CN114621312B - 一种寡肽烷基侧链的选择性修饰方法 - Google Patents
一种寡肽烷基侧链的选择性修饰方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及多肽修饰技术领域，尤其涉及一种寡肽烷基侧链的选择性修饰方法。本发明提供的选择性修饰方法是通过对甲苯磺酰基保护的多肽进行末端氮氢的选择性卤化，然后将得到的卤化物在光照条件下通过1,5‑HAT策略完全转化为中间体，从而通过环化反应实现多肽烷基侧链的精准修饰；通过多肽侧链惰性Csp3‑H键的选择性功能化，合成了具有高度结构多样性的N‑杂磺酰胺类多肽，为多肽的直接修饰提供了一种新思路和新途径，同时也为现代有机合成、天然产物和医药提供有利的合成手段。
Description
技术领域
本发明涉及多肽修饰技术领域，尤其涉及一种寡肽烷基侧链的选择性修饰方法。
背景技术
多肽化学不仅在现代制药工业发展中具有重要影响，而且也极大推动生命科学和化学学科的发展。多肽是许多细胞表面受体的天然配体，如G蛋白偶联受体(GPCRs)，离子通道和生长因子受体，在细胞内调控着信号的传导过程。多肽常被认为是信号传导途径的激动剂，而许多成功的多肽类药物也具有同样的功效。更为重要的是天然多肽为合成高效、高选择性的多肽类药物提供了一条可行的线索。至今，已有上百种的人工合成多肽药物分子被广泛应用于治疗多种疾病，特别是抗肿瘤活性。因此发展高效、简洁和快速的多肽修饰方法以产生结构和性能的改变在药物筛选、生物医学及生物技术等领域具有潜在的应用价值。
目前，基于多肽的直接修饰主要集中在侧链的修饰中，根据氨基酸侧链的氨基酸种类主要集中在极性官能团侧链和芳基侧链的选择性修饰中。如Buchwald等人(J.Am.Chem.Soc.2020,142(20),9124；Nature 2015,526,687.)利用芳基钯络合物与半胱氨酸侧链巯基反应，实现了多肽侧链半胱氨酸和甲硫氨酸的选择性芳基化。李子刚等人(Chem.Soc.2018,9,3227.)利用二溴化物与甲硫氨酸侧链间的成盐反应，合成了一类订书肽。Haddleton小组(.J.Am.Chem.Soc.2012,134,7406.)实现了芳基重氮盐与酪氨酸侧链的偶联反应。Francis(J.Am.Chem.Soc.2004,126,10256.)报到了过渡金属铑催化的重氮化合物与色氨酸中吲哚环的偶联。而多肽中对于脂肪族侧链的修饰主要集中在分子内碳碳键的构建。
发明内容
本发明的目的在于提供一种寡肽烷基侧链的选择性修饰方法，所述方法能够实现多肽中脂肪族C-N键的构建。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种寡肽烷基侧链的选择性修饰方法，包括以下步骤：
将具有式Ⅰ所示结构的化合物和卤化试剂发生卤代反应，得到具有式Ⅱ所示结构的化合物；
将所述具有式Ⅱ所示结构的化合物和有机溶剂混合，进行光照后，与无机碱混合进行环化反应，得到具有式Ⅲ所示结构的化合物；
式Ⅰ～Ⅲ中，R为脂肪族烷基；AA为氨基酸；R'为保护基团；n＝1～4且为正整数。
优选的，所述氨基酸包括脂肪族侧链天然氨基酸、极性官能团侧链的氨基酸、芳香族侧链天然氨基酸或非天然氨基酸。
优选的，所述脂肪族侧链天然氨基酸包括
所述极性官能团侧链的氨基酸包括
所述芳香族侧链天然氨基酸包括
所述非天然氨基酸包括
优选的，所述保护基团为乙酰基、苯甲酰基、对甲苯磺酰基、三氟甲磺酰基或甲磺酰基。
优选的，所述卤化试剂包括N-溴代丁二酰亚胺、N-氯代丁二酰亚胺、N-碘代丁二酰亚胺或三氯异氰尿酸。
优选的，所述具有式Ⅰ所示结构的化合物和卤化试剂的摩尔比为1：(0.9～1.5)。
优选的，所述有机溶剂包括三氟甲苯、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、乙腈或氯仿。
优选的，所述光照的波长为390～760nm；所述光照的温度为35～45℃，时间为8～10h。
优选的，所述无机碱为碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、三乙胺或氢氧化钠。
优选的，所述具有式Ⅱ所示结构的化合物与无机碱的摩尔比为1：(1.2～2.0)。
本发明提供了一种寡肽烷基侧链的选择性修饰方法，包括以下步骤：将具有式Ⅰ所示结构的化合物和卤化试剂发生卤代反应，得到具有式Ⅱ所示结构的化合物；将所述具有式Ⅱ所示结构的化合物和有机溶剂混合，进行光照后，与无机碱混合进行环化反应，得到具有式Ⅲ所示结构的化合物；
式Ⅰ～Ⅲ中，R为脂肪族烷基；AA为氨基酸；R'为保护基团；n＝1～4且为正整数。
本发明首先将氮端保护的多肽化合物与卤化试剂作用，实现了多肽中氮氢键选择性卤化反应，之后在光照和无机碱的作用下实现了多肽中脂肪键中C-N键的构建，且所述方案适用于不同长度的多肽链以及不同序列的肽序列的多肽，具有普适性；因此，本发明通过对甲苯磺酰基保护的多肽进行末端氮氢的选择性卤化，然后将得到的卤化物在光照条件下通过1,5-HAT策略完全转化为中间体，从而通过环化反应实现多肽烷基侧链的精准修饰；通过多肽侧链惰性Csp3-H键的选择性功能化，合成了具有高度结构多样性的N-杂磺酰胺类多肽，为多肽的直接修饰提供了一种新思路和新途径，同时也为现代有机合成、天然产物和医药提供有利的合成手段。
附图说明
图1为实施例1制备得到的化合物2a的核磁氢谱图；
图2为实施例1制备得到的化合物2a的核磁碳谱图；
图3为实施例2制备得到的化合物2b的核磁氢谱图；
图4为实施例2制备得到的化合物2b的核磁碳谱图；
图5为实施例3制备得到的化合物2c的核磁氢谱图；
图6为实施例3制备得到的化合物2c的核磁碳谱图；
图7为实施例4制备得到的化合物2d的核磁氢谱图；
图8为实施例4制备得到的化合物2d的核磁碳谱图；
图9为实施例5制备得到的化合物2e的核磁氢谱图；
图10为实施例5制备得到的化合物2e的核磁碳谱图；
图11为实施例6制备得到的化合物2f的核磁氢谱图；
图12为实施例6制备得到的化合物2f的核磁碳谱图；
图13为实施例7制备得到的化合物2g的核磁氢谱图；
图14为实施例7制备得到的化合物2g的核磁碳谱图。
具体实施方式
本发明提供了一种寡肽烷基侧链的选择性修饰方法，包括以下步骤：
将具有式Ⅰ所示结构的化合物和卤化试剂发生卤代反应，得到具有式Ⅱ所示结构的化合物；
将所述具有式Ⅱ所示结构的化合物和有机溶剂混合，进行光照后，与无机碱混合进行环化反应，得到具有式Ⅲ所示结构的化合物；
式Ⅰ～Ⅲ中，R为脂肪族烷基；AA为氨基酸；R'为保护基团；n＝1～4且为正整数。
在本发明中，若无特殊说明，所有制备原料均为本领域技术人员熟知的市售产品。
在本发明中，所述n的取值不代表AA的循环；而是当n大于等于2时，所述两种AA的种类可以相同可以不同；所述n＝1时，所述氨基酸为二肽；当所述n＝2时，所述氨基酸为三肽；当n＝3时，所述氨基酸为四肽；当所述n＝4时，所述氨基酸为五肽。
在本发明中，所述选择性修饰方法的流程为：
在本发明中，所述R为脂肪族烷基，优选为甲基或乙基。
在本发明中，所述氨基酸优选包括脂肪族侧链天然氨基酸、极性官能团侧链的氨基酸、芳香族侧链天然氨基酸或非天然氨基酸。
优选的，所述脂肪族侧链天然氨基酸优选包括
所述极性官能团侧链的氨基酸优选包括
所述芳香族侧链天然氨基酸优选包括
所述非天然氨基酸优选包括
在本发明中，所述保护基团优选为乙酰基、苯甲酰基、对甲苯磺酰基、三氟甲磺酰基或甲磺酰基。
在本发明中，所述具有式Ⅰ所示结构的化合物优选通过制备得到，本发明对所述制备的过程没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的过程进行即可。
在本发明的具体实施例中，所述具有式Ⅰ所示结构的化合物的制备过程优选包括氨基保护和酰胺化反应。
例如，当所述具有式Ⅰ所示结构的化合物中的n＝1时，所述具有式Ⅰ所示结构的化合物的制备流程为：
其中R”为
所述R”中的R优选与式Ⅰ～Ⅲ中的R相同。
具体的制备过程为：将碳酸钠(Na2CO3，1.59g，15mmol)加入到圆底烧瓶中，随后加入氨基酸a(12.5mmol)和水(15mL)，连续剧烈搅拌，直至所有溶质溶解。然后将溶液冷却至-5℃，在1h的时间内将对甲苯磺酰氯(15mmol)分四份，分批加入，在室温下进一步搅拌约4h，用TLC板(MeOH：DCM＝1：9)监测反应的进展，待反应完成后，用1M HCl对混合物进行酸化至pH＝2，观察到有白色固体析出，通过砂芯漏斗抽滤并干燥，得到粗产品化合物b；
在圆底烧瓶中加入氨基酸a(30mmol，1.0equiv)，加入MeOH溶液(30mL)，进行搅拌，然后在冰浴条件下缓慢滴加SOCl2液体(60mmol，2.0equiv)，待滴加完毕，将反应混合物在回流条件下搅拌2h，然后冷却到室温。在真空中除去溶剂，得到化合物c(白色固体)；
将化合物b(5.0mmol)、化合物c(5.0mmol)加入到圆底烧瓶中，加入二氯甲烷(化合物b在二氯甲烷中的浓度为0.2M)，冰浴条件下加入二异丙胺(2.5equiv)搅拌15min。然后在不改变温度的情况下，加入HOBt(1.2equiv)，30min后加入EDCI(1.5equiv)，混合物在0℃下继续搅拌3h，随后转至室温下，搅拌5h，然后加入水，在分液漏斗中分离有机相和水相，用二氯甲烷多次萃取水相(20mL×3)，结合有机相，然后依次用1MHCL(20mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤有机层，然后用无水Na2SO4干燥有机层，利用旋转蒸发仪在减压下除去溶剂，然后用柱层析法(PE：EA：DCM＝5：1：1作为洗脱剂，60-88％的收率)进一步纯化，得到化合物d(白色固体，即n＝1的具有式Ⅰ所示结构的化合物)。
在本发明中，当所述具有式Ⅰ所示结构的化合物中的n＝2时，所述具有式Ⅰ所示结构的化合物的制备流程为：
具体的制备过程为：把化合物d(1.0equiv)加入圆底烧瓶，溶解在MeOH中，然后加入2M NaOH(3.2equiv)溶液，混合溶液在室温下搅拌过夜，溶剂直接在旋转蒸发仪真空蒸发，所得残渣溶于水中，用2M HCl酸化，置于分液漏斗中分层，水相用EA多次萃取(20mL×2)，结合有机相，然后用无水Na2SO4干燥，利用旋转蒸发仪在减压下除去溶剂，得到粗产品化合物e。
将e(5.0mmol)、c(5.0mmol)加入到圆底烧瓶中，加入二氯甲烷(0.2M),冰浴条件下加入二异丙胺(2.5equiv)搅拌15min。然后在不改变温度的情况下，加入HOBt(1.2equiv)，30min后加入EDCI(1.5equiv)，混合物在0℃下继续搅拌3h，随后转至室温下，搅拌5h，然后加入水，在分液漏斗中分离有机相和水相，用二氯甲烷多次萃取水相(20mL×3)，结合有机相，然后依次用1M HCL(20mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)、饱和食盐水(20mL)洗涤有机层，然后用无水Na2SO4干燥有机层，利用旋转蒸发仪在减压下除去溶剂，然后用柱层析法(PE：EA：DCM＝5：1：1作为洗脱剂，60-88％的收率)进一步纯化，得到化合物f(白色固体，即n＝2的具有式Ⅰ所示结构的化合物)。
当n＝3或4时，参考上述技术方案所述制备化合物e和化合物f的制备过程先进行水解酸化后，再与化合物c进行酰胺化缩合反应，在此不再进行详细的赘述。
在本发明中，所述卤化试剂优选包括N-溴代丁二酰亚胺(NBS)、N-氯代丁二酰亚胺(NCS)、N-碘代丁二酰亚胺(NIS)或三氯异氰尿酸(TCCA)。
在本发明中，所述具有式Ⅰ所示结构的化合物和卤化试剂的摩尔比优选为1：(0.9～1.5)，更优选为1：(1.2～1.5)。
在本发明中，所述卤代反应优选在有机溶剂中进行；所述有机溶剂优选为三氟甲苯、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、乙腈或氯仿，更优选为二氯甲烷。
在本发明中，所述卤代反应的过程优选包括：将具有Ⅰ所示结构的化合物和有机溶剂混合后，在冰浴的条件下，加入卤化试剂。本发明对所述卤化试剂的加入方式没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的加入方式即可。
在本发明中，所述卤代反应的时间优选为5～8h，更优选为8h。
在本发明中，所述卤代反应是否反应完全优选通过TLC检测实现。
所述卤代反应完成后，本发明还优选包括依次进行的萃取和柱层析纯化。本发明对所述萃取和柱层析纯化的过程没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的过程进行即可。
得到具有式Ⅱ所示结构的化合物后，本发明将所述具有式Ⅱ所示结构的化合物和有机溶剂混合，进行光照后，与无机碱混合进行环化反应，得到具有式Ⅲ所示结构的化合物。
在本发明中，所述有机溶剂优选包括三氟甲苯、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、乙腈或氯仿。
在本发明中，所述有式Ⅱ所示结构的化合物和有机溶剂的用量比优选为0.05～2.5mmol：1～10mL，更优选为0.1mmol：1mL。
本发明对所述混合的过程没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的过程进行即可。
在本发明中，所述光照的波长优选为390～760nm，更优选为476～495nm；所述光照的温度优选为35～45℃，更优选为38～42℃；时间优选为8～10h。在本发明中，所述光照的功率优选为50～100W，更优选为100W。
所述光照完成后，本发明还优选包括在真空的条件下去除溶剂；本发明对所述去除溶剂的过程没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的过程进行即可。
在本发明中，所述无机碱优选为碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、三乙胺或氢氧化钠；所述式Ⅱ所示结构的化合物与无机碱的摩尔比优选为1：(1.2～2.0)，更优选为1：(1.4～1.6)。
在本发明中，所述混合的原料优选还包括乙腈，所述无机碱和乙腈的用量比优选为1.2～2.0mmol：1～5mL，更优选为1.4～1.6mmol：1.5～2.5mL。在本发明中，所述混合优选在搅拌的条件下进行；本发明对所述搅拌的转速没有任何特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的转速进行即可。
所述混合完成后，本发明还优选包括继续搅拌的过程，以使环化反应充分进行；所述继续搅拌的时间优选为5h。
所述环化反应完成后，本发明还优选包括加入饱和食盐水进行萃取，分离各层，用EA(3×5mL)萃取水相；合并有机相，将得到的粗产品采用柱层析法(体积比PE：EA：DCM＝4：1：1作为洗脱剂)进行纯化。
下面结合实施例对本发明提供的寡肽烷基侧链的选择性修饰方法进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
具有式Ⅰ所示结构的化合物:n＝1,化合物1a(二肽)；
制备流程为：
化合物1a的制备过程参考具体实施例方式中公开的n＝1的具有式Ⅰ所示结构的化合物的制备过程，在此不再进行赘述；
将化合物1a(0.2mmol，1.0eq.)溶解在二氯甲烷DCM(2mL)中，冰浴下加入三氯异氰尿酸(0.3mmol，1.5eq.)，反应480min后，TLC检测反应完成，萃取并除去溶剂，然后柱层析纯化；
将得到的纯化合物(0.1mmol)和1mL 1,2-二氯乙烷充分混合后，在100W蓝光灯(波长为476nm)照射下45℃反应9h。反应结束溶液为乳白色液体，在真空条件下除去溶剂后，与NaOH(0.12mmol，1.2eq)和CH3CN(2mL，0.05M)混合，继续搅拌5h，反应结束后加入5mL饱和盐水，分离各层，用EA(3×5mL)萃取水相；合并有机相，粗产品采用柱层析法(PE：EA：DCM＝4：1：1作为洗脱剂)进一步纯化，得到化合物2a，产率85％；
所述化合物2a的结构确认数据如下：
Colorless oil.
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.78(d,J＝8.1Hz,2H),7.36(d,J＝7.8Hz,3H),4.55(dd,J＝8.3,5.0Hz,1H),3.77(s,3H),3.66(d,J＝3.3Hz,1H),3.55–3.46(m,1H),3.42–3.32(m,1H),2.55(m,1H),2.45(s,3H),1.92(ddd,J＝20.5,9.5,4.8Hz,2H),1.51–1.40(m,1H),1.32–1.24(m,1H),1.20(dt,J＝16.1,7.4Hz,1H),0.93(dt,J＝7.0,3.7Hz,6H),0.60(d,J＝7.0Hz,3H)(如图1所示).
13C NMR(150MHz,CDCl3)δ171.62,170.87,144.27,133.13,129.80,127.86,68.83,56.63,52.06,48.19,38.05,37.74,31.78,25.06,21.54,18.08,15.47,11.51(如图2所示).
HRMS-ESI(m/z):[M+Na]+calcd.for C20H30N2NaO5S,433.1768；found,433.1772.
IR(KBr,cm-1):ν3553,3477,2965,1742,1162,1305,858。
实施例2
具有式Ⅰ所示结构的化合物:n＝1,化合物1b(二肽)；
制备流程为：
化合物1b的制备过程参考具体实施例方式中公开的n＝1的具有式Ⅰ所示结构的化合物的制备过程，在此不再进行赘述；
将化合物1b(0.2mmol，1.0eq.)溶解在二氯甲烷DCM(2mL)中，冰浴下加入三氯异氰尿酸(0.3mmol，1.5eq.)，反应480min后，TLC检测反应完成，萃取并除去溶剂，然后柱层析纯化；
将得到的纯化合物(0.1mmol)和1mL 1,2-二氯乙烷充分混合后，在100W蓝光灯(波长为476nm)照射下45℃反应9h。反应结束溶液为乳白色液体，在真空条件下除去溶剂后，与NaOH(0.12mmol，1.2eq)和CH3CN(2mL，0.05M)混合，继续搅拌5h，反应结束后加入5mL饱和盐水，分离各层，用EA(3×5mL)萃取水相；合并有机相，粗产品采用柱层析法(PE：EA：DCM＝4：1：1作为洗脱剂)进一步纯化，得到化合物2b，产率73％；
所述化合物2b的结构确认数据如下：
Colorless oil.
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.73(d,J＝8.2Hz,2H),7.33(d,J＝8.0Hz,2H),7.28–7.25(m,2H),7.22(t,J＝6.6Hz,2H),7.14(d,J＝7.0Hz,2H),4.86(dd,J＝13.3,7.5Hz,1H),3.77(s,3H),3.59(d,J＝3.5Hz,1H),3.34–3.30(m,1H),3.26(dd,J＝13.8,5.8Hz,2H),3.06(dd,J＝13.9,7.4Hz,1H),2.44(s,3H),2.35–2.30(m,1H),1.60(dt,J＝14.3,7.4Hz,1H),1.15–1.10(m,1H),0.54(d,J＝7.0Hz,3H)(如图3所示).
13C NMR(150MHz,CDCl3)δ171.42,170.71,144.25,136.08,133.19,129.81,129.26,128.44,127.87,126.98,68.78,53.17,52.39,48.10,38.21,37.91,31.50,21.55,18.18(如图4所示).
HRMS-ESI(m/z):[M+Na]+calcd.for C23H28N2NaO5S,467.1611；found,467.1616.
IR(KBr,cm-1):ν3728,2928,1744,1674,1348,1161,853。
实施例3
具有式Ⅰ所示结构的化合物:n＝1,化合物1c(二肽)；
制备流程为：
化合物1c的制备过程参考具体实施例方式中公开的n＝1的具有式Ⅰ所示结构的化合物的制备过程，在此不再进行赘述；
将化合物1c(0.2mmol，1.0eq.)溶解在二氯甲烷DCM(2mL)中，冰浴下加入三氯异氰尿酸(0.3mmol，1.5eq.)，反应480min后，TLC检测反应完成，萃取并除去溶剂，然后柱层析纯化；
将得到的纯化合物(0.1mmol)和1mL 1,2-二氯乙烷充分混合后，在100W蓝光灯(波长为476nm)照射下45℃反应9h。反应结束溶液为乳白色液体，在真空条件下除去溶剂后，与NaOH(0.12mmol，1.2eq)和CH3CN(2mL，0.05M)混合，继续搅拌5h，反应结束后加入5mL饱和盐水，分离各层，用EA(3×5mL)萃取水相；合并有机相，粗产品采用柱层析法(PE：EA：DCM＝4：1：1作为洗脱剂)进一步纯化，得到化合物2c，产率73％；
所述化合物2c的结构确认数据如下：
Colorless oil.
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.79(d,J＝7.8Hz,2H),7.43(d,J＝8.5Hz,1H),7.36(d,J＝7.8Hz,2H),4.57(d,J＝8.6Hz,1H),4.39(d,J＝3.3Hz,1H),3.81(s,3H),3.69(d,J＝3.6Hz,1H),3.56–3.51(m,1H),3.37(dd,J＝17.1,7.9Hz,1H),2.72(s,1H),2.56–2.51(m,1H),2.45(s,3H),1.97(dt,J＝13.6,6.8Hz,1H),1.28(d,J＝6.5Hz,1H),1.24(d,J＝6.4Hz,3H),0.66(d,J＝6.9Hz,3H)(如图5所示).
13C NMR(150MHz,CDCl3)δ171.95,170.87,144.35,133.11,129.87,127.90,69.00,68.03,57.69,52.64,48.28,38.68,31.98,21.59,19.87,18.11(如图6所示).
HRMS-ESI(m/z):[M+Na]+calcd.for C18H26N2NaO6S,421.1404；found,421.1409.
IR(KBr,cm-1):ν3704,3555,3412,2931,1744,1680,1160,860。
实施例4
具有式Ⅰ所示结构的化合物:n＝1,化合物1d(二肽)；
制备流程为：
化合物1d的制备过程参考具体实施例方式中公开的n＝1的具有式Ⅰ所示结构的化合物的制备过程，在此不再进行赘述；
将化合物1d(0.2mmol，1.0eq.)溶解在二氯甲烷DCM(2mL)中，冰浴下加入三氯异氰尿酸(0.3mmol，1.5eq.)，反应480min后，TLC检测反应完成，萃取并除去溶剂，然后柱层析纯化；
将得到的纯化合物(0.1mmol)和1mL 1,2-二氯乙烷充分混合后，在100W蓝光灯(波长为476nm)照射下45℃反应9h。反应结束溶液为乳白色液体，在真空条件下除去溶剂后，与NaOH(0.12mmol，1.2eq)和CH3CN(2mL，0.05M)混合，继续搅拌5h，反应结束后加入5mL饱和盐水，分离各层，用EA(3×5mL)萃取水相；合并有机相，粗产品采用柱层析法(PE：EA：DCM＝4：1：1作为洗脱剂)进一步纯化，得到化合物2d，产率75％；
所述化合物2d的结构确认数据如下：
Colorless oil.
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.76(d,J＝8.0Hz,2H),7.36(d,J＝8.0Hz,2H),7.23(s,1H),3.74(s,3H),3.56(d,J＝3.7Hz,1H),3.53(dd,J＝6.8,5.1Hz,1H),3.37(dd,J＝17.7,7.7Hz,1H),2.54–2.49(m,1H),2.45(s,3H),1.91(td,J＝13.9,7.2Hz,1H),1.60(s,3H),1.54(s,3H),1.21(td,J＝11.8,5.1Hz,1H),0.60(d,J＝7.0Hz,3H)(如图7所示).
13C NMR(100MHz,CDCl3)δ174.62,170.48,144.33,132.99,129.83,127.85,68.96,56.29,52.49,48.33,38.31,31.69,25.20,24.24,21.54,18.16(如图8所示).
HRMS-ESI(m/z):[M+Na]+calcd.for C18H26N2NaO5S,405.1455；found,405.1461.
IR(KBr,cm-1):ν3523,3303,2958,1738,1628,749,671。
实施例5
具有式Ⅰ所示结构的化合物:n＝2,化合物1e(三肽)；
制备流程为：
化合物1e的制备过程参考具体实施例方式中公开的n＝2的具有式Ⅰ所示结构的化合物的制备过程，在此不再进行赘述；
将化合物1e(0.2mmol，1.0eq.)溶解在二氯甲烷DCM(2mL)中，冰浴下加入三氯异氰尿酸(0.3mmol，1.5eq.)，反应480min后，TLC检测反应完成，萃取并除去溶剂，然后柱层析纯化；
将得到的纯化合物(0.1mmol)和1mL 1,2-二氯乙烷充分混合后，在100W蓝光灯(波长为476nm)照射下45℃反应9h。反应结束溶液为乳白色液体，在真空条件下除去溶剂后，与NaOH(0.12mmol，1.2eq)和CH3CN(2mL，0.05M)混合，继续搅拌5h，反应结束后加入5mL饱和盐水，分离各层，用EA(3×5mL)萃取水相；合并有机相，粗产品采用柱层析法(PE：EA：DCM＝4：1：1作为洗脱剂)进一步纯化，得到化合物2e，产率71％；
所述化合物2e的结构确认数据如下：
Colorless oil.
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.80(d,J＝8.1Hz,2H),7.38(d,J＝8.0Hz,2H),7.16(d,J＝9.2Hz,1H),7.07(d,J＝8.3Hz,1H),4.54(dd,J＝8.3,5.9Hz,1H),4.44(dd,J＝9.2,4.6Hz,1H),3.73(s,3H),3.61–3.55(m,2H),3.39(dt,J＝10.2,7.5Hz,1H),2.53–2.47(m,1H),2.47(s,3H),2.24(dd,J＝10.1,6.3Hz,1H),1.91(dt,J＝13.3,8.5Hz,2H),1.52–1.42(m,2H),1.26(dd,J＝12.6,6.7Hz,2H),1.16–1.10(m,1H),0.96(t,J＝6.4Hz,6H),0.92(d,J＝6.8Hz,3H),0.90(t,J＝7.5Hz,3H),0.68(d,J＝6.9Hz,3H)(如图9所示).
13C NMR(150MHz,CDCl3)δ172.04,171.04,170.67,144.69,132.05,129.97,128.05,58.19,56.83,51.85,48.55,39.03,37.26,36.01,31.93,25.29,24.46,21.61,18.34,16.01,15.52,11.68,11.34(如图10所示).
HRMS-ESI(m/z):[M+Na]+calcd.for C26H41N3NaO6S,546.2608；found,546.2598.
IR(KBr,cm-1):ν3681,2966,1742,1540,1349,1160,817。
实施例6
具有式Ⅰ所示结构的化合物:n＝3,化合物1b(四肽)；
制备流程为：
化合物1f的制备过程参考具体实施例方式中公开的n＝3的具有式Ⅰ所示结构的化合物的制备过程，在此不再进行赘述；
将化合物1f(0.2mmol，1.0eq.)溶解在二氯甲烷DCM(10mL)中，冰浴下加入三氯异氰尿酸(0.3mmol，1.5eq.)，反应480min后，TLC检测反应完成，萃取并除去溶剂，然后柱层析纯化；
将得到的纯化合物(0.1mmol)和1mL 1,2-二氯乙烷充分混合后，在100W蓝光灯(波长为476nm)照射下45℃反应9h。反应结束溶液为乳白色液体，在真空条件下除去溶剂后，与NaOH(0.12mmol，1.2eq)和CH3CN(2mL，0.05M)混合，继续搅拌5h，反应结束后加入5mL饱和盐水，分离各层，用EA(3×5mL)萃取水相；合并有机相，粗产品采用柱层析法(PE：EA：DCM＝4：1：1作为洗脱剂)进一步纯化，得到化合物2f，产率68％；
所述化合物2f的结构确认数据如下：
Colorless oil.
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.73(d,J＝7.6Hz,2H),7.38(d,J＝7.7Hz,2H),7.25(d,J＝7.8Hz,1H),7.04(d,J＝8.3Hz,1H),6.68(d,J＝8.1Hz,1H),4.59–4.49(m,2H),4.45(t,J＝6.9Hz,1H),3.70(s,3H),3.61–3.56(m,1H),3.50(d,J＝4.8Hz,1H),3.38(dd,J＝16.6,8.0Hz,1H),2.47(s,3H),2.42(dt,J＝12.5,6.4Hz,1H),2.11(dt,J＝13.0,6.5Hz,1H),1.91(td,J＝12.6,6.3Hz,2H),1.51(d,J＝7.2Hz,3H),1.48–1.40(m,2H),1.24–1.15(m,3H),0.99–0.92(m,6H),0.90(dd,J＝14.9,7.1Hz,6H),0.73(d,J＝6.8Hz,3H)(如图11所示).
13C NMR(150MHz,CDCl3)δ172.51,172.23,171.19,171.12,131.88,130.03,127.90,68.98,57.29,56.57,51.95,49.52,48.55,39.15,37.39,35.90,32.16,29.24,26.34,25.29,21.63,18.22,17.85,15.48,14.47,11.56,11.52(如图12所示).
HRMS-ESI(m/z):[M+Na]+calcd.for C29H46N4NaO7S,617.2979；found,617.2977.
IR(KBr,cm-1):ν3693,3525,3127,1740,1628,1275,1161,817。
实施例7
具有式Ⅰ所示结构的化合物:n＝4,化合物1g(五肽)；
制备流程为：
化合物1g的制备过程参考具体实施例方式中公开的n＝4的具有式Ⅰ所示结构的化合物的制备过程，在此不再进行赘述；
将化合物1g(0.2mmol，1.0eq.)溶解在二氯甲烷DCM(10mL)中，冰浴下加入三氯异氰尿酸(0.3mmol，1.5eq.)，反应480min后，TLC检测反应完成，萃取并除去溶剂，然后柱层析纯化；
将得到的纯化合物(0.1mmol)和1mL 1,2-二氯乙烷充分混合后，在100W蓝光灯(波长为476nm)照射下45℃反应9h。反应结束溶液为乳白色液体，在真空条件下除去溶剂后，与NaOH(0.12mmol，1.2eq)和CH3CN(2mL，0.05M)混合，继续搅拌5h，反应结束后加入5mL饱和盐水，分离各层，用EA(3×5mL)萃取水相；合并有机相，粗产品采用柱层析法(PE：EA：DCM＝4：1：1作为洗脱剂)进一步纯化，得到化合物2g，产率66％；
所述化合物2g的结构确认数据如下：
Colorless oil.
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.76(d,J＝8.1Hz,2H),7.40(d,J＝7.6Hz,1H),7.36(d,J＝8.0Hz,2H),7.14(d,J＝7.1Hz,1H),6.95(d,J＝7.8Hz,1H),6.86(d,J＝8.8Hz,1H),4.54(dd,J＝8.2,5.3Hz,1H),4.49(dd,J＝14.4,7.2Hz,1H),4.45–4.35(m,2H),3.72(s,3H),3.53(d,J＝5.6Hz,1H),3.52–3.47(m,1H),3.37(dt,J＝10.4,6.9Hz,1H),2.46(s,3H),2.41(dt,J＝12.8,6.5Hz,1H),2.02–1.94(m,2H),1.94–1.89(m,1H),1.65(dd,J＝13.2,7.5Hz,2H),1.56(dd,J＝18.1,9.1Hz,1H),1.52–1.47(m,1H),1.45(d,J＝7.1Hz,3H),1.25–1.18(m,2H),1.14(ddd,J＝16.0,14.2,7.3Hz,1H),0.91(t,J＝6.3Hz,9H),0.88(d,J＝5.7Hz,6H),0.85(t,J＝7.4Hz,3H),0.79(d,J＝6.8Hz,3H)(如图13所示).
13C NMR(150MHz,CDCl3)δ172.28,172.09,171.77,171.66,171.17,144.58,132.94,129.97,127.86,69.33,57.95,56.64,52.68,51.97,49.21,48.33,40.88,39.28,37.54,36.73,32.44,25.12,24.84,24.79,22.92,21.70,21.59,17.95,17.19,15.44,15.40,11.48,11.23(如图14所示).
HRMS-ESI(m/z):[M+Na]+calcd.for C35H57N5NaO8S,730.3820；found,730.3812.
IR(KBr,cm-1):ν3695,3432,3281,2963,2929,1741,1640,1351,1161,816。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (8)
1.一种寡肽烷基侧链的选择性修饰方法，其特征在于，包括以下步骤：
将具有式Ⅰ所示结构的化合物和卤化试剂发生卤代反应，得到具有式Ⅱ所示结构的化合物；
将所述具有式Ⅱ所示结构的化合物和有机溶剂混合，进行光照后，与无机碱混合进行环化反应，得到具有式Ⅲ所示结构的化合物；
式Ⅰ～Ⅲ中，R为脂肪族烷基；AA为氨基酸；R'为保护基团；n＝1～4且为正整数，所述n的取值不代表AA的循环；而是当n大于等于2时，所述两种AA的种类可以相同可以不同；所述n＝1时，所述氨基酸为二肽；当所述n＝2时，所述氨基酸为三肽；当n＝3时，所述氨基酸为四肽；当所述n＝4时，所述氨基酸为五肽；
所述脂肪族烷基为甲基或乙基；
所述氨基酸包括脂肪族侧链天然氨基酸、极性官能团侧链的氨基酸、芳香族侧链天然氨基酸或非天然氨基酸；
所述保护基团为乙酰基、苯甲酰基、对甲苯磺酰基、三氟甲磺酰基或甲磺酰基。
2.如权利要求1所述的选择性修饰方法，其特征在于，所述脂肪族侧链天然氨基酸包括
所述极性官能团侧链的氨基酸包括
所述芳香族侧链天然氨基酸包括
所述非天然氨基酸包括
3.如权利要求1所述的选择性修饰方法，其特征在于，所述卤化试剂包括N-溴代丁二酰亚胺、N-氯代丁二酰亚胺、N-碘代丁二酰亚胺或三氯异氰尿酸。
4.如权利要求1或3所述的选择性修饰方法，其特征在于，所述具有式Ⅰ所示结构的化合物和卤化试剂的摩尔比为1：(0.9～1.5)。
5.如权利要求1所述的选择性修饰方法，其特征在于，所述有机溶剂包括三氟甲苯、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺、乙腈或氯仿。
6.如权利要求1所述的选择性修饰方法，其特征在于，所述光照的波长为390～760nm；所述光照的温度为35～45℃，时间为8～10h。
7.如权利要求1、5或6所述的选择性修饰方法，其特征在于，所述无机碱为碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠、三乙胺或氢氧化钠。
8.如权利要求7所述的选择性修饰方法，其特征在于，所述具有式Ⅱ所示结构的化合物与无机碱的摩尔比为1：(1.2～2.0)。
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