CN114588089A - 一种植物提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本申请属于化妆品技术领域，尤其涉及一种植物提取物及其制备方法和应用。制备方法包括：将植物原料进行微射流提取后依次进行离心、纯化、浓缩，得到植物提取物；其中，益母草、当归、川芎、桃花、积雪草、洋甘菊和皱波角叉菜的混合提取物不仅具有清除DPPH自由基和ABTS自由基的功效，还具有抑制酪氨酸酶活性和黑色素生成的功效，更重要的是还具有舒缓修饰的功效，解决现有技术中缺乏同时具有淡化黑眼圈、减少皱纹以及舒缓修护功效的植物提取物的技术问题。

Description

一种植物提取物及其制备方法和应用
技术领域
本申请属于化妆品技术领域，尤其涉及一种植物提取物及其制备方法和应用。
背景技术
眼部皮肤是人体皮肤最薄的部位，眼部表皮与真皮的厚度只有0.25～0.55毫米，因此眼部周围的皮肤敏感脆弱，更容易受到外界的伤害；且眼部皮下几乎没有皮脂腺与汗腺分布，眼睛周围的细薄皮肤非常容易干燥，缺少水分，能供给的油脂相对要少，导致了眼部皮肤极容易衰老；再加上眼睛平均0.75秒眨动一次，使得眼部肌肉及其周围细致的皮肤受到巨大的压力，更容易疲劳和衰老，即由于眼部皮肤薄、皮下几乎没有皮脂腺与汗腺分布以及需要经常眨动等生理特点，导致了眼部皮肤容易疲劳和衰老。
眼部皮肤疲劳和衰老会造成黑眼圈、眼纹、眼袋、脂肪粒等，其中，黑眼圈可根据成因分为血管型黑眼圈、色素型黑眼圈和结构性黑眼圈，血管型黑眼圈通常是由于血液流通不畅，血液中的缺氧血红蛋白比例升高，最后呈现出偏紫的颜色；色素型黑眼圈一般是呈现出棕褐色，通常是由于日晒、皮肤炎症或是频繁揉搓眼睛之后导致局部皮肤受损，最后造成色素沉淀；结构性黑眼圈又称阴影型黑眼圈，这类黑眼圈是由于眼袋突出、泪沟凹陷之后形成的阴影，通常是用手术来解决此类黑眼圈。目前市面上用于眼部护理的眼霜大多数是以起效快的化学物质作为主要卖点，如使用视黄醇的美白功效去淡化色素型黑眼圈、使用乙醇增加皮肤通透性来改善血管型黑眼圈，这些成分虽然起效快，但也容易对细薄的眼部皮肤造成刺激，引起泛红、瘙痒等问题。随着现在消费者生活水平的提高及消费观念的升级，人们更青睐天然温和的眼部护理产品会是未来发展的趋势。
然而目前市面上的天然眼部护理类产品仍只在追求淡化黑眼圈、细化眼纹这两个功效。作为皮肤最薄的部位，眼部皮肤十分容易出现炎症反应，过度搓摩眼周、眼妆清洁不到位、防晒不到位、在眼部使用去角质产品、眼霜里的部分防腐剂或香精等都容易引起炎症，严重的还可能造成泛红、色素沉淀、脂肪粒等。
发明内容
有鉴于此，本申请提供了一种植物提取物及其制备方法和应用，用于解决现有技术中缺乏同时具有淡化黑眼圈、减少皱纹以及舒缓修护功效的植物提取物的技术问题。
本申请第一方面提供了一种植物提取物的制备方法，包括以下步骤：
步骤1、将植物原料进行微射流提取，得到植物粗提取物；
步骤2、将所述植物粗提取物依次进行离心、纯化、浓缩，得到植物提取物；
所述植物原料由益母草、当归、川芎、桃花、积雪草、洋甘菊和皱波角叉菜组成。
优选的，以质量份计算，所述植物原料按照以下质量份组成；
Figure BDA0003576513260000021
优选的，以质量份计算，所述植物原料按照以下质量份组成；
Figure BDA0003576513260000022
Figure BDA0003576513260000031
优选的，以质量份计算，所述植物原料按照以下质量份组成；
Figure BDA0003576513260000032
优选的，所述微射流提取的冷媒温度为0～70℃；
所述微射流提取的进料速度为10～20L/min。
优选的，所述离心的离心速度为2000～6000rpm，所述离心的离心时间为5～40min。
优选的，所述离心的次数为1～2次。
优选的，所述纯化为陶瓷膜分离纯化；
所述陶瓷膜的孔径为400～1000nm。
优选的，所述浓缩为反渗透膜浓缩；
所述反渗透膜的孔径为0.1nm～1nm。
本申请第二方面提供了植物提取物，由第一方面提供的制备方法制备得到。
本申请第三方面提供了植物提取物在抗氧化、保湿或修护的眼霜中的应用。
优选的，所述眼霜的剂型为霜剂、乳剂、凝胶剂、水剂、面膜液。
优选的，所述提取物在所述眼霜中的10.质量百分比为0.5～50％。
综上所述，本申请提供了一种植物提取物及其制备方法和应用，制备方法包括：将植物原料进行微射流提取后依次进行离心、纯化、浓缩，得到植物提取物；其中，益母草、当归、川芎、桃花、积雪草、洋甘菊和皱波角叉菜的混合提取物不仅具有清除DPPH自由基和ABTS自由基的功效，还具有抑制酪氨酸酶活性和黑色素生成的功效，更重要的是还具有舒缓修饰的功效，解决现有技术中缺乏同时具有淡化黑眼圈、减少皱纹以及舒缓修护功效的植物提取物的技术问题。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。
图1为本申请实施例提供的斑马鱼尾鳍修复的显微镜图；
图2为本申请实施例提供的斑马鱼黑色素沉积的显微镜图。
具体实施方式
本申请提供了一种植物提取物及其制备方法和应用，用于解决现有技术中缺乏同时具有淡化黑眼圈、减少皱纹以及舒缓修护功效的植物提取物的技术问题。
下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本申请保护的范围。
其中，以下实施例所用试剂或原料均为市售或自制。
实施例1
本实施例1提供了第一种植物提取物的制备方法，包括将植物原料粉碎成细粉后，加入植物原料20倍质量份的纯化水，搅拌均匀30min后，置于微射流提取器中，在提取温度15℃、进料速度10L/min条件下提取，得到提取液；将提取液通过离心机进行固液分离，转速为6000rpm，收集离心液，并将用孔径为800nm陶瓷膜对离心液进行纯化，收集滤液，用反渗透膜进行浓缩，浓缩至原料与浓缩液比为1：1，即得植物提取物1；
其中，植物原料由益母草35质量份、川芎15质量份、当归15质量份、桃花15质量份、积雪草8质量份、洋甘菊8质量份、皱波角叉菜4质量份组成。
实施例2
本实施例2提供了第二种植物提取物的制备方法，包括将植物原料粉碎成细粉后，加入植物原料25倍质量份的纯化水以及25倍质量份的1，3-丁二醇，搅拌均匀30min后，置于微射流提取器中，在提取温度25℃、进料速度15L/min条件下提取，得到提取液；将提取液通过离心机进行固液分离，转速为4500rpm，收集离心液，并将用孔径为500nm陶瓷膜对离心液进行纯化，收集滤液，用反渗透膜进行浓缩，浓缩至原料与浓缩液比为1：5，即得植物提取物2；
其中，植物原料由益母草20质量份、川芎25质量份、当归25质量份、桃花10质量份、积雪草10质量份、洋甘菊8质量份、皱波角叉菜2质量份组成。
实施例3
本实施例3提供了第三种植物提取物的制备方法，包括将植物原料粉碎成细粉后，加入植物原料5倍质量份的纯化水，搅拌均匀30min后，置于微射流提取器中，在提取温度60℃、进料速度20L/min条件下提取，得到提取液；将提取液通过离心机进行固液分离，转速为3000rpm，离心两次，收集离心液，并将用孔径为600nm陶瓷膜对离心液进行纯化，收集滤液，用反渗透膜进行浓缩，浓缩至原料与浓缩液比为1：1，即得植物提取物3；
其中，植物原料由益母草30质量份、川芎15质量份、当归15质量份、桃花20质量份、积雪草8质量份、洋甘菊10质量份、皱波角叉菜2质量份组成。
实施例4
本实施例4提供了第四种植物提取物的制备方法，包括将植物原料粉碎成细粉后，加入植物原料40倍质量份的纯化水以及10倍质量份1，3-丙二醇，搅拌均匀30min后，置于微射流提取器中，在提取温度25℃、进料速度10L/min条件下提取，得到提取液；将提取液通过离心机进行固液分离，转速为4000rpm，收集离心液，并将用孔径为800nm陶瓷膜对离心液进行纯化，收集滤液，用反渗透膜进行浓缩，浓缩至原料与浓缩液比为1：3，即得植物提取物4；
其中，植物原料由益母草25质量份、川芎10质量份、当归10质量份、桃花25质量份、积雪草15质量份、洋甘菊10质量份、皱波角叉菜5质量份组成。
实施例5
本实施例5提供了第五种植物提取物的制备方法，包括将植物原料粉碎成细粉后，加入植物原料10倍质量份的纯化水，搅拌均匀30min后，置于微射流提取器中，在提取温度15℃、进料速度15L/min条件下提取，得到提取液；将提取液通过离心机进行固液分离，转速为6000rpm，收集离心液，并将用孔径为800nm陶瓷膜对离心液进行纯化，收集滤液，用反渗透膜进行浓缩，浓缩至原料与浓缩液比为1：2，即得植物提取物5；
其中，植物原料由益母草15质量份、川芎15质量份、当归15质量份、桃花15质量份、积雪草15质量份、洋甘菊15质量份、皱波角叉菜10质量份组成。
实施例6
本实施例6提供了第六种植物提取物的制备方法，包括将植物原料粉碎成细粉后，加入植物原料20倍质量份的纯化水，搅拌均匀30min后，置于微射流提取器中，在提取温度15℃、进料速度10L/min条件下提取，得到提取液；将提取液通过离心机进行固液分离，转速为6000rpm，收集离心液，并将用孔径为800nm陶瓷膜对离心液进行纯化，收集滤液，用反渗透膜进行浓缩，浓缩至原料与浓缩液比为1：1，即得植物提取物6；
其中，植物原料由益母草8质量份、川芎7质量份、当归7质量份、桃花5质量份、积雪草35质量份、洋甘菊35质量份、皱波角叉菜3质量份组成。
实施例7
本实施例7提供了第七种植物提取物的制备方法，包括将植物原料粉碎成细粉后，加入植物原料20倍质量份的纯化水，搅拌均匀30min后，置于微射流提取器中，在提取温度15℃、进料速度10L/min条件下提取，得到提取液；将提取液通过离心机进行固液分离，转速为6000rpm，收集离心液，并将用孔径为800nm陶瓷膜对离心液进行纯化，收集滤液，用反渗透膜进行浓缩，浓缩至原料与浓缩液比为1：1，即得植物提取物7；
其中，植物原料由益母草15质量份、川芎15质量份、当归15质量份、桃花15质量份、积雪草15质量份、洋甘菊15质量份、皱波角叉菜10质量份组成。
实施例8
本实施例8提供了第八种植物提取物的制备方法，包括将植物原料粉碎成细粉后，加入植物原料20倍质量份的纯化水，搅拌均匀30min后，置于微射流提取器中，在提取温度15℃、进料速度10L/min条件下提取，得到提取液；将提取液通过离心机进行固液分离，转速为6000rpm，收集离心液，并将用孔径为800nm陶瓷膜对离心液进行纯化，收集滤液，用反渗透膜进行浓缩，浓缩至原料与浓缩液比为1：1，即得植物提取物8；
其中，植物原料由川芎20质量份、当归20质量份、桃花20质量份、积雪草15质量份、洋甘菊15质量份、皱波角叉菜10质量份组成。
实施例9
本实施例9提供了第九种植物提取物的制备方法，包括将植物原料粉碎成细粉后，加入植物原料20倍质量份的纯化水，搅拌均匀30min后，置于微射流提取器中，在提取温度15℃、进料速度10L/min条件下提取，得到提取液；将提取液通过离心机进行固液分离，转速为6000rpm，收集离心液，并将用孔径为800nm陶瓷膜对离心液进行纯化，收集滤液，用反渗透膜进行浓缩，浓缩至原料与浓缩液比为1：1，即得植物提取物9；
其中，植物原料由益母草20质量份、当归20质量份、川芎15质量份、甘草15质量份、桃花10质量份、积雪草8质量份、洋甘菊8质量份、皱波角叉菜4质量份组成。
实施例10
本申请实施例10为测试实施例1-9制备得到的植物提取物1-9抗DPPH自由基和ABTS自由基效果的实施例。
1、DPPH自由基清除实验
1.1测试原理
DPPH在有机溶剂中是一种稳定的自由基，其醇溶液呈紫色，且需低温避光储藏，具有单一电子，故能接受一个电子或氢离子，在波长为517nm下具有最大吸收。有自由基清除剂存在时，DPPH的单电子被捕捉而使其颜色变浅，在最大光吸收波长处的吸光值下降，且下降程度呈线性关系，吸光度水平的降低表明抗氧化性的增加，从而评价试验样品的抗氧化能力。抗氧化能力用抑制率来表示，抑制率越大，抗氧化性越强。
1.2DPPH试剂的配制
精密称取DPPH粉末(分子量约394)0.0100g。置于250mL容量，用适量95％乙醇溶解定容至250mL(如果测试中样品出现不溶物析出情况，可适当降低乙醇酒精度)，得浓度为0.1mmol/L的DPPH试剂。
1.3供试品的制备
取实施例1至9所得植物提取物1-9加95％乙醇溶液定容，配制成1.0％试液。并同样方法配制1mg/mL维生素E对照液。
1.4抗氧化能力测试
a.在10ml试管中依次加入4.0mlDPPH溶液和1.0ml 95％乙醇，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517nm处测吸光值，记为A0。
b.在10ml试管中依次加入4.0mlDPPH溶液和1.0ml待测试样溶液，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517nm处测吸光值，记为Ar。
c.在10ml试管中依次加入4.0ml 95％乙醇溶液和1.0ml待测试样溶液，混合摇匀，避光反应30min，稳定后，以95％乙醇为参比，在517nm处测吸光值，记为As。
d.计算公式：样品对DPPH自由基的清除率：
Figure BDA0003576513260000091
1.5测试结果
测试结果如DPPH自由基抑制效果所示，本发明实施例1～5的添加量为1％时，具有与1mg/ml维生素E相当的抗自由基效果。
DPPH自由基抑制效果
Figure BDA0003576513260000092
2、ABTS自由基清除能力测试
2.1测试原理
以ABTS(2,2’-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)diammonium salt)水溶性的自由基引发剂为显色剂，ABTS经活性氧氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子自由基ABTS+·，向其中加入被测物质，如果该物质中存在抗氧化成分，则该物质会与ABTS+发生反应而使反应体系褪色，6min后在734nm下检测吸光值(A734)的变化。
2.2试剂配制
a.PBS溶液：称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4，调pH＝7.2并定溶至1000mL。
b.ABTS+·：配制2.45mmol/L过硫酸钾，用过硫酸钾溶解ABTS，配成7mmoL/LABTS储备液，在室温、避光条件下静置12～16h，这种储备液可稳定3～4d。
c.2.45mmol/L过硫酸钾：配制100mL，取0.0662g过硫酸钾使用水定容至100mL。
d.7mmoL/LABTS储备液：取0.0384gABTS，使用2.45mmol/L过硫酸钾溶解，定容10mL，溶液呈墨绿色。
e.配制ABTS+·测定液：将ABTS+·储备液以磷酸盐缓冲液(pH＝7.2)稀释，使其吸光度在734nm波长处达到0.700±0.020。大概配制0.12mmol/L的ABTS+时，测定的吸光值在0.716A(配制4mLABTS+1mL的PBS)--约取1.7mL的mmoL/LABTS储备液稀释到100mL。
2.3测试方法
a.取4ml的ABTS+·工作液→1mL样品→混合10s→25℃避光静置6min→在734nm处测定吸光值。以4mLPBS+1mL样品作为参比，记A样品
b.取4ml的ABTS+·工作液→1mLPBS→混合10s→25℃避光静置6min→在734nm处测定吸光值。以PBS作为参比，记A0
抑制率＝(A0-A样品)/A0×100％
2.4测试结果
测试结果如ABTS+体外总抗自由基效果所示，本发明实施例1～5的添加量为1％时，与2.5mg/ml维生素C相当的体外总抗自由基效果相当。
ABTS+体外总抗自由基效果
Figure BDA0003576513260000101
Figure BDA0003576513260000111
实施例11
本申请实施例10为测试实施例1-9制备得到的植物提取物1-9酪氨酸酶活性的抑制实验。
1.1测试原理
酪氨酸酶是黑色素生成过程中的主要限速酶，其活性与黑色素的合成量成正相关。皮肤颜色的深浅主要取决于皮肤黑素细胞的量和合成黑色素的能力。酪氨酸酶作为黑色素合成的关键酶，催化L-酪氨酸羟基化转变成L-多巴，同时氧化L-多巴形成多巴醌，多巴醌再经过一系列反应，最后形成黑色素。酪氨酸酶是一种含铜的金属氧化还原酶，能催化空气中的氧对酪氨酸的氧化反应。催化过程可以通过酪氨酸转换反应过程的颜色变化来监测，在490nm处测定吸光度，根据公式，计算酪氨酸酶抑制率。
1.2试剂配置
a.PBS缓冲液(pH＝6.8)：精密称取6.80g磷酸二氢钾，溶于250mL的纯水，得0.2mlo/L磷酸二氢钾溶液；精密称取0.94g氢氧化钠，溶于118mL的纯水；取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250mL，取0.2mol/L氢氧化钠溶液118mL，用水稀释至1000mL，即得PBS缓冲液(pH＝6)。
b.L-酪氨酸溶液：用PBS配制成1.5mmol/L的L-酪氨酸溶液：L-酪氨酸先用少许0.1mol/LHCl溶解，然后再用PBS稀释到pH＝7，便可。
c.酪氨酸酶溶液：用PBS配制成200U/mL的酪氨酸酶溶液：酪氨酸酶用PBS溶解分装于PE管，置于－20℃装箱中保存，用时解冻只需取出放在冰箱上层(4℃)几小时后便可。
1.3酪氨酸酶活性检测方法
a.总反应体系为4m；
b.精密量取下样品溶液0mL、PBS 2.0mL、酪氨酸酶溶液1.0mL混匀，记为A；
精密量取下样品溶液0mL、PBS 3.0mL、酪氨酸酶溶液0mL混匀，记为B；
精密量取下样品溶液1.0mL、PBS 1.0mL、酪氨酸酶溶液1.0mL混匀，记为C；
精密量取下样品溶液1.0mL、PBS 2.0mL、酪氨酸酶溶液0mL混匀，记为D；
c.混匀后在37℃水浴中恒温10min，然后各加入1.0mL的酪氨酸溶液，反应15min
后于490nm处测定吸光度。以B作为参比读取A，以D作为参比读取C。
d.计算公式：
Figure BDA0003576513260000121
A：未加样品的加酶混合液所测的吸光度；
B：未加样品亦未加酶的混合液所测的吸光度；
C：加样品和酶的混合液所测的吸光度；
D：加样品而未加酶的混合液所测的吸光度。
1.4测试结果
测试结果如酪氨酸酶活性抑制效果所示，本发明实施例1～5的添加量为1％时，与0.5mg/ml熊果苷的酪氨酸酶效果抑制效果相当。
酪氨酸酶活性抑制效果
Figure BDA0003576513260000122
Figure BDA0003576513260000131
实施例12
本实施例12为组织修复(鱼胚实验)研究(斑马鱼)
1.1测试系统
本次测试所用斑马鱼为AB系斑马鱼，由广东药科大学引入，本实验室扩繁。
1.2主要设备及试剂
Z-A-D5五层单排独立养殖单元(上海海圣生物实验设备有限公司)；SZ780连续变倍体式显微镜(重庆奥特光学仪器有限公司)；ZXSD-A1090生化培养箱(上海智城分析仪器制造有限公司)；SQP万分之一电子秤(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司)；三卡因(麦克林)。
1.3实验方法
1.3.1实验用鱼及其受精卵的采集
将性成熟斑马鱼雌雄分缸饲养于斑马鱼养殖单元中。水温：26±2℃；PH6.7；电导率：520μs/cm；光照/黑暗周期：14h/10h。暴露实验开始前一天将雌雄以1:2配对，自然交配产卵。
1.3.2组织修复活性研究
a.挑选发育健康的斑马鱼幼鱼置于6孔细胞培养板中，切去斑马鱼尾鳍。置于体视显微镜下拍照记录。
b.转移至96孔细胞培养板，加入200μL实施例1溶液，置培养箱中继续孵育72h。实验设置空白对照组(斑马鱼系统养殖水)和受试样品组，每个浓度组20条。
c.72h后，置于体视显微镜下对斑马鱼拍照记录，并计算尾鳍的长度。
1.4统计分析
采用SPSS 19.0软件统计处理数据，实验数据均用±SEM数据表示，用单因素方差分析。各浓度组与空白对照组两两比较：*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。
1.5实验结果
实施例1对鱼胚尾鳍损伤修复的影响如表1和说明书附图1所示：
(与空白对照组比较：*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001)
Figure BDA0003576513260000141
表1：对鱼胚尾鳍损伤修复的影响#
在本次实验条件下，当受试样品浓度为0％(空白对照)、0.25％、0.50％和1.0％时，斑马鱼幼鱼尾鳍相对长度分别为1.00±0.03、1.15±0.17、1.21±0.04和1.27±0.13；
与空白对照组相比，斑马鱼幼鱼切除尾鳍后经浓度为0.25％、0.50％和1.00％的实施例1处理后有促进尾鳍生长的作用，且当受试样品浓度为0.25％、0.50％和1.00％时，有显著性差异(**P<0.01)。
实施例13
本实施例13为美白功效(鱼胚实验)功效测试
1.1测试系统
本次测试所用斑马鱼为AB系斑马鱼，由广东药科大学引入，本实验室扩繁。
1.2主要设备及试剂
Z-A-D5五层单排独立养殖单元(上海海圣生物实验设备有限公司)；SZ680连续变倍体式显微镜(重庆奥特光学仪器有限公司)；ZXSD-A1090生化培养箱(上海智城分析仪器制造有限公司)；SQP万分之一电子秤(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司)；全波长酶标仪(赛默飞)；超声振荡器(昆山市超声仪器有限公司)；超低温离心机(湘仪离心机仪器有限公司)；左旋多巴(麦克林)；脱氧胆酸钠(麦克林)等。
1.3实验方法
a.实验用鱼及其受精卵的采集
将性成熟斑马鱼雌雄分缸饲养于斑马鱼养殖单元中。水温：26±2℃；pH 7.2；电导率：520μs/cm；光照/黑暗周期：14h:10h。暴露实验开始前一天将雌雄以1:2配对，自然交配产卵。胚胎在原肠胚期(受精后0～8hpf)最为敏感，因此，于受精卵收集后6hpf进行暴露实验。
b.暴露实验
选用6孔细胞培养板，每孔放入受精卵30枚，实验重复三组。以0.5mg/mL熊果苷为阳性对照，设置实施例1实验浓度为0.25、0.50和1.00％，分别加入实验溶液5mL。另设空白对照(养殖水)组。
c.显微观察
孵育至48、72hpf时，于体式显微镜下观察斑马鱼胚胎的黑色素沉积情况，并拍照记录；
d.黑色素生成研究
孵育至72hpf时，每组实验浓度挑选20枚已孵化的斑马鱼幼鱼，用PBS冲洗，加入脱氧胆酸钠溶液，并在低温下超声制备成匀浆液；离心，加入氢氧化钠溶液，酶标仪下检测各实验的吸光值。
黑色素生成抑制率按下列公式计算:
Figure BDA0003576513260000151
1.4统计分析
采用SPSS 19.0软件统计处理数据，实验数据均用±SEM数据表示，用卡方检验进行分析比较。
1.5实验结果
实施例1对鱼胚形态学的影响如说明书附图2所示；样品处理鱼胚72h时对黑色素生成的影响如表2所示：
(注：与空白相比，*p<0.05；**p<0.01；***p<0.001)
Figure BDA0003576513260000161
在本次实验条件下，实施例1浓度为0.25％、0.50％和1.00％时，鱼胚的黑色素生成抑制率分别为：4.99±2.66、20.28±6.39和71.38±2.98％，熊果苷(0.5mg/ml)对鱼胚黑色素生成的抑制率为70.58±4.63％。
与空白对照组相比，实施例1浓度为0.50％和1.00％时对鱼胚的黑色素生成有抑制作用，并有显著性差异(***P<0.001)；当受试样品浓度为1.00％时对鱼胚的黑色素生成作用与熊果苷相当。
从实施例10-12可以看出，相比于化学合成物，本申请提供的植物提取物更安全，针对不同类型的黑眼圈有优秀的淡化效果，同时在淡化黑眼圈、细化皱纹、保湿等基础功效下，增加了舒缓修护的功效，预防和舒缓日常生活中常见的眼部皮肤发生的炎症反应，对眼部周围皮肤达到更好的护理作用，此外，与其他提取方式相比，本申请提供的微射流提取工艺可以最大程度的保留植物原料的各种活性成分，且制备过程不发生热学性、化学性变化，稳定性良好，可应用在多种化妆品中而不出容易现颜色变化，沉淀析出等问题。
实施例13
本实施例13提供了包括实施例1制备的植物提取物的眼霜，以重量百分比计，原料如表3所示。
Figure BDA0003576513260000171
表3
上述添加植物提取物的眼霜配方制备方法步骤如下：
1)将A相中的各原料分别加入容器A中，加热到80℃，搅拌至完全均匀；
2)将B相中的各原料分别加入容器B中，加热到80℃(透明质酸钠和卡波940用甘油和丁二醇预分散)，搅拌至完全均匀；
3)将B相加入A相均质5min；
4)将C项组分加入，搅拌30min；
5)搅拌降温冷却，待产品冷却到60℃后，加入D相，搅拌5min；
6)降温至45℃，加入E相和F相，搅拌10min；
7)继续搅拌冷却至室温即可。
实施例14
本实施例14提供了包括实施例1制备的植物提取物的精华液，以重量百分比计，原料如表4所示。
Figure BDA0003576513260000181
表4
上述添加植物提取物的精华液制备方法步骤如下：
1)将A相各原料加入容器A中(透明质酸钠和卡波940用甘油和丁二醇预分散)，80℃搅拌均匀至无不溶物；
2)降温至60℃，加入三乙醇胺温，搅拌10min；
降温至45℃，加入C相和D相，搅拌恢复至室温即可。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种植物提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1、将植物原料进行微射流提取，得到植物粗提取物；
步骤2、将所述植物粗提取物依次进行离心、纯化、浓缩，得到植物提取物；
所述植物原料由益母草、当归、川芎、桃花、积雪草、洋甘菊和皱波角叉菜组成。
2.根据权利要求1所述的一种植物提取物的制备方法，其特征在于，以质量份计算，所述植物原料按照以下质量份组成：
Figure FDA0003576513250000011
3.根据权利要求1所述的一种植物提取物的制备方法，其特征在于，以质量份计算，所述植物原料按照以下质量份组成：
Figure FDA0003576513250000012
4.根据权利要求1所述的一种植物提取物的制备方法，其特征在于，以质量份计算，所述植物原料按照以下质量份组成：
Figure FDA0003576513250000013
Figure FDA0003576513250000021
5.根据权利要求1所述的一种植物提取物的制备方法，其特征在于，所述微射流提取的冷媒温度为0～70℃；
所述微射流提取的进料速度为10～20L/min。
6.根据权利要求1所述的一种植物提取物的制备方法，其特征在于，所述离心的离心速度为2000～6000rpm；
所述离心的离心时间为5～40min。
7.根据权利要求1所述的一种提取物的制备方法，其特征在于，所述纯化为陶瓷膜分离纯化；
所述陶瓷膜的孔径为400～1000nm。
8.根据权利要求1所述的一种植物提取物的制备方法，其特征在于，所述浓缩为反渗透膜浓缩；
所述反渗透膜的孔径为0.1nm～1nm。
9.一种植物提取物，其特征在于，由权利要求1-8任一项所述制备方法制备得到。
10.权利要求9所述的一种植物提取物在抗氧化、保湿或修护的眼霜中的应用。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116459191A (zh) * 2023-05-08 2023-07-21 深圳市理然化妆品有限公司 一种控油保湿组合物及其制备方法与应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105616317A (zh) * 2015-11-09 2016-06-01 青岛安倍康生物医药技术有限公司 一种缓解眼部皱纹、眼袋的积雪草眼霜及其制备方法
CN110840806A (zh) * 2019-12-13 2020-02-28 广州市络捷生物科技有限公司 一种袋鼠爪提取物及其制备方法和应用
CN110859788A (zh) * 2019-12-13 2020-03-06 广州市络捷生物科技有限公司 一种塔纳卡组合物及其制备方法和应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105616317A (zh) * 2015-11-09 2016-06-01 青岛安倍康生物医药技术有限公司 一种缓解眼部皱纹、眼袋的积雪草眼霜及其制备方法
CN110840806A (zh) * 2019-12-13 2020-02-28 广州市络捷生物科技有限公司 一种袋鼠爪提取物及其制备方法和应用
CN110859788A (zh) * 2019-12-13 2020-03-06 广州市络捷生物科技有限公司 一种塔纳卡组合物及其制备方法和应用

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116459191A (zh) * 2023-05-08 2023-07-21 深圳市理然化妆品有限公司 一种控油保湿组合物及其制备方法与应用

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