CN114276218B - 一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法:将花生根粉碎处理,得到的花生根粉末进行低压蒸汽膨化处理,制得膨化混合物;将菌种接种于LB培养基中,培养至对数生长期,制得菌液,将菌液和膨化混合物混合均匀进行处理,制得固液混合物;向上述制得的固液混合物中加入乙醇溶液,混合均匀后进行超声处理,超声处理得到的混合液经过离心处理;将离心得到的上清液采用装有吸附颗粒的吸附柱内进行吸附处理,之后采用乙醇溶液洗脱处理,洗脱得到的溶液进行低温真空蒸发后,得到的浓缩液首先进行预冷冻,然后进行冷冻干燥,制得白藜芦醇晶体。该方法不仅能提高白藜芦醇的提取率,且制得的白藜芦醇的纯度也得到大大改善。

Description

一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法
技术领域:
本发明涉及农副产品加工技术领域,具体涉及一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法。
背景技术:
白藜芦醇又称芪三酚,是非黄酮类多酚化合物,化学式为为C14H12O3,化学名称为为3,4,5--三羟基-1,2-二苯乙烯。在许多种子中都检测到有白藜芦醇,至今至少在72种植物中都含有白藜芦醇。其中,虎杖中白藜芦醇的含量最为丰富,其次在葡萄和花生中的含量也极高。有相关研究表明,花生的不同器官中都含有白藜芦醇和白藜芦醇苷,其中以根部的含量最为丰富。之所以这么重视白藜芦醇是因为他具有许多生物活性,根据目前已有的研究可以得知他具有非常出色的抗氧化和抗癌功能,还能保护人体的心血管以及肝脏,可以减轻组织器官的损伤并且具有可以降低人体血脂等的功效。目前白藜芦醇已经在保健品,化妆品等领域得到了初步的应用。因此,如何从植物体中提取高纯度白藜芦醇对于其应用具有重要的意义。
发明内容:
本发明要解决的技术问题是,针对现有技术的不足,提供一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法,该方法不仅能提高白藜芦醇的提取率,且制得的白藜芦醇的纯度也得到大大改善。
为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案如下:
一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法,包括以下步骤:
(1)将称取的花生根粉碎处理,得到的花生根粉末进行低压蒸汽膨化处理,之后冷却至室温,制得膨化混合物;
(2)将菌种接种于LB培养基中,培养,制得菌液,并将菌液和膨化混合物混合均匀进行处理,制得固液混合物;
(3)向上述制得的固液混合物中加入乙醇溶液,混合均匀后进行超声处理,超声处理得到的混合液经过离心处理,并收集离心后的上清液;
(4)将离心得到的上清液采用装有吸附颗粒的吸附柱内进行吸附处理,之后采用质量浓度为70-80%的乙醇溶液洗脱处理,洗脱得到的溶液进行低温真空蒸发后,得到的浓缩液首先进行预冷冻,然后进行冷冻干燥,制得白藜芦醇晶体。
作为上述技术方案的优选,步骤(1)中,所述低压蒸汽膨化处理的条件为:压力为0.25-0.6MPa,保压时间15-120s,温度为120-140℃。
作为上述技术方案的优选,步骤(2)中,所述菌种为解淀粉芽孢杆菌,其为2013年3月11日保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC,保藏编号为CCTCC AB 2013062;培养时的温度为30-40℃,培养时的搅拌转速为100-220r/min,培养时间为4-12h。
作为上述技术方案的优选,步骤(2)中,菌液的浓度为106-109CFU/mL,膨化混合物和菌液的质量比为1:(5-15);所述处理的温度为30-40℃,转速为100-220r/min,时间为4-24h。
作为上述技术方案的优选,步骤(3)中,所述乙醇溶液的体积浓度为20-80%,所述固液混合物与乙醇溶液的体积比为1:(1-3);所述超声处理时的超声频率为2KHz,超声功率为500-800W,超声温度为30-50℃,超声时间为1-4h;所述离心处理时的转速为2000-10000r/min,离心时间为20-40min。
作为上述技术方案的优选,步骤(4)中,所述吸附颗粒为壳聚糖/聚N-乙烯基己内酰胺改性氧化硅/氧化石墨烯复合材料,其在吸附柱内的装填高度为吸附柱高度的2/3,其制备方法为:
S1:将氧化石墨烯分散在乙醇和去离子水的混合溶液中,十六烷基三甲基溴化铵搅拌混合均匀,然后滴加硅酸四乙酯,并加入质量浓度为20%的氨水溶液调节反应体系的pH为12-13,室温下搅拌反应10-15h,反应结束后将反应液过滤,并将过滤得到的沉淀干燥制得氧化硅/氧化石墨烯复合材料;该反应中控制氧化石墨烯、十六烷基三甲基溴化铵、硅酸四乙酯的质量比为1:(0.01-0.02):(0.8-1.5);
S2:将制得的氧化硅/氧化石墨烯复合材料分散在甲醇中,加入3-氨基丙基三乙氧基硅烷,室温下处理10-12h,处理结束后将固体采用甲醇洗涤后分散在甲苯中,加入溴代异丁酰溴进行反应,反应结束后在室温下静置处理,之后过滤,将过滤得到的固体干燥后制得氧化硅/氧化石墨烯基大分子引发剂;
S3:将氧化硅/氧化石墨烯基大分子引发剂分散在甲醇中,氮气气氛下,加入三乙胺,并加入N-乙烯基己内酰胺单体、溴化亚铜、2,2'-联吡啶,加热反应,反应结束后洗涤沉淀,并将洗涤后的沉淀干燥制得聚合物修饰的氧化硅/氧化石墨烯复合材料;
S4:将聚合物修饰的氧化硅/氧化石墨烯复合材料分散在二甲基甲酰胺溶剂中,然后加入巯基乙酸、三乙胺反应,反应结束后过滤,制得羧基封端的聚合物改性的纳米颗粒,之后将其置于壳聚糖的乙酸溶液中搅拌混合,加入4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐作为偶联剂,氮气保护、在室温下进行反应40-50h,之后过滤,制得。
作为上述技术方案的优选,所述氧化硅/氧化石墨烯复合材料、3-氨基丙基三乙氧基硅烷、溴代异丁酰溴的质量比为100:10-12:(37-39);所述氧化硅/氧化石墨烯基大分子引发剂、N-乙烯基己内酰胺单体、溴化亚铜、2,2'-联吡啶的质量比为1:100:0.2:(0.01-0.015);所述聚合物修饰的氧化硅/氧化石墨烯复合材料、巯基乙酸、三乙胺的质量比为20:4:(2-3)。
作为上述技术方案的优选,所述壳聚糖的乙酸溶液中是将0.5g壳聚糖和100ml摩尔浓度为0.02mol/L的乙酸溶液混合制得;所述羧基封端的聚合物改性的纳米颗粒、壳聚糖、4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐的质量比为1:1:(0.01-0.02)。
作为上述技术方案的优选,加入溴代异丁酰溴进行反应时的温度为4-5℃,反应时间为1-2h,之后在室温静置处理的时间为10-15h。
作为上述技术方案的优选,S3中加热反应的温度为40-50℃,加热反应的时间为10-15h;S4中,加入巯基乙酸反应的温度为室温,反应时间为10-15h。
作为上述技术方案的优选,步骤(4)中,低温真空蒸发时的压力为-0.25~-0.05MPa,温度为50-60℃,时间为3-5h;预冷冻的温度为-20~-40℃,时间为12-48h;冷冻干燥的温度为-40~-60℃,时间为12-48h。
由于采用了上述技术方案,本发明具有以下有益效果:
本发明首先通过低压蒸汽膨化,将废弃物中能溶于水的白藜芦醇苷转化成难溶于水的白藜芦醇,同时打开植物的细胞壁,为进一步的提取做准备。接下来,加入解淀粉芽孢杆菌,该菌在以上实验条件下,解淀粉芽孢杆菌酶分泌的纤维素酶的活力为205~890U/ml,使得花生根细胞的细胞壁能够充分分解,让更多的胞内物质释放到环境中,与溶剂得到更好的接触。然后结合超声处理,使得白藜芦醇能够进一步脱离原细胞残骸结构与溶剂结合,提高白藜芦醇的提取率。相比直接使用超声法提取,增加低压蒸汽膨化处理和解淀粉芽孢杆菌处理的超声法能够使得更多的白藜芦醇暴露在环境中,使其与溶剂得到更好的接触,从而提取更多的白藜芦醇,提高白藜芦醇的提取率。本次发明可以使得花生根中白藜芦醇的提取率超过90%,充分利用花生弃物之一的花生根资源,提高花生废弃物的资源利用率。本发明还对提取后的提取液进行了纯化处理,将提取液采用吸附颗粒进行吸附、解脱处理。本发明采用壳聚糖/聚n-乙烯基己内酰胺对氧化硅/氧化石墨烯纳米材料进行修饰,制得的吸附颗粒,吸附颗粒表面壳聚糖与聚-N乙烯基机内酰胺的共聚物作为功能化基团,与白藜芦醇具有很好的键合作用,从而能很好的对提取液进行有效纯化。
具体实施方式:
为了更好的理解本发明,下面通过实施例对本发明进一步说明,实施例只用于解释本发明,不会对本发明构成任何的限定。
下述实施例中所述的吸附颗粒的制备方法为:
将10g氧化石墨烯分散在500ml乙醇和10ml去离子水的混合溶液中,加入0.1g十六烷基三甲基溴化铵搅拌混合均匀,然后滴加10g硅酸四乙酯,并加入质量浓度为20%的氨水溶液调节反应体系的pH为12-13,室温下搅拌反应15h,反应结束后将反应液过滤,并将过滤得到的沉淀干燥制得氧化硅/氧化石墨烯复合材料;
将10g氧化硅/氧化石墨烯复合材料分散在100ml甲醇中,加入1g 3-氨基丙基三乙氧基硅烷,室温下处理10-12h,处理结束后将固体采用甲醇洗涤后分散在50ml甲苯中,加入3.8g溴代异丁酰溴,在4℃下反应2h,反应结束后在室温下静置处理10h,之后过滤,将过滤得到的固体干燥后制得氧化硅/氧化石墨烯基大分子引发剂;
将1g氧化硅/氧化石墨烯基大分子引发剂分散在100ml甲醇中,氮气气氛下,加入0.1g三乙胺,并加入100g N-乙烯基己内酰胺单体、0.2g溴化亚铜、0.01g 2,2'-联吡啶,在40-50℃下加热反应12h,反应结束后洗涤沉淀,并将洗涤后的沉淀干燥制得聚合物修饰的氧化硅/氧化石墨烯复合材料;
将10g聚合物修饰的氧化硅/氧化石墨烯复合材料分散在100ml二甲基甲酰胺溶剂中,然后加入2g巯基乙酸、1.5g三乙胺,室温下反应12h,反应结束后过滤,制得羧基封端的聚合物改性的纳米颗粒;将0.5g粘均分子量为53882Da的壳聚糖和100ml摩尔浓度为0.02mol/L的乙酸溶液混合制得壳聚糖的乙酸溶液,然后加入0.5g羧基封端的聚合物改性的纳米颗粒搅拌混合均匀,加入0.01g 4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐作为偶联剂,氮气保护、在室温下进行反应40h,之后依次进行过滤、干燥,制得吸附颗粒。
实施例1
将称取的花生根粉碎处理,得到的花生根粉末在0.4MPa的压力下保压处理90s,之后冷却至室温,制得膨化混合物;挑取解淀粉芽孢杆菌接种于LB培养基中,在温度为30℃、转速为100r/min的条件下搅拌培养至对数生长期,制得菌液,将菌液和膨化混合物以质量比为1:5的比例混合均匀,在温度为30℃、转速为100r/min的条件下继续搅拌培养4h,制得固液混合物;
将上述制得的固液混合物与体积浓度为80%的乙醇溶液按照1:1的比例进行混合,并在温度为30℃、超声频率为2KHz,功率为600W的条件下超声处理1h,得到的混合液在4000r/min的转速下离心处理40min,离心处理得到的上清液经过装有吸附颗粒的吸附柱内进行常规吸附处理,之后采用质量浓度为80%的乙醇溶液洗脱处理,收集的洗脱液在温度为50℃、压力为-0.25MPa条件下进行低温真空蒸发处理3h,得到的浓缩液首先在-30℃下进行预冷冻36h,然后在-40℃下进行冷冻干燥48h,制得白藜芦醇晶体。
实施例2
将称取的花生根粉碎处理,得到的花生根粉末在0.5MPa的压力下保压处理60s,之后冷却至室温,制得膨化混合物;挑取解淀粉芽孢杆菌接种于LB培养基中,在温度为33℃、转速为150r/min的条件下搅拌培养至对数生长期,制得菌液,将菌液和膨化混合物以质量比为1:10的比例混合均匀,在温度为33℃、转速为150r/min的条件下继续搅拌培养5h,制得固液混合物;
将上述制得的固液混合物与体积浓度为60%的乙醇溶液按照1:2的比例进行混合,并在温度为40℃、超声频率为2KHz,功率为700W的条件下超声处理1.5h,得到的混合液在6000r/min的转速下离心处理30min,离心处理得到的上清液经过装有吸附颗粒的吸附柱内进行常规吸附处理,之后采用质量浓度为80%的乙醇溶液洗脱处理,收集的洗脱液在温度为55℃、压力为-0.15MPa条件下进行低温真空蒸发处理4h,得到的浓缩液首先在-35℃下进行预冷冻30h,然后在-45℃下进行冷冻干燥36h,制得白藜芦醇晶体。
实施例3
将称取的花生根粉碎处理,得到的花生根粉末在0.6MPa的压力下保压处理30s,之后冷却至室温,制得膨化混合物;挑取解淀粉芽孢杆菌接种于LB培养基中,在温度为35℃、转速为200r/min的条件下搅拌培养至对数生长期,制得菌液,将菌液和膨化混合物以质量比为1:15的比例混合均匀,在温度为35℃、转速为200r/min的条件下继续搅拌培养6h,制得固液混合物;
将上述制得的固液混合物与体积浓度为40%的乙醇溶液按照1:3的比例进行混合,并在温度为50℃、超声频率为2KHz,功率为800W的条件下超声处理1h,得到的混合液在8000r/min的转速下离心处理20min,离心处理得到的上清液经过装有吸附颗粒的吸附柱内进行常规吸附处理,之后采用质量浓度为80%的乙醇溶液洗脱处理,收集的洗脱液在温度为60℃、压力为-0.05MPa条件下进行低温真空蒸发处理5h,得到的浓缩液首先在-40℃下进行预冷冻24h,然后在-50℃下进行冷冻干燥24h,制得白藜芦醇晶体。
对比例1
将称取的花生根粉碎处理,得到的花生根粉末在1MPa的压力下保压处理120s,之后冷却至室温,制得膨化混合物;将解淀粉芽孢杆菌接种于LB培养基中,在35℃、200r/min的条件下搅拌培养至对数生长期,制得菌液,将菌液和膨化混合物以质量比为1:15的比例混合均匀,在35℃、200r/min的条件下继续搅拌培养6h,制得固液混合物;
将上述制得的固液混合物与体积浓度为40%的乙醇溶液按照1:3的比例进行混合,并在温度为50℃、超声频率为2KHz,功率为800W的条件下超声处理1h,得到的混合液在8000r/min的转速下离心处理20min,离心处理得到的上清液经过装有吸附颗粒的吸附柱内进行常规吸附处理,之后采用质量浓度为80%的乙醇溶液洗脱处理,收集的洗脱液在温度为60℃、压力为-0.05MPa条件下进行低温真空蒸发处理5h,得到的浓缩液首先在-40℃下进行预冷冻24h,然后在-50℃下进行冷冻干燥24h,制得白藜芦醇晶体。
对比例2
将称取的花生根粉碎处理,得到的花生根粉末在0.6MPa的压力下保压处理30s,之后冷却至室温,制得膨化混合物;将解淀粉芽孢杆菌接种于LB培养基中,在35℃、200r/min的条件下搅拌培养至对数生长期,制得菌液,将菌液和膨化混合物以质量比为1:20的比例混合均匀,在35℃、200r/min的条件下继续搅拌培养6h,制得固液混合物;
将上述制得的固液混合物与体积浓度为40%的乙醇溶液按照1:3的比例进行混合,并在温度为50℃、超声频率为2KHz,功率为800W的条件下超声处理1h,得到的混合液在8000r/min的转速下离心处理20min,离心处理得到的上清液经过装有吸附颗粒的吸附柱内进行常规吸附处理,之后采用质量浓度为80%的乙醇溶液洗脱处理,收集的洗脱液在温度为60℃、压力为-0.05MPa条件下进行低温真空蒸发处理5h,得到的浓缩液首先在-40℃下进行预冷冻24h,然后在-50℃下进行冷冻干燥24h,制得白藜芦醇晶体。
对比例3
将称取的花生根粉碎处理,得到花生根粉末;挑取解淀粉芽孢杆菌接种于LB培养基中,在温度为35℃、转速为200r/min的条件下搅拌培养至对数生长期,制得菌液,将菌液和花生根粉末以质量比为1:15的比例混合均匀,在温度为35℃、转速为200r/min的条件下继续搅拌培养6h,制得固液混合物;
将上述制得的固液混合物与体积浓度为40%的乙醇溶液按照1:3的比例进行混合,并在温度为50℃、超声频率为2KHz,功率为800W的条件下超声处理1h,得到的混合液在8000r/min的转速下离心处理20min,离心处理得到的上清液经过装有吸附颗粒的吸附柱内进行常规吸附处理,之后采用质量浓度为80%的乙醇溶液洗脱处理,收集的洗脱液在温度为60℃、压力为-0.05MPa条件下进行低温真空蒸发处理5h,得到的浓缩液首先在-40℃下进行预冷冻24h,然后在-50℃下进行冷冻干燥24h,制得白藜芦醇晶体。
对比例4
将称取的花生根粉碎处理,得到的花生根粉末在0.6MPa的压力下保压处理30s,之后冷却至室温,制得膨化混合物;
将上述制得的膨化混合物与体积浓度为40%的乙醇溶液按照1:3的比例进行混合,并在温度为50℃、超声频率为2KHz,功率为800W的条件下超声处理1h,得到的混合液在8000r/min的转速下离心处理20min,离心处理得到的上清液经过装有吸附颗粒的吸附柱内进行常规吸附处理,之后采用质量浓度为80%的乙醇溶液洗脱处理,收集的洗脱液在温度为60℃、压力为-0.05MPa条件下进行低温真空蒸发处理5h,得到的浓缩液首先在-40℃下进行预冷冻24h,然后在-50℃下进行冷冻干燥24h,制得白藜芦醇晶体。
对比例5
将称取的花生根粉碎处理,得到的花生根粉末与体积浓度为40%的乙醇溶液按照1:3的比例进行混合,并在温度为50℃、超声频率为2KHz,功率为800W的条件下超声处理1h,得到的混合液在8000r/min的转速下离心处理20min,离心处理得到的上清液经过装有吸附颗粒的吸附柱内进行常规吸附处理,之后采用质量浓度为80%的乙醇溶液洗脱处理,收集的洗脱液在温度为60℃、压力为-0.05MPa条件下进行低温真空蒸发处理5h,得到的浓缩液首先在-40℃下进行预冷冻24h,然后在-50℃下进行冷冻干燥24h,制得白藜芦醇晶体。
对比例6
将称取的花生根粉碎处理,得到的花生根粉末在0.6MPa的压力下保压处理30s,之后冷却至室温,制得膨化混合物;挑取解淀粉芽孢杆菌接种于LB培养基中,在温度为35℃、转速为200r/min的条件下搅拌培养至对数生长期,制得菌液,将菌液和膨化混合物以质量比为1:15的比例混合均匀,在温度为35℃、转速为200r/min的条件下继续搅拌培养6h,制得固液混合物;
将上述制得的固液混合物与体积浓度为40%的乙醇溶液按照1:3的比例进行混合,并在温度为50℃、超声频率为2KHz,功率为800W的条件下超声处理1h,得到的混合液在8000r/min的转速下离心处理20min,离心处理得到的上清液在温度为60℃、压力为-0.05MPa条件下进行低温真空蒸发处理5h,得到的浓缩液首先在-40℃下进行预冷冻24h,然后在-50℃下进行冷冻干燥24h,制得白藜芦醇晶体。
上述实施例以及对比例中白藜芦醇的提取率的纯度如表1所示。
表1
从上述表1测试结果可以看出,本发明将超声提取与低压蒸汽膨化、菌液预处理相结合来提取白藜芦醇,可有效提高白藜芦醇的提取率,且制得的产品纯度达99.9%,质量好。处理时的具体条件对白藜芦醇的提取率和纯度也有很大的影响,低压蒸汽膨化处理时的压力大小也极其关键,如压力过大,则会使得白藜芦醇分解,从而降低白藜芦醇的提取率;而菌液的添加量过少的话,则不能有效降解纤维素,白藜芦醇的提取率也会下降。本发明还对提取液采用自制的吸附颗粒进行有效纯化处理,使得制得的白藜芦醇的纯度高达99.9%。
此外应理解,在阅读了本发明讲授的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (9)

1.一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将称取的花生根粉碎处理,得到的花生根粉末进行低压蒸汽膨化处理,之后冷却至室温,制得膨化混合物;
(2)将菌种接种于LB培养基中,培养,制得菌液,并将菌液和膨化混合物混合均匀进行处理,制得固液混合物;
(3)向上述制得的固液混合物中加入乙醇溶液,混合均匀后进行超声处理,超声处理得到的混合液经过离心处理,并收集离心后的上清液;
(4)将离心得到的上清液采用装有吸附颗粒的吸附柱内进行吸附处理,之后采用质量浓度为70-80%的乙醇溶液洗脱处理,洗脱得到的溶液进行低温真空蒸发后,得到的浓缩液首先进行预冷冻,然后进行冷冻干燥,制得白藜芦醇晶体;
步骤(4)中,所述吸附颗粒为壳聚糖/聚N-乙烯基己内酰胺改性氧化硅/氧化石墨烯复合材料,其在吸附柱内的装填高度为吸附柱高度的2/3,其制备方法为:
S1:将氧化石墨烯分散在乙醇和去离子水的混合溶液中,加入十六烷基三甲基溴化铵搅拌混合均匀,然后滴加硅酸四乙酯,并加入质量浓度为20%的氨水溶液调节反应体系的pH为12-13,室温下搅拌反应10-15h,反应结束后将反应液过滤,并将过滤得到的沉淀干燥制得氧化硅/氧化石墨烯复合材料;该反应中控制氧化石墨烯、十六烷基三甲基溴化铵、硅酸四乙酯的质量比为1:(0.01-0.02):(0.8-1.5);
S2:将制得的氧化硅/氧化石墨烯复合材料分散在甲醇中,加入3-氨基丙基三乙氧基硅烷,室温下处理10-12h,处理结束后将固体采用甲醇洗涤后分散在甲苯中,加入溴代异丁酰溴进行反应,反应结束后在室温下静置处理,之后过滤,将过滤得到的固体干燥后制得氧化硅/氧化石墨烯基大分子引发剂;
S3:将氧化硅/氧化石墨烯基大分子引发剂分散在甲醇中,氮气气氛下,加入三乙胺,并加入N-乙烯基己内酰胺单体、溴化亚铜、2,2'-联吡啶,加热反应,反应结束后洗涤沉淀,并将洗涤后的沉淀干燥制得聚合物修饰的氧化硅/氧化石墨烯复合材料;
S4:将聚合物修饰的氧化硅/氧化石墨烯复合材料分散在二甲基甲酰胺溶剂中,然后加入巯基乙酸、三乙胺反应,反应结束后过滤,制得羧基封端的聚合物改性的纳米颗粒,之后将其置于壳聚糖的乙酸溶液中搅拌混合,加入4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐作为偶联剂,氮气保护、在室温下进行反应40-50h,之后过滤,制得。
2.根据权利要求1所述的一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述低压蒸汽膨化处理的条件为:压力为0.25-0.6MPa,保压时间15-120s,温度为120-140℃。
3.根据权利要求1所述的一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述菌种为解淀粉芽孢杆菌,其为2013年3月11日保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC,保藏编号为CCTCC AB 2013062;培养时的温度为30-40℃,培养时的搅拌转速为100-220r/min,培养时间为4-12h。
4.根据权利要求1所述的一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法,其特征在于,步骤(2)中,菌液的浓度为106-109CFU/mL,膨化混合物和菌液的质量比为1:(5-15);所述处理的温度为30-40℃,转速为100-220r/min,时间为4-24h。
5.根据权利要求1所述的一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述乙醇溶液的体积浓度为20-80%,所述固液混合物与乙醇溶液的体积比为1:(1-3);所述超声处理时的超声频率为2kHz,超声功率为500-800W,超声温度为30-50℃,超声时间为1-4h;所述离心处理时的转速为2000-10000r/min,离心时间为20-40min。
6.根据权利要求1所述的一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法,其特征在于,所述氧化硅/氧化石墨烯复合材料、3-氨基丙基三乙氧基硅烷、溴代异丁酰溴的质量比为100:10-12:(37-39);所述氧化硅/氧化石墨烯基大分子引发剂、N-乙烯基己内酰胺单体、溴化亚铜、2,2'-联吡啶的质量比为1:100:0.2:(0.01-0.015);所述聚合物修饰的氧化硅/氧化石墨烯复合材料、巯基乙酸、三乙胺的质量比为20:4:(2-3)。
7.根据权利要求1所述的一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法,其特征在于,所述壳聚糖的乙酸溶液是将0.5g壳聚糖和100ml摩尔浓度为0.02mol/L的乙酸溶液混合制得;所述羧基封端的聚合物改性的纳米颗粒、壳聚糖、4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐的质量比为1:1:(0.01-0.02)。
8.根据权利要求1所述的一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法,其特征在于,S2中加入溴代异丁酰溴进行反应时的温度为4-5℃,反应时间为1-2h,之后在室温静置处理的时间为10-15h;S3中加热反应的温度为40-50℃,加热反应的时间为10-15h;S4中,加入巯基乙酸反应的温度为室温,反应时间为10-15h。
9.根据权利要求1所述的一种提高花生根中白藜芦醇提取率的方法,其特征在于,步骤(4)中,低温真空蒸发时的压力为-0.25~-0.05MPa,温度为50-60℃,时间为3-5h;预冷冻的温度为-20~-40℃,时间为12-48h;冷冻干燥的温度为-40~-60℃,时间为12-48h。
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