CN114644700B - 玉米ZmMYB126蛋白及其相关生物材料的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了玉米ZmMYB126蛋白及其相关生物材料的应用。本发明所要保护的蛋白的应用包括蛋白在调控植物抗旱性中的应用和/或在制备提高植物抗旱性的产品中的应用和/或在植物育种中的应用。所述ZmMYB126蛋白的氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质或由序列表中序列1的蛋白质衍生的具有相同功能的蛋白质。实验证明，将ZmMYB126基因导入玉米B73幼胚中得到的ZmMYB126的转基因过表达株系，与未转化的B73对照植株相比，可以提高玉米对干旱胁迫的耐受性；表明ZmMYB126参与植物对干旱相关逆境胁迫的调控与适应。

Description

玉米ZmMYB126蛋白及其相关生物材料的应用

技术领域

本发明涉及玉米ZmMYB126蛋白及其相关生物材料的应用。

背景技术

干旱是影响玉米产量的重要因素。在玉米苗期，干旱会抑制玉米生长速率，导致发育期严重缩短；干旱还会抑制玉米株高，导致叶片萎蔫，从而使光合作用减少；玉米在灌浆期遭遇干旱，会导致籽粒不饱满，从而导致产量减少。通过基因工程方法改良玉米抗旱性，对保护玉米产量具有重要意义。B73玉米基因组测序已经完成，基因编辑和遗传转化技术也在不断更新，为通过基因工程手段改良玉米抗旱性提供了重要保障。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何调控植物的抗旱性和/或确定ZmMYB126蛋白的功能及应用。

为了解决上述技术问题，本发明首先提供了蛋白质的下述任一种应用：

P1、所述蛋白质在调控植物抗旱性中的应用，

P2、所述蛋白质在制备提高植物抗旱性的产品中的应用，

P3、所述蛋白质在植物育种中的应用。

上述蛋白质为如下A1)、A2)或A3)的蛋白质：

A1)氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质；

A2)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的由A1)衍生的或与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有相同功能的蛋白质；

A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。

上述植物可为玉米。

上述蛋白质中，序列表中序列1由256个氨基酸残基组成。

上述蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。

上述蛋白质中，所述蛋白标签(protein-tag)是指利用DNA体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和/或纯化。所述蛋白标签可为Flag标签、His标签、MBP标签、HA标签、myc标签、GST标签和/或SUMO标签等。

上述蛋白质中，同一性是指氨基酸序列的同一性。可使用国际互联网上的同源性检索站点测定氨基酸序列的同一性，如NCBI主页网站的BLAST网页。例如，可在高级BLAST2.1中，通过使用blastp作为程序，将Expect值设置为10，将所有Filter设置为OFF，使用BLOSUM62作为Matrix，将Gap existence cost，Per residue gap cost和Lambda ratio分别设置为11，1和0.85(缺省值)并进行检索一对氨基酸序列的同一性进行计算，然后即可获得同一性的值(％)。

上述蛋白质中，所述80％以上的同一性可为至少81％、82％、85％、86％、88％、90％、91％、92％、95％、96％、98％、99％或100％的同一性。

为了解决上述技术问题，本发明还提供了上述的蛋白质相关的生物材料的下述任一种应用：

Q1、所述生物材料在调控植物抗旱性中的应用，

Q2、所述生物材料在制备提高植物抗旱性的产品中的应用，

Q3、所述生物材料在植物育种中的应用。

上述生物材料可为下述B1)至B9)中的任一种：

B1)编码权利要求1中所述蛋白质的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；

B4)含有B1)所述核酸分子的重组微生物、或含有B2)所述表达盒的重组微生物、或含有B3)所述重组载体的重组微生物；

B5)含有B1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、或含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系；

B6)含有B1)所述核酸分子的转基因植物组织、或含有B2)所述表达盒的转基因植物组织；

B7)含有B1)所述核酸分子的转基因植物器官、或含有B2)所述表达盒的转基因植物器官；

B8)促进或提高权利要求3中所述蛋白质的基因表达的核酸分子；

B9)含有B8)所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因植物细胞系。

上述生物材料中，B1)所述核酸分子为如下b1)、b2)或b3)所示的所述蛋白质的编码基因：

b1)编码链的编码序列是序列表中序列3的核苷酸的cDNA分子或DNA分子；

b2)核苷酸是序列表中序列3的cDNA分子或DNA分子；

b3)与b2)限定的cDNA或DNA分子杂交且编码具有相同功能的蛋白质的cDNA分子或DNA分子。

上述生物材料中，B2)所述的含有核酸分子的表达盒，是指能够在宿主细胞中表达上述应用中所述蛋白质的DNA，该DNA不但可包括启动蛋白编码基因转录的启动子，还可包括终止蛋白编码基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。可用于本发明的启动子包括但不限于：组成型启动子，组织、器官和发育特异的启动子，和诱导型启动子。

可用现有的植物表达载体构建含有所述蛋白编码基因表达盒的重组表达载体。所述植物表达载体包括双元农杆菌载体和可用于植物微弹轰击的载体等。如pAHC25、pWMB123、pBin438、pCAMBIA1302、pCAMBIA2301、pCAMBIA1301、pCAMBIA1300、pBI121、pCAMBIA1391-Xa或pCAMBIA1391-Xb(CAMBIA公司)等。所述植物表达载体还可包含外源基因的3’端非翻译区域，即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。所述聚腺苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3’端，如农杆菌冠瘿瘤诱导(Ti)质粒基因(如胭脂碱合成酶基因Nos)、植物基因(如大豆贮存蛋白基因)3’端转录的非翻译区均具有类似功能。使用本发明的基因构建植物表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。

上述生物材料中，所述重组微生物具体可为酵母，细菌，藻和真菌。

为了解决上述技术问题，本发明还提供了调控基因表达的物质的下述任一种应用：

F1、调控基因表达的物质在调控植物抗旱性中的应用，

F2、调控基因表达的物质在制备提高植物抗旱性的产品中的应用，

F3、调控基因表达的物质在植物育种中的应用。

述应用中，所述调控基因表达的物质可为进行如下6种调控中至少一种调控的物质：1)在所述基因转录水平上进行的调控；2)在所述基因转录后进行的调控(也就是对所述基因的初级转录物的剪接或加工进行的调控)；3)对所述基因的RNA转运进行的调控(也就是对所述基因的mRNA由细胞核向细胞质转运进行的调控)；4)对所述基因的翻译进行的调控；5)对所述基因的mRNA降解进行的调控；6)对所述基因的翻译后的调控(也就是对所述基因翻译的蛋白质的活性进行调控)。

上述应用中，所述调控植物的抗旱性为提高植物对干旱的耐受性。

上述应用中，所述调控基因表达可为增强或提高所述基因表达。

上述应用中，所述调控基因表达的物质可为增强或提高所述基因表达的试剂。

为了解决上述技术问题，本发明还提供了一种培育抗旱植物的方法，包括提高目的植物中上述蛋白质的活性或/和上述蛋白质的编码基因的表达量，得到抗旱植物。所述抗旱植物的抗旱性高于所述目的植物。

上述提高目的植物中所述蛋白质的活性或/和所述蛋白质的编码基因的表达量可通过将上述蛋白质的编码基因导入所述目的植物实现。

上述方法中，其中所述ZmMYB126蛋白的编码基因可先进行如下修饰，再导入目的植物中，以达到更好的表达效果：

1)与各种植物表达的启动子连接，以利于其在植物中的表达；所述启动子可包括组成型、诱导型、时序调节、发育调节、化学调节、组织优选和组织特异性启动子；启动子的选择将随着表达时间和空间需要而变化，而且也取决于靶物种；例如组织或器官的特异性表达启动子，根据需要受体在发育的什么时期而定；尽管证明了来源于双子叶植物的许多启动子在单子叶植物中是可起作用的，反之亦然，但是理想地，选择双子叶植物启动子用于双子叶植物中的表达，单子叶植物的启动子用于单子叶植物中的表达；

2)与适合的转录终止子连接，也可以提高本发明基因的表达效率；例如来源于CaMV的tml，来源于rbcS的E9；任何已知在植物中起作用的可得到的终止子都可以与本发明基因进行连接；

3)引入增强子序列，如内含子序列(例如来源于Adhl和bronzel)和病毒前导序列(例如来源于TMV,MCMV和AMV)。

上述方法中，所述对逆境胁迫敏感植物可为转基因植物，也可为通过杂交等常规育种技术获得的植物。

上述方法中，所述转基因植物理解为不仅包含第一代到第二代转基因植物，也包括其子代。对于转基因植物，可以在该物种中繁殖该基因，也可用常规育种技术将该基因转移进入相同物种的其它品种，特别包括商业品种中。所述转基因植物包括种子、愈伤组织、完整植株和细胞。

上述植物和/或上述目的植物可为玉米。

上文所述蛋白质或上文所述生物材料也属于本发明的保护范围。

上文所述核酸分子可产生不同转录本，翻译出不同蛋白质，所述核酸分子产生的不同转录本以及翻译出的不同蛋白质均在本专利保护范围内。

本发明将ZmMYB126基因导入玉米B73幼胚中得到的ZmMYB126的转基因过表达株系，与未转化的B73对照植株相比，可以提高玉米对干旱胁迫的耐受性；干旱处理后对照植株的平均成活率为46.7％，过表达植株的平均成活率为82.2％，表明ZmMYB126参与植物对干旱相关逆境胁迫的调控与适应，可应用于植物抗旱育种研究。

附图说明

图1为对照(CK)和ZmMYB126过表达株系(OE)干旱处理复水表型。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1ZmMYB126基因在玉米抗旱中的应用

一、玉米B73稳定遗传转化ZmMYB126基因

本申请的发明人在玉米B73中发现了一种植物耐旱相关基因ZmMYB126，其基因组基因核苷酸序列如序列表中序列2所示，该基因由5611个碱基组成，T01转录本的读码框为自5'端第242位到第5152位碱基。该转录本由6个外显子组成，其中编码外显子6个，分别为读码框第242位到第425位碱基，第1638位到第1714位碱基，第1788位到第1842位碱基，第4004位到第4073位碱基，第4198位到第4267位碱基，第4838位到第5152位碱基，其余为其内含子序列。基因来源于B73型玉米，在玉米基因组数据库中的编号为GRMZM2G064197。由于玉米同一DNA段序列可产生不同转录本，翻译出不同蛋白质，该段序列产生的不同转录本以及翻译出的不同蛋白质均在本专利保护范围内。

将该基因编码的蛋白质命名ZmMYB126，其氨基酸序列如序列表中序列1所示，ZmMYB126的cDNA基因的CDS如序列表中的序列3所示。

将ZmMYB126基因表达菌EHA105/pBCXUN-ZmMYB126转化玉米B73幼胚。其中ZmMYB126基因表达菌EHA105/pBCXUN-ZmMYB126的构建过程见下述步骤三。

将ZmMYB126基因表达菌EHA105/pBCXUN-ZmMYB126摇菌，重新悬浮至OD₆₀₀在0.8-1.0之间得到重组农杆菌菌悬液。将获得的重组农杆菌菌悬液侵染无菌条件下扒出的玉米B73幼胚后，经除草剂草丁膦筛选诱导愈伤组成成苗，采用PCR鉴定法(所用引物为UbiP-seq和NosR-seq组成的引物对)筛选得到ZmMYB126基因过表达植株。ZmMYB126基因过表达植株ZmMYB126经自交繁种后获得稳定遗传T3代进行后续干旱处理实验。

其中，UbiP-seq对应于Ubi启动子，NosR-seq对应于Nos终止子，序列如下：

UbiP-seq:5′-TTTTAGCCCTGCCTTCATACGC-3′，

NosR-seq:5′-AGACCGGCAACAGGATTCAATC-3′。

二、干旱处理实验

实验包含三个重复。每个重复中包含对照(B73)15个小盆和ZmMYB126基因过表达植株(T3代)15个小盆。在每个小盆中加入等量140g含蛭石营养土，托盘里加上水，在每小盆均匀放置4粒种子后覆盖50ml土，待小盆中土吸水均匀后将托盘中剩余的水倒掉，于培养间(温度25℃，湿度40％)正常培养生长。种子发芽出苗后，将长势不齐的一棵苗去掉，在托盘里加入1L水，吸满后将水倒掉，不再加水开始自然干旱处理。

在处理3周时玉米植株出现干旱胁迫表型，观察对照和转基因植株的干旱处理表型。图1显示ZmMYB126基因过表达的植株(图1中OE)的生长状况好于对照(图1中CK)，OE叶片干枯萎蔫程度低于对照CK，这表明转基因植株比对照植株抗旱。然后进行复水处理，观察复水表型，结果表明过表达ZmMYB126基因能够提高玉米的抗旱性，ZmMYB126蛋白在玉米抵御干旱逆境胁迫中起正调控作用，可应用玉米抗旱育种的研究。

三、ZmMYB126基因表达菌EHA105/pBCXUN-ZmMYB126的构建

将核苷酸序列是序列表中的序列3的DNA分子插入pBCXUN载体中得到ZmMYB126基因表达重组载体，命名为pBCXUN-ZmMYB126。pBCXUN-ZmMYB126中，序列表中的序列3所示的DNA分子由玉米泛素基因Ubi的启动子启动并由Nos终止子终止，能够表达pBCXUN-ZmMYB126蛋白(氨基酸序列如序列表中序列1所示)。其中，pBCXUN载体是将pCXUN(GenBank:FJ905215.1，06-JUL-2009)的HYG基因(hptII，潮霉素抗性基因)替换为Bar基因(编码膦丝菌素乙酰转移酶)(GenBank:MG719235.1中的第284-835位核苷酸，02-OCT-2018)，保持pCXUN的其它核苷酸不变得到的表达载体。

pBCXUN-ZmMYB126通过热激法转化到感受态农杆菌EHA105菌株中，菌落PCR鉴定出阳性克隆，挑选阳性克隆测序，菌落PCR和测序鉴定引物为上述UbiP-seq和上述NosR-seq。含有pBCXUN-ZmMYB126的阳性克隆即为重组农杆菌。

将重组农杆菌单菌落接种于2-3mL含有100μg/mL卡那霉素和50μg/mL利福平的液体培养基中，28℃振荡培养过夜，第二天转接到含有卡那霉素和利福平抗生素的大量液体培养基中震荡培养后即得到ZmMYB126基因表达菌EHA105/pBCXUN-ZmMYB126，保菌备用。

以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围，可以进行一些基本特征的应用。

序列表

<110> 中国农业大学

<120> 玉米ZmMYB126蛋白及其相关生物材料的应用

<130> GNCSQ203218

<160> 3

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 256

<212> PRT

<213> 玉米（Zea mays）

<400> 1

Met Phe Pro Pro Gly Leu Ile His His Arg Pro Asp Ala Thr Ala Pro

1 5 10 15

Gly Asp Gly Pro Pro Arg Ser Gly Pro Gly Gly Pro Ser Leu Val Leu

20 25 30

Thr Ala Asp Pro Lys Pro Arg Leu Arg Trp Thr Ala Asp Leu His Glu

35 40 45

Arg Phe Val Asp Ala Val Ala Gln Leu Gly Gly Pro Glu Lys Ala Thr

50 55 60

Pro Lys Thr Ile Leu Arg Thr Met Gly Val Lys Gly Leu Thr Leu Phe

65 70 75 80

His Leu Lys Ser His Leu Gln Lys Tyr Arg Leu Gly Lys Gln Ser Asp

85 90 95

Lys Glu Gly Ser Glu Gln Ser Lys Asp Ala Ser Tyr Leu Leu Asp Ala

100 105 110

Gln Ser Gly Met Ser Val Ser Pro Arg Val Ala Ala Gln Asp Met Lys

115 120 125

Glu Ser Gln Glu Val Lys Glu Ala Leu Arg Ala Gln Met Glu Val Gln

130 135 140

Arg Arg Leu His Glu Gln Val Glu Gln Val Gln Lys Arg Val Gln Ile

145 150 155 160

Arg Met Glu Ala Leu Glu Lys Tyr Ile Asp Ser Ile Leu Glu Ser Ala

165 170 175

Cys Lys Met Val Thr Glu Gln Phe Ala Ser Ser Gly Phe Ser Ile Ser

180 185 190

Asn Pro Asp Leu Pro Glu Ile Ser Pro Gly Gly Val Met Cys Gly Ser

195 200 205

Thr Asp Thr Leu Gly Ser Ser Val Leu Asn Gln Leu Ser Val Ser Ser

210 215 220

Ile Asp Ser His Ser Pro Gly Gly Lys Pro Ser Pro Ser Gly Met Glu

225 230 235 240

Gly Pro Thr Leu Leu Gln Lys Ser Pro Glu Leu Lys Arg Arg Ser Ser

245 250 255

<210> 2

<211> 5611

<212> DNA

<213> 玉米（Zea mays）

<400> 2

actaaacaca attcgatcga gagcgagcga gcgagagaga gagagagaga gagagagaga 60

gagagcaggg ctgaagaagt tggaggaatc gctgccagtg gaaagcggca gcagcagaag 120

caagaaccag caagaaaggg gagagagaaa gccgaaggac ttttcctcgg attgcatcct 180

tcgcttttga gggaaggaga aggaccctct ctgtcctcgc ggggggcggc aggaggagca 240

gatgttcccg cctggcctga tccaccaccg ccctgacgct accgctcccg gcgatgggcc 300

accgcgctcc ggccccggtg ggccgagcct tgtactgacg gcggacccca agcccaggct 360

acggtggacg gccgacctcc acgagcgttt cgtcgacgcc gtggcccagc tcggcggacc 420

cgagagtgag ctaccctctc ctccctctcc aatctcgcaa ctttggcggt ccttggtttt 480

ggcattggaa tagagagcat tgcgtgcttg ttgccttgtt ggttagtgca tccattgggt 540

gtcttccttg gtctctcggt agccgagatt tcgtggcgcg cgcgaggttc cgttccggat 600

tgaggatgct tgcgctgaaa ccgtcggaaa gttttgatcg ttagtgtaca aatcctggaa 660

tttaggctcg agctaaacgc aagtcgtttg gataagtgcg ccgtgcattt gcgcttccga 720

tgtcagatct agcgtgcccg aggtaacatg gtatttgggg cgtgcatgaa tgaagtttat 780

ctgctttctt gctatggaac atattgagag atgtggcctg tgtttctgct gcatgcagag 840

aagatgggtc atgttcatcg tgtccggtca ttatgttatg gtgacctgta ttgatgaagg 900

ttgattagtg tggatttttt aacgtaattg ttgaacgcaa aatgtgacat gcggactgtc 960

cgccccgggc aggacggccc gcggtggtga cgcggacggt cggctttccg gatttcggcg 1020

ccaacagtaa tgttggctgc tggaaattga tctgttgggg ctagcaagaa gtgtataatg 1080

ttttctctga gatactcctc tcttcaaatt ataagtcatt ctagtttttt tagtttttag 1140

gtacatagct ttgctatgca tctagacata cagtttatct caatgcatgg cttttgctat 1200

gcatctagaa aaaccagaac aacttataat ttagaacgaa gggattgctt attatacaca 1260

agcttggctc ttgcatattt gcactctata tagtttttta ttgttcaaat tttaggtttc 1320

aagcatttta tttctgtaat tttttatata gattcatttt tggcgccaaa tatcctggaa 1380

attcagctat aatgtcaaac attcaaaaca aaggaagtat atgtttcctt gtcgttttgg 1440

tgttccaccg ttattttttg tgtgaactgg ggcagagcag tcaccactgc caccgggtcc 1500

atttggatgt caaattgtcc ctccaaatgg tagtatgcaa ttagtcattt gctatcacgg 1560

aactaggaga gcacactaat ctaaattctt gtttcttgtg ttttgaaaat atttttaatg 1620

aatgaataat tttgcagaag caacaccaaa aactatctta aggacgatgg gtgtcaaggg 1680

tcttactctt ttccacttga agagtcatct tcaggtactt catcatgctc acatgttcct 1740

caaaagtctt aaaaacaact ggttctaaat gtttctcatg tgatcagaaa tataggttag 1800

gtaaacaatc tgataaagag gggtcagagc aatctaaaga tggtaagttg ttatccagtt 1860

aatgttcaat tctttctgtg gtgtttctaa ttttttttat gatttcaaag ttcaatttga 1920

atcaacgcaa cctgtatttt attaacaggt gcactttttc tttatgacac tctgtatgat 1980

gtttattgct attatgattg atcaatggtc tctatgtgtt agtttcctta ttgttttttg 2040

tgaaatgata tatcacctat gtgtgaacat atagtatgta gtcttttatg aaagatggaa 2100

gttgatgata actttgtaaa ggagaatctg gtcttttcct agttataaaa tggacatctg 2160

ttgtggatca acagcgtctg tggtaaggat gcagaatgag actaataagg aagactacag 2220

gaagggtcag agtagtctgt tcttatgatg actaaatatg caggattttt tagtcatagt 2280

gaggctatgg ttgataggga tgcagagcag attgatactg ccgaaattac tgcatcatgg 2340

gaggtagaag agatggcctg gacatttgtt acttgattag gatgttggtg ctaacaataa 2400

tttgtaaagg gatttggtta tatgcatttc caaatgccct atccaaacac aaattgaact 2460

tgcctcatat acacctgaca cctcacatga gtatacacac gtgtacttct aaaaatgata 2520

cagtgctgat gcatattgtc attctttgcc aaggcctaca agagtatgtt ctcattttca 2580

atttcaattt gttttcctag tgcaaatcaa gttgaagatt tggatttacc actcggtggc 2640

ttgacctcag ttaggttgag tgtggatgcc aatcatcact gttctcctgt gatagagtaa 2700

tgaaccatgc agcattcgga tatgtaccta gaggggcgga tgatgatctg ctagtgcgaa 2760

tatgatcctt caaattcatc aacatatatg ctcatgagaa tgttgaacct tgagacccaa 2820

gctgtagtac agggctatgg acatagtaaa gactacagat gtagcagatt ttagttagat 2880

ctgtgactca taataagaca aaattagctc tttcagtatc catccacttg gaataatctc 2940

caccctttct gtgttttaat atttttaact ttttttttga aggatcacct gaccacctct 3000

cactagaaga atttgtttag gaagaagcat gtgacggttt gttggtgaat attttttttt 3060

ctttctcaaa tatgctggag aactgtgtat attgctttaa gacgaaaatt taaatattta 3120

caataacccc acacactaga caaacttcag gttacatact cggcagatat agaagataaa 3180

cccgaccaaa gctagctaaa tgaccttaag tggcagcaac ctcaggttgc accaaactcc 3240

gagcttctgc taaacaccaa aggtgtcctt cctcagttac ctgtctgagg attggctgca 3300

tgcttatttg ctcacaaaat tttcacatga attgtagcag aaaactatgg attactataa 3360

tggatttgaa tgtattgaga tctgcagtgt gagcacatcc cttctaattt gtgcggcatt 3420

ggctataaat tgggaaaaaa ggagagacat tcatgttaac tgtttatgaa ttacaatcaa 3480

tagtcatgct tcttatagga tcaccacact acgacatgca taatcatgtc cagatggagt 3540

cctccaattg catctgcata tatgcaatga ataattgaaa taaaaggaac agatttaaaa 3600

ccatatgttt ctttttttgg caccacggtg tttgcttata ttattactaa actgaaaggt 3660

gttgtcattg cgtaccacct ttcctctgca gttattgtat ctttaccaaa tctttaatct 3720

gcagggaatt ttctgtttaa aagagcacca ctaatctcat atggactaag actaactgta 3780

ttatactgca tggtttagta ttatcaatcc tcagtcgcaa gttatgaaat aaaatagaga 3840

aatgtctagt taaaacctgt gtatgtatgt gacatgtata tagcttctta ccatatggca 3900

tatgttcaag ttatccattt ttcttgggtt taaagtttga aagaagtgaa agttattttg 3960

gttcttgtac taatttctgt cctctgtttt ccccaaattg cagcttccta tcttctagat 4020

gctcaaagtg gaatgagtgt gtcccctaga gttgctgccc aggatatgaa agagtatggt 4080

tcatcagatg tttcttgtcc agcatattat tcttcttttt aggcagactg agtactctta 4140

gcatatttgc tgtgattgtg ctatttgaaa gagataatgt catgatactt gctgcagaag 4200

ccaagaagtt aaagaagcac tgagagcgca gatggaagtg caacgaaggc tgcatgaaca 4260

agtggaggta attctggtta tttgttctat tatgcccttg aattagtttc ctgaattctg 4320

taaagaaaaa aagccacctc ttgtagtttt gcttttgacc attcattgag ttaatttggt 4380

aatatattct ttatatgcaa atgatgcgga atcctttggt ttcgcttatc catatattca 4440

ctttaactag tgaactgcat atgagtcaat tgttctgaag gaatcatgaa tccagcatcg 4500

aaagtttcca taatctgtgt gttcttgctt ggaagtagta ttgttaaagg gtgctttcat 4560

gtttgcaaat agtatgttga ttaaagagtt tcttaataaa agtaaaaaaa aaagagcaaa 4620

tctcaggaaa caaacgatta gttcaggagc tgaccataac tgaaacattg tggacaacag 4680

gaccttcagg gtatgtgctc tctatggagc acatctgaac gactggaccc aatgtgggat 4740

gcatctattt gtaacagtcg caacagtttg tgcttgtctt gaacagctgc gtacaaggcc 4800

tgctcattac aatccttggc tggttttact attgtagcag gtccaaaagc gcgtgcagat 4860

cagaatggaa gcacttgaga agtacatcga cagtatccta gagagcgcat gcaagatggt 4920

tactgaacaa tttgcttcga gtggcttcag tatctccaac cctgatctcc cggagatatc 4980

ccctggaggg gtcatgtgtg gctccacgga cacgttgggc tcgtcggtgt tgaaccagct 5040

ttctgtgagc tccatcgact cgcacagtcc aggaggcaaa ccttctccat caggcatgga 5100

aggtccgaca ctgctccaga agtcgcctga gctcaagcgg aggtcctctt gaactgtgac 5160

agcgaattct gaggttggcg gtgatggctg tctctgtgga gtgtctgaat atggtggtga 5220

caatggaaat ggtggcccag tcttgtggta gctgactttc tctccaggta gcaggacgtg 5280

ctgtgtttgt tgatcaatcc aagtatcaaa cggacctact atgttcatgt gaacttcctc 5340

aagtgctagt taaaaagttt tcatgcttct gtcatgagat tatgatccta gtagcatcct 5400

tagcacactt gaaacgttga ctcgtgtcct agtgtcgttt gtgttagtcc atatgtgaac 5460

aatgattcat gttggaacat gctagctaac accagatgat tcaagcttcg tatttttgtc 5520

tcaattgtcc atgcaggctt cccagcactt gctgcaattt attcccagca cttcctgcaa 5580

tttattcgac ttaaaggcta ctgtatttag c 5611

<210> 3

<211> 771

<212> DNA

<213> 人工序列（Artificial Sequence）

<400> 3

atgttcccgc ctggcctgat ccaccaccgc cctgacgcta ccgctcccgg cgatgggcca 60

ccgcgctccg gccccggtgg gccgagcctt gtactgacgg cggaccccaa gcccaggcta 120

cggtggacgg ccgacctcca cgagcgtttc gtcgacgccg tggcccagct cggcggaccc 180

gagaaagcaa caccaaaaac tatcttaagg acgatgggtg tcaagggtct tactcttttc 240

cacttgaaga gtcatcttca gaaatatagg ttaggtaaac aatctgataa agaggggtca 300

gagcaatcta aagatgcttc ctatcttcta gatgctcaaa gtggaatgag tgtgtcccct 360

agagttgctg cccaggatat gaaagaaagc caagaagtta aagaagcact gagagcgcag 420

atggaagtgc aacgaaggct gcatgaacaa gtggagcagg tccaaaagcg cgtgcagatc 480

agaatggaag cacttgagaa gtacatcgac agtatcctag agagcgcatg caagatggtt 540

actgaacaat ttgcttcgag tggcttcagt atctccaacc ctgatctccc ggagatatcc 600

cctggagggg tcatgtgtgg ctccacggac acgttgggct cgtcggtgtt gaaccagctt 660

tctgtgagct ccatcgactc gcacagtcca ggaggcaaac cttctccatc aggcatggaa 720

ggtccgacac tgctccagaa gtcgcctgag ctcaagcgga ggtcctcttg a 771

Claims (6)

1.蛋白质在提高玉米抗旱性中的应用,

所述蛋白质为如下A1）或A2）的蛋白质：

A1）氨基酸序列是序列表中序列1的蛋白质；

A2）在A1）的N末端或/和C末端连接蛋白标签得到的融合蛋白质。

2.与权利要求1中所述的蛋白质相关的生物材料在提高玉米抗旱性中的应用,

所述生物材料为下述任一种：

B1）编码权利要求1中所述蛋白质的核酸分子；

B2）含有B1）所述核酸分子的表达盒；

B3）含有B1）所述核酸分子的重组载体、或含有B2）所述表达盒的重组载体；

B4）含有B1）所述核酸分子的重组微生物、或含有B2）所述表达盒的重组微生物、或含有B3）所述重组载体的重组微生物。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：B1）所述核酸分子为如下b1）或b2)所示的所述蛋白质的编码基因：

b1）编码链的编码序列是序列表中序列3的核苷酸的cDNA分子或DNA分子；

b2）核苷酸是序列表中SEQ ID No.3的cDNA分子或DNA分子。

4.根据权利要求1-3中任一权利要求所述的应用，其特征在于：所述提高玉米的抗旱性为提高玉米对干旱的耐受性。

5.一种培育抗旱玉米的方法，包括提高玉米中权利要求1中所述蛋白质的编码基因的表达量，得到抗旱玉米；所述抗旱玉米的抗旱性高于所述玉米。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述提高玉米中权利要求1中所述蛋白质的编码基因的表达量是通过将权利要求1中所述蛋白质的编码基因导入玉米实现的。