CN114432364A - 一种抗炎、降血脂的组合物、产品及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种抗炎、降血脂的组合物、产品及其制备方法和应用，属于功能食品技术领域。本发明提供了一种抗炎、降血脂的中药组合物，包括糖茶藨子果实提取物、糖茶藨子茎叶提取物、桑叶提取物、荷叶提取物、燕麦β‑葡聚糖和壳寡糖，所述组合物以总黄酮作为活性成分，还含有茶多酚等有效成分。经实验验证，本发明所述组合物协同作用，具有良好的抗炎和降低血脂的效果。同时，本发明所述组合物原料均为药食同源的材料，可长期食用，无毒副作用，具有很好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及功能食品技术领域，特别是涉及一种抗炎、降血脂的组合物、产品及其制备方法和应用。
背景技术
炎症是由细菌或真菌侵入人体而引发的，目前，临床上主要使用抗生素来治疗细菌等引发的炎症疾病。但是，抗生素存在很多不良反应，对身体产生不良的影响，且抗生素在抗炎作用的同时，也会导致病菌潜移默化的对抗生素产生耐药性。
在我国血脂异常的总人数已经逾1.6亿人，这些患者人数还在不断增长。值得我们关注的是，数百万冠心病和脂肪肝患者需要降脂治疗。根据医学疾病的相关统计数据，在我国因为血脂异常而导致的脑梗塞、心肌梗死、脑出血、偏瘫等相关疾病死亡人数正以每年12％的速度增长。据研究显示，50％的心肌梗死病例未被制止，80％的心脏病患者为无症状表现者，86％的心脏病患者在发病很长时间之前就已经有了血脂指标异常的表现。因而，提供一种药食同源，能够代替抗生素实现抗炎症效果且具有降脂功效的产品很有必要。
发明内容
本发明的目的在于提供了一种抗炎、降血脂的组合物，由药食同源的原料组成，可长期食用，对抗炎和降血脂具有显著的增效作用。
为解决上述技术问题，本发明提供了以下技术方案：
本发明提供了一种抗炎、降血脂的组合物，包括糖茶藨子果实提取物、糖茶藨子茎叶提取物、桑叶提取物、荷叶提取物、燕麦β-葡聚糖、壳寡糖。
优选的，所述糖茶藨子果实提取物、糖茶藨子茎叶提取物、桑叶提取物、荷叶提取物、燕麦β-葡聚糖、壳寡糖的质量比为(40-90)：(40-90)：(20-50)：(20-50)：(2-10)：(0.5-2)。
本发明提供了上述组合物的制备方法，所述方法包括如下步骤：
将糖茶藨子果实、糖茶藨子茎叶、桑叶和荷叶混合进行粉碎、水浸提，得到的浸提液经膜过滤、超滤膜除杂后截留分子150D的滤液，所述滤液干燥后即得包括糖茶藨子果实提取物、糖茶藨子茎叶提取物、桑叶提取物和荷叶提取物的提取物A；
将所述提取物A与燕麦β-葡聚糖、壳寡糖混合即得所述中药组合物。
优选的，所述粉碎的粒度为15-25目。
优选的，所述水浸提的温度为42-58℃。
优选的，所述水浸提的料液比为1g：15mL-1g：25mL，所述水浸提的次数为2-4次。
优选的，所述膜过滤采用的为0.2μm陶瓷膜。
优选的，所述超滤膜除杂时的截留分子量为10000D。
本发明还提供了一种抗炎、降血脂的产品，所述产品以上述的组合物作为活性成分。
本发明还提供了上述的组合物或上述的制备方法在制备抗炎、降血脂产品中的应用。
本发明提供了一种抗炎、降血脂的组合物，包括糖茶藨子果实提取物、糖茶藨子茎叶提取物、桑叶提取物、荷叶提取物、燕麦β-葡聚糖和壳寡糖，所述组合物以总黄酮作为活性成分。经实验验证，本发明所述组合物协同作用，具有良好的抗炎和降低血脂的效果。同时，本发明所述组合物原料均为药食同源的材料，可长期食用，无毒副作用，具有很好的应用前景。
附图说明
图1为斑马鱼油红O染色后血脂分析区域，其中A为斑马鱼油红O染色后结果，B为分析区域放大图。
图2为本发明组合物处理后尾部血管染色典型图，其中A为模型对照组，B为辛伐他汀组，C为本发明组合物浓度55.6μg/mL组，D为本发明组合物浓度166.7μg/mL组，E为本发明组合物浓度500μg/mL组。
图3为本发明组合物处理后斑马鱼尾部血管血脂光密度总和(像素)与模型对照组比较结果。
图4为本发明组合物处理后斑马鱼降血脂作用与模型对照组比较结果。
图5为本发明组合物处理后斑马鱼炎症部位中性粒细胞个数典型图，其中，(1)为正常对照组，(2)为模型对照组，(3)为吲哚美辛组，(4)为本发明组合物浓度222.2μg/mL组，(5)为本发明组合物浓度666.7μg/mL组，(6)为本发明组合物浓度2000μg/mL组。
图6为本发明组合物处理后斑马鱼炎症部位中性粒细胞个数(个)与模型对照组比较。
图7为本发明组合物处理后斑马鱼炎症消退作用与模型对照组比较。
具体实施方式
本发明提供了一种抗炎、降血脂的组合物，包括糖茶藨子果实提取物、糖茶藨子茎叶提取物、桑叶提取物、荷叶提取物、燕麦β-葡聚糖、壳寡糖。
本发明中，所述糖茶藨子果实提取物、糖茶藨子茎叶提取物、桑叶提取物、荷叶提取物、燕麦β-葡聚糖、壳寡糖的质量比优选为(40-90)：(40-90)：(20-50)：(20-50)：(2-10)：(0.5-2)，更优选为(50-80)：(50-80)：(30-40)：(30-40)：(4-8)：(1.1-1.8)，最优选为(65-70)：(65-70)：(32-38)：(32-38)：(5-6)：(1.5-1.7)。
本发明提供了上述组合物的制备方法，所述方法包括如下步骤：
将糖茶藨子果实、糖茶藨子茎叶、桑叶和荷叶混合进行粉碎、水浸提，得到的浸提液经膜过滤、超滤膜除杂后截留分子150D的滤液，所述滤液干燥后即得包括糖茶藨子果实提取物、糖茶藨子茎叶提取物、桑叶提取物和荷叶提取物的提取物A；将所述提取物A与燕麦β-葡聚糖、壳寡糖混合即得所述组合物。
本发明中，所述粉碎的粒度优选为15-25目，更优选为20目。所述水浸提的温度优选为42-58℃，更优选为50℃。所述水浸提的料液比优选为1g：15mL-1g：25mL，更优选为1g：20mL；所述水浸提的次数优选为2-4次，更优选为3次。本发明对所述粉碎的方法并没有特殊限定，采用本领域常规的粉碎方法即可。
本发明将得到的浸提液经膜过滤、超滤膜除杂后截留分子150D的滤液。所述膜过滤优选为0.2μm陶瓷膜过滤，所述超滤膜除杂时的截留分子量优选为10000D。本发明对所述超滤膜的材料并没有特殊限定，在本发明的具体实施例中，所述超滤膜的材料优选为聚醚砜。本发明中，所述超滤膜除杂后优选的经纳滤膜浓缩得到所述分子150D的滤液。
本发明所述滤液干燥后即得包括糖茶藨子果实提取物、糖茶藨子茎叶提取物、桑叶提取物和荷叶提取物的提取物A。本发明对所述干燥的方式并没有特殊限定，在本发明的具体实施例中，所述干燥优选为真空干燥。本发明中，所述提取物A的活性成分为总黄酮。
本发明提供了一种抗炎、降血脂的产品，所述产品以上述的组合物作为活性成分。本发明还提供了上述的组合物或上述的制备方法在制备抗炎、降血脂产品中的应用。本发明中，所述产品优选包括食品或药品。
在本发明的具体实施例中，所用仪器和设备包括：荧光立体显微镜(Nikon AZ100，Japan)；解剖显微镜(SZX7，OLYMPUS，Japan)；与显微镜相连的相机(VertA1)；精密电子天平(CP214，OHAUS，America)；6孔板(Nest Biotech，China)；甲基纤维素(Sigma，USA)；蛋黄粉(北京开元，批号20170626)；油红O(Oil Red O，批号SLBP5248V，Sigma)；二甲基亚砜(DMSO，Sigma，France)五水合硫酸铜(批号120201，西陇化工股份有限公司)。
本发明中，所用原料、试剂与设备均为已知产品，采用常规市售产品即可。
为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
(1)将糖茶藨子果实500g、糖茶藨子茎叶500g、桑叶200g、荷叶200g混合，粗碎为粒度20目；
(2)将步骤(1)粉碎后的混合物加水浸提，料液比1g:20mL，浸提温度50℃，提取3次；
(3)步骤(2)水浸提后的溶液经0.2μm陶瓷膜膜微滤；
(4)微滤后的溶液采用聚醚砜超滤膜除杂，截留分子量为10000D的组分；
(5)步骤(4)截留后的组分继续进行纳滤膜浓缩，截留分子量150D的组分进行真空干燥，得到的即为糖茶藨子果实、糖茶藨子茎叶、桑叶、荷叶制成的提取物A；
(6)将提取物A与20g燕麦β-葡聚糖、5g壳寡糖混合，得到本发明所述组合物。
实施例2
(1)将糖茶藨子果实600g、糖茶藨子茎叶600g、桑叶300g、荷叶300g混合，粗碎为粒度15目；
(2)将步骤(1)粉碎后的混合物加水浸提，料液比1g:20mL，浸提温度42℃，提取3次；
(3)步骤(2)水浸提后的溶液经0.2μm陶瓷膜膜微滤；
(4)微滤后的溶液采用聚醚砜超滤膜除杂，截留分子量为10000D的组分；
(5)步骤(4)截留后的组分继续进行纳滤膜浓缩，截留分子量150D的组分进行真空干燥，得到的即为糖茶藨子果实、糖茶藨子茎叶、桑叶、荷叶制成的提取物A；
(6)将提取物A与25g燕麦β-葡聚糖、15g壳寡糖混合，得到本发明所述组合物。
实施例3
(1)将糖茶藨子果实800g、糖茶藨子茎叶800g、桑叶400g、荷叶400g混合，粗碎为粒度25目；
(2)将步骤(1)粉碎后的混合物加水浸提，料液比1g:20mL，浸提温度58℃，提取4次；
(3)步骤(2)水浸提后的溶液经0.2μm陶瓷膜膜微滤；
(4)微滤后的溶液采用聚醚砜超滤膜除杂，截留分子量为10000D的组分；
(5)步骤(4)截留后的组分继续进行纳滤膜浓缩，截留分子量150D的组分进行真空干燥，得到的即为糖茶藨子果实、糖茶藨子茎叶、桑叶、荷叶制成的提取物A；
(6)将提取物A与100g燕麦β-葡聚糖、20g壳寡糖混合，得到本发明所述组合物。
实施例4
一、实验动物和样品
1.实验动物
(1)黑色素等位基因突变型半透明Albino品系斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行。年龄为受精后5天，共150尾，每实验组为30尾，用于本发明实施例1组合物降血脂作用评价。
(2)转基因中性粒细胞荧光斑马鱼，以自然成对交配繁殖方式进行。年龄为受精后3天，共180尾，每实验组为30尾，用于本发明实施例1组合物抗炎作用评价。
以上斑马鱼均饲养于28℃的养鱼用水中(水质：每1L反渗透水中加入200mg速溶海盐，电导作用为480～510μS/cm；pH为6.9～7.2；硬度为53.7～71.6mg/LCaCO3)。饲养管理符合国际AAALAC认证的要求。
2.实验样品
本发明实施例1所述组合物，临用时用养鱼用水配制成20mg/mL母液，现配现用。
辛伐他汀，白色粉末，批号为UZDBF-2K，购自梯希爱(上海)化成工业发展有限公司。临用时用100％DMSO配制成4mg/mL的母液备用，用100％DMSO按需稀释，最终工作液中DMSO浓度为0.1％。
吲哚美辛，白色粉末，阴凉柜避光保存，批号为D1929098，购自阿拉丁试剂(上海)有限公司，临用时用100％DMSO配制成28.6mg/mL母液，最终工作液中DMSO浓度为0.1％。
二、降血脂作用评价
1.随机选取5dpf黑色素等位基因突变型半透明Albino品系斑马鱼于烧杯中，用蛋黄粉喂饲斑马鱼建立高血脂模型，模型建立后，随机选取150尾模型斑马鱼于6孔板中，每孔均处理30尾斑马鱼，每孔容量为3mL，具体分组和处理情况如下表1：
表1分组情况
| 组别 | 处理 |
| 实验1组 | 模型对照组 |
| 实验2组 | 给予阳性对照药辛伐他汀40ng/mL |
| 实验3组 | 水溶给予本发明实施例1组合物55.6μg/mL |
| 实验4组 | 水溶给予本发明实施例1组合物166.7μg/mL |
| 实验5组 | 水溶给予本发明实施例1组合物500μg/mL |
各实验组处理48h后，用油红O进行染色，染色后每组随机选取10尾斑马鱼在解剖显微镜下拍照并采集数据，分析统计斑马鱼尾部血管血脂光密度总和，根据光密度总和的统计学结果评价本发明实施例1组合物的降血脂作用。统计学处理结果用mean±SE表示，降血脂作用计算公式如下：
用方差分析和Dunnett'sT-检验进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异。
2.实验结果
油红染色后显微镜下拍照采集数据结果如图1和图2所示；斑马鱼尾部血管血脂光密度总和降血脂作用结果如下表2和图3-4所示。
表2本发明实施例1组合物处理斑马鱼降血脂分析结果(n＝10)
与模型对照组比较，**p<0.01，***p<0.001。
根据表2以及图1-4可以看出，阳性对照药辛伐他汀40ng/mL浓度组斑马鱼尾部血管血脂光密度总和(4486像素)与模型对照组(8147像素)比较p<0.001，其对斑马鱼血脂降低作用为45％，说明40ng/mL浓度的辛伐他汀具有明显的降血脂作用。
本发明实施例1组合物55.6μg/mL、166.7μg/mL和500μg/mL浓度组斑马鱼尾部血管血脂光密度总和分别为5736、4919和3267像素，血脂降低作用分别为30％、40％和60％，与模型对照组比较，各浓度组p<0.01&p<0.001&p<0.001，提示本发明实施例1组合物对蛋黄粉诱导的斑马鱼高血脂具有明显的降血脂作用。
三、抗炎作用评价
1.随机选取180尾受精后3天(3dpf)转基因中性粒细胞荧光斑马鱼于6孔板中，每孔均处理30尾斑马鱼，每孔容量为3mL。具体分组和处理情况如下表3：
表3分组情况
| 组别 | 处理 |
| 实验1组 | 正常对照组，给予养鱼用水 |
| 实验2组 | 模型对照组 |
| 实验3组 | 给予阳性对照药吲哚美辛28.6μg/mL |
| 实验4组 | 水溶给予本发明实施例1组合物222.2μg/mL |
| 实验5组 | 水溶给予本发明实施例1组合物666.7μg/mL |
| 实验6组 | 水溶给予本发明实施例1组合物2000μg/mL |
各组分别处理1h后，除正常对照组外，其余实验组均水溶给予五水合硫酸铜诱导斑马鱼建立神经性炎症模型。各浓度组与五水合硫酸铜共同处理2h后，每组随机选取10尾斑马鱼在荧光显微镜下拍照，用ImageJ软件进行图像分析并采集数据，分析统计斑马鱼炎症部位中性粒细胞个数，根据炎症部位中性粒细胞个数的统计学结果评价本发明组合物的抗炎作用。统计学处理结果用mean±SE表示。炎症消退作用计算公式如下：
用方差分析和Dunnett'sT-检验进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异。
2.实验结果
统计斑马鱼炎症部位中性粒细胞个数结果如下表4和图5-7所示。
表4本发明组合物处理斑马鱼抗炎作用评价实验结果(n＝10)
与模型对照组比较，***p<0.001。
根据表4和图5-7可以看出，模型对照组斑马鱼炎症部位中性粒细胞个数(21.1个)与正常对照组(3.2个)比较p<0.001，表明模型建立成功。阳性对照药吲哚美辛28.6μg/mL浓度组斑马鱼炎症部位中性粒细胞个数为12.5个，与模型对照组比较p<0.001，其对斑马鱼炎症消退作用为41％，说明吲哚美辛具有明显的抗炎作用。
本发明组合物222.2μg/mL、666.7μg/mL和2000μg/mL浓度组斑马鱼炎症部位中性粒细胞个数分别为6.1、3.4和5.5个，与模型对照组比较均p<0.001，炎症消退作用分别为71％、84％和74％。提示本发明组合物对五水合硫酸铜诱导的斑马鱼炎症具有明显的抗炎作用。
由以上实施例可以看出，本发明提供了一种抗炎、降血脂的组合物，经实验表明，本发明所述组合物对蛋黄粉诱导的斑马鱼高血脂具有降血脂作用，且对五水合硫酸铜诱导的斑马鱼炎症也具有明显的抗炎作用。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (10)
1.一种抗炎、降血脂的组合物，其特征在于，包括糖茶藨子果实提取物、糖茶藨子茎叶提取物、桑叶提取物、荷叶提取物、燕麦β-葡聚糖、壳寡糖。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述糖茶藨子果实提取物、糖茶藨子茎叶提取物、桑叶提取物、荷叶提取物、燕麦β-葡聚糖、壳寡糖的质量比为(40-90)：(40-90)：(20-50)：(20-50)：(2-10)：(0.5-2)。
3.权利要求1或2所述组合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
将糖茶藨子果实、糖茶藨子茎叶、桑叶和荷叶混合进行粉碎、水浸提，得到的浸提液经膜过滤、超滤膜除杂后截留分子150D的滤液，所述滤液干燥后即得包括糖茶藨子果实提取物、糖茶藨子茎叶提取物、桑叶提取物和荷叶提取物的提取物A；
将所述提取物A与燕麦β-葡聚糖、壳寡糖混合即得所述组合物。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述粉碎的粒度为15-25目。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述水浸提的温度为42-58℃。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述水浸提的料液比为1g：15mL-1g：25mL，所述水浸提的次数为2-4次。
7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述膜过滤采用的为0.2μm陶瓷膜。
8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述超滤膜除杂时的截留分子量为10000D。
9.一种抗炎、降血脂的产品，其特征在于，所述产品以权利要求1或2所述的组合物作为活性成分。
10.权利要求1或2所述的组合物或权利要求3-8任意一项所述的制备方法在制备抗炎、降血脂产品中的应用。
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