CN114514308A - 细胞筛选器件及细胞筛选试剂盒 - Google Patents

Abstract

该细胞筛选器件(1)具有：底板部(2)；细胞载置膜(6)，其设置于底板部(2)上，构成细胞载置面(4)；一对流体注入部(8)，其以与细胞载置膜(6)分区的方式设置于底板部(2)上；和流路(10)，其设置于底板部(2)与细胞载置膜(6)之间，流路端部(12)延伸至流体注入部(8)。在细胞载置膜(6)的细胞载置面(4)形成有：具有能将需要筛选的细胞(C)分别收容的尺寸的多个孔、和从孔的内底面通向流路(10)的贯通孔。

Description

细胞筛选器件及细胞筛选试剂盒

技术领域

本发明涉及用于筛选细胞的细胞筛选器件及细胞筛选试剂盒。本申请基于2019年9月30日于日本提出申请的日本特愿2019-178989号主张优先权，并将其内容并入本申请中。

背景技术

近年来，特别是在创新药物领域中，细胞分析的对象从细胞群水平细分为单一细胞水平，并使用下述方法：使用细胞筛选器件，在细小的孔内逐一捕获细胞，进而对大量细胞一次性地实施筛选试验，选出具有目标特性的细胞。作为筛选细胞方法，例如，采用了下述方法等：使被捕获至多个孔内的细胞与分散有针对特定抗体进行结合的捕捉剂等试剂的液体接触，找出分泌了与捕捉剂结合的分泌物的细胞，将其从孔中回收。

专利文献1中示出了本发明的申请人等先前提出的细胞筛选器件。该细胞筛选器件具有呈水平层叠配置的第一基板及第二基板，在第一基板的表面形成有多个可能将细胞逐一收容的孔，且分别形成有从各孔的底面到达第一基板的背面的连通孔。这些连通孔小至细胞无法穿过的程度。在第二基板中形成有接收通过上述连通孔从孔流出的分泌物的蓄积部，在蓄积部使分泌物与试剂反应，确定靶细胞。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第WO2017/057234A1号小册子

发明内容

发明所要解决的课题

专利文献1那样的细胞筛选器件中，需要设置试剂导入部以将试剂供给至蓄积部。例如将试剂导入部设置于器件的端部时，在孔中捕获有细胞、蓄积部充满分散液、试剂的状态下搬运细胞筛选器件、或自水平状态倾斜时，分散液、试剂沿蓄积部的长度方向流动(称作晃动(sloshing)现象)，一部分的分散液、试剂通过贯通孔流入孔中，使已被孔捕获的细胞上升，存在细胞从孔中脱离的可能性。

用于解决课题的手段

本发明的方式[1]的细胞筛选器件具有：底板部；细胞载置部，其设置于上述底板部上，构成细胞载置面；流体注入部，其以与上述细胞载置部分区的方式设置于上述底板部上；多个孔，其形成于上述细胞载置部的上述细胞载置面，并具有能将需要筛选的细胞分别收容的尺寸；流路，其设置于上述底板部与上述细胞载置部之间，流路端部延伸至上述流体注入部；贯通孔，其从上述孔的内底面通向上述流路，具有上述需要筛选的细胞无法通过的内径；盖部，其设置于上述流体注入部，堵塞上述流路端部；和流体注入端口，其设置于上述盖部，具有与上述流路连通的开口部。

利用这样的细胞筛选器件，通过用盖部堵塞流路的流路端部，在该盖部设置具有与流路连通的开口部的流体注入端口，从而能够利用上述盖部抑制流路内的流体的移动，并且使流体通过上述流体注入端口进出流路。因此，即使在将细胞捕获至细胞筛选器件的孔、分散液等流体进入流路的状态下搬运或倾斜细胞筛选器件的情况下，流体也不易沿着流路过度移动，可抑制晃动现象。由此，可抑制一部分的分散液通过贯通孔流入孔中、使已被孔捕获的细胞脱离的问题。

对于方式[2]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]中，在上述流体注入端口的周围的上述盖部形成有流体储留部，所述流体储留部能储留从上述流体注入端口的上述开口部溢出的流体，在上述细胞载置面与上述盖部之间设置有分隔部，所述分隔部防止在上述流体储留部中积累有流体时上述流体流向上述细胞载置部。这种情况下，即使在流体从上述流体注入端口的上述开口部溢出时，流体储留部也会接收流体，能够抑制其再次从流体注入端口进入流路内，可减小例如污染等的可能性。另外，由于在上述细胞载置面与上述盖部之间形成有分隔部，因此即使在上述流体储留部中积累有流体的情况下，也可抑制上述流体流向上述细胞载置部。

对于方式[3]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]或[2]中，上述底板部形成具有长边和短边的矩形，在上述底板部的长边方向的两侧分别形成有上述流体注入部、上述盖部、及上述流体注入端口，在上述两个盖部之间配置有上述细胞载置部。这种情况下，可以实现流体从2个流体注入端口中的一方流向流路、同时使多余部分的流体从另一方的流体注入端口排出等广泛的利用方法。但是，本发明不限于设置2个流体注入端口的构成，根据需要，可以仅单侧设置流体注入端口，也可以设置3个以上的流体注入端口。

对于方式[4]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]～[3]中的任一项中，上述细胞载置部为膜体，在上述膜体的上表面以多个排列为格子状的方式形成有上述孔，在上述膜体的下表面形成有通向上述孔的各自的内底面的上述贯通孔，设置有支撑上述膜体的周围并且包围上述细胞载置面的框体，在上述底板部设置有用于以可装卸的方式固定上述框体的卡合部。这种情况下，使框体卡合于底板部的卡合部时，可将具有孔的膜体定位至底板部上的正确位置，也能够在筛选后从底板部取下框体。

对于方式[5]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]～[4]中的任一项中，形成有自上述盖部的周缘立起的周壁部，上述盖部和上述周壁部形成为能从上述底板部装卸的外框体。这种情况下，将底板部和外框体以分体的方式预先成型，只要将外框体安装于底板部，就能够对盖部和周壁部进行正确定位，容易组装。另外，使用后可从底板部取下外框体，容易维护。

对于方式[6]的细胞筛选器件而言，上述方式[4]中，在上述盖部的周缘形成有立起的周壁部，上述盖部和上述周壁部形成为能从上述底板部装卸的外框体，支撑上述膜体的上述框体以可装卸的方式固定于上述外框体。这种情况下，分别将底板部、外框体及框体以分体的方式预先成型，只要将框体和外框体安装于底板部，就能够对膜体、盖部、周壁部进行正确定位，可提高组装容易度。另外，使用后也可从底板部取下框体和外框体，容易维护。

对于方式[7]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]～[5]中的任一项中，上述底板部形成具有长边和短边的矩形形状，在上述底板部的长边方向的两侧分别形成有上述流体注入部、上述盖部、及上述流体注入端口，在上述两个盖部之间配置有上述细胞载置部，上述盖部、自上述盖部的周缘立起的周壁部、及包围上述细胞载置部的周围的周壁部形成为能从上述底板部装卸的外框体。这种情况下，分别将底板部和外框体以分体的方式预先成型，只要将外框体安装于底板部，就能对细胞载置部、盖部、周壁部、及两个流体注入端口进行正确定位，可提高组装容易度。另外，使用后可从底板部取下外框体而进行分解，容易维护。

对于方式[8]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]～[7]中的任一项中，上述流体注入端口形成为自上述盖部的上表面立起的圆筒状。这种情况下，由于流体注入端口形成为圆筒状，移液器、分液器的圆锥状尖端可几乎气密性地伸进，容易取出及放入流体。

对于方式[9]的细胞筛选器件而言，上述方式[1]～[8]中的任一项中，上述盖部中，在上述流路端部的顶面的至少一部分形成有随着接近上述流体注入端口而呈斜面状或阶梯状上升的排泡面。这种情况下，由于在盖部的背面侧的顶面形成有朝向流体注入端口而上升的斜面或阶梯状的排泡面，因此容易使进入流路内的气泡从流体注入端口排出，可抑制气泡引起的故障。

方式[10]的细胞筛选试剂盒具备：上述方式[1]～[9]中任一项所述的细胞筛选器件；和检测颗粒，其为固定有与需要筛选的细胞的分泌物具有结合性的物质的载体颗粒。根据该细胞筛选试剂盒，在将细胞收入各个孔中的状态下，在孔内使检测颗粒与细胞的分泌物反应，基于源自检测颗粒的发光等进行筛选，并且，即使在分散液等流体进入流路的状态下搬运或倾斜细胞筛选器件时，流体也不易沿着流路移动，可抑制晃动现象。由此，可抑制一部分的分散液通过贯通孔流入孔中、使已被孔捕获的细胞、检测颗粒从孔中脱离的问题。

发明效果

如以上所说明的，根据本发明的细胞筛选器件或细胞筛选试剂盒，可起到如下的优异效果：即使在将细胞捕获至细胞筛选器件的孔、分散液等流体进入流路的状态下搬运或倾斜细胞筛选器件的情况下，流体也不易沿着流路移动，可抑制晃动现象，从而能够抑制一部分的分散液通过贯通孔流入孔中、使已被孔捕获的细胞、检测颗粒脱离等的问题。

附图说明

[图1]为示出本发明的一个实施方式的细胞筛选器件的俯视图。

[图2]为同一实施方式的主视图。

[图3]为示出同一实施方式的正截面的立体图。

[图4]为同一实施方式的中央部的正剖视图。

[图5]为同一实施方式的端部的正剖视图。

[图6]为同一实施方式的侧剖视图。

[图7]为示出同一实施方式的组装方法的立体图。

[图8]为示出同一实施方式的细胞载置膜(细胞载置部)和孔的放大立体图。

[图9]为示出本发明的另一个实施方式的细胞筛选器件的正截面的立体图。

[图10]为本发明的另一个实施方式的细胞筛选器件的端部的正剖视图。

具体实施方式

图1～图6均示出了本发明的一个实施方式的细胞筛选器件1的完成状态，图7示出该细胞筛选器件1的组装方法。该实施方式的细胞筛选器件1具有：底板部2；细胞载置膜(细胞载置部)6，其设置于底板部2上，构成细胞载置面4；一对流体注入部8，其以与细胞载置膜6分区的方式设置于底板部2上；流路10，其设置于底板部2与细胞载置膜6之间，流路端部12延伸至流体注入部8。例如如图8所示，在细胞载置膜6的细胞载置面4形成有：具有能将需要筛选的细胞C分别收容的尺寸的多个孔50、和从孔50的内底面通向流路10的贯通孔52。贯通孔52具有需要筛选的细胞C无法通过的内径。

以下对细胞筛选器件1的构造进行详细说明。该例的底板部2形成为壁厚恒定的细长矩形板状，四个角被倒角成弧形。在底板部2的整周沿着底面的外周缘而形成有微小的突条2B。底板部2的形状不限于图示的形状，可以为圆板状、椭圆形、正方形等任何形状，只要可形成水平的流路10，底板部2的壁厚也可不是恒定的。通常，从成型精度、成本方面，期望底板部2用对靶细胞无害的各种塑料形成，根据需要、也可用陶瓷、玻璃、金属等任何材质而形成。也可对底板部2的表面实施任何可缓和对细胞的影响的包被。

如图3所示，在底板部2的上表面以自底板部2垂直立起的状态一体化形成有卡合壁18，所述卡合壁18以包围中央部的方式形成为俯视时两端呈半圆形的长方形。卡合壁18不限于图示的形状，可以为简单的长方形、圆形、椭圆形等。该例的卡合壁18的高度在整周上是相等的。在卡合壁18可装卸地安装有外框体20，使得外框体20于整周从上方覆盖卡合壁18。

外框体20具有：俯视时两端呈半圆形的长方形的周壁部22、和一对相互平行地设置于周壁部22的内周侧的分隔部28，整体一体化形成。外框体20的材质没有限定，通常从成型精度、成本方面，期望用对细胞无害的各种塑料形成，根据需要，也可用陶瓷、玻璃、金属等任何材质形成。在分隔部28与分隔部28之间开放有长方体状的空间，其中配置有细胞载置膜6。

外框体20的周壁部22的上端形成为于整周向外侧翻折的截面形状，在该翻折部分的内侧，于整周以一定深度形成有向下开口的宽度较细的卡合槽24。通过将卡合壁18的上端部于整周插入该卡合槽24，用周壁部22的翻折部分弹性地紧固，从而使得外框体20以可装卸地方式固定于卡合壁18。在外框体20的长度方向的两个前端各自形成有水平突出的突起26，通过用指尖抬起这些突起26，卡合壁18从卡合槽24脱离，使得底板部2能够与外框体20分离。

被外框体20的周壁部22和各分隔部28包围的半圆形的区域各自形成为流体注入部8。这些流体注入部8中，以连接周壁部22的下端和各分隔部28的下端的方式，与底板部2平行地形成有呈半圆形状的盖部14。在盖部14与底板部2之间形成有作为流路10的两端的流路端部12，盖部14成为气密性地堵塞流路端部12的结构。通过以此方式形成盖部14，作为流路10的两端的流路端部12被密封，即使在细胞筛选器件1倾斜或摇晃的情况下，也能够防止流体通过流路10及流路端部12而过度地向左右流动。虽然在该例子中，流路端部12的上下方向的厚度是恒定的，但也可如后述的图10的实施方式那样根据需要而部分地进行变更。

该实施方式中，在各盖部14的大致中央各自形成有一个圆形的开口部16A，与这些开口部16A对应地，自盖部14分别直立地形成有呈圆筒形状的流体注入端口16。流体注入端口16周围的盖部14的表面形成为流体储留部，如图5所示，从流体注入端口16溢出的流体L得以积累。作为流体储留部，也可在盖部14的上表面的流体注入端口16的周围主动地形成凹部。

流体注入端口16在该实施方式中自盖部14立起，但作为替代，也可将流体注入端口制成形成于盖部14的平坦且不向上方突出的开口部，另一方面，在盖部14的表面形成包围该开口部的圆环状等的凹部，将该凹部作为流体储留部。

流体注入端口16的开口部16A形成为与用于将流体(试剂、分散液)从流体注入端口16注入的移液器、微量移液器、分液器等器具的前端的适配性好的口径，可使器具的尖端气密性地抵接于流体注入端口16的开口部16A。流体注入端口16的形状不限于圆筒形，根据需要可以为方筒状、多边筒状，也可以为仅开口部16A的周围略微隆起的环状、或如上所述的简单的开口部。也可将流体注入端口16制成在盖部14的表面凹陷而形成的倒圆锥状的开口部。

在分隔部28的流体注入部8侧的下端，于分隔部28的整个长度形成有距下表面具有一定高度的段部34，在该段部34的上方，分别延上下方向形成有到达分隔部28的上端的两根肋30。通过肋30可提高分隔部28的弯曲强度。另外，在分隔部28各自形成有朝段部34的下面开口的一定深度的卡合槽32、和与该卡合槽32的细胞载置膜6侧邻接的卡合突条42。

如图6所示，在外框体20的周壁部22的直线状延伸的2处也各自形成有朝向周壁部22的下面开口的一定深度的卡合槽32、和与该卡合槽32的细胞载置膜6侧邻接的卡合突条42。上述直线状延伸的2处的卡合槽32和卡合突条42分别与分隔部28的卡合槽32和卡合突条42相连，俯视时成矩形形状。

被周壁部22的直线状延伸的2处和两个分隔部28包围的四边形空间中，以可装卸的方式收容有俯视时呈矩形形状的方筒状的框体36。在框体36的下端，细胞载置膜6如图8所示那样以使孔50朝上的方式在整个面铺展，框体36的下端与细胞载置膜6于整周无间隙地接合。框体36用具有挠性的塑料等形成，施加向外扩张的力时四个壁向外稍微扩张，对细胞载置膜6施加张力，从而能够防止细胞载置膜6的松弛。

细胞载置膜6的厚度没有限定，从形成作为靶标的细胞逐一进入的孔50、且形成供流体从孔50的底流向背面侧的细小的贯通孔52的角度出发，优选为5～100μm左右，更优选设为10～50μm左右。细胞载置膜6可以为2层以上的多层膜。这种情况下，可以上侧的层形成成为孔50的贯通孔，下侧的层中开放成为贯通孔52的贯通孔，将这两个层贴合，形成孔50和贯通孔52。

细胞载置膜6的材质没有限定，通常从成型精度、成本方面，期望用对细胞无害的各种塑料形成，根据需要，也可用陶瓷、多晶或单晶硅、玻璃等无机化合物、金属等任何材质形成。孔50及贯通孔52也能利用蚀刻加工、光刻等形成。

从符合需要捕获的细胞C的平均的形状、提高配置密度的角度出发，孔50的平面形状优选为如图8所示的六边形或圆形，根据需要，也可以为正方形等四边形、其他的多边形、椭圆形等。孔50的大小应根据需要捕获的细胞C的大小而进行选择，没有限定，通常可设为进入孔开口部的圆的最大直径为1～100μm左右、深度为1～100μm左右，以使一个孔50内进入一个细胞C，但2个以上的细胞C难以进入。也可预先准备多种具有孔50的大小不同的细胞载置膜6的框体36，与共通的底板部2及外框体20组合，以构成细胞筛选试剂盒。

就细胞C的大小的关系而言，俯视孔50时进入其中的圆的最大直径可以是需要捕获的细胞C的最大直径的0.5～2倍左右的大小，更优选为0.8～1.9倍。孔50的深度可以是需要捕获的细胞C的最大直径的0.5～4倍左右的大小，更优选为0.8～1.9倍。邻接的孔50与孔50之间的最短距离为1～10μm左右时可增大孔50的密度，故而是适宜的，但并不限定为该范围。

该例中，在各孔50的底面中央各自形成有两个贯通孔52。以此方式形成多个时不易被堵塞，故而是适宜的，但本发明不限于此，可在中央各自形成1个或3个以上，也可在孔50的底面随机或于网格点位置形成多个贯通孔52。贯通孔52的内径没有限定，优选最小内径为10nm～20μm左右的范围，更优选需要捕获至孔50内的细胞C的平均直径的0.5倍以下，以使细胞C无法通过。

如图4及图6所示，在框体36的下端部的外周面于整周形成有：通过制成朝上翻折的形状而向上方开口的卡合槽44；和向下突出的卡合突条40。卡合槽44的深度及卡合突条40的上下宽度在框体36的整周上是大致恒定的。卡合突条40插入形成于外框体20的下表面的卡合槽32，外框体20的卡合突条42插入框体36的卡合槽44。通过它们的嵌合，在将框体36收容于外框体20的中央空间内的状态下，将框体36固定于外框体20。

此时，框体36的下端面抵接于形成于底板部2的间隔件46的上表面，可通过间隔件46的厚度准确地规定细胞载置膜6距底板部2的间隔量、即流路10的厚度。该实施方式中，如图7所示，在卡合壁18的内侧沿着框体36的下端形状形成有一对俯视时呈U字状的间隔件46，在间隔件46彼此之间形成有缺口47。在将框体36固定于底板部2上的状态下，流体通过这些缺口47从流路10流向各流路端部12。间隔件46也可以不为图示那样的形状，只要以多处抵接于框体36的下表面即可。视情况，还可以不形成间隔件46，通过与外框体20的卡合来准确地规定框体36距底板部2的高度。

在框体36的下端部的内周面于整周形成有具有一定宽度的斜面38，斜面38越朝下方则越向细胞载置膜6一侧探出。通过形成这种斜面38，如图4所示，使用移液器、微量移液器、分液器等器具P从细胞载置膜6的孔50吸取靶细胞时，即使捕获有靶细胞的孔50位于框体36的内周缘近旁的位置，也可容易地用器具P吸出细胞。另外，斜面38还起到了增加细胞载置膜6贴合至框体36的面积、提高细胞载置膜6的接合强度的效果，也有助于提高框体36的强度。

制造由上述构成形成的细胞筛选器件时，如图7所示，分别形成底板部2、框体36、及外框体20后，首先，将框体36嵌入外框体20的下表面，接着，将外框体20嵌入底板部2的卡合壁18，从而成为图1～图6所示的完成状态。

在将框体36嵌入外框体20的下表面的过程中，如图4及图6所示，通过将外框体20的卡合突条42嵌入框体36的卡合槽44，并且将框体36的卡合突条40嵌入外框体20的卡合槽32，从而利用各卡合部的弹性而将两者牢固地固定。同时，对于卡合突条40的内周面和卡合突条42的外周面而言，至少一方成为随着向上方行进而稍微倾向外侧的形状。由此，卡合进行时，框体36的四个边的卡合突条40被外框体20的卡合突条42拉向外侧，框体36的下端部向四周略微扩张，产生拉伸细胞载置膜6的四个边的张力，对细胞载置膜6施加均匀的张力。

因此，具有下述优点：即使在框体36为自由状态时细胞载置膜6略微松弛，也可在将框体36固定于外框体20时消除细胞载置膜6的松弛，提高细胞载置膜6的形成有多个孔50的细胞载置面4的平整度，将分散有细胞的分散液填充至细胞载置面4上，通过摇动细胞筛选器件等，使细胞不偏向地流动，由此容易地将细胞逐一捕获至孔50内。

使用了本实施方式的细胞筛选试剂盒具备：细胞筛选器件1；珠(检测颗粒)B，其为固定有与需要筛选的细胞的分泌物具有结合性的物质的载体颗粒。细胞筛选试剂盒可制成例如在盒型等的外侧容器之中收容有一个或多个细胞筛选器件1、和内侧容器的制品，所述内侧容器以粉末状态或悬浮于分散液的状态封入了作为检测颗粒的大量细小的珠B。

结合颗粒的种类没有限定，例如可以为由珠(磁珠、树脂珠等)、水凝胶颗粒(海藻酸钠凝胶、琼脂糖凝胶等)、金属颗粒(金纳米颗粒)等形成的载体颗粒、和附着于载体颗粒并能与由作为靶标的抗体生产细胞分泌的抗体进行结合的捕捉剂。结合颗粒的粒径没有限定，通常颗粒的最大直径优选为100nm～50μm，更优选为500nm～30μm左右。

进行实际筛选时，使细胞和作为检测颗粒的珠B分散于分散液中并填充至细胞载置膜6上，摇动细胞筛选器件1或将其通过贯通孔52排出至流路10等而使细胞C逐一地进入孔50，并且将大量珠B与各细胞C一同装入孔50，将多余的分散液通过贯通孔52排出至流路10。只要在该状态下使细胞C的分泌物中的抗体与珠B的捕捉剂反应，用荧光标记抗体仅将发生反应的珠B可视化，即能够发现靶细胞。

根据由上述构成形成的细胞筛选器件1，用盖部14分别堵塞位于流路10两端的流路端部12，在这些盖部14设置具有与流路10连通的开口部16A的流体注入端口16，从而利用盖部14来抑制流路端部12及流路10内的流体的移动，并且能使流体通过流体注入端口16进出流路10。因此，即使在将细胞C捕获至细胞筛选器件1的孔50、有分散液等流体进入流路10的状态下搬运或倾斜细胞筛选器件1的情况下，流体也不易沿着流路10及流路端部12移动，可抑制晃动现象。由此，还可抑制一部分的分散液通过贯通孔52流入孔50、使已被捕获至孔50中的细胞C、珠B脱离等的问题。

另外，该实施方式中，即使在流体从流体注入端口16的开口部16A溢出的情况下，流体储留部(盖部14的上表面)也会接收流体，可抑制再次从流体注入端口16进入流路10内的情况，可减小例如来自外部的污染等的可能性。另外，由于在细胞载置面4与盖部14之间形成有分隔部28，因此即使在流体储留部14中积累有流体的情况下，也可抑制流体流向细胞载置部6。

另外，该实施方式中，由于2个流体注入端口16形成于流路10两端，可以实现为流体从一个流体注入端口16流向流路10、使多余的流体从另一个流体注入端口16排出等广泛的利用方法。

另外，该实施方式中，通过使框体36的下端抵接于底板部2的间隔件46，可将细胞载置膜6定位至底板部2上的正确的位置，因此流体在孔50与流路10之间的流动成为所期望的状态，能够实现高精度的筛选。

另外，该实施方式中，底板部2和外框体20以分体的方式成型，只要将外框体20安装于底板部2，就可将盖部14和周壁部22配置于底板部2的正确的位置上，因此容易组装细胞筛选器件1。使用后也可从底板部2取下外框体20，容易维护。

另外，该实施方式中，分别将底板部2、外框体20及框体36以分体的方式成型，只要将框体36和外框体20安装于底板部2，就能对细胞载置膜6、盖部14、周壁部22进行正确的定位，可提高组装容易度。使用后也可从底板部2取下框体36和外框体20，容易维护。

另外，该实施方式中，分别将底板部2和外框体20以分体的方式成型，只要将外框体20安装于底板部2，就能对细胞载置部6、盖部14、周壁部22及两个流体注入端口16进行正确的定位，故而易于组装。

另外，该实施方式中，流体注入端口16形成为圆筒状，因此移液器、分液器等圆锥状尖端可几乎气密性地伸进开口部16A，容易取出及放入流体。

对于该实施方式的细胞筛选试剂盒而言，在将细胞C收入各个孔50的状态下，在孔50内使检测颗粒B与细胞的分泌物反应，基于源自检测颗粒B的发光等进行筛选，并且，即使在分散液等流体进入流路10的状态下搬运或倾斜细胞筛选器件1的情况下，流体也不易沿着流路10移动，可抑制一部分的分散液通过贯通孔52流入孔50、使已被孔50捕获的细胞C、检测颗粒B从孔50中脱离的问题。

在前文的实施方式中，为在细胞筛选器件1的两端设置了流体注入端口16的构成，但也可如图9所示，为仅在细胞筛选器件1的单侧的盖部14形成流体注入端口16的构成。这种情况下，能仅从一个流体注入端口16取出及放入流体。

另外，上述实施方式中，盖部14为平面状，但也可如图10所示，盖部14中，在流路端部12的顶面的至少一部分形成随着接近流体注入端口16而呈斜面状或阶梯状上升的排泡面54。这种情况下，由于盖部14的背面侧的顶面朝向流体注入端口而上升，因此进入流路端部12内的气泡G会沿着斜面54上升，容易从流体注入端口16排出，可抑制因气泡G导致的贯通孔52堵塞等故障。

产业上的可利用性

根据本发明的细胞筛选器件或细胞筛选试剂盒，即使在将细胞捕获至细胞筛选器件的孔、分散液等流体进入流路的状态下搬运或倾斜细胞筛选器件的情况下，流体也不易沿着流路移动，可抑制晃动现象，从而能够抑制一部分的分散液通过贯通孔流入孔中、使已被孔捕获的细胞、检测颗粒脱离等的问题。因此，本发明可用于产业。

附图标记说明

1：细胞筛选器件、2：底板部、4：细胞载置面、6：细胞载置膜(细胞载置部)、8：流体注入部、10：流路、12：流路端部、14：盖部(流体储留部)、16：流体注入端口、16A：开口部、18：卡合壁、20：外框体、22：周壁部、24：卡合槽、26：突起、28：分隔部、30：肋、32：卡合槽、34：段部、36：框体、36A：壁部、38：斜面、40：卡合突条、42：卡合突条、44：卡合槽、46：间隔件、47：缺口、50：孔、52：贯通孔、54：斜面(排泡面)、C：细胞、B：珠、L：分散液、G：气泡。

Claims (10)

1.细胞筛选器件，其特征在于，其具有：

底板部；

细胞载置部，其设置于所述底板部上，构成细胞载置面；

流体注入部，其以与所述细胞载置部分区的方式设置于所述底板部上；

多个孔，其形成于所述细胞载置部的所述细胞载置面，具有能将需要筛选的细胞分别收容的尺寸；

流路，其设置于所述底板部与所述细胞载置部之间，流路端部延伸至所述流体注入部；

贯通孔，其从所述孔的内底面通向所述流路，具有所述需要筛选的细胞无法通过的内径；

盖部，其设置于所述流体注入部，堵塞所述流路端部；和

流体注入端口，其设置于所述盖部，具有与所述流路连通的开口部。

2.如权利要求1所述的细胞筛选器件，其中，

在所述流体注入端口的周围的所述盖部形成有流体储留部，所述流体储留部能储留从所述流体注入端口的所述开口部溢出的流体，

在所述细胞载置面与所述盖部之间设置有分隔部，所述分隔部防止在所述流体储留部中积累有流体时，所述流体流向所述细胞载置部。

3.如权利要求1或2所述的细胞筛选器件，其中，所述底板部形成具有长边和短边的矩形形状，在所述底板部的长边方向的两侧分别形成所述流体注入部、所述盖部、及所述流体注入端口，在所述两个盖部之间配置有所述细胞载置部。

4.如权利要求1～3中任一项所述的细胞筛选器件，其中，

所述细胞载置部为膜体，

在所述膜体的上表面以多个排列为格子状的方式形成所述孔，在所述膜体的下表面形成有通向所述孔的各自的内底面的所述贯通孔，

设置有支撑所述膜体的周围并且包围所述细胞载置面的框体，

在所述底板部设置有用于以可装卸的方式固定所述框体的卡合部。

5.如权利要求1～4中任一项所述的细胞筛选器件，其形成有自所述盖部的周缘立起的周壁部，所述盖部和所述周壁部形成为能从所述底板部装卸的外框体。

6.如权利要求4所述的细胞筛选器件，其中，

在所述盖部的周缘形成有立起的周壁部，所述盖部和所述周壁部形成为能从所述底板部装卸的外框体，

支撑所述膜体的所述框体以可装卸的方式固定于所述外框体。

7.如权利要求1～6中任一项所述的细胞筛选器件，其中，

所述底板部形成具有长边和短边的矩形形状，在所述底板部的长边方向的两侧分别形成有所述流体注入部、所述盖部、及所述流体注入端口，在所述两个盖部之间配置有所述细胞载置部，

所述盖部、自所述盖部的周缘立起的周壁部、及包围所述细胞载置部的周围的周壁部形成为能从所述底板部装卸的外框体。

8.如权利要求1～7中任一项所述的细胞筛选器件，其中，所述流体注入端口形成自所述盖部的上表面立起的圆筒状。

9.如权利要求1～8中任一项所述的细胞筛选器件，其中，所述盖部中，在所述流路端部的顶面的至少一部分形成有排泡面，所述排泡面随着接近所述流体注入端口而呈斜面状或阶梯状上升。

10.细胞筛选试剂盒，其具备：

权利要求1～9中任一项所述的细胞筛选器件；和

检测颗粒，其为固定有与需要筛选的细胞的分泌物具有结合性的物质的载体颗粒。

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