CN114681486A - 一种干细胞因子组合物及其在毛发再生中的用途 - Google Patents

一种干细胞因子组合物及其在毛发再生中的用途 Download PDF

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Abstract

本公开涉及一种干细胞因子组合物,该组合物含有脐带间充质干细胞因子和异甘草素,所述脐带间充质干细胞因子的分子量≥3Kd,该组合物在促进毛发再生方面具有良好的效果。

Description

一种干细胞因子组合物及其在毛发再生中的用途
技术领域
本申请涉及生物医药技术领域,具体地,涉及一种干细胞因子组合物及其在毛发再生中的用途。
背景技术
脱发是一种常见的疾病,由很多因素导致,包括遗传、破坏毛囊的炎症性疾病、毛囊周期异常、外伤和精神压力等等。目前针对脱发有使用口服或者外用药物,或者进行植发等几种方式。然而,这些治疗方式具有局限性,药物治疗只能暂时的缓解症状。比如口服非那雄胺有性副作用并且会致畸,停止用药后,头发会加速脱落。植发是一种可靠的手术治疗方法,但是移植存活率低而费用高,并且有一定的风险。因此,急需一些新的治疗手段以更好的治疗脱发。
发明内容
本公开的目的在于提供一种方便、安全、效果显著的脱发治疗方法。
为了实现上述目的,本公开的第一个方面提供了一种干细胞因子组合物,该组合物含有脐带间充质干细胞因子和异甘草素,所述脐带间充质干细胞因子的分子量≥3Kd。
可选地,所述异甘草素的浓度为10-500μg/mL;所述脐带间充质干细胞因子的浓度为0.5-20μg/mL。
可选地,所述异甘草素的浓度为50-200μg/mL;所述脐带间充质干细胞因子的浓度为5-10μg/mL。
可选地,所述组合物还含有稀释剂;所述稀释剂为生理盐水。
本公开的第二个方面提供了一种制备上述的组合物的方法,该方法包括:将所述脐带间充质干细胞因子与所述异甘草素混合。
可选地,该方法包括:将所述异甘草素与所述稀释剂混合,得到所述异甘草素溶液;将所述脐带间充质干细胞因子与所述异甘草素溶液混合。
可选地,所述异甘草素溶液中异甘草素的浓度为15-1000μg/mL;所述脐带间充质干细胞因子与所述异甘草素溶液的体积比为1:0.5-2。
可选地,所述脐带间充质干细胞因子的制备方法包括:
S1、从脐带中分离提取脐带间充质干细胞,在无血清培养液中培养至P3-P8代,待细胞长至80%时,收集细胞上清液;
S2、将所述细胞上清液离心,去除下层沉淀物,得到第一细胞因子;
S3、将所述第一细胞因子进行浓缩处理。
可选地,步骤S2中,所述离心的条件包括:温度为0-10℃,转速为1000-3000rpm;步骤S3中,所述浓缩处理为低温超速离心,所述低温超速离心的条件包括:温度为0-10℃,转速为1000-3000rpm,所用超滤膜为3-10Kd。
本公开的第三个方面提供了上述的组合物在毛发再生中的应用。
通过上述技术方案,本公开的组合物制备过程简单,能够有效的促进毛发再生,且治疗方法安全简便。
本公开的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
附图说明
附图是用来提供对本公开的进一步理解,并且构成说明书的一部分,与下面的具体实施方式一起用于解释本公开,但并不构成对本公开的限制。在附图中:
图1是各组小鼠第0天、第7天、第14天和第19天的毛发生长情况;
图2是各组小鼠第19天的背部皮肤组织形态学观察。
具体实施方式
以下对本公开的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是,此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本公开,并不用于限制本公开。
本公开的第一个方面提供了一种干细胞因子组合物,该组合物含有脐带间充质干细胞因子和异甘草素,所述脐带间充质干细胞因子的分子量≥3Kd。
作为本公开的一种优选的实施方式,所述异甘草素的浓度为10-500μg/mL;所述脐带间充质干细胞因子的浓度为0.5-20μg/mL。
进一步优选地,所述异甘草素的浓度可以为50-200μg/mL;所述脐带间充质干细胞因子的浓度可以为5-10μg/mL。组合物中的异甘草素的浓度和脐带间充质干细胞因子的浓度在上述范围内时,可以有效地促进毛囊再生。
根据本公开的第一个方面,所述组合物还可以含有稀释剂;稀释剂为本领域的技术人员所熟知的,例如可以为生理盐水。
本公开的第二个方面提供了一种制备上述的组合物的方法,该方法可以包括:将所述脐带间充质干细胞因子与所述异甘草素混合。
根据本公开的第二个方面,该方法可以包括:将所述异甘草素与所述稀释剂混合,得到所述异甘草素溶液;将所述脐带间充质干细胞因子与所述异甘草素溶液混合。
根据本公开的第二个方面,所述异甘草素溶液中异甘草素的浓度可以为15-1000μg/mL;所述脐带间充质干细胞因子与所述异甘草素溶液的体积比可以为1:0.5-2;优选为1:1。
根据本公开的第二个方面,所述脐带间充质干细胞因子的制备方法可以包括:
S1、从脐带中分离提取脐带间充质干细胞,在无血清培养液中(不含抗生素)培养至P3-P8代,待细胞长至80%时,收集细胞上清液;其中,所述无血清培养液中不含有抗生素;
S2、将所述细胞上清液离心,去除下层沉淀物,得到第一细胞因子;
S3、将所述第一细胞因子进行浓缩处理。
根据本公开的第二个方面,步骤S2中,所述离心的条件可以包括:温度为0-10℃,转速为1000-3000rpm;步骤S3中,所述浓缩处理为低温超速离心,所述低温超速离心的条件可以包括:温度为0-10℃,转速为1000-3000rpm,所用超滤膜为3-10Kd。
本公开的第三个方面提供了上述的组合物在毛发再生中的应用。
本公开的组合物在促进毛发再生方面具有良好的效果,且治疗方式方便、安全、治疗过程简单。
以下通过实施例进一步详细说明本公开。实施例中所用到的原材料均可通过商购途径获得。
实施例1
从脐带中分离提取脐带间充质干细胞,使用不含抗生素的无血清培养液培养至P3~P8代,待细胞长至80%时,收集细胞上清液,300g离心10min,去除下层沉淀物,得到第一细胞因子;采用低温超速离心的方式对第一细胞因子进行浓缩,低温超速离心的条件包括:温度为4℃,转速为2000rpm;超速离心时选用截留3Kd分子量蛋白的滤网,取3Kd分子量以上的部分作为本实施例的脐带间充质干细胞因子。
采用生理盐水配制异甘草素溶液,得到异甘草素浓度为50μg/mL的异甘草素溶液。
将本实施例的脐带间充质干细胞因子与异甘草素溶液按照体积比1:1混合,得到本实施例的干细胞因子组合物。
对比例1
从脐带中分离提取脐带间充质干细胞,使用不含抗生素的无血清培养液培养至P3~P8代,待细胞长至80%时,收集细胞上清液,300g离心10min,去除下层沉淀物,得到第一细胞因子,将第一细胞因子作为本对比例的脐带间充质干细胞因子。
采用生理盐水配制异甘草素溶液,得到异甘草素浓度为50μg/mL的异甘草素溶液。
将本对比例的脐带间充质干细胞因子与异甘草素溶液按照体积比1:1混合,得到本对比例的干细胞因子组合物。
对比例2
从脐带中分离提取脐带间充质干细胞,使用不含抗生素的无血清培养液培养至P3~P8代,待细胞长至80%时,收集细胞上清液,300g离心10min,去除下层沉淀物,得到第一细胞因子;采用低温超速离心的方式对第一细胞因子进行浓缩,低温超速离心的条件包括:温度为4℃,转速为2000rpm;超速离心时选用截留3Kd分子量蛋白的滤网,取3Kd分子量以上的部分做为本对比例的脐带间充质干细胞因子。
将本对比例的脐带间充质干细胞因子与生理盐水按照体积比1:1混合,得到本对比例的干细胞因子组合物。
测试例1
本对比例选取生长周龄一致的雄性C57BL/6小鼠作为实验小鼠,使用戊巴比妥钠麻醉C57BL/6小鼠,将脱毛膏涂抹于C57BL/6小鼠背部毛发的根部,作用30s,C57BL/6小鼠背部毛发开始脱落,用清水和干净毛巾将脱毛膏擦拭干净,小鼠的背部皮肤逐渐完全暴露出来;将实施例1和对比例1-2的干细胞因子组合物分别涂抹于脱发小鼠背部,以生理盐水处理脱发小鼠背部组作为空白对照组,每天涂抹一次,一次50μL,持续涂抹19天,每天观察小鼠背部毛发的生长情况;分别在各组干细胞因子组合物后的第0d,7d,14d和19d观察各组小鼠背部皮肤毛发生长情况,第19d取背部皮肤组织,进行毛囊结构的病理学检测分析,进一步验证新型生发剂对于毛发再生的效果,具体结果见图1和图2。
通过图1和图2可以看出,实施例1的干细胞因子组合物可以有效的促进脱发小鼠毛发生长,通过脱发部位皮肤的毛发生长情况和病理染色分析可以得出,脱发小鼠经过实施例1的干细胞因子组合物的治疗,相比较于空白对照组和对比例1-2制备的干细胞因子组合物治疗的小鼠,其毛囊数量增多、毛囊结构完整。
以上详细描述了本公开的优选实施方式,但是,本公开并不限于上述实施方式中的具体细节,在本公开的技术构思范围内,可以对本公开的技术方案进行多种简单变型,这些简单变型均属于本公开的保护范围。
另外需要说明的是,在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征,在不矛盾的情况下,可以通过任何合适的方式进行组合。为了避免不必要的重复,本公开对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外,本公开的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合,只要其不违背本公开的思想,其同样应当视为本公开所公开的内容。

Claims (10)

1.一种干细胞因子组合物,其特征在于,该组合物含有脐带间充质干细胞因子和异甘草素,所述脐带间充质干细胞因子的分子量≥3Kd。
2.根据权利要求1所述的干细胞因子组合物,其中,所述异甘草素的浓度为10-500μg/mL;所述脐带间充质干细胞因子的浓度为0.5-20μg/mL。
3.根据权利要求2所述的干细胞因子组合物,其中,所述异甘草素的浓度为50-200μg/mL;所述脐带间充质干细胞因子的浓度为5-10μg/mL。
4.根据权利要求1所述的干细胞因子组合物,其中,所述组合物还含有稀释剂;所述稀释剂为生理盐水。
5.一种制备权利要求1-4中任意一项所述的组合物的方法,其特征在于,该方法包括:将所述脐带间充质干细胞因子与所述异甘草素混合。
6.根据权利要求5所述的方法,其中,该方法包括:
将所述异甘草素与所述稀释剂混合,得到所述异甘草素溶液;将所述脐带间充质干细胞因子与所述异甘草素溶液混合。
7.根据权利要求6所述的方法,其中,
所述异甘草素溶液中异甘草素的浓度为15-1000μg/mL;
所述脐带间充质干细胞因子与所述异甘草素溶液的体积比为1:0.5-2。
8.根据权利要求6所述的方法,其中,所述脐带间充质干细胞因子的制备方法包括:
S1、从脐带中分离提取脐带间充质干细胞,在无血清培养液中培养至P3-P8代,待细胞长至80%时,收集细胞上清液;
S2、将所述细胞上清液离心,去除下层沉淀物,得到第一细胞因子;
S3、将所述第一细胞因子进行浓缩处理。
9.根据权利要求8所述的方法,其中,
步骤S2中,所述离心的条件包括:温度为0-10℃,转速为1000-3000r/min;
步骤S3中,所述浓缩处理为低温超速离心,所述低温超速离心的条件包括:温度为0-10℃,转速为1000-3000rpm,所用超滤膜为3-10Kd。
10.权利要求1-4中任意一项所述的组合物在毛发再生中的应用。
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