CN114271237B - 一种长短绒自别雌雄鸽的培育方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种鸽子的培育方法，尤其涉及一种长短绒自别雌雄鸽的培育方法，属于生物技术领域。本发明公开了一可以自别雌雄的鸽培育方法，包括鉴定种鸽位于Z染色体上控制雏绒羽长短绒性状的natal‑down基因位点的基因型，选育长绒纯系和短绒纯系，将不同基因型的公鸽和母鸽作为父本和母本按照一定组合进行杂交产生商品代，商品代可以通过雏鸽出壳后前5天雏绒羽的长绒和短绒表型来鉴别雌雄。本发明提供的方法极大地降低了传统鸽商品代培育过程中早期性别鉴定的成本，同时该方法与目前已有的羽色自别方法相比，不受父母代羽色严格配套的限制，适应范围更广，可以更灵活的选择育种素材培育鸽配套系，具有重要的育种价值和经济价值。

Description

一种长短绒自别雌雄鸽的培育方法

技术领域

本发明涉及一种鸽子的培育方法，尤其涉及一种长短绒自别雌雄鸽的培育方法，属于生物技术领域。

背景技术

鸽子作为我国仅次于鸡鸭鹅的第四大家禽，截至到2021年，全国存栏量已经超过8000万对。目前我国蛋鸽生产中的主要羽色品系有美国王鸽、卡奴鸽、泰克森鸽、泰克森杂交衍生品种等，其中白羽王鸽、白卡奴鸽等白羽系鸽子产蛋性能较好，是我国养殖的主要品种。而目前制约我国鸽产业发展的瓶颈之一便是鸽子的早期性别鉴定。鸽子作为一种晚成鸟，出壳后体重约为20g，体质孱弱，不能进行翻肛鉴别雌雄，而不同性别个体外观上也几乎没有差别。传统分子生物学的方法进行检测，成本昂贵且耗时耗力，不适用于大群体的早期雌雄鉴别。如果不能进行早期雌雄鉴别，则需要将鸽子养至5-6月龄，待其成年后根据经验从外观和行为进行雌雄鉴定，而依赖经验判断外观的准确率无法保证，并会消耗大量的人力，所以这两种方法均不能很好的适应我国蛋鸽行业发展的需求。鸽中能够进行雌雄自别的方法是利用银羽和灰羽羽色，泰克森鸽是我国目前唯一一种可以利用该方法自别雌雄的商业化品系。而泰克森鸽品系自身体型较大，产蛋性能一般，不适合作为小体型节粮蛋鸽的育种素材，此外该品系的羽色自别对父母代羽色配套方式要求严格，在与其它品种杂交时，自别雌雄成功率会有所降低，尤其是利用泰克森鸽进行蛋鸽培育时，由于白羽羽色的遗传背景十分复杂，目前尚不清楚其遗传规律，所以不能引入目前市面上较为高产的白羽系品种与其杂交，否则会破坏泰克森鸽原有羽色自别模式，导致后代无法雌雄自别。生产实践中发现，部分鸽品种雏鸽雏绒羽的长短和疏密程度造成长绒和短绒差异，属于一种遗传性状。

综上所述，鸽行业需要一种适用于不同羽色的早期性别鉴定的新型制种方式，提升自别雌雄鸽的制种效率，才能更加灵活地利用不同优良品系培育鸽新配套系。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术存在的缺陷，提出一种长短绒自别雌雄鸽的培育方法，以达到鸽早期性别鉴定的目的，提高鸽的制种效率，同时降低制种成本，适应未来鸽产业的需要。

本发明通过研究和生产实践发现雏鸽的雏绒羽（natal down）长短会受到Z染色体上natal-down基因位点控制，该位点包含两个等位基因，长绒等位基因ND和短绒等位基因nd。natal-down基因位点显性纯合基因型（ND/ND）或杂合基因型（ND/nd）的长绒雏鸽，刚出壳时雏绒羽的长度和密度会明显大于natal-down基因位点隐性纯合基因型（nd/nd）的短绒雏鸽，雏绒羽的长绒和短绒差别在雏鸽出壳后7天内都可以清晰观察到。当其父母以一定配套模式杂交时，后代雏绒羽的绒毛长短就会出现差异，从而实现雏鸽的早期雌雄自别。因此，本发明通过以下技术方案解决技术问题：一种长短绒自别雌雄鸽的培育方法，包括以下步骤：

步骤一、选取待测鸽，提取DNA，进行Z染色体natal-down基因位点的基因型分析，判定基因型Z^NDZ^ND公鸽或Z^NDW母鸽为长绒纯合个体；判定基因型Z^ndZ^nd公鸽或Z^ndW母鸽为短绒纯合个体；

步骤二、选育短绒纯系，将所述短绒纯合个体的Z^ndZ^nd公鸽和Z^ndW母鸽进行纯系选育和扩繁，得到短绒纯系的品系；

步骤三、选育长绒纯系，将所述长绒纯合个体的Z^NDZ^ND公鸽和Z^NDW母鸽进行纯系选育和扩繁，得到长绒纯系的品系；

步骤四、将所述短绒纯系作为父母代父本和长绒纯系作为父母代母本进行杂交，得到商品代的公雏均为长绒个体，母雏均为短绒个体。

上述方法还包括步骤五、将步骤四筛选得到的母雏培育成青年蛋鸽进行双母拼对高产饲养，筛选得到的公雏作为商品乳鸽销售。

以上方法的所述步骤一中，鸽Z染色体natal-down基因位点的基因型是指鸽参考基因组版本Cliv_1.0的Z染色体上769369bp位点的分子标记基因型，其中该分子标记没有发生脱氧核苷酸突变的A/A基因型个体，代表Z^NDZ^ND公鸽或Z^NDW母鸽，为长绒纯合个体；该分子标记发生脱氧核苷酸纯合突变的G/G基因型个体，代表Z^ndZ^nd公鸽或Z^ndW母鸽，为短绒纯合个体。待测群体可以是任何品种的鸽子。提取的DNA经过PCR扩增指定序列后，该分子标记可以使用识别“GTSAC”碱基序列的限制性核酸内切酶进行酶切，或者测序等方法进行基因型鉴定。

所述步骤四中，长绒个体natal-down基因位点的基因型为Z^NDZ^nd，均为公雏；短绒个体natal-down基因位点的基因型为Z^ndW，均为母雏。

杂交所得后代在出壳后即可观察到，母雏鸽的绒毛在头部和背部的分布更加稀疏，并且许多绒毛长度仅有公雏鸽绒毛长度的1/2-2/3，出壳后3-5天更为明显，而7天后开始长出廓羽，区分难度慢慢变大，待绒毛完全脱落，无法再利用该方法进行雌雄自别。

本发明的有益效果：本发明提供的方法极大地降低了传统鸽商品代培育过程中早期性别鉴定的成本，同时该方法与目前已有的羽色自别方法相比，不受父母代羽色严格配套的限制，品种适应范围更广，可以更灵活的选择育种素材培育鸽配套系，具有重要的育种价值和经济价值。

附图说明

图1是本发明一个实施例所得长短绒自别雌雄鸽的后代图。

图2是本发明图1中长短绒自别雌雄鸽新品系的制种流程图。

具体实施方式

实施例1

一种自别雌雄鸽的培育方法，如图2所示，包括以下步骤：

步骤一、选择南京东晨鸽业有限公司的500只成年银王鸽作为预选群体，佩戴上脚环，翅下静脉采血，提取DNA，对包含Z染色体的769369bp位点（参考基因组版本Cliv_1.0）的片段进行PCR扩增，上游引物F：5’-GATGCTGAGGCCTTTCATGT-3’ （如SEQ ID NO：1所示）下游引物R：5’-TTTCCCCAAAGATCCAACAG-3’ （如SEQ ID NO：2所示），反应体系终浓度（50μl）为：待测鸽子DNA 50 ng，Accurate Taq DNA 聚合酶 1.25 IU，10X PCR反应缓冲液 (含Mg2+)5μl，10mM dNTPs 1μl，10μM 上游引物F 1μl，10μM 下游引物R 1μl，无菌水补足至50μl。PCR扩增的反应条件为：94℃预变性5min；94℃变性30sec，58℃退火30sec，72℃延伸60sec，共30循环；72℃延伸5min；20℃保存。选用NEB公司的TSP45I内切酶，在65℃水浴的条件下反应1h，反应体系终浓度（20μl）为：酶切反应体系（20μl）：PCR产物 10μl，10X NEB缓冲液 2μl，TSP45I内切酶 10 IU，无菌水补足至20μl。取10μl酶切产物用于琼脂糖凝胶电泳检测，判定待测鸽的分子标记基因型。核苷酸序列如SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4所示。选取Z染色体769369bp位点没有发生脱氧核苷酸突变的A/A基因型个体，表示该个体的natal-down基因位点的基因型为Z^NDZ^ND公鸽或Z^NDW母鸽，佩戴上标记有长绒纯系的脚环。同时选取Z染色体769369bp位点发生脱氧核苷酸纯合突变的G/G基因型个体，表示该个体的natal-down基因位点的基因型为Z^ndZ^nd公鸽或Z^ndW母鸽，佩戴上标记有短绒纯系的脚环。将长绒纯系个体一公一母放入产蛋笼中，同时将短绒纯系个体一公一母也放入产蛋笼中，待其配对成功，全程自由饮水，自走式喂料机喂食，每天采食时间固定20分钟。

步骤二、针对上述挑选的个体，以保姆鸽的方式育雏，即预选群体的种鸽下蛋后立即收集，做好标记放入孵化机中，孵化出壳后放入同一生理周期，正在孵化的保姆鸽窝中，让保姆鸽哺育雏鸽，做好记录。

步骤三、纯系扩繁完成后所得后代，选择短绒纯系的公鸽作为父母代父本，选择长绒纯系的母鸽作为父母代母本。

步骤四、所得父母代父本与父母代母本进行杂交，商品代公雏均为长绒，母雏均为短绒。实现鸽长短绒自别雌雄配套系的建立。如图1所示，左为长绒公雏鸽，右为短绒母雏鸽。

试验：

选取10只短绒纯系公鸽与10只长绒纯系母鸽为亲本两两配对，每对亲本置于专门的鸽产蛋笼中，自由饮水，喂料机喂食，常规免疫，杂交产生商品代，收集种蛋后机器孵化，出壳后使用肉眼观察判断绒毛长短，采集血液提取DNA，利用性别引物和分子检测方法鉴定性别，记录绒毛长短表型和性别鉴定结果，分析两者的相关性。

表1 杂交商品代群体的长短绒表型和性别鉴定结果

长短绒表型	长绒	长绒	短绒	短绒
					性别	公	母	公	母
个体数	48	0	0	45

杂交结果显示，短绒纯系公鸽与长绒纯系母鸽杂交的商品代雏鸽中，公雏100%为长绒，母雏100%为短绒，结果表明，利用鸽长短绒性状的伴性遗传在该配套模式下可以实现雏鸽早期自别雌雄，有着非常广阔的应用场景。

除上述实施外，本发明还可以有其它实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明要求的保护范围。

序列表

<110> 南京农业大学

<120> 一种长短绒自别雌雄鸽的培育方法

<160> 4

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

gatgctgagg cctttcatgt 20

<210> 2

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

tttccccaaa gatccaacag 20

<210> 3

<211> 429

<212> DNA

<213> 鸽(Columba livia domestica)

<400> 3

gatgctgagg cctttcatgt gctattagct gttttattag ccttcagggc aataatactg 60

tattattgtt atatacttgc ttttaggatc agaggcggat gacccttaaa tcactcctga 120

agacacttct aaatatgcca tcccactatc gccatctgtg tgtgagtcac ctctttggat 180

ggatggcttt cctgtccaac atgcttttct tcacagattt catgggacag gtaaaagcat 240

aaaatccttt cacttctctt tcctcatagc atcttcttct ccactgaaaa taagacagcg 300

ttgtaatcct gaaggaatca cagtgatcgc agagccagct gtgtctggat ggctcaacaa 360

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<210> 4

<211> 429

<212> DNA

<213> 鸽(Columba livia domestica)

<400> 4

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Claims (2)

1.一种长短绒自别雌雄鸽的培育方法，包括以下步骤：

步骤一、选取待测鸽，提取DNA，进行Z染色体natal-down基因位点的基因型分析，判定基因型Z^NDZ^ND公鸽或Z^NDW母鸽为长绒纯合个体；判定基因型Z^ndZ^nd公鸽或Z^ndW母鸽为短绒纯合个体；鸽Z染色体natal-down基因位点的基因型是指鸽参考基因组版本Cliv_1.0的Z染色体上769369bp位点的分子标记基因型，其中该分子标记没有发生脱氧核苷酸突变的A/A基因型个体，代表Z^NDZ^ND公鸽或Z^NDW母鸽，为长绒纯合个体；该分子标记发生脱氧核苷酸纯合突变的G/G基因型个体，代表Z^ndZ^nd公鸽或Z^ndW母鸽，为短绒纯合个体，待测群体是任何品种的鸽子，提取的DNA经过PCR扩增指定序列后，该分子标记使用识别“GTSAC”碱基序列的限制性核酸内切酶进行酶切，或者测序方法进行基因型鉴定；

步骤二、选育短绒纯系，将所述短绒纯合个体的Z^ndZ^nd公鸽和Z^ndW母鸽进行纯系选育和扩繁，得到短绒纯系的品系；

步骤三、选育长绒纯系，将所述长绒纯合个体的Z^NDZ^ND公鸽和Z^NDW母鸽进行纯系选育和扩繁，得到长绒纯系的品系；

步骤四、将所述短绒纯系作为父母代父本和长绒纯系作为父母代母本进行杂交，得到商品代的公雏均为长绒个体，母雏均为短绒个体；长绒个体natal-down基因位点的基因型为Z^NDZ^nd，均为公雏；短绒个体natal-down基因位点的基因型为Z^ndW，均为母雏。

2.根据权利要求1所述长短绒自别雌雄鸽的培育方法，其特征在于：还包括步骤五，将步骤四筛选得到的母雏培育成青年蛋鸽进行双母拼对高产饲养，筛选得到的公雏作为商品乳鸽销售。

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