CN114450389A - 细胞培养容器、细胞培养方法及细胞培养容器的制造方法 - Google Patents

细胞培养容器、细胞培养方法及细胞培养容器的制造方法 Download PDF

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Abstract

细胞观察容器具有：第1容器，其构成为收容培养液；以及第2容器，其具有在对由培养液培养的细胞及细胞团的任一者或者两者进行保持的状态下能够相对于第1容器出入的至少一个阱。至少一个阱各自具有：底部，其能够保持培养液；以及侧壁，其从底部的周缘部延伸。在侧壁设置有液体经过部，该液体经过部能够使收容于第1容器的培养液经过。

Description

细胞培养容器、细胞培养方法及细胞培养容器的制造方法
技术领域
本发明涉及细胞培养容器、细胞培养方法及细胞培养容器的制造方法。
本申请基于2019年11月14日申请的日本申请第2019－206248号而要求优先权，引用在上述日本申请中记载的全部记载内容。
背景技术
作为用于培养细胞及细胞团(以下，也称为“细胞团等”)的容器，已知排列有多个阱的容器(所谓，阱板)。在专利文献1记载有用于在培养液之中培养细胞团等的细胞用培养容器。该细胞用培养容器具有所要培养的细胞团等进行保持的多个阱。
专利文献1：国际公开第2013－18377号公报
发明内容
本发明的一个实施方式所涉及的细胞观察容器具有：第1容器，其构成为收容培养液；以及第2容器，其具有在对由培养液培养的细胞及细胞团的任一者或者两者进行保持的状态下能够相对于第1容器出入的至少一个阱。至少一个阱各自具有：底部，其能够保持培养液；以及侧壁，其从底部的周缘部延伸。在侧壁设置有液体经过部，该液体经过部能够使收容于第1容器的培养液经过。
附图说明
图1是示意地表示一个实施方式所涉及的细胞培养容器的剖视图。
图2是示意地表示一个实施方式所涉及的细胞培养容器的剖视图。
图3A是图1所示的细胞容器的俯视图。
图3B是沿图1所示的细胞容器的阱的IIIB－IIIB线的剖视图。
图4A是表示在一个实施方式所涉及的细胞培养容器的制造方法使用的模具的剖视图。
图4B是从下方观察图4A所示的上部模具及型芯的图。
图5A是表示一个实施方式所涉及的细胞培养容器的制造方法的一个工序的图。
图5B是表示图5A所示的细胞培养容器的制造方法的一个工序之后的状态的图。
图6的(a)部～(d)部是表示细胞及细胞团的培养状态的变化的示意性的剖视图。
图7是示意地表示一个实施方式所涉及的细胞培养方法的培养工序的剖视图。
图8是示意地表示一个实施方式所涉及的细胞培养方法的培养工序的剖视图。
图9是示意地表示一个实施方式所涉及的细胞培养方法的观察工序的剖视图。
图10是示意地表示一个实施方式所涉及的细胞培养方法的观察工序的剖视图。
图11的(a)部～(c)部是示意地表示对细胞团的变化的情形进行观察的各观察工序的剖视图。
图12A是示意地表示变形例所涉及的细胞培养容器的剖视图。
图12B是示意地表示图12A所示的变形例所涉及的细胞培养容器的剖视图。
图13A是示意地表示变形例所涉及的细胞容器的俯视图。
图13B是示意地表示变形例所涉及的细胞容器的俯视图。
图13C是示意地表示变形例所涉及的细胞容器的俯视图。
图13D是示意地表示变形例所涉及的细胞容器的俯视图。
图14A是示意地表示变形例所涉及的阱的剖视图。
图14B是示意地表示变形例所涉及的阱的剖视图。
图15A是示意地表示变形例所涉及的液体经过部的斜视图。
图15B是示意地表示变形例所涉及的液体经过部的斜视图。
图15C是示意地表示变形例所涉及的液体经过部的斜视图。
图16是示意地表示变形例所涉及的液体经过部的剖视图。
图17A是表示在变形例所涉及的细胞培养容器的制造方法使用的模具的剖视图。
图17B是沿图17A所示的模具的XVIIB－XVIIB线的剖视图。
图18是表示通过变形例所涉及的细胞培养容器的制造方法进行成型后的一部分的阱的图。
图19A是表示变形例所涉及的细胞培养容器的制造方法的一个工序的图。
图19B是表示图19A所示的细胞培养容器的制造方法的一个工序之后的状态的图。
图20A是表示变形例所涉及的细胞培养容器的制造方法的一个工序的图。
图20B是表示图20A所示的细胞培养容器的制造方法的一个工序之后的状态的图。
图21是示意地表示另外的变形例所涉及的阱的图。
图22是示意地表示另外的变形例所涉及的阱的图。
图23是示意地表示另外的变形例所涉及的阱的图。
图24是示意地表示另外的变形例所涉及的阱的图。
图25是示意地表示另外的变形例所涉及的阱的图。
图26是示意地表示另外的变形例所涉及的阱的图。
图27是示意地表示另外的变形例所涉及的阱的图。
图28是示意地表示另外的变形例所涉及的阱的图。
图29是示意地表示另外的变形例所涉及的细胞培养容器的图。
具体实施方式
[本发明所要解决的课题]
在使用细胞培养容器进行细胞团等的培养时，阱的内部为了培养细胞团等而由培养液充满。在培养细胞团等时，从避免由于培养液的蒸发而导致细胞团等干燥的观点出发，要求在阱的内部存在规定量以上的培养液。但是，当在培养的过程中试图光学地观察细胞团时，由于该培养液的光吸收而有时无法充分获得用于对阱进行观察的透过光量。在这样的情况下，需要减少阱的内部的培养液。为了减少培养液，例如考虑用滴管等手动将阱的内部的培养液等抽出，花费工时。
[本发明的效果]
根据本发明，能够在培养细胞团的过程中高效地进行细胞团的培养状态的观察。
[本发明的实施方式的说明]
首先，列举本发明的实施方式的内容而进行说明。一个实施方式所涉及的细胞培养容器具有：第1容器，其构成为收容培养液；以及第2容器，其具有在对由培养液培养的细胞及细胞团的任一者或者两者进行保持的状态下能够相对于第1容器出入的至少一个阱。至少一个阱各自具有：底部，其能够保持培养液；以及侧壁，其从底部的周缘部延伸。在侧壁设置有液体经过部，该液体经过部能够使收容于第1容器的培养液经过。
在该细胞培养容器，经由在侧壁设置的液体经过部使培养液出入阱。因此，仅通过将阱放入收容有培养液的第1容器，就能够由培养液充满于阱。另一方面，在对细胞团的培养状态进行观察时，仅通过从第1容器使阱退出，就能够以在底部保持有培养液的状态，仅将阱内的培养液的一部分简单地排出。因此，在培养细胞及细胞团的过程中能够高效地进行细胞团的培养状态的观察。
在一个实施方式所涉及的细胞培养容器，液体经过部可以是将侧壁贯通的至少一个孔。通过将侧壁贯通的孔，能够实现可使培养液经过的结构。
在一个实施方式所涉及的细胞培养容器，构成至少一个阱的材料可以是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有不易与细胞团等粘接的性质，因此适于细胞团等的培养，将阱由聚苯乙烯构成，由此例如能够将所培养的细胞团等从阱容易地取出。
在一个实施方式所涉及的细胞培养容器，液体经过部可以是侧壁的至少一部分的区域，该区域由使培养液经过的多孔质的高分子材料构成。在该情况下，能够通过侧壁之中的由多孔质的高分子材料构成的区域，实现能够使培养液经过的结构。
在一个实施方式所涉及的细胞培养容器，至少一个阱可以是彼此连结的多个阱。在该情况下，可以是多个阱各自的从各底部的下端至各液体经过部的下端为止的高度恒定。例如，在具有多个阱的结构中，在对细胞团的培养状态进行观察时，如果将阱的内部的培养液用滴管等手动抽出，则难以使残留在阱的培养液的量恒定。另外，阱的个数越多，则工作量越增大。与此相对，在本发明的一个实施方式所涉及的细胞培养容器，根据将多个阱各自的从各底部的下端至各液体经过部的下端为止的高度设为恒定的结构，仅通过从第1容器使阱退出，能够以在多个阱各自的各底部保持有恒定量的培养液的状态，仅将阱内的培养液的一部分简单地排出。由此，能够以相同的条件高效地进行收容于各阱的细胞团等的培养状态的观察。此外，在这里使用的“恒定”不仅是从各底部的下端至各液体经过部的下端为止的各高度一致的情况，还包含相对于各高度的平均高度为±10％的范围内的高度。
在一个实施方式所涉及的细胞培养容器，可以是第1容器具有：多个收容空间，其能够使多个阱之中的一部分分别出入；以及至少一个分隔壁，其将多个收容空间彼此分隔。在该情况下，多个收容空间之间被水密地分隔，因此培养液不会从其他收容空间进入收容于各收容空间的阱。因此，能够避免由收容于其他收容空间的培养液引起的污染。
在一个实施方式所涉及的细胞培养容器，从底部的下端至液体经过部的下端为止的高度可以为1.0mm以上且5.0mm以下。通过相对于能够保持培养液的底部使液体经过部位于如上所述的范围，从而即使在观察细胞团等时将培养液经由液体经过部排出，也能够不使细胞团等干燥，能够容易地进行观察作业。更具体地说，直至液体经过部的下端为止的高度为1.0mm以上，由此即使在对细胞团等进行观察的情况下也能够使保持于底部的细胞团等更可靠地浸渍于培养液中。另外，直至液体经过部的下端为止的高度为5.0mm以下，由此在对细胞团等进行观察的情况下，能够将会妨碍观察的培养液更容易地排出而使得培养液成为更适当的量。
在一个实施方式所涉及的细胞培养容器，至少一个阱各自可以还具有引导部件，该引导部件对从液体经过部排出的培养液的流动进行引导。在对细胞团的培养状态进行观察时如果将阱抬起而将不需要的培养液从阱排出，则形成所排出的培养液附着于阱的下方的液体垂滴，有可能妨碍所培养的细胞团的观察。但是，细胞培养容器具有防止液体垂滴的引导部件，由此能够高效地观察细胞团。此外，在设置引导部件的情况下，可以是引导部件设置于至少一个阱各自的外周面上且比液体经过部更靠底部的下端侧的区域，向液体经过部相反侧延伸。在该情况下，能够将引导部件通过简单的结构实现。
一个实施方式所涉及的细胞培养方法可以具有：准备上述任一项的细胞培养容器的工序；将在至少一个阱所保持的细胞浸入第1容器所收容的培养液，对细胞和细胞凝集而得到的细胞团进行培养的工序；以及对细胞团进行观察的工序。对细胞团进行观察的工序包含将第2容器从第1容器取出，在经由液体经过部从至少一个阱将培养液的一部分排出的状态下，对至少一个阱内的细胞团进行观察。在该情况下，在进行观察的工序，能够从阱将培养液的一部分简单地排出。另外，在排出培养液的一部分的状态下对阱内的细胞团进行观察，因此能够抑制培养液妨碍细胞团的观察。因此，在培养细胞团的过程中能够高效地进行细胞团的培养状态的观察。
在一个实施方式所涉及的细胞培养方法，对细胞团进行观察的工序可以包含有在将第2容器从第1容器取出之后将附着于第2容器的底部的外周的液体去除。在该情况下，能够抑制由附着于第2容器的外周的培养液妨碍细胞团的观察。因此，在培养细胞团的过程中能够更高效地进行细胞团的培养状态的观察。
一个实施方式所涉及的细胞培养容器的制造方法可以制造上述的细胞培养容器，该细胞培养容器的制造方法具有通过模塑成型而制造第2容器的工序。该制造的工序具有：准备模具的工序，该模具具有上部模具、下部模具和型芯，该上部模具具有与至少一个阱各自的外形状相对应的形状的凸状部，该下部模具具有与至少一个阱各自的外形状相对应的形状的凹状部，该凹状部与凸状部相对地配置，该型芯将凸状部及凹状部贯通；以及使流入模具的树脂材料硬化而对包含至少一个阱的第2容器进行成型的工序，通过型芯可以形成作为液体经过部的孔。根据该方法，在通过模塑成型制造出的第2容器的阱，形成作为液体经过部的孔，因此能够将具有上述的结构的细胞培养容器简单地形成。因此，通过使用制造出的细胞培养容器，从而在培养细胞团的过程中能够高效地进行细胞团的培养状态的观察。
另一实施方式所涉及的细胞培养容器的制造方法可以制造上述的细胞培养容器，该细胞培养容器的制造方法具有通过模塑成型而制造第2容器的工序。该制造的工序具有：准备模具的工序，该模具具有上部模具和下部模具，该上部模具具有与至少一个阱各自的外形状相对应的形状的凸状部，该下部模具具有与至少一个阱各自的外形状相对应的形状的凹状部，该凹状部与凸状部相对地配置；以及使流入模具的树脂材料硬化而对包含至少一个阱的第2容器进行成型的工序。上部模具可以具有凸起，该凸起沿上下方向延伸，从凸状部凸出而与凹状部相接，由凸起形成作为液体经过部的狭缝。根据该方法，在通过模塑成型制造出的第2容器的阱，形成作为液体经过部的狭缝，因此能够将具有上述的结构的细胞培养容器简单地形成。因此，通过使用制造出的细胞培养容器，从而能够在培养细胞团的过程中高效地进行细胞团的培养状态的观察。
其他实施方式所涉及的细胞培养容器的制造方法可以制造上述的细胞培养容器，该细胞培养容器的制造方法具有：通过模塑成型而对呈至少一个阱的外形状的成型体进行成型的工序；以及通过激光照射而在成型体形成作为液体经过部的孔的工序。根据该方法，在制造出的阱通过激光照射而形成作为液体经过部的孔，因此能够将具有上述的结构的细胞培养容器简单地形成。因此，通过使用制造出的细胞培养容器，从而在培养细胞团的过程中能够高效地进行细胞团的培养状态的观察。
[本发明的实施方式的详细内容]
以下参照附图对本发明所涉及的细胞培养容器、细胞培养方法及细胞培养容器的制造方法的具体例进行说明。此外，本发明不受这些例示所限定，而是由权利要求书示出，意在包含与权利要求书等同的含义以及范围内的全部变更。另外，在下面的说明中对同一要素或者具有同一功能的要素标注同一标号，有时省略重复说明。
(细胞培养容器的结构)
图1及图2是示意地表示一个实施方式所涉及的细胞培养容器1的剖视图。细胞培养容器1在使用培养液S培养细胞C及细胞团M(参照图8)时使用。在图1中，细胞C由假想线表示。具体地说，细胞培养容器1是在培养液S中，用于使细胞C凝集而得到期望的状态的细胞团M的容器。细胞培养容器1具有培养液容器2(第1容器)和细胞容器3(第2容器)。
培养液容器2是用于收容培养液S的容器(皿)。培养液容器2例如为树脂制。构成培养液容器2的树脂材料例如优选聚苯乙烯，但也可以是其他树脂，也可以是玻璃或者金属。培养液容器2可以在其内侧表面进行涂敷氟等的表面处理，也可以与培养液S的性质相匹配地进行具有耐药性的表面处理。此外，培养液容器2也可以不是透明体的材料。培养液容器2的形状在俯视观察时为大致长方形状。培养液容器2具有长方形状的平坦的底板21和4个侧壁22。底板21在收容有培养液S的状态(图1所示的状态)下以沿水平面扩展的方式延伸。底板21的厚度例如为1mm。底板21的长度方向的长度例如为120mm以上，并且为132mm以下。底板21的宽度方向的长度例如为80mm以上，并且为90mm以下。
4个侧壁22沿底板21的4个缘部分别直立设置。各侧壁22从底板21的各缘部向上方延伸。侧壁22的厚度例如为1mm。侧壁22的高度H1例如为14.5mm。底板21及4个侧壁22划分出用于对培养液S进行收容的收容空间V。在本实施方式中，培养液容器2仅具有1个收容空间V。另外，培养液容器2具有将收容空间V向与底板21相反侧开放的开口部23。在底板21以沿水平面的方式设置的状态下，开口部23将收容空间V向上方开放。
细胞容器3例如是树脂制的阱板。在本实施方式中，细胞容器3由能够使观察用的光源(例如，后面记述的光源L)透过的材料构成，可以相对于可见光而透明地构成。构成细胞容器3的材料例如优选为聚苯乙烯，但也可以是聚碳酸酯或者玻璃。细胞容器3具有板状的板31、在板31设置的多个(在本实施方式中例如为96个)阱32。阱32如后面所述，包含底部32a和侧壁32b而构成。细胞容器3只要是阱32的底部32a由能够使观察用的光源透过的材料构成即可，其他部分(例如侧壁32b)可以由无法使该光源透过的材料构成。在细胞容器3的阱32的内部表面，可以进行不易使细胞C附着的表面处理或者耐化学性的表面处理。细胞容器3的底部32a以外的区域(板31或者侧壁32b)可以是与底部32a的材料不同的材料，即，可以不是能够使光源透过的材料，例如可以由丙烯酸树脂、氟树脂(例如PTFE)或者金属构成，也可以由无纺布等纤维构成。在阱32的底部32a的内部表面以外的区域，可以进行使细胞难以附着的表面处理，也可以进行耐化学性的表面处理。此外，细胞容器3也可以将上述的多个材料适当组合而构成。
如上所述的结构的细胞容器3与培养液容器2分离。图3A是图1所示的细胞容器3的俯视图。图3B是沿图1所示的细胞容器3的阱32的IIIB－IIIB线的剖视图。如图1至图3A所示，在俯视观察时，板31的外形状是比底板21大一圈的大致长方形状。板31的厚度例如为1mm。在板31排列有在板31的厚度方向贯通，用于连接阱32的多个(与阱32相同数量，在本实施方式中例如为96个)连接孔31a。连接孔31a的内径φ1例如为6.0mm。板31将多个阱32彼此连结。此外，板31具有比培养液容器2的开口部23大的外形，在将细胞容器3设置于培养液容器2时，板31与培养液容器2的开口部23的缘相接，由此实现各阱32的培养液容器2内的定位。
阱32是用于对通过培养液S培养的细胞C及细胞团M进行保持的容器。阱32的厚度例如为1mm。多个阱32构成为能够出入培养液容器2的收容空间V。在本实施方式中，全部阱32相对于1个收容空间V能够出入。多个阱32与连接孔31a分别连接。多个阱32排列于板31的一个主面31b上。在本实施方式中，细胞容器3具有以在板31的长度方向排列12列、在板31的宽度方向排列8行的阱32的方式排列的阱32。相邻的2个阱32的间距P恒定(例如为9.0mm)。多个阱32通过使板31相对于培养液容器2接近而一并配置于收容空间V，通过使板31相对于培养液容器2分离而从收容空间V一并退出。
阱32具有底部32a和将底部32a与板31进行连结的侧壁32b。底部32a呈向从板31远离的朝向凹陷的凹状，能够保持培养液S。底部32a的外形状例如为半球状。底部32a的内径φ2例如为5.2mm。侧壁32b是从底部32a的周缘部延伸至板31的连接孔31a为止的筒状的部分。底部32a及侧壁32b划分出用于对进行培养的细胞C及细胞团M进行保持的培养空间W。培养空间W的高度H2小于侧壁22的高度H1。高度H2例如为10.5mm。侧壁32b的与底板21相反侧的端部与板31的连接孔31a连通，培养空间W经由连接孔31a向外部空间开放。
在侧壁32b设置有培养液S能够经过的液体经过部4。液体经过部4构成为至少不使细胞团M经过。此外，液体经过部4也可以构成为不使细胞C经过。在本实施方式中，液体经过部4为一或多个孔41。孔41的个数可以任意地设定。在本实施方式中，对设置有多个孔41的例子进行说明。孔41沿侧壁32b的厚度方向将侧壁32b贯通。此外，孔41也可以沿相对于侧壁32b的厚度方向倾斜的方向将侧壁32b贯通。孔41与培养空间W和外部空间连通。由此，孔41使培养液S经过。孔41的形状例如在从贯通方向(即，侧壁32b的厚度方向)观察时为圆形状。孔41的与贯通方向交叉的面内的大小是不使细胞团M经过的大小，例如为直径0.01mm以上，并且为直径6.0mm以下。或者，孔41的与贯通方向交叉的面内的大小可以为直径3.0mm以下，也可以为直径1.0mm以下。在本实施方式中，孔41的与贯通方向交叉的面内的大小(直径)作为一个例子为1.0mm。
液体经过部4设置于从底部32a的前端(下端)远离规定的高度H3以上的位置。如上所述在远离底部32a的位置设置液体经过部4，由此防止观察中的细胞团M干燥。从底部32a的下端至液体经过部4的下端为止的高度H3例如在所要培养的细胞团M的直径为1mm以下的情况下，可以为1.0mm以上，高度H3可以为5.0mm以下。另外，在所要培养的细胞团M的直径为0.1mm以上2mm以下的情况下，高度H3可以为1.0mm以上，高度H3可以为4.0mm以下。并且，作为细胞团M的直径和培养液的水面的高度H3之间的关系的模式，例如在细胞团M的直径为1mm以下的情况下高度H3可以为2mm，在细胞团M的直径为1mm以上2mm以下的情况下高度H3可以为3mm以上4mm以下。另外，高度H3优选尽可能低，以使得为了防止干燥而使细胞团M不会从培养液的水面露出且不妨碍观察培养液，也可以不是上述的范围。此外，如果细胞团M的上表面和培养液的水面过于接近，则由于表面张力的影响，细胞团M的正上方的水面成为凸面，有时观察用的光相对于显微镜变得不笔直而妨碍观察，因此例如作为从细胞团M上部至培养液的水面为止的距离，优选至少确保1mm以上或2mm以上的距离。液体经过部4可以遍及从距底部32a的下端分离高度H3的位置朝向板31延伸的规定的范围R而设置。在本实施方式中，范围R是侧壁32b的整个区域。此外，范围R也可以是侧壁32b的一部分区域。在本实施方式中，在范围R内分散地设置有多个孔41。在多个阱32之间，高度H3恒定。换言之，在多个阱32之间，位于最下端的孔41的高度H3彼此相等。在这里使用的“恒定”不仅是从各底部32a的下端至各液体经过部4的下端为止的各高度H3一致的情况，还包含相对于各高度H3的平均高度为±10％的范围内的高度。此外，除了位于最下端的孔41以外的多个孔41在范围R内可以设置于任意的位置。
(细胞培养容器的制造方法)
对制造以上说明的细胞培养容器1的制造方法的一个例子进行说明。首先，通过模塑成型而制造培养液容器2(制造第1容器的工序)。例如，使颗粒状的树脂材料熔融，使熔融的树脂材料流入模具，在该状态下使其硬化。由此，制造出培养液容器2。接下来，通过模塑成型而制造细胞容器3(制造第2容器的工序)。图4A是表示在细胞培养容器1的制造方法使用的模具5的剖视图。在制造第2容器的工序，首先，准备用于模塑成型的模具5。图4B是从下方观察图4A所示的上部模具51及型芯53的图。图5A及图5B是表示细胞培养容器1的制造方法的各工序的图。
如图4A及图4B所示，模具5具有上部模具51、下部模具52和多个型芯53。上部模具51及下部模具52是用于形成板31及阱32的外形的模具。具体地说，上部模具51具有与多个阱32各自的外形状相对应的形状的多个凸状部51a。下部模具52具有与多个阱32各自的外形状相对应的形状的多个凹状部52a。在凸状部51a及凹状部52a各自形成有使多个型芯53贯通的贯通孔。
多个型芯53是用于形成液体经过部4的模具。图5A示出了成型中的一部分的阱32，图5B示出了成型后的一部分的阱32。各型芯53形成孔41。型芯53是具有与孔41相同形状的外周面的棒状部件。型芯53以将上部模具51及下部模具52贯通的状态被使用。多个型芯53与在阱32形成孔41的位置相应地，例如可以平行地排列，也可以是延伸方向交叉。多个型芯53针对每个阱32，以与所要形成的孔41的个数相对应的数量配置。每1个阱32可以通过1根型芯53形成孔41，每1个阱32也可以通过多根型芯53形成孔41。
在制造细胞容器3时，使颗粒状的树脂材料熔融，使熔融的树脂材料流入该模具5，在该状态使其硬化。由此，制造出在阱32设置有液体经过部4的细胞容器3。以上，细胞培养容器1的制造完成。此外，也可以在制造培养液容器2前制造细胞容器3，也可以将培养液容器2的制造和细胞容器3的制造并行地进行。
(细胞培养方法)
接下来，作为细胞培养方法，对细胞C及细胞团M的培养方法进行说明。在本说明书中，“细胞C及细胞团M的培养”是指将细胞C浸入培养液S而使其凝集、将细胞团M浸入培养液S而使状态变化以及使其分化。图6的(a)部～(d)部是表示细胞C及细胞团M的培养状态的变化的示意性的剖视图。浸入培养液S的细胞C(参照图6的(a)部)经过几小时至几天而凝集，成为细胞团M(参照图6的(b)部)。细胞团M进一步继续培养，由此凝集增强(参照图6的(c)部)或分化(参照图6的(d)部)。该期间根据细胞C的种类、分化的内容而不同，有时持续几天至几周。该期间，适当对细胞团M进行光学地观察。下面，具体地进行说明。
图7及图8是示意地表示一个实施方式所涉及的细胞培养方法的培养工序的剖视图。首先，准备细胞培养容器1(准备的工序)。例如，准备收容有培养液S的培养液容器2和将多个阱32向培养液容器2的收容空间V放入前的细胞容器3。接下来，如图7及图8所示，将细胞C浸入培养液S，培养将细胞C和细胞C凝集而得到的细胞团M(培养的工序)。在本工序，将多个阱32放入收容有培养液S的培养液容器2的收容空间V，由此使培养液S经由液体经过部4也进入阱32的培养空间W。由此，培养空间W成为由培养液S充满的状态。通过在该培养空间W将细胞C播种而开始培养。此时，细胞C是被保持于阱32的状态。在该状态下，至经过规定时间为止进行等待。规定时间例如是通过细胞C的凝集而得到细胞团M为止的时间。规定时间与培养对象的细胞C相应地适当设定，例如为几小时至几天。
在经过规定时间后，如图8所示得到细胞团M。此时，细胞团M是被保持于阱32的状态。接下来，对该细胞团M进行观察(观察的工序)。图9及图10是示意地表示一个实施方式所涉及的细胞培养方法的培养工序的剖视图。在本工序，首先，如图9所示，从阱32的培养空间W将培养液S的一部分排出。具体地说，将细胞容器3从培养液容器2取出。通过该操作经由液体经过部4从阱32排出培养液S的一部分。在这里被排出的培养液S的一部分是指，在阱32的培养空间W比液体经过部4的下端(最下端的孔41)位于上方的一部分的培养液S。通过该操作，多个阱32中的该一部分的培养液S一度被排出。另外，通过该操作，仅在阱32的包含底部32a的部分(培养空间W之中的比液体经过部4位于下方的部分)残存培养液S。因此，维持将细胞团M浸入培养液S的状态。
接下来，如图10所示，使光透过细胞团M而进行观察。例如，在从阱32的上方(连接孔31a)由光源L对细胞团M照射光的状态下，从阱32的下方(底部32a)通过观察装置D(例如，显微镜)进行观察。将该操作以一个或多个阱32为单位分别进行。在针对全部数量的阱32进行的细胞团M的观察完成后，1次的观察工序结束。
上述的观察的工序可以仅执行1次，也可以隔开间隔而重复执行。通过将观察的工序重复执行，由此可以适当(例如，定期地)观察细胞团M的变化的情形。图11的(a)部至(c)部是示意地表示对细胞团M的变化的情形进行观察的各观察工序的剖视图。作为细胞团M的变化的情形，例如举出细胞团M的初始的状态(参照图11的(a)部)、细胞团M的凝集增强的情形(参照图11的(b)部)、细胞团M的凝集减弱的情形(即，细胞团M的凝集迟缓的情形)或者细胞团M分化的情形(参照图11的(c)部)等。在观察的工序重复执行的情况下，在各观察的工序结束后，再次将多个阱32放入收容有培养液S的培养液容器2的收容空间V，由此经由液体经过部4使培养液S进入阱32的培养空间W。通过该操作，使多个阱32的培养空间W一并成为由培养液S充满的状态。由此，进一步进行细胞团M的培养。而且，例如在形成细胞团M后，继续细胞团M的培养，再次进行观察的工序，由此如图11的(b)部所示，可以观察细胞团M的凝集增强的情形，如图11的(c)部所示，可以观察细胞团M分化的情形。如果全部的观察的工序结束，则细胞团M的观察完成。而且，生成期望的细胞团M。此外，观察的期间根据细胞的种类、分化的内容而不同，有时为几天至几周。
(作用效果)
对以上说明的细胞培养容器1、细胞培养容器1的制造方法及细胞培养方法的作用效果进行说明。在细胞培养容器1，经由在侧壁32b设置的液体经过部4使培养液S出入阱32。因此，仅通过将阱32放入收容有培养液S的培养液容器2，就能够将阱32由培养液S充满。另外，在对细胞团M的培养状态进行观察时，仅通过从培养液容器2将阱32退出，就能够以在底部32a保持有培养液S的状态，仅将阱32内的培养液S的一部分简单地排出。因此，在培养细胞C及细胞团M的过程中能够高效地进行细胞团M的培养状态的观察。
在本实施方式所涉及的细胞培养容器1，液体经过部4是将侧壁32b贯通的孔41。根据将侧壁32b贯通的孔41，能够实现可使培养液S经过的结构。
在本实施方式所涉及的细胞培养容器1，构成阱32的材料为聚苯乙烯。聚苯乙烯具有不易与细胞C及细胞团M粘接的性质，因此适于细胞C及细胞团M的培养，通过将阱32由聚苯乙烯构成，从而例如能够将所培养的细胞团等从阱32容易地取出。
在本实施方式所涉及的细胞培养容器1，细胞容器3具有彼此连结的多个阱32，在多个阱32之间，从底部32a的下端至液体经过部4的下端为止的高度H3恒定。例如，在具有多个阱32的结构中，在对细胞团M的培养状态进行观察时，如果将阱32的内部的培养液S用滴管等手动抽出，则难以将残留在阱32的培养液S的量设为恒定。另外，阱32的个数越多，则工作量越增大。与此相对，在本实施方式所涉及的细胞培养容器1，根据在多个阱32之间将高度H3设为恒定结构，仅通过将阱32从培养液容器2退出，就能够以在多个阱32的底部32a保持有恒定量的培养液S的状态，仅将阱32内的培养液S的一部分简单地排出。
在本实施方式所涉及的细胞培养容器1，液体经过部4可以以使从底部32a的下端至液体经过部4的下端为止的高度成为1.0mm以上且5.0mm以下的方式设置于侧壁32b。通过相对于能够保持培养液S的底部32a使液体经过部4位于如上所述的范围，从而在观察细胞团等时即使将培养液S经由液体经过部4排出，也能够不使细胞团等干燥，能够容易地进行观察作业。更具体地说，直至液体经过部4的下端为止的高度为1.0mm以上，由此在对细胞团等进行观察的情况下也能够将保持于底部32a的细胞团等更可靠地浸渍于培养液中。另外，直至液体经过部4的下端为止的高度为5.0mm以下，由此在对细胞团等进行观察的情况下，能够将会妨碍观察的培养液更容易地排出而使得成为更适当的量。
本实施方式所涉及的细胞培养方法具有下述工序：准备细胞培养容器1；将在阱32所保持的细胞C浸入培养液容器2所收容的培养液S，对细胞C和细胞C凝集而得到的细胞团M进行培养；以及对细胞团M进行观察。在进行观察的工序中，在通过将细胞容器3从培养液容器2取出而经由液体经过部4从阱32将培养液S的一部分排出的状态下，对阱32内的细胞团M进行观察。由此，在进行观察的工序中，能够从阱32将培养液S的一部分简单地排出。另外，在排出培养液S的一部分的状态下对阱32内的细胞团M进行观察，因此能够抑制由于培养液S而妨碍细胞团M的观察。因此，在培养细胞C及细胞团M进的过程中能够高效地进行细胞团M的观察。另外，在得到细胞团M后，适当重复进行进一步培养细胞团M并观察的工序的情况下，在各观察的工序，能够从多个阱32将培养液S的一部分简单地排出，因此能够高效地进行各观察的工序。因此，能够高效地进行细胞团M的期望的培养状态的观察。以上，本实施方式所涉及的细胞培养方法在将细胞团M的培养状态适当重复地观察的情况下，特别有效。
本实施方式所涉及的细胞培养容器1的制造方法具有通过模塑成型而制造细胞容器3的工序，该工序具有准备模具5的工序和使流入模具5的树脂材料硬化而成型出阱32的工序，其中，模具5具有上部模具51、下部模具52和型芯53，该上部模具51具有与阱32的外形状相对应的形状的凸状部51a，该下部模具52具有与阱32的外形状相对应的形状的凹状部52a，该凹状部52a与凸状部51a相对地配置，该型芯53将凸状部51a及凹状部52a贯通，可以通过型芯53而形成作为液体经过部4的孔41。根据该结构，在通过模塑成型制造出的细胞容器3的阱32，形成作为液体经过部4的孔41，因此能够简单地形成细胞培养容器1。因此，通过使用制造出的细胞培养容器1，在培养细胞C及细胞团M的过程中能够高效地进行细胞团M的培养状态的观察。另外，在继续培养细胞团M而适当观察细胞团M的变化的状态的情况下，通过使用制造出的细胞培养容器1，能够高效地进行细胞团M的期望的培养状态的观察。
(变形例)
以上的实施方式对本发明所涉及的细胞培养容器、细胞培养容器的制造方法及细胞团的培养方法的一个实施方式进行了说明。本发明所涉及的细胞培养容器、细胞培养容器的制造方法及细胞培养方法能够将上述的各实施方式任意地变更。
例如，在上述实施方式，培养液容器2具有连续的1个收容空间V，但也可以具有多个收容空间V。图12A及图12B分别是示意地表示变形例所涉及的细胞培养容器1A的剖视图。细胞培养容器1A与细胞培养容器1的不同点在于，取代培养液容器2而是具有培养液容器2A，在其他方面具有与细胞培养容器1相同的结构。
培养液容器2A具有多个收容空间V。具体地说，培养液容器2A还具有在由上述的底板21及4个侧壁22划分的空间内配置的多个分隔壁24。分隔壁24将相邻的收容空间V水密地分隔。换言之，多个收容空间V被多个分隔壁24彼此分隔。能够使多个阱32的一部分出入各收容空间V。作为一个例子，培养液容器2A具有12个收容空间V，1个收容空间V的大小是能够收容一列对应量(96个中的8个)的阱32的大小。
分隔壁24直立设置于底板21的上表面。各分隔壁24在底板21的上表面，设置于与各收容空间V相对应的位置。分隔壁24的厚度例如为1mm。分隔壁24的高度H4例如为14.5mm。构成分隔壁24的材料可以与构成底板21的材料相同。此外，收容空间V的个数可以任意地设定。培养液容器2A可以具有与阱32相同数量(96个)的收容空间V，也可以仅具有2个收容空间V。培养液容器2A在仅具有2个收容空间V的情况下，可以仅具有1个分隔壁24。
在细胞培养容器1A，经由在侧壁32b设置的液体经过部4使培养液S出入阱32，因此也能得到与上述细胞培养容器1相同的作用效果。另外，根据培养液容器2A，多个收容空间V之间被水密地分隔，因此培养液S不会从其他收容空间V进入收容于各收容空间V的阱32。因此，能够避免由收容于其他收容空间V的培养液S引起的污染。
另外，细胞容器3的阱32的个数是一个例子，可以适当设定。图13A至图13D是分别示意地表示变形例所涉及的细胞容器3B～3E的俯视图。细胞容器3B～3E与细胞容器3的不同点在于阱32的个数，在其他方面具有与细胞容器3相同的结构。上述的细胞培养容器1如图13A所示，可以取代细胞容器3而是具备仅具有1个阱32的细胞容器3B。另外，细胞培养容器1、1A如图13B所示，也可以取代细胞容器3而是具备具有2个阱32的细胞容器3C。细胞培养容器1、1A如图13C所示，可以取代细胞容器3而是具备具有6个阱32的细胞容器3C。细胞培养容器1、1A如图13D所示，可以取代细胞容器3而是具备具有8个阱32的细胞容器3C。细胞培养容器1、1A的细胞容器也可以具有上述以外的个数的阱32，例如可以具有384个阱32。
另外，阱32的底部32a的形状是一个例子，可以适当变更。图14A及图14B分别是示意地表示变形例所涉及的阱32F、32G的剖视图。图14A所示的阱32F与阱32的不同点在于，取代底部32a而是具有底部33a，在其他方面具有与阱32相同的结构。底部33a具有周壁33b和将周壁33b的下方堵塞的圆形状的底壁33c。周壁33b呈具有与侧壁32b的内径相同直径的圆筒状。在该情况下，由底部33a及侧壁32b划分的培养空间W的整体的形状成为圆柱形状。液体经过部4(孔41)设置于从底部33a的前端(下端)远离上述的规定的高度H3的范围RF内。
图14B所示的阱32G与阱32的不同点在于，取代底部32a而是具有底部34a，在其他方面具有与阱32相同的结构。底部34a具有周壁34b和将周壁34b的下方堵塞的圆形状的底壁34c。周壁34b呈从侧壁32b的下端以圆锥状前端变细的形状。液体经过部4(孔41)设置于从底部34a的前端(下端)远离上述的规定的高度H3的范围RG内。
在阱32F、32G，培养液S也经由在侧壁32b设置的液体经过部4出入阱32F、32G。因此，在培养细胞C及细胞团M的过程中能够高效地进行细胞团M的培养状态的观察。另外，在继续培养细胞团M而适当观察细胞团M的变化的状态的情况下，能够高效地进行细胞团M的期望的培养状态的观察。
另外，液体经过部4的结构为一个例子，可以适当变更。液体经过部4的孔41的形状可以适当变更。孔41的形状例如可以是椭圆形状，也可以是半圆形状。或者，液体经过部4可以是不同形状的多个孔41的组合。
图15A至图15C分别是示意地表示变形例所涉及的液体经过部4H、4J、4K的斜视图。图15A所示的液体经过部4H设置于侧壁32b的一部分的区域(范围RH)。范围RH的下端是从底部32a的前端(下端)远离高度H3的位置。范围RH的高度例如为7.0mm。液体经过部4H是一个或多个长孔41H(狭缝)。长孔41H将侧壁32b贯通。长孔41H沿侧壁32b的延伸方向(上下方向)延伸。长孔41H的形状例如为长方形状。长孔41H的高度(在本变形例是长度方向的大小)为0.01mm以上7.0mm以下，作为一个例子，与范围RH相同(7.0mm)。长孔41H的宽度(在本变形例是宽度方向的大小)例如为0.01mm以上，并且为6.0mm以下。或者，长孔41H的宽度可以为3.0mm以下，也可以为1.0mm以下。
图15B所示的液体经过部4J设置于侧壁32b的一部分的区域(范围RJ)。范围RJ例如与范围RH相同。液体经过部4J是在该范围RJ内密集地设置的多个孔41。图15C所示的液体经过部4K设置于侧壁32b的一部分的区域(范围RK)。范围RK例如与范围RH、RJ相同。液体经过部4K是在该范围RK内密集地设置的多个孔41K。孔41K与孔41的不同点在于，在从贯通方向观察时呈菱形，在其他方面具有与孔41相同的结构。孔41K的高度例如为0.01mm以上，并且为7.0mm以下。孔41K的宽度例如为0.01mm以上，并且为6.0mm以下。或者，孔41K的宽度可以为3.0mm以下，也可以为1.0mm以下。
另外，并不限定于液体经过部为孔的情况。图16是示意地表示变形例所涉及的液体经过部4L的剖视图。如图16所示，可以通过将侧壁32b的至少一部分的区域(范围R)由与底部32a不同的材料构成，从而构成液体经过部4L。在图16所示的例子中，范围R是侧壁32b的整个区域。在该情况下，作为构成液体经过部4L的材料，可举出使培养液S经过的多孔质的高分子材料。由此，能够通过侧壁32b之中的由多孔质的高分子材料构成的区域，实现可使培养液S经过的结构。因此，在该结构中，培养液S也经由液体经过部4L而出入阱32，因此在培养细胞C的过程中能够高效地进行细胞团M的培养状态的观察。同样地，在该结构中，在继续培养细胞团M而适当观察细胞团M的变化的状态的情况下，也能够高效地进行细胞团M的期望的培养状态的观察。
另外，上述实施方式所涉及的细胞培养容器的制造方法是一个例子，可以适当变更。可以取代模具5而是使用如下述的模具5A进行第2容器制造工序。图17A是表示在变形例所涉及的细胞培养容器的制造方法使用的模具5A的剖视图。图17B是沿图17A的XVIIB－XVIIB线的剖视图。图18是表示通过变形例所涉及的细胞培养容器的制造方法进行成型后的一部分的阱32M的图。
如图17A及图17B所示，模具5A具有上部模具51A和下部模具52A。上部模具51A与上部模具51同样地，具有与多个阱32各自相同形状的多个凸状部51a。下部模具52A与下部模具52同样地，具有与多个阱32各自相同形状的多个凹状部52a。另外，上部模具51A具有从凸状部51a的表面进一步凸出的一个或多个(在图17B的例子中为4个)凸起51b。凸起51b遍及对液体经过部(后面记述的液体经过部4M)进行设置的范围而沿上下方向(即，上部模具51A和下部模具52A相对的方向)延伸。
如图18所示，阱32M与阱32的不同点在于，取代液体经过部4而是具有液体经过部4M，在其他方面具有与阱32相同的结构。凸起51b形成作为液体经过部4M的狭缝41M。每1个阱32M可以通过1根凸起51b而形成1个狭缝41M，每1个阱32也可以通过多根凸起51b而形成多个狭缝41M。在制造细胞容器3时，使颗粒状的树脂材料熔融，使熔融的树脂材料流入该模具5A，在该状态使其硬化。由此，制造出在阱32M设置有液体经过部4M的细胞容器3。
根据该结构，在通过模塑成型制造出的细胞容器3的阱32M，形成作为液体经过部4M的狭缝41M，因此能够将细胞培养容器1简单地形成。因此，通过使用制造出的细胞培养容器1，从而在培养细胞C及细胞团M的过程中能够高效地进行细胞团M的观察。另外，在继续培养细胞团M而适当观察细胞团M的变化的状态的情况下，能够高效地进行细胞团M的期望的培养状态的观察。
另外，也可以通过激光照射而形成液体经过部4。图19A及图19B和图20A及图20B是表示变形例所涉及的细胞培养容器的制造方法的各工序的图。图19A示出照射激光的工序的一部分的阱32，图19B示出通过图19A所示的工序进行成型后的一部分的阱32。在制造细胞容器3时，首先，通过模塑成型而成型出成型体30(模塑成型的工序)。成型体30呈板31及多个阱32的外形状。接下来，通过激光照射而在成型体30形成孔41(照射激光的工序)。
如图19A所示，在照射激光的工序，使用激光装置6。激光装置6具有与多个阱32相对应地排列的多个激光头61。各激光头61输出与侧壁32b倾斜交叉的朝向的激光。由此，如在图19B放大表示的那样，可以形成将侧壁32b倾斜地贯通的孔41。
或者，也可以以下述方式进行照射激光的工序。图20A示出另外的照射激光的工序的一部分的阱32，图20B示出通过图20A进行成型后的一部分的阱32。如图20A所示，在照射激光的工序中，可以取代激光装置6而是使用激光装置7。激光装置7具有与多个阱32相对应地排列的多个激光头71。各激光头71输出与侧壁32b正交的朝向的激光。在相邻的2个成型体30之间可以配置遮蔽板72。或者，可以不配置遮蔽板72，由此遍及多个成型体30而照射激光。由此，如图20B所示，可以形成在侧壁32b的厚度方向将该侧壁32b贯通的孔41。
通过上述任意的照射激光的工序，如果作为液体经过部4的全部的孔41的形成完成，则制造出在阱32设置有液体经过部4的细胞容器3。根据这些结构，在制造出的阱32通过激光照射而形成作为液体经过部4的孔41，因此能够简单地形成细胞培养容器1。因此，通过使用制造出的细胞培养容器1，从而在培养细胞C及细胞团M的过程中能够高效地进行细胞团M的观察。另外，在继续培养细胞团M而适当观察细胞团M的变化的状态的情况下，能够高效地进行细胞团M的期望的培养状态的观察。
图21至图28是示意地表示另外的变形例所涉及的阱的图。阱32在通过从光源L照射出的光对细胞团M进行观察时，从培养液容器2被取出。此时，可想到从液体经过部4排出的培养液S为液体垂滴(参照图29)，会附着于阱32的底部32a的外侧。在该情况下，培养液S的液滴位于将光源L、细胞团M和观察装置D连接的线上，有可能妨碍细胞团M的观察。因此，例如如图21、图22及图23所示，可以在底部32a、33a、34a的外周面上，分别设置对从液体经过部4排出的培养液S的流动进行引导的引导部件80、81、82。各引导部件80至82例如是以圆周状延伸的筒状部件。各引导部件80至82设置于各阱32、32F、32G的外周面上且比液体经过部4靠底部32a、33a、34a侧的区域，向与液体经过部4相反侧(即，图示的下侧)延伸。此外，各引导部件80至82只要具有不将培养液S传导至底部32a、33a、34a的长度即可，可以是与底部32a、33a、34a的下端同等的长度，另外也可以比其长。引导部件80至82的长度例如能够设为0.5mm以上且10mm以下。由此，在将具有阱32、32F或者32G的细胞容器3从培养液容器2取出时能够防止从液体经过部4排出的培养液S的液体垂滴妨碍细胞团M的观察。
另外，如图24所示，引导部件83可以设置为朝向阱32的外侧倾斜。在该情况下，引导部件83可以相对于上下方向以90度以内的倾斜角朝向外侧倾斜。相反地，如图25所示，引导部件84也可以设置为朝向阱32的内侧倾斜。在该情况下，可以相对于上下方向以45度以内的倾斜角向内侧倾斜。如果是该角度，则不会妨碍观察装置D的设置。另外，如图21等所示，可以是引导部件80从侧壁32b以直线状向下方延伸的结构，但如图26所示，也可以是引导部件85位于比侧壁32b更靠径向的内侧的位置，从底部32a的中途部分向下方延伸的结构。但是，在图26所示的结构中，引导部件85的相对的距离能够设为大于所要观察的细胞团M的直径。例如，在细胞团M的直径为1mm以下的情况下，引导部件85的设置部位能够设为从底部32a的中心起直径1mm以上的范围的区域。由此，能够防止由细胞团M的观察装置D妨碍观察的情况。
另外，引导部件是用于防止液体垂滴的结构，因此无需配置于底部32a的圆周整体，例如，如图27所示，在液体经过部4设置在侧壁32b的一方的阱32L的情况下，可以仅在设置有液体经过部4侧设置引导部件86。在该情况下，引导部件86可以是半筒形状或者剖面圆弧状的部件。另外，即使在将引导部件以在周向延伸的方式设置的情况下，如图28所示，在液体经过部4设置在侧壁32b的一方的阱32L的情况下，也可以在没有设置液体经过部4侧在引导部件87的一部分设置孔87a。
另外，也可以构成为在设置引导部件80等的基础上或将其取代，如图29所示，细胞培养容器1还具有液体垂滴去除装置90。液体垂滴去除装置90例如由树脂或者金属构成。可以在液体垂滴去除装置90之上，例如设置用于对培养液S的液滴S1进行吸水的纱布91。另外，也可以设为液体垂滴去除装置90的基座本身由吸收性的材料(海绵材料)构成，在进行观察前将附着于细胞培养容器1的阱32的底部32a的外周的培养液S的液滴S1吸收而去除。为了避开引导部件80等，液体垂滴去除装置90可以是表面凹凸的形状，在没有引导部件80等的情况下表面可以是平坦状。此外，为了防止污染，在液体垂滴去除装置90的基座或其上配置的纱布91可以由能够灭菌的材料构成。
另外，上述实施方式及各变形例可以彼此组合。
标号的说明
1、1A…细胞培养容器
2、2A…培养液容器(第1容器)
3、3B、3C、3D、3E、…细胞容器(第2容器)
4、4H、4J、4K、4L、4M…液体经过部
5、5A…模具
6、7…激光装置
21…底板
22…侧壁
23…开口部
24…分隔壁
30…成型体
31…板
31a…连接孔
32、32F、32G、32M、32L…阱
32a、33a、34a…底部
32b…侧壁
33b、34b…周壁
33c、34c…底壁
41、41K…孔
41H…长孔
41M…狭缝
51、51A…上部模具
51a…凸状部
51b…凸起
52、52A…下部模具
52a…凹状部
53…型芯
61、71…激光头
72…遮蔽板
80、81、82、83、84、85、86、87…引导部件
87a…孔
90…液体垂滴去除装置
91…纱布
C…细胞
D…观察装置
H1、H2、H3、H4…高度L…光源
M…细胞团
P…间距
R、RF、RG、RH、RJ、RK…范围S…培养液
S1…液滴
V…收容空间
W…培养空间
φ1、φ2…内径

Claims (15)

1.一种细胞培养容器，其具有：
第1容器，其构成为收容培养液；以及
第2容器，其具有在对由所述培养液培养的细胞及细胞团的任一者或者两者进行保持的状态下能够相对于所述第1容器出入的至少一个阱，
所述至少一个阱各自具有：
底部，其能够保持所述培养液；以及
侧壁，其从所述底部的周缘部延伸，
在所述侧壁设置有液体经过部，该液体经过部能够使收容于所述第1容器的所述培养液经过。
2.根据权利要求1所述的细胞培养容器，其中，
所述液体经过部是将所述侧壁贯通的至少一个孔。
3.根据权利要求1或2所述的细胞培养容器，其中，
构成所述至少一个阱的材料是聚苯乙烯。
4.根据权利要求1所述的细胞培养容器，其中，
所述液体经过部是所述侧壁的至少一部分的区域，
所述区域由使所述培养液经过的多孔质的高分子材料构成。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的细胞培养容器，其中，
所述至少一个阱是彼此连结的多个阱。
6.根据权利要求5所述的细胞培养容器，其中，
所述多个阱各自的从所述各底部的下端至所述各液体经过部的下端为止的高度恒定。
7.根据权利要求5或6所述的细胞培养容器，其中，
所述第1容器具有：
多个收容空间，其能够使所述多个阱之中的一部分分别出入；以及
至少一个分隔壁，其将所述多个收容空间彼此分隔。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的细胞培养容器，其中，
从所述底部的下端至所述液体经过部的下端为止的高度为1.0mm以上且5.0mm以下。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的细胞培养容器，其中，
所述至少一个阱各自还具有引导部件，该引导部件对从所述液体经过部排出的所述培养液的流动进行引导。
10.根据权利要求9所述的细胞培养容器，其中，
所述引导部件设置于所述至少一个阱各自的外周面上且比所述液体经过部更靠所述底部的下端侧的区域，向与所述液体经过部相反侧延伸。
11.一种细胞培养方法，其具有：
准备权利要求1至10中任一项所述的细胞培养容器的工序；
将在所述至少一个阱所保持的所述细胞浸入所述第1容器所收容的所述培养液，对所述细胞和所述细胞凝集而得到的细胞团进行培养的工序；以及
对所述细胞团进行观察的工序，
对所述细胞团进行观察的工序包含将所述第2容器从所述第1容器取出，在经由所述液体经过部从所述至少一个阱将所述培养液的一部分排出的状态下，对所述至少一个阱内的所述细胞团进行观察。
12.根据权利要求11所述的细胞培养方法，其中，
对所述细胞团进行观察的工序包含有在将所述第2容器从所述第1容器取出之后将附着于所述第2容器的所述底部的外周的液体去除。
13.一种细胞培养容器的制造方法，其制造权利要求1所述的细胞培养容器，
该细胞培养容器的制造方法具有通过模塑成型而制造所述第2容器的工序，
所述工序具有：
准备模具的工序，该模具具有上部模具、下部模具和型芯，该上部模具具有与所述至少一个阱各自的外形状相对应的形状的凸状部，该下部模具具有与所述至少一个阱各自的外形状相对应的形状的凹状部，该凹状部与所述凸状部相对地配置，该型芯将所述凸状部及所述凹状部贯通；以及
使流入所述模具的树脂材料硬化而对包含所述至少一个阱的所述第2容器进行成型的工序，
通过所述型芯而形成作为所述液体经过部的孔。
14.一种细胞培养容器的制造方法，其制造权利要求1所述的细胞培养容器，
该细胞培养容器的制造方法具有通过模塑成型而制造所述第2容器的工序，
所述工序具有：
准备模具的工序，该模具具有上部模具和下部模具，该上部模具具有与所述至少一个阱各自的外形状相对应的形状的凸状部，该下部模具具有与所述至少一个阱各自的外形状相对应的形状的凹状部，该凹状部与所述凸状部相对地配置；以及
使流入所述模具的树脂材料硬化而对包含所述至少一个阱的所述第2容器进行成型的工序，
所述上部模具具有凸起，该凸起沿上下方向延伸，从所述凸状部凸出而与所述凹状部相接，
通过所述凸起而形成作为所述液体经过部的狭缝。
15.一种细胞培养容器的制造方法，其制造权利要求1所述的细胞培养容器，
该细胞培养容器的制造方法具有：
通过模塑成型而对呈所述至少一个阱的外形状的成型体进行成型的工序；以及
通过激光照射而在所述成型体形成作为所述液体经过部的孔的工序。
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