CN114316008B - 转录因子lcmyb4在调控山鸡椒萜类合成中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种转录因子LCMYB4在调控山鸡椒萜类合成中的应用,涉及生物技术领域。本发明提供了转录因子LCMYB4在调控山鸡椒萜类合成中的应用。经发明人研究发现,转录因子LCMYB4能够通过抑制山鸡椒LcTPS32的表达降低山鸡椒萜类生物合成,可在山鸡椒萜类合成分子育种和创制高产山鸡椒新种质中进行应用,也可用于山鸡椒萜类合成能力的检测。

Description

转录因子LCMYB4在调控山鸡椒萜类合成中的应用
技术领域
本发明涉及生物技术领域,尤其是涉及一种转录因子LCMYB4在调控山鸡椒萜类合成中的应用。
背景技术
山鸡椒(Litsea cubeba(Lour.)Pers.)作为樟科的核心树种,全株含油,果实含油量高达4.0%以上。山鸡椒精油用途广泛,可作为天然香料、抗菌剂、驱蚊剂、生物农药、高级香料紫罗兰酮的原料等,有广阔的开发应用前景。山鸡椒精油90%以上为萜类化合物,因此,如何进一步提高山鸡椒萜类产量,选育高产高品质山鸡椒新种质,对山鸡椒产业发展具有重要意义。植物分子育种为山鸡椒的定向育种和遗传改良提供了新的途径。挖掘调控萜类合成的关键基因并进行功能验证,是进行植物分子育种的基础。
转录因子调节是植物代谢调控的重要方式。MYB转录因子参与植物的生长发育、次生代谢物的合成、植物与环境的互作等多种过程,是植物重要的转录因子家族之一。MYB转录因子具有高度保守的、可结合DNA的MYB结构域,包含1-4个R基序重复,根据R基序的数量可分为R1/2-MYB、R2R3-MYB和R3-MYB。MYB基因可通过与靶基因的启动子序列特异性结合激活或抑制靶基因的表达,从而调控植物的生长发育和与环境的响应。
萜类化合物是数量最多的一类植物天然产物。留兰香MsMYB可以负调控单萜的生物合成。小苍兰FhMYB21可通过激活FhTPS1促进花中芳樟醇的合成。番茄SiMYB75通过调控TPS基因促进番茄果实中的香气合成。然而,樟科中利用MYB转录因子调控萜类合成的研究至今未见报道,这限制了樟科特别是山苍子萜类合成的遗传改良。
有鉴于此,特提出本发明。
发明内容
本发明的第一目的在于提供转录因子LCMYB4在调控山鸡椒萜类合成中的应用,以解决上述问题中的至少一种。
本发明的第二目的在于提供含有上述转录因子LCMYB4的载体。
本发明的第三目的在于提供含有上述载体的基因工程菌。
本发明的第四目的在于提供一种山鸡椒性状相关的标志物。
本发明的第五目的在于提供一种检测山鸡椒性状的试剂盒。
本发明的第六目的在于提供一种调控山鸡椒萜类合成的方法。
第一方面,本发明提供了一种转录因子LCMYB4在调控山鸡椒萜类合成中的应用;
所述转录因子LCMYB4的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
作为进一步技术方案,所述转录因子LCMYB4的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
作为进一步技术方案,所述山鸡椒萜类包括α-蒎烯、柠檬烯、桉叶油醇和香叶醛中的至少一种。
第二方面,本发明提供了一种载体,含有上述转录因子LCMYB4的基因。
第三方面,本发明提供了一种基因工程菌,含有上述载体。
第四方面,本发明提供了一种山鸡椒性状相关的标志物,所述标志物选自(a1):转录因子LCMYB4;
(a2):所述转录因子LCMYB4的基因;
(a3):(a2)转录的RNA;
所述性状包括山鸡椒萜类合成能力。
第五方面,本发明提供了一种检测山鸡椒性状的试剂盒,所述试剂盒用于检测上述标志物。
作为进一步技术方案,所述试剂盒包括用于扩增转录因子LCMYB4基因的引物对,所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。
第六方面,本发明提供了一种调控山鸡椒萜类合成的方法,包括过表达或抑制表达转录因子LCMYB4的基因。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
本发明提供了转录因子LCMYB4在调控山鸡椒萜类合成中的应用。经发明人研究发现,转录因子LCMYB4能够通过抑制山鸡椒LcTPS32的表达降低山鸡椒萜类生物合成,可在山鸡椒萜类合成分子育种和创制高产山鸡椒新种质中进行应用,也可用于山鸡椒萜类合成能力的检测。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施方式,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为山鸡椒不同组织和果实不同发育时期的LcMYB4和LcTPS32的基因表达量;
图2为利用双荧光素酶实验表明LcMYB4负调控LcTPS32的表达;
图3为山鸡椒瞬时转化LcMYB4基因后的萜类化合物检测结果。
具体实施方式
下面将结合实施方式和实施例对本发明的实施方案进行详细描述,但是本领域技术人员将会理解,下列实施方式和实施例仅用于说明本发明,而不应视为限制本发明的范围。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
第一方面,本发明提供了一种转录因子LCMYB4在调控山鸡椒萜类合成中的应用;
所述转录因子LCMYB4的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
转录因子LCMYB4的氨基酸序列如下:
MGRSPCCDKVGLKKGPWTPEEDQKLLAYIEEHGHGSWRALPGKAGLQRCGKSCRLRWTNYLRPDIKRGKFSLQEEQTIIQLHALLGNRWSAIATHLPKRTDNEIKNYWNTHLKKRLAKMGIDPVTHKPRCDALGSVDGQNKSAANLSHMAQWESARLEAEARLVRESKLRSQASFHSQSQAQQQLGTSSASLLSLLKQTTPPPPAPCLDVFKAWQWQSQGSVWSKSSNGGPLDLESPTSTLSFSENAVHSVVGLGDNSTAKIDSSETGGGGGDWRGYGNRNPTLSTSSSDEKEEVAAFSTADDDDMVIFPATQGPWSPSTTTGKPPPAASSCFVEGFTDLLLQNSDDDDKNNNDNSEEEEDDEDEDEDDANNYWNNILNLVNSSPSNSPLF(SEQ ID NO.2)。
经发明人研究发现,转录因子LCMYB4能够通过抑制山鸡椒LcTPS32的表达降低山鸡椒萜类生物合成,可在山鸡椒萜类合成分子育种和创制高产山鸡椒新种质中进行应用。
在一些优选的实施方式中,所述转录因子LCMYB4的基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。
转录因子LCMYB4的基因的核苷酸序列如下:
ATGGGACGATCTCCTTGCTGCGATAAGGTTGGCTTAAAGAAAGGGCCCTGGACGCCCGAAGAAGACCAGAAGCTCTTGGCCTACATAGAAGAGCATGGCCACGGCAGTTGGCGGGCATTGCCAGGGAAAGCCGGGCTTCAGAGATGCGGGAAGAGCTGTAGATTGAGGTGGACTAATTACCTCAGGCCCGATATCAAGAGAGGAAAATTCAGTTTGCAGGAAGAGCAAACCATCATACAGCTCCATGCTCTTTTAGGGAACAGGTGGTCCGCCATAGCCACTCATTTGCCGAAAAGAACGGACAACGAGATCAAAAACTATTGGAACACGCACCTGAAGAAGCGTCTGGCAAAGATGGGAATCGACCCCGTCACCCACAAGCCCAGGTGCGACGCCCTCGGCTCGGTCGACGGTCAAAACAAGAGCGCGGCCAACCTCAGCCACATGGCTCAGTGGGAGAGCGCTCGCCTCGAAGCCGAGGCCAGGCTTGTCAGAGAGTCAAAGCTGCGGTCTCAAGCATCCTTCCACTCCCAGTCTCAGGCTCAGCAGCAGCTGGGCACCTCCTCCGCTTCCCTTCTCTCCCTCCTCAAGCAGACGACACCTCCTCCCCCTGCCCCCTGTCTGGACGTGTTCAAGGCCTGGCAATGGCAGTCGCAGGGTAGCGTCTGGTCAAAGTCAAGCAATGGTGGGCCCCTTGATCTCGAGTCCCCGACCTCGACGCTTAGCTTCTCCGAGAACGCGGTGCACAGCGTCGTCGGATTAGGAGATAACTCAACAGCCAAGATCGACAGCAGCGAAACAGGAGGAGGAGGAGGAGACTGGAGGGGATACGGAAATAGAAACCCCACTCTATCCACGTCGTCCTCGGACGAAAAAGAGGAGGTGGCCGCCTTCTCCACTGCCGACGATGATGATATGGTGATCTTCCCCGCCACACAGGGCCCGTGGTCCCCTTCGACAACCACTGGCAAGCCTCCTCCCGCCGCCAGCAGTTGTTTCGTCGAAGGATTTACCGACCTTCTCCTCCAGAATTCCGACGACGATGACAAGAACAACAACGACAATTCTGAGGAGGAAGAAGACGACGAAGACGAGGACGAGGACGATGCCAACAACTATTGGAACAACATACTCAACCTCGTCAACTCCTCTCCCTCTAATTCCCCTTTGTTTTGA(SEQ ID NO.1)。
在一些优选的实施方式中,所述山鸡椒萜类包括α-蒎烯、柠檬烯、桉叶油醇和香叶醛中的至少一种。
第二方面,本发明提供了一种载体,含有上述转录因子LCMYB4的基因。该载体导入到受体细胞中能够表达转录因子LCMYB4。
第三方面,本发明提供了一种基因工程菌,含有上述载体。例如将上述载体导入到农杆菌中,进而以农杆菌为介质将目的基因插入值植物基因组中。
第四方面,本发明提供了一种山鸡椒性状相关的标志物,所述标志物选自(a1):转录因子LCMYB4;
(a2):所述转录因子LCMYB4的基因;
(a3):(a2)转录的RNA;
所述性状包括山鸡椒萜类合成能力。
由于转录因子LCMYB4能够通过抑制山鸡椒LcTPS32的表达降低山鸡椒萜类生物合成,据此可以根据转录因子LCMYB4、转录因子LCMYB4基因或转录因子LCMYB4基因转录的RNA判断山鸡椒萜类合成能力。
第五方面,本发明提供了一种检测山鸡椒性状的试剂盒,所述试剂盒用于检测上述标志物。通过对上述标志物的检测,进而可以推断山鸡椒萜类合成能力。
在一些优选的实施方式中,所述试剂盒包括用于扩增转录因子LCMYB4基因的引物对,所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。
引物F:ATGAAGATGATGATGGCCACAGCTG(SEQ ID NO.3);
引物R:TCAGGTCACCATAAGCTGAGGGTAG(SEQ ID NO.4)。
采用上述引物能够特异性实现对扩增转录因子LCMYB4基因的扩增。
第六方面,本发明提供了一种调控山鸡椒萜类合成的方法,包括过表达或抑制表达转录因子LCMYB4的基因。
在一些优选的实施方式中,将转录因子LCMYB4的基因导入到山鸡椒叶片,结果发现α-蒎烯、柠檬烯、桉叶油醇和香叶醛的产量降低了。
下面通过具体的实施例和对比例进一步说明本发明,但是,应当理解为,这些实施例仅仅是用于更详细地说明之用,而不应理解为用于以任何形式限制本发明。
实施例1 LcMYB4的基因克隆
(1)RNA提取
取山鸡椒花苞组织,液氮研磨成粉末后利用RN38 EASY spin plus植物RNA快速提取试剂盒提取RNA。按照Goldenstar RT6 cDNA Synthesis Kit反转录试剂盒说明进行cDNA第一链的合成。根据山鸡椒基因组测序获得的LcMYB4的CDS序列,设计引物,引物序列如SEQID NO.3和SEQ ID NO.3所示,利用MCLAB高保真酶对LcMYB4的cDNA序列进行扩增。
PCR反应体系:
反应程序:98℃预变性2min;98℃变性10s,60℃退火15s,72℃延伸30s,共35个循环;72℃延伸5min。PCR产物经琼脂糖凝胶后用DNA凝胶回收试剂盒回收目的片段。
利用pClone007 Blunt Vector Kit构建克隆载体。
反应体系:
室温加样,轻柔混合后短暂离心,25℃静置10min。
取5μL连接产物加至50μL处于冰水混合物状态的大肠杆菌DH5α感受态,轻弹混匀后冰浴30min;42℃热激60s;冰上静置2~3min;加700μL无抗生素的LB液体培养基;200rpm,37℃振荡培养1h;3,000rpm离心1min;弃600μL上清,悬浮菌体后取适量菌液涂布于含有50mg·L-1Amp的LB固体培养基上,37℃倒置培养过夜至长出单菌落,并进行阳性克隆检测和测序,获得LcMYB4的核苷酸序列如SEQ ID NO.1,氨基酸序列如SEQ ID NO.2。
实施例2LcMYB4和LcTPS32基因的表达模式分析
其中,LcTPS32是山鸡椒精油合成途径中的关键基因,可催化生成水芹烯和香叶醇等山鸡椒精油的关键成分。
(1)RNA提取
将山鸡椒的根、茎、叶、花、果实组织分别进行RNA提取并检测样品浓度和质量,合成cDNA第一链时将不同组织样品RNA总量统一,以用于荧光定量PCR反应。使用QuantStudio7Flex荧光定量PCR检测系统,以山鸡椒UBC基因为内参,按照荧光定量试剂盒TB GreenPremix Ex Taq II(TliRNaseH Plus)进行操作。
扩增程序为:95℃预变性30s,95℃变性5s,60℃变性31s,共40个循环。每个样品3次生物学重复,3次技术重复。利用2-ΔΔCT方法计算LcMYB4和LcTPS32基因的相对表达量。扩增LcTPS32的正向引物为5’-ATGGCATTGCAAATGACTGT-3’(SEQ ID NO.5);反向引物为5’-TCAGACAGATCCGCCATTAA-3’(SEQ ID NO.6)。用t检验计算不同组织中基因表达量的显著性差异,P<0.05用*标记,P<0.01用**标记。
结果表明(图1),在山鸡椒根、茎、叶、花和果实中,LcMYB4与LcTPS32的表达量呈良好的负相关关系,相关性达-0.90。图中,DAF代表开花后天数。
实施例3双荧光素酶实验验证LcMYB4对LcTPS32的调控作用
构建LcMYB4-SK载体和包含LcTPS32启动子的LcTPS32-PRO-LUC载体,分别转化农杆菌GV3101感受态细胞。
挑取阳性农杆菌单菌落,培养至OD600为0.8-1.0后2250g离心1min收集菌体。用悬浮液(乙酰丁香酮150μmol·L–1,MgCl2 10mM,MES 10mM)重悬菌液,OD600调至0.8,将待检测的2种农杆菌菌液按照1:1体积比进行混合,室温静置2h。
选取生长1个月左右完全伸展的烟草叶片,将混合好的菌液用1mL注射器(去掉针头)从烟草叶背面进行注射。以空载SK和含LcTPS32启动子的LUC载体混合液作为对照,与待检测目标载体的菌液注射在同一片叶片的不同部位上,以保证相同的生长背景,每株注射2-3个烟草叶片。进行4次以上生物学重复。60-72h后取样,luminometer定量检测荧光强度,检测LUC/REN比值判断调控效应。
结果表明(图2),与对照相比LcMYB4-SK载体和包含LcTPS32启动子的LcTPS32-PRO-LUC载体共同转化后的相对LUC/REN比值显著降低,说明LcMYB4负调控LcTPS32的表达。
实施例4瞬时转化山鸡椒验证LcMYB4对LcTPS32的调控作用
构建LcMYB4-pCambia1300S过表达载体,将含有LcMYB4-pCambia1300S的农杆菌菌液加入50mL LB培养基中,培养至OD600为1.0时,收集菌体,用悬浮液(乙酰丁香酮150μmol·L–1,MgCl2 10mM,MES 10mM)重悬菌液后孵育2h后用注射器通过抽真空方式渗透山鸡椒叶片,48h后利用GC-MS检测挥发性成分,各组分分别用NIST08标准谱库进行检索匹配,碎片比对,并结合相关文献报道、各成分的相对保留时间等进行定性。定量按峰面积归一化法计算各峰面积的相对含量。每个样品3次生物学重复。
结果如图3所示,瞬时转化LcMYB4后显著降低了α-蒎烯、柠檬烯、桉叶油醇和香叶醛的产量,这一结果表明LcMYB4负调控山鸡椒的萜类生物合成。
本发明表明LcMYB4负调控山鸡椒萜类生物合成,可应用于山鸡椒及其他植物的萜类合成的调控和分子育种。
最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
<120> 转录因子LCMYB4在调控山鸡椒萜类合成中的应用
<160> 6
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1176
<212> DNA
<213> 山鸡椒(Litsea cubeba (Lour.)Pers.)
<400> 1
atgggacgat ctccttgctg cgataaggtt ggcttaaaga aagggccctg gacgcccgaa 60
gaagaccaga agctcttggc ctacatagaa gagcatggcc acggcagttg gcgggcattg 120
ccagggaaag ccgggcttca gagatgcggg aagagctgta gattgaggtg gactaattac 180
ctcaggcccg atatcaagag aggaaaattc agtttgcagg aagagcaaac catcatacag 240
ctccatgctc ttttagggaa caggtggtcc gccatagcca ctcatttgcc gaaaagaacg 300
gacaacgaga tcaaaaacta ttggaacacg cacctgaaga agcgtctggc aaagatggga 360
atcgaccccg tcacccacaa gcccaggtgc gacgccctcg gctcggtcga cggtcaaaac 420
aagagcgcgg ccaacctcag ccacatggct cagtgggaga gcgctcgcct cgaagccgag 480
gccaggcttg tcagagagtc aaagctgcgg tctcaagcat ccttccactc ccagtctcag 540
gctcagcagc agctgggcac ctcctccgct tcccttctct ccctcctcaa gcagacgaca 600
cctcctcccc ctgccccctg tctggacgtg ttcaaggcct ggcaatggca gtcgcagggt 660
agcgtctggt caaagtcaag caatggtggg ccccttgatc tcgagtcccc gacctcgacg 720
cttagcttct ccgagaacgc ggtgcacagc gtcgtcggat taggagataa ctcaacagcc 780
aagatcgaca gcagcgaaac aggaggagga ggaggagact ggaggggata cggaaataga 840
aaccccactc tatccacgtc gtcctcggac gaaaaagagg aggtggccgc cttctccact 900
gccgacgatg atgatatggt gatcttcccc gccacacagg gcccgtggtc cccttcgaca 960
accactggca agcctcctcc cgccgccagc agttgtttcg tcgaaggatt taccgacctt 1020
ctcctccaga attccgacga cgatgacaag aacaacaacg acaattctga ggaggaagaa 1080
gacgacgaag acgaggacga ggacgatgcc aacaactatt ggaacaacat actcaacctc 1140
gtcaactcct ctccctctaa ttcccctttg ttttga 1176
<210> 2
<211> 391
<212> PRT
<213> 山鸡椒(Litsea cubeba (Lour.)Pers.)
<400> 2
Met Gly Arg Ser Pro Cys Cys Asp Lys Val Gly Leu Lys Lys Gly Pro
1 5 10 15
Trp Thr Pro Glu Glu Asp Gln Lys Leu Leu Ala Tyr Ile Glu Glu His
20 25 30
Gly His Gly Ser Trp Arg Ala Leu Pro Gly Lys Ala Gly Leu Gln Arg
35 40 45
Cys Gly Lys Ser Cys Arg Leu Arg Trp Thr Asn Tyr Leu Arg Pro Asp
50 55 60
Ile Lys Arg Gly Lys Phe Ser Leu Gln Glu Glu Gln Thr Ile Ile Gln
65 70 75 80
Leu His Ala Leu Leu Gly Asn Arg Trp Ser Ala Ile Ala Thr His Leu
85 90 95
Pro Lys Arg Thr Asp Asn Glu Ile Lys Asn Tyr Trp Asn Thr His Leu
100 105 110
Lys Lys Arg Leu Ala Lys Met Gly Ile Asp Pro Val Thr His Lys Pro
115 120 125
Arg Cys Asp Ala Leu Gly Ser Val Asp Gly Gln Asn Lys Ser Ala Ala
130 135 140
Asn Leu Ser His Met Ala Gln Trp Glu Ser Ala Arg Leu Glu Ala Glu
145 150 155 160
Ala Arg Leu Val Arg Glu Ser Lys Leu Arg Ser Gln Ala Ser Phe His
165 170 175
Ser Gln Ser Gln Ala Gln Gln Gln Leu Gly Thr Ser Ser Ala Ser Leu
180 185 190
Leu Ser Leu Leu Lys Gln Thr Thr Pro Pro Pro Pro Ala Pro Cys Leu
195 200 205
Asp Val Phe Lys Ala Trp Gln Trp Gln Ser Gln Gly Ser Val Trp Ser
210 215 220
Lys Ser Ser Asn Gly Gly Pro Leu Asp Leu Glu Ser Pro Thr Ser Thr
225 230 235 240
Leu Ser Phe Ser Glu Asn Ala Val His Ser Val Val Gly Leu Gly Asp
245 250 255
Asn Ser Thr Ala Lys Ile Asp Ser Ser Glu Thr Gly Gly Gly Gly Gly
260 265 270
Asp Trp Arg Gly Tyr Gly Asn Arg Asn Pro Thr Leu Ser Thr Ser Ser
275 280 285
Ser Asp Glu Lys Glu Glu Val Ala Ala Phe Ser Thr Ala Asp Asp Asp
290 295 300
Asp Met Val Ile Phe Pro Ala Thr Gln Gly Pro Trp Ser Pro Ser Thr
305 310 315 320
Thr Thr Gly Lys Pro Pro Pro Ala Ala Ser Ser Cys Phe Val Glu Gly
325 330 335
Phe Thr Asp Leu Leu Leu Gln Asn Ser Asp Asp Asp Asp Lys Asn Asn
340 345 350
Asn Asp Asn Ser Glu Glu Glu Glu Asp Asp Glu Asp Glu Asp Glu Asp
355 360 365
Asp Ala Asn Asn Tyr Trp Asn Asn Ile Leu Asn Leu Val Asn Ser Ser
370 375 380
Pro Ser Asn Ser Pro Leu Phe
385 390
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<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 3
atgaagatga tgatggccac agctg 25
<210> 4
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 4
tcaggtcacc ataagctgag ggtag 25
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 5
atggcattgc aaatgactgt 20
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 6
tcagacagat ccgccattaa 20

Claims (8)

1.转录因子LCMYB4在调控山鸡椒萜类合成中的应用;
所述转录因子LCMYB4的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2. 根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述转录因子LCMYB4的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述山鸡椒萜类包括α-蒎烯、柠檬烯、桉叶油醇和香叶醛中的至少一种。
4.一种载体,其特征在于,含有权利要求1-3任一项中所述转录因子LCMYB4的基因。
5.一种基因工程菌,其特征在于,含有权利要求4所述的载体。
6.一种山鸡椒性状相关的标志物,其特征在于,所述标志物选自(a1):权利要求1-3任一项中所述的转录因子LCMYB4
(a2):所述转录因子LCMYB4的基因;
(a3):(a2)转录的RNA;
所述性状包括山鸡椒萜类合成能力。
7.一种检测山鸡椒性状的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒用于检测权利要求6中所述的转录因子LCMYB4的基因;
所述试剂盒包括用于扩增转录因子LCMYB4基因的引物对,所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。
8.一种调控山鸡椒萜类合成的方法,其特征在于,包括过表达权利要求1-3任一项中所述的转录因子LCMYB4的基因。
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