CN114672431B - 一种防治青枯病的芽孢杆菌复合菌剂及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种防治青枯病的芽孢杆菌复合菌剂及其应用。所述芽孢杆菌复合菌剂是由混合菌种种子液扩培制成的，其中包括采用保藏编号为CGMCC No.24342的贝莱斯芽孢杆菌LGT‑1和CGMCC No.24343的解淀粉芽孢杆菌ZJ‑1制备而成的种子液，并且两种种子液的体积比为1.0~2.0:1.0~2.0。所述芽孢杆菌复合菌剂用于烟草种植上，不仅能显著降低青枯病病情指数，提高烟草多项农艺性状，还能改善种植土壤的理化性质，促进烟株生长，因此具有广阔的应用前景。

Description

一种防治青枯病的芽孢杆菌复合菌剂及其应用

技术领域

本发明属于微生物应用技术领域，具体涉及一种防治青枯病的芽孢杆菌复合菌剂及其应用。

背景技术

烟草青枯病是由青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的细菌性病害，是典型的维管束病害，根、茎、叶都可发病。烟草青枯病是限制我国烟草生产的主要病害之一。青枯菌通过根部伤口、根尖或次生根进入烟草根部，最终定殖于木质部，继而产生大量的胞外多糖堵塞维管束组织，造成叶片萎蔫、发黄坏死，直接影响着我国烟叶的品质和产量，并最终导致烟株死亡；青枯病还经常与烟草黑胫病、根结线虫病等混合发生，严重时导致全田烟株枯死，给烟叶生产造成巨大的经济损失。

目前防治青枯病多采用化学防治、土壤添加剂防治和传统综合防治。传统综合防治法受耕作方式和品种的限制，目前甚少高抗性能的烟草品种。化学药剂防治常用广谱杀菌剂，包括百菌清、多菌灵、可杀得等，虽能延缓发病，但防控效果不甚理想，并且长期使用化学药剂会使病菌产生耐药性，污染土壤及水资源，给人畜带来危害。目前市场上尚未有针对烟草青枯病的高效低毒和无环境污染的化学药剂。

鉴于化学防治和传统综合防治存在的不足，国内外利用有益微生物防治病虫害逐渐成为研究热点。芽孢杆菌是植物病害生防微生物的重要组成部分，能产生抗逆性很强的芽孢，具有较好的定殖性，并且产生的代谢产物对多种植物病害具有拮抗性。因此，开发“复合拮抗菌剂”充分发挥抗病增殖作用并实现防控技术简化，为防治烟草青枯病提供生防资源。

发明内容

本发明的目的是提供一种防治青枯病的芽孢杆菌复合菌剂及其应用，所述芽孢杆菌复合菌剂能够有效抑制烟草青枯病菌，改良种植土壤的基本理化性状和促进植物的生长。

为实现上述目的，本发明采用技术方案为：

本发明提供了一种防治青枯病的芽孢杆菌复合菌剂，所述芽孢杆菌复合菌剂是由混合菌种种子液扩培制成的；所述混合菌种种子液包括贝莱斯芽孢杆菌种子液和解淀粉芽孢杆菌种子液。

进一步的，所述贝莱斯芽孢杆菌种子液和解淀粉芽孢杆菌种子液的体积比为1.0～2.0:1.0～2.0。

优选的，所述贝莱斯芽孢杆菌种子液和解淀粉芽孢杆菌种子液的体积比为1.0:2.0。

进一步的，所述贝莱斯芽孢杆菌种子液采用保藏编号为CGMCC No.24342的贝莱斯芽孢杆菌LGT-1培养得到，其有效活菌数大于2.0×10¹⁰cfu/mL。

进一步的，所述解淀粉芽孢杆菌种子液采用保藏编号为CGMCC No.24343的解淀粉芽孢杆菌ZJ-1培养得到，其有效活菌数大于2.0×10¹⁰cfu/mL。

进一步的，所述芽孢杆菌复合菌剂的制备包括以下步骤：

(1)将活化的贝莱斯芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌分别接种在液体培养基中培养，制备贝莱斯芽孢杆菌种子液、解淀粉芽孢杆菌种子液；

(2)将步骤(1)的贝莱斯芽孢杆菌种子液、解淀粉芽孢杆菌种子液以1:100～150的体积比接入到发酵培养基中，培养得到贝莱斯芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液；

(3)将步骤(2)中的贝莱斯芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液以1.0～2.0:1.0～2.0的体积比进行混配，得到芽孢杆菌复合菌剂。

本发明还提供了所述的芽孢杆菌复合菌剂在用于防治植物青枯病中的应用。

进一步的，所述植物包括烟草；所述芽孢杆菌复合菌剂通过显著降低烟草青枯病的发病率和病情指数，来达到防治烟草青枯病的作用。

本发明还提供了所述的芽孢杆菌复合菌剂在用于制备提高植物生长和/或促进植物种植土壤肥力的肥料中的应用。

进一步的，所述芽孢杆菌复合菌剂的使用方法为：将所述芽孢杆菌复合菌剂稀释500倍，采用浇施、蘸根、灌根的方式对植物进行施用；或者将所述芽孢杆菌复合菌剂按照1～5:1000的体积质量比添加到基础肥料中，制成生物肥料，并采用塘施、穴施、条施、环施的方式进行施用。

进一步的，所述芽孢杆菌复合菌剂能够通过明显提高植物种植土壤理化性质指标，以及提高植物的株高、叶片长宽和茎围直径，达到促进植物生长的目的。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：

1、本发明的芽孢杆菌复合菌剂含有两种有益菌类，具有无毒害、无污染、活性高等优点，能改善土壤微生物群体结构，增强作物对氮磷钾等养分的吸收及利用，对土壤改良和肥力提升有一定效果。

2、本发明的芽孢杆菌复合菌剂经烟草盆栽试验验证，其烟草青枯病的防治效果最高可达65.78％，预防及防治效果较好。

3、本发明的芽孢杆菌复合菌剂由贝莱斯芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌构建而成，芽孢类杆菌易于发酵生产，不仅可降低菌剂生产成本，也可丰富对作物青枯病有防治作用的功能菌剂品种。

附图说明

图1为单一菌剂对烟草青枯病菌的拮抗作用；其中a：LGT-1贝莱斯芽孢杆菌拮抗青枯菌的抑菌圈；b：ZJ-1解淀粉芽孢杆菌拮抗青枯菌的抑菌圈。

图2为复合菌剂对烟草青枯病菌的拮抗作用；其中a：贝莱斯芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌以1.0:2.0比例混合后协同拮抗青枯菌的抑菌圈；b：贝莱斯芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌以1.0:1.0比例混合后协同拮抗青枯菌的抑菌圈；c：贝莱斯芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌以2.0:1.0比例混合后协同拮抗青枯菌的抑菌圈。

具体实施方式

以下结合附图和具体实施例对本发明的技术方案做进一步详细的说明。

一种具有防治烟草土传病害功能的芽孢杆菌复合菌剂，由一株贝莱斯芽孢杆菌和一株解淀粉芽孢杆菌组成，其中贝莱斯芽孢杆菌的编号为LGT-1，解淀粉芽孢杆菌的编号为ZJ-1。

所述贝莱斯芽孢杆菌LGT-1的保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2022年01月19日；贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis的保藏编号为：CGMCCNo.24342。

所述解淀粉芽孢杆菌ZJ-1的保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏日期：2022年01月19日；解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens的保藏编号为：CGMCCNo.24343。

所述芽孢杆菌复合菌剂的制备步骤如下：

步骤一、在无菌条件下，将保存在-4℃环境下的芽孢杆菌菌株LGT-1和ZJ-1分别接种至LB平板培养基上，30℃下培养48h。之后分别挑取各菌单菌落接种至LB液体培养基中，30℃，220r/min下振荡培养24h，即得贝莱斯芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌菌种种子液。

步骤二、按照菌种种子液、培养液体积比为1:120的比例将步骤一所得的菌种种子液接入到发酵培养基中，在温度为37℃，转速为120rpm/min条件下分别培养24h，得贝莱斯芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌发酵液，两株菌株均为芽孢杆菌，活性相似，所得发酵液的有效活菌数均大于2.0×10¹⁰cfu/mL；

步骤三、将步骤二中所得的两种发酵液按照LGT-1：ZJ-1＝1.0～2.0:1.0～2.0的体积比进行混配，得到芽孢杆菌复合菌剂。

本发明使用的培养基如下：

LB液体培养基(1000ml)：蛋白胨10.0g，氯化钠5.0g，酵母膏10.0g，蒸馏水1000ml，pH 7.2。在0.15MPa，121℃条件下灭菌30min，备用。

LB固体培养基(1000ml)：蛋白胨10.0g，氯化钠5.0g，酵母膏10.0g，琼脂粉18g，蒸馏水1000ml，pH 7.2。在0.15MPa，121℃条件下灭菌30min，备用。

发酵培养基的组成成分及其重量百分比为：黄豆粉1.0％、蔗糖0.5％、蛋白胨0.2％、玉米粉0.6％、碳酸钙0.3、鱼粉0.3％、硫酸铵0.01％、硫酸镁0.05％、磷酸二氢钾0.01％、磷酸氢二钾0.05％、硫酸锰0.01％、氢氧化钠0.04％、氯化钠0.02％、消泡剂1.5％。发酵培养基用盐酸、氢氧化钠调节pH至6.8～7.5。

所述的芽孢杆菌复合菌剂可作为微生物菌剂直接稀释使用，也可添加到肥料中制成具有防治土传病害功能的肥料产品进行使用，具体使用方法如下：

1.将复合菌剂稀释500倍，采用浇施、蘸根、灌根的方式进行施用；

2.将复合菌剂按照1～5:1000的重量比添加到有机类肥料中，制成生物有机类肥料，采用塘施、穴施、条施、环施等方式进行施用。

实施例1

一种具有防治烟草土传病害功能的芽孢杆菌复合菌剂，制备步骤如下：

步骤一、在无菌条件下，将保存在-4℃环境下的芽孢杆菌菌株LGT-1和ZJ-1分别接种至LB平板培养基上，30℃下培养48h。之后分别挑取各菌单菌落接种至LB液体培养基中，30℃，220r/min下振荡培养24h，即得贝莱斯芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌菌种种子液。

步骤二、按照菌种种子液、培养液体积比为1:120的比例将步骤一所得的菌种种子液接入到发酵培养基中，在温度为37℃，转速为120rpm/min条件下分别培养24h，得贝莱斯芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌发酵液，两株菌株均为芽孢杆菌，活性相似，所得发酵液的有效活菌数均大于2.0×10¹⁰cfu/mL；

步骤三、将步骤二中所得的两种发酵液按照贝莱斯芽孢杆菌：解淀粉芽孢杆菌＝1.0:2.0的体积比进行混配，得到芽孢杆菌复合菌剂。

实施例2

一种具有防治烟草土传病害功能的芽孢杆菌复合菌剂，制备步骤如下：

步骤一、在无菌条件下，将保存在-4℃环境下的芽孢杆菌菌株LGT-1和ZJ-1分别接种至LB平板培养基上，30℃下培养48h。之后分别挑取各菌单菌落接种至LB液体培养基中，30℃，220r/min下振荡培养24h，即得贝莱斯芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌菌种种子液。

步骤二、按照菌种种子液、培养液体积比为1:120的比例将步骤一所得的菌种种子液接入到发酵培养基中，在温度为37℃，转速为120rpm/min条件下分别培养24h，得贝莱斯芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌发酵液，两株菌株均为芽孢杆菌，活性相似，所得发酵液的有效活菌数均大于2.0×10¹⁰cfu/mL；

步骤三、将步骤二中所得的两种发酵液按照贝莱斯芽孢杆菌：解淀粉芽孢杆菌＝2.0:1.0的体积比进行混配，得到芽孢杆菌复合菌剂。

实施例3

一种具有防治烟草土传病害功能的芽孢杆菌复合菌剂，制备步骤如下：

步骤一、在无菌条件下，将保存在-4℃环境下的芽孢杆菌菌株LGT-1和ZJ-1分别接种至LB平板培养基上，30℃下培养48h。之后分别挑取各菌单菌落接种至LB液体培养基中，30℃，220r/min下振荡培养24h，即得贝莱斯芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌菌种种子液。

步骤二、按照菌种种子液、培养液体积比为1:120的比例将步骤一所得的菌种种子液接入到发酵培养基中，在温度为37℃，转速为120rpm/min条件下分别培养24h，得贝莱斯芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌发酵液，两株菌株均为芽孢杆菌，活性相似，所得发酵液的有效活菌数均大于2.0×10¹⁰cfu/mL；

步骤三、将步骤二中所得的两种发酵液按照贝莱斯芽孢杆菌：解淀粉芽孢杆菌＝1.0:1.0的体积比进行混配，得到芽孢杆菌复合菌剂。

对比例1

一种贝莱斯芽孢杆菌菌剂，制备步骤如下：

步骤一、在无菌条件下，将保存在-80℃环境下的贝莱斯芽孢杆菌LGT-1接种至LB平板培养基上，30℃下培养48h。之后挑取单菌落接种至LB液体培养基中，30℃，220r/min下振荡培养24h，即得贝莱斯芽孢杆菌菌种种子液。

步骤二、按照菌种种子液、培养液体积比为1:120的比例将步骤一所得的种子液接入到发酵培养基中，在温度为37℃，转速为120rpm/min条件下分别培养24h，得贝莱斯芽孢杆菌发酵液，所得发酵液的有效活菌数大于2.0×10¹⁰cfu/mL，即为贝莱斯芽孢杆菌菌剂

对比例2

一种解淀粉芽孢杆菌菌剂，制备步骤如下：

步骤一、在无菌条件下，将保存在-80℃环境下的解淀粉芽孢杆菌ZJ-1接种至LB平板培养基上，30℃下培养48h。之后挑取单菌落接种至LB液体培养基中，30℃，220r/min下振荡培养24h，即得解淀粉芽孢杆菌菌种种子液。

步骤二、按照菌种种子液、培养液体积比为1:120的比例将步骤一所得的种子液接入到发酵培养基中，在温度为37℃，转速为120rpm/min条件下分别培养24h，得解淀粉芽孢杆菌发酵液，所得发酵液的有效活菌数大于2.0×10¹⁰cfu/mL，即为解淀粉芽孢杆菌菌剂。

实施例4

一、菌株拮抗试验

1、单一菌株拮抗试验

以烟草青枯病菌茄科劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)为受试菌。取病原菌60μL均匀涂布在平板上并静置30-40min，用灭菌的打孔器在培养基上打孔(直径5mm)，然后将对比例1制得的单菌剂分别注入圆孔中，每个孔注入50μL，以无菌培养基为对照。将平板放入30℃培养箱中培养2d，设置5个平行实验，观察和测量抑菌圈大小。

结果如图1和表1显示，按抑菌圈由大到小依次为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)>贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。

表1：2种单菌剂对烟草青枯病菌的抑菌圈测试结果

2、复合拮抗试验

取60μL烟草青枯病菌均匀涂布在平板并静置30min，将直径6mm的无菌滤纸片贴至涂菌后的平板，分别取实施例1-3制备的芽孢杆菌复合菌剂10μL滴至滤纸片上，于30℃培养24h，观察和测量抑菌圈大小。

结果见图2和表2，结果显示贝莱斯芽孢杆菌-解淀粉芽孢杆菌(LGT-1：ZJ-1＝1.0:2.0)协同拮抗效果最佳，且复合菌剂的抑菌效果显著优于单菌剂。由此说明，两种菌株的复配能够明显提高对烟草青枯病菌的拮抗作用。

表2：芽孢杆菌复合菌剂对烟草青枯病菌的抑菌圈测试结果

3、芽孢杆菌复合菌剂对烟草的防病试验

(1)功能菌接菌方法

采用国际标准的苗期浸根接种鉴定方法。在育苗盘中种植烟草幼苗，待供试幼苗生长至苗长至5～6叶时，从育苗盘中拔起，用自来水将植株根部的泥土冲洗干净，浸在配好的浓度为1×10⁸CFU/mL的菌液中20min，保证所有苗的根部浸在菌液中，同时避免叶子上沾上菌液。随后选择大小一致的烟苗移栽回原来的穴盘中，3次重复，总株数不少于90株。缓苗后约3d，使用灌根法于根际接种拮抗菌菌悬液，每株约200mL，重复接种2次，间隔为3d。对照接入等量清水。

(2)青枯病菌接菌方法

5d后，将烟草青枯菌菌悬液(OD值为1.0)使用伤根灌根法接种于烟苗根际，每株200ml。对照接等量清水。完成后将烟株置于30℃左右的温室中保温保湿，观察发病情况。每日观察记录发病株数。以接种病原菌日为起点日，接种青枯菌7d、15d、30d后统计发病率和病情指数。共观察30d。

(3)试验设计

CK1：只接烟草青枯病菌；

CK2：不接任何菌；

处理1：实施例1制备的芽孢杆菌复合菌剂+烟草青枯病菌；

处理2：实施例2制备的芽孢杆菌复合菌剂烟草青枯病菌；

处理3：实施例3制备的芽孢杆菌复合菌剂+烟草青枯病菌；

处理4：对比例1制备的单菌剂+青枯病菌；

处理5：对比例2制备的单菌剂+青枯病菌。

试验共设5个处理，每处理10个重复，每盆1株烟苗。试验期间正常水分管理。另外，为满足烟草生长需求，在装土时每盆追施尿素2.06g，过磷酸钙0.94g，硫酸钾2.72g。移栽40天后，记录烟草发病情况，计算其病情指数及青枯病抑制率，测定土壤中pH、有机质、碱解氮、全氮、速效磷、速效钾含量。

烟草青枯病病情调查分级标准分为5个等级：0级，植株健康，未出现萎蔫症状；1级，1/4叶片出现萎蔫；2级，1/2叶片出现萎蔫；3级，2/3叶片出现萎蔫；4级，整株植株枯萎、死亡。烟草青枯病分级及调查方法参照国标GB/T23222-2008。

发病率＝(发病株数/调查总株数)×100％。

病情指数＝100×∑(各级病株数×各级代表值)/(调查总株数×最高级代表值)。

相对防治效果＝[(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数]×100％。

烟草农艺性状分析：选取盆栽移栽后60天内的烟苗测量烟株的高度，茎秆直径，最大叶片的长宽。每个处理烟株为5株，重复5次。

(4)不同处理对烟草土壤理化性质的影响

由表3和表4可知，本发明实施例1-3处理过的土壤pH、有机质、碱解氮、全氮、速效磷、速效钾含量均高于原始土壤、不接菌处理(CK1)和只接烟草青枯菌处理(CK2)。与CK组比，处理1-3施用后速效磷急剧上升，且处理2的速效磷最高，为98.66g/kg，pH和有机质比较维持稳定。单菌剂处理后的各项烟草根际土壤的理化性质指标均不及复合菌剂。由此说明，本发明的芽孢杆菌复合菌剂能改良土壤基本理化性状，提高土壤肥力。

表3：原始土壤基本理化性状

表4：烟草盆栽40天后土壤基本理化性状变化

(4)不同处理下对烟草青枯病的防治效果

烟苗移栽15d后开始统计青枯菌的发病情况，经过5次重复试验，共计统计烟草150株。

由表5可知，在同时接种烟草青枯病菌的基础上，经本发明的芽孢杆菌复合菌剂处理烟草后，青枯病病情指数较低，抑制率最高可达65.78％，说明本发明的芽孢杆菌复合菌剂对烟草青枯病具有较好的防治效果。且处理1的青枯病发病率及病情指数显著低于其它处理组和对照组，其次是处理2，对比分析青枯病防治效果为：处理1>处理2>处理3>处理4>处理5>CK2。由此说明，由解淀粉芽孢杆菌和贝莱斯芽孢杆菌制备的芽孢杆菌复合菌剂对青枯病的发生具有很好的防治作用。

表5：不同处理烟草青枯病发病情况统计

(5)烟草农艺性状分析

从烟草的株高、最大叶片长宽和茎围直径综合分析了在CK1、处理1、处理2和处理3下烟草的农艺性状。

如表6可知，芽孢杆菌复合菌剂的施用整体提高了烟草的株高、叶片长宽和茎围直径，虽然对烟草的生长促进作用较小，但处理1、处理2和处理3对烟草的生长均强于CK1。处理1和处理3的株高分别为118.33±31.12cm和109.27±42.52cm，相较于CK1分别提高了15.4％和11.2％；CK的最大叶片长度为73.2±15.71cm，处理1和处理2分别提高了18.1％和21.33％；CK、处理1、处理2和处理3的最大叶片宽度分别为29.5±15.7cm、33.52±20.73cm、32.12±13.42cm和31.2±16.5cm；CK的茎围直径为6.22±0.7cm，处理1和处理2相较于CK分别提高了34.08％和22.34％。

综上可知，烟叶农艺性状处理1＞处理2＞处理3＞CK，结果表明，本发明的芽孢杆菌复合菌剂能显著促进烟株生长，施用生防菌剂组的最大叶长、最大叶宽、株高、茎直径均高于对照组。因此，芽孢杆菌复合菌剂的施用提高了烟草的农艺性状，达到了烟草增产的目的。

表6：不同处理下烟草农艺性状

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。

Claims (8)

1.一种防治青枯病的芽孢杆菌复合菌剂，其特征在于，所述芽孢杆菌复合菌剂是由混合菌种种子液扩培制成的；所述混合菌种种子液为贝莱斯芽孢杆菌种子液和解淀粉芽孢杆菌种子液；

所述贝莱斯芽孢杆菌种子液采用保藏编号为CGMCC No.24342的贝莱斯芽孢杆菌LGT-1培养得到，其有效活菌数大于2.0×10¹⁰ cfu/mL；

所述解淀粉芽孢杆菌种子液采用保藏编号为CGMCC No.24343的解淀粉芽孢杆菌ZJ-1培养得到，其有效活菌数大于2.0×10¹⁰ cfu/mL。

2.根据权利要求1所述的芽孢杆菌复合菌剂，其特征在于，所述贝莱斯芽孢杆菌种子液和解淀粉芽孢杆菌种子液的体积比为1.0~2.0:1.0~2.0。

3.根据权利要求1所述的芽孢杆菌复合菌剂，其特征在于，所述芽孢杆菌复合菌剂的制备包括以下步骤：

（1）将活化的贝莱斯芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌分别接种在液体培养基中培养，制备贝莱斯芽孢杆菌种子液、解淀粉芽孢杆菌种子液；

（2）将步骤（1）的贝莱斯芽孢杆菌种子液、解淀粉芽孢杆菌种子液以1:100~150的体积比接入到发酵培养基中，培养得到贝莱斯芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液；

（3）将步骤（2）中的贝莱斯芽孢杆菌发酵液、解淀粉芽孢杆菌发酵液以1.0~2.0:1.0~2.0的体积比进行混配，得到芽孢杆菌复合菌剂。

4.权利要求1-3任一项所述的芽孢杆菌复合菌剂在用于防治植物青枯病中的应用，其特征在于，所述植物为烟草。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述芽孢杆菌复合菌剂通过显著降低烟草青枯病的发病率和病情指数，来达到防治烟草青枯病的作用。

6.权利要求1-3任一项所述的芽孢杆菌复合菌剂在用于制备提高植物生长和/或促进植物种植土壤肥力的肥料中的应用，其特征在于，所述植物为烟草。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述芽孢杆菌复合菌剂的使用方法为：将所述芽孢杆菌复合菌剂稀释500倍，采用浇施、蘸根、灌根的方式对植物进行施用；或者将所述芽孢杆菌复合菌剂按照1~5:1000的体积质量比添加到基础肥料中，制成生物肥料，并采用塘施、穴施、条施、环施的方式进行施用。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述芽孢杆菌复合菌剂能够通过明显提高植物种植土壤理化性质指标，以及提高植物的株高、叶片长宽和茎围直径，达到促进植物生长的目的。

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