CN114835828B - 黑木耳粗多糖的制备方法 - Google Patents
黑木耳粗多糖的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114835828B CN114835828B CN202210437120.2A CN202210437120A CN114835828B CN 114835828 B CN114835828 B CN 114835828B CN 202210437120 A CN202210437120 A CN 202210437120A CN 114835828 B CN114835828 B CN 114835828B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- black fungus
- crude polysaccharide
- solution
- polysaccharide
- liquid phase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000233866 Fungi Species 0.000 title claims abstract description 142
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 99
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 99
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 99
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 56
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 52
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract description 43
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 30
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims abstract description 29
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 70
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 30
- 239000004927 clay Substances 0.000 claims description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 28
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 22
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 5
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 31
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 abstract description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 9
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 abstract description 8
- 230000005855 radiation Effects 0.000 abstract description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 abstract description 4
- 238000009834 vaporization Methods 0.000 abstract description 4
- 230000008016 vaporization Effects 0.000 abstract description 4
- 238000004904 shortening Methods 0.000 abstract 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 30
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 10
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 6
- 238000000874 microwave-assisted extraction Methods 0.000 description 6
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 4
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 3
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002488 Hemicellulose Polymers 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 2
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000003670 easy-to-clean Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 description 2
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N phenol;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.OC1=CC=CC=C1 OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 2
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 2
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 244000251953 Agaricus brunnescens Species 0.000 description 1
- 244000045069 Agrocybe aegerita Species 0.000 description 1
- 229910018072 Al 2 O 3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000221377 Auricularia Species 0.000 description 1
- 244000028550 Auricularia auricula Species 0.000 description 1
- 235000000023 Auricularia auricula Nutrition 0.000 description 1
- 240000005710 Auricularia polytricha Species 0.000 description 1
- 235000000024 Auricularia polytricha Nutrition 0.000 description 1
- 244000234623 Coprinus comatus Species 0.000 description 1
- 235000004439 Coprinus comatus Nutrition 0.000 description 1
- 240000006499 Flammulina velutipes Species 0.000 description 1
- 235000016640 Flammulina velutipes Nutrition 0.000 description 1
- 241000222350 Pleurotus Species 0.000 description 1
- 244000252132 Pleurotus eryngii Species 0.000 description 1
- 235000001681 Pleurotus eryngii Nutrition 0.000 description 1
- 240000001462 Pleurotus ostreatus Species 0.000 description 1
- 235000001603 Pleurotus ostreatus Nutrition 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001506047 Tremella Species 0.000 description 1
- 240000006794 Volvariella volvacea Species 0.000 description 1
- CQBLUJRVOKGWCF-UHFFFAOYSA-N [O].[AlH3] Chemical compound [O].[AlH3] CQBLUJRVOKGWCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OBNDGIHQAIXEAO-UHFFFAOYSA-N [O].[Si] Chemical compound [O].[Si] OBNDGIHQAIXEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004939 coking Methods 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 230000008094 contradictory effect Effects 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000003544 deproteinization Effects 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 238000011056 performance test Methods 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000004879 turbidimetry Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/10—Process efficiency
Abstract
本发明提供一种黑木耳粗多糖的制备方法,包括以下步骤:向黑木耳粉料中加入总碱浓度为0.1~2mol/L的碱液,得到混合液;将所述混合液置于微波装置中,并设定微波功率为140~700W,经微波提取,得到提取液;对所述提取液进行固液分离,收集液相;将所述液相进行脱色和脱浊处理,得到黑木耳粗多糖。本发明利用特定浓度的稀碱液与黑木耳粉料混合,使黑木耳粉的细胞壁充分膨胀甚至胀破,便于粗多糖析出,然后通过特定功率的微波辐射,使细胞内物质均匀受热,并快速提高细胞内物质的温度,如此,液态水汽化产生的压力导致细胞膜和细胞壁破裂,形成微小孔洞,便于胞内的多糖释放,从而大大提高了黑木耳粗多糖的提取效率,并缩短了提取周期。
Description
技术领域
本发明涉及多糖提取技术领域,特别涉及一种黑木耳粗多糖的制备方法。
背景技术
我国是食用菌生产大国。目前可进行人工栽培的食用菌种类众多,例如香菇、黑木耳、平菇、金针菇、双孢菇、毛木耳、杏鲍菇、真姬菇、茶树菇、滑菇、银耳、秀珍菇、草菇、鸡腿菇等。随着城乡居民收入及消费水平的不断提高,对食用菌的需求有进一步提升的空间。
作为食用菌的一种,我国黑木耳产量较高。而且,黑木耳味道鲜美,含有多糖、蛋白质、黄酮、皂甙、黑色素、膳食纤维、氨基酸、钙、铁等多种营养成分。其中,黑木耳多糖是一类由多个单糖分子经过糖苷键链接而成的高营养价值的天然产物,具有抗氧化、抗衰老、抗病毒、降血脂、降血糖、抗肿瘤、提高免疫力等多种生物活性。如果将黑木耳粗多糖分离出来并加以纯化成药物,必将大幅提高其附加值。
目前,常用的黑木耳粗多糖提取技术包括:热水提取法、超声提取法、酸碱提取法、微波提取法、酶法等。然而,热水浸提法要求料温高,提取时间长,多糖得率低;超声提取法对设备要求高,超声产生的空穴效应影响粗多糖的分子量,还会提高粘度;酸能将黑木耳粗多糖的糖苷键水解,得到的粗多糖分子量低,产品得率不高,而且酸溶液还会腐蚀容器;碱法提取增大了粗多糖的粘度,导致过滤困难;微波法提取黑木耳粗多糖的得率要比微波辅助碱法低得多;酶法需要采用纤维素酶和果胶酶,而目前市面上已有的两种酶的活力均不高,降解食用菌中的纤维素和半纤维素的能力有限,而且,酶蛋白的引入,增加了分离蛋白的难度。总体来说,现有的黑木耳粗多糖提取技术存在生产周期长、能耗高、产品得率低的缺陷。为此,开发一种快速、高效的食用菌多糖提取与纯化技术,对提高黑木耳的附加值具有重要的战略意义和现实意义。
发明内容
本发明的主要目的是提出一种黑木耳粗多糖的制备方法,旨在提供一种提取速度快且提取效率高的黑木耳粗多糖制备方法。
为实现上述目的,本发明提出一种黑木耳粗多糖的制备方法,包括以下步骤:
向黑木耳粉料中加入总碱浓度为0.1~2mol/L的碱液,得到混合液;
将所述混合液置于微波装置中,并设定微波功率为140~700W,经微波提取,得到提取液;
对所述提取液进行固液分离,收集液相;
将所述液相进行脱色和脱浊处理,得到黑木耳粗多糖。
可选地,向黑木耳粉料中加入总碱浓度为0.1~2mol/L的碱液,得到混合液的步骤中,所述总碱浓度为0.6~1.2mol/L;和/或,
所述碱液包括氢氧化钠和/或氢氧化钾。
可选地,向黑木耳粉料中加入总碱浓度为0.1~2mol/L的碱液,得到混合液的步骤中,每克所述黑木耳粉料对应加入60~200mL的所述碱液。
可选地,将所述混合液置于微波装置中,并设定微波功率为140~700W,经微波提取,得到提取液的步骤中,所述微波功率为280~520W。
可选地,将所述混合液置于微波装置中,并设定微波功率为140~700W,经微波提取,得到提取液的步骤中,所述微波提取的时间为2~20min。
可选地,所将所述液相进行脱色和脱浊处理,得到黑木耳粗多糖的步骤包括:
调节所述液相的pH至2~13,加入活性白土,搅拌使所述液相脱色和脱浊,得到黑木耳粗多糖。
可选地,调节所述液相的pH至5~10后加入活性白土。
可选地,每100毫升所述液相对应加入0.5~3克所述活性白土;和/或,
搅拌使所述液相脱色和脱浊的步骤在30~70℃下进行。
可选地,所述搅拌的速率为200~500rpm,所述搅拌的时间为30~100min。
可选地,向黑木耳粉料中加入总碱浓度为0.1~2mol/L的碱液,得到混合液的步骤中,所述黑木耳粉料的粒径为40~80目筛。
本发明提出的技术方案中,利用特定浓度的稀碱液与黑木耳粉料混合,使黑木耳粉的细胞壁充分膨胀甚至胀破,便于粗多糖析出,然后通过特定功率的微波辐射,使细胞内物质均匀受热,并快速提高细胞内物质的温度,如此,液态水汽化产生的压力导致细胞膜和细胞壁破裂,形成微小孔洞,便于胞内的多糖释放,从而大大提高了黑木耳粗多糖的提取效率,并缩短了提取周期;此外,本发明方法操作简单,且色度和浊度的清除非常容易,能满足后续粗多糖进一步纯化的要求。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅为本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本发明提出的黑木耳粗多糖的制备方法的一实施例的流程示意图。
本发明目的的实现、功能特点及优点将结合实施例,参照附图做进一步说明。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然,所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例,而不是全部的实施例。
需要说明的是,实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。另外,全文中出现的“和/或”的含义,包括三个并列的方案,以“A和/或B”为例,包括A方案、或B方案、或A和B同时满足的方案。此外,各个实施例之间的技术方案可以相互结合,但是必须是以本领域普通技术人员能够实现为基础,当技术方案的结合出现相互矛盾或无法实现时应当认为这种技术方案的结合不存在,也不在本发明要求的保护范围之内。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
作为食用菌的一种,我国黑木耳产量较高。而且,黑木耳味道鲜美,含有多糖、蛋白质、黄酮、皂甙、黑色素、膳食纤维、氨基酸、钙、铁等多种营养成分。其中,黑木耳多糖是一类由多个单糖分子经过糖苷键结合而成的高营养价值的天然产物,具有抗氧化、抗衰老、抗病毒、降血脂、降血糖、抗肿瘤、提高免疫力等多种生物活性。如果将黑木耳粗多糖分离出来并加以纯化成药物,必将大幅提高其附加值。
目前,常用的黑木耳粗多糖提取技术包括:热水提取法、超声提取法、酸碱提取法、微波提取法、酶法等。然而,热水浸提法要求料温高,提取时间长,多糖得率低;超声提取法对设备要求高,超声产生的空穴效应影响粗多糖的分子量,还会提高粘度;酸能将黑木耳粗多糖的糖苷键水解,得到的粗多糖分子量低,产品得率不高,而且酸溶液还会腐蚀容器;碱法提取增大了粗多糖的粘度,导致过滤困难;微波法提取黑木耳粗多糖的得率要比微波辅助碱法低得多;酶法需要采用纤维素酶和果胶酶,而目前市面上已有的两种酶的活力均不高,降解食用菌中的纤维素和半纤维素的能力有限,而且,酶蛋白的引入,增加了分离蛋白的难度。总体来说,现有的黑木耳粗多糖提取技术存在生产周期长、能耗高、产品得率低的缺陷。为此,开发一种快速、高效的食用菌多糖提取与纯化技术,对提高黑木耳的附加值具有重要的战略意义和现实意义。
鉴于此,本发明提出一种黑木耳粗多糖的制备方法,所述黑木耳粗多糖的制备方法包括以下步骤:
步骤S10,向黑木耳粉料中加入总碱浓度为0.1~2mol/L的碱液,得到混合液。
本实施例将黑木耳粉料和稀碱液混合,利用稀碱液将黑木耳粉的细胞壁充分膨胀甚至胀破,以便于粗多糖析出。其中,碱液可以是任意常见的碱性溶液,例如,氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液或者两种溶液的混合溶液等。
具体地,本实施例采用的碱液的浓度为0.1~2mol/L,以氢氧化钠溶液为例,即溶液中氢氧化钠的浓度可以是0.1mol/L、0.2mol/L、0.5mol/L、0.6mol/L、0.8mol/L、0.9mol/L、1mol/L、1.4mol/L、1.5mol/L、1.8mol/L、2mol/L等。选用该浓度范围内的碱液时,既能够充分破坏黑木耳细胞壁,尽可能提高多糖得率,又能避免因碱性过强而影响器皿的使用寿命,也能避免因酸中和而引入过多盐分,从而影响到后续的粗多糖纯化。进一步地,所述碱液的总碱浓度优选为0.6~1.2mol/L,如此,可以提高粗多糖得率,并均衡各项因素,达到效果最大化。
可以理解的是,上文中提到的总碱浓度是指碱液中所有碱性溶质的总浓度,以氢氧化钾和氢氧化钠的混合溶液为例,其总浓度是指氢氧化钾的浓度和氢氧化钠的浓度之和。
此外,为确保黑木耳细胞壁被充分涨破,步骤S10中,每克所述黑木耳粉料对应加入60~200mL的所述碱液,也就是说,黑木耳粉料和碱液的质量体积比(g:mL)为1:(60~200),例如,1:60、1:70、1:90、1:100、1:120、1:150、1:200等。
实际加工时,黑木耳粉料可以直接在市面上购得,也可以自行粉碎获得。所述黑木耳粉料的粒径优选为40~80目筛,即优选能够过40~80目筛的黑木耳粉料,相较而言,粒径在该范围内的黑木耳粉料比表面积大,利于粗多糖的溶出,且容易与碱液混匀,从而被碱液充分处理。具体地,在一些实施例中,步骤S10之前还包括:取干燥的黑木耳,用粉碎机粉碎,过40~80目筛。
步骤S20,将所述混合液置于微波装置中,并设定微波功率为140~700W,经微波提取,得到提取液。
微波具有升温快、穿透能力强、萃取时间短等优点。微波辐射使黑木耳细胞内物质均匀受热,快速提高细胞内物质的温度,液态水汽化产生的压力导致细胞膜和细胞壁破裂,形成微小孔洞,便于胞内的多糖释放。本实施例对混合液进行微波辐射处理,进一步提高了多糖提取效率,且极大地提升了提取速度,使提取时间只需要2~20min,且进一步优选为4~7min,大幅缩短了提取周期。同时,本实施例限定微波辐射时,微波功率为140~700W,以在提高多糖释放的同时,避免细胞壁与胞内物质焦化,进而反向干扰粗多糖的溶出,导致粗多糖提取率非升反降。进一步地,所述微波功率优选为280~520W,如此,能够在极大地提高提取速度的同时,确保高的提取效率。
步骤S30,对所述提取液进行固液分离,收集液相。
具体实施时,步骤S30可以按照如下步骤操作:
将提取液离心,并设置离心转速和时间分别为1000~4000rpm和5~30min。然后,收集上清液,固体沉淀物用少量等浓度的碱液洗涤,再离心5~30min。合并上清液(即固液分离得到的液相),以备后续使用。
步骤S40,将所述液相进行脱色和脱浊处理,得到黑木耳粗多糖。
具体地,步骤S40包括:
步骤S41,调节所述液相的pH至2~13,加入活性白土,搅拌使所述液相脱色和脱浊,得到黑木耳粗多糖。
活性白土的主要化学成分为SiO2和Al2O3,是两个硅氧四面体夹一层铝氧八面体组成的2:1晶型结构。活性白土对提取液的脱色和脱浊是通过物理吸附、化学吸附和离子交换吸附实现的。活性白土的晶胞形成的层间阳离子为H+,易与其他阳离子或基团发生离子交换吸附。活性白土对磷脂、色素、有机杂质均具有很强的吸附性能。不过,需要控制好合适的酸度和处理时间,在一些实施例中,使用盐酸调节所述液相的pH至2~13后再加入活性白土,以增强活性白土对浊度和色度的清除率,减少对黑木耳粗多糖的吸附;进一步地,酸度优选为5~10,即调节所述液相的pH至5~10后加入活性白土。在另一些实施例中,控制所述搅拌的速率为200~500rpm,所述搅拌的时间为30~100min,从而进一步增强浊度和色度清除率,进一步地,搅拌时间优选为40~60min。
此外,活性白土的添加量为:每100毫升所述液相对应加入0.5~3克所述活性白土,优选为1~2g;搅拌使所述液相脱色和脱浊的步骤在30~70℃下进行,优选为45~50℃。
进一步地,对脱色、脱浊处理后得到的黑木耳粗多糖溶液进行脱蛋白、脱盐、浓缩、干燥等精制步骤后,可以得到黑木耳精多糖,能够用于临床抗癌药物使用。其精制步骤可以是,黑木耳粗多糖中的蛋白质,采用sevag法(氯仿与正丁醇)分离除去;黑木耳粗多糖中的盐分,经透析除去。经脱蛋白、脱盐的多糖溶液,再过DE-52柱洗脱以及透析脱盐处理,过葡聚糖凝胶G-100柱,分离得到具有生物活性的精多糖溶液。最后,经旋转蒸发仪浓缩和/或冻干处理,制成干粉制剂。
本发明提出的技术方案中,利用特定浓度的稀碱液与黑木耳粉料混合,使细胞壁充分膨胀甚至胀破,便于粗多糖析出,然后通过特定功率的微波辐射,使细胞内物质均匀受热,并快速提高细胞内物质的温度,如此,液态水汽化产生的压力导致细胞膜和细胞壁破裂,形成微小孔洞,便于胞内的多糖释放,从而大大提高了黑木耳粗多糖的提取效率,并缩短了提取周期;此外,本发明方法操作简单,能耗低且对环境友好,而且制得的粗多糖提取液的色度和浊度的清除(色度清除率不低于45%,浊度清除率不低于60%)非常容易,能满足后续粗多糖进一步纯化的要求,更容易提纯。
进一步地,基于上述实施例,提出优选方案,本方案黑木耳粗多糖的制备方法包括以下步骤:
步骤S100,向40~80目粒径的黑木耳粉料中加入总碱浓度为0.6~2mol/L的碱液,得到混合液,其中,每克所述黑木耳粉料对应加入60~200mL的所述碱液。
步骤S200,将所述混合液置于微波装置中,并设定微波功率为280~520W,经微波提取4~7min,得到提取液。
步骤S300,将提取液离心,并设置离心转速和时间分别为1000~4000rpm和5~30min。然后,收集上清液,固体沉淀物用少量等浓度的碱液洗涤,再离心5~30min。合并上清液(即固液分离得到的液相),以备后续使用。
步骤S400,调节所述液相的pH至5~10,按每100毫升所述液相对应加入1~2克所述活性白土的比例加入活性白土,在45~50℃下搅拌40~60min使所述液相脱色和脱浊,得到黑木耳粗多糖。
基于本实施例,黑木耳粗多糖的提取效率能够达到45%以上,且提取周期缩短在几分钟内;此外,制得的粗多糖提取液的色度清除率不低于50%,浊度清除率不低于60%。
以下结合具体实施例和附图对本发明的技术方案作进一步详细说明,应当理解,以下实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
实施例1
称取经干燥至恒重的黑木耳1g,经机械粉碎过40目筛后,收集过筛的黑木耳粉。按料液比(g:mL)1:120的比例向黑木耳粉中加入1.6mol/L的NaOH溶液,于420W微波处理5min。将提取液置于4000rpm离心10min,收集上清液。固形物经等浓度的NaOH溶液洗涤一次,再离心5min,合并上清液。用盐酸将上清液pH值调至13。按料液比(g:mL)2%(m/v,g/100mL)加入活性白土,于50℃恒温搅拌60min,搅拌速率500rpm,制得黑木耳粗多糖提取液。
实施例2
称取经干燥至恒重的黑木耳3g,经机械粉碎过80目筛后,收集过筛的黑木耳粉。按料液比(g:mL)1:100的比例向黑木耳粉中加入1.2mol/L的NaOH溶液,于420W微波处理5min。将提取液置于3000rpm离心10min,收集上清液。固形物经等浓度的NaOH溶液洗涤一次,再离心5min,合并上清液,用稀盐酸将上清液pH值调至7。按料液比(g:mL)加入2%(m/v,g/100mL)活性白土,于45℃恒温搅拌100min,搅拌速率为300rpm,制得黑木耳粗多糖提取液。
实施例3
称取经干燥至恒重的黑木耳1g,经机械粉碎后过60目筛,收集过筛的黑木耳粉。按料液比(g:mL)1:80的比例向黑木耳粉中加入0.6mol/L的NaOH溶液,于280W微波处理10min。将提取液置于1000rpm离心30min,收集上清液。固形物经等浓度的NaOH溶液洗涤一次,再离心5min,合并上清液,用稀盐酸将上清液pH值调至11。按料液比(g:mL)1.5%(m/v,g/100mL)加入活性白土,于50℃恒温搅拌50min,搅拌速率为500rpm,制得黑木耳粗多糖提取液。
实施例4
称取经干燥至恒重的黑木耳2g,经机械粉碎过60目筛后,收集过筛的黑木耳粉。按料液比(g:mL)1:140的比例向黑木耳粉中加入2.0mol/L的NaOH溶液,于560W微波处理3min。将提取液置于2000rpm离心20min,收集上清液。固形物经等浓度的NaOH溶液洗涤一次,再离心5min,合并上清液,用稀盐酸将上清液pH值调至5。按料液比(g:mL)1%(m/v,g/100mL)加入活性白土,于70℃恒温搅拌40min,搅拌速率为200rpm,制得黑木耳粗多糖提取液。
实施例5
称取经干燥至恒重的黑木耳1g,经机械粉碎过80目筛后,收集过筛的黑木耳粉。按料液比(g:mL)1:200的比例向黑木耳粉中加入0.8mol/L的KOH溶液,于420W处理10min。将提取液置于4000rpm离心20min,收集上清液。固形物经等浓度的KOH溶液洗涤一次,再离心5min,合并上清液,用稀盐酸将上清液pH值调至7。按料液比(g:mL)加入2%(m/v,g/100mL)活性白土,于47℃恒温搅拌60min,搅拌速率为400rpm,制得黑木耳粗多糖提取液。
实施例6
称取经干燥至恒重的黑木耳1g,经机械粉碎过40目筛后,收集过筛的黑木耳粉。按料液比(g:mL)1:60的比例向黑木耳粉中加入1.6mol/L的NaOH+KOH混合溶液(溶质摩尔比1:1),于520W微波处理4min。将提取液置于4000rpm离心10min,收集上清液。固形物经等浓度的NaOH溶液洗涤一次,再离心5min,合并上清液。用盐酸将上清液pH值调至10。按料液比(g:mL)2%(m/v,g/100mL)加入活性白土,于50℃恒温搅拌60min,搅拌速率500rpm,制得黑木耳粗多糖提取液。
实施例7
称取经干燥至恒重的黑木耳1g,经机械粉碎过40目筛后,收集过筛的黑木耳粉。按料液比(g:mL)1:120的比例向黑木耳粉中加入0.8mol/L的NaOH溶液,于700W微波处理2min。将提取液置于4000rpm离心10min,收集上清液。固形物经等浓度的NaOH溶液洗涤一次,再离心5min,合并上清液。用盐酸将上清液pH值调至13。按料液比(g:mL)0.5%(m/v,g/100mL)加入活性白土,于50℃恒温搅拌30min,搅拌速率500rpm,制得黑木耳粗多糖提取液。
实施例8
称取经干燥至恒重的黑木耳1g,经机械粉碎过40目筛后,收集过筛的黑木耳粉。按料液比(g:mL)1:120的比例向黑木耳粉中加入1.6mol/L的NaOH溶液,于140W微波处理20min。将提取液置于4000rpm离心5min,收集上清液。固形物经等浓度的NaOH溶液洗涤一次,再离心5min,合并上清液。用盐酸将上清液pH值调至2。按料液比(g:mL)3%(m/v,g/100mL)加入活性白土,于30℃恒温搅拌60min,搅拌速率500rpm,制得黑木耳粗多糖提取液。
实施例9
与实施例5相比,除了将碱液浓度调整为0.1mol/L外,其他步骤和参数均与实施例5相同。
对比例1
除删除掉“按料液比(g:mL)1:120的比例向黑木耳粉中加入1.6mol/L的NaOH溶液”的步骤,并将黑木耳粉料直接分散在水中后进行微波处理外,其他步骤和参数均与实施例9相同。
对比例2
除将微波功率调整为750W外,其他步骤和参数均与实施例9相同。
对比例3
除将“用盐酸将上清液pH值调至13。按料液比(g:mL)2%(m/v,g/100mL)加入活性白土,于50℃恒温搅拌60min,搅拌速率500rpm”调整为“用盐酸将上清液pH值调至13.5。按料液比(g:mL)2%(m/v,g/100mL)加入活性白土,于50℃恒温搅拌25min,搅拌速率500rpm”外,其他步骤和参数均与实施例9相同。
对各实施例和对比例制得的黑木耳粗多糖进行检测,检测项目包括粗多糖得率、提取液浊度清除率以及提取液色度清除率,结果记入表1中。各项目检测方法如下:
(1)粗多糖得率测定:采用苯酚硫酸法。计算公式为:
式中:
Y1:粗多糖得率,%;
m0:黑木耳干重;
m1:苯酚硫酸法测得的黑木耳粗多糖含量。
(2)浊度清除率测定:采用比浊法测定。计算公式为:
式中:
Y2:黑木耳粗多糖提取液的浊度清除率,%;
OD0:样品处理前的浊度;
OD1:样品处理后的浊度。
(3)色度清除率测定:采用比色法测定。计算公式为:
式中:
Y3:黑木耳粗多糖提取液色度清除率,%;
A0:样品处理前色度;
A1:样品处理后色度。
表1性能测试
结果分析:
从三个检测项目来看,相较于对比例,各实施例均表现出较高的黑木耳粗多糖得率、较高的提取液浊度和色度清除率,说明本发明方法制备黑木耳粗多糖效率高且具有优异的脱色脱浊效率,得到的粗多糖更容易提纯。
以上仅为本发明的优选实施例,并非因此限制本发明的专利范围,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (6)
1.一种黑木耳粗多糖的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
向黑木耳粉料中加入总碱浓度为0.6~2mol/L的碱液,每克所述黑木耳粉料对应加入60~200mL的所述碱液,得到混合液;
将所述混合液置于微波装置中,并设定微波功率为280~560W,微波提取的时间为3~10min,经微波提取,得到提取液;
对所述提取液进行固液分离,收集液相;
调节所述液相的pH值至5~13,加入活性白土,搅拌使所述液相脱色和脱浊,得到黑木耳粗多糖。
2.如权利要求1所述的黑木耳粗多糖的制备方法,其特征在于,向黑木耳粉料中加入总碱浓度为0.6~2mol/L的碱液,每克所述黑木耳粉料对应加入60~200mL的所述碱液,得到混合液的步骤中:
所述碱液包括氢氧化钠和/或氢氧化钾。
3.如权利要求1所述的黑木耳粗多糖的制备方法,其特征在于,调节所述液相的pH至5~10后加入活性白土。
4.如权利要求1所述的黑木耳粗多糖的制备方法,其特征在于,每100毫升所述液相对应加入0.5~3克所述活性白土;和/或,
搅拌使所述液相脱色和脱浊的步骤在30~70℃下进行。
5.如权利要求1所述的黑木耳粗多糖的制备方法,其特征在于,所述搅拌的速率为200~500rpm,所述搅拌的时间为30~100min。
6.如权利要求1所述的黑木耳粗多糖的制备方法,其特征在于,向黑木耳粉料中加入总碱浓度为0.6~2mol/L的碱液,每克所述黑木耳粉料对应加入60~200mL的所述碱液,得到混合液的步骤中,所述黑木耳粉料的粒径为40~80目筛。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210437120.2A CN114835828B (zh) | 2022-04-20 | 2022-04-20 | 黑木耳粗多糖的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210437120.2A CN114835828B (zh) | 2022-04-20 | 2022-04-20 | 黑木耳粗多糖的制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN114835828A CN114835828A (zh) | 2022-08-02 |
CN114835828B true CN114835828B (zh) | 2024-01-09 |
Family
ID=82565030
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202210437120.2A Active CN114835828B (zh) | 2022-04-20 | 2022-04-20 | 黑木耳粗多糖的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN114835828B (zh) |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102803299A (zh) * | 2010-03-17 | 2012-11-28 | 电气化学工业株式会社 | 透明质酸的提纯方法以及制造方法 |
CN103030702A (zh) * | 2011-09-29 | 2013-04-10 | 天津贻诺琦生物工程有限公司 | 烟曲霉半乳甘露聚糖抗原的提取与纯化方法 |
CN103265648A (zh) * | 2013-05-14 | 2013-08-28 | 安徽金枫果胶有限公司 | 从梨皮中提取果胶的方法 |
WO2013132506A1 (en) * | 2012-03-07 | 2013-09-12 | Praj Industries Limited | Process for the purification of hyaluronic acid salts (ha) from fermentation broth |
CN104877035A (zh) * | 2015-03-24 | 2015-09-02 | 中国计量学院 | 一种具有降糖作用的黑木耳多糖的制备方法 |
CN108084292A (zh) * | 2018-02-06 | 2018-05-29 | 重庆医科大学附属永川医院 | 一种从黑木耳中提取治疗老年性高血脂多糖的方法 |
CN109206536A (zh) * | 2018-11-01 | 2019-01-15 | 南京工业大学 | 一种从木醋液中分离左旋葡聚糖的方法 |
CN114052157A (zh) * | 2021-11-18 | 2022-02-18 | 九愿健康产业科技(苏州)有限公司 | 黑木耳微波提取多糖颗粒固体饮料的制备方法 |
-
2022
- 2022-04-20 CN CN202210437120.2A patent/CN114835828B/zh active Active
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102803299A (zh) * | 2010-03-17 | 2012-11-28 | 电气化学工业株式会社 | 透明质酸的提纯方法以及制造方法 |
CN103030702A (zh) * | 2011-09-29 | 2013-04-10 | 天津贻诺琦生物工程有限公司 | 烟曲霉半乳甘露聚糖抗原的提取与纯化方法 |
WO2013132506A1 (en) * | 2012-03-07 | 2013-09-12 | Praj Industries Limited | Process for the purification of hyaluronic acid salts (ha) from fermentation broth |
CN103265648A (zh) * | 2013-05-14 | 2013-08-28 | 安徽金枫果胶有限公司 | 从梨皮中提取果胶的方法 |
CN104877035A (zh) * | 2015-03-24 | 2015-09-02 | 中国计量学院 | 一种具有降糖作用的黑木耳多糖的制备方法 |
CN108084292A (zh) * | 2018-02-06 | 2018-05-29 | 重庆医科大学附属永川医院 | 一种从黑木耳中提取治疗老年性高血脂多糖的方法 |
CN109206536A (zh) * | 2018-11-01 | 2019-01-15 | 南京工业大学 | 一种从木醋液中分离左旋葡聚糖的方法 |
CN114052157A (zh) * | 2021-11-18 | 2022-02-18 | 九愿健康产业科技(苏州)有限公司 | 黑木耳微波提取多糖颗粒固体饮料的制备方法 |
Non-Patent Citations (13)
Title |
---|
"10省市黑木耳产品品质的对比分析";郭兴等;《防护林科技》;20181115(第11期);第53-54和58页 * |
"5种黑木耳主要成分的对比分析";郭兴等;《食品研究与开发》;20210819;第42卷(第16期);第37-42页 * |
"Antioxidant activity in vitro and in vivo of the polysaccharides from different varieties of Auricularia auricula";Siqi Xu et al.;Food Funct.;第7卷;第3868-3879页 * |
"不同产区黑木耳中营养成分比较分析";刘文贺等;《北方园艺》;20200305(第05期);第121-128页 * |
"响应面优化微波辅助碱法提取黑木耳粗多糖工艺";赵海兵等;武汉轻工大学学报;第41卷(第5期);第26-33页 * |
"提取技术对酸性黑木耳多糖抗凝血活性的影响";李德海等;《华南理工大学学报(自然科学版)》;20180615;第46卷(第6期);第93-102页 * |
"提取技术对酸性黑木耳多糖抗凝血活性的影响";李德海等;华南理工大学学报(自然科学版);第46卷(第6期);第93-102页 * |
"黑木耳多糖提取液浊度清除的响应面优化";赵海兵等;北方园艺(第24期);第73-80页 * |
"黑木耳多糖的微波提取工艺研究";宋力等;《上海化工》;20131115;第138卷(第11期);第8-11页 * |
"黑木耳多糖的微波提取工艺研究";宋力等;上海化工;第138卷(第11期);第8-11页 * |
刘玉兰主编.现代植物油料油脂加工技术.河南科学技术出版社,2015,(第1版),第206页. * |
徐怀德等.天然产物提取工艺学.中国轻工业出版社,2021,(第2版),第389页. * |
韩长日等.药物制造技术.科学技术文献出版社,2000,第409-411页. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN114835828A (zh) | 2022-08-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN107177007B (zh) | 一种木耳多糖的制备方法 | |
CN106905440B (zh) | 一种银耳多糖提取的方法 | |
CN104222889B (zh) | 一种枸杞可溶性膳食纤维及其制备方法 | |
CN102224879B (zh) | 香菇多肽的制备方法和用途 | |
CN103719880A (zh) | 高活性紫甘薯膳食纤维的制备方法 | |
CN102960644A (zh) | 一种南瓜膳食纤维的制备方法及南瓜膳食纤维 | |
CN106317243A (zh) | 一种枸杞多糖的制备方法 | |
CN106866834B (zh) | 一种制备高效定制分子量的褐藻糖胶的方法及其应用 | |
CN104829734A (zh) | 一种利用干香菇生产色素、蛋白、多糖及膳食纤维的方法 | |
CN102349632A (zh) | 一种高色值红薯浓缩清汁的制备方法 | |
WO2017005134A1 (zh) | 一种具有抗病毒和免疫活性的亚麻籽多糖的制备及其应用 | |
CN106046188A (zh) | 一种岩藻多糖的制备方法 | |
CN107778375A (zh) | 一种淮山药黏液多糖和抗性淀粉的制备方法 | |
CN100543039C (zh) | 一种龙眼、荔枝多糖超声强化提取及其纯化方法 | |
CN112941128B (zh) | 一种从银耳中提取银耳多糖的方法 | |
CN112626150A (zh) | 一种昆布多糖的提取方法及应用 | |
CN110256542A (zh) | 一种红藻藻红蛋白的制备方法 | |
CN114835828B (zh) | 黑木耳粗多糖的制备方法 | |
CN101375863B (zh) | 一种提取海参煮汁中多糖等多种活性成分的方法 | |
CN112442136A (zh) | 一种银耳功能性成分的提取方法 | |
JP4406032B2 (ja) | 帆立貝多糖類抽出方法 | |
CN110283860A (zh) | 超声波辅助复合酶解提取的细基江蓠多糖及其提取方法 | |
CN102746413B (zh) | 蜂花粉多糖酶解破壁结合热水超声浸提方法 | |
CN105685740B (zh) | 一种制备浓缩冬凌草清汁的方法 | |
CN109468358B (zh) | 一种肉苁蓉螯合肽的提取方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |