CN114762685A

CN114762685A - 马来酸替加色罗在治疗急性髓系白血病和结直肠癌中的应用

Info

Publication number: CN114762685A
Application number: CN202110037295.XA
Authority: CN
Inventors: 陈璋辉; 高向伟; 洪运广; 钱宇
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2021-01-12
Filing date: 2021-01-12
Publication date: 2022-07-19
Also published as: WO2022151532A1; ZA202304761B

Abstract

本申请属于分子生物学领域，具体的为肿瘤治疗，具体为从选现有技术中已经公开的药物中筛选获得马来酸替加色罗具有治疗急性髓系白血病和结直肠癌的效果，通过细胞学实验和动物实验证明，马来酸替加色罗可以抑制急性髓系白血病细胞系和人结直肠癌细胞系的增殖，诱导细胞凋亡、使细胞周期阻滞于G1期；能够在小鼠模型中显著延长小鼠生存时间及阻碍白血病的进展；同时，本申请还首次发现了马来酸替加色罗是通过抑制肿瘤细胞中的m6A识别蛋白YTHDF1的功能，即阻断YTHDF1与含m6A修饰的RNA的结合，达到抑制下游关键靶基因的翻译能力实现上述效果的。

Description

马来酸替加色罗在治疗急性髓系白血病和结直肠癌中的应用

技术领域

本发明属于分子生物学领域，具体为肿瘤治疗领域，涉及一种根据急性髓系白血病和结直肠癌特异性高表达的标志物筛选获得的治疗药物。具体的，本发明首次利用N6-甲基腺苷(m6A)识别蛋白YTHDF1筛选治疗急性髓系白血病和结直肠癌的药物，具体的，所述的药物为马来酸替加色罗(Tegaserod maleate)。

背景技术

白血病是造血系统的恶性克隆性疾病，根据白血病细胞的分化成熟程度和自然进程，将白血病分为急性和慢性两大类。其次，根据主要受累的细胞系列，可分为急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、慢性髓系白血病(CML)和慢性淋巴细胞白血病(CLL)及少见类型的白血病，如：毛细胞白血病、幼淋巴细胞白血病等。我国发病率为(3～4)/10万。在恶性肿瘤死亡率中，白血病居第6位(男性)和第7位(女性)，在儿童及35岁以下成人中，则居第l位。我国白血病发病率与亚洲国家相近，低于欧美国家。城市的发病率高于农村，成人中以AML多见，男性发病率高于女性(1.81:1)，儿童中则以ALL较多见。目前，AML在60岁以下的成年患者中治愈35％至40％，在60岁以上的患者中治愈5％至15％。大多数AML患者在诊断后3年内会发生疾病复发。

结直肠癌(Colorectal Cancer，CRC)是一种严重威胁人类健康的消化道恶性肿瘤，其发病率和死亡率均位居前列。其中，美国CRC发病率和死亡率都位于恶性肿瘤第三位，而我国CRC发病率和死亡率为第五位。早期CRC可以通过手术切除，治疗效果较好，患者5年生存率可达90％以上；但目前对转移性CRC缺乏有效的治疗手段，患者5年生存率仅为10％左右。结直肠癌在机体内的发生发展过程十分复杂，临床上多采用手术为主的综合治疗。结直肠癌化疗效果受病人个体差异影响较大，但术后化疗仍有改善预后的意义，且可能是很多病人唯一能得到的治疗，因此针对不同靶点选择靶向药物提高结直肠癌对化疗药物的敏感性、减少无效治疗，对提高病人整体生存率有很重要的意义。

最近的研究指出了mRNA甲基化在基因表达调控中的作用。在真核细胞中，一种丰富且保守的mRNA修饰是在N-6位的腺苷甲基化，即N6-甲基腺苷(m6A)。m6A是真核细胞中mRNAs丰度最高的甲基化修饰，影响了RNA生命周期的每个过程，如mRNA的稳定性、剪接及前体miRNA加工等，同时也参与了组织发育、干细胞修复分化、DNA损伤应答、生物节律调控和天然免疫调控等生物学过程。m6A在细胞内的稳态由甲基转移酶复合体(METTL3,METTL14,和WTAP等)和去甲基化酶(FTO和ALKBH5)维持，而且m6A识别蛋白(YTHDF1/2和eIF3等)特异性识别m6A位点并将信息传递，由此构建了一套高效有序的m6A调控网络。研究已确定FTO和ALKBH5可介导这种甲基化的可逆去除。此外，YTH结构域家族蛋白是主要的m6A结合蛋白，可调节各种RNA代谢，包括mRNA剪接，降解和翻译。YTHDF1，也称为含YTH结构域的家族蛋白1或C20orf21，是559个氨基酸的蛋白质，其定位于细胞质中。有证据表明，m6A依赖的mRNA调节在哺乳动物中是必不可少的，并且m6A甲基化的缺陷影响多种生物过程。M6A mRNA甲基化正在成为影响多种肿瘤中癌症发生和发展的途径。到目前为止，许多研究证实了m6A修饰在白血病中的功能重要性，例如METTL3，METTL14，FTO和YTHDF2。然而，YTHDF1蛋白在AML和CRC发生发展中的作用仍有待探索。靶向YTHDF1蛋白筛选药物，将为治疗AML和CRC提供了一个新的切入点。

马来酸替加色罗(Tegaserod maleate)，商品名泽马可、常罗宁，是一种化学品。化学名称(R)-3-(5-甲氧基-1H-吲哚-3-亚甲基)-N-戊基-亚胺胍马来酸盐，分子式为C₂₀H₂₇N₅O₅，分子量为417.46。马来酸替加色罗为选择性的、5-HT₄受体的部分激动剂，临床上主要适用于女性便秘型肠易激综合征患者缓解症状的短期治疗。

目前关于马来酸替加色罗在胃肠道中表现出促进的作用机理，即马来酸替加色罗是吲哚类选择性5-HT₄受体的部分激动剂，通过激动胃肠道5-HT₄受体受体刺激胃肠蠕动反射和肠道分泌，并抑制内脏的敏感性。但是，马来酸替加色罗是否能够靶向m6A识别蛋白YTHDF1来治疗急性髓系白血病和结直肠癌，达到延缓急性髓系白血病和结直肠癌进展与提高患者生存的效果现有技术中并未提及，且未有动物实验证明其治疗效果。

发明内容

本发明的一个方面是提供马来酸替加色罗在制备阻断YTHDF1与含m6A修饰的RNA的结合，从而调控下游关键靶基因表达的制剂的应用；在一个具体的实施例中，所述的其中所述的关键基因为CCNE2；在另外一个具体的实施方式中，所述的调控为抑制表达。

本发明的另外一个方面是提供马来酸替加色罗或其药学上可接受的盐在制备治疗肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述的马来酸替加色罗通过阻断YTHDF1与含m6A修饰的RNA的结合，从而调控下游关键靶基因的翻译，达到治疗肿瘤的效果。

在一个具体的实施例中，所述的肿瘤包括但不限于：本申请中所述肿瘤是选自上腺皮质癌、肛门癌、肛门直肠癌、肛管癌、阑尾癌、小脑星形细胞瘤、脑星形细胞瘤、基底细胞癌、皮肤癌(非黑色素瘤)、胆道癌、肝外胆管癌、肝内胆管癌、膀胱癌、骨关节癌、骨肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、脑癌、脑肿瘤、脑干胶质瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、视觉通路和下丘脑神经胶质瘤、乳腺癌、支气管腺瘤、神经系统癌、神经系统淋巴瘤、中枢神经系统癌、中枢神经系统淋巴瘤、宫颈癌、慢性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病、慢性骨髓增生性疾病、结肠癌、结直肠癌、皮肤T细胞淋巴瘤、淋巴肿瘤、蕈样真菌病、Sezary综合征、子宫内膜癌、食管癌、颅外生殖细胞肿瘤、性腺外生殖细胞肿瘤、眼癌、眼内黑色素瘤、视网膜母细胞瘤、胆囊癌、胃癌、胃肠道类癌、胃肠道间质瘤(GIST)、生殖细胞肿瘤、卵巢生殖细胞瘤、头颈癌、肝细胞癌、霍奇金淋巴瘤、胰岛细胞瘤、卡波西肉瘤、肾癌、喉癌、急性淋巴细胞白血病、急性髓系白血病、毛细胞白血病、唇和口腔腔癌、肝癌、肺癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、非霍奇金淋巴瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、Waldenstroem巨球蛋白血症、黑色素瘤、间皮瘤、转移性鳞癌、舌癌、多发性内分泌肿瘤综合征、骨髓增生异常综合征、多发性骨髓瘤、鼻咽癌、神经母细胞瘤、口咽癌、卵巢癌、卵巢上皮癌、卵巢低恶性潜能肿瘤、胰腺癌、胰岛细胞胰腺癌、鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、咽癌、嗜铬细胞瘤、松果体瘤、垂体瘤、浆细胞肿瘤、胸膜肺母细胞瘤、前列腺癌、直肠癌、肾盂和输尿管移行细胞癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、尤文家族肉瘤、卡波西肉瘤、滑膜肉瘤、子宫癌、子宫肉瘤、小肠癌、软组织肉瘤、鳞状细胞癌、幕上原始神经外胚层肿瘤、睾丸癌、咽喉癌、胸腺瘤、尿道癌、子宫内膜异位症、阴道癌、外阴癌或威尔姆氏肿瘤。

在一个具体的实施例中，所述的肿瘤为血液肿瘤，优选为白血病，更优选为急性髓系白血病。

在另外一个具体的实施例中，所述的肿瘤为实体瘤，优选为结直肠癌。

在另外一个具体的实施例中，所述的药学上可接受的盐选自甲磺酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、醋酸盐、二氟醋酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、枸橼酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、萘磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、以及磷酸盐。

在另外一个具体的实施例中，其中所述的药物还包括药学上可接受的载体，具体的，所述的“药学上可接受的载体”包括生理学上相容的任意的和所有的溶剂、分散介质、包衣剂、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。在一个实施方案中，所述的载体适合静脉、肌肉、皮下、胃肠外、腹腔、脊柱或表皮施用(例如，通过注射或输注)，本申请的药物组合物可以包括一种或多种药学上可接受的盐、抗氧化剂、水性和非水性载体，和/或佐剂，诸如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。

在另外的一个具体的实施例中，所述的药物的给药方式包括但不限于所述药物通过静脉、肌肉、皮下、胃肠外、腹腔、脊柱或表皮施用。

在另外的一个实施例中，所述的药物还包含缓冲剂、稳定剂，任选地还含有表面活性剂。缓冲剂可选自醋酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、以及磷酸盐中的一种或几种。稳定剂可选自糖或氨基酸，优选二糖，例如蔗糖、乳糖、海藻糖、麦芽糖。表面活性剂选自聚氧乙烯氢化蓖麻油、甘油脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯，优选所述聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯为聚山梨酯20、

在另外的一个具体实施例中，所述的药物的给药剂量为1-20mg/kg,优选为2-15mg/kg，更有选为3-10mg/kg，最优选为5mg/kg。

本发明的另外一个方面是提供马来酸替加色罗在制备用于阻断YTH结构域与含m6A修饰的RNA结合反应的制剂的用途，其中所述的用途为非治疗目的。

本发明的另外一个方面是将YTHDF1作为筛选治疗肿瘤药物的靶点的应用。

在另外一个具体的实施例中，所述的肿瘤为实体瘤，优选为消化道肿瘤，更优选为结直肠癌。

本发明的有益效果包括了1)将急性髓系白血病和结直肠癌的标志物蛋白(YTHDF1)作为筛选用于治疗急性髓系白血病和结直肠癌药物的作用靶点，具体的，利用生物信息学技术，模拟标志物蛋白的高级结构，从上市的治疗药物中进行筛选与其能够特异性结合的药物；进一步的，所述的生物信息学技术是指虚拟筛选技术；更进一步的，所述的药物为化学药物。

2)本发明首次发现了用于女性便秘型肠易激综合征患者的药物马来酸替加色罗可以应用于肿瘤的治疗，特别是为急性髓系白血病；

3)本发明发现了马来酸替加色罗是通过抑制细胞中的m6A识别蛋白YTHDF1的功能，从而达到抑制细胞增殖，使细胞周期阻滞于G1期，以及促进细胞凋亡的效果，实现了对肿瘤的抑制。

附图说明

图1马来酸替加色罗对急性髓系白血病THP-1细胞具有细胞毒性，且具有剂量依赖性，其IC50值为3.58μM(图1a)，抑制细胞增殖(图1b)，促进细胞凋亡(图1e)，使细胞周期停滞于G1期(图1f)。同样地，马来酸替加色罗对人结直肠癌细胞HCT116也具有细胞毒性，且具有剂量依赖性，其IC50值为2.349μM(图1c)，抑制细胞增殖(图1d)。

图2马来酸替加色罗阻断m6A识别蛋白YTHDF1与含m6A修饰的RNAs的结合，其K_D值为0.7993μM(图2a)。对THP-1细胞施用马来酸替加色罗，分别检测YTHDF1和CCNE2的表达情况，以DMSO为对照，施用马来酸替加色罗使得YTHDF1蛋白水平不改变，而CCNE2蛋白表达水平下调(图2b)。

图3利用重度免疫缺陷NCG小鼠，在异种移植人类THP-1细胞构建AML小鼠模型中，施用马来酸替加色罗可以延长小鼠生存时间，以及阻碍白血病进展。

具体实施方式

实验方法

1、材料

急性髓系白血病细胞系THP-1、人结直肠癌细胞HCT116由中国科学院干细胞库提供；RPMI1640、DMEM购于Gibco公司；胎牛血清购于Hyclone公司。Cell Counting Kit-8试剂购于DOJINDO公司，hCD45-FITC抗体、hCD117-PE-Cy7抗体、凋亡试剂盒与细胞周期试剂购于eBioscience公司。YTHDF1和CCNE2抗体分别购于Proteintech和CST公司。引物委托杭州有康生物公司合成。马来酸替加色罗购买自MCE公司(HY-14153A)；其他药品为国产分析纯。瑞氏-姬姆萨染色液购于BASO公司；重度免疫缺陷NCG小鼠购于江苏集萃药康生物公司。

2、细胞培养

急性髓系白血病细胞系悬浮生长于含10％胎牛血清的RPMI 1640培养液中，人结直肠癌细胞系贴壁生长于含10％胎牛血清的DMEM培养液中，于37℃，5％CO2湿化培养箱中培养，隔天传代一次。

3、CCK-8细胞增殖实验：

细胞增殖实验采用DOJINDO公司细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)：

(1)取对数生长期的THP-1细胞10000个/孔，HCT116细胞20000个/孔，接种于96孔板，每孔加含不同药物浓度的培养液至终体积100μl；置37℃，5％CO2培养；并设3个复孔，3个对照孔(不加细胞只加培养液的空白对照)。

(2)细胞接种后按0h计时，在0h、12h、24h及72h后，分别在实验孔内加入10μl CCK-8溶液，37℃孵育4h。

(3)酶联免疫监测仪测定450nm波长的吸光度，以对照调零，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。

4、细胞凋亡实验

(1)取对数生长期的细胞，接种于6孔板，每孔加含不同药物浓度的培养液至终体积3ml；置37℃，5％CO2培养；并设3个复孔，3个对照孔(DMSO)。

(2)收集细胞，取100μl细胞悬液重悬于流式管，分别加入Annexin V-APC和Propidium iodide流式抗体，室温条件下避光孵育15min。

(3)流式细胞仪检测细胞凋亡，以DMSO组为对照，比较细胞凋亡的比例。

5、细胞周期实验

(2)收集细胞，取1x10⁶细胞/管，PBS洗涤两次，每次1000rpm，离心5分钟。

(3)去除上清，加入1ml于－20℃预冷的70％乙醇，振荡混匀后将标本保存于－20℃过夜。

(4)取出样本，1000rpm，离心5分钟，去除上清，PBS洗涤一次，1000rpm，离心5分钟。

(5)去除上清，加入染色液，即由PBS稀释PI(40μg/ml)，RNase A,DNase andprotease-free(0.2mg/ml)组成，充分混匀，避光孵育15min。

(6)流式细胞仪检测细胞周期。

6、免疫印迹法

SDS-PAGE分离蛋白质，转膜、封闭、一抗孵育过夜，辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗室温孵育1小时，加入底物ECL显色，化学发光成像仪扫描获取结果。

7、骨髓(BM)细胞瑞氏-姬姆萨染色

骨髓细胞染色采用BASO公司的瑞氏-姬姆萨染色液试剂盒。

(1)分离小鼠的股骨，去除两端干骺端，用400μl PBS反复冲洗骨髓腔于1.5ml Ep管内收集细胞，吸取10μl骨髓液滴加于载玻片上，用另一块载玻片涂片；

(2)在干燥的血涂片上滴加0.5ml～1ml的A液，染色1分钟(注意：A液全程湿润覆盖，切勿让A液染料晾干)；

(3)将B液滴加于A液上(滴加量为A液的2～3倍)，用洗耳球吹风或者轻晃载玻片，使两夜充分混合，染色3-10分钟；

(4)水洗(冲洗时不能先倒掉染料，应以流水冲洗，以防染料沉渣再标本上)，待干，镜检。

8、AML肿瘤负荷检测实验

分离小鼠的股骨，收集骨髓细胞，加入抗人的CD45和CD177抗体，孵育30分钟，裂解红细胞，PBS洗涤2次，流式细胞仪检测小鼠肿瘤负荷。

9、异种移植人类AML细胞构建AML小鼠模型

收集1×10⁶细胞重悬于200μl的PBS中，无菌操作尾静脉注射于8-10周龄的雄性重度免疫缺陷NCG小鼠，流式检测确认白血病细胞植入成功之后，隔天给药和称量小鼠体重，观察小鼠生命状态。

10、SPR检测-SA芯片

使用Biacore T200仪器(GE Healthcare)通过SPR实验评估含m6A和非m6A的RNA与YTHDF1蛋白的结合亲和力。将系列浓度的YTHDF1蛋白注入流动系统并分别进行分析。接下来，将一系列浓度的化合物注入流动系统并分析90s，解离为120s。关联时间设置为120s，而解离时间设置为360s。解离后，芯片表面通过50mM NaOH和1M NaCl再生。在分析之前，先进行两次参考减法以消除体折射率的变化，注入噪声和数据漂移。通过对Biacore评估软件(GE Healthcare)中的Langmuir 1：1结合模型进行整体拟合来确定结合亲和力。

实施例1药物筛选

首先，从PDB数据库(http://www.rcsb.org)中获取hYTHDF1的晶体结构PDB ID:4RCJ。确定以hYTHDF1蛋白m6A结合区域作为虚拟筛选的对接口袋，虚拟筛选所用软件为

Maestro 11.4。使用Protein Preparation Wizard Panel模块对蛋白进行处理：去水、加氢、优化结构、删除多余链、能量最小化等，将hYTHDF1蛋白m6A结合区域作为对接口袋，用Receptor Grid Generation模块制作格点文件，盒子大小为

然后，准备化合物：将FDA-Approved Drug Library(含1805个化合物)的2D格式通过LigPrep Module模块进行处理，输出3D结构。最后，虚拟筛选：采用VirtualScreening Workflow模块进行虚拟筛选，将准备好的化合物导入，利用Glide模块进行分子对接，即受体和配体分子之间通过几何匹配和能量匹配而互相对接。采用Glide模块中高精度(XP)模式进行筛选，获得小分子化合物的排名。最后进行人工挑选，即人工复核靶点与化合物结合力、化合物结构等，优选出FDA-Approved Drug Library排名前21名化合物输出，并用细胞生物学实验证实筛选出来的化合物抑制效果。

最终，针对急性髓系白血病的标志物蛋白(YTHDF1)筛选已上市药物，发现马来酸替加色罗(Tegaserod maleate)，能够抑制YTHDF1蛋白的功能，从而抑制其在急性髓系白血病和结直肠癌中的作用。

实施例2马来酸替加色罗的细胞学实验

取培养状态良好的急性髓系白血病THP-1细胞和人结直肠癌HCT116细胞，对其施用不同浓度的马来酸替加色罗，观察马来酸替加色罗对于细胞的毒性，以及细胞的增殖、细胞周期、凋亡情况。

首先，我们发现通过细胞凋亡实验发现马来酸替加色罗具有细胞毒性，其对THP-1细胞和HCT116细胞的IC50分别为为3.58μM、2.349μM(参见图1a、1c)；且其对于THP-1细胞和HCT116细胞的增殖具有浓度依赖的抑制作用(参见图1b、1d)；

同时其能给诱导THP-1细胞的凋亡、使THP-1细胞周期停滞于G1期(参见图1c和1d)。

实施例3马来酸替加色罗阻断YTHDF1蛋白与含m6A修饰的RNA的结合能力

基于实施例1的虚拟筛选的结果以及本领域技术人员所知晓的m6A识别蛋白与急性髓系白血病、结直肠癌的关系，我们预测马来酸替加色罗与急性髓系白血病、结直肠癌的m6A识别蛋白YTHDF1有关，因此我们推测当对细胞施用马来酸替加色罗时，可以抑制YTHDF1的功能及关键靶基因，为此，我们利用Biacore系统证实了施用马来酸替加色罗能够阻断m6A识别蛋白YTHDF1与含m6A修饰的RNA的结合，结果如图2a所示。

同时，我们采用免疫印迹法发现，THP-1细胞在马来酸替加色罗药物处理后，周期素E2(cyclin E2，CCNE2)蛋白水平下调，而YTHDF1蛋白水平不发生改变，提示马来酸替加色罗抑制YTHDF1蛋白的功能，导致下游关键靶基因CCNE2的翻译能力下降，达到了阻碍白血病细胞进展的目的(图2b)。

实施例4异种移植人类AML细胞构建AML小鼠模型实验

为进一步验证马来酸替加色罗治疗急性髓系白血病的作用，我们进行了小鼠实验，即在异种移植人类AML细胞构建AML小鼠模型中，5mg/kg马来酸替加色罗显著延长小鼠生存时间。

AML肿瘤负荷结果及骨髓涂片显示，马来酸替加色罗能够阻碍急性髓系白血病进展过程(参见图3)。

本领域技术人员所公知的是，上述的具体实施例是本领域已知的最佳的实施方式，但是其并不对本申请请求保护的范围有所限制，所属领域技术人员所熟知的本领域的普遍技术均可纳入本申请所要求保护的范围。

Claims

1.马来酸替加色罗在制备阻断YTHDF1与含m6A修饰的RNA的结合，从而调控下游关键靶基因表达的制剂的应用，所述的应用为非治疗目的。

2.根据权利要求1所述的应用，其中所述的关键基因为CCNE2，所述的调控为抑制表达。

3.马来酸替加色罗或其药学上可接受的盐在制备治疗肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述的马来酸替加色罗通过阻断YTHDF1与含m6A修饰的RNA的结合，从而调控下游关键靶基因的翻译，达到治疗肿瘤的效果。

4.根据权利要求3所述的应用，所述的肿瘤为血液肿瘤，优选为白血病，更优选为急性髓系白血病；或者所述的肿瘤为实体瘤，优选为结直肠癌。

5.权利要求3-4任一一项所述的应用，所述的药学上可接受的盐选自甲磺酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、醋酸盐、二氟醋酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、枸橼酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、萘磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、以及磷酸盐。

6.权利要求3-5任一项所述的用途，其中所述的药物还包括药学上可接受的载体，优选的，所述的药学上可接受的载体包括生理学上相容的任意的溶剂、分散介质、包衣剂、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂。

7.权利要求3-6任一项所述的用途，其中所述的被调节翻译的关键的靶基因为CCNE2。

8.根据权利要求3-10所述的用途，其中给药剂量为1-20mg/kg,优选为2-15mg/kg，更有选为3-10mg/kg，最优选为5mg/kg。

9.马来酸替加色罗在制备用于阻断YTH结构域与含m6A修饰的RNA结合反应的制剂的用途，其中所述的用途为非治疗目的。

10.YTHDF1作为筛选治疗肿瘤药物的靶点的应用；优选的，所述的肿瘤为血液肿瘤或实体瘤，优选为白血病，更优选为急性髓性白血病或结直肠癌。