CN114931525B - 一种小分子团活水组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种小分子团活水组合物及其制备方法，包括以下成分：小分子水、生物酶，所述生物酶包括蛋白酶和/或淀粉酶。本发明采用小分子水、特定的生物酶制备了小分子团活水组合物具有优异的低温稳定性，尤其是在5℃下的环境下能够长期存放而不会团聚成大分子水，同时小分子水能够引导具有催化、分解及掌握生命活动的生物酶作用于皮肤及毛孔，进行最原始最有效的方式做深层清洁，皮肤修复和滋润，从而保持皮肤的弹性和光泽。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种小分子团活水组合物及其制备方法。
背景技术
小分子团水具有很强的溶解力、代谢力、渗透力、乳化力、洗净力、扩散力，能够将更多水分和营养带入细胞，同时可以更好地排出废物和毒物。由于小分子团水更容易被体内每一个细胞吸收和利用，因此它的生物学利用率比普通水要高很多，能够增强新陈代谢的效率和功能、增强每细胞和周围组织机构间的信息传递、提高全身氧的运输能力等。然而小分子水因其粒径较小，其稳定性较差，一般不会超过4个小时就会团聚形成大分子水。针对上述问题，申请人前期研究了一种小分子水簇团组合物，已经公开在中国专利CN111789773A中，能够长期稳定小分子水，并且可以很好地增强皮肤屏障的作用，具有免疫调节的作用，但是申请人经过一段时间后发现所述小分子水簇团组合物在常温下具有较好的稳定性，但是当温度较低时，稳定性较差，则会缔合成大的水分子，基于此，申请人在原来的基础上进行了改善与优化，特提出本申请，提高了小分子水簇组合物的低温稳定性。
发明内容
针对上述提到的技术问题，本发明一方面提供了一种小分子团活水组合物，包括以下成分：小分子水、生物酶，所述生物酶包括蛋白酶和/或淀粉酶。
作为一种优选的技术方案，按照重量份计，所述小分子团活水组合物包括小分子水95-100份、生物酶0.8-1.5份。
作为一种优选的技术方案，所述小分子水的制备方法包括以下步骤：将氢气与水在压力下的高度混合液输入到小分子水制备器，穿过永磁强磁场，垂直切割磁力线，即得。
作为一种优选的技术方案，所述氢气与水的体积比为1：(0.8-1.2)。
作为一种优选的技术方案，所述压力为7-9kg，所述强磁场的强度为40-50千高斯。
作为一种优选的技术方案，所述生物酶包括蛋白酶和淀粉酶，二者的重量比为1：(0.3-0.6)。
作为一种优选的技术方案，所述蛋白酶包括菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶，其重量比为(1-3)：1。
作为一种优选的技术方案，所述木瓜蛋白酶的制备方法包括以下步骤：
(1)将清洗后的番木瓜去皮、去籽，榨汁，加入复合酶在40-50℃下反应1-2h，抽滤，去除滤渣，离心后取上清液，冷藏备用；
(2)向步骤(1)所得上清液中加入乙醇水溶液，然后再加入半胱氨酸、乙二胺四乙酸、维生素B1，用氢氧化钠水溶液调节pH值至6-8，静置8-12h，然后离心，取上清液，最后经冷冻干燥，即得。
作为一种优选的技术方案，所述复合酶包括纤维素酶和果胶酶，重量比为(2-3)：1。
本发明的另一方面提供了一种小分子团活水组合物的制备方法，包括以下步骤：将小分子水、生物酶混合后即得。
有益效果：本发明采用小分子水、特定的生物酶制备了小分子团活水组合物具有优异的低温稳定性，尤其是在5℃下的环境下能够长期存放而不会团聚成大分子水，同时小分子水能够引导具有催化、分解及掌握生命活动的生物酶作用于皮肤及毛孔，进行最原始最有效的方式做深层清洁，皮肤修复和滋润，从而保持皮肤的弹性和光泽。
具体实施方式
结合以下本发明的优选实施方法的详述以及包括的实施例可进一步地理解本发明的内容。除非另有说明，本文中使用的所有技术及科学术语均具有与本发明所属领域普通技术人员的通常理解相同的含义。如果现有技术中披露的具体术语的定义与本发明中提供的任何定义不一致，则以本发明中提供的术语定义为准。
在本文中使用的，除非上下文中明确地另有指示，否则没有限定单复数形式的特征也意在包括复数形式的特征。还应理解的是，如本文所用术语“由…制备”与“包含”同义，“包括”、“包括有”、“具有”、“包含”和/或“包含有”，当在本说明书中使用时表示所陈述的组合物、步骤、方法、制品或装置，但不排除存在或添加一个或多个其它组合物、步骤、方法、制品或装置。此外，当描述本发明的实施方式时，使用“优选的”、“优选地”、“更优选的”等是指，在某些情况下可提供某些有益效果的本发明实施方案。然而，在相同的情况下或其他情况下，其他实施方案也可能是优选的。除此之外，对一个或多个优选实施方案的表述并不暗示其他实施方案不可用，也并非旨在将其他实施方案排除在本发明的范围之外。
为了实现上述目的，本发明一方面提供了一种小分子团活水组合物，包括以下成分：小分子水、生物酶，所述生物酶包括蛋白酶和/或淀粉酶。
在一些优选的实施方式中，按照重量份计，所述小分子团活水组合物包括小分子水95-100份、生物酶0.8-1.5份。
优选的，所述小分子团活水组合物包括小分子水98份、生物酶1.2份。
在一些优选的实施方式中，所述小分子水的制备方法包括以下步骤：将氢气与水在压力下的高度混合液输入到小分子水制备器，穿过永磁强磁场，垂直切割磁力线，即得。
在一些优选的实施方式中，所述氢气与水的体积比为1：(0.8-1.2)。
优选的，所述氢气与水的体积比为1：1。
在一些优选的实施方式中，所述压力为7-9kg，所述强磁场的强度为40-50千高斯。
优选的，所述压力为8kg，所述强磁场的强度为47千高斯。
在一些优选的实施方式中，所述生物酶包括蛋白酶和淀粉酶，二者的重量比为1：(0.3-0.6)。
优选的，所述生物酶包括蛋白酶和淀粉酶，二者的重量比为1：0.5。
所述淀粉酶为支链型淀粉酶，可通过市售购买得到，包括但不限于，所述支链型淀粉酶购自石家庄宁诺商贸有限公司。
在一些优选的实施方式中，所述蛋白酶包括菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶，其重量比为(1-3)：1。
优选的，所述蛋白酶包括菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶，其重量比为2：1。
在一些优选的实施方式中，所述菠萝蛋白酶的制备方法包括以下步骤：
(1)将菠萝果皮清洗后榨汁，过滤除去大颗粒杂质后进行预冷处理，向其中加入粉末NaHSO3、粉末半胱氨酸、粉末乙二胺四乙酸、粉末维生素B1，以3000r/min离心20min，收集上清液；
(2)向步骤(1)所得上清液中加入聚丙烯酸，置于4℃冷凝聚10h，以3000r/min离心20min，收集沉淀；
(3)向步骤(2)所得沉淀中缓慢加入乙酸钙水溶液直至完全溶解沉淀，以3000r/min离心，取上清液，加入缓冲液，4℃透析10小时，最后经冷冻干燥，即得。
在一些优选的实施方式中，所述预冷处理的温度为0-5℃，预冷处理时间为10-20h。
优选的，所述预冷处理的温度为2℃，预冷处理时间为16h。
在一些优选的实施方式中，所述的单位体积菠萝汁中粉末NaHSO3的加入量为0.1-0.5mg/L。
优选的，所述的单位体积菠萝汁中粉末NaHSO3的加入量为0.3mg/L。
在一些优选的实施方式中，所述粉末NaHSO3、粉末乙二胺四乙酸、粉末半胱氨酸、粉末维生素B1的重量比为(0.1-0.5)：(0.3-0.7)：(0.02-0.06)：(0.01-0.05)。
所述粉末NaHSO3、粉末乙二胺四乙酸、粉末半胱氨酸、粉末维生素B1的重量比为0.3：0.05：0.5：0.03。
在一些优选的实施方式中，所述聚丙烯酸的加入量为步骤(1)所得上清液的0.5-1wt％。
优选的，所述聚丙烯酸的加入量为步骤(1)所得上清液的0.8wt％。
在一些优选的实施方式中，所述乙酸钙水溶液的浓度为35-45mmol/L，所述缓冲液为磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液，所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的浓度为0.04-0.06mol/L，pH值为6.5-7。
优选的，所述乙酸钙水溶液的浓度为39mmol/L，所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的浓度为0.05mol/L，pH值为6.8。
在一些优选的实施方式中，所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的加入量是步骤(3)中所述上清液体积的2-6倍。
优选的，所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的加入量是步骤(3)中所述上清液体积的4倍。
在一些优选的实施方式中，所述冷冻干燥温度为-40℃。
所述半胱氨酸的CAS号为4371-52-2，所述维生素B1的CAS号为59-43-8，所述聚丙烯酸的CAS号为9003-01-4。
在一些优选的实施方式中，所述木瓜蛋白酶的制备方法包括以下步骤：
(1)将清洗后的番木瓜去皮、去籽，榨汁，加入复合酶在40-50℃下反应1-2h，抽滤，去除滤渣，离心后取上清液，冷藏备用；
(2)向步骤(1)所得上清液中加入乙醇水溶液，然后再加入半胱氨酸、乙二胺四乙酸、维生素B1，用氢氧化钠水溶液调节pH值至6-8，静置8-12h，然后离心，取上清液，最后经冷冻干燥，即得。
在一些优选的实施方式中，所述复合酶的加入量为番木瓜的0.3-0.8wt％。
优选的，所述复合酶的加入量为番木瓜的0.5wt％
在一些优选的实施方式中，所述复合酶包括纤维素酶和果胶酶，重量比为(2-3)：1。
优选的，所述复合酶包括纤维素酶和果胶酶，重量比为2.5：1。
在一些优选的实施方式中，所述乙醇水溶液的浓度为70-80wt％，优选为所述乙醇水溶液的浓度为75wt％。
在一些优选的实施方式中，所述步骤(1)所得上清液中粉末半胱氨酸的加入量为1-3g/L。
优选的，所述步骤(1)所得上清液中粉末半胱氨酸的加入量为2g/L。
在一些优选的实施方式中，，所述粉末半胱氨酸、粉末维生素B1、粉末乙二胺四乙酸的重量比为(1-3)：(0.5-1.5)：(0.2-0.4)。
优选的，所述粉末半胱氨酸、粉末维生素B1、粉末乙二胺四乙酸的重量比为2：1：0.3。
在一些优选的实施方式中，所述氢氧化钠水溶液的浓度为0.5-2mol/L，优选为1mol/L。
在一些优选的实施方式中，所述冷冻干燥温度为-40℃。
所述纤维素酶的CAS号为9012-54-8，所述果胶酶的CAS号为9032-75-1。
在一些优选的实施方式中，所述生物酶的制备方法包括以下步骤：将蛋白酶、淀粉酶、水混合后于37℃下有氧发酵20天，发酵期满后每隔15h搅拌一次，搅拌时间为20min，10天后停止搅拌，静置10天，最后经过滤即得。
申请人前期研究了一种小分子水簇团组合物，能够长期稳定小分子水，并且可以很好地增强皮肤屏障的作用，具有免疫调节的作用，但是申请人经过一段时间后发现所述小分子水簇团组合物在常温下具有较好的稳定性，但是当温度较低时，稳定性变得较差，会缔合成大的水分子，申请人在前期的基础上又做了大量研究，意外地发现，当在体系中加入特定的蛋白酶和淀粉酶以1：(0.3-0.6)的重量比作为生物酶，能够提高小分子团活水组合物的低温稳定性，可能的原因在于一方面加入的淀粉酶具有较多的支链，能够与蛋白酶中的自由基、自由质子产生更多的交互，使其形成的小分子团活水组合物更加稳定，减少了水分子之间的氢键结合，因此在温度较低时也不会缔合成大分子水，从而增加了小分子团活水组合物低温稳定性。
本发明的另一方面提供了一种小分子团活水组合物的制备方法，包括以下步骤：将小分子水、生物酶混合后即得。
实施例
为了更好的理解上述技术方案，下面将结合具体的实施方式对上述技术方案进行详细的说明。有必要在此指出的是，以下实施例只用于对本发明作进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的专业技术人员根据上述本发明的内容做出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。另外，如果没有其它说明，所用原料都是市售的。
实施例1
本实施例一方面提供了一种小分子团活水组合物，按照重量份计，所述小分子团活水组合物的原料为：小分子水98份、生物酶1.2份。
所述小分子水的制备方法包括以下步骤：将氢气与水在压力下的高度混合液输入到小分子水制备器，穿过永磁强磁场，垂直切割磁力线，即得。
所述压力为8kg，所述强磁场的强度为47千高斯。
所述生物酶包括蛋白酶和淀粉酶，二者的重量比为1：0.5。
所述淀粉酶为支链型淀粉酶，购自石家庄宁诺商贸有限公司。
所述蛋白酶包括菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶，其重量比为2：1。
所述菠萝蛋白酶的制备方法包括以下步骤：
(1)将菠萝果皮清洗后榨汁，过滤后进行预冷处理，然后加入粉末NaHSO3、粉末半胱氨酸、粉末乙二胺四乙酸、粉末维生素B1，以3000r/min离心20min，收集上清液；
(2)向上清液中加入聚丙烯酸，置于4℃冷凝聚10h，以3000r/min离心20min，收集沉淀；
(3)向沉淀中缓慢加入乙酸钙水溶液直至完全溶解沉淀，以3000r/min离心，取上清液，加入缓冲液，4℃透析10小时，最后经冷冻干燥，即得。
所述预冷处理的温度为2℃，预冷处理时间为16h。
所述的单位体积菠萝汁中粉末NaHSO3的加入量为0.3mg/L。
所述粉末NaHSO3、粉末乙二胺四乙酸、粉末半胱氨酸、粉末维生素B1的重量比为0.3：0.05：0.5：0.03。
所述聚丙烯酸的加入量为步骤(1)所得上清液的0.8wt％，所述乙酸钙水溶液的浓度为39mmol/L，所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的浓度为0.05mol/L，pH值为6.8。
所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的加入量是步骤(3)中所述上清液体积的4倍。
所述冷冻干燥温度为-40℃。
所述木瓜蛋白酶的制备方法包括以下步骤：
(1)将清洗后的番木瓜去皮、去籽，榨汁，加入复合酶在45℃下反应1.5h，抽滤，去除滤渣，离心后取上清液，冷藏备用；
(2)向步骤(1)所得上清液中加入乙醇水溶液，然后再加入半胱氨酸、乙二胺四乙酸、维生素B1，用氢氧化钠水溶液调节pH值至7，静置10h，然后离心，取上清液，最后经冷冻干燥，即得。
所述复合酶的加入量为番木瓜的0.5wt％，所述复合酶包括纤维素酶和果胶酶，重量比为2.5：1。
所述乙醇水溶液的浓度为75wt％。
所述步骤(1)所得上清液中粉末半胱氨酸的加入量为2g/L。
所述粉末半胱氨酸、粉末维生素B1、粉末乙二胺四乙酸的重量比为2：1：0.3。
所述氢氧化钠水溶液的浓度为1mol/L。
所述冷冻干燥温度为-40℃
所述生物酶的制备方法包括以下步骤：将蛋白酶、淀粉酶、水混合后于37℃下有氧发酵20天，发酵期满后每隔15h搅拌一次，搅拌时间为20min，10天后停止搅拌，静置10天，最后经过滤即得。
本实施例的另一方面提供了一种小分子团活水组合物的制备方法，包括以下步骤：将小分子水、生物酶混合后即得。
实施例2
本实施例一方面提供了一种小分子团活水组合物，按照重量份计，所述小分子团活水组合物的原料为：小分子水95份、生物酶0.8份。
所述小分子水的制备方法包括以下步骤：将氢气与水在压力下的高度混合液输入到小分子水制备器，穿过永磁强磁场，垂直切割磁力线，即得。
所述压力为8kg，所述强磁场的强度为47千高斯。
所述生物酶包括蛋白酶和淀粉酶，二者的重量比为1：0.3。
所述淀粉酶为支链型淀粉酶，购自石家庄宁诺商贸有限公司。
所述蛋白酶包括菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶，其重量比为1：1。
所述菠萝蛋白酶的制备方法包括以下步骤：
(1)将菠萝果皮清洗后榨汁，过滤后进行预冷处理，然后加入粉末NaHSO3、粉末半胱氨酸、粉末乙二胺四乙酸、粉末维生素B1，以3000r/min离心20min，收集上清液；
(2)向上清液中加入聚丙烯酸，置于4℃冷凝聚10h，以3000r/min离心20min，收集沉淀；
(3)向沉淀中缓慢加入乙酸钙水溶液直至完全溶解沉淀，以3000r/min离心，取上清液，加入缓冲液，4℃透析10小时，最后经冷冻干燥，即得。
所述预冷处理的温度为2℃，预冷处理时间为16h。
所述的单位体积菠萝汁中粉末NaHSO3的加入量为0.3mg/L。
所述粉末NaHSO3、粉末乙二胺四乙酸、粉末半胱氨酸、粉末维生素B1的重量比为0.3：0.05：0.5：0.03。
所述聚丙烯酸的加入量为步骤(1)所得上清液的0.8wt％，所述乙酸钙水溶液的浓度为39mmol/L，所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的浓度为0.05mol/L，pH值为6.8。
所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的加入量是步骤(3)中所述上清液体积的4倍。
所述冷冻干燥温度为-40℃。
所述木瓜蛋白酶的制备方法包括以下步骤：
(1)将清洗后的番木瓜去皮、去籽，榨汁，加入复合酶在45℃下反应1.5h，抽滤，去除滤渣，离心后取上清液，冷藏备用；
(2)向步骤(1)所得上清液中加入乙醇水溶液，然后再加入半胱氨酸、乙二胺四乙酸、维生素B1，用氢氧化钠水溶液调节pH值至7，静置10h，然后离心，取上清液，最后经冷冻干燥，即得。
所述复合酶的加入量为番木瓜的0.5wt％，所述复合酶包括纤维素酶和果胶酶，重量比为2：1。
所述乙醇水溶液的浓度为75wt％。
所述步骤(1)所得上清液中粉末半胱氨酸的加入量为2g/L。
所述粉末半胱氨酸、粉末维生素B1、粉末乙二胺四乙酸的重量比为2：1：0.3。
所述氢氧化钠水溶液的浓度为1mol/L。
所述冷冻干燥温度为-40℃
所述生物酶的制备方法包括以下步骤：将蛋白酶、淀粉酶、水混合后于37℃下有氧发酵20天，发酵期满后每隔15h搅拌一次，搅拌时间为20min，10天后停止搅拌，静置10天，最后经过滤即得。
本实施例的另一方面提供了一种小分子团活水组合物的制备方法，包括以下步骤：将小分子水、生物酶混合后即得。
实施例3
本实施例一方面提供了一种小分子团活水组合物，按照重量份计，所述小分子团活水组合物的原料为：小分子水100份、生物酶1.5份。
所述小分子水的制备方法包括以下步骤：将氢气与水在压力下的高度混合液输入到小分子水制备器，穿过永磁强磁场，垂直切割磁力线，即得。
所述压力为8kg，所述强磁场的强度为47千高斯。
所述生物酶包括蛋白酶和淀粉酶，二者的重量比为1：0.6。
所述淀粉酶为支链型淀粉酶，购自石家庄宁诺商贸有限公司。
所述蛋白酶包括菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶，其重量比为3：1。
所述菠萝蛋白酶的制备方法包括以下步骤：
(1)将菠萝果皮清洗后榨汁，过滤后进行预冷处理，然后加入粉末NaHSO3、粉末半胱氨酸、粉末乙二胺四乙酸、粉末维生素B1，以3000r/min离心20min，收集上清液；
(2)向上清液中加入聚丙烯酸，置于4℃冷凝聚10h，以3000r/min离心20min，收集沉淀；
(3)向沉淀中缓慢加入乙酸钙水溶液直至完全溶解沉淀，以3000r/min离心，取上清液，加入缓冲液，4℃透析10小时，最后经冷冻干燥，即得。
所述预冷处理的温度为2℃，预冷处理时间为16h。
所述的单位体积菠萝汁中粉末NaHSO3的加入量为0.3mg/L。
所述粉末NaHSO3、粉末乙二胺四乙酸、粉末半胱氨酸、粉末维生素B1的重量比为0.3：0.05：0.5：0.03。
所述聚丙烯酸的加入量为步骤(1)所得上清液的0.8wt％，所述乙酸钙水溶液的浓度为39mmol/L，所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的浓度为0.05mol/L，pH值为6.8。
所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的加入量是步骤(3)中所述上清液体积的4倍。
所述冷冻干燥温度为-40℃。
所述木瓜蛋白酶的制备方法包括以下步骤：
(1)将清洗后的番木瓜去皮、去籽，榨汁，加入复合酶在45℃下反应1.5h，抽滤，去除滤渣，离心后取上清液，冷藏备用；
(2)向步骤(1)所得上清液中加入乙醇水溶液，然后再加入半胱氨酸、乙二胺四乙酸、维生素B1，用氢氧化钠水溶液调节pH值至7，静置10h，然后离心，取上清液，最后经冷冻干燥，即得。
所述复合酶的加入量为番木瓜的0.5wt％，所述复合酶包括纤维素酶和果胶酶，重量比为3：1。
所述乙醇水溶液的浓度为75wt％。
所述步骤(1)所得上清液中粉末半胱氨酸的加入量为2g/L。
所述粉末半胱氨酸、粉末维生素B1、粉末乙二胺四乙酸的重量比为2：1：0.3。
所述氢氧化钠水溶液的浓度为1mol/L。
所述冷冻干燥温度为-40℃
所述生物酶的制备方法包括以下步骤：将蛋白酶、淀粉酶、水混合后于37℃下有氧发酵20天，发酵期满后每隔15h搅拌一次，搅拌时间为20min，10天后停止搅拌，静置10天，最后经过滤即得。
本实施例的另一方面提供了一种小分子团活水组合物的制备方法，包括以下步骤：将小分子水、生物酶混合后即得。
实施例4
本实施例提供了一种小分子团活水组合物及其制备方法，具体实施方式同实施例1，其区别在于，所述生物酶不包括淀粉酶。
实施例5
本实施例提供了一种小分子团活水组合物及其制备方法，具体实施方式同实施例1，其区别在于，所述淀粉酶为直链淀粉酶。
性能测试
1.低温稳定性测试
将实施例制备所得小分子团活水组合物在5℃下放置1个月后，根据JY/T007-1996测试其半幅宽。若半幅宽<100Hz，则记为合格，否则为不合格，由此评价小分子团活水组合物的低温稳定性，结果见表1。
表1
以上所述仅为本发明的优选实施例，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对本领域的技术人员来说，可根据上述说明加以改进和变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
Claims (1)
1.一种小分子团活水组合物，其特征在于，按照重量份计，所述小分子团活水组合物的原料为：小分子水98份、生物酶1.2份；
所述小分子水的制备方法包括以下步骤：将氢气与水在压力下的高度混合液输入到小分子水制备器，穿过永磁强磁场，垂直切割磁力线，即得；
所述压力为8kg，所述强磁场的强度为47千高斯；
所述生物酶为蛋白酶和淀粉酶，二者的重量比为1：0.5；
所述淀粉酶为支链型淀粉酶；
所述蛋白酶为菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶，其重量比为2：1；
所述菠萝蛋白酶的制备方法包括以下步骤：
(1)将菠萝果皮清洗后榨汁，过滤后进行预冷处理，然后加入粉末NaHSO3、粉末半胱氨酸、粉末乙二胺四乙酸、粉末维生素B1，以3000r/min离心20min，收集上清液；
(2)向上清液中加入聚丙烯酸，置于4℃冷凝聚10h，以3000r/min离心20min，收集沉淀；
(3)向沉淀中缓慢加入乙酸钙水溶液直至完全溶解沉淀，以3000r/min离心，取上清液，加入缓冲液，4℃透析10小时，最后经冷冻干燥，即得；
所述预冷处理的温度为2℃，预冷处理时间为16h；
所述的单位体积菠萝汁中粉末NaHSO3的加入量为0.3mg/L；
所述粉末NaHSO3、粉末乙二胺四乙酸、粉末半胱氨酸、粉末维生素B1的重量比为0.3：0.05：0.5：0.03；
所述聚丙烯酸的加入量为步骤(1)所得上清液的0.8wt％，所述乙酸钙水溶液的浓度为39mmol/L，所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的浓度为0.05mol/L，pH值为6.8；
所述磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液的加入量是步骤(3)中所述上清液体积的4倍；
所述冷冻干燥温度为-40℃；
所述木瓜蛋白酶的制备方法包括以下步骤：
(1)将清洗后的番木瓜去皮、去籽，榨汁，加入复合酶在45℃下反应1.5h，抽滤，去除滤渣，离心后取上清液，冷藏备用；
(2)向步骤(1)所得上清液中加入乙醇水溶液，然后再加入半胱氨酸、乙二胺四乙酸、维生素B1，用氢氧化钠水溶液调节pH值至7，静置10h，然后离心，取上清液，最后经冷冻干燥，即得；
所述复合酶的加入量为番木瓜的0.5wt％，所述复合酶包括纤维素酶和果胶酶，重量比为2.5：1；
所述乙醇水溶液的浓度为75wt％；
所述步骤(1)所得上清液中粉末半胱氨酸的加入量为2g/L；
所述粉末半胱氨酸、粉末维生素B1、粉末乙二胺四乙酸的重量比为2：1：0.3；
所述氢氧化钠水溶液的浓度为1mol/L；
所述冷冻干燥温度为-40℃；
所述生物酶的制备方法包括以下步骤：将蛋白酶、淀粉酶、水混合后于37℃下有氧发酵20天，发酵期满后每隔15h搅拌一次，搅拌时间为20min，10天后停止搅拌，静置10天，最后经过滤即得；
所述一种小分子团活水组合物的制备方法，包括以下步骤：将小分子水、生物酶混合后即得。
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