CN114641472A - 用于治疗疾病的双亮氨酸拉链(dlk)激酶的双环[1.1.1]戊烷抑制剂 - Google Patents

Abstract

本文披露了抑制双亮氨酸拉链(DLK)激酶(MAP3K12)的激酶活性的化合物、药物组合物和治疗DLK介导的疾病的方法，这些疾病是例如由中枢神经系统和周围神经系统神经元的创伤性损伤(例如中风、颅脑损伤、脊髓损伤)引起的神经性疾病、或由慢性神经退行性病症(例如，阿尔茨海默病、额颞痴呆、帕金森病、亨廷顿病、肌萎缩性侧索硬化症、脊髓小脑性共济失调、进行性核上性麻痹、路易体病、肯尼迪病和其他相关病症)引起的神经性疾病、由神经损伤导致的神经病变(化学疗法诱导的周围神经病变、糖尿病神经病变和相关病症)引起的神经性疾病、以及由药物干预导致的认知障碍(例如，化学疗法诱导的认知障碍，也称为化疗脑)引起的神经性疾病。

Description

用于治疗疾病的双亮氨酸拉链(DLK)激酶的双环[1.1.1]戊烷 抑制剂

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年10月21日提交的美国申请号62/923,929的优先权和权益，将其全部内容通过引用并入本文。

发明内容

本文披露了新的取代的双环[1.1.1]戊烷化合物和组合物及其作为用于治疗疾病的药物的应用。与先前专利申请(WIPO公开号WO2018107072A1)中报道的相关类似物相比，这些化合物中的一些令人惊讶地显示出改善的代谢和药代动力学特性。还提供了抑制人或动物受试者中双亮氨酸拉链的激酶活性的方法，该方法用于治疗如神经性疾病(由中枢神经系统和周围神经系统神经元的创伤性损伤引起的)、神经退行性病症、由神经损伤引起的神经病变等疾病，以及治疗由药物干预引起的疼痛和认知障碍。

双亮氨酸拉链激酶(DLK)是混合谱系激酶(MLK)家族的成员，其是c-Jun N-末端激酶(JNK)的应激诱导的神经元活化所必需的。反过来，JNK涉及对细胞调节(包括细胞凋亡和细胞增殖)而言重要的途径。JNK已经涉及天然存在的细胞死亡和神经元的病理性死亡。

已经发现了新颖的化合物和药物组合物(已经发现其抑制DLK的激酶活性)，以及合成和使用这些化合物的方法，包括通过施用这些化合物用于治疗患者的DLK介导的疾病的方法。

附图说明

图1A示出了与DLK结合的化合物1a的晶体结构。图1B示出了与DLK结合的化合物13的晶体结构。图1C示出了与DLK结合的化合物4b的晶体结构。

具体实施方式

本文提供了实施例1，一种具有结构式(I)的化合物

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；

R²选自氟和NR^5aR^5b；

R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；

R⁴是卤代；

R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的单环杂环烷基；并且

每个R⁶独立地选自氰基、卤代和羟基。

本文还提供了实施例1a，一种具有结构式(I’)的化合物

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；

R²选自氟和NR^5aR^5b；

R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；

R⁴是卤代；

R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的单环杂环烷基；并且

每个R⁶独立地选自氰基、卤代和羟基；

条件是R²不是吗啉基团。

本文披露的化合物具有有用的DLK抑制活性，并且可以用于治疗或预防其中DLK起着积极作用的疾病或病症。因此，在广义上，某些实施例还提供了包含一种或多种本文披露的化合物以及药学上可接受的载体的药物组合物，以及制备和使用这些化合物和组合物的方法。某些实施例提供了用于抑制DLK的方法。其他实施例提供了用于治疗需要这种治疗的患者的DLK介导的障碍的方法，这些方法包括向所述患者施用治疗有效量的如本文披露的化合物或组合物。还提供了本文披露的化合物用于制造用于治疗通过抑制DLK而改善的疾病或病症的药物的用途。

在某些实施例中，R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的4-7元单环杂环烷基。在某些实施例中，R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的5-7元单环杂环烷基。在某些实施例中，R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的4-6元单环杂环烷基。在某些实施例中，R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的5-6元单环杂环烷基。

在某些实施例中，由R^5a、R^5b和居间的氮形成的单环杂环烷基只包含一个-CF₂-。在某些实施例中，由R^5a、R^5b和居间的氮形成的单环杂环烷基选自3,3-二氟吡咯烷-1-基、3,3-二氟哌啶-1-基和4,4-二氟哌啶-1-基。在某些实施例中，由R^5a、R^5b和居间的氮形成的单环杂环烷基选自3,3-二氟哌啶-1-基和4,4-二氟哌啶-1-基。在某些实施例中，由R^5a、R^5b和居间的氮形成的单环杂环烷基是4,4-二氟哌啶-1-基。

在某些实施例中，每个R⁶选自氰基和卤代。在某些实施例中，每个R⁶是卤代。在某些实施例中，每个R⁶是氟。

本文还提供了实施例2，具有结构式(II)的实施例1或1a的化合物：

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；

R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；并且

R⁴是卤代。

本文还提供了实施例3，具有结构式(IIa)的实施例2的化合物：

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；并且

R⁴是卤代。

本文还提供了实施例4，具有结构式(IIb)的实施例2的化合物：

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；并且

R⁴是卤代。

本文还提供了实施例5，具有结构式(III)的实施例1的化合物：

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；

R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；

R⁴是卤代；

R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的单环杂环烷基；并且

每个R⁶独立地选自氰基、卤代和羟基。

本文还提供了实施例6a，具有结构式(III’)的实施例1a的化合物：

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；

R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；

R⁴是卤代；

R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的单环杂环烷基；并且

每个R⁶独立地选自氰基、卤代和羟基，

条件是当R^5a和R^5b结合时不形成吗啉基团。

本文还提供了实施例7，具有结构式(IIIa)的实施例5的化合物：

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；

R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；

R⁴是卤代；

R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的单环杂环烷基；并且

每个R⁶独立地选自氰基、卤代和羟基。

本文还提供了实施例8a，具有结构式(IIIa’)的实施例6a的化合物：

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；

R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；

R⁴是卤代；

R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的单环杂环烷基；并且

每个R⁶独立地选自氰基、卤代和羟基，

条件是当R^5a和R^5b结合时不形成吗啉基团。

本文还提供了实施例9，具有结构式(IIIb)的实施例5的化合物：

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；

R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；

R⁴是卤代；

R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的单环杂环烷基；并且

每个R⁶独立地选自氰基、卤代和羟基。

本文还提供了实施例10a，具有结构式(IIIb’)的实施例6a的化合物：

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；

R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；

R⁴是卤代；

R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的单环杂环烷基；并且

每个R⁶独立地选自氰基、卤代和羟基，

条件是当R^5a和R^5b结合时不形成吗啉基团。

实施例11：如实施例5-10a中任一项所述的化合物，其中R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的4-7元单环杂环烷基。

实施例12：如实施例5-10a中任一项所述的化合物，其中R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的5-7元单环杂环烷基。

实施例13：如实施例5-10a中任一项所述的化合物，其中R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的4-6元单环杂环烷基。

实施例14：如实施例5-10a中任一项所述的化合物，其中R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的5-6元单环杂环烷基。

实施例15：如实施例5-14中任一项所述的化合物，其中每个R⁶是卤代。

实施例16：如实施例15所述的化合物，其中每个R⁶是氟。

实施例17：如实施例16所述的化合物，其中由R^5a、R^5b和居间的氮形成的单环杂环烷基包含一个或两个-CF₂-。

实施例18：如实施例17所述的化合物，其中由R^5a、R^5b和居间的氮形成的单环杂环烷基只包含一个-CF₂-。

实施例19：如实施例18所述的化合物，其中由R^5a、R^5b和居间的氮形成的单环杂环烷基选自3,3-二氟吡咯烷-1-基、3,3-二氟哌啶-1-基和4,4-二氟哌啶-1-基。

实施例20：如实施例18所述的化合物，其中由R^5a、R^5b和居间的氮形成的单环杂环烷基选自3,3-二氟哌啶-1-基和4,4-二氟哌啶-1-基。

实施例21：如实施例20所述的化合物，其中由R^5a、R^5b和居间的氮形成的单环杂环烷基是4,4-二氟哌啶-1-基。

实施例22：如实施例18所述的化合物，其中由R^5a、R^5b和居间的氮形成的单环杂环烷基选自：

实施例23：如实施例22所述的化合物，其中由R^5a、R^5b和居间的氮形成的杂环烷基是

实施例24：如实施例1-23中任一项所述的化合物，其中R¹选自C_1-6烷基和C_3-7环烷基，其中任一个任选地被一个、两个或三个R⁴取代。

实施例25：如实施例1-24中任一项所述的化合物，其中R⁴是氟。

实施例26：如实施例24和25中任一项所述的化合物，其中R¹选自异丙基、三氟甲基和环丙基。

实施例27：如实施例1或1a所述的化合物，该化合物选自：

或其盐。

在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的烷基。

在一些实施例中，R¹选自C_1-6烷基和C_3-7环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的C_1-6烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的C_3-7环烷基。

在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的C₁烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的C₂烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的C₃烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的C₄烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的C₅烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的C₆烷基。

在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的甲基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的乙基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的丙基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的正丙基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的异丙基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的丁基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的正丁基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的异丁基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的仲丁基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的叔丁基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的戊基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的己基。

在一些实施例中，R¹是未经取代的烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个R⁴取代的烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被两个R⁴取代的烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被三个R⁴取代的烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被四个R⁴取代的烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被五个R⁴取代的烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被六个R⁴取代的烷基。

在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的环烷基。

在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的C₃环烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的C₄环烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的C₅环烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的C₆环烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的C₇环烷基。

在一些实施例中，R¹是环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基或环癸基，每个任选地被一个或多个R⁴取代。

在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的环丙基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的环丁基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的环戊基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的环己基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的环庚基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的环辛基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的环壬基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个或多个R⁴取代的环癸基。

在一些实施例中，R¹是未经取代的环烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被一个R⁴取代的环烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被两个R⁴取代的环烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被三个R⁴取代的环烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被四个R⁴取代的环烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被五个R⁴取代的环烷基。在一些实施例中，R¹是任选地被六个R⁴取代的环烷基。

在一些实施例中，R²是氟。在一些实施例中，R²是NR^5aR^5b。

在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是4-7元杂环烷基。在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是4-6元杂环烷基。在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是5-6元杂环烷基。在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是5-7元杂环烷基。

在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是4元杂环烷基。在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是5元杂环烷基。在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是6元杂环烷基。在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是7元杂环烷基。

在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是未经取代的。在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基被一个R⁶取代。在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基被两个R⁶取代。在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基被三个R⁶取代。在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基被四个R⁶取代。

在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是

在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是

在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是

在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是

在一些实施例中，由R^5a、R^5b形成的单环杂环烷基是

在一些实施例中，R⁶是氰基。在一些实施例中，R⁶是卤代。在一些实施例中，R⁶是羟基。

在一些实施例中，R⁶是F。在一些实施例中，R⁶是Cl。在一些实施例中，R⁶是Br。在一些实施例中，R⁶是I。

在一些实施例中，具有式(I)的化合物的盐是药学上可接受的盐。在一些实施例中，具有式(II)的化合物的盐是药学上可接受的盐。在一些实施例中，具有式(IIa)的化合物的盐是药学上可接受的盐。在一些实施例中，具有式(IIb)的化合物的盐是药学上可接受的盐。在一些实施例中，具有式(III)的化合物的盐是药学上可接受的盐。在一些实施例中，具有式(IIIa)的化合物的盐是药学上可接受的盐。在一些实施例中，具有式(IIIb)的化合物的盐是药学上可接受的盐。

还提供了其中可以将以上任何实施例与这些实施例中的任一个或多个组合的实施例，条件是该组合不互相排斥。

如本文所用，当一个被定义为与另一个不同时，两个实施例是“互相排斥的”。换言之，当两个实施例定义相同的一个或多个变量时，使得两个定义不能同时存在。例如，其中两个基团组合形成环烷基的实施例与其中一个基团是乙基和另一个基团是氢的实施例是互相排斥的。类似地，其中一个基团是CH₂的实施例与其中相同基团是NH的实施例是互相排斥的。

还提供了选自本文披露的实例的化合物。

还提供了抑制至少一种DLK功能的方法，该方法包括使DLK与如本文所述的化合物接触的步骤。可以监测细胞表型、细胞增殖、DLK的活性、由活性DLK产生的生化输出的变化、DLK的表达、或DLK与天然结合配偶体的结合。此类方法可以是疾病的治疗方式、生物学测定、细胞测定、生化测定等。

本文还提供了治疗DLK介导的疾病的方法，该方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的如本文披露的化合物或其盐。

在某些实施例中，该疾病选自神经退行性疾病。

本文还提供了如本文披露的化合物，其用作药物。

本文还提供了如本文披露的化合物，其用作用于治疗DLK介导的疾病的药物。

还提供了如本文所披露的化合物作为药物的用途。

还提供了如本文披露的化合物作为用于治疗DLK介导的疾病的药物的用途。

还提供了如本文披露的化合物，用于制造用于治疗DLK介导的疾病的药物。

还提供了如本文披露的化合物用于治疗DLK介导的疾病的用途。

本文还提供了抑制DLK的方法，该方法包括使DLK与如本文披露的化合物或其盐接触。

本文还提供了一种用于在患者中实现效果的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的如本文披露的化合物或其盐，其中该效果选自认知增强。

在某些实施例中，DLK介导的疾病选自以下：由中枢神经系统和周围神经系统神经元的创伤性损伤(例如中风、颅脑损伤、脊髓损伤)引起的疾病、由慢性神经退行性病症(例如阿尔茨海默病、额颞痴呆、帕金森病、亨廷顿病、肌萎缩性侧索硬化症、脊髓小脑性共济失调、进行性核上性麻痹、路易体病、肯尼迪病和其他相关病症)引起的疾病、由神经损伤导致的神经病变(化学疗法诱导的周围神经病变、糖尿病神经病变和相关病症)引起的疾病、以及由药物干预导致的认知障碍(例如化学疗法诱导的认知障碍，也称为化疗脑(chemobrain))引起的疾病。

还提供了调节受试者中DLK介导的功能的方法，该方法包括施用治疗有效量的如本文披露的化合物。

还提供了药物组合物，该药物组合物包含如本文所披露的化合物以及药学上可接受的载体。

在某些实施例中，将药物组合物配制为用于口服施用。

在某些实施例中，口服药物组合物选自片剂和胶囊。

定义

如本文所用，以下术语具有所指示的含义。

当披露值范围以及使用符号“从n₁…至n₂”或“在n₁…与n₂之间”(其中n₁和n₂是数字)时，则除非另外说明，否则此符号旨在包括这些数字本身以及它们之间的范围。此范围可以是整的或在这些端值之间连续的并且包括这些端值。通过举例，范围“从2至6个碳”旨在包括两个、三个、四个、五个以及六个碳，因为碳以整数单位出现。通过举例，将范围“从1μM至3μM(微摩尔)”(其旨在包括1μM、3μM和介于两者之间的所有数)与有效数字的任何数字(例如，1.255μM、2.1μM、2.9999μM等)进行比较。

如本文所用，术语“约”旨在限定它所修饰的数值，表示此值在误差界限内可变。当未叙述具体误差界限(如图表或数据表中给出的平均值的标准差)时，术语“约”应理解为意指涵盖所叙述值的范围及还有通过四舍五入到该数字而被包括的范围，考虑到了有效数字。

如本文单独或组合所用，术语“酰基”是指附接到烯基、烷基、芳基、环烷基、杂芳基、杂环或任何其他部分上的羰基，其中附接到羰基上的原子是碳。“乙酰基”基团是指–C(O)CH₃基团。“烷基羰基”或“烷酰基”基团是指通过羰基基团附接到母体分子部分上的烷基基团。此类基团的实例包括甲基羰基和乙基羰基。酰基基团的实例包括甲酰基、烷酰基和芳酰基。

如本文单独或组合所用，术语“烯基”是指具有一个或多个双键并含有从2至20个碳原子的直链或支链烃基。在某些实施例中，所述烯基将包含2至6个碳原子。术语“亚烯基”是指附接在两个或更多个位置处的碳-碳双键体系，如亚乙烯基[(-CH＝CH-)、(-C::C-)]。适合的烯基基团的实例包括乙烯基、丙烯基、2-甲基丙烯基、1,4-丁二烯基等。除非另外说明，否则术语“烯基”可以包括“亚烯基”基团。

如本文单独或组合所用，术语“烷氧基”是指烷基醚基团，其中术语烷基是如下所定义的。适合的烷基醚基团的实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等。

如本文单独或组合所用，术语“烷基”是指含有1至20个碳原子的直链或支链烷基基团。在某些实施例中，所述烷基将包含1至10个碳原子。在另外的实施例中，所述烷基将包含1至8个碳原子。烷基基团可以如本文所定义的那样任选地被取代。烷基基团的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、己基、辛基、壬基等。如本文单独或组合所用，术语“亚烷基”是指附接在两个或更多个位置的直链饱和烃，如亚甲基(-CH₂-)、亚乙基(-CH₂CH₂-)和亚丙基(-CH₂CH₂CH₂-)。因此，“亚烷基”可以描述为-(CH₂)_n-，其中n是正整数。在一些实施例中，n选自1至20。在一些实施例中，n选自1至10。在一些实施例中，n选自1至8。在一些实施例中，n选自1至6。除非另外说明，否则术语“烷基”可以包括“亚烷基”基团。

如本文单独或组合所用，术语“烷基氨基”是指通过氨基基团附接到母体分子部分上的烷基基团。适合的烷基氨基基团可以是单烷基化的或二烷基化的形成的基团，例如N-甲基氨基、N-乙基氨基、N,N-二甲基氨基、N,N-乙基甲基氨基等。

如本文单独或组合所用，术语“亚烷基”是指烯基基团，其中碳-碳双键的一个碳原子属于烯基基团所附接的部分。

如本文单独或组合所用，术语“烷硫基”是指烷基硫醚(R-S-)基团，其中术语烷基是如上所定义的，并且其中硫可以是单或双氧化的。适合的烷基硫醚基团的实例包括甲硫基、乙硫基、正丙硫基、异丙硫基、正丁硫基、异丁硫基、仲丁硫基、叔丁硫基、甲磺酰基、乙亚磺酰基等。

如本文单独或组合所用，术语“炔基”是指具有一个或多个三键并且含有从2至20个碳原子的直链或支链烃基。在某些实施例中，所述炔基包含从2至6个碳原子。在另外的实施例中，所述炔基包含从2至4个碳原子。术语“亚炔基”是指附接在两个位置处的碳-碳三键，如亚乙炔基(-C:::C-、-C≡C-)。炔基基团的实例包括乙炔基、丙炔基、羟基丙炔基、丁炔-1-基、丁炔-2-基、戊炔-1-基、3-甲基丁炔-1-基、己炔-2-基等。除非另外说明，否则术语“炔基”可以包括“亚炔基”基团。

如本文单独或组合所用，术语“酰胺基”和“氨甲酰基”是指如下所述通过羰基基团附接到母体分子部分上的氨基基团，或反之亦然。如本文单独或组合所用，术语“C-酰胺基”是指-C(O)N(RR’)基团，其中R和R'是如本文所定义的或如通过所指定的具体枚举的“R”基团定义的。如本文单独或组合所用，术语“N-酰胺基”是指RC(O)N(R’)-基团，其中R和R'是如本文所定义的或如通过所指定的具体枚举的“R”基团定义的。如本文单独或组合所用，术语“酰基氨基”包括通过氨基基团附接到母体部分上的酰基基团。“酰基氨基”基团的实例是乙酰基氨基(CH₃C(O)NH-)。

如本文单独或组合所用，术语“氨基”是指-NRR’，其中R和R’独立地选自氢、烷基、酰基、杂烷基、芳基、环烷基、杂芳基和杂环烷基，它们中的任一个可以本身任选地被取代。另外，R和R’可以组合以形成杂环烷基，其中的任一个可以任选地被取代。

如本文单独或组合所用，术语“芳基”意指含有一个、两个或三个环的碳环芳香族系，其中此类多环环系稠合在一起。术语“芳基”包括芳香族基团，如苯基、萘基、蒽基和菲基。

如本文单独或组合所用，术语“芳基烯基”或“芳烯基”是指通过烯基基团附接到母体分子部分上的芳基基团。

如本文单独或组合所用，术语“芳基烷氧基”或“芳烷氧基”是指通过烷氧基基团附接到母体分子部分上的芳基基团。

如本文单独或组合所用，术语“芳基烷基”或“芳烷基”是指通过烷基基团附接到母体分子部分上的芳基基团。

如本文单独或组合所用，术语“芳基炔基”或“芳炔基”是指通过炔基基团附接到母体分子部分上的芳基基团。

如本文单独或组合使用，术语“芳基烷酰基”或“芳烷酰基”或“芳酰基”是指衍生自经芳基取代的链烷羧酸的酰基基团，如苯甲酰基、萘甲酰基、苯乙酰基、3-苯基丙酰基(氢肉桂酰基)、4-苯基丁酰基、(2-萘基)乙酰基、4-氯氢肉桂酰基等。

如本文单独或组合所用，术语“芳氧基”是指通过氧基附接到母体分子部分上的芳基基团。

如本文单独或组合所用，术语“苯并(benzo)”和“苯并(benz)”是指衍生自苯的二价基团C₆H₄＝。实例包括苯并噻吩和苯并咪唑。

如本文单独或组合所用，术语“氨基甲酸酯”是指氨基甲酸的酯(–NHCOO–)，其可以从氮或酸端附接到母体分子部分上，并且其可以如本文所定义的那样任选地被取代。

如本文单独或组合所用，术语“O-氨甲酰基”是指-OC(O)NRR’基团，其中R和R'是如本文所定义。

如本文单独或组合所用，术语“N-氨甲酰基”是指ROC(O)NR’基团，其中R和R’是如本文所定义。

如本文所用，术语“羰基”当单独时包括甲酰基[-C(O)H]，并且当组合时是-C(O)-基团。

如本文所用，术语“羧基(carboxyl)”或“羧基(carboxy)”是指-C(O)OH或对应的“羧酸根”阴离子，如在羧酸盐中。“O-羧基”基团是指RC(O)O-基团，其中R是如本文所定义的。“C-羧基”基团是指-C(O)OR基团，其中R是如本文所定义的。

如本文单独或组合所用，术语“氰基”是指-CN。

如本文单独或组合所用，术语“环烷基”或可替代地“碳环”是指饱和的或部分饱和的单环、二环或三环烷基基团，其中每个环部分含有从3至12个碳原子环成员，并且可以任选地是如本文所定义的任选地被取代的苯并稠合环系。在某些实施例中，所述环烷基将包含5至7个碳原子。在某些实施例中，所述环烷基将包含螺环环系。此类环烷基基团的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、四氢萘基、茚满基、八氢萘基、2,3-二氢-1H-茚基、金刚烷基等。如本文所用，“二环”和“三环”旨在包括两个稠合的环系，如十氢萘、八氢萘以及多环(多中心)饱和的或部分不饱和的类型。后一种类型的异构体通常以双环[1.1.1]戊烷、樟脑、金刚烷和双环[3.2.1]辛烷为例。

如本文单独或组合所用，术语“酯”是指对在碳原子处连接的两个部分进行桥接的羧基基团。

如本文单独或组合所用，术语“醚”是指对在碳原子处连接的两个部分进行桥接的氧基基团。

如本文单独或组合所用，术语“卤代”或“卤素”是指氟、氯、溴或碘。

如本文单独或组合所用，术语“卤代烷氧基”是指通过氧原子附接到母体分子部分上的卤代烷基基团。

如本文单独或组合所用，术语“卤代烷基”是指具有如上所定义的含义的烷基基团，其中一个或多个氢被卤素代替。确切地包括单卤代烷基、双卤代烷基和多卤代烷基基团。举一个例子，单卤代烷基基团可以在该基团内具有碘、溴、氯或氟原子。双卤代和多卤代烷基基团可以具有两个或更多个相同的卤代原子或具有不同的卤代基团的组合。卤代烷基基团的实例包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、五氟乙基、七氟丙基、二氟氯甲基、二氯氟甲基、二氟乙基、二氟丙基、二氯乙基和二氯丙基。“卤代亚烷基”是指附接在两个或更多个位置的卤代烷基基团。实例包括氟亚甲基(-CFH-)、二氟亚甲基(-CF₂-)、氯亚甲基(-CHCl-)等。

如本文单独或组合所用，术语“杂烷基”是指稳定的直链或支链或其组合，其为完全饱和的或含有从1至3个不饱和度，其由所述数量的碳原子和一个、两个或三个选自O、N和S的杂原子组成，并且其中可以将N和S原子任选地氧化并且可以将N杂原子任选地季铵化。一个或多个杂原子可以放置在杂烷基基团的任意内部位置。多达两个杂原子可以是连续的，如，例如-CH₂-NH-OCH₃。

如本文单独或组合所用，术语“杂芳基”是指3至15元不饱和的杂单环，或稠合的单环、二环或三环环系，其中该稠环中的至少一个为芳香族的，该“杂芳基”含有至少一个选自N、O和S的原子。在某些实施例中，所述杂芳基将包含1至4个杂原子作为环成员。在另外的实施例中，所述杂芳基将包含1至2个杂原子作为环成员。在某些实施例中，所述杂芳基将包含5至7个原子。该术语还包括稠合的多环基团，其中杂环与芳基环稠合，其中杂芳基环与其他杂芳基环稠合，其中杂芳基环与杂环烷基环稠合，或其中杂芳基环与环烷基环稠合。杂芳基基团的实例包括吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三唑基、吡喃基、呋喃基、噻吩基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻唑基、噻二唑基、异噻唑基、吲哚基、异吲哚基、吲嗪基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、吲唑基、苯并三唑基、苯并二氧杂环戊烯基、苯并吡喃基、苯并噁唑基、苯并噁二唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、色酮基、香豆素基、苯并吡喃基、四氢喹啉基、四唑并哒嗪基、四氢异喹啉基、噻吩并吡啶基、呋喃并吡啶基、吡咯并吡啶基等。示例性三环杂环基团包括咔唑基、苯并吲哚基、菲咯啉基、二苯并呋喃基、吖啶基、菲啶基、咕吨基等。

如本文单独或组合所用，术语“杂环烷基”和可互换地“杂环”每个是指含有至少一个杂原子作为环成员的饱和、部分不饱和的、或完全不饱和(但非芳香族)的单环、二环、或三环杂环基团，其中每个所述杂原子可以独立地选自氮、氧、和硫。在某些实施例中，所述杂环烷基将包含螺环环系。在某些实施例中，所述杂环烷基将包含1至4个杂原子作为环成员。在另外的实施例中，所述杂环烷基将包含1至2个杂原子作为环成员。在某些实施例中，所述杂环烷基将在每个环中包含3至8个环成员。在另外的实施例中，所述杂环烷基将在每个环中包含3至7个环成员。在又另外的实施例中，所述杂环烷基将在每个环中包含5至6个环成员。“杂环烷基”和“杂环”旨在包括砜、亚砜、具有叔氮环成员的N-氧化物以及碳环稠合环系和苯并稠合环系；另外，这两个术语还包括如下体系，其中杂环与如本文所定义的芳基基团或另外的杂环基团稠合。杂环基团的实例包括吖丙啶基、氮杂环丁烷基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯基、二氢异吲哚基、二氢异喹啉基、二氢噌啉基、二氢苯并二噁英基、二氢[1,3]噁唑并[4,5-b]吡啶基、苯并噻唑基、二氢吲哚基、二氢吡啶基、1,3-二噁烷基、1,4-二噁烷基、1,3-二氧戊环基、异二氢吲哚基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基、四氢吡啶基、哌啶基、硫代吗啉基等。除非明确地禁止，否则杂环基团可以任选地被取代。

如本文单独或组合所用，术语“肼基”是指由单键连接的两个氨基基团，即-N-N-。

如本文单独或组合所用，术语“羟基”是指-OH。

如本文单独或组合所用，术语“羟基烷基”是指通过烷基基团附接到母体分子部分上的羟基基团。

如本文单独或组合所用，术语“亚氨基”是指＝N-。

如本文单独或组合所用，术语“亚氨基羟基”是指＝N(OH)和＝N-O-。

短语“在主链中”是指起始于某基团与具有本文披露的任一式的化合物的附接点处的碳原子的最长连续链或相邻链。

术语“异氰酸基”是指-NCO基团。

术语“异硫氰酸基”是指-NCS基团。

短语“原子的线性链”是指独立地选自碳、氮、氧和硫的原子的最长直链。

如本文单独或组合所用，在没有另外明确定义的情况下，术语“低级”意指含有1至6个碳原子，并且包括6个碳原子(即，C₁-C₆烷基)。

如本文单独或组合所用，术语“低级芳基”意指苯基或萘基，其中的任一个可以如所提供的任选地被取代。

如本文单独或组合所用，术语“低级杂芳基”意指1)包含五个或六个环成员的单环杂芳基，其中一个至四个所述成员可以是选自N、O和S的杂原子，或2)二环杂芳基，其中每个稠合环包含五个或六个环成员，在它们之间包含一至四个选自N、O和S的杂原子。

如本文单独或组合所用，术语“低级环烷基”意指具有三至六个环成员的单环环烷基(即，C₃-C₆环烷基)。低级环烷基可以是不饱和的。低级环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。

如本文单独或组合所用，术语“低级杂环烷基”意指具有三至六个环成员的单环杂环烷基，其中一至四个可以是选自N、O和S的杂原子(即，C₃-C₆杂环烷基)。低级杂环烷基的实例包括吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基和吗啉基。低级杂环烷基可以是不饱和的。

如本文单独或组合所用，术语“低级氨基”是指-NRR’，其中R和R’独立地选自氢和低级烷基，其中的任一个可以任选地被取代。

如本文单独或组合所用，术语“巯基”是指RS-基团，其中R是如本文所定义的。

如本文单独或组合所用，术语“硝基”是指-NO₂。

如本文单独或组合所用，术语“氧基”或“氧杂”是指-O-。

如本文单独或组合所用，术语“氧代”是指＝O。

术语“全卤代烷氧基”是指烷氧基基团，其中所有的氢原子都被卤素原子代替。

如本文单独或组合所用，术语“全卤代烷基”是指烷基基团，其中所有的氢原子都被卤素原子代替。

术语“螺环环系”是指包含两个环的多环环系，使得单个原子是这两个环共用的。

如本文单独或组合所用，术语“磺酸酯”、“磺酸(sulfonic acid和sulfonic)”是指-SO₃H基团并且以盐形式使用其作为磺酸的阴离子。

如本文单独或组合所用，术语“硫烷基”是指-S-。

如本文单独或组合所用，术语“亚磺酰基”是指-S(O)-。

如本文单独或组合所用，术语“磺酰基”是指-S(O)₂-。

术语“N-磺酰胺基”是指RS(＝O)₂NR’-基团，其中R和R'是如本文所定义的。

术语“S-磺酰胺基”是指-S(＝O)₂NRR’基团，其中R和R’是如本文所定义的。

如本文单独或组合所用，术语“硫杂”和“硫代”是指-S-基团或醚，其中氧被硫代替。硫代基团的被氧化的衍生物(即亚磺酰基和磺酰基)被包括在硫杂和硫代的定义中。

如本文单独或组合所用，术语“硫醇”是指-SH基团。

如本文所用，术语“硫代羰基”当单独时包括硫代甲酰基-C(S)H，并且当组合时是-C(S)-基团。

术语“N-硫代氨基甲酰基”是指ROC(S)NR’-基团，其中R和R’是如本文所定义的。

术语“O-硫代氨基甲酰基”是指-OC(S)NRR’，其中R和R’是如本文所定义的。

术语“硫氰酸根”是指-CNS基团。

术语“三卤代甲磺酰胺基”是指X₃CS(O)₂NR-基团，其中X是卤素，并且R是如本文所定义的。

术语“三卤代甲磺酰基”是指X₃CS(O)₂-基团，其中X是卤素。

术语“三卤代甲氧基”是指X₃CO-基团，其中X是卤素。

如本文单独或组合所用，术语“三取代的甲硅烷基”是指在其三个自由价处被本文在取代的氨基的定义下所列出的基团取代的有机硅基团。实例包括三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、三苯基甲硅烷基等。

本文的任何定义可以与任何其他定义结合使用以描述复合结构基团。按照惯例，任何这样定义的尾随元素是附接到母体部分上的元素。例如，复合基团烷基酰胺基表示通过酰胺基基团附接到母体分子上的烷基基团，并且术语烷氧基烷基表示通过烷基基团附接到母体分子上的烷氧基基团。

当基团被定义为“无”时，意指所述基团是不存在的。

术语“任选地被取代的”意指前述基团可以被取代或不被取代。当被取代时，“任选地被取代的”基团的取代基可包括但不限于独立地选自以下基团或具体指定的一组基团(单独或组合)的一个或多个取代基：低级烷基、低级烯基、低级炔基、低级烷酰基、低级杂烷基、低级杂环烷基、低级卤代烷基、低级卤代烯基、低级卤代炔基、低级全卤代烷基、低级全卤代烷氧基、低级环烷基、苯基、芳基、芳氧基、低级烷氧基、低级卤代烷氧基、氧代、低级酰氧基、羰基、羧基、低级烷基羰基、低级羧酸酯、低级甲酰胺基、氰基、氢、卤素、羟基、氨基、低级烷基氨基、芳基氨基、酰胺基、硝基、硫醇、低级烷硫基、低级卤代烷硫基、低级全卤代烷硫基、芳硫基、磺酸根、磺酸、三取代的甲硅烷基、N₃、SH、SCH₃、C(O)CH₃、CO₂CH₃、CO₂H、吡啶基、噻吩、呋喃基、低级氨基甲酸酯和低级脲。在结构上可行的情况下，可以将两个取代基连接在一起以形成由零至三个杂原子组成的稠合的五元、六元或七元碳环或杂环，例如形成亚甲二氧基或亚乙二氧基。任选被取代的基团可以是未取代的(例如-CH₂CH₃)、完全取代的(例如-CF₂CF₃)、单取代的(例如-CH₂CH₂F)或以完全取代与单取代之间的任意水平取代(例如-CH₂CF₃)。在叙述取代基而未定性为取代的情况下，涵盖取代形式和未取代形式两者。在取代基被定性为“取代的”情况下，尤其意指取代形式。另外，对具体部分的不同组的任选取代基可以按需进行定义；在这些情况下，任选的取代将是如所定义的，通常紧跟在短语“任选地被取代”之后。

除非另外定义，否则术语R或术语R’在独自出现并且没有数字指定的情况下，是指选自氢、烷基、环烷基、杂烷基、芳基、杂芳基和杂环烷基的部分，其中的任一个可以任选地被取代。此类R和R’基团应理解为如本文所定义的任选地被取代。无论R基团是否具有数字指定，应当理解的是，每个R基团(包括R、R’和Rⁿ，其中n＝(1,2,3,…n))、每个取代基和每个术语就从组的选择而论是独立于所有其他的。如果任何变量、取代基或术语(例如，芳基、杂环、R等)在某式或通用结构中出现不止一次，则在每次出现时其定义应当独立于在每次其他出现时的定义。本领域的技术人员将进一步认识到，某些基团可以附接到母体分子上或可以在从如所写的任一端的元件的链中占据位置。例如，如-C(O)N(R)-的不对称基团可以在碳或氮处附接至母体部分。

不对称中心存在于本文披露的化合物中。这些中心由符号“R”或“S”指定，取决于手性碳原子周围的取代基的构型。应当理解，本发明涵盖所有立体化学异构体形式，包括非对映异构体、对映异构体和差向异构体形式，以及d-异构体和1-异构体，以及它们的混合物。化合物的单独立体异构体可以从含有手性中心的可商购的起始材料合成制备，或通过制备对映异构体的产物的混合物随后分离，如转化为非对映异构体的混合物随后分离或重结晶、色谱技术、在手性色谱柱上直接分离对映异构体，或本领域已知的任何其他适当的方法来制备。特定立体化学的起始化合物是可商购的，或可以通过本领域已知的技术进行制备并拆分。另外，本文披露的化合物可以作为几何异构体存在。本发明包括所有顺式、反式、同式、逆式、异侧(E)和同侧(Z)异构体，以及它们的适当混合物。另外，化合物可以作为互变异构体存在；本发明提供了所有互变异构的异构体。另外，本文披露的化合物可以按非溶剂化形式以及与药学上可接受的溶剂如水、乙醇等的溶剂化形式存在。通常，认为溶剂化形式等效于非溶剂化形式。

当通过键连接的原子被认为是较大子结构的部分时，术语“键”是指在两个原子或两个部分之间的共价键。除非另外说明，否则键可以是单键、双键或三键。在分子图中，在两个原子之间的虚线指示另外的键在该位置可以存在或不存在。

如本文所用，术语“疾病”旨在通常与术语“障碍”、“综合征”和“病症”(如在医学病症中)同义并且可以与这些术语互换使用，因为所有这些都反映了人体或动物体的或其部位之一的损害了正常功能的异常情况，典型地表现为区别的体征和症状，并且使人或动物有减少的寿命期限或降低的生活质量。

如本文所用，“认知障碍”是指精神健康障碍，其中认知功能丧失是主要症状，并且其主要影响学习、记忆、感知和/或解决问题。认知障碍包括健忘症、痴呆和谵妄。原因可能包括对脑的记忆部分的损伤，无论是来自创伤还是化学疗法的损伤。

术语“组合疗法”意指施用两种或更多种治疗剂来治疗本披露内容中所述的治疗的病症或障碍。这种施用涵盖以基本上同时的方式共同施用这些治疗剂，如在具有固定比率活性成分的单个胶囊中或者在针对每种活性成分的多个分开的胶囊中。此外，这种施用还涵盖以依次的方式使用每种类型的治疗剂。在任一情况下，治疗方案将在治疗本文所述的病症或障碍中提供药物组合的有益作用。

本文使用的“DLK结合剂”是指显示出关于DLK不多于约100μM和更典型地不多于约50μM的K_d(如总体上在本文所述的DLK结合测定中所测量的)的化合物。DLK结合测定测量了化合物与DLK活性位点结合的K_d(解离常数)。已经发现本文披露的化合物与DLK结合。在某些实施例中，化合物将显示出关于DLK的不多于约10μM的K_d；在另外的实施例中，化合物将显示出关于DLK的不多于约1μM的K_d；在又另外的实施例中，化合物将显示出关于DLK的不多于约0.1μM的K_d；在又另外的实施例中，化合物将显示出关于DLK的不多于约10nM的K_d，如在本文所述的DLK测定中所测量的。

短语“治疗有效”旨在限制在疾病或障碍的治疗中或对临床终点产生效果使用的活性成分的量。

术语“治疗上可接受的”是指适用于与患者组织接触而不产生过度毒性、刺激和过敏反应的化合物(或盐、前药、互变异构体、两性离子形式等)，这些化合物与合理受益/风险比相称，且对于其预定用途是有效的。

如本文所用，提及“治疗”患者旨在包括预防。治疗也可以是自然地抢占先机，即，它可以包括疾病的预防。疾病的预防可以涉及完全免受疾病，例如像在预防病原体感染的情况下，或可以涉及疾病进展的预防。例如，疾病的预防可以不意指完全圈定任何水平的与疾病相关的任何效果，而是可意指将疾病的症状预防至临床上显著的或可检测的水平。疾病的预防也可以意指预防疾病进展至疾病的更晚阶段。

术语“患者”通常与术语“受试者”同义，并且包括所有哺乳动物，包括人。患者的实例包括人、牲畜(如牛、山羊、绵羊、猪和兔)和宠物(如狗、猫、兔和马)。优选地，患者是人。

术语“前药”是指在体内变得更具活性的化合物。本文披露的化合物也可以作为前药存在，如在Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism:Chemistry,Biochemistry,and Enzymology[药物和前药代谢中的水解：化学、生物化学和酶学](Testa,Bernard和Mayer,Joachim M.瑞士苏黎世威利-VHCA公司(Wiley-VHCA,Zurich,Switzerland)2003)中所述。本文所述化合物的前药是以下化合物的结构改良型：该化合物在生理条件下容易进行化学变化来提供该化合物。另外，在离体环境中，通过化学方法或生化方法可以将前药转变成该化合物。例如，当前药置于经皮贴片贮器内部时用适合的酶试剂或化学试剂可以将前药缓慢地转变成化合物。因为在一些情况下前药可以比化合物或母体药物更容易施用，所以它们经常是有用的。例如，它们可以是通过口服施用而生物可利用的，而母体药物却不行。前药还可以在药物组合物中具有改进的优于母体药物的溶解性。本领域已知多种前药衍生物，如依赖于前药的水解切割或氧化激活的那些。前药的实例是(但不限于)作为酯(该“前药”)施用的化合物，但是然后代谢水解为羧酸，即活性实体。另外的实例包括化合物的肽基衍生物。

盐和多晶型物

本文披露的化合物可以作为治疗上可接受的盐存在。本发明包括以上以盐形式列出的化合物，该盐形式包括酸加成盐。适合的盐包括与有机酸或无机酸形成的那些。此类酸加成盐通常是药学上可接受的。然而，非药学上可接受的盐的盐可以在所讨论的化合物的制备和纯化中是有效用的。也可以形成碱加成盐，并且是药学上可接受的。有关盐的制备和选择的更完整讨论，请参阅Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use[可药用盐：特性、选择与用途](Stahl,P.Heinrich.瑞士苏黎世威利-VHCA公司(Wiley-VHCA,Zurich,Switzerland)，2002年)。

如本文所用，术语“治疗上可接受的盐”表示本文披露的化合物的盐或两性离子形式，其是水溶性的或油溶性的或可分散的并且是如本文所定义的治疗上可接受的。这些盐可以在化合物的最后分离和纯化期间制备，或是通过游离碱形式的适当的化合物与适合的酸反应分开地制备。代表性酸加成盐包括乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、L-抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐(苯磺酸盐)、重硫酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、二葡萄糖酸盐、甲酸盐、延胡索酸盐、龙胆酸盐、戊二酸盐、甘油磷酸盐、乙醇酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟乙磺酸盐(羟乙基磺酸盐)、乳酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、DL-扁桃酸盐、均三甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、焦谷氨酸盐、琥珀酸盐、磺酸盐、酒石酸盐、L-酒石酸盐、三氯乙酸盐、三氟乙酸盐、磷酸盐、谷氨酸盐、碳酸氢盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。并且，可以将本文披露的化合物中的碱性基团用甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；二甲基、二乙基、二丁基和二戊基的硫酸酯；癸基、月桂基、豆蔻基和甾醇基的氯化物、溴化物和碘化物；以及苄基和苯乙基的溴化物进行季铵化。可以采用以形成治疗上可接受的加成盐的酸的实例包括无机酸(如盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸)以及有机酸(如草酸、马来酸、琥珀酸和柠檬酸)。盐还可以通过这些化合物与碱金属或碱土离子的配位形成。因此，本发明设想了本文所披露化合物的钠盐、钾盐、镁盐和钙盐等。

碱加成盐可以在化合物的最后分离和纯化期间制备，通过将羧基基团与适合的碱如金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐反应，或者与氨或有机伯、仲或叔胺反应。治疗上可接受的盐的阳离子包括锂、钠、钾、钙、镁和铝，以及无毒季胺阳离子如铵、四甲铵、四乙铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺、乙胺、三丁胺、吡啶、N,N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基吗啉、二环己胺、普鲁卡因、二苄胺、N,N-二苄基苯乙胺、1-二苯羟甲胺和N,N'-二苄基乙二胺。可用于形成碱加成盐的其他代表性有机胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶和哌嗪。

虽然本发明的化合物可能作为原始化学物质施用，它们还可能作为药物配制品来提供。因此，本文提供了药物配制品，这些药物配制品包含本文披露的化合物中的一种或多种，或者其一种或多种药学上可接受的盐、酯、前药、酰胺或溶剂化物，以及一种或多种其药学上可接受的载体和任选地一种或多种其他治疗成分。这种或这些载体必须在与配制品的其他成分相容且对于其接受者无害的意义上是“可接受的”。适当的配制品取决于所选择的施用途径。任何熟知的技术、载体和赋形剂均可以在适合时并且如本领域已知的那样使用。本文披露的药物组合物可以用本领域已知的任何方式制造，例如通过常规的混合、溶解、造粒、造糖衣丸、磨细、乳化、包囊、包埋或压片方法。

配制品

配制品包括适于口服、肠胃外(包括皮下、皮内、肌内、静脉内、关节内和髓内)、腹膜内、经粘膜、经皮、直肠和局部(包括皮肤、经颊、舌下和眼内)施用的那些，但最适合的途径可以取决于例如接受者的病症和障碍。配制品可以方便地以单位剂型呈现，并且可以通过配药学领域熟知的任何方法来制备。典型地，这些方法包括使本发明的化合物或其药学上可接受的盐、酯、酰胺、前药或溶剂化物(“活性成分”)与构成一种或多种辅助成分的载剂缔合的步骤。通常，配制品通过以下方式制备：均匀且密切地使活性成分与液体载体或细粉碎的固体载体或与这两者混合，并且然后如果需要的话，使产物成形为所希望的配制品。

适合用于口服施用的本文披露的化合物的配制品可以以离散单元呈现，如各自含有预定量的活性成分的胶囊、扁囊剂或片剂；以粉末或颗粒呈现；以水性液体或非水性液体中的溶液或悬浮液呈现；或以水包油液体乳液或油包水液体乳液呈现。活性成分也可以大丸剂、药糖剂或糊剂呈现。

可以口服使用的药物制剂包括片剂、由明胶制成的推入配合式(push-fit)胶囊、以及由明胶和增塑剂如甘油或山梨糖醇制成的密封的软胶囊。可以通过任选地与一种或多种辅助成分一起压制或模制来制造片剂。可以通过在适合的机器中压制处于自由流动形式(如粉末或颗粒)的活性成分来制备压制片，该活性成分任选地与粘合剂、惰性稀释剂或润滑剂、表面活性剂或分散剂混合。模制片可以通过在适合的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉状化合物的混合物来制备。片剂可以任选地被包衣或刻痕，并且可以被配制成实现其中的活性成分的缓慢或受控释放。所有用于口服施用的配制品应以适合于这种施用的剂量使用。推入配合式胶囊可以含有与填充剂如乳糖、粘合剂如淀粉和/或润滑剂如滑石或硬脂酸镁以及任选地稳定剂配混的活性成分。在软胶囊中，可以将活性化合物溶解或悬浮在适合的液体如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇中。此外，可以添加稳定剂。糖衣丸的芯具有适合的包衣。出于这个目的，可使用浓缩的糖溶液，这些糖溶液可任选地含有阿拉伯树胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆胶、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液，以及多种适合的有机溶剂或溶剂混合物。可以将染料或颜料添加到片剂或糖衣丸包衣中，以用于鉴别或表征活性化合物剂量的不同组合。

化合物可以被配制为用于通过注射(例如通过推注或连续输注)进行肠胃外施用。用于注射的配制品可以以单位剂型而存在，例如在添加有防腐剂的安瓿中或在多剂量容器中。组合物可采取此类形式，如在油性或水性运载体中的悬浮液、溶液或乳液，并且可含有配制试剂，如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。配制品可以呈现在单位剂量或多剂量容器(例如密封的安瓿和小瓶)中，并且可以以粉末形式或于冷冻干燥(冻干)条件下储存，并且仅需要在即将使用之前添加无菌液体载体(例如生理盐水或无菌无热原质水)。临时注射溶液和悬浮液可以由先前描述类型的无菌粉末、颗粒和片剂制备。

用于肠胃外施用的配制品包括活性化合物的水性和非水性(油性)无菌注射溶液，其可以包含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使配制品与预期接受者的血液等渗的溶质；以及水性和非水性无菌悬浮液，其可以包括悬浮剂和增稠剂。适合的亲脂性溶剂或媒介物包括脂肪油如芝麻油或合成的脂肪酸酯如油酸乙酯或甘油三酯，或者脂质体。水性注射悬浮液可以含有增加悬浮液的粘度的物质，如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇或葡聚糖。任选地，悬浮液还可以含有适合的稳定剂或增加化合物的溶解性的药剂，以允许制备高度浓缩的溶液。

除了前述配制品之外，化合物还可以被配制为贮库(depot)制剂。此类长效配制品可以通过植入(例如，皮下或肌内)或通过肌内注射来施用。因此，例如，这些化合物可以与适合的聚合物或疏水性材料(例如，作为在可接受的油中的乳液)或离子交换树脂一起配制，或被配制成微溶性衍生物，例如被配制成微溶性盐。

对于经颊或舌下施用，组合物可以采取以常规方式配制的片剂、锭剂、糖果锭剂、或凝胶的形式。此类组合物可以包含调味基料如蔗糖和阿拉伯树胶或黄芪胶中的活性成分。

这些化合物还可以被配制为直肠组合物，如栓剂或保留灌肠剂，例如含有常规栓剂基质，如可可脂、聚乙二醇、或其他甘油酯。

本文披露的化合物可以局部地施用，即通过非全身施用。这包括将本文披露的化合物经外部施用至表皮或口腔以及将此种化合物滴注至耳朵、眼睛和鼻子中，使得该化合物不会大量进入血流。相比之下，全身施用是指口服、静脉内、腹膜内和肌内施用。

适于局部施用的配制品包括适于渗透通过皮肤至炎症部位的液体或半液体制剂，如凝胶、擦剂、洗剂、乳膏、软膏剂或糊剂，以及适于施用至眼睛、耳朵或鼻子的滴剂。局部施用的活性成分可包含例如配制品的0.001％至10％w/w(按重量计)。在某些实施例中，活性成分可包含多达10％w/w。在其他实施例中，它可包含少于5％w/w。在某些实施例中，活性成分可包含2％w/w至5％w/w。在其他实施例中，它可包含配制品的0.1％至1％w/w。

针对通过吸入施用，化合物可以方便地从吹入器、喷雾器加压包或其他递送气雾剂喷雾的方便的手段来递送。加压包可以包含适合的推进剂，如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他适合的气体。在增压式气溶胶的情况下，剂量单位可通过提供阀以递送计量的量来确定。替代性地，对于通过吸入或吹入施用，根据本发明的化合物可以采用干燥粉组合物的形式，例如，该化合物与适合的粉末基质(如乳糖或淀粉)的粉末组合物。粉末组合物可以以单位剂型呈现在例如胶囊、药筒、明胶或泡罩包装中，粉末从中可以借助于吸入器或吹入器施用。

优选的单位剂量配制品是含有有效剂量的(如下文所叙述的)或其适当分数的活性成分的那些。

应当理解，除了上文特别提及的成分外，上述配制品还可以包括本领域中考虑到所讨论配制品的类型的其他常规试剂，例如适合于口服施用的那些配制品可以包含调味剂。

给予和治疗

化合物可以经口服或经由注射以每天0.1mg/kg至500mg/kg的剂量施用。成人的剂量范围通常为5mg至2g/天。以离散单位提供的片剂或其他呈现形式可以方便地包含一定量的一种或多种化合物，其以这种剂量或多个这种剂量有效，例如，含有5mg至500mg(通常为大约10mg至200mg)的单位。

可以与载体材料组合产生单一剂型的活性成分的量将取决于所治疗的宿主和具体的施用方式而变化。

可以按多种方式施用化合物，例如口服、局部或通过注射。向患者施用的化合物的精确量是主治医生的职责。针对任何特定患者的具体剂量水平将取决于多种因素，包括所使用的具体化合物的活性、年龄、体重、一般健康情况、性别、饮食、施用时间、施用途径、排泄速率、药物组合、所治疗的确切的障碍以及所治疗的适应症或病症的严重程度。同样，施用途径可以根据病症及其严重程度而变化。

在某些情况下，可能合适的是，将至少一种本文所述的化合物(或其药学上可接受的盐、酯或前药)与另一种治疗剂组合施用。仅通过举例，如果患者在接受本文中的一种化合物时经历的副作用之一是高血压，则将抗高血压剂与初始治疗剂组合施用可能是合适的。或者，仅通过举例，可以通过施用辅助剂来增强本文所述的化合物之一的治疗效果(即，辅助剂本身仅具有微弱的治疗益处，但是与另一种治疗剂组合时，对患者的总体治疗益处得到增强)。或者，仅通过举例，可以通过将本文所述的化合物之一与也具有治疗益处的另一种治疗剂(也包括治疗方案)一起施用来增加患者所经历的益处。仅通过举例，在涉及施用本文所述的化合物之一的糖尿病治疗中，还可以通过向患者提供另一种糖尿病治疗剂来增加治疗益处。在任何情况下，无论所治疗的疾病、障碍或病症如何，患者所经历的总体益处可能只是两种治疗剂的加和，或者患者可能经历协同益处。

可能的组合疗法的具体非限制性实例包括本发明的化合物与多奈哌齐、利凡斯的明、加兰他敏和美金刚一起使用。另外的实例包括抗淀粉样抗体和疫苗、抗Ab抗体和疫苗、抗τ抗体和疫苗、β-分泌酶抑制剂、5-HT4激动剂、5-HT6拮抗剂、5-HT1a拮抗剂、α7烟碱受体激动剂、5-HT3受体拮抗剂、PDE4抑制剂、O-聚糖酶抑制剂和其他批准用于治疗阿尔茨海默病的药物。另外的实例包括二甲双胍、米诺环素、组织纤溶酶原激活剂、和其他改善神经元存活的疗法。

在任何情况下，可以按任何顺序或甚至同时施用多种治疗剂(其中至少一种是本文所披露的化合物)。如果同时施用，则多种治疗剂可以按单一、统一的形式或按多种形式(仅通过举例，作为单一丸剂或作为两种分开的丸剂)来提供。这些治疗剂中的一种可以按多个剂量给予，或者两种治疗剂都可以作为多个剂量而给予。如果不同时，则多个剂量之间的时间间隔可以是从几分钟到四周的任何持续时间。

因此，在另一个方面，某些实施例提供了用于治疗需要这种治疗的人类或动物受试者的DLK介导的障碍的方法，该方法包括与本领域中已知的用于治疗所述障碍的至少一种另外的药剂组合向所述受试者施用一定量的本文披露的化合物，该量的化合物有效减轻或预防受试者的所述障碍。在相关的方面，某些实施例提供了治疗组合物，这些治疗组合物包含至少一种本文披露的化合物与一种或多种用于治疗DLK介导的障碍的另外的药剂的组合。

在某些实施例中，本文披露的化合物、组合物和方法可用于治疗由中枢神经系统和周围神经系统神经元的创伤性损伤引起的神经性疾病。

在某些实施例中，本文披露的化合物、组合物和方法可用于治疗中风。

在某些实施例中，本文披露的化合物、组合物和方法可用于治疗颅脑损伤。

在某些实施例中，本文披露的化合物、组合物和方法可用于治疗脊髓损伤。

在某些实施例中，本文披露的化合物、组合物和方法可用于治疗由慢性神经退行性病症引起的神经性疾病。

在某些实施例中，该神经退行性病症是阿尔茨海默病。

在某些实施例中，该神经退行性病症是额颞痴呆。

在某些实施例中，该神经退行性病症是帕金森病。

在某些实施例中，该神经退行性病症是亨廷顿病。

在某些实施例中，该神经退行性病症是肌萎缩性侧索硬化症。

在某些实施例中，该神经退行性病症是阿尔茨海默病。

在某些实施例中，该神经退行性病症是脊髓小脑性共济失调。

在某些实施例中，该神经退行性病症是进行性核上性麻痹。

在某些实施例中，该神经退行性病症是路易体病。

在某些实施例中，该神经退行性病症是肯尼迪病。

在某些实施例中，本文披露的化合物、组合物和方法可用于治疗由神经损伤引起的神经病变。

在某些实施例中，该神经病变是化学疗法诱导的周围神经病变。

在某些实施例中，该神经病变是糖尿病神经病变。

在某些实施例中，本文披露的化合物、组合物和方法可用于治疗认知障碍。

在某些实施例中，该认知障碍是由药物干预引起的。

在某些实施例中，该认知障碍是化学疗法诱导的认知障碍。

在某些实施例中，本文披露的化合物、组合物和方法可以与另一种治疗剂共同给予。

在某些实施例中，本文披露的化合物、组合物和方法可以与另一种治疗剂共同给予用于治疗认知障碍。

除了可用于人治疗之外，本文披露的化合物和配制品还可以用于宠物、外来动物和农场动物，包括哺乳动物、啮齿动物等的兽医治疗。更优选的动物包括马、狗和猫。

缩写列表

Ac₂O＝乙酸酐；AcCl＝乙酰氯；AcOH＝乙酸；AIBN＝偶氮二异丁腈；aq.＝水溶液；BAST＝双(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫；Bu＝丁基；Bu₃SnH＝氢化三丁基锡；CD₃OD＝氘代甲醇；CDCl₃＝氘代氯仿；CDI＝1,1′-羰基二咪唑；DAST＝(二乙基氨基)三氟化硫；dba＝二亚苄基丙酮；DBU＝1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯；DCM＝二氯甲烷；DEAD＝偶氮二甲酸二乙酯；DIBAL-H＝二异丁基氢化铝；DIEA＝DIPEA＝N,N-二异丙基乙胺；DMAP＝4-二甲基氨基吡啶；DMF＝N,N-二甲基甲酰胺；DMSO-d₆＝氘代二甲基亚砜；DMSO＝二甲基亚砜；DPPA＝叠氮磷酸二苯酯；dppf＝1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁；EDC·HCl＝EDCI·HCl＝1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐；Et＝乙基；Et₂O＝二乙醚；EtOAc＝乙酸乙酯；EtOH＝乙醇；h＝小时；HATU＝2-(1H-7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸甲铵；HMDS＝六甲基二硅氮烷；HOBT＝1-羟基苯并三唑；iPr＝i-Pr＝异丙基＝2-丙基；iPrOH＝i-PrOH＝异丙醇；LAH＝氢化铝锂；LDA＝二异丙基酰胺锂；LiHMDS＝双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂；MeCN＝乙腈；MeI＝碘甲烷；MeOH＝甲醇；MP-碳酸酯树脂＝大孔三乙基铵甲基聚苯乙烯碳酸酯树脂；MsCl＝甲磺酰氯；MTBE＝甲基叔丁基醚；n-BuLi＝正丁基锂；NaHMDS＝双(三甲基甲硅烷基)酰胺钠；NaOEt＝乙醇钠；NaOMe＝甲醇钠；NaOtBu＝叔丁醇钠；NBS＝N-溴代琥珀酰亚胺；NCS＝N-氯代琥珀酰亚胺；ND＝未测定；NIS＝N-碘代琥珀酰亚胺；NMP＝N-甲基-2-吡咯烷酮；Pd(Ph₃)₄＝四(三苯基膦)钯(0)；Pd₂(dba)₃＝三(二亚苄基丙酮)二钯(0)；PdCl₂(PPh₃)₂＝双(三苯基膦)二氯化钯(II)；PG＝保护基团；Ph＝苯基；制备型HPLC＝制备型高效液相色谱；PMBCl＝对甲氧基苄基；PMBCl＝对甲氧基苄基氯；PMBOH＝对甲氧基苄醇；PyBop＝六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基磷；Pyr＝吡啶；RT＝室温；RuPhos＝2-二环己基膦基-2′,6′-二异丙氧基联苯；sat.＝饱和；ss＝饱和溶液；tBu＝t-Bu＝叔丁基＝1,1-二甲基乙基；TBAF＝四丁基氟化铵；TBDPS＝叔丁基二苯基甲硅烷基；t-BuOH＝tBuOH＝叔丁醇；T3P＝丙基膦酸酐；TEA＝Et₃N＝三乙胺；TFA＝三氟乙酸；TFAA＝三氟乙酸酐；THF＝四氢呋喃；TIPS＝三异丙基甲硅烷基；Tol＝甲苯；TsCl＝甲苯磺酰氯；Trt＝三苯甲基＝(三苯基)甲基；Xantphos＝4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基氧杂蒽；XPhos＝2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯。

用于制备化合物的一般合成方法

以下方案可以用来实践本发明。

方案I

实例1和2以及类似化合物可以通过使用方案I中所示的通用合成程序来合成。双环戊烷二甲酸101转化为单氟化化合物102。由酰基叠氮和Boc保护的胺的中间性，通过标准库尔提斯(Curtius)重排获得胺103。与甲醛和乙二醛缩合产生咪唑104。金属化后通过用N,N-二甲基甲酰胺捕获给出甲酰基咪唑105。用三氟甲基阴离子等效物获得三氟甲基化合物106。由区域选择性格氏(Grignard)介导的二碘咪唑107的还原获得单碘咪唑108。与硼酸酯偶联提供所希望的产物109。

应当理解，可以利用多种芳基硼酸酯，从而提供在吡啶部分具有多种取代基的化合物。此外，可以使用其他阴离子等效物，以在咪唑2-位置处纳入不同的取代基。最后，可以将外消旋化合物106或连续的中间体拆分以提供纯的对映异构体。

方案II

实例3和4以及类似化合物可以通过使用方案II中所示的通用合成程序来合成。咪唑104的金属化后，通过用醛R₂₀₁CHO捕获给出仲醇201。按照方案I进行单碘化合物202的选择性形成。202与硼酸酯偶联提供所希望的产物203。

方案III

实例5和6以及类似化合物可以通过使用方案III中所示的通用合成程序来合成。按照方案I将胺103缩合，利用苄氧基乙醛以给出官能化咪唑301。如在先前的方案中，通过两步程序获得单碘化合物302。202与硼酸酯偶联，随后去除苄基保护基团，提供伯醇303。氧化为醛，随后与适合的格氏试剂反应，提供所希望的产物304。

方案IV

实例7和8以及类似化合物可以通过使用方案IV中所示的通用合成程序来合成。将单独保护的双环戊烷二胺401与乙二醛和甲醛缩合以给出咪唑402。金属化后，通过用醛R₄₀₁CHO捕获给出仲醇403。如前形成单碘化合物404。醇保护后去除Boc保护基团以给出伯胺405。与1,5-二溴-3-戊酮缩合给出4-哌啶酮406。用DAST将酮官能团转化为偕二氟化物；氟化物诱导的脱保护给出醇407。与硼酸酯偶联提供所希望的产物408。

方案V

实例9和10以及类似化合物可以通过使用方案V中所示的通用合成程序来合成。将单独保护的双环戊烷二胺401与乙二醛和苄氧基乙醛缩合以给出官能化咪唑501。如前形成单碘化合物502。由与方案IV类似的反应步骤提供4-哌啶酮503和4,4-二氟哌啶504。去除苄基保护基团，随后氧化为醛，并且与来自方案I的三氟甲基阴离子等效物反应给出三氟甲基化合物505。与硼酸酯偶联提供所希望的产物506。

方案VI

实例11和12以及类似化合物可以通过使用方案VI中所示的通用合成程序来合成。将碘咪唑503与硼酸酯偶联以给出601。用TFA处理去除苄基基团以提供伯胺602，将其氧化为醛603。与适合的格氏试剂反应提供所希望的产物604。

本发明进一步通过以下实例说明。

实例1a和1b

(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇和

(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇

步骤1：3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸向双环[1.1.1]戊烷-1,3-二甲酸(50g，320.23mmol)在脱氧H₂O(1600mL)中的溶液中添加选择性氟试剂(Selectfluor)(283.62g，800.59mmol)和AgNO₃(4.08g，24.02mmol)，并且在N₂气氛下将所得混合物在60℃-63℃下搅拌12h。将混合物冷却至25℃，并且过滤。将滤液用MTBE(1L x 4)萃取。将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩以提供呈棕色固体的标题化合物(227g，1.74mol，68.10％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.88(s,1H),2.41-2.38(m,6H)。

步骤2：叔丁基(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)氨基甲酸酯向来自前述步骤的产物(50g，384.27mmol)和Et₃N(42.77g，422.70mmol，58.83mL)在甲苯(2000mL)中的溶液中添加Boc₂O(83.87g，384.27mmol，88.28mL)和DPPA(116.33g，422.70mmol，91.60mL)，并且将所得混合物在25℃下搅拌0.5h，然后加热至110℃持续2h。然后添加t-BuOH(113.93g，1.54mol，147.01mL)，并且将混合物加热至110℃持续12h。将两批反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱(石油醚/EtOAc＝20/1)纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(153g，粗产物)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ4.86(s,1H),2.25(s,6H),1.38(s,9H)。

步骤3：3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-胺向来自先前步骤的产物(153g，760.30mmol)在EtOAc(500mL)中的溶液中添加HCl/EtOAc(4M，500mL)，并且将所得混合物在15℃下搅拌1h。将反应混合物在真空中浓缩。在10℃下，将粗产物用MTBE研磨20分钟以提供呈白色固体的标题化合物(81g，588.74mmol，77.44％产率，HCl盐)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.37(s,3H),2.34(d,J＝2.08Hz,6H)。

步骤4：1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑(中间体I)

在0℃下，将来自先前步骤的产物(30g，218.05mmol，HCl盐)和DIEA(29.59g，228.95mmol，39.88mL)在MeOH(300mL)中的溶液逐滴添加至HCHO(23.00g，283.47mmol，21.10mL)在MeOH(300mL)中的溶液中，然后添加NH₄OAc(65.21g，846.04mmol)，搅拌5分钟后，随后在0℃下逐滴添加乙二醛(38.60g，266.02mmol，34.77mL，40％纯度)在MeOH(276mL)中的溶液。将混合物在15℃下搅拌16h。将两批反应混合物在真空中浓缩，并且将残余物用H₂O(600mL)稀释，用EtOAc(600mL x 4)萃取，经Na₂SO₄干燥，过滤并且在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝9/1-3/1)纯化以提供第一批呈黄色油状物的标题化合物(32.3g，129.48mmol，29.69％产率，61％纯度)和第二批呈黄色油状物的标题化合物(2.3g，5.59mmol，1.28％产率，37％纯度)。

MS(ES⁺)C₈H₉FN₂要求：152，实测：153[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.48(s,1H),7.07(s,1H),6.89(s,1H),2.59(d,J＝2.0Hz,6H)。

步骤5：1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-甲醛在N₂下、于-70℃下向中间体I(3g，19.71mmol)在THF(50mL)中的溶液中逐滴添加n-BuLi(2.5M，9.46mL)，并且在N₂下、于-70℃下将所得混合物搅拌30分钟。然后添加DMF(1.73g，23.66mmol，1.82mL)，并且在N₂下、于-70℃下将混合物再搅拌30分钟。将反应混合物用NH₄Cl(饱和水性，200mL)淬灭，将有机层分离，并且将水相用EtOAc(100mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且浓缩。将残余物通过硅胶柱(石油醚/EtOAc＝1/1-0/1)纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(2.4g，12.12mmol，61.48％产率，91％纯度)。MS(ES⁺)C₉H₉FN₂O要求：180，实测：181[M+H]⁺。

步骤6：2,2,2-三氟-1-(1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)乙醇平行进行两批以下反应：在N₂下、于-20℃下向来自先前步骤的产物(1.2g，6.66mmol)在THF(120mL)中的溶液中逐滴添加TMSCF₃(9.47g，66.60mmol)，随后在N₂下、于-20℃下添加TBAF(1M，66.60mL)，并且将所得混合物在-20℃下搅拌1h。将两批反应混合物用NH₄Cl(饱和水性，200mL)淬灭，并且用EtOAc(200mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱(石油醚/EtOAc＝1/1-0/1)纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(3.5g，粗产物)。MS(ES⁺)C₁₀H₁₀F₄N₂O要求：250，实测：251[M+H]⁺。

步骤7：2,2,2-三氟-1-(1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,5-二碘-1H-咪唑-2-基)乙醇向来自先前步骤的产物(2g，7.99mmol)在DMF(50mL)中的溶液中添加NIS(8.99g，39.97mmol)，并且将混合物在70℃下搅拌72h。添加另外的NIS(8.99g，39.97mmol)，并且将所得混合物在70℃下再搅拌3h。将反应用Na₂SO₃(饱和水性，100mL)淬灭，并且通过EtOAc(100mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过纯化硅胶柱(石油醚/EtOAc＝10/1至5/1)纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(2.5g，4.18mmol，52.33％产率，84％纯度)。MS(ES⁺)C₁₀H₈F₄I₂N₂O要求：502，实测：503[M+H]⁺。

步骤8：2,2,2-三氟-1-(1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-碘-1H-咪唑-2-基)乙醇在N₂下、于-70℃下向来自先前步骤的产物(2.4g，4.78mmol)在THF(50mL)中的混合物中逐滴添加iPrMgCl(2M，2.87mL)持续15分钟，并且将所得混合物在-70℃下搅拌1h。添加另外的iPrMgCl(2M，1mL)，并且将混合物在-70℃下再搅拌1h。将反应混合物用NH₄Cl(饱和水性，80mL)淬灭，并且用EtOAc(80mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝10/1-3/1)和制备型HPLC(柱：Phenomenexluna C18 150*40mm*15μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：26％-56％，8.5分钟)纯化以提供呈白色固体的标题化合物(670mg，1.73mmol，36.18％产率，97％纯度)。MS(ES⁺)C₁₀H₉F₄IN₂O要求：376，实测：377[M+H]⁺。

步骤9：(S)-2,2,2-三氟-1-(1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-碘-1H-咪唑-2-基)乙醇和(R)-2,2,2-三氟-1-(1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-碘-1H-咪唑-2-基)乙醇(中间体IIa和IIb)将外消旋标题化合物(670mg)通过手性HPLC(柱：DAICEL CHIRALPAKAS(250mm*30mm，10μm)；流动相：[0.1％NH₄OH/MeOH]；B％：20％-20％，4.2分钟；50分钟)分离以提供未确定绝对立体化学的两个对映异构体。

中间体IIa：无色油状物(250mg，658.09μmol，36.94％产率，99％纯度)；保留时间＝0.501(柱：Chiralpak AS-3 50×4.6mm I.D.，3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为MeOH(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的MeOH(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；波长：220nm；柱温：35℃；背压：100巴)。

中间体IIb：无色油状物(240mg，619.00μmol，34.75％产率，97％纯度)；保留时间＝0.625(柱：Chiralpak AS-3 50×4.6mm I.D.，3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为MeOH(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的MeOH(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；波长：220nm；柱温：35℃；背压：100巴)。

步骤10a：1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇，异构体A(实例1a)

在N₂下，向中间体IIa(20mg，319.07μmol)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-胺(126.13mg，414.80μmol)在DMF(5mL)中的混合物中添加Pd(dppf)Cl₂(39.69mg，54.24μmol)和K₂CO₃(2M，526.47uL)，并且将所得混合物加热至90℃持续0.5h。将反应混合物倾倒入水(30mL)中，并且用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用CaCl₂(饱和水性，50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱(石油/EtOAc＝1/1)纯化，并且通过制备型HPLC(柱：Boston Green ODS 150*30mm*5μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：38％-68％，10分钟)再纯化以提供呈白色固体的实例1a(79.6mg，184.86μmol，57.94％产率，99％纯度)；保留时间＝0.837分钟(柱：Chiralcel OJ-3 50×4.6mm I.D.，3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为MeOH(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的MeOH(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；波长：220nm，柱温：35℃；背压：100巴)。

MS(ES⁺)C₁₆H₁₃F₇N₄O₂要求：426，实测：427[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.38(s,1H),7.75(s,1H),7.08(s,1H),5.08-5.04(m,1H),4.87(s,2H),2.75-2.69(m,6H)。

步骤10b：1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇，异构体B(实例1b)对中间体IIb进行用于由中间体IIa获得实例1a的程序。

实例2a和2b

(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇和

(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇

1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇(实例2a)在N₂下，向中间体IIa(167mg，444.04μmol)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(166.29mg，577.25μmol)在DMF(5mL)中的混合物中添加Pd(dppf)Cl₂(55.23mg，75.49μmol)和K₂CO₃(2M，732.67uL)，并且将所得混合物加热至90℃持续0.5h。将混合物倾倒入水(30mL)中，并且用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用CaCl₂(饱和水性，50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(石油醚/EtOAc＝1/1)纯化，并且通过制备型HPLC(柱：Phenomenex Synergi Max-RP 150*50mm*10μm；流动相：[水(0.2％FA)-ACN]；B％：33％-63％，11分钟)再纯化以提供呈白色固体的实例2a(93.4mg，227.64μmol，51.27％产率，100％纯度)；保留时间＝0.876分钟(柱：Chiralcel OJ-3 50×4.6mm I.D.，3um；流动相：A相为CO₂，以及B相为MeOH(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的MeOH(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；波长：220nm；柱温：35℃；背压：100巴)。

MS(ES⁺)C₁₆H₁₃F₇N₄O要求：410，实测：411[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.60(s,1H),8.06(s,1H),7.11(s,1H),5.12-5.05(m,3H),2.76-2.70(m,6H)。

1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇(实例2b)在N₂下，向中间体IIb(200.00mg，531.79μmol)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(199.15mg，691.33μmol)在DMF(5mL)中的混合物中添加Pd(dppf)Cl₂(66.15mg，90.40μmol)和K₂CO₃(2M，877.45uL)，并且将所得混合物加热至90℃持续16h。将反应混合物倾倒入水(30mL)中，并且用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用CaCl₂(饱和水性，50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(石油醚/EtOAc＝1/1)纯化，并且通过制备型HPLC(柱：Phenomenex Synergi Max-RP 150mm*50mm*10μm；流动相：[水(0.2％FA)-ACN]；B％：33％-63％，11分钟)再纯化以提供呈白色固体的实例2b(128.7mg，310.54μmol，58.40％产率，99％纯度)；保留时间＝0.806分钟(柱：Chiralcel OJ-3 50×4.6mm I.D.，3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为MeOH(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的MeOH(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；波长：220nm；柱温：35℃；背压：100巴)。

MS(ES⁺)C₁₆H₁₃F₇N₄O要求：410，实测：411[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:8.60(s,1H),8.06(s,1H),7.11(d,J＝2.0,1H),5.06(s,3H),2.76-2.70(m,6H)。

实例3a和3b

(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇和

(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇

步骤1：1-(1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇在N₂下、于-70℃下向中间体I(10g，65.72mmol)在THF(100mL)中的溶液中逐滴添加n-BuLi(2.5M，52.50mL)，并且在N₂下、于-70℃下将所得混合物搅拌30分钟。然后添加异丁醛(7.90g，109.56mmol，10.00mL)，并且在N₂下、于-70℃下将混合物再搅拌30分钟。在-70℃下，将反应混合物用NH₄Cl(饱和水性，50mL)淬灭，并且用EtOAc(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩以提供呈黄色固体的标题化合物(18.8g，粗产物)，将其不经进一步纯化用于下一步骤。MS(ES⁺)C₁₂H₁₇FN₂O要求：224，实测：225[M+H]⁺。

步骤2：1-(1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,5-二碘-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇在0℃下，向来自先前步骤的产物(26g，82.31mmol)在DMF(260mL)中的溶液中添加NIS(88.40g，392.92mmol)，并且将所得混合物在50℃下搅拌12h。将反应混合物与另一批(1g规模)合并，并且用Na₂SO₃(饱和水性，300mL)淬灭，然后用EtOAc(300mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过SiO₂凝胶色谱法(在石油醚中的0％至13％EtOAc)纯化以提供第一批呈黄色固体的标题化合物(9.6g，19.76mmol，24.01％产率，98％纯度)和第二批呈黄色固体的标题化合物(6.5g，粗产物)。

MS(ES⁺)C₁₂H₁₅FI₂N₂O要求：476，实测：477[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ4.43(m,1H),2.7-2.88(m,6H),2.9-2.44(m,1H),2.4-2.05(m,1H),1.1-0.92(m,6H)。

步骤3：1-(1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-碘-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇(中间体III)在N₂下、于-70℃下向来自先前步骤的产物(8.6g，18.06mmol)在THF(170mL)中的混合物中逐滴添加iPrMgCl(2M，10.84mL)持续10分钟，并且将所得混合物在-70℃下搅拌10分钟。在-70℃下，将反应混合物用NH₄Cl(饱和水性，200mL)淬灭，并且用EtOAc(200mLx 3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过SiO₂凝胶色谱法(在石油醚中的0％至25％EtOAc)纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(4g，11.42mmol，63.23％产率)。MS(ES⁺)C₁₂H₁₆FIN₂O要求：350，实测：351[M+H]⁺。

步骤4：1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇将中间体III(2.1g，6.00mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-胺(2.39g，7.87mmol)、Pd(dppf)Cl₂(756.01mg，1.03mmol)和K₂CO₃(2M，9.24mL)在DMF(40mL)中的混合物脱气，并且用N₂吹扫3次，并且在N₂下、于90℃下将所得混合物搅拌1h。将反应混合物用H₂O(100mL)淬灭，并且用EtOAc(100mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(在石油醚中的0％至27％EtOAc)和反相进行纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(1.2g，2.91mmol，48.48％产率，97％纯度)。MS(ES⁺)C₁₈H₂₀F₄N₄O₂要求：400，实测：401[M+H]⁺。

步骤5：(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇(实例3a)和(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇(实例3a和3b)将外消旋标题化合物(1.2g)通过手性HPLC(柱：DAICEL CHIRALPAK AD-H(250mm*30mm*5μm)；流动相：[0.1％NH₄OH/iPrOH]；B％：25％-25％，3.25分钟；180分钟)分离以提供两个未确定绝对立体化学的两个对映异构体。

获得呈白色固体的实例3a(467.7mg，1.16mmol，38.59％产率，99％纯度)；保留时间＝1.147(柱：Chiralpak AD-3 50mm*4.6mm*3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为IPA(0.05％DEA)；梯度洗脱：在A中的B，从5％至40％；流速：3mL/min；检测器：DAD；柱温：35℃；背压：100巴)。

MS(ES⁺)C₁₈H₂₀F₄N₄O₂要求：400，实测：401[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.34(d,J＝1.6Hz,1H),7.79-7.75(m,1H),6.96(s,1H),4.74(s,2H),4.44-4.40(m,1H),2.76-2.65(m,7H),2.20-2.10(m,1H),1.04(d,J＝6.8Hz,3H),0.98(d,J＝6.8Hz,3H)。

获得呈白色固体的实例3b(490.2mg，1.21mmol，40.44％产率，99％纯度)；保留时间＝1.316(柱：Chiralpak AD-3 50mm*4.6mm*3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为IPA(0.05％DEA)；梯度洗脱：在A中的B，从5％至40％；流速：3mL/min；检测器：DAD；柱温：35℃；背压：100巴)。

MS(ES⁺)C₁₈H₂₀F₄N₄O₂要求：400，实测：401[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.34(d,J＝2.0Hz,1H),7.82-7.73(m,1H),6.96(s,1H),4.74(s,2H),4.44-4.40(m,1H),2.81-2.63(m,7H),2.22-2.09(m,1H),1.04(d,J＝6.8Hz,3H),0.98(d,J＝6.8Hz,3H)。

实例4a和4b

(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇和

(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇

步骤1：1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇向中间体III(3g，8.57mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(3.21g，11.14mmol)和Pd(dppf)Cl₂(1.07g，1.46mmol)在DMF(60mL)中的溶液中添加K₂CO₃(2M，12.90mL)，并且在N₂下、于90℃下将所得混合物搅拌1h。将反应混合物与另一批(100mg规模)合并。将合并的混合物用H₂O(200mL)稀释，并且用EtOAc(200mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过SiO₂凝胶色谱法(在石油醚中的0％至50％EtOAc)和反相(碱性条件)进行纯化以提供呈白色固体的标题化合物(2.48g，6.06mmol，70.79％产率，94％纯度)。MS(ES⁺)C₁₈H₂₀F₄N₄O要求：384，实测：385[M+H]⁺。

步骤2：(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇和(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇(实例4a和4b)将外消旋标题化合物(1.5g)通过手性HPLC(柱：DAICEL CHIRALPAK AD-H(250mm*30mm*5μm)；流动相：[0.1％NH₄OH/iPrOH]；B％：25％-25％，2.75分钟；721分钟)分离以提供未确定绝对立体化学的两个对映异构体。

获得呈白色固体的实例4a；保留时间＝1.352分钟(柱：Chiralpak AD-3 50mm*4.6mm*3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为IPA(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的IPA(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；检测器：PDA；柱温：35℃；背压：100巴)(495.1mg，1.29mmol，33.01％产率，100％纯度)。

MS(ES⁺)C₁₈H₂₀F₄N₄O要求：384，实测：385[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.55(d,J＝1.6Hz,1H),8.07(d,J＝1.6Hz,1H),6.99(s,1H),4.97(s,2H),4.42(dd,J＝6.4,8.8Hz,1H),2.75-2.66(m,7H),2.15(m,1H),1.04(d,J＝6.4Hz,3H),0.98(d,J＝6.8Hz,3H)。

获得呈白色固体的实例4b；保留时间＝1.479分钟(柱：Amycoat 50mm*4.6mm*3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为IPA(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的IPA(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；检测器：PDA；柱温：35℃；背压：100巴)(504.8mg，1.27mmol，32.64％产率，97％纯度)。

MS(ES⁺)C₁₈H₂₀F₄N₄O要求：384，实测：385[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.56(d,J＝1.2Hz,1H),8.08(d,J＝1.6Hz,1H),6.99(s,1H),4.96(s,2H),4.43(dd,J＝6.4,9.2Hz,1H),2.76-2.62(m,7H),2.20-2.09(m,1H),1.04(d,J＝6.8Hz,3H),0.98(d,J＝6.8Hz,3H)。

实例5

(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)(环丙基)甲醇

步骤1：2-((苄氧基)甲基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑在0℃下，将3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-胺(3.2g，23.26mmol，HCl盐)和DIEA(3.16g，24.42mmol，4.25mL)在MeOH(10mL)中的溶液逐滴添加至2-苄氧基乙醛(3.88g，25.82mmol，3.62mL)在MeOH(10mL)中的溶液中，然后添加NH₄OAc(6.96g，90.24mmol)。将混合物搅拌5分钟，然后在0℃下逐滴添加乙二醛(4.12g，28.38mmol，3.71mL，40％纯度)在MeOH(10mL)中的溶液，并且将所得混合物在25℃下搅拌16h。将混合物用H₂O(80mL)稀释，并且用EtOAc(80mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(60mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且浓缩以提供呈黄色油状物的标题化合物(7g，粗产物)。MS(ES⁺)C₁₆H₁₇FN₂O要求：272，实测：273[M+H]⁺。

步骤2：2-((苄氧基)甲基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,5-二碘-1H-咪唑在0℃下，向来自先前步骤的产物(7g，25.71mmol)在DMF(50mL)中的混合物中添加NIS(28.92g，128.53mmol)，并且将所得混合物在50℃下搅拌10h。将反应混合物用Na₂S₂O₃(饱和水性，400mL)淬灭，并且用EtOAc(300mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(150mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝10/1-5/1)纯化，随后用MTBE(80mL)研磨。将滤饼在真空中干燥，以提供呈黄色固体的标题化合物(3.5g，6.54mmol，25.46％产率，98％纯度)。

MS(ES⁺)C₁₆H₁₅FI₂N₂O要求：524，实测：525[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.38-7.06(m,5H),4.60-4.49(m,2H),4.48-4.36(m,2H),2.88-2.74(m,6H)。

步骤3：2-((苄氧基)甲基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-碘-1H-咪唑(中间体IV)在-70℃下，向来自先前步骤的产物(3g，5.72mmol)在THF(60mL)中的混合物中逐滴添加iPrMgCl(2M，3.43mL)，并且将所得混合物在-70℃下搅拌1h。将反应混合物用NH₄Cl(饱和水性，100mL)淬灭，并且用EtOAc(80mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(60mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝20/1-8/1)纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(2g，4.57mmol，79.85％产率，91％纯度)。

MS(ES⁺)C₁₆H₁₆FIN₂O要求：398，实测：399[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.33-7.15(m,5H),6.88(s,1H),4.50(s,2H),4.41(s,2H),2.53(d,J＝2.0Hz,6H)。

步骤4：5-(2-((苄氧基)甲基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-4-基)-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-胺将中间体IV(1g，2.44mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-胺(1.00g，3.29mmol)、Pd(dppf)Cl₂(267.35mg，365.38μmol)和K₂CO₃(2M，4.03mL)在DMF(30mL)中的混合物脱气，并且用N₂吹扫3次，并且在N₂气氛下、于90℃下将所得混合物搅拌1h。将反应混合物用H₂O(120mL)稀释，并且用EtOAc(80mL x 4)萃取。将有机层用盐水(80mL x 4)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且浓缩。将残余物通过快速柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝8/1-1/1)纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(912mg，1.57mmol，64.29％产率，77％纯度)。MS(ES⁺)C₂₂H₂₀F₄N₄O₂要求：448，实测：449[M+H]⁺。

步骤5：(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)甲醇将来自先前步骤的产物(1.07g，2.39mmol)在TFA(10mL)中的混合物在90℃下搅拌8h。将反应混合物在真空中浓缩，将残余物用NaHCO₃(饱和水性，40mL)稀释，并且用EtOAc(40mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝2/1-0/1)纯化以提供呈白色固体的标题化合物(595mg，1.66mmol，69.59％产率)。

MS(ES⁺)C₁₅H₁₄F₄N₄O₂要求：358，实测：359[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.26(d,J＝1.7Hz,1H),7.75(s,1H),7.00(s,1H),5.02(s,2H),4.70(s,2H),2.72(d,J＝2.0Hz,6H)。

步骤6：4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-甲醛在25℃下，向来自先前步骤的产物(590mg，1.65mmol)在CHCl₃(20mL)中的混合物中添加MnO₂(1.43g，16.47mmol)，并且将所得混合物在50℃下搅拌6h。在25℃下添加另外的MnO₂(715.80mg，8.23mmol)，并且将所得混合物在50℃下再搅拌4h。将反应混合物过滤。将滤饼用CH₂Cl₂(20mL x 3)和THF(30mL)以及EtOAc(20mL)洗涤。将滤液在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝8/1-2/1)纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(398mg，860.18μmol，52.24％产率，77％纯度)。MS(ES⁺)C₁₅H₁₂F₄N₄O₂要求：356，实测：357[M+H]⁺。

步骤7：(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)(环丙基)甲醇(实例5)在N₂下、于-70℃下经由注射器向来自先前步骤的产物(200mg，432.25μmol)在THF(4mL)中的混合物中逐滴添加环丙基溴化镁(0.5M，12.97mL)，并且将所得混合物在-70℃下搅拌0.5h。将反应混合物用NH₄Cl(饱和水性，20mL)淬灭，并且用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过制备型TLC(SiO₂，CH₂Cl₂/EtOAc/甲醇＝5/5/1)纯化以提供呈白色固体的实例5(42.2mg，101.70μmol，23.53％产率，96％纯度)。

MS(ES⁺)C₁₈H₁₈F₄N₄O₂要求：398，实测：399[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.34(d,J＝1.8Hz,1H),7.79(s,1H),6.98(s,1H),4.73(s,2H),4.38(d,J＝5.76Hz,1H),3.66(brs,1H),2.74-2.64(m,6H),0.64-0.61(m,2H),0.51-0.44(m,1H),0.40-0.32(m,1H)。

实例6

(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)(环丙基)甲醇

步骤1：5-(2-((苄氧基)甲基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-4-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺将中间体IV(1.76g，4.42mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1.66g，5.75mmol)、Pd(dppf)Cl₂(517.43mg，707.16μmol)和K₂CO₃(2M，7.33mL)在DMF(45mL)中的混合物脱气，并且用N₂吹扫3次，并且将所得混合物在90℃下搅拌4h。将反应混合物用H₂O(90mL)稀释，并且用EtOAc(90mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(90mL x 3)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物与另一批(204mg规模)合并，并且通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝5/1-1/1)纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(2.1g，4.86mmol，109.88％产率)。MS(ES⁺)C₂₂H₂₀F₄N₄O要求：432，实测：433[M+H]⁺。

步骤2：(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)甲醇将来自先前步骤的产物(1.6g，3.70mmol)在TFA(20mL)中的混合物在90℃下搅拌16h。将反应混合物在真空中浓缩。将残余物用NaHCO₃(饱和水性)淬灭，并且用EtOAc(80mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝2/1-0/1)纯化以提供呈白色固体的标题化合物(1.1g，3.21mmol，86.85％产率，100％纯度)。MS(ES⁺)C₁₅H₁₄F₄N₄O要求：342，实测：343[M+H]⁺。

步骤3：4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-甲醛向来自先前步骤的产物(700mg，2.05mmol)在CHCl₃(14mL)中的混合物中添加MnO₂(2.67g，30.68mmol)，并且将所得混合物在50℃下搅拌21h。将反应混合物过滤，并且将滤饼依次用CH₂Cl₂(20mL x 3)、THF(10mL x 3)和EtOAc(5mL x 3)洗涤。将合并的滤液在真空中浓缩。将粗产物与另一批(100mg规模)合并，并且通过MTBE(40mL)研磨，并且将滤饼在真空中干燥以提供第一批呈黄色固体的标题化合物(540mg，1.59mmol，77.75％产率)。将滤液通过制备型TLC(SiO₂，石油醚/EtOAc＝2/1)纯化以提供第二批呈黄色固体的标题化合物(140mg，411.43μmol，20.12％产率)。

MS(ES⁺)C₁₅H₁₂F₄N₄O要求：340，实测：341[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.82(d,J＝0.88Hz,1H),8.63(d,J＝1.68Hz,1H),8.16(d,J＝2.0Hz,1H),7.26(s,1H),5.07(s,2H),2.81(d,J＝2.0Hz,6H)。

步骤4：(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-氟双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)(环丙基)甲醇(实例6)在N₂下、于-70℃下向来自先前步骤的产物(160mg，470.21μmol)在THF(4mL)中的混合物中逐滴添加环丙基溴化镁(0.5M，14.11mL)，并且将所得混合物在-70℃下搅拌1.5h。将反应混合物与另一批(10mg规模)合并以进行后处理。将合并的混合物用NH₄Cl(20mL)淬灭，并且用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过制备型TLC(SiO₂，CH₂Cl₂/EtOAc/MeOH＝5/5/1)纯化，随后通过制备型HPLC(柱：Phenomenex Synergi C18 150mm*30mm*4μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：20％-50％，10分钟)纯化以提供呈白色固体的实例6(57.5mg，144.37μmol，30.70％产率，96％纯度)。

MS(ES⁺)C₁₈H₁₈F₄N₄O要求：382，实测：383[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.56(d,J＝1.6Hz,1H),8.09(d,J＝2.0Hz,1H),7.00(s,1H),4.98(s,2H),4.38(d,J＝7.1Hz,1H),2.74-2.68(m,6H),1.58-1.55(m,1H),0.66-0.47(m,2H),0.51-0.44(m,1H),0.39-0.32(m,1H)。

实例7a和7b

(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇和

(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇

步骤1：叔丁基(3-(1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)氨基甲酸酯在0℃下，将叔丁基(3-氨基双环[1.1.1]戊烷-1-基)氨基甲酸酯(5g，25.22mmol)在MeOH(20mL)中的溶液逐滴添加至HCHO(2.73g，33.58mmol，2.5mL)在MeOH(20mL)中的溶液中，然后添加NH₄OAc(7.50g，97.30mmol)，搅拌5分钟后，随后在0℃下逐滴添加乙二醛(4.44g，30.60mmol，4.00mL，40％纯度)在甲醇(20mL)中的溶液，并且将所得混合物在15℃下搅拌16h。将四个批次的反应混合物合并，并且添加H₂O(300mL)。将混合物用EtOAc(300mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(300mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，CH₂Cl₂/MeOH＝1/0-10/1)纯化以提供呈黄色油状物的标题化合物(16.2g，46.14mmol，45.74％产率，71％纯度)。

MS(ES⁺)C₁₃H₁₉N₃O₂要求：249，实测：250[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.55(s,1H),7.11(s,1H),6.92(d,J＝1.24Hz,1H),5.05(s,1H),2.48(s,6H),1.46(s,9H)。

步骤2：叔丁基(3-(2-(1-羟基-2-甲基丙基)-1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)氨基甲酸酯在N₂下、于-70℃下向来自先前步骤的产物(5.0g，14.24mmol)在THF(160mL)中的溶液中逐滴添加n-BuLi(2.5M，40mL，7.02当量)。在N₂下、于-70℃下搅拌0.5h后，添加2-甲基丙醛(4.74g,65.74mmol，6mL)，并且在N₂下、于-70℃下将所得混合物再搅拌1.5h。在-70℃下，将反应混合物用NH₄Cl(饱和水性，100mL)缓慢淬灭，然后将混合物用EtOAc(200ml x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝3/1-0/1)纯化以提供呈浅黄色固体的标题化合物(4.5g，9.10mmol，63.91％产率，65％纯度)。MS(ES⁺)C₁₇H₂₇N₃O₃要求：321，实测：322[M+H]⁺。

步骤3：叔丁基(3-(2-(1-羟基-2-甲基丙基)-4,5-二碘-1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)氨基甲酸酯在0℃下，向来自先前步骤的产物(3.2g，6.47mmol)在DMF(100mL)中的溶液中添加NIS(10g，44.45mmol)，并且将所得混合物在50℃下搅拌12h。在0℃下添加Na₂SO₃(饱和水性，80mL)，并且将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。将混合物用EtOAc(200mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝10/1-1/1)纯化以提供呈浅黄色固体的标题化合物(3.0g，4.55mmol，70.36％产率，87％纯度)。

MS(ES⁺)C₁₇H₂₅I₂N₃O₃要求：573，实测：574[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ4.99(s,1H),4.52-4.37(m,1H),2.86-2.80(m,6H),2.58-2.32(m,1H),2.04-1.98(m,1H),1.40(s,9H),0.96(d,J＝6.4,3H),0.95(d,J＝6.4,3H)。

步骤4：叔丁基(3-(2-(1-羟基-2-甲基丙基)-4-碘-1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)氨基甲酸酯在-70℃下，向来自先前步骤的产物(4.0g，6.98mmol，1当量)在THF(120mL)中的混合物中添加iPrMgCl(2M，4.2mL)，并且在N₂下、于-70℃下将所得混合物搅拌1h。在-70℃下缓慢添加NH₄Cl(饱和水性，60mL)，然后将混合物用EtOAc(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(60mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝20/1-1/1)纯化以提供呈浅黄色固体的标题化合物(1.8g，3.74mmol，53.63％产率，93％纯度)。

MS(ES⁺)C₁₇H₂₆IN₃O₃要求：447，实测：448[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ6.87(s,1H),5.13(s,1H),4.39(d,J＝6.48Hz,1H),2.65-2.54(m,6H),2.16-2.07(m,1H),1.46(s,9H),1.02(d,J＝6.60Hz,3H),0.89(d,J＝6.72Hz,3H)。

步骤5：叔丁基(3-(2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-甲基丙基)-4-碘-1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)氨基甲酸酯在0℃下，向来自先前步骤的产物(1.8g，3.74mmol)在DMF(60mL)中的溶液中添加TBSCl(2.5g，16.59mmol，2.03mL)和咪唑(1.60g，23.50mmol)，并且将所得混合物在30℃下搅拌12h。将反应混合物用H₂O(60mL)稀释，然后将混合物用EtOAc(100mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝20/1-3/1)纯化以提供呈浅黄色固体的标题化合物(2.1g，3.74mmol，99.92％产率)。

MS(ES⁺)C₂₃H₄₀IN₃O₃Si要求：561，实测：562[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ6.77(s,1H),4.99(s,1H),4.33(d,J＝9.28Hz,1H),2.44(s,6H),2.14-1.97(m,1H),1.36(s,9H),0.96(d,J＝6.60Hz,3H),0.74(s,9H),0.60(d,J＝6.72Hz,3H),0.21(s,6H)。

步骤6：3-(2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-甲基丙基)-4-碘-1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-胺在0℃下，向来自先前步骤的产物(2.1g，3.74mmol)在CH₂Cl₂(20mL)中的溶液中逐滴添加TFA(12.94g，113.45mmol，8.40mL)，并且将所得混合物在20℃下搅拌4h。将反应混合物在减压下浓缩，然后在0℃下添加NaHCO₃(饱和水性，30mL)，并且将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后用EtOAc(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(80mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤。将滤液在减压下浓缩以提供呈浅黄色油状物的标题化合物(1.7g，粗产物)，将其不经进一步纯化用于下一步骤。MS(ES⁺)C₁₈H₃₂IN₃OSi要求：461，实测：462[M+H]⁺。

步骤7：1-(3-(2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-甲基丙基)-4-碘-1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)哌啶-4-酮在20℃下，向来自先前步骤的产物(1.6g，3.47mmol)和NaHCO₃(1.60g，19.05mmol，740.74uL)在MeOH(100mL)中的混合物中逐滴添加在MeOH(10mL)中的1,5-二溴戊烷-3-酮(2.00g,8.20mmol)，并且将所得混合物在20℃下搅拌12h。将反应混合物过滤，并且将滤液在减压下浓缩。然后在0℃下添加H₂O(40mL)，并且将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后用EtOAc(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝10/1-2/1)纯化以提供呈浅黄色油状物的标题化合物(1.54g，2.83mmol，81.71％产率)。

MS(ES⁺)C₂₃H₃₈IN₃O₂Si要求：543，实测：544[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ6.92(s,1H),4.45(d,J＝9.36Hz,1H),2.89-2.74(m,4H),2.51(t,J＝6.12Hz,4H),2.38-2.29(m,6H),2.20-2.14(m,1H),1.07(d,J＝6.48Hz,3H),0.85(s,9H),0.71(d,J＝6.64Hz,3H),-0.11(s,6H)。

步骤8：1-(3-(2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-甲基丙基)-4-碘-1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二氟哌啶在0℃下，向来自先前步骤的产物(800mg，1.47mmol)在CH₂Cl₂(30mL)中的溶液中添加DAST(732.00mg，4.54mmol，600.00uL)，并且将所得混合物在20℃下搅拌2h。在0℃下添加NaHCO₃(饱和水性，60mL)，并且将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。将混合物用CH₂Cl₂(60mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(80mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物与另一批(700mg规模)合并，并且通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝10/1-2/1)纯化以提供呈浅黄色固体的标题化合物(750mg，1.33mmol，90.10％产率)。

MS(ES+)C₂₃H₃₈F₂IN₃OSi要求：565，实测：566[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.04-6.95(m,1H),4.55(d,J＝9.28Hz,1H),2.74(t,J＝5.60Hz,4H),2.47-2.38(m,6H),2.35-2.23(m,1H),2.22-2.04(m,4H),1.18(d,J＝6.48Hz,3H),0.96(s,9H),0.81(d,J＝6.72Hz,3H),0.00(s,6H)。

步骤9：1-(1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-碘-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇(中间体V)在0℃下，向来自先前步骤的产物(700mg，1.24mmol)在THF(30mL)中的溶液中逐滴添加TBAF(1M，4mL)，并且将所得混合物在20℃下搅拌4h。在0℃下，将反应混合物用NH₄Cl(饱和水性，50mL)缓慢淬灭，然后在0℃下搅拌30分钟。将混合物用EtOAc(100mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水(400mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝10/1-2/1)纯化以提供呈浅黄色固体的标题化合物(450mg，997.14μmol，80.56％产率)。

MS(ES⁺)C₁₇H₂₄F₂IN₃O要求：451，实测：452[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ6.96-6.79(m,1H),4.39(s,1H),2.65-2.61(m,4H),2.43-2.22(m,6H),2.18-2.09(m,1H),2.09-1.95(m,4H),1.03(d,J＝6.72Hz,3H),0.87(d,J＝6.72Hz,3H)。

步骤10：1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇将中间体V(400mg，886.34μmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(360.01mg，1.25mmol)、Pd(dppf)Cl₂(160.00mg，218.67μmol)和K₂CO₃(2M，1.60mL)在DMF(20mL)中的混合物脱气，并且用N₂吹扫3次，并且在N₂下、于90℃下将所得混合物搅拌1h。将反应混合物过滤。将滤液用H₂O(50ml)稀释，并且用EtOAc(100ml x3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mlx 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，EtOAc/CH₂Cl₂/MeOH＝20/20/1-5/5/2)纯化，随后通过制备型TLC(EtOAc/CH₂Cl₂/MeOH＝5/5/2)纯化以提供呈浅黄色固体的标题化合物(400mg，790.95μmol，89.24％产率，96％纯度)。MS(ES⁺)C₂₃H₂₈F₅N₅O要求：485，实测：486[M+H]⁺。

步骤11：(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇和(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇(实例7a和7b)将来自前述步骤的外消旋产物(400mg)通过手性HPLC(柱：DAICEL CHIRALPAK AD(250mm*30mm*10μm)；流动相：[0.1％NH₄OH/EtOH]；B％：40％-40％，2.5分钟，70分钟)分离以提供未确定绝对立体化学的两个对映异构体。

将实例7a通过制备型HPLC(柱：Boston Green ODS 150mm*30mm*5μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：30％-60％，10分钟；柱温：30℃)再纯化，并且获得白色固体(119.3mg，245.73μmol，29.82％产率，100％纯度)；保留时间＝1.381分钟(柱：Amycoat50mm*4.6mm*3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为EtOH(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的EtOH(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；波长：220nm；柱温：35℃；背压：100巴)。

MS(ES⁺)C₂₃H₂₈F₅N₅O要求：485，实测：486[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.47(d,J＝1.60Hz,1H),8.00(d,J＝1.84Hz,1H),6.94(s,1H),4.92(s,2H),4.41(d,J＝6.12Hz,1H)2.58(t,J＝5.68Hz,4H),2.33-2.26(m,6H),2.12-2.05(m,1H),2.01-1.93(m,4H),0.95(d,J＝6.72Hz,3H),0.89(d,J＝6.72Hz,3H)。

将实例7b通过制备型HPLC(柱：Phenomenex Synergi C18 150mm*25mm*10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：20％-42％，11分钟；柱温：30℃)再纯化，并且获得白色固体(113.0mg，232.75μmol，28.25％产率，100％纯度)；保留时间＝1.726分钟(柱：Amycoat50mm*4.6mm*3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为EtOH(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的EtOH(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；波长：220nm；柱温：35℃；背压：100巴)。

MS(ES⁺)C₂₃H₂₈F₅N₅O要求：485，实测：486[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(d,J＝1.48Hz,1H),8.08(d,J＝1.84Hz,1H),7.01(s,1H),5.03(s,2H),4.49(d,J＝6.36Hz,1H),2.66(br t,J＝5.64Hz,4H),2.42-2.34(m,6H),2.16(m,1H),2.10-1.98(m,4H),1.04(d,J＝6.72Hz,3H),0.97(d,J＝6.84Hz,3H)。

实例8a和8b

(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇和

(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇

步骤1：1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇将中间体V(400mg，886.34μmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-胺(400mg，1.32mmol)、K₂CO₃(2M，2.05mL)和Pd(dppf)Cl₂(160mg，218.67μmol)在DMF(20mL)中的混合物脱气，并且用N₂吹扫3次，并且在N₂下、于90℃下将所得混合物搅拌1h。将反应混合物过滤。将滤液用H₂O(50mL)稀释，并且用EtOAc(100mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，EtOAc/CH₂Cl₂/MeOH＝20/20/1-5/5/2)纯化，随后通过制备型HPLC(柱：Phenomenex lunaC18 150mm*40mm*15μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：11％-41％，8.5分钟；柱温：30℃)纯化以提供呈浅黄色固体的标题化合物(400mg，749.76μmol，84.59％产率，94％纯度)。MS(ES+)C₂₃H₂₈F₅N₅O₂要求：501，实测：502[M+H]⁺。

步骤2：(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇和(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2-甲基丙-1-醇(实例8a和8b)将来自前述步骤的外消旋化合物(400mg)通过手性HPLC(柱：DAICEL CHIRALPAK AD-H(250mm*30mm*5μm)；流动相：[0.1％NH₄OH/EtOH]；B％：25％-25％，6.5分钟；45分钟)分离以提供未确定绝对立体化学的两个对映异构体。

获得呈白色固体的实例8a(107.6mg，214.56μmol，28.62％产率，100％纯度)；保留时间＝1.238分钟(柱：Chiralpak AD-3 50mm*4.6mm*3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为EtOH(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的EtOH(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；波长：220nm；柱温：35℃；背压：100巴)。

MS(ES⁺)C₂₃H₂₈F₅N₅O₂要求：501，实测：502[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.33(d,J＝1.84Hz,1H),7.77(d,J＝1.6Hz,1H),6.99(s,1H),4.76(s,2H),4.48(dd,J＝8.66,6.24Hz,1H),2.96(d,J＝8.80Hz,1H),2.66(t,J＝5.68Hz,4H),2.42-2.31(m,6H),2.20-2.12(m,1H),2.11-2.00(m,4H),1.03(d,J＝6.72Hz,3H),0.96(d,J＝6.86Hz,3H)。

获得呈白色固体的实例8b(146.4mg，291.93μmol，38.94％产率，100％纯度)；保留时间＝1.492分钟(柱：Chiralpak AD-3 50mm*4.6mm*3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为EtOH(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的EtOH(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；波长：220nm；柱温：35℃；背压：100巴)。

MS(ES⁺)C₂₃H₂₈F₅N₅O₂要求：501，实测：502[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.34(d,J＝1.83Hz,1H),7.80-7.74(m,1H),6.99(s,1H),4.77(s,2H),4.48(dd,J＝8.68,6.24Hz,1H),2.97(d,J＝8.68Hz,1H),2.66(t,J＝5.68Hz,4H),2.41-2.33(m,6H),2.21-2.12(m,1H),1.97-2.11(m,4H),1.03(d,J＝6.60Hz,3H),0.97(d,J＝6.72Hz,3H)。

实例9a和9b

(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇和

(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇

步骤1：叔丁基(3-(2-((苄氧基)甲基)-1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)氨基甲酸酯向2-苄氧基乙醛(4.19g，27.90mmol，3.92mL)在MeOH(125mL)中的混合物中添加叔丁基(3-氨基双环[1.1.1]戊烷-1-基)氨基甲酸酯(5g，25.22mmol)、NH₄OAc(6.57g，85.23mmol)，随后在0℃下逐滴添加乙二醛(4.45g，30.67mmol，4.01mL，40％纯度)在MeOH(25mL)中的溶液。将混合物在25℃下搅拌16h。将两批反应混合物合并。将合并的混合物用H₂O(500mL)稀释，并且用EtOAc(400mL x 4)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩以提供呈黄色油状物的标题化合物(22g，粗产物)。MS(ES⁺)C₂₁H₂₇N₃O₃要求：369，实测：370[M+H]⁺。

步骤2：叔丁基(3-(2-((苄氧基)甲基)-4,5-二碘-1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)氨基甲酸酯在0℃下，向来自先前步骤的产物(22g，59.55mmol)在DMF(120mL)中的混合物中添加NIS(66.98g，297.73mmol)。将混合物在50℃下搅拌9h。将两批反应混合物合并，用Na₂S₂O₃(饱和水性，400mL)淬灭，并且用EtOAc(400mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(300mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝10/1至3/1)纯化，然后通过MTBE(80mL)研磨，并且过滤。将滤饼用EtOAc(30mL)洗涤，并且在真空中干燥，以提供呈白色固体的标题化合物(10g，16.10mmol，13.52％产率，100％纯度)。MS(ES⁺)C₂₁H₂₅I₂N₃O₃要求：621，实测：622[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.43-7.22(m,5H),5.02(brs,1H),4.64(s,2H),4.51(s,2H),2.82(s,6H),1.48(s,9H)。

步骤3：叔丁基(3-(2-((苄氧基)甲基)-4-碘-1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)氨基甲酸酯在-70℃下，向来自先前步骤的产物(7.8g，12.56mmol)在THF(160mL)中的混合物中逐滴添加iPrMgCl(2M，8.79mL)，并且将混合物在-70℃下搅拌2h。将反应混合物倾倒入NH₄Cl(饱和水性，400mL)中，并且用EtOAc(3x 200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(500mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤。将滤液在减压下浓缩以提供呈白色固体的标题化合物(6.12g，12.35mmol，98.40％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.38-7.28(m,5H),6.97(s,1H),5.05(brs,1H),4.59(s,2H),4.49(s,2H),2.52(brs,6H),1.45(s,9H)。

步骤4：3-(2-((苄氧基)甲基)-4-碘-1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-胺向来自先前步骤的产物(7.7g，15.54mmol)在无水MeOH(70mL)中的溶液中添加HCl/MeOH(4M，70mL)，并且将所得混合物在20℃下搅拌4h。将反应浓缩。将残余物倾倒入NaHCO₃(饱和水性，200mL)中，并且将所得混合物用EtOAc(200mL x 3)萃取。将合并的有机层通过盐水(400mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且浓缩以提供呈黄色油状物的标题化合物(6g，15.18mmol，97.66％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.40-7.20(m,5H),6.96(s,1H),4.58(s,2H),4.48(s,2H),2.31(s,6H)。

步骤5：1-(3-(2-((苄氧基)甲基)-4-碘-1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)哌啶-4-酮向来自先前步骤的产物(2.2g，5.57mmol)和NaHCO₃(2.34g，27.83mmol)在MeOH(110mL)中的混合物中逐滴添加在MeOH(11mL)中的1,5-二溴戊烷-3-酮(2.72g，11.13mmol)，并且将所得混合物加热至60℃持续1h。将反应混合物过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(石油醚/EtOAc＝1/1)纯化以提供第一批呈黄色固体的标题化合物(4.1g，8.59mmol，51.44％产率)和第二批呈黄色油状物的标题化合物(700mg，1.04mmol，6.24％产率，71％纯度)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ7.35-7.28(m,5H),6.99(s,1H),4.60(s,2H),4.49(s,2H),2.79(t,J＝6.2Hz,4H),2.49(t,J＝6.2Hz,4H),2.32(s,6H)。

步骤6：1-(3-(2-((苄氧基)甲基)-4-碘-1H-咪唑-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4,4-二氟哌啶(中间体VI)向来自先前步骤的产物(2g，4.19mmol)在CH₂Cl₂(40mL)中的溶液中添加DAST(1.42g，8.80mmol，1.16mL)，并且将所得混合物在20℃下剧烈搅拌0.5h。将反应混合物倾倒入水(100mL)中，并且用CH₂Cl₂(3x 50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱(石油醚/EtOAc＝5/1-1/1)纯化以提供呈白色固体的标题化合物(1.53g，3.06mmol，73.13％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.38-7.28(m,5H),6.99(s,1H),4.59(s,2H),4.49(s,2H),2.63-2.59(m,4H),2.28(s,6H),2.09-1.97(m,4H)。

步骤7：(1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-碘-1H-咪唑-2-基)甲醇将中间体VI(3.4g，6.81mmol)在TFA(34mL)中的混合物在90℃下搅拌16h。将反应混合物与另一批(11.7g规模)合并。将合并的混合物在真空中浓缩。将残余物用NaHCO₃(饱和水性，220mL)淬灭，并且用EtOAc(220mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩以提供粗产物。将粗产物通过MTBE(140mL)研磨，并且过滤。将滤饼在真空中干燥以提供第一批呈黄色固体的标题化合物(8.2g，89％纯度)。将滤液浓缩，并且通过柱色谱法(SiO₂，CH₂Cl₂/MeOH＝1/0-10/1)纯化以提供第二批呈黄色固体的标题化合物(3.6g，80％纯度)。MS(ES⁺)C₁₄H₁₈F₂IN₃O要求：409，实测：410[M+H]⁺。

步骤8：1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-碘-1H-咪唑-2-甲醛在N₂下、于15℃下，向来自先前步骤的产物(5g，12.22mmol)在CHCl₃(80mL)中的混合物中添加MnO₂(15.93g，183.28mmol)，并且将所得混合物在50℃下搅拌16h。将反应混合物过滤。将滤饼依次用THF(25mL x 2)、CH₂Cl₂(50mL x 2)和EtOAc(50mL x 2)洗涤。将滤液在真空中浓缩以提供呈黄色固体的标题化合物(4.44g，10.90mmol，89.24％产率)。MS(ES⁺)C₁₄H₁₆F₂IN₃O要求：407，实测：408[M+H]⁺。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.70(s,1H),7.17(d,J＝0.7Hz,1H),2.65(t,J＝5.7Hz,4H),2.41(s,6H),2.11-1.97(m,4H)。

步骤9：1-(1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-4-碘-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇(中间体VII)平行进行两批以下反应。在N₂下、于-20℃下，向来自先前步骤的产物(2.5g，6.14mmol)在THF(150mL)中的溶液中逐滴添加TMSCF₃(10.48g，73.67mmol)在THF(100mL)中的溶液持续1h，搅拌10分钟后，在N₂下、于-20℃下逐滴添加TBAF(1M，73.67mL)持续1h，并且将所得混合物在-20℃下搅拌0.5h。将两批反应混合物用NH₄Cl(饱和水性，1000mL)淬灭，并且用EtOAc(1000mL x 3)萃取。将有机层用NH₄Cl(饱和水性，1000mL x 3)洗涤。将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并且浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝10/1-3/1)纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(4.14g，8.68mmol，70.65％产率)。MS(ES⁺)C₁₅H₁₇F₅IN₃O要求：477，实测：478[M+H]⁺。

步骤10：1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇将来自先前步骤的产物(3g，6.29mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-胺(2.56g，8.42mmol)、Pd(dppf)Cl₂(689.99mg，942.98μmol)和K₂CO₃(2M，10.47mL)在DMF(50mL)中的混合物脱气，并且用N₂吹扫3次，并且在N₂气氛下、于90℃下将所得混合物搅拌1小时。将反应混合物用H₂O(60mL)稀释，并且用EtOAc(60mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(60x 3)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤。将滤液在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝8/1-1/1)纯化，随后通过制备型HPLC(柱：Phenomenex luna C18150mm*40mm*15μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：25％-55％，9分钟)纯化以提供呈白色固体的标题化合物(1.8g，3.34mmol，53.20％产率，98％纯度)。MS(ES⁺)C₂₁H₂₁F₈N₅O₂要求：527，实测：528[M+H]⁺。

步骤11：(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇和(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇(实例9a和9b)将外消旋标题化合物(1.8g)通过手性HPLC(柱：DAICEL CHIRALCEL OJ-H(250mm*30mm*5μm)；流动相：[0.1％NH₄OH/EtOH]；B％：20％-20％，4.95分钟；149分钟)分离以提供未确定绝对立体化学的两个对映异构体。

获得呈白色固体的实例9a(687.4mg，1.26mmol，36.92％产率，97％纯度)；保留时间＝0.878(柱：Chiralcel OJ-3 50mm*4.6mm*3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为EtOH(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的EtOH(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；检测器：PDA；柱温：35℃；背压：100巴)。

MS(ES⁺)C₂₁H₂₁F₈N₅O₂要求：527，实测：528[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.36(d,J＝2.0Hz,1H),7.77(d,J＝1.6Hz,1H),7.12(s,1H),5.11(br s,1H),4.79(s,2H),4.37(br s,1H),2.66(t,J＝5.6Hz,4H),2.44-2.34(m,6H),2.13-2.00(m,4H)。

获得呈白色固体的实例9b(697.2mg，1.31mmol，38.38％产率，99％纯度)；保留时间＝1.150(柱：Chiralcel OJ-3 50mm*4.6mm*3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为EtOH(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的EtOH(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；检测器：PDA；柱温：35℃；背压：100巴)。

MS(ES⁺)C₂₁H₂₁F₈N₅O₂要求：527，实测：528[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.37(d,J＝1.6Hz,1H),7.79-7.66(m,1H),7.09(s,1H),5.33(br s,1H),5.14(br d,J＝5.0Hz,1H),4.94(s,2H),2.65(br t,J＝5.6Hz,4H),2.43-2.34(m,6H),2.12-1.99(m,4H)。

实例10a和10b

(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇和

(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇

步骤1：1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇将中间体VII(2g，4.19mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(1.62g，5.62mmol)、Pd(dppf)Cl₂(459.99mg，628.65μmol)和K₂CO₃(2M，6.98mL)在DMF(60mL)中的混合物脱气，并且用N₂吹扫3次，并且在N₂气氛下、于90℃下将所得混合物搅拌1小时。将反应混合物与另一批(1g规模)合并，用H₂O(50mL)稀释，并且用EtOAc(30mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(45mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝2/1-1/2)纯化，随后通过制备型HPLC(柱：Phenomenex luna C18 150*40mm*15μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：24％-54％，9分钟)纯化以提供第一批呈白色固体的标题化合物(908mg，1.72mmol，41.09％产率，97％纯度)和第二批黄色固体(293mg，472.20μmol，11.27％产率，80％纯度)。MS(ES⁺)C₂₁H₂₁F₈N₅O要求：511，实测：512[M+H]⁺。

步骤2：(R)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇和(S)-1-(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)-2,2,2-三氟乙醇(实例10a和10b)将外消旋标题化合物(1.3g)通过手性HPLC(柱：DAICEL CHIRALPAK AD-H(250mm*30mm*5μm)；流动相：[0.1％NH₄OH/EtOH]；B％：25％-25％，2.2分钟；380分钟)分离以提供未确定绝对立体化学的两个对映异构体。

实例10a：获得白色固体(602.4mg，1.17mmol，45.88％产率，99％纯度)；保留时间＝1.237(柱：Chiralpak AD-3 50mm*4.6mm*3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为IPA(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的IPA(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；检测器：PDA；柱温：35℃；背压：100巴)。

MS(ES⁺)C₂₁H₂₁F₈N₅O要求：511，实测：512[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.58(d,J＝1.6Hz,1H),8.07(d,J＝2.0Hz,1H),7.14(s,1H),5.12(br s,1H),5.02(s,2H),4.36(br d,J＝7.0Hz,1H),2.66(t,J＝5.6Hz,4H),2.44-2.34(m,6H),2.12-2.00(m,4H)。

获得呈白色固体的实例10b(566.1mg，1.11mmol，43.55％产率，100％纯度)；保留时间＝1.399(柱：Chiralpak AD-3 50mm*4.6mm*3μm；流动相：A相为CO₂，以及B相为IPA(0.05％DEA)；梯度洗脱：在CO₂中的IPA(0.05％DEA)，从5％至40％；流速：3mL/min；检测器：PDA；柱温：35℃；背压：100巴)。

MS(ES⁺)C₂₁H₂₁F₈N₅O要求：511，实测：512[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.58(d,J＝1.6Hz,1H),8.07(d,J＝2.0Hz,1H),7.14(s,1H),5.12(br s,1H),5.02(s,2H),4.36(br d,J＝7.0Hz,1H),2.66(t,J＝5.6Hz,4H),2.41-2.36(m,6H),2.11-2.00(m,4H)。

实例11

(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)(环丙基)甲醇(IACS-071089)

步骤1：5-(2-((苄氧基)甲基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-4-基)-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-胺在N₂下，向中间体VI(1g，2.00mmol)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-(三氟甲氧基)吡啶-2-胺(791.64mg，2.60mmol)在DMF(30mL)中的混合物中添加Pd(dppf)Cl₂(250.00mg，341.67μmol)和K₂CO₃(2M，3.30mL)。将混合物加热至90℃持续0.5h。将反应混合物倾倒入水(100mL)中，并且用EtOAc(3x 50mL)萃取。将合并的有机层用CaCl₂(饱和水性，100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱(石油醚/EtOAc＝1/1-0/1)纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(0.9g，1.47mmol，73.60％产率，90％纯度)。

MS(ES⁺)C₂₇H₂₈F₅N₅O₂要求：549，实测：550[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.35(s,1H),7.80(s,1H),7.39-7.29(m,5H),7.08(s,1H),4.73(s,2H),4.65(s,2H),4.55(s,2H),2.62(br t,J＝5.6Hz,4H),2.33(s,6H),2.13-1.98(m,4H)。

步骤2：(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)甲醇将来自先前步骤的产物(900mg，1.64mmol)在TFA(8mL)中的混合物在90℃下搅拌12h，然后在减压下浓缩。将残余物用NaHCO₃(饱和水性，50mL)稀释，并且用EtOAc(50mL x 3)萃取。将有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤。将滤液浓缩，并且通过硅胶柱(EtOAc/甲醇＝100/1-20/1)纯化以提供呈灰色固体的标题化合物(550mg，1.10mmol，67.25％产率，92％纯度)。

MS(ES⁺)C₂₀H₂₂F₅N₅O₂要求：459，实测：460[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.31(d,J＝1.2Hz,1H),7.77(s,1H),7.04(s,1H),4.85(s,2H),4.72(s,2H),2.66(t,J＝5.6Hz,4H),2.38(s,6H),2.12-1.96(m,4H)。

步骤3：4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-甲醛向来自先前步骤的产物(150mg，326.50μmol)在CHCl₃(5mL)中的溶液中添加MnO₂(283.85mg，3.27mmol)，并且将所得混合物在50℃下搅拌48h。将反应混合物过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(石油醚/EtOAc＝1/1)纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(65mg，103.74μmol，31.77％产率，73％纯度)。

MS(ES⁺)C₂₀H₂₀F₅N₅O₂要求：457，实测：458[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.81(s,1H),8.39(d,J＝1.6Hz,1H),7.88(s,1H),7.29(s,1H),4.88(s,2H),2.68(t,J＝5.6Hz,4H),2.47(s,6H),2.17-1.96(m,4H)。

步骤4：(4-(6-氨基-5-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)(环丙基)甲醇(实例11)在N₂下、于-70℃下向来自先前步骤的产物(30mg，65.59μmol)在THF(1.5mL)中的溶液中添加环丙基溴化镁(0.5M，1.31mL)，并且将所得混合物在-70℃下搅拌1小时，然后将混合物在20℃下搅拌1h。将反应混合物用NH₄Cl(饱和水性，10mL)淬灭，并且用EtOAc(3x 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(EtOAc/石油醚＝2/1)纯化，随后通过制备型HPLC(柱：Phenomenex Synergi C18 150mm*25mm*10μm；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：16％-40％，8分钟)纯化以提供呈白色固体的实例11(5.1mg，10.01μmol，15.26％产率，98％纯度)。

MS(ES⁺)C₂₃H₂₆F₅N₅O₂要求：499，实测：500[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.31(d,J＝2.0Hz,1H),7.92-7.86(d,J＝1.6Hz,1H),7.41(s,1H),4.15(d,J＝8.6Hz,1H),2.71(br t,J＝5.6Hz,4H),2.45-2.35(m,6H),2.12-1.94(m,4H),1.74-1.56(m,1H),0.76-0.67(m,1H),0.64-0.55(m,1H),0.52-0.46(m,1H),0.35-0.30(m,1H)。

实例12

(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)(环丙基)甲醇

步骤1：5-(2-((苄氧基)甲基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-4-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺将中间体VI(900mg，1.80mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(674.99mg，2.34mmol)、Pd(dppf)Cl₂(225.00mg，307.50μmol)和K₂CO₃(2M，2.97mL)在DMF(10mL)中的混合物脱气，并且用N₂吹扫3次，并且将所得混合物在90℃下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(20mL)稀释，并且用EtOAc(30mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(60mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且过滤。将滤液在减压下浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝1/0-1/1)纯化以提供呈白色固体的标题化合物(1g，1.74mmol，96.71％产率，93％纯度)。

MS(ES⁺)C₂₇H₂₈F₅N₅O要求：533，实测：534[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.57(d,J＝1.6Hz,1H),8.10(d,J＝2.0Hz,1H),7.39-7.29(m,5H),7.11(s,1H),4.97(s,2H),4.65(s,2H),4.55(s,2H),2.62(t,J＝5.6Hz,4H),2.33(s,6H),2.11-1.99(m,4H)。

步骤2：(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)甲醇将来自先前步骤的产物(900mg，1.57mmol)在TFA(10mL)中的混合物在90℃下搅拌12h。将反应混合物冷却至室温，并且在减压下浓缩。将残余物用NaHCO₃(10mL)稀释，并且用EtOAc(15mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/EtOAc＝1/0-0/1)纯化以提供呈黄色固体的标题化合物(670mg，1.38mmol，87.65％产率，91％纯度)。

MS(ES⁺)C₂₀H₂₂F₅N₅O要求：443，实测：444[M+H]⁺.

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.56(d,J＝1.2Hz,1H),8.08(d,J＝1.6Hz,1H),7.08(s,1H),5.01(s,2H),4.75(s,2H),2.66(t,J＝5.8Hz,4H),2.39(s,6H),2.12-2.01(m,4H)。

步骤3：4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-甲醛向来自先前步骤的产物(600mg，1.23mmol)在CHCl₃(10mL)中的溶液中添加MnO₂(1.18g，13.57mmol)，并且将所得混合物在50℃下搅拌12h。添加另外的MnO₂(600mg)，并且将所得混合物在50℃下再搅拌12h。将反应混合物过滤。将滤液浓缩。将残余物用MTBE(30mL)研磨，并且过滤。收集滤饼以提供第一批呈黄色固体的标题化合物(320mg，623.48μmol，50.63％产率，86％纯度)。将滤液通过制备型TLC(EtOAc/CH₂Cl₂/MeOH＝20/10/1)纯化以提供第二批呈黄色固体的标题化合物(85mg，182.94μmol，14.86％产率，95％纯度)。

MS(ES⁺)C₂₀H₂₀F₅N₅O要求：441，实测：442[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.82(d,J＝0.8Hz,1H),8.63(d,J＝1.6Hz,1H),8.16(d,J＝1.8Hz,1H),7.31(d,J＝0.8Hz,1H),5.06(s,2H),2.76-2.58(m,4H),2.47(s,6H),2.14-1.99(m,4H)。

步骤4：(4-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-基)-1H-咪唑-2-基)(环丙基)甲醇(实例12)在N₂下、于-78℃下向来自先前步骤的产物(50mg，97.42μmol)在THF(2.5mL)中的溶液中添加环丙基溴化镁(0.5M，3.50mL)，并且将所得混合物在-78℃下搅拌1h。将反应混合物升温至20℃持续0.5h。将反应混合物与另一批(10mg规模)合并，并且在-78℃下用NH₄Cl(饱和水性，8mL)淬灭。将悬浮液用EtOAc(100mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL x 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且在真空中浓缩。将残余物通过制备型TLC(CH₂Cl₂/EtOAc/甲醇＝10/10/1)纯化。将粗产物通过制备型HPLC(柱：Waters Xbridge 150mm*25mm*5μm；流动相：[水(10mM NH₄HCO₃)-ACN]；B％：27％-57％，10分钟)再纯化以提供呈白色固体的实例12(8.8mg，17.11μmol，17.56％产率，94％纯度)。

MS(ES⁺)C₂₃H₂₆F₅N₅O要求：483，实测：484[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.57(s,1H),8.19(s,1H),7.45(s,1H),4.17(d,J＝8.8Hz,1H),2.73(br t,J＝5.6Hz,4H),2.46(s,6H),2.20-1.98(m,4H),1.77-1.60(m,1H),0.80-0.68(m,1H),0.66-0.57(m,1H),0.51(m,1H),0.40-0.28(m,1H)。

对实例1-12中的化合物作为DLK抑制剂的活性在以下测定中进行说明。

生物活性测定

已显示本文所述的化合物在体外结合DLK，并且在细胞测定中抑制下游分子靶标的磷酸化。

DLK Kd测定

已在DiscoveRx公司的KINOMEscan KdELECT服务中测定出DLK解离常数(K_d)。

在瞬时转染的HEK293细胞中表达全长人DLK(氨基酸1-859)和NFkB的DNA结合结构域的融合蛋白。从这些HEK293细胞中，遵照制造商的说明书，在蛋白酶抑制剂完全混合物(罗氏公司(Roche))和磷酸酶抑制剂混合物组II(默克公司(Merck))的存在下，在M-PER提取缓冲液(皮尔斯公司(Pierce))中制备提取物。用嵌合双链DNA标签来标记DLK融合蛋白，该标签含有与用于qPCR读数的扩增子融合的NFkB结合位点(5'-GGGAATTCCC-3')，将该融合蛋白直接添加至表达提取物中(结合反应中DNA标签的最终浓度为0.1nM)。

将链霉亲和素包被的磁珠(Dynal M280)用生物素酰化的小分子配体在室温下处理30分钟，以产生用于结合测定的亲和树脂。将这些配体处理的珠粒用过量的生物素封闭，并且用封闭缓冲液(SeaBlock(皮尔斯公司)、1％BSA、0.05％吐温20、1mM DTT)洗涤以去除未结合的配体，并且减少非特异性结合。

通过结合16μl的DNA标记的激酶提取物、3.8μl配位合亲和珠和0.18μl测试化合物(PBS/0.05％吐温20/10mM DTT/0.1％BSA/2μg/ml经声处理的鲑鱼精子DNA)来组装结合反应。将提取物直接用于结合测定，无需任何酶纯化步骤，总体储备液稀释度≥10,000倍(最终DNA标记的酶浓度<0.1nM)。将提取物用DNA标签加载，并且以两步过程稀释到结合反应中。首先，将提取物在含有10nM DNA标签的1x结合缓冲液(PBS/0.05％吐温20/10mM DTT/0.1％BSA/2μg/ml经声处理的鲑鱼精子DNA)中以1:100稀释。允许该稀释液在室温下平衡15分钟，随后在1x结合缓冲液中以1:100稀释。将测试化合物制备为在100％DMSO中的111x储备液。使用具有三个DMSO控制点的11个点的3倍化合物稀释系列来测定K_d。用于K_d测量的所有化合物都通过声传递(非接触式分配)分布在100％DMSO中。然后将化合物直接稀释到测定中，使得DMSO的最终浓度为0.9％。所有反应均在聚丙烯384孔板中进行。每个反应的最终体积为0.02mL。将测定物在室温下在振荡下孵育1小时。然后将珠粒沉淀，并且用洗涤缓冲液(1x PBS、0.05％吐温20)洗涤以去除被置换的激酶和测试化合物。将这些洗涤过的珠粒重悬浮于洗脱缓冲液(1x PBS、0.05％吐温20、0.5μM非生物素酰化的亲和配体)中，并且在室温下在振荡下孵育30分钟。通过qPCR测量洗脱物中的激酶浓度。通过向含有0.15μM扩增子引物和0.15μM扩增子探针的7.5μL的qPCR主混合液中添加2.5μL激酶洗脱物来组装qPCR反应。qPCR方案由在95℃下10分钟热启动，随后95℃持续15秒、60℃持续1分钟的35个循环组成。

测试化合物处理。将测试化合物制备为在100％DMSO中的111x储备液。使用具有三个DMSO控制点的11个点的3倍化合物稀释系列来测定K_d。用于K_d测量的所有化合物都通过声传递(非接触式分配)分布在100％DMSO中。然后将化合物直接稀释到测定中，使得DMSO的最终浓度为0.9％。使用最高浓度为30,000nM的化合物测定K_d。以一式两份进行K_d测量。

结合常数(K_d)计算。使用希尔(Hill)方程，用标准剂量-响应曲线计算结合常数(K_d)：

将希尔斜率设置为-1。使用符合列文伯格-马夸尔特(Levenberg-Marquardt)算法的非线性最小二乘法来拟合曲线(Levenberg,K.,A method for the solution ofcertain non-linear problems in least squares[解决最小二乘法中某些非线性问题的方法]Q.Appl.Math.[应用数学季刊]2,164-168(1944))。还参见Fabian,M.A.等人A smallmolecule-kinase interaction map for clinical kinase inhibitors.[临床激酶抑制剂的小分子激酶相互作用图]Nat.Biotechnol.[自然生物技术]23,329-336(2005)；Wodicka,L.M.等人.Activation state-dependent binding of small molecule kinaseinhibitors:structural insights from biochemistry.[小分子激酶抑制剂的活化状态依赖性结合：来自生物化学的结构见解]Chem Biol.[化学生物学]17,1241-9(2010)。

具有较低解离常数的化合物以更高亲和力与靶标结合。本文披露的化合物，特别是(但不排他地)具有较低解离常数的那些，可以预期抑制靶标活性，并且可用于治疗DLK介导的疾病。

磷酸-cJun细胞测定

将用Dox诱导型人DLK稳定转染的HEK293细胞铺板到含有10％胎牛血清、1.5μg/ml多西环素和1μg/ml嘌呤霉素的20μl(400,000细胞/孔)DMEM培养基(不含酚红)的384孔板中。使作为阴性对照的细胞在不存在多西环素的情况下生长。将板在37℃、5％CO₂下孵育20h，然后添加DMSO(对照)或在培养基中稀释的化合物。将细胞在37℃下再孵育5h，随后进行裂解，并且按照制造商的方案从p-cJun(Ser63)细胞测定试剂盒(Cisbio公司)添加检测抗体。标准剂量反应曲线由Genedata Screener软件使用以下可变斜率模型拟合：

信号＝信号_阴性对照+(信号_DMSO对照-信号_阴性对照)/(1+(IC₅₀/剂量)^希尔斜率)。

只有方程中的信号和剂量被视为已知值。

为了比较，DLK抑制剂13、14、14b、15和16的数据包括在下文药代动力学和药效动力学披露中。化合物的合成在WIPO公开WO2018107072A1中披露，其中13、14、15和16分别对应于上述公开中的63b、59、7a和8a。

表1.另外的DLK抑制剂

表2.DLK活性

肝微粒体制剂的代谢稳定性

在NADPH的存在下、于37℃下，将测试化合物与来自CD-1小鼠、斯普拉格-道利(Sprague Dawley)大鼠、比格犬、食蟹猴和人的肝微粒体(0.5mg/mL)一起孵育45分钟。通过LC-MS/MS，使用峰面积比率确定了随时间推移的剩余亲本％。使用以下方程计算半衰期(t_1/2)：t_1/2＝ln2/k，其中k是随时间推移的亲本衰变的速率常数(log[剩余亲本％]相对于时间的曲线的斜率)。

表3.在多种动物肝微粒体中观察到的半衰期。

本发明中的本发明化合物相对于在WO 2018207072中披露的化合物在体外微粒体稳定性方面表现出意想不到的改善。如上文表3中所示，将氟(实例1a和4b)或4,4’-二氟哌啶(实例9b)添加至比较化合物13或14/14b的双环[1.1.1]戊烷部分，导致微粒体稳定性的改善(比较1a和9b与13；比较4b与14/14b)。如在下一部分和表5中所述，尽管对应来自WO2018207072的实例15和16的化合物(具有吗啉取代的双环[1.1.1]戊烷)也显示出改善的稳定性，但这些实例具有由在本新发明中的本发明化合物解决的其它缺陷。

药代动力学

使用本领域熟知的技术、使用单剂量的Wistar Han大鼠，确定化合物13、1a和9b的药代动力学。由在20％DMSO+60％PEG400+20％水中配制的IV剂量(1mg/kg)确定清除率、V_ss和t_1/2值。由在0.5％甲基纤维素水溶液中配制的口服剂量(3mg/kg)确定C_最大、AUC_最终和％F值。这些研究的结果在表4中示出。

表4.大鼠药代动力学数据。

PK参数	<u>13</u>	<u>1a</u>	<u>9b</u>
				清除率(mL/min/kg)	12.1	5.9	2.8
V<sub>ss</sub>(L/kg)	7.9	4.9	4.7
				t<sub>1/2</sub>(h)	9.94	11.5	22.7
C<sub>最大</sub>(μM)	0.909	1.31	1.05
				AUC<sub>最终</sub>(h*μM)	7.59	16.8	19.2
％F	86.3	103	95.9

使用本领域熟知的技术、使用单剂量的雄性C57BL/6小鼠确定化合物1a、4b、8a、9b、13、14b、15和16的药代动力学。由在20％DMSO+60％PEG400+20％水中配制的IV剂量(化合物1a、4b、13、14b和16为0.3mg/kg，化合物15为1mg/kg)确定清除率、V_ss和t_1/2值。由在0.5％甲基纤维素水溶液中配制的口服剂量(10mg/kg)确定C_最大、AUC_最终、％F和脑/血浆比率(基于AUC)。这些研究的结果在表5中示出。

表5.小鼠药代动力学数据。

本发明中的本发明化合物相对于WO 2018207072中披露的化合物，显示出改善的体内药代动力学。如上文表4中所示，将氟(实例1a)或4,4’-二氟哌啶(实例9b)添加至比较化合物13的双环[1.1.1]部分，导致大鼠中清除率降低和更长的半衰期。如表5中所示，将氟(实例1a和4b)或4,4’-二氟哌啶(实例9b)添加至比较化合物13或14b的双环[1.1.1]戊烷部分，导致小鼠中清除率降低和更长的半衰期(比较1a和9b与13；比较4b与14b)。尽管来自WO2018207072的具有吗啉取代的双环[1.1.1]戊烷的实例15和16相对于实例13或14b，也显示出在小鼠中的清除率降低和更长的半衰期，但是这些实例相对于13和14b以及本发明中的可比较的本发明化合物1a、4b、8a和9b，也显示出降低的脑渗透。(参见表5的最后两行。)

总之，请求保护的发明的化合物与WO 2018207072中披露的化合物相比，显示出改善的微粒体稳定性、降低的清除率和更长的半衰期，并且还维持了可接受水平的脑渗透。

与具有式(I)的化合物结合的DLK的晶体结构

蛋白质表达

将DLK的残基E115至T402与C末端六聚组氨酸标签(MGS-115EDL...EGT402-GNSHHHHHH)一起克隆到pTriEx4载体中。在粉纹夜蛾(T.Ni)昆虫细胞中表达蛋白。从对数生长期和>98％活力的培养物中制备粉纹夜蛾(T.ni)昆虫细胞(p30)。将细胞以0.7x 10⁶个细胞/mL接种在5L最佳生长烧瓶中4x 2.5L的ESF921培养基(含有5μg/ml庆大霉素)上，并且使其过夜达到细胞密度为1.2×10⁶个细胞。对过夜培养物计数，并且然后以MOI-5用P2-BIIC(Sf21)感染。将感染的培养物在定轨振荡器上以110rpm在27℃下孵育48h。通过在4℃下以3,500x g离心15分钟收获培养物，并且在-80℃下储存。

蛋白质纯化

在pH 8.0的25mM Tris/HCl、250mM NaCl、5mMβ-巯基乙醇、0.1％Triton X-100、10％甘油、10mM MgCl2、25mM咪唑中，用根据制造商的建议添加的蛋白酶抑制剂混合物(罗氏完全公司(Roche Complete))和全能核酸酶(benzonase)来裂解细胞(例如，185g湿重对应10L培养物)，。通过离心清除后，使用5mL HisTrap粗FF柱和4ml/min的流速对蛋白进行IMAC。以20mM咪唑进行100ml洗涤后，将高度纯化的蛋白在20CV内于20mM至300mM咪唑的梯度中洗脱。然后，使用在pH 8.0的25mM Tris/HCl、5％甘油、50mM NaCl、1mM TCEP中平衡的S200 26/60pg柱，对浓度不高于3.5mg/ml的合并蛋白进行凝胶过滤步骤。然后使用离子交换色谱法在HiTrap Q HP柱(装载和洗涤缓冲液为25mM Tris/HCl、5％甘油、1mM TCEP，pH8.0，并且洗脱缓冲液含有1M的NaCl)上进一步精制蛋白质。所使用的流速为5ml/min，并且梯度延伸超过10CV。估计最终蛋白质缓冲液为25mM TrisHCl(pH 8)、5％甘油、90mM NaCl、1mM TCEP。使用具有30kDa MWCO的Amicon Ultra离心过滤器将蛋白浓缩至浓度为大约3mg/ml，然后用液氮以小等分试样速冻，并且在-80℃下储存。

结晶

当蛋白质与100mM HEPES/NaOH(pH 7.5-8.2)、200mM乙酸镁、8％-16％PEG3350(悬滴蒸汽扩散形式)等体积混合时，该蛋白质在2至3.5mg/ml下容易结晶为薄板。晶体生长得益于在液滴混合后即进行划线接种。对于化合物浸泡试验，将晶体转移至含有25％PEG3350、250mM乙酸镁、100mM HEPES/NaOH(pH 7.8)、15％乙二醇和2mM化合物的新液滴中。孵育4至18小时后，收获晶体，并且在数据收集前投入液氮中冷却。

在本申请中引用的所有参考文献、专利或申请(无论是美国的还是国外的)都特此通过引用并入，就像完整地写在本文中一样。在出现任何不一致之处，以本文字面意义上披露的材料为准。

通过以上的说明，本领域的技术人员可以很容易地确定本发明的实质特征并且在不偏离本发明的精神和范围的情况下可以对本发明作出不同变化和修改，以使它适应不同用途和条件。

Claims (38)

1.一种具有式(I’)的化合物

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；

R²选自氟和NR^5aR^5b；

R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；

R⁴是卤代；

R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的单环杂环烷基；并且

每个R⁶独立地选自氰基、卤代和羟基

条件是R²不是吗啉。

2.一种具有式(II)的化合物：

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；

R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；并且

R⁴是卤代。

3.一种具有式(III’)的化合物：

或其盐，其中：

R¹选自烷基和环烷基，其中任一个任选地被一个或多个R⁴取代；

R³选自三氟甲基和三氟甲氧基；

R⁴是卤代；

R^5a和R^5b结合以形成亚烷基，该亚烷基与居间的氮一起形成任选地被一个或多个R⁶取代的单环杂环烷基；并且

每个R⁶独立地选自氰基、卤代和羟基

条件是当R^5a和R^5b结合时不形成吗啉基团。

4.如权利要求1或权利要求3所述的化合物，其中每个R⁶是氟。

5.如权利要求4所述的化合物，其中由R^5a、R^5b和居间的氮形成的单环杂环烷基只包含一个-CF₂-。

6.如权利要求5所述的化合物，其中由R^5a、R^5b和居间的氮形成的单环杂环烷基选自3,3-二氟哌啶-1-基和4,4-二氟哌啶-1-基。

7.如权利要求6所述的化合物，其中由R^5a、R^5b和居间的氮形成的单环杂环烷基是4,4-二氟哌啶-1-基。

8.如权利要求1-7中任一项所述的化合物，其中R¹选自C_1-6烷基和C_3-7环烷基，其中任一个任选地被一个、两个或三个R⁴取代。

9.如权利要求8所述的化合物，其中每个R⁴是卤代。

10.如权利要求8所述的化合物，其中R¹选自异丙基、三氟甲基和环丙基。

11.一种化合物，该化合物选自：

或其盐。

12.如权利要求1-11中任一项所述的化合物，其用作药物。

13.如权利要求1-11中任一项所述的化合物，其用于制造用于预防或治疗通过抑制DLK而改善的疾病或病症的药物。

14.如权利要求1-11中任一项所述的化合物，其用于治疗通过DLK激酶介导的疾病。

15.如权利要求14所述的化合物，其中所述疾病是由中枢神经系统或周围神经系统神经元的创伤性损伤引起的。

16.如权利要求15所述的化合物，其中所述创伤性损伤选自中风、颅脑损伤和脊髓损伤。

17.如权利要求14所述的化合物，其中所述疾病是由慢性神经退行性病症引起的。

18.如权利要求17所述的化合物，其中所述神经退行性病症选自阿尔茨海默病、额颞痴呆、帕金森病、亨廷顿病、肌萎缩性侧索硬化症、脊髓小脑性共济失调、进行性核上性麻痹、路易体病和肯尼迪病。

19.如权利要求14所述的化合物，其中所述疾病是由神经损伤导致的神经病变引起的。

20.如权利要求19所述的化合物，其中所述神经损伤选自化学疗法诱导的周围神经病变和糖尿病神经病变。

21.如权利要求1-11中任一项所述的化合物，其用于治疗认知障碍。

22.如权利要求21所述的化合物，其中所述认知障碍是由药物干预引起的。

23.一种药物组合物，该药物组合物包含如权利要求1-11中任一项所述的化合物以及药学上可接受的载体。

24.一种抑制DLK的方法，该方法包括使DLK与如权利要求1-11中任一项所述的化合物接触。

25.一种治疗DLK介导的疾病的方法，该方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的如权利要求1-11中任一项所述的化合物。

26.如权利要求25所述的方法，其中所述疾病是神经性疾病。

27.如权利要求26所述的方法，其中所述神经性疾病是由中枢神经系统或周围神经系统神经元的创伤性损伤引起的。

28.如权利要求27所述的方法，其中所述创伤性损伤选自中风、颅脑损伤和脊髓损伤。

29.如权利要求26所述的方法，其中所述神经性疾病是由慢性神经退行性病症引起的。

30.如权利要求29所述的方法，其中所述慢性神经退行性病症选自阿尔茨海默病、额颞痴呆、帕金森病、亨廷顿病、肌萎缩性侧索硬化症、脊髓小脑性共济失调、进行性核上性麻痹、路易体病和肯尼迪病。

31.如权利要求26所述的方法，其中所述神经性疾病是由神经损伤导致的神经病变引起的。

32.如权利要求31所述的方法，其中所述神经损伤选自化学疗法诱导的周围神经病变和糖尿病神经病变。

33.如权利要求26所述的方法，其中所述疾病是认知障碍。

34.如权利要求33所述的方法，其中所述认知障碍是由药物干预引起的。

35.一种治疗DLK介导的疾病的方法，该方法包括施用：

a.治疗有效量的如权利要求1-11中任一项所述的化合物；和

b.另一种治疗剂。

36.如权利要求35所述的方法，其中所述DLK介导的疾病是由药物干预引起的认知障碍。

37.如权利要求36所述的方法，其中所述认知障碍是化学疗法诱导的认知障碍。

38.一种用于在患者中实现效果的方法，该方法包括向患者施用治疗有效量的如权利要求1-11中任一项所述的化合物，其中该效果选自减少神经元损失、减少脑萎缩、改善神经功能、改善认知和改善心智表现。

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