CN114381478A - 一种固体发酵豆粕制备大豆苷元的方法 - Google Patents
一种固体发酵豆粕制备大豆苷元的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114381478A CN114381478A CN202210274535.2A CN202210274535A CN114381478A CN 114381478 A CN114381478 A CN 114381478A CN 202210274535 A CN202210274535 A CN 202210274535A CN 114381478 A CN114381478 A CN 114381478A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- daidzein
- streptomyces
- soybean meal
- culture medium
- weight
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N daidzein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC=C2C1=O ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 151
- 235000007240 daidzein Nutrition 0.000 title claims abstract description 73
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 44
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 44
- 239000007787 solid Substances 0.000 title claims abstract description 40
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 title claims abstract description 34
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 title claims abstract description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims abstract description 44
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 36
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 24
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 12
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 claims description 12
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 10
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 10
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 10
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 claims description 7
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 claims description 3
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 claims description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 9
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 abstract description 7
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 abstract description 7
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 abstract description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- GMTUGPYJRUMVTC-UHFFFAOYSA-N Daidzin Natural products OC(COc1ccc2C(=O)C(=COc2c1)c3ccc(O)cc3)C(O)C(O)C(O)C=O GMTUGPYJRUMVTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- KYQZWONCHDNPDP-UHFFFAOYSA-N Daidzoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 KYQZWONCHDNPDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- KYQZWONCHDNPDP-QNDFHXLGSA-N daidzein 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 KYQZWONCHDNPDP-QNDFHXLGSA-N 0.000 description 5
- 238000013461 design Methods 0.000 description 5
- TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N genistein Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000006539 genistein Nutrition 0.000 description 5
- 229940045109 genistein Drugs 0.000 description 5
- ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N genistein 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 4
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 229930003270 Vitamin B Natural products 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001076 estrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 2
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- XDIYNQZUNSSENW-UUBOPVPUSA-N (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O XDIYNQZUNSSENW-UUBOPVPUSA-N 0.000 description 1
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- GOMNOOKGLZYEJT-UHFFFAOYSA-N isoflavone Chemical compound C=1OC2=CC=CC=C2C(=O)C=1C1=CC=CC=C1 GOMNOOKGLZYEJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N isoflavone Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC(OC)=C1C1=COC2=C(C=CC(C)(C)O3)C3=C(OC)C=C2C1=O CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008696 isoflavones Nutrition 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 238000012803 optimization experiment Methods 0.000 description 1
- 230000036284 oxygen consumption Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000022983 regulation of cell cycle Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P60/00—Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
- Y02P60/80—Food processing, e.g. use of renewable energies or variable speed drives in handling, conveying or stacking
- Y02P60/87—Re-use of by-products of food processing for fodder production
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种固体发酵豆粕制备大豆苷元的方法,该方法使用含有豆粕的固体培养基培养链霉菌,得到大豆苷元;所述链霉菌为砖红链霉菌CGMCC No.21851。实验证明,采用本发明的固体发酵培养基,在29℃下固体发酵培养砖红链霉菌CGMCC No.21851 9天,大豆苷元的含量可从17.62mg/kg增加到369.56mg/kg,含量提高约21倍。本发明可用于利用大豆副产物生产大豆苷元。
Description
技术领域
本发明涉及固体发酵豆粕制备大豆苷元的方法,该方法使用含有豆粕的固体培养基培养链霉菌,制备大豆苷元。
背景技术
大豆苷元(daidzein)是大豆的重要的活性物质,也是大豆异黄酮的主要组分,具有广泛的生物学活性,研究证明其主要功效有:显著抗肿瘤、降低酒精依赖度、抑制白血病细胞和黑色素瘤细胞生长;扩张血管并降低血压;减慢心率降低心肌耗氧、防止骨质疏松。如雌激素样作用、抗氧化、调节细胞周期等,其营养生理功能日益受到重视并被广泛研究。大豆苷元主要与葡萄糖基相结合以大豆苷的形式存在,而大豆苷元的存在形式对其生物活性和生物利用度有着显著的影响。研究表明,大豆苷元比大豆苷具有更好的吸收率,将大豆苷转化为大豆苷元能显著提高其吸收效率和生物利用度,体外实验也表明,大豆苷元比大豆苷具有更好的雌激素样生物活性。大豆中95%-99%的大豆苷元都是以苷的形式存在,大豆苷元含量很少,使得大豆苷元的制备比较困难。
目前,工业上主要采用化学酸水解发生产大豆苷元,但化学提取方法污染较为严重、溶剂提取率低和结合型大豆苷元不稳定等特点,因而如何以较为低廉的成本、污染较低的方法生产大豆苷元成为大豆苷元生产工艺该进的重要方向。豆粕是大豆的主要加工副产物,近年来豆粕产量呈上升趋势,2020年约为7840万吨。但豆粕多用于饲料加工,为了扩大和开发植物资源,对豆粕的深加工利用越来越重视。为了开发一种经济有效的大豆苷元生产方法,提高豆粕的附加值,通过自身筛选获得一株砖红链霉菌,能够将豆粕中高含量的大豆苷元转化为染料木素,显著提高豆粕中大豆苷元的含量。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是如何通过固体发酵高效地制备大豆苷元,即如何提高固体发酵制备大豆苷元的得率。
为了解决以上技术问题,本发明提供了制备大豆苷元的方法。
本发明提供的制备大豆苷元的方法,包括使用含有豆粕的固体培养基培养砖红链霉菌,得到大豆苷元;所述砖红链霉菌为CGMCC No.21851。
上述方法中,所述固体培养基由淀粉、NaCl、豆粕和水组成。上述方法中,所述淀粉为玉米淀粉。
所述固体培养基组成配比为:50-150重量份豆粕:0.5-2.5重量份淀粉:0.2-1.0重量份NaCl:60-150重量份的水,其中豆粕目数为4-24目。
所述培养基组成配比为:100重量份豆粕:1.5重量份淀粉:0.3重量份NaCl:100重量份的水,其中豆粕目数为14目。所述培养基中的水可为蒸馏水。
上述方法中,所述培养的培养条件可为接种2%-8%的种子培养基,19-39℃、培养1-14天。
上述方法中,所述培养条件具体可为接种5%的种子培养基,29℃、培养9天。接种量均以体积百分比计算。
为了解决以上技术问题,本法提供可以用于生产大豆苷元的培养基。
本发明所提供的用于生产大豆苷元的培养基为上述固体培养。
为了解决以上技术问题,本发明提供了用于生产大豆苷元的固体发酵条件为上述固体发酵条件。
为了解决以上技术问题,本发明提供了砖红链霉菌的应用。
本发明所提供的砖红链霉菌的应用为砖红链霉菌在固体发酵生产大豆苷元中的应用,所述砖红链霉菌为CGMCC No.21851。
为了对固体发酵培养基和发酵条件进行优化,得到可以产业化的固体发酵培养基和最佳固体发酵条件。本发明运用正交设计试验,对培养基因素和发酵条件进行优化,得到了大豆苷元得率高的固体发酵砖红链霉菌制备大豆苷元的方法。实验证明,采用本发明的固体发酵培养基,在29℃、固体发酵砖红链霉菌CGMCC No.21851 9天,大豆苷元的含量可从17.62mg/kg增加到369.56mg/kg,含量提高约21倍。本发明可用于生产大豆苷元,为大豆苷元的生产制备提供了新方法、途径,同时提高了大豆副产物豆粕的综合利用和附加值。
附图说明
图1实施例1中砖红链霉菌CGMCC No.21851发酵制备得到的大豆苷元的HPLC图;
图2 大豆苷元标准品的HPLC图;
图3实施例1中砖红链霉菌CGMCC No.21851发酵制备得到的大豆苷元和大豆苷元标准品的TLC图;
图4实施例1中砖红链霉菌CGMCC No.21851发酵制备得到的染料木素1H-NMR核磁谱图;
图5实施例1中砖红链霉菌CGMCC No.21851发酵制备得到的染料木素13C-NMR核磁谱图。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
以下实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
以下实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
以下实施例中使用的砖红链霉菌CGMCC No.21851已于于2021年3月1日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编100101),保藏编号为CGMCC No.21851,分类命名为砖红链霉菌(Streptomyces lateritius)。菌株信息参见CN113215066A,并将其全部信息引入本申请。
实施例1: 固体发酵砖红链霉菌制备大豆苷元
1、配制所用培养基
YIM38琼脂培养基:葡萄糖(Glucose)4 g /L,酵母浸粉(Yeast extract)4 g/L,麦芽浸粉(Malt extract)5 g/L, 维生素B(B-Vitamins)1 g/L,氯化钠(Trace salt)1 g/L,琼脂粉(Agar)20.0 g,pH 7.2,121℃条件下灭菌15min,得到YIM38琼脂培养基。
种子培养基:葡萄糖(Glucose)4 g /L,酵母浸粉(Yeast extract)4 g/L,麦芽浸粉(Malt extract)5 g/L, 维生素B(B-Vitamins)1 g/L,氯化钠(Trace salt)1 g/L,pH7.2,121℃条件下灭菌15min,得到YIM38培养基。
固体发酵培养基:豆粕100g,玉米淀粉1.5g,NaCl的含量为0.3g,100ml蒸馏水。121℃灭菌30min,得到固体发酵培养基。其中,豆粕为粉碎后过12目筛得到的粒状物,常温密封保存备用。
2、利用砖红链霉菌CGMCC No.21851固体发酵制备大豆苷元
将砖红链霉菌CGMCC No.21851悬浮液均匀涂布于YIM38培养基上,于29℃生化培养箱中培养7天,无菌环境下用接种环刮下接种到已灭菌装有50ml的YIM39培养基的250ml三角瓶中,于29℃、200rpm的恒温震荡器中培养24h得到砖红链霉菌CGMCC No.21851种子培养基。将砖红链霉菌CGMCC No.21851种子培养基以8%(v/m)的接种量接种到已灭菌装有50g豆粕培养基的500ml三角瓶中,于29℃的生化培养箱中培养12天,得到砖红链霉菌CGMCCNo.21851发酵培养基。
3、测定大豆苷元的含量
3.1 发酵培养基的预处理
将发酵培养基经80℃下干燥至恒重后,将发酵培养基粉碎至60目,用乙酸乙酯超声浸提3次,合并提取液,减压悬蒸提取液得到乙酸乙酯浸膏。
3.2 发酵培养基中大豆苷元的制备及结构鉴定
乙酸乙酯浸膏经硅胶柱柱层析纯化后,采用乙腈-水体积比35:75为流动相,用制备型HPLC制备得到单体化合物,即为大豆苷元。图1的砖红链霉菌CGMCC No.21851发酵得到的大豆苷元的HPLC结果和图2大豆苷元标准品的HPLC结果可以看出式I化合物和大豆苷元标品保留时间相同;图3的TLC结果显示,式I化合物和大豆苷元位置相同;结合1H谱、13C谱及质谱数据(图4、图5),确定了本发明式I的分子量为270,分子式为C15H10O4,它们的结构如式(I)所示。
式I
3.3 发酵培养基中大豆苷元的含量测定
利用HPLC法测定发酵培养基中大豆苷元的含量。将大豆苷元标品用甲醇定容后,根据标准品的保留时间和标准曲线测定大豆苷元含量。具体方法如下:将相同重量空白培养基和加入砖红链霉菌CGMCC No.21851发酵培养基获得的大豆苷元纯品,经甲醇溶解后过0.22μm滤膜,进行HPLC分析,计算大豆苷元的含量:大豆质量(mg)/豆粕质量。取染料木素标准品,用甲醇溶解定容,进行HPLC制作标准曲线。HPLC色谱条件如下:Agilent 1100,配有ELSD检测器和Chemstation色谱工作站;XDB-C18色谱柱(250×4.6mm,5μm);用5-95%乙腈-水溶液进行洗脱50min,流速1ml/min,进样量10μL。结果表明,空白培养基大豆苷元的含量为17.06mg/kg,发酵培养基中大豆苷元的含量为347.68mg/kg,大豆苷元含量升高约21倍。
实施例2: 固体发酵砖红链霉菌制备大豆苷元固体培养基的优化
以砖红链霉菌CGMCC No.21851为实验菌株,以大豆苷元的含量为指标,通过微生物介导的生物转化,运用正交分析法,对豆粕目数,及每100g豆粕对应的水分含量、淀粉含量和NaCl含量作为考虑因素,设计4因素3水平的正交实验,研究固体发酵砖红链霉菌制备大豆苷元的最优培养基配方(表1)。实验数据表明,水分含量和豆粕目数对固体发酵砖红链霉菌制备大豆苷元具有显著影响,NaCl对固体发酵砖红链霉菌制备大豆苷元影响最小,最优培养基配方为豆粕目数为14目,100g豆粕及水、淀粉和NaCl的含量分别为100ml,1.5g,0.3g(表2)。
表1 培养基成分正交设计实验的因素水平
表2 培养基成分正交设计实验结果
实施例3:固体发酵砖红链霉菌制备大豆苷元固体培养条件的优化
固体发酵砖红链霉菌CGMCC No.21851制备大豆苷元培养条件的优化上述实施案例1采用的固体发酵培养基的培养条件是通过以下优化实验得到。以大豆苷元的含量为标准,分别考察接种量、培养时间和培养温度对固体发酵砖红链霉菌CGMCC No.21851制备大豆苷元的影响(表3)。表3的正交实验结果表明,各影响因素的主次关系为:培养周期>培养时间>接种量。结合实验结果,最优的培养条件为5%的接种量,29℃培养9天。
表3培养条件正交设计实验的因素水平
表4 培养条件正交设计实验结果
Claims (9)
1.制备大豆苷元的方法,其特征在于:所述方法包括用含有豆粕的固态培养基培养链霉菌,得到大豆苷元;所述链霉菌为砖红链霉菌种CGMCC No.21851。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述固态培养基由豆粕、淀粉、NaCl和水组成。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述淀粉为玉米淀粉。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述固态培养基组成配比为:50-150重量份豆粕:0.5-2.5重量份淀粉:0.2-1.0重量份NaCl:60-150重量份的水,其中豆粕目数为4-24目。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述固态培养基组成配比为:100重量份豆粕:1.5重量份淀粉:0.3重量份NaCl:100重量份的水,其中豆粕目数为14目。
6.根据权利要求4-5任一所述的方法,其特征在于:所述的水为蒸馏水。
7.根据权利要求1-5任一所述的方法,其特征在于:所述培养为在接种4-8%体积百分比的种子培养基19-37℃、培养1-14天。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述培养为接种5%体积百分比的种子培养基,在29℃、培养9天。
9.砖红链霉菌的应用,其特征在于:所述应用为砖红链霉菌在固体发酵生产大豆苷元中的应用,所述链霉菌为砖红链霉菌种CGMCC No.21851。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210274535.2A CN114381478B (zh) | 2022-03-21 | 2022-03-21 | 一种固体发酵豆粕制备大豆苷元的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202210274535.2A CN114381478B (zh) | 2022-03-21 | 2022-03-21 | 一种固体发酵豆粕制备大豆苷元的方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN114381478A true CN114381478A (zh) | 2022-04-22 |
CN114381478B CN114381478B (zh) | 2022-05-20 |
Family
ID=81205751
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202210274535.2A Active CN114381478B (zh) | 2022-03-21 | 2022-03-21 | 一种固体发酵豆粕制备大豆苷元的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN114381478B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115197972A (zh) * | 2022-09-13 | 2022-10-18 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种抗衰老砖红链霉菌提取物及其制备方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113215066A (zh) * | 2021-06-29 | 2021-08-06 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种砖红链霉菌a001及其应用 |
-
2022
- 2022-03-21 CN CN202210274535.2A patent/CN114381478B/zh active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113215066A (zh) * | 2021-06-29 | 2021-08-06 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种砖红链霉菌a001及其应用 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
BISHNU PP等: "Effect of extracellular tyrosinase on the expression level of P450,Fpr,and Fdx and ortho-hydroxylation of daidzein in Streptomyces avermitilis", 《APPLIED BIOCHEMISTRY AND BIOTECHNOLOGY》 * |
LASATA S等: "Biotransformation of Daidzein,Genistein,and Naringenin by Streptomyces Species isolated from High-altitude soil of Nepal", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF MICROBIOLOGY》 * |
YABIN YANG等: "A new daidzein derivative from endophytic Streptomyces sp.YIM 65408", 《NAT PROD RES》 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115197972A (zh) * | 2022-09-13 | 2022-10-18 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种抗衰老砖红链霉菌提取物及其制备方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN114381478B (zh) | 2022-05-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103910708A (zh) | 一种海洋真菌来源的Azaphilones化合物及其制备方法和应用 | |
CN103910746B (zh) | 一类海洋真菌来源的Berkeleyones化合物及其制备方法和应用 | |
CN114381478B (zh) | 一种固体发酵豆粕制备大豆苷元的方法 | |
CN114350722B (zh) | 一种制备染料木素的方法 | |
CN113121557A (zh) | 海洋真菌来源的杂萜化合物及其在制备抗炎药物中的应用 | |
CN110863021B (zh) | 一种细胞松弛素类化合物的制备方法和应用 | |
CN103910701B (zh) | 一种海洋真菌来源的萘醌类化合物及其制备方法和应用 | |
CN113637010A (zh) | 氢化氧杂蒽酮衍生物及其制备方法和应用 | |
CN101720772A (zh) | 一种防治作物真菌病害的大环内脂类组合物及其制备工艺 | |
CN113248369A (zh) | 具有抗新冠病毒活性的聚酮类化合物的制备及其应用 | |
CN117106595A (zh) | 一株产黄酮类化合物的工业大麻内生真菌hmy07及其应用 | |
CN110357788B (zh) | 一种聚酮类化合物及其制备方法和用途 | |
CN103911407A (zh) | 一种海洋真菌来源的Azaphilone类二聚体化合物的制备方法及应用 | |
CN101720781A (zh) | 一种防治作物真菌病害的新磷氮霉素a及其制备工艺 | |
CN102154125A (zh) | 茎点霉菌株及其用途 | |
CN112063574B (zh) | 一种提高三孢布拉氏霉菌的番茄红素产量的方法 | |
CN108794502B (zh) | 一种单端孢霉烯类化合物及其制备方法和用途 | |
CN106591155B (zh) | 尖孢镰刀菌株及其在制备3β,7α,15α-三羟基雄甾-5-烯-17-酮中的应用 | |
CN110863022A (zh) | 嘌呤的发酵生产工艺 | |
CN111534548A (zh) | 一种基于酵母菌和植物乳杆菌分段发酵花果的方法 | |
CN115029252B (zh) | 一株粗糙脉孢菌wc2022菌株及其应用 | |
CN107973803A (zh) | 一种七元内酯并呋喃衍生物及其制备方法和应用 | |
CN115044628B (zh) | 一种全细胞转化生产大豆异黄酮苷元的方法 | |
CN102586355A (zh) | 利用海洋红树林内生真菌生产抗癌蒽醌类化合物的培养基及制备方法 | |
CN110041401B (zh) | 肯塔森纳霉素及其制备方法和应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20240513 Address after: 100193 No.2 Yuanmingyuan West Road, Haidian District, Beijing Patentee after: Huang Yatao Country or region after: China Address before: 100193 No. 2 Old Summer Palace West Road, Beijing, Haidian District Patentee before: INSTITUTE OF FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY, CHINESE ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES Country or region before: China |
|
TR01 | Transfer of patent right |