CN114717143B - 一种多功能假单胞菌及其在水产养殖中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于水产养殖技术领域，具体涉及一种多功能假单胞菌及其在水产养殖中的应用。本发明提供了一种多功能假单胞菌(Pseudomonas chengduensis)WD211，该菌分离于淡水水产养殖水体；菌落呈无色、半透明，表面光滑；菌体革兰氏染色呈阴性，杆状；可以耐受四环素、头孢氨苄、克林霉素等多种抗生素；在四环素等抗生素胁迫下以单一菌株便可对水产养殖污水中氨氮、总磷、COD具有良好的去除效果，促进养殖污水达标排放。且在长期净化污水过程中能够适应低碳低氮的水质条件，无需额外添加乙酸钠等营养物质，节约了污水处理成本。

Description

一种多功能假单胞菌及其在水产养殖中的应用

技术领域

本发明属于水产养殖技术领域，具体涉及一种多功能假单胞菌及其在水产养殖中的应用。

背景技术

近年来，水产养殖污水的达标排放受到了高度重视。与市政污水相比，水产养殖污水具有低碳低氮、含多种抗生素的特点，给本来处理成本就低廉的污水生化处理工艺带来了不少挑战。

在污水处理工艺中，维持功能微生物的生长、繁殖需要足够的碳源、氮源等营养物质，如果将处理市政污水的活性污泥类微生物用于净化具有低碳低氮特点的水产养殖污水，在长期运行过程中需要额外添加大量乙酸钠等营养物质，会大大增加污水处理的成本。因此，针对水产养殖污水的处理处置需要采用能够长期适应低碳低氮水质条件的功能微生物，而从水产养殖水体筛选土著功能微生物有望满足了这一要求，可在长期净化水产养殖污水过程中无需添加碳源营养物。此外，采用土著功能微生物无需担心生物入侵安全风险，可起到因地制宜的效果。

在水产养殖过程中，为了防治养殖动物病害，养殖户会添加多种抗生素，例如具有广谱抑菌作用的四环素、头孢氨苄、诺氟沙星等。但这些抗生素会抑制功能微生物发挥硝化反硝化、嗜磷、降解有机物等净化水质的作用，甚至会抑制功能微生物的生长、繁殖及代谢过程。所以急需筛选能够耐受多种抗生素的土著功能微生物，这些土著功能微生物已经适应了水产养殖水体中存在多种抗生素的情况，且在抗生素胁迫、低碳低氮条件下能够正常发挥脱氮除磷、降解有机污染物的效果。

当前，多是采用复合菌群来处理水产养殖污水，这需要具有不同功能的菌株发挥协同互作作用，但如果其中某种菌株适应不了抗生素、低碳低氮的胁迫，便无法长期维持净化水质的效能，导致整体净化效能退化。因此，若某单一土著菌株同时具有耐受抗生素、脱氮除磷、降解有机污染物的效能，则能保证其具有稳定发挥净化水产养殖污水的优势。基于上述原因，特此提出本发明。

发明内容

为了克服上述现有技术的不足，本发明的首要目的是提供一种多功能假单胞菌。

本发明的第二个目的是提供上述多功能假单胞菌在水产养殖中的应用。

本发明的上述第一个目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明提供了一种多功能假单胞菌，所述假单胞菌为成都假单胞菌(Pseudomonaschengduensis)WD211，所述假单胞菌具有如SEQ ID NO.1所示的16s rRNA序列，所述假单胞菌于2021年11月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23926。

本发明的多功能假单胞菌筛选自广东省佛山市淡水水产养殖水体，是一种土著微生物，菌落呈无色、半透明，表面光滑；菌体革兰氏染色呈阴性，杆状；该菌株在常见的牛肉膏蛋白胨培养基和LB培养基上生长迅速。该菌具有SEQ ID NO.1所示的16s rRNA序列，与Pseudomonas chengduensis的相似度达99.93％，故命名为成都假单胞菌(Pseudomonaschengduensis)WD211。

所述成都假单胞菌(Pseudomonas chengduensis)WD211已于2021年11月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.23926。

本发明的上述第二个目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明还提供了上述多功能假单胞菌在水产养殖中的应用。

本发明还提供了上述多功能假单胞菌在净化含抗生素水产养殖污水中的应用。

所述成都假单胞菌(Pseudomonas chengduensis)WD211筛选于水产养殖自然水体，是土著微生物，对水产养殖污水中氨氮、总磷、COD具有良好的去除效果。而且该菌具有耐受多种抗生素的特点，且在抗生素胁迫、低碳低氮条件下对水产养殖污水中的氨氮、总磷、COD均具有良好的去除效果。有望用于净化含有抗生素的水产养殖污水，促进污水达标排放。

优选地，所述抗生素包括四环素、青霉素、苯唑西林、氨苄西林、羧苄西林、头孢氨苄、头孢唑啉、头孢拉定、头孢呋辛、头孢他啶、头孢曲松、头孢哌酮、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、多西环素、米诺环素、红霉素、麦迪霉素、环丙沙星、万古霉素、复方新诺明、呋喃唑酮、氯霉素、克林霉素。

优选地，污水的水质包括高碳低氮水质、低碳低氮水质、含青霉素和/或链霉素的水质。

本发明还提供了一种水产养殖污水净化方法，具体为：对上述的多功能假单胞菌进行活化后转移至液体培养基中培养得到纯菌液，纯菌液再转入发酵培养基中培养得到发酵培养液，然后从发酵液中收集菌体，菌体经复溶后投入到待净化水产养殖污水中。

优选地，复溶后的菌体与水产养殖污水的体积比为5：10000-1：100。

优选地，发酵培养液也可以与负载固体制成假单胞菌固载菌剂后投入到待净化水产养殖污水中。

进一步地，所述负载固体包括米糠、面粉、海藻酸钠、硅藻土、沸石、陶粒、生物炭中的一种或多种。

进一步地，还可以结合SBR、BAF工艺将成都假单胞菌固载菌剂运用于净化水产养殖污水。

优选地，所述固体培养基包括胰蛋白胨10g/kg，酵母提取粉5g/kg，氯化钠5-10g/kg，葡萄糖1g/kg，琼脂粉15-20g/kg，pH＝7.2-7.6。

优选地，所述液体培养基为LB液体培养基。

进一步地，所述LB液体培养基包括胰蛋白胨10g/L，酵母提取粉5g/L，氯化钠5-10g/L，葡萄糖1g/L，pH＝7.2-7.6。

优选地，所述发酵培养基包括蛋白胨1.5-5g/L，红糖3-10g/L，pH＝7.2-7.6。

本发明还提供了一种用于净化水产养殖污水的菌剂，所述菌剂包括上述的多功能假单胞菌。

优选地，所述菌剂还包括制备菌剂时可接受的辅料。

进一步地，所述辅料为负载固体，所述负载固体包括米糠、面粉、海藻酸钠、硅藻土、沸石、陶粒、生物炭中的一种或多种。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明提供了一种多功能假单胞菌(Pseudomonas chengduensis)WD211，该菌分离于淡水水产养殖水体；菌落呈无色、半透明，表面光滑；菌体革兰氏染色呈阴性，杆状；可以耐受四环素、头孢氨苄、克林霉素等多种抗生素；在四环素等抗生素胁迫下以单一菌株便可对水产养殖污水中氨氮、总磷、COD具有良好的去除效果，促进养殖污水达标排放。且在长期净化污水过程中能够适应低碳低氮的水质条件，无需额外添加乙酸钠等营养物质，节约了污水处理成本。

附图说明

图1为成都假单胞菌WD211的平板培养图；

图2为成都假单胞菌WD211的革兰氏染色光学显微镜图；

图3为高碳低氮、低碳低氮水质条件下成都假单胞菌WD211与市面复合菌的生物量对比情况；

图4为高碳低氮、低碳低氮条件下成都假单胞菌WD211与市面复合菌的生长曲线；

图5为不同梯度青霉素、链霉素胁迫下成都假单胞菌WD211的生物量变化情况；

图6为不同梯度青霉素、链霉素胁迫下成都假单胞菌WD211的生长曲线。

具体实施方式

下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为可通过常规的商业途径购买得到。

实施例1多功能假单胞菌WD211的筛选、鉴定

本实验所用的菌株成都假单胞菌(Pseudomonas chengduensis)WD211分离自淡水水产养殖水体。具体的分离、纯化和鉴定过程如下：

(1)配制筛菌培养液：0.1g/L KNO₃，25mg/L NaNO₂，0.1g/L(NH₄)₂SO₄，0.5g/L柠檬酸钠，0.1g/L K₂HPO₄，0.1g/LKH₂PO₄，20mg/LMgSO₄·7H₂O，pH调至7.2-7.6。

BTB培养基：在筛菌培养液的基础上添加1mLBTB(1％溶于酒精)和2.5(w/v)的琼脂。

(2)富集培养：将若干玻璃珠加入装有100mL筛菌培养液的250mL锥形瓶中，经0.1MPa、121℃高温灭菌后，加入1mL水产养殖污水(取自广东省佛山市顺德区乐从镇上华村加州鲈养殖鱼塘养殖水体)。然后将锥形瓶置于30℃、150rpm的恒温摇床中培养5天，期间每隔24小时向富集培养液中分别加入1mL的0.5％(NH₄)₂SO₄溶液和0.5％NaNO₂溶液。

(3)菌株初筛：富集培养完成后，在无菌操作台中取1mL步骤(2)的培养液加入到9mL灭菌纯水中，充分混合制成10¹稀释液。并通过这种方式继续稀释菌液直到合适倍数，然后分别取1mL浓度为10⁵、10⁶、10⁷的菌悬液均匀涂布于BTB培养基上，将平板置于30℃的恒温培养箱中培养1-2天，待长出明显菌落时取出观察。

(4)菌株分离：选取周围明显变蓝或者带有蓝色晕圈的菌落，使用接种环挑取后在LB固体培养基上划线，将平板置于30℃的恒温培养箱中培养1-2天，然后在新的平板上重新划线，重复上述操作至少3次以得到纯菌。将菌株保存于LB斜面培养基上，并置于4℃的冰箱中冷藏。

(5)菌株鉴定：提取高纯度、高质量菌株，通过琼脂糖凝胶电泳检测DNA的提取质量，随后挑取符合OD₂₆₀/OD₂₈₀比值为1.8-2.0的DNA进行16S双向测序比对，将得到的合格序列(16S序列如SEQ ID NO.1所示)在EZBioCloud数据库中比对构建发育树，经鉴定，所筛选菌株与Pseudomonas chengduensis的相似度达99.93％，故命名为成都假单胞菌(Pseudomonas chengduensis)WD211。

对Pseudomonas chengduensis WD211进行菌落形态观察和兰氏染色发现。WD211菌株的菌落呈无色、半透明，表面光滑(如图1所示)，且革兰氏染色呈阴性，杆状(如图2所示)。该菌株在常见的牛肉膏蛋白胨培养基和LB培养基上生长迅速。

最后于2021年11月17日将得到的成都假单胞菌WD211(Pseudomonaschengduensis WD211)保藏到中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCCNo.23926。

Pseudomonas chengduensis WD211的16S序列(SEQ ID NO.1)：

tgagaggagcttgctccttgatttagcggcggacgggtgagtaatgcctaggaatctgcctggtagtgggggataacgttccgaaaggaacgctaataccgcatacgtcctacgggagaaagcaggggaccttcgggccttgcgctatcagatgagcctaggtcggattagctagttggtgaggtaatggctcaccaaggcgacgatccgtaactggtctgagaggatgatcagtcacactggaactgagacacggtccagactcctacgggaggcagcagtggggaatattggacaatgggcgaaagcctgatccagccatgccgcgtgtgtgaagaaggtcttcggattgtaaagcactttaagttgggaggaagggcattaacctaatacgttagtgttttgacgttaccgacagaataagcaccggctaacttcgtgccagcagccgcggtaatacgaagggtgcaagcgttaatcggaattactgggcgtaaagcgcgcgtaggtggttcgttaagttggatgtgaaagccccgggctcaacctgggaactgcatccaaaactggcgagctagagtacggtagagggtggtggaatttcctgtgtagcggtgaaatgcgtagatataggaaggaacaccagtggcgaaggcgaccacctggactgatactgacactgaggtgcgaaagcgtggggagcaaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgtcaactagccgttgggttccttgagaacttagtggcgcagctaacgcattaagttgaccgcctggggagtacggccgcaaggttaaaactcaaatgaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaaccttacctggccttgacatgctgagaactttccagagatggattggtgccttcgggaactcagacacaggtgctgcatggctgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgtaacgagcgcaacccttgtccttagttaccagcacgtaatggtgggcactctaaggagactgccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaagtcatcatggcccttacggccagggctacacacgtgctacaatggtcggtacaaagggttgccaagccgcgaggtggagctaatcccataaaaccgatcgtagtccggatcgcagtctgcaactcgactgcgtgaagtcggaatcgctagtaatcgtgaatcagaatgtcacggtgaatacgttcccgggccttgtacacaccgcccgtcacaccatgggagtgggttgctccagaagtagctagtctaaccttcggggggacg。

实施例2抗菌药物敏感性试验

按照WS/T 639-2018纸片药敏法对Pseudomonas chengduensis WD211进行抗菌药物敏感性试验。结果发现(见表1)，Pseudomonas chengduensis WD211可以耐受四环素、青霉素、苯唑西林、氨苄西林、羧苄西林、头孢氨苄、头孢唑啉、头孢拉定、头孢呋辛、头孢他啶、头孢曲松、头孢哌酮、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、多西环素、米诺环素、红霉素、麦迪霉素、环丙沙星、万古霉素、复方新诺明、呋喃唑酮、氯霉素、克林霉素等抗生素。对诺氟沙星轻微敏感，对哌拉西林、丁胺卡那、氧氟沙星较为敏感。

表1 Pseudomonas chengduensis WD211耐受抗生素的测试结果

实施例3Pseudomonas chengduensis WD211在不同胁迫条件下的生长情况

(1)高碳低氮水质条件下Pseudomonas chengduensis WD211的生长情况

配制高碳低氮培养液，使水质COD含量达350mg/L，BOD₅含量达150mg/L，总氮含量为40mg/L，氨氮含量为19mg/L。然后量取200mL该培养液于250mL锥形瓶中，经0.1MPa、121℃高温灭菌后，在无菌操作台中接种多功能假单胞菌WD211和市面渔业复合硝化菌(订购于潍坊意品宠物用品有限公司，货号为YZL-013)。随后将锥形瓶置于30℃、150rpm的恒温摇床中培养4天，每天取样检测菌液OD₆₀₀，考察其生物量。

试验证明(见图3、4)，在高碳低氮水质条件下，多功能假单胞菌WD211和市面渔业复合硝化菌均可以适应水质快速繁殖生长，其中多功能假单胞菌WD211一天时间便可以达到最大生物量，有利于快速生长生物膜处理污水。

(2)低碳低氮水质条件下Pseudomonas chengduensis WD211的生长情况

配制低碳低氮培养液，使水质COD含量达240mg/L，BOD₅含量达90mg/L，总氮含量为30mg/L，氨氮含量为18mg/L。然后量取200mL该培养液于250mL锥形瓶中，经0.1MPa、121℃高温灭菌后，在无菌操作台中接种多功能假单胞菌WD211和市面渔业复合硝化菌(订购于潍坊意品宠物用品有限公司，货号为YZL-013)。随后将锥形瓶置于30℃、150rpm的恒温摇床中培养4天，每天取样检测菌液OD₆₀₀，考察其生物量。

试验证明(见图3、4)，在低碳低氮水质条件下，假单胞菌WD211也可以一天时间达到最大生物量，而市面复合硝化菌无法适应低碳低氮水质，生物量接近零。

(3)青霉素、链霉素胁迫下Pseudomonas chengduensis WD211的生长情况

配制含氮培养液:0.1g/L KNO₃，25mg/L NaNO₂，0.1g/L(NH₄)₂SO₄，0.5g/L柠檬酸钠，0.1g/LK₂HPO₄，0.1g/L KH₂PO₄，20mg/L MgSO₄·7H₂O，pH调至7.2-7.6。然后往上述培养液中加入抗生素使青霉素和链霉素(订购于广州市左克生物科技发展有限公司，品牌Gibco，货号为15140122)的浓度分别达到0、1、10、100、1000mg/L五个梯度。之后分别量取200mL该培养液于250mL锥形瓶中，经0.1MPa、121℃高温灭菌后，在无菌操作台中接种多功能假单胞菌WD211。随后将锥形瓶置于30℃、150rpm的恒温摇床中培养8天，每天取样检测菌液OD₆₀₀，考察其生物量。

该试验证明(图5、图6)，在青霉素和链霉素胁迫下，多功能假单胞菌WD211的生长速度受到抑制，脱氮除磷、降解有机物的效能也有所减少；但启动耐受机制后，在1-10mg/L青霉素、链霉素条件下，第二天便能达到最大生物量，100-1000mg/L青霉素、链霉素条件下，第七天也能达到最大生物量。

实施例4Pseudomonas chengduensis WD211在处理水产养殖污水中的应用

本实施例所涉及的水产养殖污水来源于佛山市顺德区乐从镇上华村加州鲈养殖鱼塘，其pH为7.66，COD含量为39.83mg/L，BOD₅含量为11.81mg/L，总磷含量为0.72mg/L，总氮含量为6.58mg/L，氨氮含量为0.90mg/L，硝态氮含量为2.71mg/L，亚硝态氮含量为0.013mg/L，即污水水质超过SC/T 9101-2007淡水养殖尾水排放标准值。

采用Pseudomonas chengduensis WD211处理水产养殖污水的方法包括以下步骤：

(1)在固体培养基(胰蛋白胨10g/kg，酵母提取粉5g/kg，氯化钠5-10g/kg，葡萄糖1g/kg，琼脂粉15-20g/kg，pH＝7.2-7.6)中活化保藏的成都假单胞菌(Pseudomonaschengduensis)WD211，然后接种于LB液体培养基(胰蛋白胨10g/L，酵母提取粉5g/L，氯化钠5-10g/L，葡萄糖1g/L，pH＝7.2-7.6)中，于30-35℃、160-200rpm条件下摇床培养8-24h，得纯菌液；

(2)将上述纯菌液转入发酵培养基(蛋白胨1.5-5g/L，红糖3-10g/L，pH＝7.2-7.6)中，于30-35℃、160-200rpm条件下摇床培养48-72h，得发酵培养液；

(3)将上述发酵培养液于4℃下以9000-12000rpm的转速离心30-45min，去除上层液体，保留菌体。

(4)在上述菌体中加入等体积生理盐水，以5：10000-1：100的体积比投入水产养殖污水中，曝气处理使溶解氧浓度大于4mg/L，最后分别于24、48、72小时后取样分析水体的净化效果。

结果发现，氨氮去除率可达100％，总氮去除率达50％以上，硝态氮去除率达60％以上，总磷去除率达83％以上，COD降解率达78％以上。即该养殖污水经净化后可达到SC/T9101-2007淡水养殖尾水排放的二级标准。

实施例5结合SBR工艺运用假单胞菌固载菌剂处理水产养殖污水

本实施例所涉及的水产养殖污水来源于佛山市顺德区龙江镇万安村生鱼养殖鱼塘，其pH为7.6，COD含量为39.0mg/L，BOD₅含量为23.5mg/L，总磷含量为0.6mg/L，总氮含量为8.5mg/L，氨氮含量为1.19mg/L，硝态氮含量为4.9mg/L，亚硝态氮含量为0.62mg/L，即污水水质超过SC/T 9101-2007淡水养殖尾水排放标准值。另外，水产养殖污水中盐酸氯四环素、甲氧苄氨嘧啶含量分别为9.0mg/L、1.5mg/L。

结合SBR工艺运用假单胞菌固载菌剂处理水产养殖污水的方法为：

将Pseudomonas chengduensis WD211发酵培养液与沸石按照1：3的质量比混合搅拌均匀，并置于50℃培养箱中风干3小时，取出后研磨成粉末，制备得假单胞菌固载菌剂。

将水产养殖污水温度控制为15-35℃，pH值控制为6-9，然后投入上述假单胞菌固载菌剂(1g/L)，并将水力停留时间控制为8-16小时，曝气过程中控制溶解氧浓度大于4mg/L，沉淀静置后取上清水分析水体净化效果。

结果发现，运用假单胞菌固载菌剂结合SBR工艺处理水产养殖污水，氨氮去除率达90％以上，总氮去除率达46％以上，硝态氮去除率可达100％，总磷去除率达80％以上，COD降解率达70％以上。即该养殖污水经净化后可达到SC/T 9101-2007淡水养殖尾水排放的二级标准。

综上所述，本发明提供的Pseudomonas chengduensis WD211是一种多功能假单胞菌，该假单胞菌具有耐受多种抗生素的特点，且在抗生素胁迫、低碳低氮条件下对水产养殖污水中的氨氮、总磷、COD均具有良好的去除效果，有望用于净化含有四环素等抗生素的水产养殖污水，促进污水达标排放。

以上对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。

序列表

<110> 广东省农业科学院农业资源与环境研究所

<120> 一种多功能假单胞菌及其在水产养殖中的应用

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1386

<212> RNA

<213> 16S序列(Pseudomonas chengduensis)

<400> 1

tgagaggagc ttgctccttg atttagcggc ggacgggtga gtaatgccta ggaatctgcc 60

tggtagtggg ggataacgtt ccgaaaggaa cgctaatacc gcatacgtcc tacgggagaa 120

agcaggggac cttcgggcct tgcgctatca gatgagccta ggtcggatta gctagttggt 180

gaggtaatgg ctcaccaagg cgacgatccg taactggtct gagaggatga tcagtcacac 240

tggaactgag acacggtcca gactcctacg ggaggcagca gtggggaata ttggacaatg 300

ggcgaaagcc tgatccagcc atgccgcgtg tgtgaagaag gtcttcggat tgtaaagcac 360

tttaagttgg gaggaagggc attaacctaa tacgttagtg ttttgacgtt accgacagaa 420

taagcaccgg ctaacttcgt gccagcagcc gcggtaatac gaagggtgca agcgttaatc 480

ggaattactg ggcgtaaagc gcgcgtaggt ggttcgttaa gttggatgtg aaagccccgg 540

gctcaacctg ggaactgcat ccaaaactgg cgagctagag tacggtagag ggtggtggaa 600

tttcctgtgt agcggtgaaa tgcgtagata taggaaggaa caccagtggc gaaggcgacc 660

acctggactg atactgacac tgaggtgcga aagcgtgggg agcaaacagg attagatacc 720

ctggtagtcc acgccgtaaa cgatgtcaac tagccgttgg gttccttgag aacttagtgg 780

cgcagctaac gcattaagtt gaccgcctgg ggagtacggc cgcaaggtta aaactcaaat 840

gaattgacgg gggcccgcac aagcggtgga gcatgtggtt taattcgaag caacgcgaag 900

aaccttacct ggccttgaca tgctgagaac tttccagaga tggattggtg ccttcgggaa 960

ctcagacaca ggtgctgcat ggctgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc 1020

ccgtaacgag cgcaaccctt gtccttagtt accagcacgt aatggtgggc actctaagga 1080

gactgccggt gacaaaccgg aggaaggtgg ggatgacgtc aagtcatcat ggcccttacg 1140

gccagggcta cacacgtgct acaatggtcg gtacaaaggg ttgccaagcc gcgaggtgga 1200

gctaatccca taaaaccgat cgtagtccgg atcgcagtct gcaactcgac tgcgtgaagt 1260

cggaatcgct agtaatcgtg aatcagaatg tcacggtgaa tacgttcccg ggccttgtac 1320

acaccgcccg tcacaccatg ggagtgggtt gctccagaag tagctagtct aaccttcggg 1380

gggacg 1386

Claims (8)

1.一种多功能假单胞菌，其特征在于，所述假单胞菌为成都假单胞菌(Pseudomonaschengduensis)WD211，所述假单胞菌具有如SEQ ID NO.1所示的16s rRNA序列，所述假单胞菌于2021年11月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23926。

2.权利要求1所述的多功能假单胞菌在净化含抗生素水产养殖污水中的应用，其特征在于，所述抗生素包括四环素、青霉素、苯唑西林、氨苄西林、羧苄西林、头孢氨苄、头孢唑啉、头孢拉定、头孢呋辛、头孢他啶、头孢曲松、头孢哌酮、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、多西环素、米诺环素、红霉素、麦迪霉素、环丙沙星、万古霉素、复方新诺明、呋喃唑酮、氯霉素、克林霉素。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，污水的水质包括高碳低氮水质、低碳低氮水质、含青霉素和/或链霉素的水质。

4.一种水产养殖污水净化方法，其特征在于，对权利要求1所述的多功能假单胞菌进行活化后转移至液体培养基中培养得到纯菌液，纯菌液再转入发酵培养基中培养得到发酵培养液，然后从发酵液中收集菌体，菌体经复溶后投入到待净化水产养殖污水中。

5.根据权利要求4所述的一种水产养殖污水净化方法，其特征在于，复溶后的菌体与水产养殖污水的体积比为5：10000-1：100。

6.根据权利要求4所述的一种水产养殖污水净化方法，其特征在于，发酵培养液能够与负载固体制成假单胞菌固载菌剂后投入到待净化水产养殖污水中。

7.根据权利要求4所述的一种水产养殖污水净化方法，其特征在于，所述负载固体包括米糠、面粉、海藻酸钠、硅藻土、沸石、陶粒、生物炭中的一种或多种。

8.一种用于净化水产养殖污水的菌剂，其特征在于，所述菌剂包括权利要求1所述的多功能假单胞菌。