CN114558118A - 一种修复肠粘膜促消化方剂及其制备工艺 - Google Patents

一种修复肠粘膜促消化方剂及其制备工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN114558118A
CN114558118A CN202210188221.0A CN202210188221A CN114558118A CN 114558118 A CN114558118 A CN 114558118A CN 202210188221 A CN202210188221 A CN 202210188221A CN 114558118 A CN114558118 A CN 114558118A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fibronectin
parts
solution
intestinal mucosa
prescription
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202210188221.0A
Other languages
English (en)
Inventor
杨得富
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Henan Jianda Dynamic Insurance Co ltd
Original Assignee
Henan Jianda Dynamic Insurance Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Henan Jianda Dynamic Insurance Co ltd filed Critical Henan Jianda Dynamic Insurance Co ltd
Priority to CN202210188221.0A priority Critical patent/CN114558118A/zh
Publication of CN114558118A publication Critical patent/CN114558118A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/39—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
    • A61K36/734—Crataegus (hawthorn)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/53—Liquid-solid separation, e.g. centrifugation, sedimentation or crystallization
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/55—Liquid-liquid separation; Phase separation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明提供一种修复肠粘膜促消化方剂，其有效成分的重量组成为：纤连蛋白1～5份、山楂提取物5～20份、氯化钠1～5份、稳定剂5～30份。本发明提供的修复肠粘膜促消化方剂，将动物血浆纤维连接蛋白和山楂提取物完美结合，该方剂不但能够快速修复损伤的胃肠粘膜，并具有保护胃肠黏膜之功效，可开胃消食、消积化滞，从而促进动物生长，改善动物的健康状态，实现减抗替抗的目的，间接提高人类食品安全。该方剂生产采用传统工艺与现代工艺相结合，简易设备与现代设备相结合，可操作性强，规模可大可小，经济效益显著。

Description

一种修复肠粘膜促消化方剂及其制备工艺
技术领域
本发明涉及饲料添加剂技术领域，具体涉及一种修复肠粘膜促消化方剂及其制备工艺。
背景技术
山楂属蔷薇科山楂属，为常用中药材，其性味酸甘微温，能开胃消食、消积化滞、活血化瘀、收敛止痢。广泛地应用于治疗消化不良、食积停滞。
纤连蛋白（fibronectin，Fn）是一种分子量为470-500kDa的大分子冷凝糖蛋白，广泛存在于动物组织和组织液中，如血浆、乳汁、羊水和唾液等。纤连蛋白是动物体内具有重要生物学功能的生长因子，因其结构上的多个功能域而具有多种生物学性质。纤连蛋白广泛参与皮肤真皮细胞迁移、黏附、增殖、止血及衰老和受损皮肤组织修复等过程，调动血液中的单核吞噬细胞系统清除损伤组织处有害物质，具有生长因子作用。纤连蛋白作为细胞培养的必要基质，可提高多种细胞的贴壁率、汇合率，缩短细胞汇合时间，使细胞形态结构良好，代谢率增强，DNA、RNA及蛋白质合成速度显著提高。纤连蛋白促进细胞的集落率升高，促进原代培养成活率提高。大量的研究和临床应用已证明，FN在创伤粘膜的修复和愈合中起着十分重要的作用，能够快速修复损伤的胃肠粘膜，并具有保护胃肠黏膜之功效。
目前，纤连蛋白在细胞培养、神经修复和临床输注等领域获得了广泛应用。纤连蛋白在动物养殖领域也有着极大的潜力。因此，开发细胞纤连蛋白修复肠粘膜应用于养殖技术中的组织再生，可作为一种安全和有效的高科技兽用技术和方案。目前尚未发现有关纤连蛋白和山楂提取物复合剂的使用、销售及报道。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的缺陷和不足，提供一种修复肠粘膜促消化方剂，该方剂生物利用度较高、修复作用强、无毒副作用、能够快速修复损伤的胃肠粘膜，并具有保护胃肠黏膜之功效，可开胃消食、消积化滞，从而促进动物生长，改善动物的健康状态，实现减抗替抗的目的，间接提高人类食品安全。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种修复肠粘膜促消化方剂，其有效成分的重量组成为：纤连蛋白1～5份、山楂提取物5～20份、氯化钠1～5份、稳定剂5～30份。
一种修复肠粘膜促消化方剂，所述方剂的有效成分的重量组成为：纤连蛋白3份、山楂提取物15份、氯化钠3份、稳定剂15份；
所述稳定剂包括玉米低聚肽粉、海藻酸钠、柠檬酸钠、甘露醇中的一种或多种；
所述的修复肠粘膜促消化方剂的制备工艺，其特征在于，包括如下步骤：
（1）称取玉米低聚肽粉、海藻酸钠、柠檬酸钠、甘露醇中的一种或多种，加水溶解后调节pH至6.0-7.5，得到第一溶液；
（2）向第一溶液中缓慢加入经洗脱的动物纤连蛋白溶液，均匀搅拌，避免产生泡沫，得到含有纤连蛋白的液体；将含有纤连蛋白的液体进行冻结，得到纤维连接蛋白冻干粉；
（3）称取纤维连接蛋白冻干粉、山楂提取物和氯化钠，搅拌均匀，即得修复肠粘膜促消化方剂；
所述修复肠粘膜促消化方剂的制备工艺，其特征在于，其中纤连蛋白的提取包括如下步骤：
（1）从全血中分离出血浆和血细胞；
（2）向血浆中加入酸性Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液并充分混匀，然后边搅拌边加入硫酸铵，使其饱和度达到20%，并调节pH至碱性，然后放入冰箱冷藏1-5h使之充分沉淀；
（3）将步骤（2）得到的沉淀溶于酸性PBS缓冲液中，装入透析袋内进行透析，每8-10h换一次透析液，直至用10%BaCl2检测无SO42－为止，收集透析袋内液体进行浓缩操作，即得纤维连接蛋白粗品；
（4）先用Tris-HCl缓冲液作为平衡液、碱性TB缓冲液作为洗脱液，将步骤（3）步所得纤维连接蛋白粗品通过明胶－琼脂糖凝胶快速流动4B的预柱；
（5）通过用含有EDTA 的TBS顺序洗涤去除凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（6）通过用1M NaCl溶液依次洗涤除去凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（7）使用小于0.5 mol浓度的精氨酸溶液顺序洗涤去除凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（8）使用大于0.5 mol浓度的精氨酸溶液洗脱，制得动物血浆纤连蛋白。
所述的一种修复肠粘膜促消化方剂的制备工艺，其中的山楂提取物的提取工艺包括如下步骤：
（1）取山楂，加入乙醇提取3次，合并提取液，静置过夜；
（2）过滤，滤液浓缩，回收乙醇，将浓缩液过大孔吸附树脂，加入适量水洗脱；
（3）再用乙醇洗脱，合并浓缩液、过聚酰胺，水洗，再用乙醇洗，浓缩得到山楂提取物。
山楂具有开胃消食、消积化滞、活血化瘀、收敛止痢的功效，广泛地应用于治疗消化不良、食积停滞。纤连蛋白是动物体内具有重要生物学功能的生长因子，因其结构上的多个功能域而具有多种生物学性质。纤连蛋白广泛参与皮肤真皮细胞迁移、黏附、增殖、止血及衰老和受损皮肤组织修复等过程，调动血液中的单核吞噬细胞系统清除损伤组织处有害物质，具有生长因子作用。纤连蛋白在创伤粘膜的修复和愈合中起着十分重要的作用，能够快速修复损伤的胃肠粘膜，并具有保护胃肠黏膜之功效。由于患有肠粘膜损伤的动物对食物的消化也将减弱，长期肠炎导致动物食欲低下，体重减轻，使养殖户遭受巨大经济损失，本发明将细胞纤连蛋白应用于养殖技术中，修复动物肠粘膜，促进肠粘膜组织再生，同时在该方剂中加入山楂提取物，使纤连蛋白和山楂提取物发挥协同作用，在修复肠粘膜的同时促进动物对饲料的消化吸收，将对动物对健康起到显著的作用。同时，该方剂中加有玉米低聚肽粉、海藻酸钠、柠檬酸钠、甘露醇等稳定剂，使制剂具有更易于储存、稳定性好、用药方便等优点。
与现有技术相比，本发明的有益效果具体为：
（1）本发明提供的修复肠粘膜促消化方剂，将动物血浆纤维连接蛋白和山楂提取物完美结合，该方剂不但能够快速修复损伤的胃肠粘膜，并具有保护胃肠黏膜之功效，可开胃消食、消积化滞，从而促进动物生长，改善动物的健康状态，实现减抗替抗的目的，间接提高人类食品安全。
（2）该方剂稳定性好、易于储存、用药方便，生物利用度较高、修复作用强、无毒副作用。
（3）该方剂生产采用传统工艺与现代工艺相结合，简易设备与现代设备相结合，可操作性强，规模可大可小，经济效益显著。
具体实施方式
以下通过具体实施例再对本发明的上述内容做进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅局限于以下的实施例。在不脱离本发明上述技术思想的情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段作出的各种替换或变更，均应包括在本发明的范围内。
实施例1
一种修复肠粘膜促消化方剂，其有效成分的重量组成为：纤连蛋白3份、山楂提取物15份、氯化钠3份、稳定剂15份。
所述稳定剂包括玉米低聚肽粉5份、海藻酸钠4份、柠檬酸钠3份、甘露醇3份。
该修复肠粘膜促消化方剂，是通过以下提取工艺步骤得到的：
（1）称取一定量的玉米低聚肽粉、海藻酸钠、柠檬酸钠、甘露醇，加水溶解后调节pH至6.0，得到第一溶液；
（2）向第一溶液中缓慢加入经洗脱的动物纤连蛋白溶液，均匀搅拌，避免产生泡沫，得到含有纤连蛋白的液体；将含有纤连蛋白的液体进行冻结，得到纤维连接蛋白冻干粉；
（3）称取一定量的纤维连接蛋白冻干粉、山楂提取物和氯化钠，搅拌均匀，即得修复肠粘膜促消化方剂。
其中纤连蛋白是通过以下提取工艺步骤得到的：
（1）从全血中分离出血浆和血细胞；
（2）向血浆中加入酸性Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液并充分混匀，然后边搅拌边加入硫酸铵，使其饱和度达到20%，并调节pH至碱性，然后放入冰箱冷藏1-5h使之充分沉淀；
（3）将（2）步沉淀溶于酸性PBS缓冲液中，装入透析袋内进行透析， 每8-10h换一次透析液，直至用10%BaCl2检测无SO42－为止，收集透析袋内液体进行浓缩操作，即得纤维连接蛋白粗品；
（4）先用Tris-HCl缓冲液作为平衡液、碱性TB缓冲液作为洗脱液，将（3）步所得纤维连接蛋白粗品通过明胶－琼脂糖凝胶快速流动4B的预柱；
（5）通过用含有EDTA（乙二胺四乙酸） 的TBS（三乙醇胺缓冲盐水溶液）顺序洗涤去除凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（6）通过用1M NaCl溶液依次洗涤除去凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（7）使用小于0.5 mol浓度的精氨酸溶液顺序洗涤去除凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（8）使用大于0.5 mol浓度的精氨酸溶液洗脱，制得动物血浆纤连蛋白。
其中的山楂提取物是通过以下提取工艺步骤得到的：
（1）取山楂，共提取3次，第一次加入7倍量的75％的乙醇提取1小时，
（2）第二次加入7倍量的75％的乙醇提取1小时，
（3）第三次加入7倍量的75％的乙醇提取1小时，静置过夜，过滤，滤液浓缩，回收乙醇，
（4）将浓缩液过大孔吸附树脂，加入适量水洗脱，再用35％乙醇洗脱，合并浓缩液、过聚酰胺，水洗，再用55％乙醇洗，浓缩得到山楂提取物。
实施例2
一种修复肠粘膜促消化方剂，其有效成分的重量组成为：纤连蛋白1份、山楂提取物5份、氯化钠1份、稳定剂5份。
所述稳定剂包括玉米低聚肽粉2份、海藻酸钠3份。
该修复肠粘膜促消化方剂，是通过以下提取工艺步骤得到的：
（1）称取一定量的玉米低聚肽粉、海藻酸钠，加水溶解后调节pH至7.5，得到第一溶液；
（2）向第一溶液中缓慢加入经洗脱的动物纤连蛋白溶液，均匀搅拌，避免产生泡沫，得到含有纤连蛋白的液体；将含有纤连蛋白的液体进行冻结，得到纤维连接蛋白冻干粉；
（3）称取一定量的纤维连接蛋白冻干粉、山楂提取物和氯化钠，搅拌均匀，即得修复肠粘膜促消化方剂。
其中纤连蛋白是通过以下提取工艺步骤得到的：
（1）从全血中分离出血浆和血细胞；
（2）向血浆中加入酸性Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液并充分混匀，然后边搅拌边加入硫酸铵，使其饱和度达到20%，并调节pH至碱性，然后放入冰箱冷藏1-5h使之充分沉淀；
（3）将（2）步沉淀溶于酸性PBS缓冲液中，装入透析袋内进行透析， 每8-10h换一次透析液，直至用10%BaCl2检测无SO42－为止，收集透析袋内液体进行浓缩操作，即得纤维连接蛋白粗品；
（4）先用Tris-HCl缓冲液作为平衡液、碱性TB缓冲液作为洗脱液，将（3）步所得纤维连接蛋白粗品通过明胶－琼脂糖凝胶快速流动4B的预柱；
（5）通过用含有EDTA（乙二胺四乙酸） 的TBS（三乙醇胺缓冲盐水溶液）顺序洗涤去除凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（6）通过用1M NaCl溶液依次洗涤除去凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（7）使用小于0.5 mol浓度的精氨酸溶液顺序洗涤去除凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（8）使用大于0.5 mol浓度的精氨酸溶液洗脱，制得动物血浆纤连蛋白。
其中的山楂提取物是通过以下提取工艺步骤得到的：
（1）取山楂，共提取3次，第一次加入7倍量的75％的乙醇提取1小时，
（2）第二次加入7倍量的75％的乙醇提取1小时，
（3）第三次加入7倍量的75％的乙醇提取1小时，静置过夜，过滤，滤液浓缩，回收乙醇，
（4）将浓缩液过大孔吸附树脂，加入适量水洗脱，再用35％乙醇洗脱，合并浓缩液、过聚酰胺，水洗，再用55％乙醇洗，浓缩得到山楂提取物。
实施例3
一种修复肠粘膜促消化方剂，其有效成分的重量组成为：纤连蛋白5份、山楂提取物20份、氯化钠5份、稳定剂30份。
所述稳定剂包括海藻酸钠15份、甘露醇15份。
该修复肠粘膜促消化方剂，是通过以下提取工艺步骤得到的：
（1）称取一定量的海藻酸钠、柠檬酸钠、甘露醇，加水溶解后调节pH至6.5，得到第一溶液；
（2）向第一溶液中缓慢加入经洗脱的动物纤连蛋白溶液，均匀搅拌，避免产生泡沫，得到含有纤连蛋白的液体；将含有纤连蛋白的液体进行冻结，得到纤维连接蛋白冻干粉；
（3）称取一定量的纤维连接蛋白冻干粉、山楂提取物和氯化钠，搅拌均匀，即得修复肠粘膜促消化方剂。
其中纤连蛋白是通过以下提取工艺步骤得到的：
（1）从全血中分离出血浆和血细胞；
（2）向血浆中加入酸性Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液并充分混匀，然后边搅拌边加入硫酸铵，使其饱和度达到20%，并调节pH至碱性，然后放入冰箱冷藏1-5h使之充分沉淀；
（3）将（2）步沉淀溶于酸性PBS缓冲液中，装入透析袋内进行透析， 每8-10h换一次透析液，直至用10%BaCl2检测无SO42－为止，收集透析袋内液体进行浓缩操作，即得纤维连接蛋白粗品；
（4）先用Tris-HCl缓冲液作为平衡液、碱性TB缓冲液作为洗脱液，将（3）步所得纤维连接蛋白粗品通过明胶－琼脂糖凝胶快速流动4B的预柱；
（5）通过用含有EDTA（乙二胺四乙酸） 的TBS（三乙醇胺缓冲盐水溶液）顺序洗涤去除凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（6）通过用1M NaCl溶液依次洗涤除去凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（7）使用小于0.5 mol浓度的精氨酸溶液顺序洗涤去除凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（8）使用大于0.5 mol浓度的精氨酸溶液洗脱，制得动物血浆纤连蛋白。
其中的山楂提取物是通过以下提取工艺步骤得到的：
（1）取山楂，共提取3次，第一次加入7倍量的75％的乙醇提取1小时，
（2）第二次加入7倍量的75％的乙醇提取1小时，
（3）第三次加入7倍量的75％的乙醇提取1小时，静置过夜，过滤，滤液浓缩，回收乙醇，
（4）将浓缩液过大孔吸附树脂，加入适量水洗脱，再用35％乙醇洗脱，合并浓缩液、过聚酰胺，水洗，再用55％乙醇洗，浓缩得到山楂提取物。
上述实施例，只是本发明的较佳实施例，并非用来限制本发明实施范围，故凡以本发明权利要求所述内容所做的等效变化，均应包括在本发明权利要求范围之内。

Claims (6)

1.一种修复肠粘膜促消化方剂，其特征在于，其有效成分的重量组成为：纤连蛋白1～5份、山楂提取物5～20份、氯化钠1～5份、稳定剂5～30份。
2.如权利要求1所述的一种修复肠粘膜促消化方剂，其特征在于，所述方剂的有效成分的重量组成为：纤连蛋白3份、山楂提取物15份、氯化钠3份、稳定剂15份。
3.如权利要求1所述的一种修复肠粘膜促消化方剂，其特征在于，所述稳定剂包括玉米低聚肽粉、海藻酸钠、柠檬酸钠、甘露醇中的一种或多种。
4.一种如权利要求1-3中任一所述的修复肠粘膜促消化方剂的制备工艺，其特征在于，包括如下步骤：
（1）称取玉米低聚肽粉、海藻酸钠、柠檬酸钠、甘露醇中的一种或多种，加水溶解后调节pH至6.0-7.5，得到第一溶液；
（2）向第一溶液中缓慢加入经洗脱的动物纤连蛋白溶液，均匀搅拌，避免产生泡沫，得到含有纤连蛋白的液体；将含有纤连蛋白的液体进行冻结，得到纤维连接蛋白冻干粉；
（3）称取纤维连接蛋白冻干粉、山楂提取物和氯化钠，搅拌均匀，即得修复肠粘膜促消化方剂。
5.如权利要求4所述修复肠粘膜促消化方剂的制备工艺，其特征在于，其中纤连蛋白的提取包括如下步骤：
（1）从全血中分离出血浆和血细胞；
（2）向血浆中加入酸性Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液并充分混匀，然后边搅拌边加入硫酸铵，使其饱和度达到20%，并调节pH至碱性，然后放入冰箱冷藏1-5h使之充分沉淀；
（3）将步骤（2）得到的沉淀溶于酸性PBS缓冲液中，装入透析袋内进行透析，每8-10h换一次透析液，直至用10%BaCl2检测无SO4 2－为止，收集透析袋内液体进行浓缩操作，即得纤维连接蛋白粗品；
（4）先用Tris-HCl缓冲液作为平衡液、碱性TB缓冲液作为洗脱液，将步骤（3）步所得纤维连接蛋白粗品通过明胶－琼脂糖凝胶快速流动4B的预柱；
（5）通过用含有EDTA 的TBS顺序洗涤去除凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（6）通过用1M NaCl溶液依次洗涤除去凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（7）使用小于0.5 mol浓度的精氨酸溶液顺序洗涤去除凝胶中非特异性吸附的蛋白质；
（8）使用大于0.5 mol浓度的精氨酸溶液洗脱，制得动物血浆纤连蛋白。
6.如权利要求4所述的一种修复肠粘膜促消化方剂的制备工艺，其特征在于，其中的山楂提取物的提取工艺包括如下步骤：
（1）取山楂，加入乙醇提取3次，合并提取液，静置过夜；
（2）过滤，滤液浓缩，回收乙醇，将浓缩液过大孔吸附树脂，加入适量水洗脱；
（3）再用乙醇洗脱，合并浓缩液、过聚酰胺，水洗，再用乙醇洗，浓缩得到山楂提取物。
CN202210188221.0A 2022-02-28 2022-02-28 一种修复肠粘膜促消化方剂及其制备工艺 Pending CN114558118A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210188221.0A CN114558118A (zh) 2022-02-28 2022-02-28 一种修复肠粘膜促消化方剂及其制备工艺

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210188221.0A CN114558118A (zh) 2022-02-28 2022-02-28 一种修复肠粘膜促消化方剂及其制备工艺

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114558118A true CN114558118A (zh) 2022-05-31

Family

ID=81715542

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210188221.0A Pending CN114558118A (zh) 2022-02-28 2022-02-28 一种修复肠粘膜促消化方剂及其制备工艺

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114558118A (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103816534A (zh) * 2014-03-25 2014-05-28 王斌 一种防治胃肠溃疡的纤连蛋白口服剂
CN104945495A (zh) * 2014-03-27 2015-09-30 安徽宝迪肉类食品有限公司 从猪血中分离纯化纤维连接蛋白的生产工艺

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103816534A (zh) * 2014-03-25 2014-05-28 王斌 一种防治胃肠溃疡的纤连蛋白口服剂
CN104945495A (zh) * 2014-03-27 2015-09-30 安徽宝迪肉类食品有限公司 从猪血中分离纯化纤维连接蛋白的生产工艺

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112544981A (zh) 一种沙棘益生菌微胶囊的制备方法及其制备的沙棘益生菌微胶囊产品
CN101020715B (zh) 鹿茸神经生长因子(deer ngf)提取及其制备方法
CN102145009B (zh) 一种十八复方氨基酸注射液及其制备方法
CN105687036A (zh) 白及护肤产品及其制备方法
CN111955632A (zh) 一种含唾液酸的饮料及其制备方法
CN105770078B (zh) 一种药物组合物及其制剂和用途
CN114558118A (zh) 一种修复肠粘膜促消化方剂及其制备工艺
CN104127473B (zh) 一种治疗骨疾病的药物组合物及其注射剂和制法
CN110664983A (zh) 一种活性肽组合配制酒及其制备方法
CN107303386A (zh) 一种用于治疗白细胞低下的口服液的制备方法
CN105481976A (zh) 一种制备人凝血因子viii的离子交换层析用洗涤缓冲液及其用途
CN104042645B (zh) 复方氨基酸注射液
CN115088849A (zh) 一种补气养血综合调理的复合低聚阿胶肽制品及制备方法
CN1733070A (zh) 治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法
CN107114775B (zh) 一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物及其制备方法
CN101507747A (zh) 黄芪总皂苷氯化钠注射液的制备方法
CN107595924B (zh) 一种骨瓜提取物注射液制备方法及相应的药物组合物
CN101703466A (zh) 冰片注射剂及其制剂方法
CN111671783A (zh) 药用沙棘果汁生产方法
CN111838666A (zh) 一种具有辅助改善记忆功能的组合物及其应用
CN111053788B (zh) 一种用于慢性出血辅助治疗的组合物及其应用
CN111679042A (zh) 一种林蛙油冻干粉抗疲劳药理作用的研究方法
CN111218369A (zh) 一种能够提高免疫力的保健药酒
CN103655490A (zh) 盐酸伊达比星药物组合物及制备方法
CN107281142A (zh) 一种注射用左卡尼汀冻干粉针剂及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination