CN114645003A - 一株副干酪乳杆菌及其在制备皮肤抑菌和抗炎的产品中的应用 - Google Patents
一株副干酪乳杆菌及其在制备皮肤抑菌和抗炎的产品中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114645003A CN114645003A CN202210478906.9A CN202210478906A CN114645003A CN 114645003 A CN114645003 A CN 114645003A CN 202210478906 A CN202210478906 A CN 202210478906A CN 114645003 A CN114645003 A CN 114645003A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- staphylococcus
- profmic
- skin
- growth
- lactobacillus paracasei
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000186605 Lactobacillus paracasei Species 0.000 title claims abstract description 32
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 title claims abstract description 14
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 8
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 claims abstract description 26
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims abstract description 23
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 claims abstract description 19
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims abstract description 15
- 241000186427 Cutibacterium acnes Species 0.000 claims abstract description 14
- 229940055019 propionibacterium acne Drugs 0.000 claims abstract description 14
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 claims abstract description 13
- XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazole-2-carbaldehyde Chemical compound O=CC1=NC=CN1 XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 3-Methylbutanoic acid Natural products CC(C)CC([O-])=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 12
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 208000035985 Body Odor Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 206010055000 Bromhidrosis Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 206010000496 acne Diseases 0.000 claims abstract description 12
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N beta-methyl-butyric acid Natural products CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 claims abstract description 11
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 201000009890 sinusitis Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 claims description 19
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 17
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 10
- 241000191984 Staphylococcus haemolyticus Species 0.000 claims description 8
- 241000192087 Staphylococcus hominis Species 0.000 claims description 7
- 229940037649 staphylococcus haemolyticus Drugs 0.000 claims description 7
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 6
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 6
- 230000006872 improvement Effects 0.000 claims description 5
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 4
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 4
- 241000186245 Corynebacterium xerosis Species 0.000 claims description 3
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 claims description 2
- 241000295644 Staphylococcaceae Species 0.000 claims description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 28
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 abstract description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 4
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 abstract description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 abstract description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 34
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 25
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 25
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 22
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 20
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 18
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 15
- 239000000047 product Substances 0.000 description 13
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 241000186612 Lactobacillus sakei Species 0.000 description 7
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 6
- 244000005714 skin microbiome Species 0.000 description 6
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 5
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 5
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 3
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 3
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 3
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 3
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 3
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000008591 skin barrier function Effects 0.000 description 3
- 230000005808 skin problem Effects 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 description 2
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 2
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 210000002850 nasal mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 1
- 229920002444 Exopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 1
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 description 1
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 description 1
- 241000214517 Lactobacillus casei group Species 0.000 description 1
- 241000736262 Microbiota Species 0.000 description 1
- 238000010802 RNA extraction kit Methods 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 206010040844 Skin exfoliation Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000035618 desquamation Effects 0.000 description 1
- 230000000459 effect on growth Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000003780 keratinization Effects 0.000 description 1
- 235000021109 kimchi Nutrition 0.000 description 1
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012257 pre-denaturation Methods 0.000 description 1
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 1
- 235000021391 short chain fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004666 short chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 210000000434 stratum corneum Anatomy 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 239000013595 supernatant sample Substances 0.000 description 1
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/99—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from microorganisms other than algae or fungi, e.g. protozoa or bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/10—Anti-acne agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q15/00—Anti-perspirants or body deodorants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
- A61Q17/005—Antimicrobial preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/165—Paracasei
Abstract
本发明涉及微生物技术领域,尤其涉及一株副干酪乳杆菌及其在皮肤抑菌和抗炎产品中的应用。本发明于五岁健康女孩粪便中分离出副干酪乳杆菌ProfMIC‑207,其具备皮肤抑菌和抗炎的功效。具体地,该菌能抑制臭汗症病原菌的生长、抑制葡萄球菌产生异戊酸;该菌还能抑制痤疮丙酸杆菌以治疗痤疮、抑制铜绿假单胞菌以治疗鼻窦炎、抑制金黄色葡萄球菌以改善敏感肌。除此之外,所述菌株能下调炎症因子相关基因IL‑8的表达、降低细胞NO的生成量,从而抗皮肤炎症。本发明提供的副干酪乳杆菌ProfMIC‑207在食品、药品、保养品或化妆品中具有一定应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域,尤其涉及一株副干酪乳杆菌及其在皮肤抑菌和抗炎产品中的应用。
背景技术
皮肤是机体与外部环境的交接面,是防止外来病原体入侵的重要物理屏障,其表面定居着大量的微生物,其中有多种益生菌,也有多种病原菌。
皮肤微生态中,多种菌群相互制约处于动态平衡,对当皮肤表皮的微生态平衡被打破,各种皮肤病就会出现。如皮肤表面的痤疮丙酸杆菌的能诱发痤疮和炎症反应,然而皮肤常驻的表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)能与痤疮丙酸杆菌相互拮抗竞争,抑制痤疮丙酸杆菌的增殖。而当菌体的相互拮抗失去平衡,痤疮丙酸杆菌大量繁殖就会诱发痤疮。再比如,某些特定部位的葡萄球菌属和棒状杆菌属的菌株,它们能代谢汗液中的营养物质产生异戊酸等具有臭味的短支链脂肪酸。当这些菌株大量地具有臭味且具有挥发性的代谢物,造成臭汗症。除此之外,鼻腔黏膜处也有大量的微生物,当机体免疫力低下,鼻腔黏膜抵抗力下降,会导致局部生态环境异常,从而使一些致病菌过度繁殖从而导致鼻窦炎。如铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的过度繁殖易致鼻窦炎,与此同时,清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)却对于维持鼻腔正常功能有积极作用。
除了特定病原菌和有益菌的失衡造成特定的皮肤疾病,皮肤微生态失衡还容易造成炎症、皮肤屏障损伤、敏感肌等综合性的皮肤问题,这些问题反作用于皮肤微生态,形成循环的不良影响。随着皮肤炎症的加重,皮肤保水性下降、紧绷甚至脱屑,并且角质形成和细胞生长也将受到影响,皮肤的自我修复能力减弱。与此对应的是,表皮上一般存在部分益生菌,它们能调控细胞因子的释放,控制全身的免疫状态,起到防治炎症的作用。随着皮肤微生态的持续失衡,皮肤免疫力下降、角质层变薄,最终将损伤皮肤屏障、造成敏感肌。当皮肤屏障受损,金黄色葡萄球菌更易定植增殖,引发发炎红肿。幸运的是,皮肤常驻的表皮葡萄球菌能与金黄色葡萄球菌相互拮抗,降低其增殖速率。
根据以上所述,促进皮肤微生态平衡是解决痤疮、臭汗症、皮肤炎症、敏感肌等肌肤问题的重要途经。如今,不良化妆品的使用以及不健康的生活习惯诱发的皮肤炎症、屏障受损等肌肤问题越来越多,人们对美和健康的追求也越来越高,皮肤微生态平衡成为皮肤领域研究的热点。
副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)属于乳杆菌属中的干酪乳杆菌群,广泛存在于奶酪、泡菜等发酵食品。它具有干酪乳杆菌属调节肠道和增强免疫力等益生功能,代谢产生的细菌素具有优良的抑菌性能。因此,副干酪乳杆菌在食品、医疗保健等领域发挥重要作用,但目前尚未见该菌直接用于皮肤抑菌和抗炎的报道。
发明内容
有鉴于此,本发明要解决的问题在于提供一株副干酪乳杆菌及其在制备皮肤抑菌和抗炎的产品中的应用。
本发明提供了一株保藏编号为CCTCC NO:M20211534的副干酪乳杆菌ProfMIC-207。
本发明还提供了所述菌株在制备皮肤的抑菌和抗炎的产品物中的应用,所述产品的功能包括:治疗痤疮、治疗臭汗症、治疗鼻窦炎、改善敏感肌、抗皮肤炎症中至少一种。
所述治疗痤疮包括:抑制痤疮丙酸杆菌生长、降低痤疮丙酸杆菌与表皮葡萄球菌的相对比例。
本发明中所述的菌株间的相对比例,在本发明的实施例中用菌株间的相对浓度比值来表征。
所述治疗臭汗症包括:抑制臭汗症病原菌的生长、抑制葡萄球菌产生异戊酸。
所述葡萄球菌包括:金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、人葡萄球菌(Staphylococcus hominis)、溶血葡萄球菌(Staphylococcus haemolyticus)和表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)中至少一种。
一些实施例中,ProfMIC-207菌株降低葡萄球菌产生异戊酸,其降低率为69.55%。
所述臭汗症病原菌包括:金黄色葡萄球菌、人葡萄球菌、溶血葡萄球菌和干燥棒状杆菌(Corynebacterium xerosis)中至少一种。
一些实施例中,ProfMIC-207菌株抑制臭汗症病原菌的生长,其抑制率为28.7%~74.7%。
所述治疗鼻窦炎包括:抑制铜绿假单胞菌生长、促进清酒乳酸菌生长,降低铜绿假单胞菌与清酒乳酸菌的相对比例。
所述改善敏感肌包括:抑制金黄色葡萄球菌生长、降低金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌的相对比例。
所述抗炎包括:下调炎症因子相关基因IL-8的表达、降低细胞NO的生成量。
一些实施例中,ProfMIC-207菌株下调金黄色葡萄球菌诱导的HaCaT细胞炎症因子IL-8基因的表达,下调率为30.37%;抑制脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞Raw264.7的一氧化氮(NO)生成,NO的产量降低13.60%~18.09%。
本发明还提供了一种皮肤的抑菌和抗炎的产品,其原料包括本发明所述的ProfMIC-207菌株。
本发明所述产品的原料包括所述副干酪乳杆菌ProfMIC-207菌株的活菌、灭活菌、裂解物、提取物、培养上清液、衍生物中至少一种;所述衍生物包括:代谢产物、代谢生物产物、益生素、细胞壁及其成分、胞外多糖和含有免疫原性成分的化合物中至少一种。
优选地,本发明所述的产品的原料为所述副干酪乳杆菌ProfMIC-207菌株的上清液或灭活菌体。
本发明于五岁健康女孩粪便中分离出副干酪乳杆菌ProfMIC-207,其具备皮肤抑菌和抗炎的功效。具体地,该菌能抑制臭汗症病原菌的生长、抑制葡萄球菌产生异戊酸;该菌还能抑制痤疮丙酸杆菌以治疗痤疮、抑制铜绿假单胞菌以治疗鼻窦炎、抑制金黄色葡萄球菌以改善敏感肌。除此之外,所述菌株能下调炎症因子相关基因IL-8的表达、降低细胞NO的生成量,从而抗皮肤炎症。本发明提供的副干酪乳杆菌ProfMIC-207在食品、药品、保养品或化妆品中具有一定应用价值。
生物保藏说明
副干酪乳杆菌ProfMIC-207 Lactobacillus paracasei ProfMIC-207,于2021年12月03日保藏在中国典型培养物保藏中心,地址为:中国.武汉.武汉大学,保藏编号为CCTCC NO:M 20211534。
附图说明
图1示ProfMIC-207抑制臭汗症相关病原菌生长。
具体实施方式
本发明提供了一株副干酪乳杆菌及其在制备皮肤抑菌和抗炎的产品中的应用,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
以上仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
本发明采用的试材皆为普通市售品,皆可于市场购得。下面结合实施例,进一步阐述本发明:
实施例1 ProfMIC-207的分离
于健康女孩粪便中采样。将样品适当处理后于生理盐水中震荡混匀,取上清划线于MRS固体平板,37℃恒温培养48h后,挑取白色菌落反复接种筛选,直至得到均匀的单个菌落,命名为ProfMIC-207。革兰氏染色镜检:菌株ProfMIC-207为革兰氏染色阳性,显微镜下呈杆状;在MRS平板上生长,可形成白色、表面光滑圆润不透明圆形小菌落,边缘整齐;在MRS液体培养基中呈均匀浑浊生长,久置菌体呈白色沉淀。
实施例2 ProtMIC-207的核酸鉴定
1、16s rRNA基因序列分析:
挑取单菌落置于MRS液体培养基中,37℃培养过夜后,离心收集菌体,按照DNA提取试剂盒步骤进行操作。PCR扩增引物为细菌通用引物27F和1492R;PCR扩增体系为50μL体系,PCR扩增程序为:95℃预变性5min;94℃15s,57℃15s,72℃40s,35个循环;72℃延伸10min。扩增后测定核酸的碱基序列。
2、结果。
PCR产物的测序结果与GenBank中已发表的标准序列进行同源性比较(BLASTN)后得出ProfMIC-207菌株为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。
实施例3 ProfMIC-207改变菌群比例以治疗痤疮
1、副干酪乳杆菌ProfMIC-207菌液制备。
将活化的副干酪乳杆菌ProfMIC-207菌液以MRS液体培养基培养于37℃培养箱静置培养16~18h,检测并调整使得OD600=2.0,然后将培养菌液于121℃,30min灭活,离心取上清液,0.22μm滤膜过滤,得灭活上清液。
2、皮肤菌群菌液制备。
将痤疮丙酸杆菌CGMCC 1.5003和表皮葡萄球菌CGMCC 1.4260分别用BHI培养基于37℃培养18h,检测并调整至OD600=0.2。
3、添加上清液影响皮肤菌群生长实验。
将灭活上清液以10%(V/V)的比例分别加入两种皮肤菌群菌液中,37℃培养16h,以两种菌液的相对浓度(OD600的比值)为指标评价灭活上清液对皮肤菌群生长影响。
相对浓度比值的计算公式为:A菌和B菌的相对浓度比值=(实验组A菌的浓度/对照组A菌的浓度)/(实验组B菌的浓度/对照组B菌的浓度)。
4、结果。结果如表1所示,ProfMIC-207对痤疮丙酸杆菌有显著抑制作用,而对表皮葡萄球菌抑制作用则低得多。所以ProfMIC-207能够显著降低痤疮丙酸杆菌和表皮葡萄球菌的相对浓度比值,降低痤疮丙酸杆菌和表皮葡萄球菌的相对比例,有治疗痤疮的潜力。
表1 ProfMIC-207对痤疮相关菌群生长影响
实施例4 ProfMIC-207抑制臭汗症病原菌生长
1、副干酪乳杆菌ProfMIC-207菌液制备:
将活化的副干酪乳杆菌ProfMIC-207菌液用MRS液体培养基培养,于37℃培养箱静置培养16~18h,检测并调整至OD600=2.0,然后将培养菌液于121℃,30min灭活,离心取上清液,0.22μm滤膜过滤,得灭活上清液。
2、病原菌菌液制备:
将5种病原菌:金黄色葡萄球菌CGMCC 1.8721、人葡萄球菌CGMCC 1.493、溶血葡萄球菌CGMCC 1.540和干燥棒状杆菌CGMCC 1.1919分别用BHI培养基37℃培养18h,检测并调整至OD600=0.2。
3、抑制臭汗症病原菌实验
将灭活上清液以10%(V/V)加入病原菌中,37℃培养2h,以菌液浓度(OD600)降低百分比为指标评价灭活上清液对病原菌生长的抑制作用。
4、结果
结果显示ProfMIC-207对金黄色葡萄球菌、人葡萄球菌、溶血葡萄球菌和干燥棒状杆菌等臭汗症病原菌均具有抑制作用。ProfMIC-207对臭汗症病原菌抑制率的结果见图1。
表2 ProfMIC-207对臭汗症病原菌抑制率
实施例5 ProfMIC-207降低异戊酸的产生
1、副干酪乳杆菌ProfMIC-207菌液制备:
将活化的副干酪乳杆菌ProfMIC-207菌液以MRS液体培养基培养于37℃培养箱静置培养16~18h,检测并调整OD600至2.0,然后将培养菌液于121℃,30min灭活,离心取上清液,0.22μm滤膜过滤,得ProfMIC-207灭活上清液。
2、葡萄球菌混合菌液制备:
将4种葡萄球菌:金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、人葡萄球菌和溶血葡萄球菌分别以BHI培养基于37℃培养18h,检测并调整OD600至2.0,最后将四种菌液等体积混合制得葡萄球菌混合菌液。
3、副干酪乳杆菌ProfMIC-207上清液添加及异戊酸含量检测。
将灭活上清液以10%(V/V)的比例加入葡萄球菌混合菌液中为实验组,未添加灭活上清液的实验组为对照组,一起于37℃培养2h,然后分别用气相色谱法测定样品和对照的异戊酸含量,计算添加上清液后异戊酸含量降低率。
4、结果如表3所示,ProfMIC-207具有降低葡萄球菌产生异戊酸的作用,降低率为69.55%。
表3 ProfMIC-207的添加对异戊酸产生的降低率
实施例6 ProfMIC-207降低Raw264.7细胞的NO生成量
1、ProfMIC-207菌液制备
将ProfMIC-207用MRS培养基培养过夜,检测OD600,调整菌液浓度至OD600=0.2,离心后,将菌体于121℃高压灭菌30min得ProfMIC-207灭活菌体样品,将上清用0.22μm滤膜过滤得ProfMIC-207灭活上清液样品。
2、Raw264.7细胞制备
将Raw264.7细胞消化后以2×105个/孔的密度接种至24孔板,于5%二氧化碳培养箱中37℃培养过夜。
3、ProfMIC-207添加及LPS刺激
设置上清液和灭活菌体2个不同的实验组,将上清液以5%(V/V)、灭活菌体以10%(V/V)的比例分别加入对应实验组的培养过夜的Raw264.7细胞中。2h后分别添加0.5ml浓度为0.2μg/ml的LPS溶液,诱导Raw264.7细胞发炎,20h后取细胞培养上清,用NO含量检测试剂盒对细胞培养上清进行NO含量检测,每次3个复孔,共进行三次实验。
4、结果。结果如表4所示,ProtMIC-207具有抗炎作用,能够降低LPS诱导的Raw264.7细胞NO生成量。与对照组相比,ProfMIC-207上清液降低NO生成量13.60%,ProfMIC-207灭活菌体降低NO生成量18.09%。
表4 ProfMIC-207降低Raw264.7细胞的NO生成量
实施例7 ProfMIC-207下调炎症因子相关基因的表达
1、ProfMIC-207样品制备。
将ProfMIC-207用MRS培养过夜,检测OD600,调整菌液浓度至OD600=0.2,离心后,菌体于121℃高压灭菌30min得灭活菌体样品,离心上清用0.22μm滤膜过滤得ProfMIC-207上清液。
2、HaCaT细胞制备
将HaCaT细胞消化后以2×105个/孔的密度接种至24孔板,于5%二氧化碳培养箱37℃培养过夜。
3、金黄色葡萄球菌制备及添加
金黄色葡萄球菌接入营养肉汤培养基,于37℃摇床培养过夜,用MEM无血清培养基调整菌液浓度至OD600=6.0,然后以每孔100μl的量加入培养过夜的HaCaT细胞中,刺激细胞产生炎症因子,3h后弃去细胞培养基,PBS清洗5次,每孔重新加入1ml的MEM无血清培养基。
4、ProfMIC-207样品添加
将ProfMIC-207上清液以5%(V/V)的比例加入金黄色葡萄球菌刺激过的HaCaT细胞中,每组3个复孔,培养过夜。
5、qPCR法检测细胞炎症因子mRNA相对表达倍数
将上述细胞弃去培养基后,用RNA提取试剂盒提取RNA,检测RNA浓度及纯度,将所有样品调整至1μg,用反转录试剂盒、SYBRGreen qPCR试剂盒进行RT-PCR及qPCR,计算炎症因子基因IL-8的相对表达倍数F。
公式:F=2-ΔΔCT
结果。结果如表5所示,ProfMIC-207能够下调金黄色葡萄球菌诱导的HaCaT细胞炎症因子相关基因的表达,表达量降低30.37%。因此,ProfMIC-207具有抗炎作用。
表5 ProfMIC-207下调炎症因子基因的表达
实施例8 ProfMIC-207改变菌群比例以治疗鼻窦炎
1、副干酪乳杆菌ProfMIC-207菌液制备:
将活化的副干酪乳杆菌ProfMIC-207菌液以MRS液体培养基培养于37℃培养箱静置培养16~18h,检测并调整至OD600=2.0,121℃,30min灭活,离心取上清液,0.22μm滤膜过滤,得ProfMIC-207灭活上清液样品。
2、鼻腔菌群菌液制备:
将铜绿假单胞菌CGMCC1.1785用BHI培养基、清酒乳杆菌用MRS培养基37℃培养18h,检测并调整至OD600=0.2。
3、添加上清液影响皮肤菌群生长实验
将灭活上清液以10%(V/V)的比例分别加入两种菌液中,37℃培养3h,以铜绿假单胞菌和清酒乳杆菌的相对浓度比值(OD600比值)为指标评价Prof MIC-207灭活上清液对鼻腔菌群生长影响。
相对浓度比值的计算公式为:A菌和B菌的相对浓度比值=(实验组A菌的浓度/对照组A菌的浓度)/(实验组B菌的浓度/对照组B菌的浓度)。
4、结果
结果如表6所示,ProfMIC-207对铜绿假单胞菌有显著抑制作用,而对清酒乳杆菌有一定促进增殖作用。ProfMIC-207能够明显降低铜绿假单胞杆菌和清酒乳杆菌的相对浓度比值,降低铜绿假单胞杆菌和清酒乳杆菌的相对比例,从而有效治疗鼻窦炎。
表6 ProfMIC-207对铜绿假单胞菌/清酒乳杆菌比值影响
实施例9 ProfMIC-207改变菌群比例以改善敏感肌。
1、副干酪乳杆菌ProfMIC-207菌液制备。
将活化的副干酪乳杆菌ProfMIC-207菌液以MRS液体培养基培养于37℃培养箱静置培养16~18h,检测并调整至OD600 2.0,121℃,30min灭活,离心取上清液,0.22μm滤膜过滤,得ProfMIC-207灭活上清液样品。
2、敏感肌相关菌群菌液制备。
将金黄色葡萄球菌CGMCC 1.8721和表皮葡萄球菌CGMCC 1.4260分别用BHI培养基37℃培养18h,检测并调整至OD600=0.2。
3、添加上清液影响敏感肌相关菌群生长实验。
将灭活上清液以10%(V/V)的比例分别加入两种皮肤菌群菌液中,37℃培养2h,以两种菌液的相对浓度比值(OD600的比值)为指标评价对敏感肌相关菌群生长影响。
相对浓度比值的计算公式为:A菌和B菌的相对浓度比值=(实验组A菌的浓度/对照组A菌的浓度)/(实验组B菌的浓度/对照组B菌的浓度)。
4、结果。
结果如表7所示,ProfMIC-207对金黄色葡萄球菌有显著抑制作用,而对表皮葡萄球菌的抑制作用较弱。ProfMIC-207能够显著降低金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的相对浓度比值,降低金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的相对比例,从而有效改善敏感肌。
表7 ProfMIC-207对敏感肌相关菌群生长的影响
以上仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护。
Claims (10)
1.保藏编号为CCTCC NO:M20211534的副干酪乳杆菌ProfMIC-207。
2.权利要求1所述的菌株在制备皮肤抑菌和抗炎的产品中的应用,所述产品的功能包括:治疗痤疮、治疗臭汗症、治疗鼻窦炎、改善敏感肌、抗皮肤炎症中至少一种。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述治疗痤疮包括:抑制痤疮丙酸杆菌生长、降低痤疮丙酸杆菌与表皮葡萄球菌的相对比例。
4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述治疗臭汗症包括:抑制臭汗症病原菌的生长和/或抑制葡萄球菌产生异戊酸。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述臭汗症病原菌包括:金黄色葡萄球菌、人葡萄球菌、溶血葡萄球菌和干燥棒状杆菌中至少一种。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述葡萄球菌包括:金黄色葡萄球菌、人葡萄球菌、溶血葡萄球菌和表皮葡萄球菌中至少一种。
7.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述治疗鼻窦炎包括:抑制铜绿假单胞菌生长、促进清酒乳酸菌生长,降低铜绿假单胞菌与清酒乳酸菌的相对比例。
8.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述改善敏感肌包括:抑制金黄色葡萄球菌生长、降低金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌的相对比例。
9.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述抗炎包括:下调炎症因子相关基因IL-8的表达、降低细胞NO的生成量。
10.一种皮肤的抑菌和抗炎的产品,其特征在于,其原料包括权利要求1所述的菌株。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210478906.9A CN114645003A (zh) | 2022-04-29 | 2022-04-29 | 一株副干酪乳杆菌及其在制备皮肤抑菌和抗炎的产品中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210478906.9A CN114645003A (zh) | 2022-04-29 | 2022-04-29 | 一株副干酪乳杆菌及其在制备皮肤抑菌和抗炎的产品中的应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN114645003A true CN114645003A (zh) | 2022-06-21 |
Family
ID=81996429
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202210478906.9A Pending CN114645003A (zh) | 2022-04-29 | 2022-04-29 | 一株副干酪乳杆菌及其在制备皮肤抑菌和抗炎的产品中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN114645003A (zh) |
-
2022
- 2022-04-29 CN CN202210478906.9A patent/CN114645003A/zh active Pending
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN105132318B (zh) | 植物乳杆菌Grx16及其应用 | |
CN107988115B (zh) | 植物乳杆菌及其复合益生菌发酵液与制备方法 | |
CN111304117B (zh) | 一株具有抗氧化活性的植物乳杆菌gl-5及其应用 | |
CN111925961B (zh) | 一株植物乳杆菌Lp2及其应用 | |
CN114081901B (zh) | 一种益生菌组合物、制备方法及其应用 | |
CN103911306B (zh) | 加氏乳杆菌菌株及其用途 | |
CN114645001A (zh) | 一株副干酪乳杆菌及其在制备调节皮肤微生态系统的产品中的应用 | |
CN114634899B (zh) | 发酵乳杆菌及其应用 | |
CN112812999B (zh) | 一株对阴沟肠杆菌具有抑制作用的植物乳杆菌slb01及其衍生产品和应用 | |
CN113604395A (zh) | 一株可发酵石斛且其发酵液可改善皮肤质量的植物乳杆菌 | |
CN114504599A (zh) | 副干酪乳杆菌et-22在抗衰老、提高先天免疫方面的新应用 | |
CN103911309B (zh) | 加氏乳杆菌菌株及其用途 | |
CN114574408B (zh) | 益生菌seuneu-107及应用 | |
CN114032190A (zh) | 一株可发酵石斛且其发酵液可有效修复日光皮炎的罗伊氏乳杆菌 | |
CN114645002A (zh) | 一种用于皮肤抗炎和治疗痤疮的副干酪乳杆菌及其应用 | |
CN114703106A (zh) | 益生菌GforU-12及应用 | |
CN114672442A (zh) | 益生菌ProfMIC-211及应用 | |
CN114874945A (zh) | 一株短乳杆菌及其应用 | |
CN114645003A (zh) | 一株副干酪乳杆菌及其在制备皮肤抑菌和抗炎的产品中的应用 | |
CN116162569A (zh) | 动物双歧杆菌乳亚种bl03及其应用 | |
CN114891699A (zh) | 调节菌群平衡的唾液乳杆菌 | |
CN114717161A (zh) | 发酵乳杆菌及其应用 | |
CN114621902A (zh) | 一株副干酪乳杆菌及其在制备防治皮肤病的产品中的应用 | |
RU2210592C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bifidobacterium longum 58B ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ДОБАВОК, РЕГУЛИРУЮЩИХ МИКРОФЛОРУ КИШЕЧНИКА У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА | |
CN110982737A (zh) | 一种犬用生物被膜态乳酸菌剂及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |