CN114958486A - 一种红景天烟用香料及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及卷烟香精香料技术领域，尤其是涉及一种红景天烟用香料及其制备方法应用，制备方法包括如下步骤：预处理：粉碎红景天药材；超声波提取，制得红景天溶液；对红景天溶液进行灭活处理；活化冠突散囊菌株，以冠突散囊菌株为原料制备冠突散囊菌种子液；向灭活后的红景天溶液中接种冠突散囊菌种子液，发酵后得到红景天微生物发酵液；进行一次醇提、过滤、二次醇提，得到红景天发酵提取液；进行过滤、浓缩得到红景天烟用香料。本发明采用微生物发酵技术来制备香料，利用冠突散囊菌进行发酵处理，提高了红景天中的有效活性成分的提取率，减少了有机试剂的使用量，降低致香物质的损失，红景天的保健功效得到保证和提升。
Description
技术领域
本发明涉及卷烟香精香料技术领域，尤其是涉及一种红景天烟用香料及其制备方法应用。
背景技术
烟用香精香料是专供各种烟草制品加香矫味使用的一种添加剂，能够产生良好的烟气效果。烟用香精香料技术是烟草行业的核心技术之一。通过近年的研究，国内在烟用香精香料技术方面取得了一定成绩，对形成中式卷烟香气和吸味特征做出了贡献。烟用香料一般分为天然烟用香料和人工合成烟用香料。
天然烟用香料具有成分天然、香气协调、香味丰富饱满、环保等优点，具有巨大的开发前景。天然烟用香料在加入卷烟后经燃烧裂解能释放出香气香味，在卷烟生产中占据着非常重要地位。
红景天作为一种天然烟用香料，能增强体内细胞的氧气扩散，或氧气运用效益、抗氧化的能力，有助提高身体对缺氧刺激的适应力。但是由于原料有限，提取成本高，远远满足不了卷烟香料市场的需求。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种红景天烟用香料，该红景天烟用香料具有多种有效成分，提高了保健功效，生产周期短。
本发明的第二目的在于提供一种红景天烟用香料的制备方法，利用了微生物发酵技术，反应条件温和，提升了红景天活性成分的提取效率。
本发明第三目的在于提供一种红景天烟用香料在卷烟生产中的应用。
本发明提供了一种红景天烟用香料的制备方法，包括如下步骤：
(1)预处理：将红景天药材粉碎，得到红景天粉末；优选粉碎时的温度不高于40℃，将红景天在低温条件处理，保证了红景天中有效成分活性，提升了提取效率。
(2)超声波提取：将步骤(1)制备得到的红景天粉末与水、葡萄糖混合均匀，超声波处理，制得红景天溶液；将红景天在低温环境进行粉碎得到粉末进行超声，红景天内有效活性成分会快速有效的浸出，有助于后续提取，提高提取效率。
(3)溶液灭活：对步骤(2)中得到的红景天溶液进行灭活处理；
(4)冠突散囊菌种子液制备：活化冠突散囊菌株，以冠突散囊菌株为原料制备冠突散囊菌种子液；
(5)微生物发酵处理：向步骤(3)灭活后的红景天溶液中接种步骤(4)得到的冠突散囊菌种子液，发酵后得到红景天微生物发酵液；
(6)提纯：以乙醇作为浸提剂，对步骤(5)中的红景天微生物发酵液进行一次醇提、过滤、二次醇提，得到红景天发酵提取液；
(7)对步骤(6)得到的红景天发酵提取液进行过滤、浓缩得到红景天烟用香料。
优选地，步骤(2)中红景天粉末与水和葡萄糖之间的质量比为1:10-50：3-5，超声波处理时将超声设备设置为温度45-55℃、功率400-500KW，提取时间30-60min。
优选地，步骤(3)中灭活处理的条件为：121℃条件下灭菌15-30min，冷却至室温。
优选地，步骤(4)冠突散囊菌种子液制备的具体步骤为：取冠突散囊菌株接种于固体培养基培养，形成冠突散囊菌孢子，培养温度为25-35℃，培养时间为5-7d，固体培养基为CZG或PDA固体培养基；用灭菌的玻璃棒从平板上刮取冠突散囊菌孢子，无菌水稀释，获得孢子悬浮液，孢子悬浮液的OD600吸收值为0.5-3.0，即为冠突散囊菌种子液，其中冠突散囊菌的浓度为1×103～1×108CFU/mL。
优选地，步骤(5)中发酵条件为发酵温度25-35℃，搅拌转速100-300r/min，培养时间为2-7d，冠突散囊菌种子液的接种量为红景天溶液体积百分比的1％～5％。冠突散囊菌具有良好的产香能力和发酵能力，其代谢产物还具有保健功能。利用冠突散囊菌对红景天溶液进行发酵处理，得到由多种香味成分有机组合而成的红景天微生物发酵液，烟用香料香韵独特、协调性好，香味品质高，为烟用香料的开发提供了重要途径。
优选地，步骤(6)中一次醇提和二次醇提的条件为：乙醇浓度为50-100％(V/V)，红景天微生物发酵液与乙醇之间的体积比为1:10-15。本发明通过超声波处理和多次醇提，提高了红景天活性成分的提取效率。
优选地，步骤(6)中过滤条件为：采用孔径60-80目滤布过滤，并进行离心，离心机转速为6000-10000rpm，离心时间为5-20min。
优选地，步骤(7)中过滤采用膜孔径为200-400目的过滤膜过滤，浓缩的具体步骤为采用旋转蒸馏真空减压浓缩，浓缩温度30-35℃、真空度30-35mbar，转速60-75rpm，将红景天发酵提取液减压浓缩至1.20±0.005g/mL。
本发明还提供了一种上述制备方法制备得到的红景天烟用香料。
本发明还提供了红景天烟用香料在卷烟生产中的应用。
有益效果：
本发明利用微生物发酵技术来制备香料或进行香料的转化，制备得到的香料为天然级产品，在提高香料产品质量的同时，节约能源、降低成本，实现了天然香料加工技术的革命。
本申请采用的微生物为冠突散囊菌，利用冠突散囊菌进行发酵处理，提高了红景天中的有效活性成分红景天苷、红景天素、槲皮素、洛塞琳和络塞维的提取率，减少了有机试剂的使用量，降低致香物质的损失，极大地保护了红景天活性成分的药用价值，红景天的保健功效得到保证和提升。该烟用香料香韵协调、独特，具有提升卷烟香气量、柔和细腻烟气、降低喉部刺激感的功效。
与传统制备的红景天提取物相比，本发明提供的微生物发酵技术制备红景天烟用香料的反应条件温和、产物易分离、生产周期短，具有安全环保、操作简便、易调控等优点，有利于节约工艺成本，适宜工业化生产。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种红景天烟用香料的制备方法，包括如下步骤：
(1)预处理：将红景天药材粉碎，得到红景天粉末；粉碎时的温度不高于40℃，将红景天在低温条件处理，保证了红景天中有效成分活性，提升了提取效率；
(2)超声波提取：将步骤(1)制备得到的红景天粉末与水、葡萄糖按照质量比为1:30：5混合均匀，超声波处理，将超声设备设置为温度55℃、功率500KW，提取时间60min，制得红景天溶液；将红景天在低温环境进行粉碎得到粉末进行超声，红景天内有效活性成分会快速有效的浸出，有助于后续提取，提高提取效率；
(3)溶液灭活：对步骤(2)中得到的红景天溶液进行灭活处理；121℃条件下灭菌30min，之后冷却至室温；
(4)冠突散囊菌种子液制备：取冠突散囊菌株接种于PDA固体培养基培养，在30℃下培养5d，形成冠突散囊菌孢子；用灭菌的玻璃棒从平板上刮取冠突散囊菌孢子，无菌水稀释，调整孢子悬浮液的OD600吸收值为1.0，得到冠突散囊菌种子液，其中冠突散囊菌的浓度为2.68×106CFU/mL；
(5)微生物发酵处理：向步骤(3)灭活后的红景天溶液中接种步骤(4)得到的冠突散囊菌种子液，冠突散囊菌种子液的接种量为红景天溶液体积百分比的1％；进行发酵处理，发酵温度28℃，搅拌转速210r/min，培养时间为3d，发酵后得到红景天微生物发酵液；
(6)提纯：以浓度为75％(V/V)的乙醇作为浸提剂，红景天微生物发酵液与乙醇之间按照体积比1:10进行混合，对步骤(5)中的红景天微生物发酵液进行一次醇提；之后采用孔径60目滤布过滤，并在10000rpm下离心10min，去除红景天残渣和冠突散囊菌体；以浓度为90％(V/V)的乙醇作为浸提剂，红景天微生物发酵液与乙醇按1:10比例混合，进行二次醇提，得到红景天发酵提取液；
(7)对步骤(6)得到的红景天发酵提取液采用膜孔径为200目的过滤膜进行过滤，并对滤液进行浓缩，采用旋转蒸馏真空减压浓缩，浓缩温度30℃、真空度35mbar，转速75rpm，将红景天发酵提取液减压浓缩至1.20±0.005g/mL，得到红景天烟用香料。
本发明制备得到的红景天烟用香料在卷烟生产中应用。
实施例2
一种红景天烟用香料的制备方法，包括如下步骤：
(1)预处理：将红景天药材粉碎，得到红景天粉末；粉碎时的温度不高于40℃，将红景天在低温条件处理，保证了红景天中有效成分活性，提升了提取效率；
(2)超声波提取：将步骤(1)制备得到的红景天粉末与水、葡萄糖按照质量比为1:10:3混合均匀，超声波处理，将超声设备设置为温度45℃、功率400KW，提取时间30min，制得红景天溶液；将红景天在低温环境进行粉碎得到粉末进行超声，红景天内有效活性成分会快速有效的浸出，有助于后续提取，提高提取效率；
(3)溶液灭活：对步骤(2)中得到的红景天溶液进行灭活处理；121℃条件下灭菌15min，之后冷却至室温；
(4)冠突散囊菌种子液制备：取冠突散囊菌株接种于固体培养基培养，形成冠突散囊菌孢子，培养温度为25℃，培养时间为6d，固体培养基为CZG固体培养基；用灭菌的玻璃棒从平板上刮取冠突散囊菌孢子，无菌水稀释，获得孢子悬浮液，孢子悬浮液的OD600吸收值为0.5，即为冠突散囊菌种子液，其中冠突散囊菌的浓度为1.94×104CFU/mL；
(5)微生物发酵处理：向步骤(3)灭活后的红景天溶液中接种步骤(4)得到的冠突散囊菌种子液，冠突散囊菌种子液的接种量为红景天溶液体积百分比的3％进行发酵，发酵温度25℃，搅拌转速110r/min，培养时间为2d，发酵后得到红景天微生物发酵液；
(6)提纯：以浓度为50％(V/V)的乙醇作为浸提剂，红景天微生物发酵液与乙醇之间按照体积比1:10进行混合，对步骤(5)中的红景天微生物发酵液进行一次醇提；之后采用孔径60目滤布过滤，并在6500rpm下离心5min，去除红景天残渣和冠突散囊菌体；以浓度为50％(V/V)的乙醇作为浸提剂，红景天微生物发酵液与乙醇按1:10比例混合，进行二次醇提，得到红景天发酵提取液；
(7)对步骤(6)得到的红景天发酵提取液采用膜孔径为200-400目的过滤膜进行过滤，并对滤液进行浓缩，采用旋转蒸馏真空减压浓缩，浓缩温度30℃、真空度30mbar，转速60rpm，将红景天发酵提取液减压浓缩至1.20±0.005g/mL，得到红景天烟用香料。
本发明制备得到的红景天烟用香料在卷烟生产中应用。
实施例3
一种红景天烟用香料的制备方法，包括如下步骤：
(1)预处理：将红景天药材粉碎，得到红景天粉末；粉碎时的温度不高于40℃，将红景天在低温条件处理，保证了红景天中有效成分活性，提升了提取效率；
(2)超声波提取：将步骤(1)制备得到的红景天粉末与水、葡萄糖按照质量比为1:50:5混合均匀，超声波处理，将超声设备设置为温度50℃、功率450KW，提取时间50min，制得红景天溶液；将红景天在低温环境进行粉碎得到粉末进行超声，红景天内有效活性成分会快速有效的浸出，有助于后续提取，提高提取效率；
(3)溶液灭活：对步骤(2)中得到的红景天溶液进行灭活处理；121℃条件下灭菌30min，之后冷却至室温；
(4)冠突散囊菌种子液制备：取冠突散囊菌株接种于固体培养基培养，形成冠突散囊菌孢子，培养温度为35℃，培养时间为7d，固体培养基为PDA固体培养基；用灭菌的玻璃棒从平板上刮取冠突散囊菌孢子，无菌水稀释，获得孢子悬浮液，孢子悬浮液的OD600吸收值为3.0，即为冠突散囊菌种子液，其中冠突散囊菌的浓度为8.25×107CFU/mL；
(5)微生物发酵处理：向步骤(3)灭活后的红景天溶液中接种步骤(4)得到的冠突散囊菌种子液，冠突散囊菌种子液的接种量为红景天溶液体积百分比的5％；进行发酵，发酵温度35℃，搅拌转速300r/min，培养时间为7d，发酵后得到红景天微生物发酵液；
(6)提纯：以浓度为100％(V/V)的乙醇作为浸提剂，红景天微生物发酵液与乙醇之间按照体积比1:15进行混合，对步骤(5)中的红景天微生物发酵液进行一次醇提；之后采用孔径80目滤布过滤，并在10000rpm下离心20min，去除红景天残渣和冠突散囊菌体；以浓度为100％(V/V)的乙醇作为浸提剂，红景天微生物发酵液与乙醇按1:15比例混合，进行二次醇提，得到红景天发酵提取液；
(7)对步骤(6)得到的红景天发酵提取液采用膜孔径为200-400目的过滤膜进行过滤，并对滤液进行浓缩，采用旋转蒸馏真空减压浓缩，浓缩温度35℃、真空度35mbar，转速75rpm，将红景天发酵提取液减压浓缩至1.20±0.005g/mL，得到红景天烟用香料。
本发明制备得到的红景天烟用香料在卷烟生产中应用。
对比例1
一种红景天烟用香料的制备方法，包括如下步骤：
(1)预处理：将红景天药材粉碎，得到红景天粉末；粉碎时的温度不高于40℃，将红景天在低温条件处理，保证了红景天中有效成分活性，提升了提取效率；
(2)超声波提取：将步骤(1)制备得到的红景天粉末与水、葡萄糖按照质量比为1:30：5混合均匀，超声波处理，将超声设备设置为温度55℃、功率500KW，提取时间60min，制得红景天溶液；
(3)提纯：以浓度为75％(V/V)的乙醇作为浸提剂，红景天溶液与乙醇之间按照体积比1:10进行混合，对步骤(5)中的红景天溶液进行一次醇提；之后采用孔径60目滤布过滤，并在10000rpm下离心10min，去除红景天残渣，取滤液备用；以浓度为90％(V/V)的乙醇作为浸提剂，红景天溶液与乙醇按1:10比例混合，进行二次醇提，得到红景天提取液；
(4)对步骤(3)得到的红景天提取液采用膜孔径为200目的过滤膜进行过滤，得到红景天滤液，并对滤液进行浓缩，采用旋转蒸馏真空减压浓缩，浓缩温度30℃、真空度35mbar，转速75rpm，将红景天发酵提取液减压浓缩至1.20±0.005g/mL，得到红景天烟用香料。
测试例
采用UPLCMS-MS对实施例1-3和对比例1制备得到的红景天烟用香料进行检测，得到红景天苷、红景天素、槲皮素、洛塞琳和络塞维五种有效活性成分的含量，测试结果如表1所示。
表1主要活性成分(单位：mg/g)
| 活性成分 | 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 对比例1 |
| 红景天苷 | 1.1407 | 1.1382 | 1.1623 | 1.1218 |
| 红景天素 | 0.4226 | 0.4018 | 0.4697 | 0.3801 |
| 槲皮素 | 0.0094 | 0.0082 | 0.0171 | 0.0078 |
| 洛塞琳 | 0.0188 | 0.0179 | 0.0194 | 0.0154 |
| 络塞维 | 0.0182 | 0.0181 | 0.0190 | 0.0179 |
由表1可知，本发明经冠突散囊菌发酵后的红景天烟用香料，其活性成分红景天苷、红景天素、槲皮素、洛塞琳和络塞维的含量明显提升。红景天中含有红景天苷、红景天素、槲皮素、洛塞琳和络塞维等有效成分，因此红景天能增强体内细胞的氧气扩散，或氧气运用效益、抗氧化的能力，有助提高身体对缺氧刺激的适应力。红景天苷具有抗氧化、抗炎、抗肝纤维化等多种作用。本发明通过低温冷冻、微生物发酵、蒸馏减压浓缩等技术的结合制备的红景天香料能够改善卷烟的抽吸品质，保证红景天有效活性成分的活性和提取效率，制备得到的红景天烟用香料中的活性成分含量明显提升，进而提高了其保健功效。
由此可见，本发明采用冠突散囊菌发酵制得的红景天烟用香料具有较高的品质。同时本发明提供的微生物发酵技术制备红景天烟用香料的反应条件温和、产物易分离、生产周期短，具有安全环保、操作简便、易调控等优点，有利于节约工艺成本，适宜工业化生产。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (10)
1.一种红景天烟用香料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)预处理：将红景天药材粉碎，得到红景天粉末；
(2)超声波提取：将步骤(1)制备得到的红景天粉末与水、葡萄糖混合均匀，超声波处理，制得红景天溶液；
(3)溶液灭活：对步骤(2)中得到的红景天溶液进行灭活处理；
(4)冠突散囊菌种子液制备：活化冠突散囊菌株，以冠突散囊菌株为原料制备冠突散囊菌种子液；
(5)微生物发酵处理：向步骤(3)灭活后的红景天溶液中接种步骤(4)得到的冠突散囊菌种子液，发酵后得到红景天微生物发酵液；
(6)提纯：以乙醇作为浸提剂，对步骤(5)中的红景天微生物发酵液进行一次醇提、过滤、二次醇提，得到红景天发酵提取液；
(7)对步骤(6)得到的红景天发酵提取液进行过滤、浓缩得到红景天烟用香料。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中红景天粉末与水和葡萄糖之间的质量比为1:10-50：3-5，超声波处理时将超声设备设置为温度45-55℃、功率400-500KW，提取时间30-60min。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中灭活处理的条件为：121℃条件下灭菌15-30min，冷却至室温。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)冠突散囊菌种子液制备的具体步骤为：取冠突散囊菌株接种于固体培养基培养，形成冠突散囊菌孢子，培养温度为25-35℃，培养时间为5-7d，固体培养基为CZG或PDA固体培养基；用灭菌的玻璃棒从平板上刮取冠突散囊菌孢子，无菌水稀释，获得孢子悬浮液，孢子悬浮液的OD600吸收值为0.5-3.0，即为冠突散囊菌种子液，其中冠突散囊菌的浓度为1×103～1×108CFU/mL。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)中发酵条件为发酵温度25-35℃，搅拌转速100-300r/min，培养时间为2-7d，冠突散囊菌种子液的接种量为红景天溶液体积百分比的1％～5％。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(6)中一次醇提和二次醇提的条件为：乙醇浓度为50-100％(V/V)，红景天微生物发酵液与乙醇之间的体积比为1:10-15。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(6)中过滤条件为：采用孔径60-80目滤布过滤，并进行离心，离心机转速为6000-10000rpm，离心时间为5-20min。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(7)中过滤采用膜孔径为200-400目的过滤膜过滤，浓缩的具体步骤为采用旋转蒸馏真空减压浓缩，浓缩温度30-35℃、真空度30-35mbar，转速60-75rpm，将红景天发酵提取液减压浓缩至1.20±0.005g/mL。
9.一种权利要求1-8任一所述的制备方法制备得到的红景天烟用香料。
10.一种权利要求9所述红景天烟用香料在卷烟生产中的应用。
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|---|---|---|---|---|
| CN114891639A (zh) * | 2021-11-23 | 2022-08-12 | 河北省科学院生物研究所 | 一种提高红景天苷含量的微生物菌株及其发酵方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101928638A (zh) * | 2009-06-23 | 2010-12-29 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 红景天提取物及其作为烟草制品添加剂的用途 |
| CN103923132A (zh) * | 2014-04-16 | 2014-07-16 | 安徽博格生物科技有限公司 | 天然红景天中红景天甙的超声提取工艺 |
| CN108142984A (zh) * | 2017-12-12 | 2018-06-12 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种利用茶源金花菌发酵制备烟叶余料香料的方法 |
| CN112442421A (zh) * | 2020-11-19 | 2021-03-05 | 河南中烟工业有限责任公司 | 一种香樟香型烟用香料的制备方法 |
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Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101928638A (zh) * | 2009-06-23 | 2010-12-29 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 红景天提取物及其作为烟草制品添加剂的用途 |
| CN103923132A (zh) * | 2014-04-16 | 2014-07-16 | 安徽博格生物科技有限公司 | 天然红景天中红景天甙的超声提取工艺 |
| CN108142984A (zh) * | 2017-12-12 | 2018-06-12 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种利用茶源金花菌发酵制备烟叶余料香料的方法 |
| CN112442421A (zh) * | 2020-11-19 | 2021-03-05 | 河南中烟工业有限责任公司 | 一种香樟香型烟用香料的制备方法 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114891639A (zh) * | 2021-11-23 | 2022-08-12 | 河北省科学院生物研究所 | 一种提高红景天苷含量的微生物菌株及其发酵方法 |
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