CN114414673A - 一种鉴别植物油种类的方法 - Google Patents
一种鉴别植物油种类的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114414673A CN114414673A CN202111536782.7A CN202111536782A CN114414673A CN 114414673 A CN114414673 A CN 114414673A CN 202111536782 A CN202111536782 A CN 202111536782A CN 114414673 A CN114414673 A CN 114414673A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- oil
- mass
- vegetable
- vegetable oil
- charge ratio
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 title claims abstract description 101
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 title claims abstract description 101
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims abstract description 61
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 claims abstract description 61
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 46
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 26
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 claims abstract description 17
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 claims abstract description 17
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 claims abstract description 16
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 claims abstract description 16
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 claims abstract description 14
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 239000000944 linseed oil Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000000828 canola oil Substances 0.000 claims abstract description 11
- 235000021388 linseed oil Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 235000020238 sunflower seed Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 235000019519 canola oil Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 84
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 43
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 19
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 17
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 claims description 15
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 12
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 10
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 9
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 6
- 108010022337 Leucine Enkephalin Proteins 0.000 claims description 5
- URLZCHNOLZSCCA-UHFFFAOYSA-N leu-enkephalin Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1CC(N)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)NC(C(=O)NC(CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 URLZCHNOLZSCCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- HQVFCQRVQFYGRJ-UHFFFAOYSA-N formic acid;hydrate Chemical compound O.OC=O HQVFCQRVQFYGRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000002386 leaching Methods 0.000 claims description 4
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 3
- 239000004047 hole gas Substances 0.000 claims description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 238000001196 time-of-flight mass spectrum Methods 0.000 claims description 2
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 claims 1
- 239000008157 edible vegetable oil Substances 0.000 abstract description 14
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 7
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 6
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 7
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 7
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 7
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 7
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 5
- 239000010773 plant oil Substances 0.000 description 5
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 description 4
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 description 4
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 238000011197 physicochemical method Methods 0.000 description 2
- 238000000513 principal component analysis Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 2
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 2
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 2
- 235000019487 Hazelnut oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000004497 NIR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000001069 Raman spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000001237 Raman spectrum Methods 0.000 description 1
- 241000207961 Sesamum Species 0.000 description 1
- 235000003434 Sesamum indicum Nutrition 0.000 description 1
- 235000019498 Walnut oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 150000001793 charged compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000010468 hazelnut oil Substances 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001558 permutation test Methods 0.000 description 1
- -1 phytosterols Chemical class 0.000 description 1
- 229940068065 phytosterols Drugs 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000013513 substance screening Methods 0.000 description 1
- 238000001328 terahertz time-domain spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000008170 walnut oil Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
- G01N30/72—Mass spectrometers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/86—Signal analysis
- G01N30/8624—Detection of slopes or peaks; baseline correction
- G01N30/8631—Peaks
- G01N30/8634—Peak quality criteria
Landscapes
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Quality & Reliability (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明公开了一种鉴别植物油种类的方法。所述的植物油包括花生油、大豆油、芥花油、橄榄油、芝麻油、玉米油、葵花籽油、稻米油、亚麻籽油、调和油，所述的方法采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用仪对植物油进行检测分析。本发明通过筛选每种植物油的特异物质，获取特异物质准确的质荷比和二级质谱图，构成植物油种类鉴别的候选成分列表，然后在多种调和用油和其他品牌的植物油进行验证，确定食用植物油种类的鉴别成分，利用上述特异物质物质可准确鉴定食用植物油的种类，包括调和油中的植物油种类，检测速度快、效率高，适合分析大批量样品，具有较好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种鉴别植物油种类的方法，特别涉及一种通过超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用仪鉴别植物油种类的方法。本发明属于食品检测技术领域。
背景技术
食用植物油种类繁多，种类不同，其具体成分和营养价值也不同。受总产量，营养价值，生产成本和消费群体等因素的影响，不同植物油的价格差异非常大。不同种类的植物油具有不同的固有特性，如色泽、气味、营养价值、特殊的化学成分和脂肪酸组成。根据上述差异，可利用理化方法可建立分析不同植物油的方法。目前主要采用电导率法、核磁共振、红外光谱法、太赫兹时域光谱法、拉曼光谱法、气相色谱法、液相色谱法、离子色谱法以及色谱质谱联用技术等对食用植物油进行掺假鉴别。
例如Christy等将近红外光谱和化学计量学有效结合起来用于橄榄油中大豆油、葵花籽油、玉米油、核桃油和榛子油等掺假物的定性、定量鉴别，建立了525种掺假混合油波谱扫描数据的定性定量分析模型，区分掺假植物油。核磁共振、紫外光谱、红外光谱和拉曼光谱等光谱学方法对植物进行区分，不需要复杂前处理，操作简单迅速，但必须建立有效的数据库，并结合化学计量学对数据进行统计分析才能用于实际样品的定性或定量识别。色谱法和质谱法主要通过分析不同植物油中的脂肪酸、植物甾醇、甘油三酯等的种类及含量来区分各种植物油。不同的食用植物油脂肪酸组成与含量均不相同，掺伪后必然会改变其脂肪酸的组成和含量。分析油品中脂肪酸组成和含量，再与其对应的纯品油脂肪酸构成比较，可快速鉴别是否掺伪。然而，不同产地、不同品种可影响食用植物油的脂肪酸组成和含量，限制了该方法的应用。利用PCR技术检测植物种子特异DNA片段，进而判断植物油种类，但是该方法只适用于已知转基因序列的转基因植物提炼植物油种类的鉴别，实际应用受限。
目前对于各种食用植物油的掺伪检测方法研究较多，各种方法都有其优缺点。目前所有方法都是基于某一类物质含量的差异、整体光谱图的差异，或者结合化学计量法进行区分，但都没有鉴定出的不同植物油的特异成分，不能具体定性掺杂植物油的种类，都不是属于肯定或确定的定性方法。
不同植物油在组分种类或含量上有一定差别，利用理化方法分析不同植物油的组成成分，可以对植物油进行区分。
发明内容
本发明的目的是提供一种通过超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用仪鉴别植物油种类的方法。
为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：
本发明通过高效液相色谱串联飞行时间质谱联用仪检测了9种不同的常见食用植物油的成分，依据检测标准筛选每种植物油的成分，然后比较分析筛选出每种植物油的特异成分；通过高效液相色谱串联飞行时间质谱联用仪获得特异成分的保留时间、质荷比和二级质谱图，用于不同植物油的种类鉴别分析；最后通过不同品牌的同种植物油、不同加工方式的植物油和调和油，确定不受品牌、产地和加工方式影响的植物油的特异成分，基于上述确定的特异成分，可用于不同植物油种类的快速特异的鉴定，为评估植物油种类、质量和掺假鉴别提供有利帮助。
具体的，本发明的一种鉴别植物油种类的方法，所述的植物油包括花生油、大豆油、芥花油、橄榄油、芝麻油、玉米油、葵花籽油、稻米油、亚麻籽油、调和油，所述的方法采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用仪对植物油进行检测分析，包括以下步骤：
(1)在15ml EP管中先后加入800μL植物油和1600μL甲醇，漩涡混合器涡旋两分钟，于4℃冰箱静置12小时，取上清液400μL待测；
(2)采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用仪对植物油进行检测分析其中，高效液相色谱条件为：采用ACQUITYUPLC BEH C18柱，规格为150mm×2. 1mm，1.7μm，以0.1％甲酸水溶液和乙腈作为流动相，以梯度淋洗的方式对植物油中的成分进行分离；正离子模式下的梯度淋洗方法为：0-0.5min，98％0.1％甲酸水溶液， 2％乙腈；0.5-3min，30％-98％0.1％甲酸水溶液，2％-70％乙腈；3-10min，2％-30％0.1％甲酸水溶液，70％-98％乙腈；10-12min，2％0.1％甲酸水溶液，98％乙腈；12-14min， 2％-98％0.1％甲酸水溶液，98％-2％乙腈；14-16min，98％0.1％甲酸水溶液，2％乙腈；
四级杆飞行时间质谱的条件为：电喷雾离子源；正离子模式毛细管电压分别为3.0Kv/2.8Kv；锥孔电压：35V；温度：110℃；锥孔气流量：12L/hr；脱溶剂气温度： 320℃；脱溶剂气流量：720L/hr；碰撞气体，氩气；
(3)数据采集：数据采集范围均为50至1000，数据收集采用中心模式，频率为0.48s，数据每10s校正一次，数据采集时间为0至16min；
(4)获得待检植物油的包括保留时间、质荷比和峰面积在内的数据集，与不同植物油中的特异物质的保留时间、质荷比、碎片离子和二级质谱图进行比较，确定植物油的种类。
其中，优选的，为确保质荷比的准确性和可重复性，使用亮氨酸-脑啡肽为内标对采集的质谱信号进行实时校正，正离子，[M+H]+＝556.2771。
其中，优选的，正离子模式下，花生油、大豆油、芥花油、橄榄油、芝麻油、玉米油、葵花籽油、稻米油、亚麻籽油中的特异物质的保留时间、质荷比、碎片离子如下表1-9：
表1
表2
表3
表4
表5
表6
表7
表8
表9
相较于现有技术，本发明的有益效果是：
本发明提供了一种常见食用植物油的种类鉴别方法，将大豆油、花生油、玉米油、葵花籽油、亚麻籽油、菜籽油、芝麻油、橄榄油、稻米油、调和油等中国常见的食用植物油进行超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用仪检测分析，筛选每种植物油的特异物质，获取准确的质荷比和二级质谱图，构成植物油种类鉴别的候选成分列表，然后在多种调和用油和其他品牌的植物油进行验证，确定食用植物油种类的鉴别成分，利用上述物质可准确鉴定食用植物油的种类，包括调和油中的植物油种类，检测速度快、效率高，适合分析大批量样品，具有较好的应用前景。
附图说明
图1A-B为不同种类的植物油的高效液相色谱图；
图2为不同的植物油之间的分离趋势；
其中：B表示调和油；CA表示菜籽油；CO表示玉米油；O表示橄榄油；P表示花生油；R表示稻米油；S1表示脱色豆油；S2表示非脱色豆油；
图3A-B为9种植物油POS特异物质提取色谱图；
图4为花生油特异物质MSMS质谱图；
图5为大豆油特异物质MSMS质谱图；
图6为芥花油特异物质MSMS质谱图；
图7为橄榄油特异物质MSMS质谱图；
图8为芝麻油特异物质MSMS质谱图；
图9为玉米油特异物质MSMS质谱图；
图10为葵花籽油特异物质MSMS质谱图；
图11为稻米油特异物质MSMS质谱图；
图12为亚麻籽油特异物质MSMS质谱图；
图13A-D为植物油特异物质验证POS色谱图。
具体实施方式
下面通过实验并结合实施例对本发明做进一步说明，应该理解的是，这些实施例仅用于例证的目的，决不限制本发明的保护范围。
实施例1鉴别植物油种类的方法的建立
1材料与试剂
筛选实验植物油：一级大豆油、三级大豆油(九三粮油工业有限公司)，花生油 (山东鲁花集团有限公司)，菜籽油(呼伦贝尔合适佳食品有限公司)，橄榄油(北京市品利食品有限公司)，稻米油(华润五丰有限公司)，玉米油(山东西王食品有限公司)，芝麻油(青岩寺牌，水代法制取，原料为白芝麻)，亚麻籽油，调和油：各种植物油比例为葵花籽油25％、菜籽油24％、玉米油18.9％、大豆油18％、花生油 6％、稻米油5％、胡麻油2.5％、芝麻油0.6％(益海嘉里集团)，均在哈尔滨市当地超市购买并在4℃下储存待检。
验证实验植物油：调和油1(多力)成分：葵花籽油(68％)、玉米油(15％)、芥花油(15％)、花生油(1％)、芝麻油(1％)；调和油2(营养家)成分：玉米油(37％)，芥花油(35％)，稻米油(13％)，花生油(10％)，亚麻籽油(5％)；调和油3(贝蒂斯)成分：葵花籽油(88％)，橄榄油(12％)。
大豆原油(九三，黑龙江)、大豆三级油(九三，巴西)，大豆一级油(九三，美国)，橄榄油(鲁花)，橄榄油(奥莱奥)，花生油(胡姬花)，亚麻籽油(多润)，芝麻油(老恒和)，芝麻油(六必居)。
试剂：乙腈、甲醇(购于Fisher公司，色谱纯)；亮氨酸-脑啡肽(购于Waters 公司，色谱纯)；超纯水(由Milli-Q超纯水系统制备，购于Millipore公司)；标准品(购于Sigma公司，阿拉丁试剂(上海)有限公司)。
1.2仪器与设备
超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱联用仪(色谱：ACQUITYUPLC；质谱：Micromass Q-TOFWaters公司，美国)；低温高速离心机(Eppendorf公司，德国)；漩涡混合器。
1.3实验方法
1.3.1样品前处理
15ml EP管中先后加入800μL植物油和1600μL甲醇，漩涡混合器涡旋两分钟，于 4℃冰箱静置12小时，取上清液400μL待测。
1.3.2色谱/质谱条件
色谱条件：采用ACQUITYUPLC BEH C18柱(150mm×2.1mm，1.7μm，Waters， USA)以0.1％甲酸水溶液(A液)和乙腈(B液)作为流动相，以梯度淋洗的方式对芝麻油中成分进行分离。正离子模式下的梯度淋洗方法为：0-0.5min，2％乙腈；0.5-3min，2％-70％乙腈；3-10min，70％-98％乙腈；10-12min，98％乙腈；12-14min，98％-2％乙腈；14-16min，2％乙腈。负离子模式下的梯度淋洗方法为：0-0.5min，2％乙腈；0.5-3min， 2％-70％乙腈；3-10.5min，70％-98％乙腈；10.5-12.5min，98％乙腈；12.5-14min，98％-2％乙腈；14-16min，2％乙腈。自动进样室温度4℃；柱温为35℃；流动相流速为0.35mL/min；进样量为4μL。
质谱条件：电喷雾离子源；正/负离子模式毛细管电压分别为3.0Kv/2.8Kv；锥孔电压：35V；温度：110℃；锥孔气流量：12L/hr；脱溶剂气温度：320℃；脱溶剂气流量：720L/hr；碰撞气体，氩气。为确保质荷比的准确性和可重复性，亮氨酸-脑啡肽 (Leucineenkephalin，LE)为内标对采集的质谱信号进行实时校正(正离子，[M+H]+＝ 556.2771；负离子：[M-H]-＝554.2615)。数据采集范围均为50至1000，数据收集采用中心模式，频率为0.48s，数据每10s校正一次，数据采集时间为0至16min。
1.3.3数据分析
将检测获得原始数据导入MarkerLynx(Version 4.1，Waters，USA)软件进行色谱峰提取、峰对齐和峰面积归一化等预处理。MarkerLynxApexTrack参数设置如下：5％高度处的峰宽，1秒；峰间基线噪声(自动计算)和采集参数设置如下：保留时间范围为0.5-10.5分钟；质量范围50-1000Da；峰高5％时的狭缝宽度，1秒；峰间基线噪声 (自动计算)；质量误差范围，0.05Da；保留时间误差范围，0.1分钟；最小峰强度值，100；噪声消除水平，6.0；脱同位素数据，是。经峰提取和对齐后，对分子离子丰度进行归一化处理，消除样品体积和浓度的影响。通过上述步骤的处理，获取包括保留时间(Retention time，RT)、质荷比和峰面积等在内的数据集。通过Pareto-scaling 的模式对数据进行标准化处理，并使用EZ-info(Version 2.0.0.0，Waters)软件进行多元统计分析，主成分分析(PCA)、最小二乘判别分析(PLS-DA)，观察组间的分类趋势。为判断模型是否过拟合，通过SIMCA-P 14.1(Version14.1，Umetrics)软件对 PLS-DA模型进行200次随机置换检验。
1.3.4成分鉴定
按照以下标准确定每种植物油中的潜在成分：信噪比大于20；峰强度大于500；可获得准确的二级质谱图。
1.3.5植物油的候选特异成分
该成分只在一种植物油被检出，其他种类的植物油不能检出，我们认为是该植物油的候选特异成分，具有鉴别植物油种类的潜力。
1.3.6植物油特异成分的验证与确定
市场购买其他不同品牌的植物油和调和油，利用相同的检测方法对每种植物油进行检测，然后在获得的数据中验证上一步筛选出的植物油特异成分，如果在不同品牌或调和油中获得验证，我们将这些物质称之为植物油的特异物质，提供植物油特异物质的提取色谱图、二级质谱图，通过比对特异成分的保留时间、质荷比和二级质谱图，用于不同种类植物油的鉴别。
2.实验结果：
2.1植物油质谱图
每种植物油的色谱图如图1A-B，初步证实植物油的成分是不一样的，每种植物油可能存在其特异成分。由图2可知，不同的植物油之间有明显的分离趋势，进一步说明每种植物油的成分是不一样的。
2.2物质筛选
依据信噪比大于20，峰强度大于500的标准筛选物质，在9种植物油共获取1225 个物质(芝麻油240个；花生油113个；葵花油110个；亚麻籽油125个；玉米油124 个；芥花油92个；稻米油120个；橄榄油131个；三级(非脱色)大豆油170个，表 10所示)，且都通过UPLC-Q/TOF MSMS获取了二级质谱图。
表10常见9种植物油正负离子模式下特异成分及二级谱图数目
2.2.1正离子模式下物质筛选
在ESI+中，共筛选923个物质，有135个物质在2种及以上的植物油中被检测出： 3个物质在10种油中存在；4个物质在9种油中存在；4个物质在8种油中存在；6 个物质在7种油中存在；6个物质在6种油中存在；8个物质在5种油中存在；10个物质在4种油中存在；33个物质在3种油中存在；61个物质在2种油中存在。
正离子模式下，445个物质只在一种植物油中被检测出：芝麻油55个；非脱色豆油68个；脱色豆油18个；花生油28个；葵花油54个；亚麻籽油46个；玉米油38 个；芥花油41个；稻米油50个；橄榄油47个。
2.2.2负离子模式下物质筛选
在ESI-中，共筛选392个物质，有46个物质在2种及2种以上的植物油中被检测出：7个物质在9种油中存在；3个物质在7种油中存在；1个物质在5种油中存在； 6个物质在4种油中存在；9个物质在3种油中存在；20个物质在2种油中存在。
负离子模式下一种植物油中被检测出的物质210个：芝麻油112个；非脱色豆油 10个；花生油9个；葵花油8个；亚麻籽油9个；玉米油9个；芥花油2个；稻米油 3个；橄榄油44个。
植物油在正负离子模式下特异成分比较分析后，发现正离子模式特异成分个数较多，在正离子模式下对植物油进行种类鉴别，更具操作性和潜力。
2.3植物油的独特成分
正离子模式下，根据特异离子的信号强度，我们在每种植物油中筛选出的5种特异离子，可在不同品牌和产地的同种类的植物油中获得验证，是该种植物油的特异成分，可用于该种植物油的种类鉴别和掺假鉴别，见表11-19。但是负离子模式下，每种植物油最多只能筛选2-3种特异物质，有的植物油甚至没有特异离子，可能由于负离子检测的特异物质比较少。因此，依据上述实验结果，我们推荐在正离子模式下对不同种类的植物油进行鉴别。图3A-B和图4-图12是经过验证，最终确定的植物油特异物质的提取色谱图和二级质谱图。
每种植物油初步筛选的特异候选物质，在2-3种含有该植物油的调和油和其他品牌的同种类植物油中进行验证，能够被验证的，我们认为是该种植物油的特异鉴定物质，可用于该植物油的定性鉴别，且不受其他因素的干扰，例如产地、品牌和是否与其他植物油混合。不同种类在植物油验证的色谱图见表11-19以及图13A-D。
Claims (3)
1.一种鉴别植物油种类的方法，其特征在于，所述的植物油包括花生油、大豆油、芥花油、橄榄油、芝麻油、玉米油、葵花籽油、稻米油、亚麻籽油、调和油，所述的方法采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用仪对植物油进行检测分析，包括以下步骤：
(1)在15ml EP管中先后加入800μL植物油和1600μL甲醇，漩涡混合器涡旋两分钟，于4℃冰箱静置12小时，取上清液400μL待测；
(2)采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用仪对植物油进行检测分析其中，高效液相色谱条件为：采用ACQUITY UPLC BEH C18柱，规格为150mm×2.1mm，1.7μm，以0.1％甲酸水溶液和乙腈作为流动相，以梯度淋洗的方式对植物油中的成分进行分离；正离子模式下的梯度淋洗方法为：0-0.5min，98％0.1％甲酸水溶液，2％乙腈；0.5-3min，30％-98％0.1％甲酸水溶液，2％-70％乙腈；3-10min，2％-30％0.1％甲酸水溶液，70％-98％乙腈；10-12min，2％0.1％甲酸水溶液，98％乙腈；12-14min，2％-98％0.1％甲酸水溶液，98％-2％乙腈；14-16min，98％0.1％甲酸水溶液，2％乙腈；
四级杆飞行时间质谱的条件为：电喷雾离子源；正离子模式毛细管电压分别为3.0Kv/2.8Kv；锥孔电压：35V；温度：110℃；锥孔气流量：12L/hr；脱溶剂气温度：320℃；脱溶剂气流量：720L/hr；碰撞气体，氩气；
(3)数据采集：数据采集范围均为50至1000，数据收集采用中心模式，频率为0.48s，数据每10s校正一次，数据采集时间为0至16min；
(4)获得待检植物油的包括保留时间、质荷比和峰面积在内的数据集，与不同植物油中的特异物质的保留时间、质荷比、碎片离子和二级质谱图进行比较，确定植物油的种类。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，为确保质荷比的准确性和可重复性，使用亮氨酸-脑啡肽为内标对采集的质谱信号进行实时校正，正离子，[M+H]+＝556.2771。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，正离子模式下，花生油中的特异物质的保留时间、质荷比、碎片离子如下：
大豆油中的特异物质的保留时间、质荷比、碎片离子如下：
芥花油中的特异物质的保留时间、质荷比、碎片离子如下：
橄榄油中的特异物质的保留时间、质荷比、碎片离子如下：
芝麻油中的特异物质的保留时间、质荷比、碎片离子如下：
玉米油中的特异物质的保留时间、质荷比、碎片离子如下：
葵花籽油中的特异物质的保留时间、质荷比、碎片离子如下：
稻米油中的特异物质的保留时间、质荷比、碎片离子如下：
亚麻籽油中的特异物质的保留时间、质荷比、碎片离子如下：
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111536782.7A CN114414673B (zh) | 2021-12-14 | 2021-12-14 | 一种鉴别植物油种类的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111536782.7A CN114414673B (zh) | 2021-12-14 | 2021-12-14 | 一种鉴别植物油种类的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114414673A true CN114414673A (zh) | 2022-04-29 |
| CN114414673B CN114414673B (zh) | 2024-01-05 |
Family
ID=81267224
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111536782.7A Active CN114414673B (zh) | 2021-12-14 | 2021-12-14 | 一种鉴别植物油种类的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114414673B (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104597193A (zh) * | 2014-12-31 | 2015-05-06 | 中国农业科学院油料作物研究所 | 一种花生油掺伪定性鉴别方法 |
| CN106770796A (zh) * | 2017-01-25 | 2017-05-31 | 青岛市食品药品检验研究院 | 顶空气相色谱质谱联用测定调和油调和比例的方法 |
| CN106896177A (zh) * | 2017-04-21 | 2017-06-27 | 山东省分析测试中心 | 一种芝麻油中掺伪植物油种类及掺伪量鉴别方法 |
| US20170307589A1 (en) * | 2016-04-21 | 2017-10-26 | Nanjing University | Effect-directed identification of targeted and non-targeted androgen disruptors |
-
2021
- 2021-12-14 CN CN202111536782.7A patent/CN114414673B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104597193A (zh) * | 2014-12-31 | 2015-05-06 | 中国农业科学院油料作物研究所 | 一种花生油掺伪定性鉴别方法 |
| US20170307589A1 (en) * | 2016-04-21 | 2017-10-26 | Nanjing University | Effect-directed identification of targeted and non-targeted androgen disruptors |
| CN106770796A (zh) * | 2017-01-25 | 2017-05-31 | 青岛市食品药品检验研究院 | 顶空气相色谱质谱联用测定调和油调和比例的方法 |
| CN106896177A (zh) * | 2017-04-21 | 2017-06-27 | 山东省分析测试中心 | 一种芝麻油中掺伪植物油种类及掺伪量鉴别方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 李子祥 等: "基于UPLC/Q-TOF MS/MS的花生油成分分析", 《中国油脂》, vol. 46, no. 3, pages 122 - 127 * |
| 董锋 等: "基于UPLC/Q-TOF MS/MS的芝麻油成分分析", 《中国油脂》, vol. 47, no. 10, pages 130 - 136 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114414673B (zh) | 2024-01-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ibáñez et al. | Novel MS-based approaches and applications in food metabolomics | |
| Ogrinc et al. | The application of NMR and MS methods for detection of adulteration of wine, fruit juices, and olive oil. A review | |
| Ramos et al. | Determination of chloramphenicol residues in shrimps by liquid chromatography–mass spectrometry | |
| Huang et al. | Simultaneous determination of aflatoxins B1, B2, G1, G2, M1 and M2 in peanuts and their derivative products by ultra-high-performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry | |
| Zhou et al. | Flavonoid glycosides as floral origin markers to discriminate of unifloral bee pollen by LC–MS/MS | |
| Lara-Ortega et al. | Direct olive oil analysis by mass spectrometry: A comparison of different ambient ionization methods | |
| CN107219313B (zh) | 一种基于分子印迹固相萃取-气/质谱联用技术的检测食用油中24种多环芳烃的方法 | |
| CN110618218A (zh) | 一种快速筛查茶叶中农药及代谢物残留的分析方法 | |
| CN107782824A (zh) | 一种pet塑料瓶中多种紫外稳定剂的快速检测方法 | |
| Cai et al. | Dispersive solid-phase extraction followed by high-performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry for the determination of ricinine in cooking oil | |
| CN113419022A (zh) | 固相萃取-液相色谱-串联质谱联用测定植物源性食品中双胍辛胺残留量的方法 | |
| Maldini et al. | Profiling and simultaneous quantitative determination of anthocyanins in wild Myrtus communis L. berries from different geographical areas in sardinia and their comparative evaluation | |
| CN107941950A (zh) | 超高效液相色谱‑串联质谱法同时测定常山胡柚的不同部位中九种功能性成分的方法 | |
| CN113281440B (zh) | 基于UHPLC-Q-Orbitrap MS筛查和定量30种合成染料的方法及应用 | |
| CN112114079B (zh) | 一种同时检测使君子中9种化学成分的方法 | |
| CN107153103B (zh) | 一种测定生鲜乳样品中的多种霉菌毒素含量的方法 | |
| CN109828051A (zh) | 一种有毒化合物的检测方法 | |
| CN110702816B (zh) | 一种检测动物性水产干制品中酸性偶氮类着色剂的液质联用检测方法 | |
| CN114414673B (zh) | 一种鉴别植物油种类的方法 | |
| Deng et al. | Quality assessment and origin tracing of Guangdong Liangcha granules using direct mass spectrometry fingerprinting | |
| CN112129856B (zh) | 一种五倍子来源鞣花酸的鉴定方法 | |
| CN111798937B (zh) | 一种枸杞组织的代谢组学数据库建立方法及应用 | |
| Hann et al. | Workflow development for the analysis of phenolic compounds in wine using liquid chromatography combined with drift-tube ion mobility–mass spectrometry | |
| CN109374803B (zh) | 检测甜菊糖苷类甜味剂的方法及其应用 | |
| CN107991402B (zh) | 一种豆制品中6组偶氮磺酸色素同分异构体的同时检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |