CN114563580A - 家用便隐血检测试条及其制备方法和包含其的检测盒 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了家用便隐血检测试条及其制备方法和包含其的检测盒，该家用便隐血检测试条，从加样端开始依次形成有样本垫，标记垫，反应膜和吸收垫，所述标记垫上含有标记用抗人血红蛋白抗体和金颗粒联结形成的胶体金颗粒；所述反应膜上喷涂有包被用抗人血红蛋白抗体。采用胶体金标记，通过免疫层析方法定性检测粪便中微量的人血红蛋白，用于消化道出血的早期诊断，提高检测结果的准确性，具有简便、快速、结果易懂，无需特殊仪器，大便样本可即采即测等优点。本发明的家用便隐血检测试条的制备方法，方法简单，适合于工业化生产。将本发明的家用便隐血检测试条用于试剂盒，能更好的携带和使用，满足不同的使用需求。

Description

家用便隐血检测试条及其制备方法和包含其的检测盒
技术领域
本发明属于医疗检测器械领域，涉及一种家用便隐血检测试条及其制备方法和包含其的检测盒。
背景技术
“便隐血”(简称FOB)指的是每日消化道出血量小于5ml。许多疾病如结直肠癌、结肠炎、消化道溃疡、肠息肉、胃肠憩室等疾病，在早期并无症状，仅有大便隐血。早期结直肠癌的病灶限于粘膜层或粘膜下层并未侵及肌层者，往往为无症状阶段，患者不会主动求诊，因此对高危人群筛查及定期检查是发现早期癌患者的重要方式。临床研究证实，87％的消化道肿瘤病人便隐血试验为阳性；早期大肠癌唯一可以查出的异常现象为微量出血，粪便中带有微量血红蛋白；所以对粪便中微量血红蛋白的检出具有重要的意义，可以及早发现早期癌患者，并及早进行治疗，其远期生存率可达91％。对于其中病灶局限者甚至可以保留具有生理功能的肛门，极大地减少了患者的痛苦，提高了生活质量。因此，在许多发达国家推荐大于50岁人群每年定期做一次便隐血检查，对其中阳性患者再作进一步精密检查。其中隐血检测试条可以快捷的进行便隐血的检测，但部分产品采用化学法容易因为动物血红蛋白以及食物中某些具有氧化能力的物质产生干扰，造成假阳性结果。
发明内容
为了克服现有技术的不足，本发明的第一个目的在于提供一种家用便隐血检测试条,采用胶体金标记，经过免疫层析进行检测可以避免化学法易产生的假阳性的问题，提高检测结果的准确性。
本发明的第二个目的是为了提供一种上述家用便隐血检测试条的制备方法。
本发明的第三个目的是为了提供一种包含上述家用便隐血检测试条是检测试剂盒。
实现本发明的目的之一可以通过采取如下技术方案达到：
一种家用便隐血检测试条，其特征在于，在所述试纸条上，从加样端开始依次形成有样本垫、标记垫、反应膜和吸收垫，所述标记垫上含有标记用抗人血红蛋白抗体和金颗粒联结形成的胶体金颗粒；所述反应膜上喷涂有包被用抗人血红蛋白抗体。
进一步的，所述反应膜上包括羊抗鼠多克隆抗体，所述羊抗鼠多克隆抗体喷涂在包被用抗人血红蛋白抗体远离加样端的一侧。
进一步的，所述样本垫为玻璃纤维素膜，所述反应膜为硝酸纤维素膜，所述标记垫为聚酯纤维素膜。
进一步的，所述吸收垫为吸水纸。
进一步的，所述标记垫上标记用抗人血红蛋白抗体和金颗粒联结形成的胶体金颗粒的含量为0.2-0.67μg/cm2；所述反应膜上包被用抗人血红蛋白抗体的含量为2-6.7μg/cm2；所述反应膜上羊抗鼠多克隆抗体的含量为2-6.7μg/cm2。
实现本发明的目的之二可以通过采取如下技术方案达到：
一种家用便隐血检测试条的制备方法，包括以下步骤：
步骤S1，将包被用抗人血红蛋白抗体喷在反应膜上，然后在烘箱内烘干；
步骤S2，将标记用抗人血红蛋白抗体和金颗粒联结形成的胶体金颗粒点在标记垫上，并在烘箱中烘干；
步骤S3，将样本垫、标记垫、反应膜和吸收垫依次重叠组装，得到所述家用便隐血检测试条；
其中，步骤S1和步骤S2不分先后或者同时进行。
进一步的，步骤S1中在将包被用抗人血红蛋白抗体喷在反应膜上后，还包括喷涂羊抗鼠多克隆抗体步骤，所述羊抗鼠多克隆抗体喷涂在反应膜上包被用抗人血红蛋白抗体远离加样端的一侧。
进一步的，在S3步骤后，还包括切割、组装步骤，将所述家用便隐血检测试条切割成需要的宽度，放入相应配件进行包装。
进一步的，步骤S1中在将包被用抗人血红蛋白抗体喷在反应膜上之前，将反应膜粘在片材上，所述片材为PVC胶板。
进一步的，在S3步骤后，还包括成品检验步骤，成品检验使用血红蛋白干粉标准粉，所述血红蛋白干粉标准品购自美国Sigma公司，经稀释成所需浓度后用于产品的质量控制和检验。
实现本发明的目的之三可以通过采取如下技术方案达到：
所述试剂盒包括上述任一项所述的家用便隐血检测试条。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
1、本发明的家用便隐血检测试条采用胶体金标记，通过免疫层析方法可以避免化学法易产生的假阳性，定性检测粪便中微量的人血红蛋白，用于消化道出血的早期诊断，提高检测结果的准确性。并且具有简便、快速、结果易懂，无需特殊仪器，大便样本可即采即测等优点，能满足门诊快速检验的需要，适合于基层门诊和家庭使用，以及大面积的体检普查，更便捷50岁以上中老年人使用，对下消化道出血的早期诊断等方面具有重要的意义。
2、本发明的家用便隐血检测试条的制备方法，方法简单，适合于工业化生产。
3、将本发明的家用便隐血检测试条用于试剂盒，能更好的携带和使用，满足不同的使用需求。
具体实施方式
下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述：
部分公司生产的便隐血检测试条采用化学法的氧化还原法原理进行检测，但是氧化还原原理检测容易因为动物血红蛋白以及食物中某些具有氧化能力的物质产生干扰，造成假阳性结果。因此本发明提供一种免疫层析方法进行检测便隐血的方法，可以避免化学法易产生的假阳性，提高检测结果的准确性。
一种家用便隐血检测试条，在所述试纸条上，从加样端开始依次形成有样本垫，标记垫，反应膜和吸收垫，所述标记垫上含有抗人血红蛋白抗体和金颗粒；所述反应膜上喷涂有包被用抗人血红蛋白抗体。
采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术，检测样品中的人血红蛋白，反应膜上有包被用抗人血红蛋白抗体，标记垫上含有抗人血红蛋白抗体和金颗粒。测试时，大便稀释液样本滴入加样端后，样本与胶体金颗粒结合的抗人血红蛋白抗体反应混合，然后，混合物随之在毛细效应下向反应膜层析。当过样品中存在人血红蛋白时，胶体金颗粒结合的抗人血红蛋白抗体在层析过程中先与样本中的人血红蛋白结合，随后结合物会被固定在反应膜上的包被抗人血红蛋白抗体结合，形成抗体-抗原-抗体-胶体金颗粒复合物，并产生一条红色条带，表示结果为阳性。如果样品中没有人血红蛋白时，反应膜上不出现色带，表示结果为阴性。
通过高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术，选择性鉴定人血红蛋白，具有很高的灵敏性和特异性。可以避免化学法易产生的假阳性，提高检测结果的准确性。
进一步的，所述反应膜上包括羊抗鼠多克隆抗体，所述羊抗鼠多克隆抗体喷涂在包被用抗人血红蛋白抗体远离加样端的一侧。
羊抗鼠多克隆抗体喷涂在包被用抗人血红蛋白抗体远离加样端的一侧可以作为控制线，用来指示试条系统工作是否正常。如果在羊抗鼠多克隆抗体喷涂区域出现红色色带表示试条工作系统正常，如果不出现红色色带表示试条系统存在问题，试条失效。
进一步的，所述样本垫为玻璃纤维素膜，所述反应膜为硝酸纤维素膜，所述标记垫为聚酯纤维素膜。
进一步的，所述吸收垫为吸水纸。
进一步的，所述标记垫上标记用抗人血红蛋白抗体和金颗粒联结形成的胶体金颗粒的含量为0.2-0.67μg/cm2；所述反应膜上包被用抗人血红蛋白抗体的含量为2-6.7μg/cm2；所述反应膜上羊抗鼠多克隆抗体的含量为2-6.7μg/cm2。实现本发明的目的之二可以通过采取如下技术方案达到：
一种家用便隐血检测试条的制备方法，包括以下步骤：
步骤S1，将包被用抗人血红蛋白抗体喷在反应膜上，然后在烘箱内烘干；
步骤S2，将标记用抗人血红蛋白抗体和金颗粒联结形成的胶体金颗粒点在标记垫上，并在烘箱中烘干；
步骤S3，将样本垫，标记垫，反应膜和吸收垫依次重叠组装，得到所述家用便隐血检测试条；
其中，步骤S1和步骤S2不分先后或者同时进行。
样本垫，标记垫，反应膜和吸收垫依次重叠组装，是指在样本垫与标记垫重叠放置，反应膜与标记垫重叠放置，吸收垫与反应膜重叠放置，从而使得层析可以连续的从进样端向反应膜进行。
进一步的，步骤S1还包括喷涂羊抗鼠多克隆抗体步骤，所述羊抗鼠多克隆抗体喷涂在反应膜上包被用抗人血红蛋白抗体远离加样端的一侧。
进一步的，还包括切割，组装步骤，将所述家用便隐血检测试条切割成需要的宽度，放入相应配件进行包装。
进一步的，步骤S1中在将包被用抗人血红蛋白抗体喷在反应膜上之前，将反应膜粘在片材上，所述片材为PVC胶板。
进一步的，还包括成品检验步骤，所述检验的用的血红蛋白干粉标准品购自美国Sigma公司，经稀释成所需浓度后用于产品的质量控制和检验。
实现本发明的目的之三可以通过采取如下技术方案达到：所述试剂盒包括上述任一项所述的家用便隐血检测试条。
实施例1
制备标记用抗人血红蛋白抗体和金颗粒联结形成的胶体金颗粒溶液取0.01％氯金酸水溶液100ml加热至沸，搅动下准确加入1％柠檬酸三钠水溶液0.7ml，金黄色的氯金酸水溶液在2分钟内变为紫红色，继续煮沸15分钟，冷却后以蒸馏水恢复到原体积得到胶体金溶液；
在电磁搅拌下，将含有0.5g标记用抗人血红蛋白抗体的溶液逐滴加入到胶体金溶液中，搅拌30分钟后加入5％的牛血清白蛋白，使标记用抗人血红蛋白抗体终浓度为1％，再搅拌15分钟后加入聚乙二醇(PEG MW20000)使标记用抗人血红蛋白抗体终浓度为0.05％。
实施例2
先将硝酸纤维素膜即NC膜粘在片材上面，然后将包被用抗人血红蛋白抗体配制成溶液并通过机器将溶液按照喷涂量为2μg/cm2均匀的喷在粘好NC膜的片材上，然后在烘箱内烘干得到反应膜；将实施例1制备的标记用抗人血红蛋白抗体和金颗粒联结形成的胶体金颗粒溶液，通过机器将溶液点在聚酯纤维膜即标记垫上，喷涂量为0.2μg/cm2，并在烘箱中烘干；将处理好反应膜、标记垫和样本垫的按一定的位置组装在一起，并加上吸水纸，最后切割成需要的宽度，放入相应配件进行包装。
实施例3
先将硝酸纤维素膜即NC膜粘在片材上面，然后将包被用抗人血红蛋白抗体配制成溶液并通过机器将溶液按照喷涂量为6.7μg/cm2均匀的喷在粘好NC膜的片材上，将羊抗鼠多克隆抗体按照喷涂量为2μg/cm2喷涂在反应膜上包被用抗人血红蛋白抗体远离加样端的一侧，然后在烘箱内烘干得到反应膜；将实施例1制备的标记用抗人血红蛋白抗体和金颗粒联结形成的胶体金颗粒溶液，通过机器将溶液点在聚酯纤维膜即标记垫上，喷涂量为0.67μg/cm2，并在烘箱中烘干；将处理好反应膜、标记垫和样本垫的按一定的位置组装在一起，并加上吸水纸，最后切割成需要的宽度，放入相应配件进行包装。
实施例4
先将硝酸纤维素膜即NC膜粘在片材上面，然后将包被用抗人血红蛋白抗体配制成溶液并通过机器将溶液按照喷涂量为4.35μg/cm2均匀的喷在粘好NC膜的片材上，将羊抗鼠多克隆抗体按照喷涂量为6.7μg/cm2喷涂在反应膜上包被用抗人血红蛋白抗体远离加样端的一侧，然后在烘箱内烘干得到反应膜；将实施例1制备的标记用抗人血红蛋白抗体和金颗粒联结形成的胶体金颗粒溶液，通过机器将溶液点在聚酯纤维膜即标记垫上，喷涂量为0.44μg/cm2，并在烘箱中烘干；将处理好反应膜、标记垫和样本垫的按一定的位置组装在一起，并加上吸水纸，最后切割成需要的宽度，放入相应配件进行包装。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。

Claims (10)

1.家用便隐血检测试条，其特征在于，在所述试纸条上，从加样端开始依次形成有样本垫、标记垫、反应膜和吸收垫，所述标记垫上含有标记用抗人血红蛋白抗体和金颗粒联结形成的胶体金颗粒；所述反应膜上喷涂有包被用抗人血红蛋白抗体。
2.根据权利要求1所述的家用便隐血检测试条，其特征在于，所述反应膜上包括羊抗鼠多克隆抗体，所述羊抗鼠多克隆抗体喷涂在包被用抗人血红蛋白抗体远离加样端的一侧。
3.根据权利要求1所述的家用便隐血检测试条，其特征在于，所述样本垫为玻璃纤维素膜，所述反应膜为硝酸纤维素膜，所述标记垫为聚酯纤维素膜，所述吸收垫为吸水纸。
4.根据权利要求1所述的家用便隐血检测试条，其特征在于，
所述标记垫上标记用抗人血红蛋白抗体和金颗粒联结形成的胶体金颗粒的含量为0.2-0.67μg/cm2；所述反应膜上包被用抗人血红蛋白抗体的含量为2-6.7μg/cm2；所述反应膜上羊抗鼠多克隆抗体的含量为2-6.7μg/cm2。
5.家用便隐血检测试条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤S1，将包被用抗人血红蛋白抗体喷在反应膜上，然后在烘箱内烘干；
步骤S2，将标记用抗人血红蛋白抗体和金颗粒联结形成的胶体金颗粒点在标记垫上，并在烘箱中烘干；
步骤S3，将样本垫、标记垫、反应膜和吸收垫依次重叠组装，得到所述家用便隐血检测试条；
其中，步骤S1和步骤S2不分先后或者同时进行。
6.根据权利要求5所述的家用便隐血检测试条的制备方法，其特征在于，步骤S1中在将包被用抗人血红蛋白抗体喷在反应膜上后，还包括喷涂羊抗鼠多克隆抗体步骤，所述羊抗鼠多克隆抗体喷涂在反应膜上包被用抗人血红蛋白抗体远离加样端的一侧。
7.根据权利要求5所述的家用便隐血检测试条的制备方法，其特征在于，在S3步骤后，还包括切割、组装步骤，将所述家用便隐血检测试条切割成需要的宽度，放入相应配件进行包装。
8.根据权利要求5所述的家用便隐血检测试条的制备方法，其特征在于，步骤S1中在将包被用抗人血红蛋白抗体喷在反应膜上之前，将反应膜粘在片材上，所述片材为PVC胶板。
9.根据权利要求5所述的家用便隐血检测试条的制备方法，其特征在于，在S3步骤后，还包括成品检验步骤，成品检验使用血红蛋白干粉，所述血红蛋白干粉标准品购自美国Sigma公司，经稀释成所需浓度后用于产品的质量控制和检验。
10.家用便隐血检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-4任一项所述的家用便隐血检测试条。
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CN117310149A (zh) * 2023-09-28 2023-12-29 中科鋆迪(浙江)生物医学有限公司 一种亲合捕获固相化学反应体系的检测方法

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