CN114736983A - 一种通过dna分析监测叶丝加工均匀性的方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法及其应用，所述通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法包括：对符合标准的叶丝样品进行DNA浓度检测，并建立DNA浓度监测区间，对叶丝样品的加工均匀性进行判断。本发明将DNA浓度的检测引入叶丝加工均匀性的监控与评价中，仅需对生产后的叶丝的DNA浓度进行检测，即可对其加工均匀性进行准确检测，稳定性强，平行性好，检测成本低，效率高，在叶丝的加工中具有重要的应用价值。
Description
技术领域
本发明属于烟草叶丝加工技术领域，尤其涉及一种通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法及其应用。
背景技术
近年来，随着我国烟草特色工艺技术的推广和发展，烟草行业对卷烟生产过程中的精细化要求越来越高，对卷烟产品的稳定性、一致性要求越来越严格。随着卷烟产品结构的升级，消费者对卷烟产品的质量稳定性要求也越来越高。新的形势对卷烟工业企业的生产加工提出了新的要求，企业为获得更好的发展，势必要对卷烟生产的“均质化”进行深入研究。
所谓“均质化”，就是同一批次、不同批次产品的质量保持相对一致。卷烟生产的“均质化”研究涉及很多方面，而卷烟叶丝加工过程中的均匀性是其中一个重要的研究内容，且直接关系到卷烟产品质量的稳定性、一致性。
目前，对于卷烟叶丝加工过程中的均匀性控制主要通过工艺流程的优化、工艺技术标准的优化和工艺参数的符合性监测来实现，但这些控制方法均来自于经验，并未有确切的数量来进行表征。卷烟叶丝加工过程中的均匀性虽然可以通过感官评吸或化学成分分析的方法来进行评价，但感官评吸方法每次都需要制备评价样品，组织专业的评价人员进行专项评价，工作量大且要求高，无法作为一种日常的监控方法使用。化学成分分析的方法检测指标多，检测时间长，且检测结果受外源添加的糖香料影响较大，对取样的要求和检测过程的要求非常高，当个别指标存在波动较大时，对评价的结论会产生影响，因此通过分析加工后叶丝的化学成分也无法全面、清晰、快捷地评价加工的均匀性。目前还没有一个好的技术手段来对卷烟叶丝生产过程的均匀性进行常态化和精准化监测和评价。
因此，如何提供一种可以对卷烟叶丝生产中的均匀性进行科学、精准、具体的监测和评价的方法，已成为亟待解决的问题。
发明内容
针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供一种通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法及其应用，提出了一种以DNA分析为技术手段对制丝烘丝工艺环节进行均质化监测的方法，即建立加工后叶丝的DNA浓度监测区间，在后续的生产过程中，通过检测加工后叶丝的DNA浓度，并依据检测值是否在监测区间内，实现以DNA分析为技术手段对叶丝加工均匀性进行评价和监测的目的。
为达此目的，本发明采用如下技术方案：
第一方面，本发明提供了一种通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法，所述通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法包括：
对符合标准的叶丝样品进行DNA浓度检测，并建立DNA浓度监测区间，对叶丝样品的加工均匀性进行判断。
DNA分析技术是一项精准度高、受外界因素影响少、数据可靠性高的分析技术手段，随着DNA分析技术的不断发展，分析难度和分析成本不断降低，已经成为在大规模生产过程中作为一项常态化分析手段进行应用。卷烟叶丝所用烟叶原料的DNA天然存在，且较为稳定和明确，本申请在前期的研究中，证明可以对加工后的卷烟叶丝的DNA浓度进行快速检测，且检测数据能够有效表征叶丝加工的均匀性，这为DNA分析技术在卷烟生产过程中的应用提供了技术保障和应用基础。
本发明创新性地提出以DNA分析技术为手段对卷烟叶丝加工过程进行均质化监测，解决了对卷烟叶丝加工过程中进行均质化评价缺乏有效手段的问题，填补了对卷烟叶丝加工过程进行均质化评价的技术空白。检测结果受外界因素的影响较小，准确性好，稳定性高，且不受评价人员的主观性的影响，并且可以实现大批量产品的同时检测，无需预先制备卷烟样品，检测成本低，效率高。
优选地，所述通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法包括以下步骤：
(1)加工后的叶丝样品进行取样，进行感官质量评价和化学成分分析；
(2)对感官质量均匀性和化学成分均匀性符合标准的叶丝样品进行DNA浓度检测，并建立DNA浓度监测区间；
(3)取加工好的叶丝样品进行DNA浓度检测，根据步骤(2)中的DNA浓度监测区间，对叶丝样品的加工均匀性进行判断。
优选地，步骤(1)中，所述取样的方法包括：
每隔5～10min，取样6～12个，均分为3～4份，间隔时间例如可以是5min、6min、7min、8min、9min或10min等，取样个数例如可以是6个、7个、8个、9个、10个、11个或12个，均分的份数例如可以是3份或4份，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤(1)中，所述感官质量评价的方法包括：将叶丝制成卷烟样品，对所述卷烟样品的感官质量进行评价。
优选地，步骤(1)中，所述化学成分分析的方法包括：对叶丝样品的总植物碱、水溶性糖、总氮、氯、钾和水分的含量进行测定。
优选地，所述感官质量评价的标准为GB 5606.4-2005《卷烟第4部分：感官技术要求》。
优选地，所述总植物碱、水溶性糖、总氮、氯、钾和水分的含量的测定方法依次为YC/T 468-2013、YC/T 159-2019、YC/T 161-2002、YC/T 162-2011、YC/T 217-2007和YC/T31-1996。
优选地，步骤(2)中，所述感官质量均匀性的评价标准为：平行样品的不同评价人员的感官质量评价的分差不大于2分，所述叶丝样品的感官质量均匀性符合标准，分差例如可以是0分、0.5分、1分、1.5分或2分等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤(2)中，所述化学成分均匀性的评价标准为：平行样品的各项化学成分的含量的相对标准偏差不大于3％，所述叶丝样品的化学成分均匀性符合标准，相对标准偏差例如可以是1％、2％或3％等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤(2)中，所述DNA浓度检测的方法包括：
a.烘干后的样品研磨成粉末，加入提取缓冲液，处理，离心；
b.取上清液加入苯酚和氯仿，混合，去除蛋白；
c.离心取上清液，沉淀DNA，并配置成溶液；
d.对所得溶液的DNA浓度进行检测。
优选地，步骤a中，所述研磨的方法包括：
取0.1～0.2g样品，加入液氮进行研磨，样品的质量例如可以是0.1g、0.15g或0.2g等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤a中，所述提取缓冲液包括CTAB提取缓冲液，所述提取缓冲液的加入体积为600～800μL，例如可以是600μL、650μL、700μL、750μL或800μL等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤a中，所述处理的方法包括：
在60～70℃水浴条件下浸泡15～25min，期间每隔3～5min进行震荡，水浴的温度例如可以是60℃、61℃、62℃、63℃、64℃、65℃、66℃、67℃、68℃、69℃或70℃等，浸泡的时间例如可以是15min、16min、17min、18min、19min、20min、21min、22min、23min、24min或25min等，间隔的时间例如可以是3min、3.5min、4min、4.5min或5min等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤a中，所述离心的条件为11000～13000rpm离心10～15min，离心的速度例如可以是11000rpm、11500rpm、12000rpm、12500rpm或13000rpm等，离心的时间例如可以是10min、11min、12min、13min、14min或15min等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤b中，所述上清液、苯酚和氯仿的体积相同。
优选地，步骤b中，所述去除蛋白的方法包括：
混合后的溶液在3～5℃(例如可以是3℃、3.5℃、4℃、4.5℃或5℃等)下11000～13000rpm(例如可以是11000rpm、11500rpm、12000rpm、12500rpm或13000rpm等)离心10～15min(例如可以是10min、11min、12min、13min、14min或15min等)，吸取上清液加入等体积氯仿，在3～5℃(例如可以是3℃、3.5℃、4℃、4.5℃或5℃等)下11000～13000rpm(例如可以是11000rpm、11500rpm、12000rpm、12500rpm或13000rpm等)离心10～15min(例如可以是10min、11min、12min、13min、14min或15min等)，重复2～3次(例如可以是2次或3次)，直至蛋白完全去除，上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤c中，所述离心的条件为11000～13000rpm离心10～15min，离心的速度例如可以是11000rpm、11500rpm、12000rpm、12500rpm或13000rpm等，离心的时间例如可以是10min、11min、12min、13min、14min或15min等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤c中，所述沉淀DNA的方法包括：
在-20～-25℃(例如可以是-20℃、-21℃、-22℃、-23℃、-24℃或-25℃等)条件下沉淀1～2h(例如可以是1h、1.5h或2h等)，在3～5℃(例如可以是3℃、3.5℃、4℃、4.5℃或5℃等)下11000～13000rpm(例如可以是11000rpm、11500rpm、12000rpm、12500rpm或13000rpm等)离心10～15min(例如可以是10min、11min、12min、13min、14min或15min等)，上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述沉淀DNA后还包括乙醇洗涤和干燥的步骤。
优选地，所述乙醇洗涤的方法包括：
使用浓度为50％～70％的乙醇洗涤1～2次，乙醇的浓度例如可以是50％、55％、60％、65％或70％等，洗涤的次数例如可以是1次或2次，上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述干燥的条件为：室温下干燥10～15min，时间例如可以是10min、11min、12min、13min、14min或15min等，上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤d中，使用超微量分光光度计在波长200～220nm条件下对所得溶液的DNA浓度进行检测，波长例如可以是200nm、202nm、204nm、206nm、208nm、210nm、212nm、214nm、216nm、218nm或220nm等，上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤(2)中，所述建立DNA浓度监测区间的方法包括：
以平行样品的平均值作为平均DNA浓度值，使用统计学95％置信区间的计算方法，以叶丝样品平均DNA浓度值±(2～3)倍标准偏差作为DNA浓度监测区间，标准偏差例如可以是2倍、2.5倍或3倍等，上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤(3)中，所述判断的标准为：
叶丝样品的DNA浓度在所述DNA浓度监测区间内，所述叶丝样品的加工均匀性符合标准；
叶丝样品的DNA浓度在所述DNA浓度监测区间外，所述叶丝样品的加工均匀性不符合标准。
作为优选技术方案，本发明所述的通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法，包括以下步骤：
(1)在卷烟叶丝正常生产的过程中，在烘丝工序后每隔5～10min，随机取加工完成后的叶丝样品6～12个，均分为3～4份；
(2)对所取叶丝样品中的一份进行卷烟样品卷制，作为感官质量评价的卷烟样品，组织具备感官质量评价资格的人员依照GB 5606.4-2005《卷烟第4部分：感官技术要求》对卷烟样品进行感官质量评价；
(3)对所取叶丝样品的一份进行化学成分分析，对叶丝样品分别依据YC/T 468-2013、YC/T 159-2019、YC/T 161-2002、YC/T 162-2011、YC/T 217-2007和YC/T 31-1996标准方法依次测定总植物碱、水溶性糖、总氮、氯、钾和水分含量；
(4)组织质量管理专业人员对样品的感官质量评价结果和化学成分分析结果进行分析评价，确认叶丝质量的均匀性符合标准后，对所取的叶丝样品进行DNA浓度检测；
其中，所述感官质量的均匀性的评价标准为：平行样品的不同评价人员的感官质量评价的分差不大于2分，所述叶丝样品的感官质量均匀性符合标准；
所述化学成分的均匀性的评价标准为：平行样品的各项化学成分的含量的相对标准偏差不大于3％，所述叶丝样品的化学成分均匀性符合标准；
(5)进行叶丝样品DNA浓度检测时，将样品放置在95～100℃的烘箱中烘2～3h，粉碎，过40目筛后，取0.1～0.2g粉碎后的样品加液氮在研钵中研磨成粉末，转入2～5mL离心管中；
加入600～800μL的CTAB提取缓冲液，混合，在60～70℃水浴条件下每3～5min进行震荡，15～25min后11000～13000rpm离心10～15min；
上清液中加入等体积的苯酚和氯仿溶液，混合，3～5℃下11000～13000rpm离心10～15min；
吸取上清液，加入等体积的氯仿，混合，3～5℃下11000～13000rpm离心10～15min，重复2～3次，直至蛋白完全去除；
11000～13000rpm离心10～15min取上清液，在-20～-25℃条件下沉淀1～2h，3～5℃下11000～13000rpm离心10～15min；
弃上清液，用浓度为50％～70％的乙醇洗涤沉淀1～2次；室温下干燥10～15min，于不高于-20℃条件下保存备用；
(6)将提前处理好的检测样品配置成溶液，用超微量分光光度计在波长200～220nm条件下对其DNA浓度进行测定，以平行样品的平均值作为平均DNA浓度值，使用统计学95％置信区间的计算方法，以叶丝样品平均DNA浓度值±(2～3)倍标准偏差作为DNA浓度监测区间；
(7)在叶丝正常生产过程中，按照固定的周期在烘丝工序后取加工好的叶丝样品，对所取烟丝样品进行DNA浓度检测，根据DNA浓度监测区间，对叶丝样品的加工均匀性进行判断：
叶丝样品的DNA浓度在所述DNA浓度监测区间内，所述叶丝样品的加工均匀性符合标准；
叶丝样品的DNA浓度在所述DNA浓度监测区间外，所述叶丝样品的加工均匀性不符合标准，需要质量管理人员进行原因分析，并采取纠正措施。
第二方面，本发明提供了第一方面所述的通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法在叶丝加工中的应用。
相比于现有技术，本发明具有如下有益效果：
本发明创新性地将DNA分析技术引入到卷烟叶丝加工均匀性的评价中，充分利用卷烟叶丝所用烟叶原料的DNA能被有效识别且较为稳定的特性，以DNA分析技术为手段，通过对卷烟制丝生产过程中加工完成后的叶丝DNA浓度进行监测，在统计分析的基础上，建立加工后叶丝DNA浓度的控制上下限；在卷烟制丝正常生产过程中，通过检测加工后叶丝样品的DNA浓度，并依据检测值在监测区间的实际情况来评价叶丝加工的均匀性，从而实现了以DNA分析为技术手段对叶丝加工均匀性进行评价和监测的目的。本发明建立的通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法与传统感官评吸法和化学成分分析法相比，受外在因素影响较小，稳定性高，结果准确性高且较为直观明确，能够作为对卷烟叶丝加工均匀性进行评价和监测的有效方法；使用本发明所述的方法对叶丝样品的均匀性进行评价时，无需制备卷烟样品，也无需专业的评价人员，节省了大量的人力物力，且提高了检测效率，进一步促进了相关技术的推广。
附图说明
图1为本发明依据实施例1构建的DNA浓度监测控制示意图；
图2为采用实施例1中的方法根据检测的DNA浓度与建立的DNA浓度监测区间绘制的控制图。
具体实施方式
为进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合实施例和附图对本发明作进一步地说明。可以理解的是，此处所描述的具体实施方式仅仅用于解释本发明，而非对本发明的限定。
实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购获得的常规产品。
实施例1
本实施例提供一种通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法，步骤如下：
(1)在卷烟叶丝正常生产时，在烘丝工序后每隔5min，随机进行10次取样，每次所取样品均匀分为4份，并对分样后的样品进行编号；
(2)将所取叶丝样品中的一份进行卷烟样品卷制，作为感官质量评价的卷烟样品，组织具备感官质量评价资格的人员依照GB 5606.4-2005《卷烟第4部分：感官技术要求》对卷烟样品进行感官质量评价；
(3)对所取叶丝样品的一份进行化学成分分析，对叶丝样品分别依据YC/T468-2013、YC/T 159-2019、YC/T 161-2002、YC/T 162-2011、YC/T 217-2007和YC/T 31-1996标准方法依次测定总植物碱、水溶性糖、总氮、氯、钾和水分含量；
(4)组织质量管理专业人员对样品的感官质量评价结果和化学成分分析结果进行分析评价，确认叶丝质量的均匀性符合标准后，对所取的叶丝样品进行DNA浓度检测；
其中，所述感官质量的均匀性的评价标准为：平行样品的不同评价人员的感官质量评价的分差不大于2分，所述叶丝样品的感官质量均匀性符合标准；
所述化学成分的均匀性的评价标准为：平行样品的各项化学成分的含量的相对标准偏差不大于3％，所述叶丝样品的化学成分均匀性符合标准；
(5)进行叶丝样品DNA浓度检测时，将样品放置在100℃的烘箱中烘2h，粉碎，过40目筛后，取0.1g粉碎后的样品加液氮在研钵中研磨成粉末，转入2mL离心管中；
加入700μL的CTAB提取缓冲液，混合，在65℃水浴条件下每4min轻轻震荡几次，20min后12000rpm离心12min；
小心吸取上清液，加入等体积的苯酚和氯仿(各400μL)，混合，4℃下12000rpm离心12min；
小心吸取上清液，加入等体积的氯仿，混合，4℃下12000rpm离心12min，重复3次，直至蛋白层不再出现；
12000rpm离心12min取上清液，在-20℃条件下沉淀1h，4℃下12000rpm离心12min；
弃上清液，用浓度为60％的乙醇洗涤沉淀2次；室温下干燥15min，于-25℃条件下保存备用；
(6)加入50μL去离子水溶解提前处理好的检测样品，配置成溶液，用超微量分光光度计在波长220nm条件下对提前处理好的样品DNA浓度进行测定，10个平行样品的平均值为作样品DNA浓度值，使用统计学95％置信区间的计算方法，以叶丝样品平均DNA浓度值±2倍标准偏差作为DNA浓度监测区间，建立DNA浓度监测控制图，示意图如图1所示；
(7)在叶丝正常生产过程中，按照固定的周期在烘丝工序后取加工好的叶丝样品，对所取烟丝样品进行DNA浓度检测，根据DNA浓度监测区间，对叶丝样品的加工均匀性进行判断：
叶丝样品的DNA浓度在所述DNA浓度监测区间内，所述叶丝样品的加工均匀性符合标准；
叶丝样品的DNA浓度在所述DNA浓度监测区间外，所述叶丝样品的加工均匀性不符合标准，需要质量管理人员进行原因分析，并采取纠正措施。
本实施例中，将DNA的浓度分析结果作为评价叶丝加工均匀性的标准，受外界及人为因素的影响较小，检测稳定性及平行性均较好，结果准确，应用价值很高。
实施例2
与实施例1的区别仅在于，本实施例中，步骤(6)中，以叶丝样品平均DNA浓度值±3倍标准偏差作为DNA浓度监测区间，其余步骤及方法与实施例1相同。
对比例1
本对比例提供一种通过感官质量评价监测叶丝加工均匀性的方法，步骤如下：
(1)在卷烟叶丝正常生产时，在烘丝工序后每隔5min，随机进行10次取样，每次所取样品均匀分为4份，并对分样后的样品进行编号；
(2)将所取叶丝样品中的一份进行卷烟样品卷制，作为感官质量评价的卷烟样品，组织具备感官质量评价资格的人员依照GB 5606.4-2005《卷烟第4部分：感官技术要求》对卷烟样品进行感官质量评价。
对比例2
本对比例提供一种通过化学成分分析监测叶丝加工均匀性的方法，步骤如下：
(1)在卷烟叶丝正常生产时，在烘丝工序后每隔5min，随机进行10次取样，每次所取样品均匀分为4份，并对分样后的样品进行编号；
(2)对所取叶丝样品的一份进行化学成分分析，对叶丝样品分别依据YC/T 468-2013、YC/T 159-2019、YC/T 161-2002、YC/T 162-2011、YC/T 217-2007和YC/T 31-1996标准方法依次测定总植物碱、水溶性糖、总氮、氯、钾和水分含量。
测试例1
本测试例采用实施例1～2以及对比例1～2中的方法，对同一批加工后的叶丝的均匀性进行评价，并对结果进行分析。
在某一规格卷烟产品叶丝正常生产时，在烘丝工序后每隔5min，随机进行10次取样，每次所取样品均匀分为4份，并对分样后的样品进行编号。
其中一份样品采用对比例1的方法进行分析评价(以1号样品为对照样进行感官质量评吸打分)，结果如表1所示。
表1
由感官评吸结果可知：所有样品间感官质量得分平行且未有超过2分的情况，各个评委间评价得分也未有超过2分的情况，这说明本批次叶丝感官质量无明显差异，加工的均匀性和一致性较好。但采用这种方法进行评价，受评委主观评价以及个体差异的影响较大，结果的准确性及平行性较差。
其中一份样品采取对比例2的方法进行分析评价，结果如表2所示。
表2
由表2分析可知，加工后叶丝样品的大部分常规化学成分指标的相对标准偏差均小于3.0％，但其中一项指标(钾含量)的相对标准偏差为3.37％，超过了3.0％。由以上分析结果只能大致地判断本批次叶丝的常规化学成品无明显差异，加工的均匀性和一致性比较好。且采用对比例2中的方法，每次评估都需要进行相应的化学成分分析检测，效率低，且检测成本极高。
其中一份样品采取对本发明的实施例1的方法进行分析评价，结果如表3所示。
表3
本规格产品建立的DNA浓度监测区间为52～64ng/μL，将本次检测的DNA浓度数据与建立的DNA浓度监测区间绘制成控制图，如图2所示。由检测结果和控制图可以直观地判断，本次生产的叶丝DNA浓度监测值均在控制区间内，均匀性和一致性较好。
本测试例还对实施例2中的方法进行了分析评价，评价步骤及结果与实施例1十分接近。相比于实施例1，实施例2中以叶丝样品平均DNA浓度值±3倍标准偏差作为DNA浓度监测区间，因此所得的DNA浓度监测区间相较于实施例1更宽，因此对于部分样品，可能出现采用实施例1中的方法分析的结果为均匀性不合格而采用实施例2中的方法则是合格的，因此实施例2中的方法的灵敏度与准确度差于实施例1中的方法。
综上所述，本发明采用所述通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法，通过对正常生产的卷烟叶丝的DNA浓度进行检测，配合相应的DNA监测区间，即可对该批叶丝的生产均匀性是否符合标准进行迅速判断，并达到监控的目的。相比较于另外两种方法，不需要卷制样品、组织感官评吸专家进行感官评价，指标少，影响因素少，评价判断直观明了。本发明所述的方法可对大批量样品进行同时检测，具有良好的检测稳定性、平行性及准确性，在叶丝的加工中具有实际应用的价值。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (10)
1.一种通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法，其特征在于，所述通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法包括：
对符合标准的叶丝样品进行DNA浓度检测，并建立DNA浓度监测区间，对叶丝样品的加工均匀性进行判断。
2.根据权利要求1所述的通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法，其特征在于，所述通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法包括以下步骤：
(1)加工后的叶丝样品进行取样，进行感官质量评价和化学成分分析；
(2)对感官质量均匀性和化学成分均匀性符合标准的叶丝样品进行DNA浓度检测，并建立DNA浓度监测区间；
(3)取加工好的叶丝样品进行DNA浓度检测，根据步骤(2)中的DNA浓度监测区间，对叶丝样品的加工均匀性进行判断。
3.根据权利要求2所述的通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述取样的方法包括：
每隔5～10min，取样6～12个，均分为3～4份；
优选地，步骤(1)中，所述感官质量评价的方法包括：将叶丝制成卷烟样品，对所述卷烟样品的感官质量进行评价；
优选地，步骤(1)中，所述化学成分分析的方法包括：对叶丝样品的总植物碱、水溶性糖、总氮、氯、钾和水分的含量进行测定。
4.根据权利要求3所述的通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法，其特征在于，所述感官质量评价的标准为GB 5606.4-2005《卷烟第4部分：感官技术要求》；
优选地，所述总植物碱、水溶性糖、总氮、氯、钾和水分的含量的测定方法依次为YC/T468-2013、YC/T 159-2019、YC/T 161-2002、YC/T 162-2011、YC/T 217-2007和YC/T 31-1996。
5.根据权利要求2～4任一项所述的通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述感官质量均匀性的评价标准为：平行样品的不同评价人员的感官质量评价的分差不大于2分，所述叶丝样品的感官质量均匀性符合标准；
优选地，步骤(2)中，所述化学成分均匀性的评价标准为：平行样品的各项化学成分的含量的相对标准偏差不大于3％，所述叶丝样品的化学成分均匀性符合标准。
6.根据权利要求2～5任一项所述的通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述DNA浓度检测的方法包括：
a.烘干后的样品研磨成粉末，加入提取缓冲液，处理，离心；
b.取上清液加入苯酚和氯仿，混合，去除蛋白；
c.离心取上清液，沉淀DNA，并配置成溶液；
d.对所得溶液的DNA浓度进行检测。
7.根据权利要求6所述的通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法，其特征在于，步骤a中，所述研磨的方法包括：
取0.1～0.2g样品，加入液氮进行研磨；
优选地，步骤a中，所述提取缓冲液包括CTAB提取缓冲液，所述提取缓冲液的加入体积为600～800μL；
优选地，步骤a中，所述处理的方法包括：
在60～70℃水浴条件下浸泡15～25min，期间每隔3～5min进行震荡；
优选地，步骤a中，所述离心的条件为11000～13000rpm离心10～15min；
优选地，步骤b中，所述上清液、苯酚和氯仿的体积相同；
优选地，步骤b中，所述去除蛋白的方法包括：
混合后的溶液在3～5℃下11000～13000rpm离心10～15min，吸取上清液加入等体积氯仿，在3～5℃下11000～13000rpm离心10～15min，重复2～3次，直至蛋白完全去除；
优选地，步骤c中，所述离心的条件为11000～13000rpm离心10～15min；
优选地，步骤c中，所述沉淀DNA的方法包括：
在-20～-25℃条件下沉淀1～2h，在3～5℃下11000～13000rpm离心10～15min；
优选地，所述沉淀DNA后还包括乙醇洗涤和干燥的步骤；
优选地，所述乙醇洗涤的方法包括：
使用浓度为50％～70％的乙醇洗涤1～2次；
优选地，所述干燥的条件为：室温下干燥10～15min；
优选地，步骤d中，使用超微量分光光度计在波长200～220nm条件下对所得溶液的DNA浓度进行检测。
8.根据权利要求2～7任一项所述的通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述建立DNA浓度监测区间的方法包括：
以平行样品的平均值作为平均DNA浓度值，使用统计学95％置信区间的计算方法，以叶丝样品平均DNA浓度值±(2～3)倍标准偏差作为DNA浓度监测区间。
9.根据权利要求2～8任一项所述的通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述判断的标准为：
叶丝样品的DNA浓度在所述DNA浓度监测区间内，所述叶丝样品的加工均匀性符合标准；
叶丝样品的DNA浓度在所述DNA浓度监测区间外，所述叶丝样品的加工均匀性不符合标准。
10.权利要求1～9任一项所述的通过DNA分析监测叶丝加工均匀性的方法在叶丝加工中的应用。
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