CN114544852B - 一种改进的癃清胶囊质量检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种改进的癃清胶囊质量检测方法，检测方法包括对胶囊中黄连、黄柏，败酱草，泽泻药材的薄层鉴别检查，对胶囊中盐酸黄柏碱，23‑乙酰泽泻醇B和23‑乙酰泽泻醇C的含量的测定。通过方法学考察，该检测方法具有专属性强、耐用性好、重复性好的效果，能有效的检测癃清胶囊的质量情况，进一步提高产品质量。
Description
技术领域
本发明涉及药物检测领域，具体涉及一种改进的癃清胶囊质量检测方法。
背景技术
癃清胶囊，为贵州远程制药有限责任公司的产品，具有清热解毒，凉血通淋的作用。用于下焦湿热所致的热淋，症见尿频、尿急、尿痛、尿短、腰痛、小腹坠胀等。
癃清胶囊收载于《中国药典》2020年版中，检测内容为：性状；显微鉴别；黄连、黄柏薄层鉴别；牡丹花薄层鉴别；金银花薄层鉴别；赤芍薄层鉴别；检查；盐酸小檗碱的含量测定；盐酸黄柏碱的含量测定。但是在实际检测中，发现该检测方法存在以下缺陷：(1)黄连、黄柏薄层鉴别主斑点较模糊，斑点Rf值偏小，重现性差的问题；(2)盐酸黄柏碱的含量测定峰形不好，分率度差，出峰时间长的问题，不能有效控制癃清胶囊的质量；(3)原检测内容中未涉及败酱草和泽泻药材的薄层鉴别进；(4)原检测内容中未涉及23-乙酰泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇C的含量测定。
为了解决上述问题，有效的提高产品质量，提升癃清胶囊的质量标准，贵州远程制药有限责任公司根据公司的实际情况并结合《中国药典》2020年版所载的癃清胶囊质量标准进行了重新修订，在之前质量标准的基础上，修定了薄层色谱法鉴别黄连、黄柏的方法、增加了用薄层色谱法鉴别败酱草的方法；增加了用薄层色谱法鉴别泽泻的方法；修定了用高效液相色谱法测定盐酸黄柏碱的方法；增加了用高效液相色谱法测定23-乙酰泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇C的方法，目的在于有效检测癃清胶囊的质量，提高产品质量标准，有效的控制产品质量，保证产品临床疗效。
发明内容
本发明的目的是提供一种改进的癃清胶囊质量检测方法。
所述癃清胶囊的处方为：泽泻261g、车前子52.5g、败酱草522g、金银花261g、牡丹皮261g、白花蛇舌草522g、赤芍261g、仙鹤草261g、黄连261g、黄柏261g。
所述癃清胶囊的制法为：以上十味，泽泻粉碎成细粉，过筛，备用；金银花、败酱草、白花蛇舌草、仙鹤草加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度在50℃为1.25～1.30的清膏；车前子、牡丹皮、赤芍、黄连和黄柏五味用60％乙醇加热回流提取三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度在50℃为1.25～1.30的清膏；合并上述清膏，加入泽泻细粉，混匀，65℃低温减压干燥，粉碎成细粉，加入淀粉适量，混匀，加入85％乙醇适量，制粒，干燥，整粒，加入微粉硅胶适量，混匀，装入胶囊，制成1500粒，即得。
所述癃清胶囊的检测方法包括：胶囊中黄连、黄柏，败酱草，泽泻药材的薄层鉴别，胶囊中盐酸黄柏碱、23-乙酰泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇C的含量测定。
所述癃清胶囊中黄连、黄柏药材薄层鉴别方法为：取本品内容物1g，研细，加0.1～0.5％硫酸15ml，振摇提取处理20～45分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材、黄柏对照药材各0.25g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为6：3：2的甲苯-乙酸乙酯-0.2～0.5％磷酸溶液为展开剂，置用氨蒸气预饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
优选的，
所述癃清胶囊中黄连、黄柏药材薄层鉴别方法为：取本品内容物1g，研细，加0.2％硫酸15ml，振摇提取处理30分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材、黄柏对照药材各0.25g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为6：3：2的甲苯-乙酸乙酯-0.5％磷酸溶液为展开剂，置用氨蒸气预饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
所述癃清胶囊中败酱草药材薄层鉴别方法为：取本品内容物2g，加乙酸乙酯10～30ml，回流提取30～60分钟，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取败酱草对照药材，同法制成败酱草对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、败酱草对照药材溶液各10～20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为14：5丙酮-乙酸乙酯为展开剂，置展开缸中预饱和10～20分钟，展开，取出，晾干，喷以3-6％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
优选的，
所述癃清胶囊中败酱草药材薄层鉴别方法为：取本品内容物2g，加乙酸乙酯20ml，回流提取30分钟，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取败酱草对照药材，同法制成败酱草对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、败酱草对照药材溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为14：5丙酮-乙酸乙酯为展开剂，置展开缸中预饱和15分钟，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
所述癃清胶囊中泽泻药材薄层鉴别方法为：取本品内容物2g，加石油醚10～30ml，回流处理30～60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取泽泻对照药材2g，同法制成对照药材溶液；再取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为10：3的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以比例为1∶9的1～3％香草醛硫酸溶液-乙醇混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，分别显相同颜色的斑点。
优选的，
所述癃清胶囊中泽泻药材薄层鉴别方法为：取本品内容物2g，加石油醚20ml，回流处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取泽泻对照药材2g，同法制成对照药材溶液；再取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为10：3的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以以比例为1∶9的2％香草醛硫酸溶液-乙醇混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，分别显相同颜色的斑。
所述癃清胶囊中盐酸黄柏碱的含量测定方法为：
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为40：60的乙腈-0.01～0.03mol/L乙酸铵溶液为流动相；检测波长为240nm，理论板数按盐酸黄柏碱峰计算应不低于5000；
对照品溶液的制备取盐酸黄柏碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含20μg的溶液，即得；
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，混匀，研细，取1～3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相25ml，密塞，称定重量，以功率250W，频率40kHz超声处理20～30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
优选的，
所述癃清胶囊中盐酸黄柏碱的含量测定方法为：
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为40：60的乙腈-0.02mol/L乙酸铵溶液为流动相；检测波长为240nm，理论板数按盐酸黄柏碱峰计算应不低于5000；
对照品溶液的制备取盐酸黄柏碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含20μg的溶液，即得；
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，混匀，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相25ml，密塞，称定重量，以功率250W，频率40kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
所述癃清胶囊中23-乙酰泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇C的含量测定方法为：
色谱条件与系统适用性试验以色谱柱为CORTECS UPLC T3 1.6um，柱温为40℃，流速为0.35mL/min，以乙酸乙酯为流动相A,以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱；23-乙酰泽泻醇B检测波长为228nm，23-乙酰泽泻醇C检测波长为250nm，理论板数按23-乙酰泽泻醇B峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1ml含23-乙酰泽泻醇B35μg和23-乙酰泽泻醇C5μg的混合溶液，即得；
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物1～2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，密塞，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理20～40分钟，放冷，再称定重量，用乙腈补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
有益效果
1.本发明在癃清胶囊原有检测项目的基础上，优化了黄连、黄柏药材的薄层鉴别和盐酸黄柏碱含量测定，新增了败酱草，泽泻药材的薄层鉴别和23-乙酰泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇C含量测定，更有利于保证产品的质量，提升了检测的标准。
2.本发明黄连、黄柏，败酱草，泽泻药材的薄层鉴别方法，通过了提取溶剂、提取方式、提取时间、展开剂及比例进行了筛选实验，得到检测结果斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好；并通过了方法学考察，表明不同湿度条件下，用高效薄层板和硅胶G商品板进行试验，色谱图斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，验证试验表明重现性好、耐用性好，进一步证明了薄层鉴别方法的准确性和可靠性。
3.本发明盐酸黄柏碱及23-乙酰泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇C含量测定方法，峰形好，分离度和峰纯度均合格，且精确性高，出峰时间短，重现性好、操作简单。
4.本发明对黄柏含量检测进行方法学验证考察，线性试验表明，线性方程为y＝52.775x+988.12，R2＝0.9979，表明盐酸黄柏碱进样浓度在20.113μg/ml～1005.00μg/ml范围内呈良好的线性关系；仪器精密度试验中，取盐酸黄柏碱对照品溶液，重复进样5次，测定盐酸黄柏碱峰面积，计算RSD％(盐酸黄柏碱)值为1.48％，表明仪器精密度良好；重复性试验中，精密称取同一批癃清胶囊，制得6份供试品溶液，各精密吸取20μL，注入液相色谱仪，按色谱条件进行分析，测定盐酸黄柏碱峰面积，RSD值1.77％，表明此盐酸黄柏碱的测定方法具有良好的重复性；稳定性试验中，取癃清胶囊供试品溶液一份，室温放置，按拟定色谱条件下于0，2，4，6，8，10h分别进样，测定峰面积，RSD％为1.83％，表明盐酸黄柏碱在10h内相对稳定；十批样品的盐酸黄柏碱含量为每粒平均值为0.4533mg，均符合标准要求。
5.本发明对泽泻含量检测进行方法学验证考察，线性试验表明，线性方程为y＝121.67x+86.391，R2＝1，表明23-乙酰泽泻醇C进样浓度在20.010μg/ml～1000.500μg/ml范围内呈良好的线性关系；仪器精密度试验中，取对照品混合溶液，在上述色谱条件下，重复进样5次，测定23-乙酰泽泻醇C峰面积，计算RSD％值为1.95％，表明仪器精密度良好；重复性试验中，精密称取同一批样品，制得6份供试品溶液，各精密吸取20μL，注入液相色谱仪，测定23-乙酰泽泻醇C峰面积，RSD值1.62％，表明此23-乙酰泽泻醇C峰的测定方法具有良好的重复性；稳定性试验中，供试品溶液一份，室温放置，按拟定色谱条件下于0，2，4，6，8，10h分别进样，测定峰面积。计算23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C的总含量，RSD％为1.83％，表明23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C在10h内相对稳定；十批样品的23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C总含量平均值为0.1628mg，暂定标准为0.13mg/粒。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1
【处方】泽泻261g、车前子52.5g、败酱草522g、金银花261g、牡丹皮261g、白花蛇舌草522g、赤芍261g、仙鹤草261g、黄连261g、黄柏261g。
【制法】以上十味，泽泻粉碎成细粉，过筛，备用；金银花、败酱草、白花蛇舌草、仙鹤草加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度在50℃为1.25～1.30的清膏；车前子、牡丹皮、赤芍、黄连和黄柏五味用60％乙醇加热回流提取三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度在50℃为1.25～1.30的清膏；合并上述清膏，加入泽泻细粉，混匀，65℃低温减压干燥，粉碎成细粉，加入淀粉适量，混匀，加入85％乙醇适量，制粒，干燥，整粒，加入微粉硅胶适量，混匀，装入胶囊，制成1500粒，即得。
【性状】本品为硬胶囊，内容物为棕褐色至褐色的颗粒及粉末；气芳香，味微苦。
【鉴别】
显微鉴别：取本品，置显微镜下观察：薄壁细胞类圆形，具椭圆形纹孔，集成纹孔群；内皮层细胞垂周壁波状弯曲，较厚，木化，有稀疏细孔沟(泽泻)。
黄连、黄柏薄层鉴别：取本品内容物1g，研细，加0.2％硫酸15ml，振摇提取处理30分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材、黄柏对照药材各0.25g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为6：3：2的甲苯-乙酸乙酯-0.5％磷酸溶液为展开剂，置用氨蒸气预饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
败酱草薄层鉴别：取本品内容物2g，加乙酸乙酯20ml，回流提取30分钟，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取败酱草对照药材，同法制成败酱草对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、败酱草对照药材溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为14：5丙酮-乙酸乙酯为展开剂，置展开缸中预饱和15分钟，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
泽泻薄层鉴别：取本品内容物2g，加石油醚20ml，回流处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取泽泻对照药材2g，同法制成对照药材溶液；再取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为10：3的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以比例为1∶9的1～3％香草醛硫酸溶液-乙醇混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，分别显相同颜色的斑点。
【检查】应符合胶囊剂项下有关的各项规定(通则0103)。
泽泻照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以色谱柱为CORTECS UPLC T3 1.6um，柱温为40℃，流速为0.35mL/min，以乙酸乙酯为流动相A,以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱；23-乙酰泽泻醇B检测波长为228nm，23-乙酰泽泻醇C检测波长为250nm，理论板数按23-乙酰泽泻醇B峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1ml含23-乙酰泽泻醇B35μg和23-乙酰泽泻醇C5μg的混合溶液，即得；
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用乙腈补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每粒(0.4g)含泽泻以含23-乙酰泽泻醇B(C32H50O5)和23-乙酰泽泻醇C(C32H48O6)的总量计，不得少于0.13mg。
【功能与主治】清热解毒，凉血通淋。用于下焦湿热所致的热淋，症见尿频、尿急、尿痛、尿短、腰痛、小腹坠胀。
【用法与用量】口服。一次6粒，一日2次，重症一次8粒。
【注意】体虚胃寒者不宜服用。
【规格】每粒装0.4g
实施例2
【处方】泽泻261g、车前子52.5g、败酱草522g、金银花261g、牡丹皮261g、白花蛇舌草522g、赤芍261g、仙鹤草261g、黄连261g、黄柏261g。
【制法】以上十味，泽泻粉碎成细粉，过筛，备用；金银花、败酱草、白花蛇舌草、仙鹤草加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度在50℃为1.25～1.30的清膏；车前子、牡丹皮、赤芍、黄连和黄柏五味用60％乙醇加热回流提取三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度在50℃为1.25～1.30的清膏；合并上述清膏，加入泽泻细粉，混匀，65℃低温减压干燥，粉碎成细粉，加入淀粉适量，混匀，加入85％乙醇适量，制粒，干燥，整粒，加入微粉硅胶适量，混匀，装入胶囊，制成1500粒，即得。
【性状】本品为硬胶囊，内容物为棕褐色至褐色的颗粒及粉末；气芳香，味微苦。
【鉴别】
显微鉴别：取本品，置显微镜下观察：薄壁细胞类圆形，具椭圆形纹孔，集成纹孔群；内皮层细胞垂周壁波状弯曲，较厚，木化，有稀疏细孔沟(泽泻)。
黄连、黄柏薄层鉴别：取本品内容物1g，研细，加0.1％硫酸15ml，振摇提取处理20分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材、黄柏对照药材各0.25g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为6：3：2的甲苯-乙酸乙酯-0.2％磷酸溶液为展开剂，置用氨蒸气预饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
败酱草薄层鉴别：取本品内容物2g，加乙酸乙酯10ml，回流提取30分钟，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取败酱草对照药材，同法制成败酱草对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、败酱草对照药材溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为14：5丙酮-乙酸乙酯为展开剂，置展开缸中预饱和10分钟，展开，取出，晾干，喷以3％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
泽泻薄层鉴别：取本品内容物2g，加石油醚10ml，回流处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取泽泻对照药材2g，同法制成对照药材溶液；再取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为10：3的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以比例为1∶9的1％香草醛硫酸溶液-乙醇混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，分别显相同颜色的斑点。
【检查】应符合胶囊剂项下有关的各项规定(通则0103)。
【含量测定】
黄柏照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为40：60的乙腈-0.01mol/L乙酸铵溶液为流动相；检测波长为240nm，理论板数按盐酸黄柏碱峰计算应不低于5000；
对照品溶液的制备取盐酸黄柏碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含20μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，混匀，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)20分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每粒(0.4g)含黄柏以盐酸黄柏碱(C20H23NO4·HCl)计，不得少于0.36mg。
泽泻照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以色谱柱为CORTECS UPLC T3 1.6um，柱温为40℃，流速为0.35mL/min，以乙酸乙酯为流动相A,以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱；23-乙酰泽泻醇B检测波长为228nm，23-乙酰泽泻醇C检测波长为250nm，理论板数按23-乙酰泽泻醇B峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1ml含23-乙酰泽泻醇B35μg和23-乙酰泽泻醇C5μg的混合溶液，即得；
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)20分钟，放冷，再称定重量，用乙腈补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每粒(0.4g)含泽泻以含23-乙酰泽泻醇B(C32H50O5)和23-乙酰泽泻醇C(C32H48O6)的总量计，不得少于0.13mg。
【功能与主治】清热解毒，凉血通淋。用于下焦湿热所致的热淋，症见尿频、尿急、尿痛、尿短、腰痛、小腹坠胀。
【用法与用量】口服。一次6粒，一日2次，重症一次8粒。
【注意】体虚胃寒者不宜服用。
【规格】每粒装0.4g
实施例3
【处方】泽泻261g、车前子52.5g、败酱草522g、金银花261g、牡丹皮261g、白花蛇舌草522g、赤芍261g、仙鹤草261g、黄连261g、黄柏261g。
【制法】以上十味，泽泻粉碎成细粉，过筛，备用；金银花、败酱草、白花蛇舌草、仙鹤草加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度在50℃为1.25～1.30的清膏；车前子、牡丹皮、赤芍、黄连和黄柏五味用60％乙醇加热回流提取三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度在50℃为1.25～1.30的清膏；合并上述清膏，加入泽泻细粉，混匀，65℃低温减压干燥，粉碎成细粉，加入淀粉适量，混匀，加入85％乙醇适量，制粒，干燥，整粒，加入微粉硅胶适量，混匀，装入胶囊，制成1500粒，即得。
【性状】取本品，置显微镜下观察：薄壁细胞类圆形，具椭圆形纹孔，集成纹孔群；内皮层细胞垂周壁波状弯曲，较厚，木化，有稀疏细孔沟(泽泻)。
【鉴别】
显微鉴别：同实施例1。
黄连、黄柏薄层鉴别：取本品内容物1g，研细，加0.5％硫酸15ml，振摇提取处理45分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材、黄柏对照药材各0.25g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为6：3：2的甲苯-乙酸乙酯-0.3％磷酸溶液为展开剂，置用氨蒸气预饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
败酱草薄层鉴别：取本品内容物2g，加乙酸乙酯30ml，回流提取60分钟，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取败酱草对照药材，同法制成败酱草对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、败酱草对照药材溶液各20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为14：5丙酮-乙酸乙酯为展开剂，置展开缸中预饱和20分钟，展开，取出，晾干，喷以6％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
泽泻薄层鉴别：取本品内容物2g，加石油醚30ml，回流处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取泽泻对照药材2g，同法制成对照药材溶液；再取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为10：3的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以比例为1∶9的1～3％香草醛硫酸溶液-乙醇混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，分别显相同颜色的斑点。
【检查】应符合胶囊剂项下有关的各项规定(通则0103)。
【含量测定】
黄柏照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为40：60的乙腈-0.03mol/L乙酸铵溶液为流动相；检测波长为240nm，理论板数按盐酸黄柏碱峰计算应不低于5000；
对照品溶液的制备取盐酸黄柏碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含20μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，混匀，研细，取2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每粒(0.4g)含黄柏以盐酸黄柏碱(C20H23NO4·HCl)计，不得少于0.36mg。
泽泻照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以色谱柱为CORTECS UPLC T3 1.6um，柱温为40℃，流速为0.35mL/min，以乙酸乙酯为流动相A,以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱；23-乙酰泽泻醇B检测波长为228nm，23-乙酰泽泻醇C检测波长为250nm，理论板数按23-乙酰泽泻醇B峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1ml含23-乙酰泽泻醇B35μg和23-乙酰泽泻醇C5μg的混合溶液，即得；
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)40分钟，放冷，再称定重量，用乙腈补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每粒(0.4g)含泽泻以含23-乙酰泽泻醇B(C32H50O5)和23-乙酰泽泻醇C(C32H48O6)的总量计，不得少于0.13mg。
【功能与主治】清热解毒，凉血通淋。用于下焦湿热所致的热淋，症见尿频、尿急、尿痛、尿短、腰痛、小腹坠胀。
【用法与用量】口服。一次6粒，一日2次，重症一次8粒。
【注意】体虚胃寒者不宜服用。
【规格】每粒装0.4g
实验例：为证明本发明的科学性与合理性，进行了以下方法学实验研究：
1.性状(未修定)本品为硬胶囊，内容物为棕褐色至褐色的颗粒及粉末；气芳香，味微苦。
2.鉴别
2.1显微鉴别(未修定)
取本品，置显微镜下观察：薄壁细胞类圆形，具椭圆形纹孔，集成纹孔群；内皮层细胞垂周壁波状弯曲，较厚，木化，有稀疏细孔沟(泽泻)。
2.2黄连、黄柏薄层鉴别(已修定)
修定前标准：取本品内容物1g，研细，加甲醇15ml，超声处理30分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材、黄柏对照药材各0.25g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述四种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液(6：3：1.5：1.5：0.5)为展开剂，置用氨蒸气预饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
检测结果：在长期检测过程中，发现该方法薄层结果易出现斑点较小、Rf值偏小，重现性差，分率度差。
2.2.1供试品提取方法考察
取本品内容物各1g，研细，加甲醇15ml，分别按超声、回流、振摇提取方法各处制备供试品，按“2.2”项下的方法展开，结果显示：三种提取方法制备的供试品斑点大小及清晰度均相当，故提取方法优选操作简单的“振摇”。
2.2.2供试品提取溶剂考察
取本品内容物各1g，研细，分别加甲醇、乙醇、乙酸乙酯、稀盐酸、0.5％硫酸各15ml，分别按振摇提取制备供试品，按“2.2”项下的方法展开，结果显示：以“0.5％硫酸”作提取溶剂时，供试品的斑点均清晰，且斑点大小适中，故为优选提取溶剂。
2.2.3提取溶剂浓度考察
取本品内容物各1g，研细，分别加0.1％硫酸、0.2％硫酸、0.5％硫酸各15ml，振摇提取制备供试品，按“2.2”项下的方法展开，结果显示：以“0.2％硫酸”作提取溶剂时，3个供试品的斑点相对较清晰，故为优选提取溶剂。
2.2.4提取溶剂用量考察
取本品内容物各1g，研细，分别加10ml、15ml、20ml、30ml的0.2％硫酸，振摇提取制备供试品，按“2.2”项下的方法展开，结果显示：0.2％硫酸用量为“15ml”处理供试品，斑点相对较清晰，故为优选提取溶剂用量。
2.2.5振摇提取时间考察
取本品内容物各1g，研细，加0.2％硫酸15ml，分别按振摇提取15分钟、20分钟、30分钟、45分钟制备供试品，按“2.2”项下的方法展开，结果显示：“振摇提取30分钟”处理的供试品，斑点相对较清晰，斑点相对大小适中，故为优选提取时间。
2.2.6展开剂及比例考察
由于按原标准的展开剂展开，易出现斑点拖尾、分率度较小的问题，故对展开剂作考察，经过多次的筛选实验，选表1中的展开剂及比例作考察，结果如下：
表1展开剂考察表
由表1可知，展开剂甲苯-乙酸乙酯-0.5％磷酸溶液(6：3：2)的斑点圆整、分率度适中，故为优选。
2.2.7黄连、黄柏薄层鉴别优选结果(修定后方法)
取本品内容物1g，研细，加0.2％硫酸15ml，振摇提取处理30分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材、黄柏对照药材各0.25g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为6：3：2的甲苯-乙酸乙酯-0.5％磷酸溶液为展开剂，置用氨蒸气预饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
2.2.8方法学验证
2.2.8.1专属性
取癃清胶囊、黄连对照药材、黄连对照药材及缺黄连、黄连的阴性样品，按“2.2.7”项下所述方法制得供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液及阴性供试品溶液，点于同一硅胶G层板上，以比例为6：3：2的甲苯-乙酸乙酯-0.5％磷酸溶液展开，置用氨蒸气预饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，且斑点分离较好，阴性无干扰。
2.2.8.2重现性
取癃清胶囊10批，分别按“2.2.7”项下修定的方法实验，结果见表2。
表2重现性试验结果
2.2.8.3耐用性
2.2.8.3.1不同薄层板的比较
取癃清胶囊10批，分别按““2.2.7”项下修定的方法实验，比较青岛海洋化工厂分厂硅胶G商品板和高效硅胶G商品板的薄层，结果见表3。
表3不同薄层板耐用性结果表
由表3可知，高效硅胶板商品板斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中；硅胶G商品板斑点清晰，分离达到要求,Rf值适中，故本方法耐用性好。
2.2.8.3.2不同湿度的比较
取癃清胶囊10批，分别按“2.2.7”项下修定的方法实验，比较了低湿度(30％)和高湿度(75％)环境下高效薄层板展开效果，结果见表4。
表4低湿度(30％)和高湿度(75％)环境下高效薄层板展开效果表
由表4可知，斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，两个条件下均能得到较好的鉴别色谱。
经上述方法学验证试验，结果表明不同湿度条件下，用高效薄层板和硅胶G商品板进行试验，黄连、黄柏的薄层鉴别色谱图斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，验证试验表明重现性好、耐用性好。
2.3牡丹皮薄层鉴别(未修定)
取本品内容物1g，研细，加甲醇15ml，超声处理30分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液，75℃水浴蒸干，残渣加水10ml，微热使溶解，用乙醚振摇提取3次，每次15ml，合并乙醚液(水液备用)，挥干，残渣加丙酮0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，使成条带状，以环己烷-乙酸乙酯(7：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.4金银花薄层鉴别(未修定)
牡丹皮薄层鉴别项下乙醚提取后的备用水液，用稀盐酸调节pH值至2～3，用乙酸乙酯振摇提取3次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取金银花对照药材0.3g，加甲醇8ml，超声处理30分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。再取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1～2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，使成条状，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸(8：1：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
2.5赤芍薄层鉴别(未修定)
取本品内容物5g，研细，加水50ml，加热30分钟，放冷，离心5分钟，上清液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，回收溶剂至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5～10μl、对照品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40：5：10：0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.6败酱草薄层鉴别(新增，载入标准)
2.6.1方法来源
参照专利号CN201610936802.2，中药复方中败酱草的鉴别方法：
对照药材溶液的制备：取败酱草对照药材2g，加水150ml，煎煮半小时，过滤，滤液浓缩至30ml，同供试品溶液制备方法制备，作为败酱草对照药材溶液；供试品溶液的制备：取痔舒适洗液20ml，加水10ml稀释，加乙酸乙酯萃取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；将甲苯、乙酸乙酯按照体积比为10:1混合均匀，另槽置等体积氨水，作为展开剂；晾干后的薄层板喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视，得到薄层色谱图。
检测结果：取癃清胶囊，按以上方法进行薄层鉴别，结果显示斑点模糊、Rf值偏小，重现性差，分率度差。
2.6.2供试品提取方法考察
取本品内容物各2g，研细，分别加乙酸乙酯20ml，各按超声、回流、萃取提取方法各制备供试品溶液，按“2.6.1”项下的方法展开，结果显示：“回流提取”方法制备的供试品斑点相对清晰，故为优选提取方法。
2.6.3供试品提取溶剂考察
取本品内容物各2g，研细，分别加甲醇、乙酸乙酯、稀盐酸、冰醋酸，分别按回流提取制备供试品，按“2.6.1”项下的方法展开，结果显示：以“乙酸乙酯”作提取溶剂时，供试品的斑点较清晰，且斑点大小适中，故为优选提取溶剂。
2.6.4提取溶剂用量考察
取本品内容物各2g，研细，分别加10ml、15ml、20ml、30ml的乙酸乙酯，回流提取制备供试品，按“2.6.1”项下的方法展开，结果显示：乙酸乙酯用量为“20ml”处理供试品，斑点相对较清晰，故为优选提取溶剂用量。
2.6.5回流提取时间考察
取本品内容物各2g，研细，加乙酸乙酯20ml，分别按回流提取20分钟、30分钟、45分钟制备供试品，按“2.6.1”项下的方法展开，结果显示：“回流提取30分钟”处理的供试品，斑点相对较清晰，斑点相对大小适中，故为优选提取时间。
2.6.6展开剂及比例考察
按“2.6.1”项下的方法展开，出现斑点拖尾、重现性差的问题，故对展开剂作考察，经过多次的筛选实验，选表5中的展开剂及比例作考察，结果如下：
表5展开剂考察表
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由表1可知，展开剂丙酮-乙酸乙酯(14：5)的斑点圆整、清晰，Rf值适中，故为优选。
2.6.7败酱草薄层鉴别筛选结果
取本品内容物2g，加乙酸乙酯20ml，回流提取30分钟，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取败酱草对照药材，同法制成败酱草对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、败酱草对照药材溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为14：5丙酮-乙酸乙酯为展开剂，置展开缸中预饱和15分钟，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.6.8方法学验证
2.6.8.1专属性
取癃清胶囊、败酱草对照药材及缺败酱草的阴性样品，按“2.6.7”项下所述方法制得供试品溶液、对照药材溶液及阴性供试品溶液，点于同一硅胶G层板上，以比例为14：5丙酮-乙酸乙酯为展开剂，置展开缸中预饱和15分钟，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，且斑点分离较好，阴性无干扰。
2.6.8.2重现性
取癃清胶囊10批，分别按“2.6.7”项下的方法实验，结果见表6。
表6重现性试验结果
2.6.8.3耐用性
2.6.8.3.1不同薄层板的比较
取癃清胶囊10批，分别按“2.6.7”项下修定的方法实验，比较青岛海洋化工厂分厂硅胶G商品板和高效硅胶G商品板的薄层，结果见表7。
表7不同薄层板耐用性结果表
由表7可知，高效硅胶板商品板斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中；硅胶G商品板斑点清晰，分离达到要求,Rf值适中，故本方法耐用性好。
2.6.8.3.2不同湿度的比较
取癃清胶囊10批，分别按“2.6.7”项下修定的方法实验，
比较了低湿度(30％)和高湿度(75％)环境下高效薄层板展开效果，结果见表8。
表8低湿度(30％)和高湿度(75％)环境下高效薄层板展开效果表
由表8可知，斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，两个条件下均能得到较好的鉴别色谱。
经上述方法学验证试验，结果表明不同湿度条件下，用高效薄层板和硅胶G商品板进行试验，败酱草的薄层鉴别色谱图斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，验证试验表明重现性好、耐用性好。
2.7泽泻薄层鉴别(新增，载入标准)
2.7.1方法来源
中国药典2020版：取本品粉末2g，加70％乙醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，至无醇味，通过HP20型大孔吸附树脂柱(内径为1cm，柱高为5cm，30％乙醇湿法装柱)，用30％乙醇15ml洗脱，弃去洗脱液，再用70％乙醇15ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取泽泻对照药材2g，同法制成对照药材溶液。再取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(15：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％香草醛硫酸溶液-乙醇(1∶9)混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，分别显相同颜色的斑点或荧光斑点。
检测结果：取癃清胶囊，按以上方法进行薄层鉴别，结果显示斑点模糊、拖尾，Rf值偏小，分率度差且样品处理复杂。
2.7.2供试品提取溶剂方法考察
取本品内容物各2g，分别加70％乙醇、甲醇、氯仿、乙醚、石油醚20ml，按“2.7.1”项下的方法实验，结果显示：溶剂为“石油醚”制备的供试品斑点相对清晰，故为优选提溶剂。
2.7.3供试品提取方法考察
取本品内容物各2g，分别加石油醚20ml，按超声、回流、振摇、大孔吸附树脂提取供试品，结果显示：“回流提取”方法制备的供试品斑点相对清晰，故为优选提取方。
2.7.4提取溶剂用量考察
取本品内容物各2g，研细，分别加10ml、15ml、20ml、30ml的石油醚，回流提取制备供试品，按“2.7.1”项下的方法展开，结果显示：石油醚用量为“20ml”处理供试品，斑点相对较清晰，故为优选提取溶剂用量。
2.7.5回流提取时间考察
取本品内容物各2g，研细，加石油醚20ml，分别按回流提取20分钟、30分钟、45分钟制备供试品，按“2.7.1”项下的方法展开，结果显示：“回流提取30分钟”处理的供试品，斑点相对较清晰，斑点相对大小适中，故为优选提取时间。
2.7.6展开剂及比例考察
按“2.7.1”项下的方法展开，出现斑点拖尾、Rf值较大、重现性差的问题，故对展开剂作考察，经过多次的筛选实验，选表9中的展开剂及比例作考察，结果如下：
表9展开剂考察表
由表9可知，展开剂三氯甲烷-甲醇(10：3)的斑点圆整、清晰，分率度适中，故为优选。
2.7.7泽泻薄层鉴别筛选结果
取本品内容物2g，加石油醚20ml，回流处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取泽泻对照药材2g，同法制成对照药材溶液；再取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为10：3的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以比例为1∶9的1～3％香草醛硫酸溶液-乙醇混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，分别显相同颜色的斑点。
2.7.8方法学验证
2.7.8.1专属性
取癃清胶囊、泽泻对照药材、23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品及缺泽泻的阴性样品，按“2.7.7”项下所述方法制得供试品溶液、对照品溶液、对照药材溶液及阴性供试品溶液，点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为10：3的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以比例为1∶9的1～3％香草醛硫酸溶液-乙醇混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，且斑点分离较好，阴性无干扰。
2.7.8.2重现性
取癃清胶囊10批，分别按“2.7.7”项下的方法实验，结果见表10。
表10重现性试验结果
2.7.8.3耐用性
2.7.8.3.1不同薄层板的比较
取癃清胶囊10批，分别按“2.7.7”项下修定的方法实验，比较青岛海洋化工厂分厂硅胶GF254商品板和高效硅胶GF254商品板的薄层，结果见表11。
表11不同薄层板耐用性结果表
由表11可知，高效硅胶板商品板斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中；硅胶GF254商品板斑点清晰，分离达到要求,Rf值适中，故本方法耐用性好。
2.7.8.3.2不同湿度的比较
取癃清胶囊10批，分别按““2.7.7”项下修定的方法实验，比较了低湿度(30％)和高湿度(75％)环境下高效薄层板展开效果，结果见表12。
表12低湿度(30％)和高湿度(75％)环境下高效薄层板展开效果表
由表12可知，斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，两个条件下均能得到较好的鉴别色谱。
经上述方法学验证试验，结果表明不同湿度条件下，用高效薄层板和硅胶GF254商品板进行试验，泽泻的薄层鉴别色谱图斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，验证试验表明重现性好、耐用性好。
3.检查(未修定)
应符合胶囊剂项下有关的各项规定(通则0103)。
4.含量测定
4.1黄连、黄柏照高效液相色谱法(通则0512)测定(未修定)
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(50：50)(每100ml中加十二烷基硫酸钠0.4g，再以磷酸调节pH值至4.0)为流动相；检测波长为345nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，混匀，研细，取0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-盐酸(100：0.2)的混合溶液25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每粒(0.4g)含黄连、黄柏以盐酸小檗碱(C20H17NO4·HCl)计，不得少于5.7mg。
4.2黄柏照高效液相色谱法(通则0512)测定(已修定，载入标准)。
4.2.1方法来源
黄柏含量测定的原标准为：
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1％磷酸溶液(每100ml中加十二烷基磺酸钠0.2g)(36：64)为流动相；检测波长为284nm。理论板数按盐酸黄柏碱峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备取盐酸黄柏碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含20μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，混匀，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
结果：以上检测方法，在长期实验检测过程中，发现该检测结果有时会出现分离度，峰形，峰纯度、重现性均不好的问题。
4.2.2针对“4.2.1”的问题，对癃清胶囊中盐酸黄柏碱含量测定中流动相及其比例进行考察，具体如下：
取癃清胶囊装量差异项下的本品内容物，混匀，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入相应流动相25ml，按表13中的流动相进行考察，按“4.2.1”项下的方法测定，结果如下：
表13流动相考察表
由表13可知，以“乙腈-0.02％乙酸铵溶液液(40：60)”为流动相检测结果显示，分离度，峰形，峰纯度均良好，重现性好，适用于癃清胶囊盐酸黄柏碱的检验。
4.2.3黄柏含量方法检测波长的确定
根据优化流动相选择检测波长：
取癃清胶囊装量差异项下的本品内容物，混匀，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相25ml，密塞，称定重量，以功率250W，频率40kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，即得；记录190～400nm范围内的吸收光谱。
结果:在240nm左右，癃清胶囊的盐酸黄柏碱(C20H23NO4·HCl)有最大吸收，峰响应高，基线平稳，因此选择240nm为癃清胶囊盐酸黄柏碱(C20H23NO4·HCl)含量检测波长。
4.2.4黄柏含量方法的确定(修定后)
根据上述流动相及波长的考察结果，得到了盐酸黄柏碱检测较好检测结果，故优化后的检测方法为：
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为40：60的乙腈-0.02mol/L乙酸铵溶液为流动相；检测波长为240nm，理论板数按盐酸黄柏碱峰计算应不低于5000；
对照品溶液的制备取盐酸黄柏碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含20μg的溶液，即得；
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，混匀，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相25ml，密塞，称定重量，以功率250W，频率40kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
4.2.5黄柏含量检测方法学验证考察
4.2.5.1线性试验
精密取浓度20.113μg/ml、40.226μg/ml、201.130μg/ml、402.26μg/ml、1005.00μg/ml的盐酸黄柏碱对照品溶液，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到线性方程为y＝52.775x+988.12，R2＝0.9979，表明盐酸黄柏碱进样浓度在20.113μg/ml～1005.00μg/ml范围内呈良好的线性关系，结果见表14。
表14盐酸黄柏碱线性试验结果
4.2.5.2仪器精密度试验
取盐酸黄柏碱对照品溶液，在“4.2.4”项下的色谱条件，重复进样5次，测定盐酸黄柏碱峰面积，计算RSD％(盐酸黄柏碱)值为1.48％，表明仪器精密度良好，测定结果见表15。
表15仪器精密度试验结果
4.2.5.3重复性试验
精密称取同一批癃清胶囊，按供试品溶液的制备方法，制得6份供试品溶液，各精密吸取20μL，注入液相色谱仪，按色谱条件进行分析，测定盐酸黄柏碱峰面积，RSD值1.77％，表明此盐酸黄柏碱的测定方法具有良好的重复性；结果见表16。
表16重复性试验结果
4.2.5.4稳定性试验
取癃清胶囊供试品溶液一份，室温放置，按拟定色谱条件下于0，2，4，6，8，10h分别进样，测定峰面积，RSD％为1.83％，表明盐酸黄柏碱在10h内相对稳定。稳定性试验结果见表17。
表17稳定性试验结果
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4.2.5.5样品含量测定
按修定后“4.2.4”项下的方法对十批癃清胶囊进行盐酸黄柏碱含量测定，结果见表18。
表18十批样品含量测定结果表
由表18可知，本品每粒(0.4g)含黄柏以盐酸黄柏碱(C20H23NO4·HCl)计，为0.4533mg，符合药典要求。
4.3泽泻照高效液相色谱法(通则0512)测定(增加，载入标准)。
4.3.1方法来源：中国药典2020年版
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱，23-乙酰泽泻醇B检测波长为208nm，23-乙酰泽泻醇C检测波长为246nm。理论板数按23-乙酰泽泻醇B峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品适量，精密称定，加乙腈制成每1ml含23-乙酰泽泻醇B35μg和23-乙酰泽泻醇C5μg的混合溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品粉末(过五号筛)约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙腈25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用乙腈补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
结果：取癃清胶囊按上述方法检测23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C的含量，结果显示出峰时间较长，峰形不好，峰纯度不好，分离度不好、重现性差等问题。
4.3.2针对“4.3.1”的问题，对23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C含量方法中的流动相及梯度比例、流速、柱温、色谱柱等进行考察。
优化方法一：色谱柱：ACQUITY UPLC HSS T3 1.8um(100×2.1mm)；以乙腈为流动相A，以水为流动相B；柱温：30℃；进样体积：20μl；流速：0.30ml/min；按表19的规定进行梯度洗脱。
表19梯度洗脱表(优化方法一)
由表19可知，该方法峰形，峰纯度均良好，但考察不同批号23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C含量时，该方法稳定性差，个别出现相邻峰分离度不好的情况。
优化方法二：色谱柱：CORTECS UPLC T3 1.8um(100×2.1mm)；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，柱温：35℃；进样体积：20μl；流速：0.35ml/min；按表20的规定进行梯度洗脱。
表20梯度洗脱表(优化方法二)
由表20可知，改变柱温、流速及流动相梯度，23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C峰的峰形均成M峰，分离度差。
优化方法三：色谱柱：CORTECS UPLC T3 1.8um(100×2.1mm)；以乙酸乙酯为流动相A，以水为流动相B，柱温：35℃；进样体积：20μl；流速：0.35ml/min；按表21的规定进行梯度洗脱。
表21梯度洗脱表(优化方法三)
由表21可知，改变流动相，发现23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C均未能与相邻峰达到基线分离。
优化方法四：色谱柱：CORTECS UPLC T3 1.6um(100×2.1mm)；乙酸乙酯流动相A，水为流动相B；柱温：40℃；流速：0.35mL/min；进样体积：20μL；优化后梯度见表22。
表22梯度洗脱表(优化方法四)
由表22可知，“优化方法四”检测23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C含量，分离度、峰形，峰纯度均良好，且适用于不同批次癃清胶囊的检验，故“优化方法四”为优选。
4.3.3泽泻含量方法检测波长的确定
根据优化流动相选择检测波长
取癃清胶囊内容物1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙腈25ml，密塞，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用乙腈补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；记录190～400nm范围内的吸收光谱。
结果:在228nm处，23-乙酰泽泻醇B(C32H50O5)有最大吸收；在250nm处，23-乙酰泽泻醇C(C32H48O6)有最大吸收；且峰响应高，基线平稳。
4.3.4供试品提取溶剂的筛选
取癃清胶囊内容物1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入表23的溶剂各25ml，密塞，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用相应溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；按“4.3.2”项下的优选方法，筛选供试品提取溶剂。
表23提取溶剂的选择
由表23可知，以乙酸乙酯作提取溶剂，23-乙酰泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇C的总含量最高，故“乙酸乙酯”为优选提取溶剂。
4.3.5泽泻含量方法的确定
经过以上筛选实验，得出泽泻含量检测方法为：
色谱条件与系统适用性试验以色谱柱为CORTECS UPLC T3 1.6um，柱温为40℃，流速为0.35mL/min，以乙酸乙酯为流动相A,以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱；23-乙酰泽泻醇B检测波长为228nm，23-乙酰泽泻醇C检测波长为250nm，理论板数按23-乙酰泽泻醇B峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1ml含23-乙酰泽泻醇B35μg和23-乙酰泽泻醇C5μg的混合溶液，即得；
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入乙酸乙酯25ml，密塞，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用乙腈补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
4.3.6泽泻含量检测方法学验证考察
4.3.6.1线性试验
精密取浓度20.010μg/ml、40.020μg/ml、200.100μg/ml、400.200μg/ml、1000.500μg/ml的23-乙酰泽泻醇C对照品溶液，以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到线性方程为y＝121.67x+86.391，R2＝1，表明23-乙酰泽泻醇C进样浓度在20.010μg/ml～1000.500μg/ml范围内呈良好的线性关系，结果见表24。
表24 23-乙酰泽泻醇C线性试验结果
4.3.6.2仪器精密度试验
取对照品混合溶液，在上述色谱条件下，重复进样5次，测定23-乙酰泽泻醇C峰面积，计算RSD％值为1.95％，表明仪器精密度良好，测定结果见表25。
表25仪器精密度试验结果
4.3.6.3重复性试验
精密称取同一批样品，按供试品溶液的制备方法，制得6份供试品溶液，各精密吸取20μL，注入液相色谱仪，按色谱条件进行分析，测定23-乙酰泽泻醇C峰面积，RSD值1.62％，表明此23-乙酰泽泻醇C峰的测定方法具有良好的重复性；结果见表26。
表26重复性试验结果
4.3.6.4稳定性试验
按“4.3.5”项下方法制备供试品溶液一份，室温放置，按拟定色谱条件下于0，2，4，6，8，10h分别进样，测定峰面积。计算23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C的总含量，RSD％为1.83％，表明23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C在10h内相对稳定。稳定性试验结果见表27。
表27稳定性试验结果
4.3.6.5样品含量测定
按“4.3.5”的方法对十批癃清胶囊进行23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C总含量测定，结果见表28。
表28十批样品含量测定表
结论：从表28可知，十批样品平均含量为0.1628mg(每粒装0.4g)，故暂定标准为：本品每粒(0.4g)含泽泻以23-乙酰泽泻醇B(C32H50O5)和23-乙酰泽泻醇C(C32H48O6)的总量计，不得少于0.13mg。
5.功能与主治
清热解毒，凉血通淋。用于下焦湿热所致的热淋，症见尿频、尿急、尿痛、尿短、腰痛、小腹坠胀。
6.用法与用量
口服，一次6粒，一日2次，重症一次8粒，一日3次。
7.注意体虚胃寒者不宜服用。
8.规格每粒装0.4g
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作出一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (5)
1.一种改进的癃清胶囊质量检测方法，所述癃清胶囊，处方为：泽泻261g、车前子52.5g、败酱草522g、金银花261g、牡丹皮261g、白花蛇舌草522g、赤芍261g、仙鹤草261g、黄连261g、黄柏261g；制法为：以上十味，泽泻粉碎成细粉，过筛，备用；金银花、败酱草、白花蛇舌草、仙鹤草加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度在50℃为1.25～1.30的清膏；车前子、牡丹皮、赤芍、黄连和黄柏五味用60％乙醇加热回流提取三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，并浓缩至相对密度在50℃为1.25～1.30的清膏；合并上述清膏，加入泽泻细粉，混匀，65℃低温减压干燥，粉碎成细粉，加入淀粉适量，混匀，加入85％乙醇适量，制粒，干燥，整粒，加入微粉硅胶适量，混匀，装入胶囊，制成1500粒，即得；
其特征在于，所述癃清胶囊的检测方法包括：胶囊中黄连、黄柏，败酱草，泽泻药材的薄层鉴别，胶囊中盐酸黄柏碱、23-乙酰泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇C的含量测定；
所述癃清胶囊中黄连、黄柏药材薄层鉴别方法为：取本品内容物1g，研细，加0.1～0.5％硫酸15ml，振摇提取处理20～45分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材、黄柏对照药材各0.25g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为6：3：2的甲苯-乙酸乙酯-0.2～0.5％磷酸溶液为展开剂，置用氨蒸气预饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
所述癃清胶囊中败酱草药材薄层鉴别方法为：取本品内容物2g，加乙酸乙酯10～30ml，回流提取30～60分钟，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取败酱草对照药材，同法制成败酱草对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、败酱草对照药材溶液各10～20μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为14：5丙酮-乙酸乙酯为展开剂，置展开缸中预饱和10～20分钟，展开，取出，晾干，喷以3-6％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
所述癃清胶囊中泽泻药材薄层鉴别方法为：取本品内容物2g，加石油醚10～30ml，回流处理30～60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取泽泻对照药材2g，同法制成对照药材溶液；再取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为10：3的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以比例为1∶9的1～3％香草醛硫酸溶液-乙醇混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，分别显相同颜色的斑点；
所述癃清胶囊中盐酸黄柏碱的含量测定方法为：
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为40：60的乙腈-0.01～0.03mol/L乙酸铵溶液为流动相；检测波长为240nm，理论板数按盐酸黄柏碱峰计算应不低于5000；
对照品溶液的制备取盐酸黄柏碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含20μg的溶液，即得；
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，混匀，研细，取1～2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相25ml，密塞，称定重量，以功率250W，频率40kHz超声处理20～30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
所述癃清胶囊中23-乙酰泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇C的含量测定方法为：
色谱条件与系统适用性试验以色谱柱为CORTECS UPLC T3 1.6um，柱温为40℃，流速为0.35mL/min，以乙酸乙酯为流动相A,以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱；23-乙酰泽泻醇B检测波长为228nm，23-乙酰泽泻醇C检测波长为250nm，理论板数按23-乙酰泽泻醇B峰计算应不低于3000；
对照品溶液的制备取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1ml含23-乙酰泽泻醇B35μg和23-乙酰泽泻醇C5μg的混合溶液，即得；
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物1～2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，密塞，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理20～40分钟，放冷，再称定重量，用乙腈补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述癃清胶囊中黄连、黄柏药材薄层鉴别方法为：取本品内容物1g，研细，加0.2％硫酸15ml，振摇提取处理30分钟，滤过，滤液回收溶剂至干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄连对照药材、黄柏对照药材各0.25g，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为6：3：2的甲苯-乙酸乙酯-0.5％磷酸溶液为展开剂，置用氨蒸气预饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述癃清胶囊中败酱草药材薄层鉴别方法为：取本品内容物2g，加乙酸乙酯20ml，回流提取30分钟，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取败酱草对照药材，同法制成败酱草对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、败酱草对照药材溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以比例为14：5丙酮-乙酸乙酯为展开剂，置展开缸中预饱和15分钟，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述癃清胶囊中泽泻药材薄层鉴别方法为：取本品内容物2g，加石油醚20ml，回流处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取泽泻对照药材2g，同法制成对照药材溶液；再取23-乙酰泽泻醇B对照品和23-乙酰泽泻醇C对照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为10：3的三氯甲烷-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以比例为1∶9的2％香草醛硫酸溶液-乙醇混合溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，分别显相同颜色的斑。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述癃清胶囊中盐酸黄柏碱的含量测定方法为：
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为40：60的乙腈-0.02mol/L乙酸铵溶液为流动相；检测波长为240nm，理论板数按盐酸黄柏碱峰计算应不低于5000；
对照品溶液的制备取盐酸黄柏碱对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含20μg的溶液，即得；
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，混匀，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相25ml，密塞，称定重量，以功率250W，频率40kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液，即得；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
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|---|---|---|---|---|
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| CN105548405A (zh) * | 2016-01-19 | 2016-05-04 | 李兴惠 | 检测中药组合物的方法和制剂 |
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