粒剂的制备方法

1.2.1中间体制备

称取防风15g，五灵脂10g，当归12g，赤芍20g，独活15g，防己10g，桑寄生15g，熟地黄20g，川芎12g，制草乌15g，牛膝15g，元胡15g，红花10g，威灵仙15g，桂枝10g，制川乌15g，加处方药材总量的6～20倍量水，加适量水煎煮1～4次，每次1～3小时，过滤，收集滤液，减压浓缩至适当密度，得浸膏液，然后所得浸膏液低温真空干燥，粉碎，得干浸膏粉。

1.2.2颗粒成型

将1.2.1中所得浸膏粉按以下质量配比湿法制粒：

填充剂:浸膏粉＝20％～210％

粘合剂:浸膏粉＝1％～12％

润湿剂:浸膏粉＝40％～120％

其中填充剂包括淀粉、乳糖、甘露醇、微晶纤维素等；粘合剂包括聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羧甲纤维素钠(CMC-Na)等；润湿剂包括蒸馏水、无水乙醇、90％～95％浓度的乙醇等。分别称取处方量浸膏粉和辅料，混合均匀，加入粘合剂的乙醇溶液，搅拌制软材，16目筛制粒，所得颗粒置于干燥箱中鼓风干燥，16目筛整粒，过60目筛，去掉细粉，得颗粒剂。

2药效试验

2.1非临床实验

2.1.1实验动物

(1)家兔：体重2.0～2.7kg，雄性。

(2)KM小鼠，体重18.5～22.5g。

2.1.2实验仪器、试剂

(1)酶标仪、电子天平等

(2)青霉素、链霉素、生理盐水、消毒酒精等。

2.1.3阳性药

(1)抗骨增生片；(2)吗啡

【治疗家兔实验性膝关节增生药效学及其机理】

取家兔40只，以戊巴比妥钠30mg/kg耳缘静脉注射麻醉，固定于手术台上，选左膝在无菌条件下施行手术，于股骨上段绑扎止血带，切除内侧半月板并切断内侧副韧带后，逐层缝合切口，放松止血带。手术结束后，家兔分笼饲养，并连续3天肌注青霉素钠40万U/只，防止伤口感染。同时将已造模的家兔按体重随机分为5组，每组8只，分别作为：模型组、阳性组、颗粒高、中、低剂量组。另取8只作为假手术组(只做假手术创伤)。药物高、中、低剂量组按12.54g浸膏/kg剂量灌胃给药，阳性组按0.50g/kg剂量腹腔注射给予吗啡生理盐水溶液，正常组和模型组灌胃给予纯净水，给药体积均为250ml/kg，连续2周。

检测指标：于末次给药后2h，处死动物，立即解剖膝关节，置10％甲醛溶液中固定、石腊包埋、切片、HE染色，光镜下观察软骨改变情况。将软骨增生程度按表3评分标准进行打分，评价损伤程度。采用免疫组织化学方法观察关节软骨中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)、聚蛋白多糖酶-4(ADAMTS-4)，记录阳性细胞数量。

表3软骨增生成都评价标准

【对醋酸致小鼠扭体反应治疗作用】

取昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机等分为5组，每组10只，分别作为：按体重随机分为7组，每组10只，分别作为：对照组、阳性组、颗粒高、中、低剂量组。药物高、中、低剂量组按23.3g浸膏/kg灌胃给药，阳性组按2.5mg/kg剂量腹腔注射给予吗啡生理盐水溶液，对照组灌胃给予纯净水，体积均为20ml/kg，每日一次，连续7d。于末次给药后1h，每只小鼠腹腔注射0.6％冰醋酸0.1ml/10g，记录注射后5～15min内出现的扭体反应次数。

【对小鼠热刺激所致疼痛治疗作用】

选取昆明种雌性小鼠(痛阈值<5s或>30s者或易跳跃者剔除)70只，随机等分为7组，剂量及时间、体积同上。于末次给药后2测定各实验组小鼠痛阈值，以动物投入热板至出现舔后足的时间为该鼠的痛阈值，超过60s的以60s计。

2.1.4.实验结果

【治疗家兔实验性膝关节增生药效学及其机理】

由图4可知，与模型组比较，药物高、中剂量组家兔膝关节软骨增生分数有极显著减小(P<0.01)，低剂量组有显著减小(P<0.05)；与阳性组比较，药物高剂量组有显著减小(P<0.05)。结果表明，药物对家兔骨质增生具有良好的抑制作用。

由图5可知，与模型组比较，药物高、中剂量组家兔膝关节软骨MMP-1阳性细胞有极显著减少(P<0.01)，低剂量组有显著减少(P<0.05)；与阳性组比较，药物高剂量组有显著减少(P<0.05)。

由图6可知，与模型组比较，药物高、中、低剂量组家兔膝关节软骨TIMP-1阳性细胞均有极显著增多(P<0.01)；与阳性组比较，药物高剂量组有显著增多(P<0.05)。

由图7可知，与模型组比较，药物高剂量组家兔膝关节软骨ADAMTS-4阳性细胞有极显著减少(P<0.01)，中、低剂量组有显著减少(P<0.05)。

【对醋酸致小鼠扭体反应治疗作用】

由图8可知，与对照组比较，药物高、中、低剂量组小鼠扭体次数均有极显著减少(P<0.01)；与阳性组比较，药物高剂量组有显著减少(P<0.05)。结果表明，药物对醋酸致小鼠扭体反应具有良好的对抗作用。

【对小鼠热刺激所致疼痛治疗作用】

由图9可知，与对照组比较，药物高、低剂量组小鼠痛阈值有极显著增大(P<0.01)，中剂量组有显著增大(P<0.05)；与阳性组比较，药物高剂量组有显著增大(P<0.05)。结果表明，药物可显著提高小鼠痛阈值。

【实验结论】

本发明制备的药物颗粒具有良好的抗骨质增生效果，其作用机理可能与降低基质金属蛋白酶1(MMP-1)、聚蛋白多糖酶-4(ADAMTS-4)活性，提高基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)活性有关，同时该颗粒还表现出了良好的镇痛作用。

Claims (7)

1.一种治疗骨质增生的药物组合物，其特征在于：它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂：

防风4~60份，五灵脂2~45份，当归3~36份，赤芍4~60份，独活2~60份，防己3~50份，桑寄生3~50份，熟地黄5~60份，川芎3~48份，制草乌2~30份，牛膝3~60份，元胡2~45份，红花2~40份，威灵仙4~50份，桂枝5~60份，制川乌2~30份。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂：

防风15份，五灵脂10份，当归12份，赤芍20份，独活15份，防己10份，桑寄生15份，熟地黄20份，川芎12份，制草乌15份，牛膝15份，元胡15份，红花10份，威灵仙15份，桂枝10份，制川乌15份。

3.根据权利要求1或2任意一项所述的药物组合物，其特征在于：它是由所述原料药的药粉、或原料药的水或/和乙醇提取物为活性成分，加上药学上常用的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。

4.根据权利要求3任意一项所述的药物组合物，其特征在于：所述制剂为经胃肠道吸收制剂。

5.权利要求1-4任意一项所述药物组合物的制备方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：

（1）按配比称取原料药；

（2）取原料药，加水提取，合并水提液，加上药学上常用的辅料或辅助性成分制备成制剂。

6.权利要求1-4任意一项所述药物组合物在制备抗炎、镇痛或治疗骨质增生的药物中的用途。

7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于：所述药物是治疗颈椎骨质增生、腰椎骨质增生、含椎间盘突出或膝关节骨质增生的药物。