CN114540199B - 一种球状香菇菌株七河珍香1号及Indel指纹图谱鉴定方法 - Google Patents

一种球状香菇菌株七河珍香1号及Indel指纹图谱鉴定方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种球状香菇菌株七河珍香1号及Indel指纹图谱鉴定方法。本发明提供了一种香菇新品种——七河珍香1号，该菌株与目前通过国家品种审定的其他品种以及常用栽培品种具有明显差异；其子实体外形为球形，子实体无菌柄，其栽培方法两潮产量300‑500g，由于其外形较为美观，具有较好的销售前景。本发明还提供了上述菌株的Indel指纹图谱，可实现所述菌株的特异性检测。

Description

一种球状香菇菌株七河珍香1号及Indel指纹图谱鉴定方法
技术领域
本发明属于香菇食用菌技术领域，具体涉及一种菌盖为球状的香菇(Lentinulaedodes)菌株七河珍香1号菌种、所述菌种的Indel标记指纹图谱、菌种的培养物及所述菌种的培养方法。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
我国食用菌产值过千亿，名列种植业第五位，其中香菇(Lentinula edodes(Berk.)Pegler)产量最多。据中国食用菌协会统计，2018年中国食用菌总产量为3842.04万吨，其中香菇总产量为1043.12万吨，占国内食用菌总产量的27.15％，占世界香菇总产量的90％以上。随着人口老龄化进程的加剧和劳动力成本的提高，香菇栽培由传统模式向工厂化模式的转型升级。香菇目前尚不能实现工厂化出菇的主要原因在于其多潮出菇的特性，不能像金针菇那样单潮集中出菇采收，一个生产周期通常出4-5潮菇，且出菇不集中。并且，传统栽培中香菇的出菇温型偏中低温(10-20℃)，其次，传统香菇品种的出菇需要温差、湿差、光照及机械震动等多方面的刺激才能实现，这些措施往往是个性化的，很多情况下是靠经验，很难有统一的标准化、精准化的管理措施。因此，要想实现香菇工厂化生产，必须采用具有特殊生物学特性的香菇品种。
发明内容
通过系统选育方式获得具有更加商业化品质的香菇新品种是本领域的常用方法，获得生长周期短、口感好、外形美观的品种具有重要的市场意义。本发明目的在于提供一种外形美观独特的香菇菌株。
基于上述技术目的，本发明筛选得到了一种菌盖为球状的香菇菌株，命名为七河珍香1号，该菌株具有球形的子实体，与现有香菇在外形方面具有明显的差异。该菌种不仅外形美观，而且因其无菌柄产生，因此纤维含量少，且菌盖肉质紧实，富有弹性，口感极佳，具有良好的市场销售前景。
基于上述技术效果，本发明提供以下技术方案：
正如背景技术所介绍的，选育具有更加商业化品质的香菇新品种对于获得市场收益具有重要意义，本发明通过筛选提供了一株与现有香菇具有明显差异的球形香菇品种——七河珍香1号。该菌株具有适应温度范围广的技术优势。本发明还进一步提供了所述香菇品种的Indel标记指纹图谱构建方法，以满足对该菌株的特异性鉴定。
本发明第一方面，提供一种球状香菇(Lentinula edodes)菌株七河珍香1号，该香菇菌株已经于2021年04月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，其生物保藏号为：CGMCC NO.21952。
该香菇菌株的菌落生理学特征为：菌落圆整、菌丝浓白呈绒毛状，需25±1℃范围内暗光培养，菌落受温差刺激后易形成同心带，菌落老化后易菌丝扭结。
该香菇菌株的菌丝显微结构为：菌丝壁光滑，菌丝横隔膜处有锁状联合，菌丝粗细不均，常见分隔和分支。
该菌株的子实体特征为：子实体呈球形，无菌柄，鳞片无或极小，分布在周边的特点。
本发明第一方面所述七河珍香1号香菇菌与目前通过国家审定的香菇品种、市面常见栽培品种在外形方面就具有显著的特异性。该品种香菇子实体外形接近球形，子实体无菌柄，外形美观、口感良好，具有良好的市场销售前景。另外，该香菇品种是一种广温型栽培品种，对培养环境的温度要求低，并且球状菌盖不打开，成熟后的菇体不会向菇房内四处播散孢子，有助于优化养殖环境，更加适宜工业放大生产。
本发明第二方面，提供第一方面所述球状香菇(Lentinula edodes)菌株七河珍香1号的Indel指纹图谱，该指纹图谱由10对InDel标记组成，基于香菇基因组插入/缺失片段开发的InDel标记引物序列如下：
QHID_fp002正向引物：CTTTGGTTTTCTGCGTGCTT；
反向引物：TCCTGGAAGAAGATTCATTGG；
QHID_fp009正向引物：ATGGTGGTGTTGATCACGTC；
反向引物：GTTCCACCAGAGCCGAAATA；
QHID_fp024正向引物：CCGCAATCAACAGTAGCTCA；
反向引物：GTCAACCAGTGACCCGATTT；
QHID_fp045正向引物：AACAAGGGCTGTGAATCCTG；
反向引物：CTGCAAAACCTGGAAATTGG；
QHID_fp110正向引物：TCACGATACATTCGACCTCC；
反向引物：GGACAATTGACTAATATGGC；
QHID_fp114正向引物：AAACTTGGCCGAGAAATCGG；
反向引物：TGACGGCTGATTCATCTGTC；
QHID_fp120正向引物：TTTCTTGTAGGGACGTAGCC；
反向引物：TTCGAACAGCAATGGCAAGG；
QHID_fp122正向引物：GGAATGAGCAAGGAGACATC；
反向引物：TCCCTTTTCTTCACTGTCGG；
QHID_fp127正向引物：TTTCAAAGTCCCTTGGTGCG；
反向引物：CACGATCCCTACGCTCTTTC；
QHID_fp137正向引物：CCAGGATCTGGTTAAACTGC；
反向引物：TGAACACAAGGCAATTCCGC。
本发明采用上述引物对七河珍香1号及其他国审品种、市售品种进行了Indel标记引物带型扩增，采用上述引物对七河珍香1号香菇基因组进行扩增，能够产生(12)(12)(12)(12)(12)11(12)12的等位片段组合，扩增的等位片段具体如下：
QHID_fp002的等位片段为1，2；
QHID_fp009的等位片段为1，2；
QHID_fp024的等位片段为1，2；
QHID_fp045的等位片段为1，2；
QHID_fp110的等位片段为1，2；
QHID_fp114的等位片段为1；
QHID_fp120的等位片段为1；
QHID_fp122的等位片段为1，2；
QHID_fp127的等位片段为1；
QHID_fp137的等位片段为2。
基于本发明第二方面提供的Indel标记引物组合，能够将七河珍香1号与其他118个香菇品种进行区分。通过上述十个Indel等位位点的编号组合即可有效识别七河珍香1号，是一种特异性非常好的鉴定方法。
本发明第三方面，提供第二方面所述球状香菇(Lentinula edodes)菌株七河珍香1号的Indel指纹图谱的应用。
第三方面所述应用的一种方式如下：对待测香菇菌丝进行培养并进行基因组DNA提取，通过Indel标记引物对待测香菇菌种进行扩增，将扩增产物通过电泳分析，符合标记组合为：(12)(12)(12)(12)(12)11(12)12的菌种，即为七河珍香1号；
或将扩增后的带型与七河珍香1号进行对照，带型一致者即为七河珍香1号。
本发明第四方面，提供第一方面所述球状香菇(Lentinula edodes)菌株七河珍香1号的栽培方法，所述栽培方法如下：
采用阔叶类木屑、麦麸及石膏混合后装袋制成菌棒；将七河珍香1号菌种接种于菌棒的接种穴中，并在适宜条件下进行培养使菌棒达到生理成熟；菌棒成熟后通过注水、调温、调节CO2进行催蕾，随后进行疏蕾，待子实体生长4-5天后进行一潮采收；菌棒休养补水后重复上述催蕾、疏蕾、出菇步骤，再进行二潮采收，重复上述操作进行出菇，可采收三至四潮。
一种具体的实施方式中，所述栽培方法步骤如下：
(1)制棒：选择阔叶类木屑作为七河珍香1号菌株的主要栽培基质，木屑颗粒度3-10mm之间，夏季木屑进行预湿堆置3-7天，冬季木屑进行预湿堆置5-10天，促使木屑充分发酵同时使木屑软化，保证木屑无干料，达到灭菌彻底的良好效果；栽培基质配比(干重)为木屑74-84％、麦麸15-25％、石膏1％，调至总含水量57-58％，pH6-7，充分搅拌30-40min；培养料采用直径15cm、长度55cm、厚度0.006-0.008mm的聚乙烯栽培袋装成长度42-45cm的菌棒，装好后的菌棒棒重量在2200-2400g之间，菌棒在119℃下保持4-5h灭菌；
(2)接种：灭菌后的菌棒温度降至20-25℃时，接种七河珍香1号菌种，每棒接种4个接种穴，每个接种穴接菌种20-25g，为确保菌丝长速一致，要保证接种穴打孔深度及接种量一致；
(3)培养：七河珍香1号菌丝最适生长温度为24-26.5℃，将培养环境温度调控在23-26℃，棒温维持在25±1℃，空气相对湿度50-70％，CO2浓度2000-6000ppm，避光培养；菌丝蔓延至菌棒表面1/2-2/3时，沿菌落边缘进行一次刺孔操作，每棒刺孔数量16-22个，刺孔深度2-3cm，直径2-4mm；培养至菌棒表面形成瘤状凸起并变软后进行二次刺孔操作，每棒刺孔数量50-80个，刺孔深度5-7cm，孔径4-6mm；二次刺孔后增加持续24h强度为500-1000lux散射光照，待菌棒周身转色成褐色，培养菌龄在95-105天之间时，菌棒达到生理成熟；
(4)出菇：菌棒成熟后，转移至出菇房，对菌棒进行注水，补水至初始菌棒重量的88-95％；注水完成后，进行催蕾，出菇房温度10-20℃之间，昼夜8-10℃的温差，CO2浓度800ppm以下，空间湿度85-90％，催蕾3-5天后菇蕾形成；随后进行疏蕾操作，每棒保留菇蕾10-16个，疏蕾后出菇房温度调控13-15℃维持2天；随后出菇房温度控制在15-25℃之间，18-23℃之间最佳，CO2浓度600-800ppm，空间湿度85-90％，子实体生长4-5天，进行采收，一潮采收期5-7天，可采收200-300g鲜菇；随后菌棒进入休养期，出菇房内温度提升至23-26℃，湿度70-80％，CO2浓度2000ppm以内，菌棒休养15天；通过注水的方式将菌棒重量补充至初始棒重的75％-85％，进入二潮出菇，催蕾、出菇条件同一潮，二潮可采收100-200g鲜菇。
本发明第五方面，提供一种所述香菇菌的培养物，所述培养物中包括第一方面所述球状香菇(Lentinula edodes)菌株七河珍香1号的菌种。
上述第五方面所述培养物的一种实施方式中，所述培养物为接种七河珍香1号的菌棒、菌袋、栽培袋或菌包。
以上一个或多个技术方案的有益效果是：
1、本发明提供的七河珍香1号子实体形似球体，表面光滑、褶皱较少，是一种较为美观的品种，投放市场后容易获得消费者青睐而取得更高的市场价值。
2、经验证，七河珍香1号能够适应较大范围的培养温度，对培养环境的要求低，属于广温型品种，具有更好的工业生产性能。
3、为了实现对上述香菇品种的特异性鉴定，本发明还开发了七河珍香1号的Indel指纹图谱，该Indel指纹图谱能够将七河珍香1号与现有的118种香菇品种进行区分，是一种特异性良好的鉴定方法。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。
图1为实施例1中提供的七河珍香1号菌株的指纹图谱。
图2为实施例1中所述19种国审品种、主栽品种的指纹图谱。
图3为本发明所述七河珍香1号的实物照片。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本发明的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本发明的技术方案。
实施例1
一、七河珍香1号以及部分国内审定或者主栽品种的Indel指纹图谱鉴定
为了实现对七河珍香1号的特异性鉴定，本实施例中，针对包括七河珍香1号在内的156个香菇品种指纹图谱的构建进行了研究。本实施例采用82对香菇Indel引物对156个香菇菌株进行扩增，通过带型比对，确定了10对具有良好重复性的Indel引物，这10对引物能够区分156株香菇菌株中的118株，多态性较高；通过这10对Indel引物对七河珍香1号以及部分国内审定品种菌株进行PCR扩增，通过对比DNA分子量对照D2000bp DNA ladder可确定各Indel标记对应的等位片段的数量和相对分子量大小，与10个Indel标记标准产物大小比较后，可确定七河珍香1号菌株的特异性标记组合为：(12)(12)(12)(12)(12)11(12)12，可特异性鉴定该菌株为香菇七河珍香1号，这样的DNA等位片段的组合扩增组合使七河珍香1号菌株区别于其他118个香菇菌种。
图1中M是DL2000 DNA Marker；
1：引物QHID_fp002扩增带型，菌株七河珍香1号扩增条带为1，2；
2：引物QHID_fp009扩增带型，菌株七河珍香1号扩增条带为1，2；
3：引物QHID_fp024扩增带型，菌株七河珍香1号扩增条带为1，2；
4：引物QHID_fp045扩增带型，菌株七河珍香1号扩增条带为1，2；
5：引物QHID_fp110扩增带型，菌株七河珍香1号扩增条带为1，2；
6：引物QHID_fp114扩增带型，菌株七河珍香1号扩增条带为1；
7：引物QHID_fp120扩增带型，菌株七河珍香1号扩增条带为1；
8：引物QHID_fp122扩增带型，菌株七河珍香1号扩增条带为1，2；
9：引物QHID_fp127扩增带型，菌株七河珍香1号扩增条带为1；
10：引物QHID_fp137扩增带型，菌株七河珍香1号扩增条带为2；
N：空白对照。
表1SSR标记扩增信息表
所述10对Indel标记具体为：
QHID_fp002正向引物：CTTTGGTTTTCTGCGTGCTT；
反向引物：TCCTGGAAGAAGATTCATTGG；
QHID_fp009正向引物：ATGGTGGTGTTGATCACGTC；
反向引物：GTTCCACCAGAGCCGAAATA；
QHID_fp024正向引物：CCGCAATCAACAGTAGCTCA；
反向引物：GTCAACCAGTGACCCGATTT；
QHID_fp045正向引物：AACAAGGGCTGTGAATCCTG；
反向引物：CTGCAAAACCTGGAAATTGG；
QHID_fp110正向引物：TCACGATACATTCGACCTCC；
反向引物：GGACAATTGACTAATATGGC；
QHID_fp114正向引物：AAACTTGGCCGAGAAATCGG；
反向引物：TGACGGCTGATTCATCTGTC；
QHID_fp120正向引物：TTTCTTGTAGGGACGTAGCC；
反向引物：TTCGAACAGCAATGGCAAGG；
QHID_fp122正向引物：GGAATGAGCAAGGAGACATC；
反向引物：TCCCTTTTCTTCACTGTCGG；
QHID_fp127正向引物：TTTCAAAGTCCCTTGGTGCG；
反向引物：CACGATCCCTACGCTCTTTC；
QHID_fp137正向引物：CCAGGATCTGGTTAAACTGC；
反向引物：TGAACACAAGGCAATTCCGC。
本实施例进一步的，重新挑选了19个香菇品种对上述Indel标记指纹图谱的区分效果进行了验证。
1.鉴定菌株：QH340、申香4号、武香1号、申香215、Cr62、L135、广香51号、华香8号、申香12号、香杂26号、闽丰1号、菌兴8号、华香5号、L952、赣香1号、森源8408、香九、森XR1、L26共19个菌株。
2.菌丝培养：将七河珍香1号菌种转接到PDA(马铃薯葡萄糖)培养皿中，23℃～25℃下避光培养10-15d，用小菌丝。
3.基因组DNA的提取：上述19个菌株用康为世纪新型植物基因组DNA提取试剂盒法提取上述菌丝的基因组DNA，紫外分光光度法检测总基因组DNA浓度和纯度，调整样品DNA的浓度为20-30ng/μL。
4.Indel分子标记的检测：对上述提取的DNA进行Indel标记的PCR扩增，总体积20μL，包括：PCR反应mix 10uL，Indel标记正向引物和反向引物各1μL(引物浓度10μmol/L)，模板DNA 2μL，ddH2O 6μL；
PCR反应条件：94℃5min；94℃45s，55-60℃45s，72℃30s，35个循环；72℃7min；10℃保存。
5.电泳检测，结果统计。
预计入核酸染料(0.5μL/L)的琼脂糖凝胶，浓度为3％；上述PCR扩增产物10μL，DNA分子量对照D2000bp DNA ladder以及PCR空白对照点样；电泳缓冲液为1×TBE，固定电压110v，电泳4h，凝胶成像系统照相。
实施例2七河珍香1号的杂交过程
2017年4月-2017年8月，将QH147与QH193两个孢子群体稀释相同浓度梯度后将两个孢子悬浮液混匀，分别取100微升涂布在PDA平板上，待混合孢子液大量萌发后随机挑取菌落300个进行纯化，经镜检后，最终获得菌丝浓密、生长速度较快的双核菌丝体206个，再次经ISSR鉴定，与亲本差异较大的杂交后代196个。
初筛实验：2018年9月-2019年1月，将196个菌株制作栽培菌棒，每个菌株制作3个重复，筛选出33个具备出菇能力的菌株进行复筛；
复筛实验：2019年2月-2019年8月，完成33个菌株复筛，对33个菌株进行表型性状的收集，分析发现1株菌株没有明显的菌盖菌柄分化，明显区别于其他菌株；
稳定性验证：2019年9月-2020年3月，在试验棚设3个播种区，每个小区设计完全按照随机区组排列，分别对每个小区的50个菌棒(50株)进行田间观察，生产周期平均为160天，其中发菌期100天，出菇采收期60天，98％菌棒均可正常现蕾出菇，出菇整齐。
实施例3七河珍香1号的栽培方法
(1)制棒：选择阔叶类木屑作为七河珍香1号菌株的主要栽培基质，木屑颗粒度3-10mm之间，夏季木屑进行预湿堆置3-7天，冬季木屑进行预湿堆置5-10天，促使木屑充分发酵同时使木屑软化，保证木屑无干料，达到灭菌彻底的良好效果。栽培基质配比(干重)为木屑79％、麦麸20％、石膏1％，调至总含水量57.5％，pH6-7，充分搅拌30-40min。培养料采用直径15cm、长度55cm、厚度0.006-0.008mm的聚乙烯栽培袋装成长度43cm的菌棒，装好后的菌棒棒重量在2200-2400g之间，菌棒在119℃下保持4.5h灭菌。
(2)接种：灭菌后的菌棒温度降至20-25℃时，接种七河珍香1号菌种，每棒接种4个接种穴，每个接种穴接菌种23g，为确保菌丝长速一致，要保证接种穴打孔深度及接种量一致。
(3)培养：七河珍香1号菌丝最适生长温度为24-26.5℃，将培养环境温度调控在23-26℃，棒温维持在25±1℃，空气相对湿度50-70％，CO2浓度2000-6000ppm，避光培养。菌丝蔓延至菌棒表面1/2-2/3时沿菌落边缘进行一次刺孔操作，每棒刺孔数量20个，刺孔深度2.5cm，直径3mm；培养至菌棒表面形成瘤状凸起并变软后进行二次刺孔操作，每棒刺孔数量65个，刺孔深度6m，孔径5mm。二次刺孔后增加持续24h强度为500-1000lux散射光照，待菌棒周身转色成褐色，培养菌龄在100天时，菌棒达到生理成熟。
(4)出菇：菌棒成熟后，转移至出菇房，对菌棒进行注水，补水至初始菌棒重量的92％。注水完成后，进行催蕾，出菇房温度10-20℃之间，昼夜8-10℃的温差，CO2浓度800ppm以下，空间湿度85-90％，催蕾4天后菇蕾形成。随后进行疏蕾操作，每棒保留菇蕾14个，疏蕾后出菇房温度调控14℃维持2天。随后出菇房温度控制在15-25℃之间，18-23℃之间最佳，CO2浓度600-800ppm，空间湿度85-90％，子实体生长4-5天，可进行采收，一潮采收期6天，采收250g鲜菇。随后菌棒进入休养期，出菇房内温度提升至24℃，湿度70-80％，CO2浓度2000ppm以内，菌棒休养15天。通过注水的方式将菌棒重量补充至初始棒重的80％，进入二潮出菇，催蕾、出菇条件同一潮，二潮可采收200g鲜菇。至此，七河珍香1号的两潮产量为450g。
实施例4七河珍香1号的培养物
本实施例中，提供一种接种七河珍香1号的菌棒，所述菌棒采用实施例3中步骤(1)-(2)方法制备。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 山东七河生物科技股份有限公司
<120> 一种球状香菇菌株七河珍香1号及Indel指纹图谱鉴定方法
<130> 2010
<160> 20
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 1
ctttggtttt ctgcgtgctt 20
<210> 2
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 2
tcctggaaga agattcattg g 21
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 3
atggtggtgt tgatcacgtc 20
<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 4
gttccaccag agccgaaata 20
<210> 5
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 5
ccgcaatcaa cagtagctca 20
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 6
gtcaaccagt gacccgattt 20
<210> 7
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 7
aacaagggct gtgaatcctg 20
<210> 8
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 8
ctgcaaaacc tggaaattgg 20
<210> 9
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 9
tcacgataca ttcgacctcc 20
<210> 10
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 10
ggacaattga ctaatatggc 20
<210> 11
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 11
aaacttggcc gagaaatcgg 20
<210> 12
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 12
tgacggctga ttcatctgtc 20
<210> 13
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 13
tttcttgtag ggacgtagcc 20
<210> 14
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 14
ttcgaacagc aatggcaagg 20
<210> 15
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 15
ggaatgagca aggagacatc 20
<210> 16
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 16
tcccttttct tcactgtcgg 20
<210> 17
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 17
tttcaaagtc ccttggtgcg 20
<210> 18
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 18
cacgatccct acgctctttc 20
<210> 19
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 19
ccaggatctg gttaaactgc 20
<210> 20
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 20
tgaacacaag gcaattccgc 20

Claims (2)

1.一种用于鉴定球状香菇（Lentinula edodes）菌株七河珍香1号的InDel标记引物对，其特征在于，所述InDel标记引物对包括：
QHID_fp002正向引物：CTTTGGTTTTCTGCGTGCTT；
反向引物：TCCTGGAAGAAGATTCATTGG；
QHID_fp009正向引物：ATGGTGGTGTTGATCACGTC；
反向引物：GTTCCACCAGAGCCGAAATA；
QHID_fp024正向引物：CCGCAATCAACAGTAGCTCA；
反向引物：GTCAACCAGTGACCCGATTT；
QHID_fp045正向引物：AACAAGGGCTGTGAATCCTG；
反向引物：CTGCAAAACCTGGAAATTGG；
QHID_fp110正向引物：TCACGATACATTCGACCTCC；
反向引物：GGACAATTGACTAATATGGC；
QHID_fp114正向引物：AAACTTGGCCGAGAAATCGG；
反向引物：TGACGGCTGATTCATCTGTC；
QHID_fp120正向引物：TTTCTTGTAGGGACGTAGCC；
反向引物：TTCGAACAGCAATGGCAAGG；
QHID_fp122正向引物：GGAATGAGCAAGGAGACATC；
反向引物：TCCCTTTTCTTCACTGTCGG；
QHID_fp127正向引物：TTTCAAAGTCCCTTGGTGCG；
反向引物：CACGATCCCTACGCTCTTTC；
QHID_fp137正向引物：CCAGGATCTGGTTAAACTGC；
反向引物：TGAACACAAGGCAATTCCGC；
所述球状香菇（Lentinula edodes）菌株七河珍香1号，该球状香菇菌株已经于2021年04月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，其生物保藏号为：CGMCC NO.21952。
2.如权利要求1所述的InDel标记引物对，其特征在于，所述香菇菌株的子实体特征为：子实体菌盖呈球形，无菌柄，鳞片无或极小，分布在周边。
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李海峰.香菇子实体发育相关基因的克隆及分析.《CNKI优秀硕士学位论文全文库》.2011,第i、9-10页. *

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