CN114349697B

CN114349697B - 一种异莲心碱高氯酸盐的制备和纯化方法

Info

Publication number: CN114349697B
Application number: CN202210018750.6A
Authority: CN
Inventors: 曾建伟; 谭春江; 褚剑锋; 陈达鑫; 林珊; 吴广文; 郑春松; 曹治云
Original assignee: Fujian University of Traditional Chinese Medicine
Current assignee: Fujian University of Traditional Chinese Medicine
Priority date: 2022-01-09
Filing date: 2022-01-09
Publication date: 2023-12-22
Anticipated expiration: 2042-01-09
Also published as: CN114349697A

Abstract

本发明涉及一种由异莲心碱制备和纯化异莲心碱高氯酸盐的方法。取1份异莲心碱粉末，加适量市售高氯酸反应完全后，加适量纯化水稀释至高氯酸质量浓度为1%‑40%，再加适量的二氯甲烷萃取1‑3次，合并二氯甲烷，回收、浓缩、干燥，即得异莲心碱高氯酸盐。现有生物碱成盐工艺多采用在有机溶剂中先成盐、后重结晶的方法，但结晶时间长，收率低。本发明提供的一种简单快速制备和纯化异莲心碱高氯酸盐的方法，较现有工艺更简单、更高效，且适合工业化大生产。

Description

一种异莲心碱高氯酸盐的制备和纯化方法

技术领域

本发明属于中药生物碱成盐制备技术，具体涉及一种由异莲心碱制备和纯化异莲心碱高氯酸盐的方法。

背景技术

异莲心碱(Isoliensinine)为莲子心中主要活性成分之一，具有降血压、抗心律失常、抗血小板聚集、抗癌等药理作用。但是，异莲心碱的水溶性差，限制了它的转化应用。譬如，用异莲心碱干预细胞时，难以溶于培养液；给动物灌胃后，溶解不好就会降低了胃肠道吸收，导致其血药浓度极低，影响了临床疗效的发挥；又因水溶性差，也不便于液体产品的制备。

异莲心碱与酸反应生成盐则能提高水溶性。异莲心碱与莲心碱属于同分异构体，具有相似的结构与性质，由于已有市售莲心碱高氯酸盐产品，故将异莲心碱优先与高氯酸反应生成异莲心碱高氯酸盐，以期提高异莲心碱的水溶性。虽有专利（CN1117735C）从莲子心中提取纯化莲心碱和异莲心碱时，采用氢氧化钠调碱，盐酸调酸，氯仿、乙醚萃取，重结晶等方法获得盐的粗品。但现有生物碱成盐工艺，先将生物碱在甲醇等有机溶剂中溶解，再加酸与之反应成盐后，采用的纯化方法有二：一是通过重结晶析盐，该法因结晶时间过长，不适合快速制备；二是回收溶剂直接得盐，该法因残留多余的反应物和副产物，后续仍须复杂的纯化去杂处理过程。这些方法制备生物碱盐，制备过程复杂，产品收率也低，均不适合大量快速制备生物盐。

况且，异莲心碱与高氯酸反应成盐后，在反应液中极易溶解而很难析晶，即使在4℃冰箱中放置数天仍无结晶析出；改用回收溶剂直接得盐，高氯酸沸点高达203℃难回收，且残留的反应物和副产物，难以去除。因此，现有方法均不太适合异莲心碱高氯酸盐的制备和纯化。

发明内容

本发明对前期发明（ZL201310344643.3）制得的莲心总碱进一步分离得到异莲心碱的基础上，再次提供一种简单快速制备和纯化异莲心碱高氯酸盐的方法，具体通过以下技术方案来实现。

一种异莲心碱高氯酸盐的制备和纯化方法，其特征在于，取1份异莲心碱粉末，加适量市售高氯酸，使之完全溶解后，加适量纯化水稀释至高氯酸质量浓度为1%-40%（详见附图1），加适量二氯甲烷萃取1-3次（详见附图2），合并二氯甲烷，回收、浓缩、干燥，即得异莲心碱高氯酸盐。

以上所述的异莲心碱粉末，其特征为从莲子心提取分离所得或者市场购买，其纯度应不低于80%。

以上所述的使之完全溶解，其特征在于采用超声、搅拌、涡旋或者加热等方法，增加异莲心碱粉末的溶解速度和程度。

以上所述的完全溶解，其特征在于发生了以下成盐反应：

C₃₇H₄₂N₂O₆(异莲心碱)+ HClO₄(高氯酸)＝C₃₇H₄₂N₂O₆·HClO₄(异莲心碱高氯酸盐)。

以上所述的稀释至高氯酸质量浓度为1%-40%，其特征在于较优浓度为1%-20%，最优浓度为10%。

以上所述的加适量二氯甲烷，其特征在于以加纯化水稀释后总体积的0.25-3倍为适量（详见附图3），较优体积为1.5-3倍。

以上所述的异莲心碱高氯酸盐，其特征在于电喷雾质谱图ESI（+）中至少出现611[M+H]和711[M+ HClO₄]（M＝610）的离子峰（详见附图4）。

色谱条件

Agilent 1260高效液相色谱仪（美国Agilent公司）。

Eclipe XDB C-18色谱柱（4.5 mm×150 mm，5μm），流动相：乙腈-0.1%三乙胺水溶液(55:45)，等度洗脱，流速为1 mL/mL，紫外检测波长为282 nm，进样量10 μL，柱温为30℃。HPLC色谱图见附图5。

质谱条件

micr-OTOF-QⅡ质谱仪(德国Bruker公司)。

电喷雾离子源（ESI），正离子模式，毛细管电压为4000V，锥孔电压为－500V，雾化气压力为2 bar，干燥气流速为4 L/min，干燥气温度为180℃，扫描范围m/z ：50~2000。ESI-MS质谱图详见附图4。

有益效果

本发明在技术方案的优化过程中，产生了包括但不限于以下有益效果：

1.本发明提供了一种将异莲心碱制成异莲心碱高氯酸盐的新方法，并填补了异莲心碱高氯酸盐的产品空白。

2.本发明制得的异莲心碱高氯酸盐在25℃水中的溶解度为1.328 mg/mL，是异莲心碱溶解度0.158 mg/mL的8.40倍，溶解度得到了大幅提高。

3.本发明选用二氯甲烷萃取异莲心碱高氯酸盐，是因为二氯甲烷的萃取效果远高于三氯甲烷和四氯甲烷，结果见表1。

表1 不同溶剂的萃取效果

溶剂种类	二氯甲烷	三氯甲烷	四氯甲烷
				峰面积	222.9	54.6	0

4.异莲心碱与市售高氯酸反应成盐后，若用二氯甲烷直接萃取，几乎萃取不到异莲心碱高氯酸盐；本发明在萃取前，先加适量纯化水稀释至高氯酸浓度为1%-40%，再用二氯甲烷萃取，则能大幅提高异莲心碱高氯酸盐的萃取率（详见附图1）。

附图说明

附图1 高氯酸质量浓度与萃取率的关系。

附图2 萃取次数与萃取率的关系。

附图3 二氯甲烷体积倍数与萃取率的关系。

附图4 异莲心碱高氯酸盐ESI-MS质谱图。

附图5 异莲心碱高氯酸盐HPLC色谱图。

具体实施方式

以下通过实施例来详细说明本发明的技术方案，以下的实施例仅用于解释和说明本发明的技术方案，而不是对本发明技术方案的限制。

实施例1

一种异莲心碱高氯酸盐的制备和纯化方法，其特征在于，取1份异莲心碱粉末，加适量市售高氯酸，使之完全溶解后，加适量纯化水稀释至高氯酸质量浓度为10%，加2倍体积的二氯甲烷萃取2次，合并二氯甲烷，回收、浓缩、干燥，即得异莲心碱高氯酸盐1。

实施例2

一种异莲心碱高氯酸盐的制备和纯化方法，其特征在于，取1份异莲心碱粉末，加适量市售高氯酸，使之完全溶解后，加适量纯化水稀释至高氯酸质量浓度为1%，加0.25倍体积的二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷，回收、浓缩、干燥，即得异莲心碱高氯酸盐2。

实施例3

一种异莲心碱高氯酸盐的制备和纯化方法，其特征在于，取1份异莲心碱粉末，加适量市售高氯酸，使之完全溶解后，加适量纯化水稀释至高氯酸质量浓度为40%，加3倍体积的二氯甲烷萃取1次，合并二氯甲烷，回收、浓缩、干燥，即得异莲心碱高氯酸盐3。

Claims

1.一种异莲心碱高氯酸盐的制备和纯化方法，其特征在于，取1份异莲心碱粉末，加适量市售高氯酸，使之完全溶解后，加适量纯化水稀释至高氯酸质量浓度为1%-40%，加适量二氯甲烷萃取1-3次，合并二氯甲烷，回收、浓缩、干燥，即得异莲心碱高氯酸盐；所述异莲心碱粉末为从莲子心提取分离所得或者市场购买，其纯度应不低于80%。

2.如权利要求1所述的一种异莲心碱高氯酸盐的制备和纯化方法，其特征在于使之完全溶解采用超声、搅拌、涡旋或者加热方法，增加异莲心碱粉末的溶解速度和程度。

3.如权利要求1所述的一种异莲心碱高氯酸盐的制备和纯化方法，其特征在于稀释至高氯酸质量浓度为1%-20%。

4.如权利要求1所述的一种异莲心碱高氯酸盐的制备和纯化方法，其特征在于稀释至高氯酸质量浓度为10%。

5.如权利要求1所述的一种异莲心碱高氯酸盐的制备和纯化方法，其特征在于加适量二氯甲烷的体积为加纯化水稀释后总体积的0.25-3倍。

6.如权利要求1所述的一种异莲心碱高氯酸盐的制备和纯化方法，其特征在于加适量二氯甲烷的体积为加纯化水稀释后总体积的1.5-3倍。